JPS5942890A - セルロ−ス系多孔質材料を含む固定化増殖菌体組成物の製造方法 - Google Patents
セルロ−ス系多孔質材料を含む固定化増殖菌体組成物の製造方法Info
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- JPS5942890A JPS5942890A JP15233682A JP15233682A JPS5942890A JP S5942890 A JPS5942890 A JP S5942890A JP 15233682 A JP15233682 A JP 15233682A JP 15233682 A JP15233682 A JP 15233682A JP S5942890 A JPS5942890 A JP S5942890A
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- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は固定化増殖セルラーゼ生産菌体組成物およびそ
の製造法に関−４−る。より詳細に述べると。
の製造法に関−４−る。より詳細に述べると。
本発明は多孔質材料を含む固定化増殖セルラーゼ生産菌
体組成物およびその製造法に関する。
体組成物およびその製造法に関する。
セルロース廃資源は再生産可能な賎富な非枯渇エネルギ
ー資源の一つであり、最近、この廃資源を糖化発酵によ
りアルコールに変換し、燃寥１あるいは化学原料に活用
しようとする研死が盛んになってきている。セルロース
廃資源を糖化発酵によりフルコールに変換するのには、
まず糖化をセルラーゼによる酵素糖化又は酸糖化を行い
、ついで酵母によ！ＩＩ＠酵を行う。酸糖化法は咳の回
収や酵母阻害物質の生成などでの問題があるため、酵素
糖化法が注目されている。酵素糖化を行う五易合、セル
ラーゼ酵素全添加してｌノ占化を灯う方法とセルラーゼ
を産生ずるセルラーゼ生産菌体を培養しつつ糖化合行う
方法がち９．一般的には後者の方法で行うのであるが１
ｍ体の培養に大きな培養槽などの装置、運転に費用がか
かるという問題がある。
ー資源の一つであり、最近、この廃資源を糖化発酵によ
りアルコールに変換し、燃寥１あるいは化学原料に活用
しようとする研死が盛んになってきている。セルロース
廃資源を糖化発酵によりフルコールに変換するのには、
まず糖化をセルラーゼによる酵素糖化又は酸糖化を行い
、ついで酵母によ！ＩＩ＠酵を行う。酸糖化法は咳の回
収や酵母阻害物質の生成などでの問題があるため、酵素
糖化法が注目されている。酵素糖化を行う五易合、セル
ラーゼ酵素全添加してｌノ占化を灯う方法とセルラーゼ
を産生ずるセルラーゼ生産菌体を培養しつつ糖化合行う
方法がち９．一般的には後者の方法で行うのであるが１
ｍ体の培養に大きな培養槽などの装置、運転に費用がか
かるという問題がある。
本発明者等はセルラーゼ生産函体を培養中に多孔質組成
物上で増殖させる固定化増殖セルラーゼ生産菌体組成物
を作ることによりこの問題ケ解決することができた。
物上で増殖させる固定化増殖セルラーゼ生産菌体組成物
を作ることによりこの問題ケ解決することができた。
従来、セルラーゼ生産菌体を液体培養すると培ｉ時間と
ともに一体が著しく増殖するために１通常培養槽を除々
に大き（して一定期間培養して菌体分離を行い、培養液
中のセルラーゼＶＣより糖化會行っている。本発明の固
定化増殖セルラーゼ生産菌体組成物を使用した−合２組
１或吻ｆｆ−液体培養すると菌体が固定化物に含まれて
いるセルロースを中心にして増殖して、組成物の中およ
び表面部に著しく増殖した状態になり、菌体は固定され
た状態でセルラーゼを産生ずるため、セルラーゼ生産菌
体〃・ら１４）る重合にも菌体等の分離操作もなくなり
、連続的に培養しながらセルラーゼ水溶ｅ、を連続的に
吸潰し、セルロース廃資源の連続的糖化も０Ｔ能にさせ
ることができるという特長がめる。
ともに一体が著しく増殖するために１通常培養槽を除々
に大き（して一定期間培養して菌体分離を行い、培養液
中のセルラーゼＶＣより糖化會行っている。本発明の固
定化増殖セルラーゼ生産菌体組成物を使用した−合２組
１或吻ｆｆ−液体培養すると菌体が固定化物に含まれて
いるセルロースを中心にして増殖して、組成物の中およ
び表面部に著しく増殖した状態になり、菌体は固定され
た状態でセルラーゼを産生ずるため、セルラーゼ生産菌
体〃・ら１４）る重合にも菌体等の分離操作もなくなり
、連続的に培養しながらセルラーゼ水溶ｅ、を連続的に
吸潰し、セルロース廃資源の連続的糖化も０Ｔ能にさせ
ることができるという特長がめる。
本発明の詳細な説明する；
不発明に従って、セルラーゼ生産菌体又はその水中分子
ｆ＊液液上セルロース系多孔質材料よびガラス化性ビニ
ル系重合注解量体を混合し、温度を５〜−ｉ ａ ｏ
”ｃの低温に維持して、心離性放射線を照射することに
よって多孔質材料を含む固定化増殖セルラーゼ生産菌体
組成物が製造される。
ｆ＊液液上セルロース系多孔質材料よびガラス化性ビニ
ル系重合注解量体を混合し、温度を５〜−ｉ ａ ｏ
”ｃの低温に維持して、心離性放射線を照射することに
よって多孔質材料を含む固定化増殖セルラーゼ生産菌体
組成物が製造される。
本発明は、好気性で増ｙ＋ｉ Ｌながらセルラーゼを産
生ま′ｆ？：、は保持している菌体にビニル基ｔもち放
射線によ！ｌｌ１重合する単量体とセルロース系多孔質
材料を１１口え混合し、照射重合させる方法で、この中
でセルロース系多孔質材料はセルラーゼ生産菌体のセル
ラーゼ産生に付して産生誘発剤となるほか、炭素源にも
なり固定化物中では多孔質材の役割ケしている、従って
セルロース系多孔質材料の固定化物中の組成比は大きな
割合ケしめるようにする。セルラーゼ生産菌体は液体培
髪中、セルロース系繊維に接着しながら増殖゛ｒる性質
があるため、セルロース系繊維は固定化吻の中で菌体増
夕１αの重要な役目をする。また菌体が増殖しセルラー
ゼの産生が著しくなるとセルロースが少しづつ分解され
て消費されるが、固定化吻においてセルロースが分解さ
れた部所が孔となって向ボ比吻が多孔質化し、そこに菌
体がｐｔｉｔｗするということりこなるので好都合な状
態になる。このようｔＣ本発明の方法は菌体が増殖しや
すいような固ｊピｆヒ吻の構造にするところに特徴があ
る。
生ま′ｆ？：、は保持している菌体にビニル基ｔもち放
射線によ！ｌｌ１重合する単量体とセルロース系多孔質
材料を１１口え混合し、照射重合させる方法で、この中
でセルロース系多孔質材料はセルラーゼ生産菌体のセル
ラーゼ産生に付して産生誘発剤となるほか、炭素源にも
なり固定化物中では多孔質材の役割ケしている、従って
セルロース系多孔質材料の固定化物中の組成比は大きな
割合ケしめるようにする。セルラーゼ生産菌体は液体培
髪中、セルロース系繊維に接着しながら増殖゛ｒる性質
があるため、セルロース系繊維は固定化吻の中で菌体増
夕１αの重要な役目をする。また菌体が増殖しセルラー
ゼの産生が著しくなるとセルロースが少しづつ分解され
て消費されるが、固定化吻においてセルロースが分解さ
れた部所が孔となって向ボ比吻が多孔質化し、そこに菌
体がｐｔｉｔｗするということりこなるので好都合な状
態になる。このようｔＣ本発明の方法は菌体が増殖しや
すいような固ｊピｆヒ吻の構造にするところに特徴があ
る。
本発明を実施する鴨合、閑Ｉ４−等全セルロース系多２
比質材料、ガラス化性ビニル系重合性檗献体、と混合す
るが、混合組成中セルロース系多孔質材料の占める割合
が組成物の体積に半分以上になるように配合する。また
ガラス化性ビニル系虜合性単量体は組成物全体量の半分
以下、好ましくは１〜６０％の範囲が良く、比較的低濃
度にする。一体は水又は培養液に分散させたもので菌体
の酸は１１Ｊ、Ｕ１〜１１．１係（半乾燥重量）でよい
。これらを混合させたものを室温又は低温下で電離性放
射線ケ照射して重合せしめる。線数は１０〜５Ｘ１０’
レントゲンで温度１６．５”Ｃ以下が好イしい。照射温
度が５℃以ドで、線量が１×１０〜５ｘ１０Ｒであれば
函体に付して放射線の活性への影響はない。
比質材料、ガラス化性ビニル系重合性檗献体、と混合す
るが、混合組成中セルロース系多孔質材料の占める割合
が組成物の体積に半分以上になるように配合する。また
ガラス化性ビニル系虜合性単量体は組成物全体量の半分
以下、好ましくは１〜６０％の範囲が良く、比較的低濃
度にする。一体は水又は培養液に分散させたもので菌体
の酸は１１Ｊ、Ｕ１〜１１．１係（半乾燥重量）でよい
。これらを混合させたものを室温又は低温下で電離性放
射線ケ照射して重合せしめる。線数は１０〜５Ｘ１０’
レントゲンで温度１６．５”Ｃ以下が好イしい。照射温
度が５℃以ドで、線量が１×１０〜５ｘ１０Ｒであれば
函体に付して放射線の活性への影響はない。
本発明において固定化増殖セルラーゼ生産菌体組成ｖｌ
Ｊケ得る方法として前述しｌζように菌体を照射重合前
に添すロする方法と又、ガラス化性ビニル系重合性単量
体とセルロース系多孔質材料と水溶液とか混合し、低温
で照射重合した後に、画体ケ培養液に分散したものを接
触させることによ！７繭陣がセルロース系多孔質材料に
吸着され固定化増殖１看体組１戎吻を作る方法もある。
Ｊケ得る方法として前述しｌζように菌体を照射重合前
に添すロする方法と又、ガラス化性ビニル系重合性単量
体とセルロース系多孔質材料と水溶液とか混合し、低温
で照射重合した後に、画体ケ培養液に分散したものを接
触させることによ！７繭陣がセルロース系多孔質材料に
吸着され固定化増殖１看体組１戎吻を作る方法もある。
本発明はいずれの方法をも包含する。
不発明の′＋！ｆＩａの一つは、爪合体所ｆｆｔ体とし
てガラス化性ビニル系重合性単量体 ！り” ｏガラス化性重合性重量体は、低温で結晶化せ
ずに過冷却状態となり、重合性ケ失わない性質をもった
重合性単量体である。過冷却状態におけるガラス化性重
合性単量体の重合は、非晶質状態での固相重合といって
よいものであり低温順１或での重合性が大きいので、生
体の固定化など低温重合の応用にはきわめて有用な手段
である。通常菌体等は熱的に不安定であるので活性を失
活させな諭ためにも固定化は低温である程哩想的である
。
てガラス化性ビニル系重合性単量体 ！り” ｏガラス化性重合性重量体は、低温で結晶化せ
ずに過冷却状態となり、重合性ケ失わない性質をもった
重合性単量体である。過冷却状態におけるガラス化性重
合性単量体の重合は、非晶質状態での固相重合といって
よいものであり低温順１或での重合性が大きいので、生
体の固定化など低温重合の応用にはきわめて有用な手段
である。通常菌体等は熱的に不安定であるので活性を失
活させな諭ためにも固定化は低温である程哩想的である
。
低温で有効に重合ケ行なうことが出来る手段としては放
射線重合法であり、放射、尿によって低温で大きな重合
性を有するのはガラス化性ビニル系重合性単量体である
ことケ考えると１本発明はガラス化性重合性単量体を１
更用することによって１戊立したものといい得る。所で
、ガラス１じ性重合性咄献体は分子内に適度の強さの水
累結合性の官能承・かさ高いあるいは著しく非付称性の
１直喚基・エーテル結合のような回転の自由エネルギー
の小さい結合などを含んでいるもので、下記の一１役式
で表わされるものの中から１種又はン踵以上が１史ｌＪ
される； ’、ＣＨ２”ＣＸ−Ｃ−０（ＣＨ２） ｎ０１ｊ＋１ ここでＸはＨ又はメチル基、山 はＨ又は（１−Ｉ、
＝ＣＸ −Ｃ− １ ここでＸはＨ又はメチル基、そしてｎは４〜１０の幣数
： ｂ、ＣＬ＝ＣＸ−Ｃ−０−（Ｒ２）ｍ−Ｃ−ＣＸ＝Ｃ，
Ｅ（２１１１ ００ ここでＸはＨ又はメチル基、Ｒ２は−ｃＨ２Ｃｆ−１２
０−。
射線重合法であり、放射、尿によって低温で大きな重合
性を有するのはガラス化性ビニル系重合性単量体である
ことケ考えると１本発明はガラス化性重合性単量体を１
更用することによって１戊立したものといい得る。所で
、ガラス１じ性重合性咄献体は分子内に適度の強さの水
累結合性の官能承・かさ高いあるいは著しく非付称性の
１直喚基・エーテル結合のような回転の自由エネルギー
の小さい結合などを含んでいるもので、下記の一１役式
で表わされるものの中から１種又はン踵以上が１史ｌＪ
される； ’、ＣＨ２”ＣＸ−Ｃ−０（ＣＨ２） ｎ０１ｊ＋１ ここでＸはＨ又はメチル基、山 はＨ又は（１−Ｉ、
＝ＣＸ −Ｃ− １ ここでＸはＨ又はメチル基、そしてｎは４〜１０の幣数
： ｂ、ＣＬ＝ＣＸ−Ｃ−０−（Ｒ２）ｍ−Ｃ−ＣＸ＝Ｃ，
Ｅ（２１１１ ００ ここでＸはＨ又はメチル基、Ｒ２は−ｃＨ２Ｃｆ−１２
０−。
ＣＨ３Ｃｌ−ｌ３
そしてｍは１〜６の整数：
ここでＸはＨ又はメチル基；
ｄ、ＣＬ ””ＣＸ −Ｃ−０−Ｒ３０−Ｒ４１：
ここでＸはＨ又はメチル基、山は１〜１０個の炭素原子
を有する直鎖又ｅユ汁枝鎖了ルキレン基。
を有する直鎖又ｅユ汁枝鎖了ルキレン基。
そしてＲ，は１〜１０ｉｌｉ！ｊの炭素原子を有するビ
ニル又はアルキル基； （〕 ここでル はアルカン（Ｃ＋〜Ｃ，）−イル−イリド、
アルキレン（ｃ＋〜Ｃ５）アミノ基、Ｒ６１−よびＲ７
は各々Ｈ，１〜５個の炭素原子を有］−るアルキル基、
１〜５個の炭素原子ケ有するアルキルアミノ基、１〜５
個の炭素原子を有するヒドロキシルアルキル基、アリル
又はビニル基；ｆ、ｃＨｚ＝ｃＸ−ＣＲ８ＯＲ８０−Ｒ
４１ ここでＸ、Ｒ３およびＲ３は上で定義し７４通り。
ニル又はアルキル基； （〕 ここでル はアルカン（Ｃ＋〜Ｃ，）−イル−イリド、
アルキレン（ｃ＋〜Ｃ５）アミノ基、Ｒ６１−よびＲ７
は各々Ｈ，１〜５個の炭素原子を有］−るアルキル基、
１〜５個の炭素原子ケ有するアルキルアミノ基、１〜５
個の炭素原子を有するヒドロキシルアルキル基、アリル
又はビニル基；ｆ、ｃＨｚ＝ｃＸ−ＣＲ８ＯＲ８０−Ｒ
４１ ここでＸ、Ｒ３およびＲ３は上で定義し７４通り。
Ｒ８は烏 と゛同じ、Ｒ３およびＲ８は同じ各々異って
いる； ０ ここでｘ、ｉｔ、および氏に上で定義した通り：ｈ、
ＣＲ２”’ ＣＸ −ＣＯ−Ｒ３−ＣＯ−Ｒ４００ ここでＸ、Ｒ８およびＲ４は上で定義した通り；ｔ、Ｃ
Ｈ，、＝ＣＸ ｃ−ｏ Ｒ１＋ １ ここでＸは上で定義した通り、そして山Ｉはベンジル、
トルイル、キシリル、フェニル、フルフリル、ナフチル
、フタリル、シクロヘキシル。
いる； ０ ここでｘ、ｉｔ、および氏に上で定義した通り：ｈ、
ＣＲ２”’ ＣＸ −ＣＯ−Ｒ３−ＣＯ−Ｒ４００ ここでＸ、Ｒ８およびＲ４は上で定義した通り；ｔ、Ｃ
Ｈ，、＝ＣＸ ｃ−ｏ Ｒ１＋ １ ここでＸは上で定義した通り、そして山Ｉはベンジル、
トルイル、キシリル、フェニル、フルフリル、ナフチル
、フタリル、シクロヘキシル。
シクロフェニル、シクロへブチル、シクロブチル、ピリ
ジル又は６−オキツビロリジニル基；Ｊ、Ｒｇ Ｃ−
（ＣＨＩ！ ０−Ｃ−ＣＸ”ＣＨ２）ａ１ ここでＸは上で定義した１司り、−ｆニジてＲｏはエチ
ル又はプロピル浩；又は に、 ＣＲ２＝ＣＸ Ｃ−０−ＯＲｓ ｏ −０−Ｃ−
ＣＸ＝ＣＨ２１１１ ０ ここでＸは上で定義した通り、そしてＲＩＧはイソプロ
ピレン、インブチレン、１〜５個の炭素原子を有する汁
枝鎖了ルキレン承。
ジル又は６−オキツビロリジニル基；Ｊ、Ｒｇ Ｃ−
（ＣＨＩ！ ０−Ｃ−ＣＸ”ＣＨ２）ａ１ ここでＸは上で定義した１司り、−ｆニジてＲｏはエチ
ル又はプロピル浩；又は に、 ＣＲ２＝ＣＸ Ｃ−０−ＯＲｓ ｏ −０−Ｃ−
ＣＸ＝ＣＨ２１１１ ０ ここでＸは上で定義した通り、そしてＲＩＧはイソプロ
ピレン、インブチレン、１〜５個の炭素原子を有する汁
枝鎖了ルキレン承。
ＨＨ
Ｏ）Ｉ Ｒ１゜
ここでＲ７Ｉは上で定義した通り。
そして１本発明で使用するカラスｆヒ性ビニル系重合体
所敏体を具体的に例示すると；ヒドロキシエｆルメタク
リレート、ヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシ
プロピル了クリレート、ヒドロキシプロピルメタクリレ
ート、゛ンエチレングリコールメタクリレート、ジエチ
レングリコール了クリレート、トリエチレングリコール
メタクリレート、トリエチレングリコールアクリレート
、テトラエチレングリコール了クリレート、テトラエチ
レングリコールメタクリレート、ポリエチレングリコー
ルメタクリレート、ポリエチレングリコール了クリレー
ト、ジエチレングリコール・ジメタクリレート、ジエチ
レングリコ ルジ了クリレート、メトキシジエチレング
リコールジメタクリレート、メトキシジエチレングリコ
ールパンート、メトキシテトラエチレングリコールジメ
タクリレート、ネオペン享ルグリコールジメタクリレー
ト、ヘキサンジオールモノメタクリレート。
所敏体を具体的に例示すると；ヒドロキシエｆルメタク
リレート、ヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシ
プロピル了クリレート、ヒドロキシプロピルメタクリレ
ート、゛ンエチレングリコールメタクリレート、ジエチ
レングリコール了クリレート、トリエチレングリコール
メタクリレート、トリエチレングリコールアクリレート
、テトラエチレングリコール了クリレート、テトラエチ
レングリコールメタクリレート、ポリエチレングリコー
ルメタクリレート、ポリエチレングリコール了クリレー
ト、ジエチレングリコール・ジメタクリレート、ジエチ
レングリコ ルジ了クリレート、メトキシジエチレング
リコールジメタクリレート、メトキシジエチレングリコ
ールパンート、メトキシテトラエチレングリコールジメ
タクリレート、ネオペン享ルグリコールジメタクリレー
ト、ヘキサンジオールモノメタクリレート。
グリシパンルメタクリレート、グリシジ！レアクリレー
ト、ヘプタンジオールモノメタクリレート、フタンジオ
ールモノメタクリレート、エチレングリコりルレジ了ク
リレート、プロピレンクリコールパンメタクリレート 不発明において用いられるセルロースを主１ｊｌとした
多孔質材料としでは，セルロース粉末，セルロース繊維
，木綿，木綿繊維で織んだ製品等があり，その形態は繊
維状であるのが好ましい。
ト、ヘプタンジオールモノメタクリレート、フタンジオ
ールモノメタクリレート、エチレングリコりルレジ了ク
リレート、プロピレンクリコールパンメタクリレート 不発明において用いられるセルロースを主１ｊｌとした
多孔質材料としでは，セルロース粉末，セルロース繊維
，木綿，木綿繊維で織んだ製品等があり，その形態は繊
維状であるのが好ましい。
不発明において固定化すべきセルラーゼ生産一体は好気
性，嫌気性のいずれの菌体でもよいが。
性，嫌気性のいずれの菌体でもよいが。
嫌気性の鳴絵には系を嫌気の状態に保って培養を行う。
好気性の嚇合には固定化増ＩＩｆｉ菌体組成物を培養液
に入れ通気しながら培養を行うことによって菌体の工・
ｄ焔がおこる。
に入れ通気しながら培養を行うことによって菌体の工・
ｄ焔がおこる。
不発明で用いられる菌体の具１本例としては，糸状［］
テｉｊ：了スペルギルスニガー，了スペルギルスオリー
ゼ，トリコデルマビリデ、担子菌ではイルペックスレク
チュウス等がある。
テｉｊ：了スペルギルスニガー，了スペルギルスオリー
ゼ，トリコデルマビリデ、担子菌ではイルペックスレク
チュウス等がある。
本発明で１更中される電離性放射線はσ，腺，βＩ線。
γ線，Ｘ線，電子線であり，使用０Ｔ能な線量は１０４
〜５×１０ レントゲンの範囲である。所で。
〜５×１０ レントゲンの範囲である。所で。
菌体活性にぺする放射線の照射効！４！：は照射の温ｒ
Ｌと線量に著しく依存しており、００以上，１０レント
ゲン以上の照射条件では照射による失活が急政に増大す
．る。逆に５℃〜−ＩＵＵ’Ｃの温度範囲で１０′〜５
×１Ｕレントゲンの照射条件で速やかに反応させる限り
函体活性に付する照射の影響はほとんど認められない。
Ｌと線量に著しく依存しており、００以上，１０レント
ゲン以上の照射条件では照射による失活が急政に増大す
．る。逆に５℃〜−ＩＵＵ’Ｃの温度範囲で１０′〜５
×１Ｕレントゲンの照射条件で速やかに反応させる限り
函体活性に付する照射の影響はほとんど認められない。
従って，本発明を実施する重合の！！（１射温度ｆｉ．
ｂ〜−１００℃，好ましくは．５’Ｃ〜−８０”Ｃの中
１囲である。
ｂ〜−１００℃，好ましくは．５’Ｃ〜−８０”Ｃの中
１囲である。
以下，実施例ケ掲げて本発明ケより具体的に説明する。
実施例１
液体培養してえられたトリコデルマビリデ菌体０、 １
部． 木Ｍ６布２部，ヒドロキシエチルＩタク１ルー
ト２部および緩衝水溶１２０１１を混合し，均一にして
これケ氷ケ用いて４℃に冷却し，この温ｉｉに保ってコ
バルト６０よジ放射されるガンマ−、４ケｂｘ１０Ｒ／
時の＃ｌ量率で１時間照射して重合せしめた。得られた
組成物全適当の大きさに切断し，これをトリコデルマビ
リデ用の培養液の入った培養容器Ｖこ入れ、通気の状態
で２８°Ｃで回分培養した紹束，４日後には組１戎吻は
増殖した菌体で覆われた。培養液中のセルラーゼ生成量
を濾紙分解活性で調べた結１４５．ＯＩＵ であった。
部． 木Ｍ６布２部，ヒドロキシエチルＩタク１ルー
ト２部および緩衝水溶１２０１１を混合し，均一にして
これケ氷ケ用いて４℃に冷却し，この温ｉｉに保ってコ
バルト６０よジ放射されるガンマ−、４ケｂｘ１０Ｒ／
時の＃ｌ量率で１時間照射して重合せしめた。得られた
組成物全適当の大きさに切断し，これをトリコデルマビ
リデ用の培養液の入った培養容器Ｖこ入れ、通気の状態
で２８°Ｃで回分培養した紹束，４日後には組１戎吻は
増殖した菌体で覆われた。培養液中のセルラーゼ生成量
を濾紙分解活性で調べた結１４５．ＯＩＵ であった。
実施例２
液体培養してえられたト１１コデルマビリデ菌体ｔＪ．
２部−Ａｎ６ｆｌｆｌ≦、ヒドロキシエチル了クリレー
ト１、５都および緩衝水溶液２０部ケ混合し，均一にし
，これ全寒剤を用いて一２４℃に冷却し，この温度に保
って，゛コバルト６Ｕより放射されるガンマ−線２６ｘ
ｌＯＲ／時の線量率で２時間照射して重合させた。得ら
れた組成物を１ｃｒ／ｌの大きさに切り，これ（１１一
連続培養槽（５００ｅｃ）に入れ２８℃でまず２日間静
置して通気しながら培養してから，次に培養液ケ１０田
／時の流速で連続的に流して培養を行った。培養液中の
セルラーゼ生成量は濾紙分解活性で調べ４白目１立いか
ら除々に活性が増大しはじめ７白目で活性値が６．ＳＩ
Ｏ になり。
２部−Ａｎ６ｆｌｆｌ≦、ヒドロキシエチル了クリレー
ト１、５都および緩衝水溶液２０部ケ混合し，均一にし
，これ全寒剤を用いて一２４℃に冷却し，この温度に保
って，゛コバルト６Ｕより放射されるガンマ−線２６ｘ
ｌＯＲ／時の線量率で２時間照射して重合させた。得ら
れた組成物を１ｃｒ／ｌの大きさに切り，これ（１１一
連続培養槽（５００ｅｃ）に入れ２８℃でまず２日間静
置して通気しながら培養してから，次に培養液ケ１０田
／時の流速で連続的に流して培養を行った。培養液中の
セルラーゼ生成量は濾紙分解活性で調べ４白目１立いか
ら除々に活性が増大しはじめ７白目で活性値が６．ＳＩ
Ｏ になり。
１０日１で５．５ＩＵになり，２０日間このｆ直が接続
した。
した。
実施例６
セルロース粉末５部．ヒドロキシエチルメタクリレ−）
１０部，および緩衝水溶液５０部を混合し．均一にし，
これを−７８℃に急冷した。これをコバルト６０よジ放
射されるガンマ−線を１×１ ０６Ｒ／時の線量率で１
時間照射し重合させた。
１０部，および緩衝水溶液５０部を混合し．均一にし，
これを−７８℃に急冷した。これをコバルト６０よジ放
射されるガンマ−線を１×１ ０６Ｒ／時の線量率で１
時間照射し重合させた。
得られた重合物ケ室温にもどすと多孔質和本ケ得た。こ
れ全１ｄの大きさに切り，１０ケの培養容器（５００ｃ
ｃ） にこの容器に水に分散させたトリコデルマビリ
デ菌体０．１部を入れ，培．ｄＭ．２００ＣＣを入れて
２８℃で通気しながら振とうＪ＠譬すると固定化物に菌
体が増殖した。培養液中の濾紙分解活性を６日後に測定
したところ４．５であった。
れ全１ｄの大きさに切り，１０ケの培養容器（５００ｃ
ｃ） にこの容器に水に分散させたトリコデルマビリ
デ菌体０．１部を入れ，培．ｄＭ．２００ＣＣを入れて
２８℃で通気しながら振とうＪ＠譬すると固定化物に菌
体が増殖した。培養液中の濾紙分解活性を６日後に測定
したところ４．５であった。
固定化増殖菌体組成物を回分培養で（り返し１史１−１
４試験した。培養液は培養毎に耕しく交萌して６日間の
培養で５回のくり返し匣用で毎回のＦ低分解活性は４．
５ＩＵで一定でめった。
４試験した。培養液は培養毎に耕しく交萌して６日間の
培養で５回のくり返し匣用で毎回のＦ低分解活性は４．
５ＩＵで一定でめった。
特許出願人 日本原子力研究所
代理人升埋士湯浅恭三、゛
（外２名）
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 セルラーゼ生産歯体又はその水中分散液とセルロ
ース系多孔質材料およびガラス化性ビニル系重合性単量
体を混合し、これに電離性放射線全照射することから成
るセルロース系多孔質材料を含む固定化増殖セルラーゼ
生産菌体組成物を製造する方法。 ２、カラス化性ビニル系重合性単量体が下記の一般式か
ら選択される１種以上であることケ特徴とする特許請求
の範囲第′１項に記載の方法。 は ＣＨ２＝ＣＸ−Ｃ− １ ここでＸはＨ又はメチルノン．そしてｎは４〜１０の整
数； ここでＸはＨ又はメチル基，Ｒ２は一ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−
。 そしてｍは１〜６の整数； ここでＸｒｌｌ：Ｈ又はメチル基； ｄ．ＣＨ２＝ＣＸ−Ｃ−０−Ｒ３−０−Ｒ。 １ ここでＸはＨ又はメチル＝．ａａｒｚｉ〜１０個の炭素
原子ケ有する直鎖又は分校鎖了ルキレン基，そしてＲ４
は１〜１０涸のここでＲ，ハアルカン（Ｃ，−Ｃ，
）−イル−イリド、アルキレン（Ｃ’、−Ｃ，）了ミノ
基、Ｒ６およびＲ７は各々Ｈ，１〜５個の炭素原子を有
するアルキル基、１〜５個の炭素原子を有するアルキル
了ミノ基。 １〜５個の炭素原子ケ有するヒドロキシルアルキル基、
アリル又はビニル基； ｆ、 ＣＩ’１２ ＝ ＣＸ −ＣＲ３−ＯＲＢ −
０−Ｒ４１ ここでＸ、Ｒ３および瓜 は上で定義したＩＩｌ！ｉす
、Ｒ８はＲ３と同じ、Ｒ８およびＲ８は同じ各々異って
いる； ここでＸ、Ｒ３およびＲ１は上で定義した通り； ここでＸ 、 １％およびＲ，ｋｎ上で定義した通り； ｉ、 ＣＨ２＝ＣＸ−Ｃ−０−＆ｔ １ ここでＸは上で定義した通り、そしてＲ７゜はベンジル
、トルイル、キシリル、フェニル、フルフリル、ナフチ
ル、フタリル。 シクロヘキシル、シクロフェニル、シクロへブチル、シ
クロブチル、ピリ・ジル又は６−オキソピロリジニル基
： ｊ−ＩＥ％−Ｃ−（ＣＨ２−ＯＣ−ＣＸ＝Ｃ，Ｒ２）３
１ ここでＸは上で定義した通゛す、そしてＲ９はエチル又
はプロピル基；又は ここでＸは上で定義した通り、そしてＲ１゜はイソプロ
ピレン、インブチレン、１〜５個の炭素原子を有する分
枝鎖アルキレン基。 トＩＨ ＯＨＲｕ ここでＲ１１は上で定義した通り。 ６、電離性放射線にコ〜−１００℃の温度範囲で１０′
〜５Ｘ１０’レントゲン照射することを特徴とする特許
請求の範囲嘱１項記載の方法。 ４、 ガラス化性ビニル系重合性単叶体を組成物単量体
１〜５０ｑｂ使用する特許請求の範囲第１項記載の方法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15233682A JPS5942890A (ja) | 1982-09-01 | 1982-09-01 | セルロ−ス系多孔質材料を含む固定化増殖菌体組成物の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15233682A JPS5942890A (ja) | 1982-09-01 | 1982-09-01 | セルロ−ス系多孔質材料を含む固定化増殖菌体組成物の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5942890A true JPS5942890A (ja) | 1984-03-09 |
Family
ID=15538308
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15233682A Pending JPS5942890A (ja) | 1982-09-01 | 1982-09-01 | セルロ−ス系多孔質材料を含む固定化増殖菌体組成物の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5942890A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS626683A (ja) * | 1985-04-29 | 1987-01-13 | ミネソタ マイニング アンド マニュファクチュアリング コンパニ− | 複合材料およびその製造方法 |
| JPH02255088A (ja) * | 1989-03-29 | 1990-10-15 | Japan Vilene Co Ltd | 固定化生理活性物質 |
| JPH06153905A (ja) * | 1992-11-24 | 1994-06-03 | Sanyo Chem Ind Ltd | 細胞培養基材および細胞培養方法 |
| JP2017099404A (ja) * | 2009-05-20 | 2017-06-08 | キシレコ インコーポレイテッド | バイオマス加工方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5296791A (en) * | 1976-02-09 | 1977-08-13 | Japan Atom Energy Res Inst | Preparation of composition including enzymes or microorganisms |
-
1982
- 1982-09-01 JP JP15233682A patent/JPS5942890A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5296791A (en) * | 1976-02-09 | 1977-08-13 | Japan Atom Energy Res Inst | Preparation of composition including enzymes or microorganisms |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS626683A (ja) * | 1985-04-29 | 1987-01-13 | ミネソタ マイニング アンド マニュファクチュアリング コンパニ− | 複合材料およびその製造方法 |
| JPH02255088A (ja) * | 1989-03-29 | 1990-10-15 | Japan Vilene Co Ltd | 固定化生理活性物質 |
| JPH06153905A (ja) * | 1992-11-24 | 1994-06-03 | Sanyo Chem Ind Ltd | 細胞培養基材および細胞培養方法 |
| JP2017099404A (ja) * | 2009-05-20 | 2017-06-08 | キシレコ インコーポレイテッド | バイオマス加工方法 |
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