JPS5934357B2 - 微生物によるソルビト−ルの製造法 - Google Patents
微生物によるソルビト−ルの製造法Info
- Publication number
- JPS5934357B2 JPS5934357B2 JP5325182A JP5325182A JPS5934357B2 JP S5934357 B2 JPS5934357 B2 JP S5934357B2 JP 5325182 A JP5325182 A JP 5325182A JP 5325182 A JP5325182 A JP 5325182A JP S5934357 B2 JPS5934357 B2 JP S5934357B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sorbitol
- candida
- bacterial cells
- producing sorbitol
- microorganisms
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はブドウ糖から微生物的手法によってソルビトー
ルを製造する方法に関し、より詳しくはキャンデイダ属
微生物の生菌体、処理菌体、菌体破砕物および菌体抽出
物等を用いて還元型ニコチンアミド アゾ゛ニン ジヌ
クレオチド ホスフェイト（以下ＮＡＤＰＨとする）の
存在下にブドウ糖からソルビトールを効率よく製造する
方法に関する。
ルを製造する方法に関し、より詳しくはキャンデイダ属
微生物の生菌体、処理菌体、菌体破砕物および菌体抽出
物等を用いて還元型ニコチンアミド アゾ゛ニン ジヌ
クレオチド ホスフェイト（以下ＮＡＤＰＨとする）の
存在下にブドウ糖からソルビトールを効率よく製造する
方法に関する。
ソルビトールは特有の甘味を有すると共に反応性に乏し
く、無害であって、湿潤調節作用を有するため、そのま
ま食品、歯みがき、化粧品等に添加物として使用される
他、ビタミンＣ１界面活性剤製造の中間原料として広く
使用されている。
く、無害であって、湿潤調節作用を有するため、そのま
ま食品、歯みがき、化粧品等に添加物として使用される
他、ビタミンＣ１界面活性剤製造の中間原料として広く
使用されている。
ソルビトールは現在、工業的にはブ下つ糖をラネーニッ
ケル等のＮｉ触媒を用いて接触還元して製造されている
力ζ このような方法によれは反応条件が必然的に高温
（１６０℃）、高圧（１７０ｋｇ／ｃ！１）となりエネ
ルギーを多く消費する他、耐圧容器を必要とし、更に水
素を取扱う関係上爆発の危険が内在している。
ケル等のＮｉ触媒を用いて接触還元して製造されている
力ζ このような方法によれは反応条件が必然的に高温
（１６０℃）、高圧（１７０ｋｇ／ｃ！１）となりエネ
ルギーを多く消費する他、耐圧容器を必要とし、更に水
素を取扱う関係上爆発の危険が内在している。
本発明者らは上記方法とは発想を異にし、グルコースを
微生物学的に還元することにより緩和な条件でソルビト
ールを製造する方法を試みた。
微生物学的に還元することにより緩和な条件でソルビト
ールを製造する方法を試みた。
ブドウ糖をソルビトールに還元する機構は動物細胞系で
は羊の精のう中（Ｈ，Ｇ、Ｈｅｒｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ−
Ｂｉｏｐｈｙｓ−Ａｃｔａ ３７（１９６０）１２７−
１３８ ）あるいはレンズ中（Ｍ−Ｌｏｕ Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ−Ｂｉｏｐｈｙｓ−Ａｃｔａ １＜す（１９６７）
５４７−５５９ ）に存在することは知られているが
、微生物では、わずかに特公昭４５−２４８３４号及び
４６−２３０３８号にキシロースをキシリトールに好気
的に醗酵して還元する方法が開示されているにすぎない
。
は羊の精のう中（Ｈ，Ｇ、Ｈｅｒｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ−
Ｂｉｏｐｈｙｓ−Ａｃｔａ ３７（１９６０）１２７−
１３８ ）あるいはレンズ中（Ｍ−Ｌｏｕ Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ−Ｂｉｏｐｈｙｓ−Ａｃｔａ １＜す（１９６７）
５４７−５５９ ）に存在することは知られているが
、微生物では、わずかに特公昭４５−２４８３４号及び
４６−２３０３８号にキシロースをキシリトールに好気
的に醗酵して還元する方法が開示されているにすぎない
。
また、上記発明に開示された菌株をグルコース培地中で
培養してもソルビトールを得ることはできなかった。
培養してもソルビトールを得ることはできなかった。
そこで本発明者らは多種類の微生物について試験を行っ
た結果、五炭糖中で培養増殖せしめたキャンデイダ属の
菌体、あるいは菌体抽出物、凍結乾燥菌体がＮＡＤＰＨ
の存在下に基質グルコースをソルビトールに高収率に還
元することを見出して本発明を完成するに至った。
た結果、五炭糖中で培養増殖せしめたキャンデイダ属の
菌体、あるいは菌体抽出物、凍結乾燥菌体がＮＡＤＰＨ
の存在下に基質グルコースをソルビトールに高収率に還
元することを見出して本発明を完成するに至った。
本発明に用いるキャンデイダ属としてはキャンデイダ、
トロピカリス（Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉ
ｓ）キャンデイダ、ポリモルファ（Ｃａｎｄｉｄａ ｐ
ｏｌｙ −ｍｏｒｐｈａ） 、キャンデイダ、ユテイリ
ス（Ｃａｎｄ−ｉｄａ ｕｔｉｌｉｓ）、等が挙げられ
るが、中でもキャンデイダ、トロピカリスが好ましい。
トロピカリス（Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉ
ｓ）キャンデイダ、ポリモルファ（Ｃａｎｄｉｄａ ｐ
ｏｌｙ −ｍｏｒｐｈａ） 、キャンデイダ、ユテイリ
ス（Ｃａｎｄ−ｉｄａ ｕｔｉｌｉｓ）、等が挙げられ
るが、中でもキャンデイダ、トロピカリスが好ましい。
本発明に係る菌を増殖させるにあたっては炭素源として
２〜１５％、Ｄ−キシロース、Ｄ−アラビノース、Ｄ−
Ｕボース等の五炭糖を含有し、イーストエキス又はコー
ンステイープリカー等を添加した液体培地中で２５〜３
５℃で２〜１０日間培養する。
２〜１５％、Ｄ−キシロース、Ｄ−アラビノース、Ｄ−
Ｕボース等の五炭糖を含有し、イーストエキス又はコー
ンステイープリカー等を添加した液体培地中で２５〜３
５℃で２〜１０日間培養する。
培養法は通気培養、振盪培養、回転ドラム法等好気的条
件であればいずれも採用できる。
件であればいずれも採用できる。
また、培地に上記成分の他各種ビタミン、無機質、ペプ
トンおよびイーストエキス等の有機物を加えてより増殖
率を高めることもできる。
トンおよびイーストエキス等の有機物を加えてより増殖
率を高めることもできる。
このようにして増殖した菌体を集菌、洗滌して得た生菌
をそのまま使用してもある程度の効果は認められるが、
凍結乾燥菌体、凍結融解菌体、アセトン、エーテル等の
有機溶媒処理した菌体等の処理菌体を用いた方がはるか
に効果的である。
をそのまま使用してもある程度の効果は認められるが、
凍結乾燥菌体、凍結融解菌体、アセトン、エーテル等の
有機溶媒処理した菌体等の処理菌体を用いた方がはるか
に効果的である。
また、超音波処理、ビプロゲンセルミル等の破砕機を用
いて調製した菌体破砕物および菌体抽出物を用いること
もできる。
いて調製した菌体破砕物および菌体抽出物を用いること
もできる。
ツルピトー′ルを製造するにあたっては、上記方法で得
られた処理菌体、菌体破砕物又はこれから分離した菌体
抽出物あるいはこれらの混合物を１〜６０％濃度のブド
ウ糖液に加え、１０〜６０℃、望ましくは２５〜３５℃
で反応させる。
られた処理菌体、菌体破砕物又はこれから分離した菌体
抽出物あるいはこれらの混合物を１〜６０％濃度のブド
ウ糖液に加え、１０〜６０℃、望ましくは２５〜３５℃
で反応させる。
この際補酵素としてＮＡＤＰＨを共存させることによっ
てソルビトールの生産性は飛躍的に向上する。
てソルビトールの生産性は飛躍的に向上する。
ＮＡＤＰＨの添加量は使用する菌体の調製法あるいは菌
体の抽出操作により大幅に異り、ブドウ糖１モル当り（
ｌｌミＩＪモル〜２０モル望ましくは０．１モル〜１０
モルである。
体の抽出操作により大幅に異り、ブドウ糖１モル当り（
ｌｌミＩＪモル〜２０モル望ましくは０．１モル〜１０
モルである。
反応に要する時間もまた条件により大きく変動し、例え
ば菌体抽出物を用いた場合、３０分ないし１４日で反応
は完了する。
ば菌体抽出物を用いた場合、３０分ないし１４日で反応
は完了する。
反応終了後、母液からソルビトールを分離する。
ソルビトールの分離精製にあたっては遠心分離法、限外
濾過法、イオン交換法等公知の方法を組合せて利用する
。
濾過法、イオン交換法等公知の方法を組合せて利用する
。
以下 実施例を挙げて本発明の詳細な説明する。
実鯖 １
５００ｍｌ溶消化フラスコに滅菌した表１に示す組成の
培地５０１７１１を人ね、Ｃ−ｔｒｏｐ １ｃａｌ ｉ
ｓＩＡＭ １２２０２株およびＣ−ｕｔｉｌｉｓ ＩＡ
Ｍ ４９６１株をそれぞれ１白金耳植菌し、３０℃、６
日間培養した。
培地５０１７１１を人ね、Ｃ−ｔｒｏｐ １ｃａｌ ｉ
ｓＩＡＭ １２２０２株およびＣ−ｕｔｉｌｉｓ ＩＡ
Ｍ ４９６１株をそれぞれ１白金耳植菌し、３０℃、６
日間培養した。
培養菌体をリン酸緩衝液で２回洗滌し、６１０ｎｍにお
ける濁度が２５になるようにリン酸緩衝液に懸濁した。
ける濁度が２５になるようにリン酸緩衝液に懸濁した。
この菌体懸濁液を２０分間超音波処理し、１４，００（
１，２０分間遠心分離し、その上滑両分をソルビトール
の生産に供した。
１，２０分間遠心分離し、その上滑両分をソルビトール
の生産に供した。
上記操作で得た上清両分を用いて表２に示す組成の反応
液を調製し、ｐＨ７，５とし、３０°Ｃで６時間反応さ
せた。
液を調製し、ｐＨ７，５とし、３０°Ｃで６時間反応さ
せた。
Ｃ，ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓでは８６μｍｏｌｅｓ、 Ｃ
１ｕｔ １ｌｉｓでは１０μｍｏｌｅｓのソルビトール
がそれぞれ得られた。
１ｕｔ １ｌｉｓでは１０μｍｏｌｅｓのソルビトール
がそれぞれ得られた。
生産物の確認は薄層クロマトグラフィー、高速液体クロ
マトグラフィーおよびガスクロマトグラフィーによって
行った。
マトグラフィーおよびガスクロマトグラフィーによって
行った。
また定量は高速液体クロマトグラフィーで行った。
実施例 ２
Ｃ−ｕｔｉｌｉｓ ＩＡＭ４９６１株を用いた以外は実
施例１と同様に培養して得られた菌体をリン酸緩衝液で
２回洗滌した後、凍結乾燥した。
施例１と同様に培養して得られた菌体をリン酸緩衝液で
２回洗滌した後、凍結乾燥した。
得られた凍結乾燥菌体を用いて表３に示した反応組成液
を調製し、３０℃で１６時間反応させた。
を調製し、３０℃で１６時間反応させた。
Ｃ−ｕｔｉ ｌｉｓの反応液から３８０μｍｏｌｅｓの
ソルビトールが得られた。
ソルビトールが得られた。
実施例 ３
Ｃ１ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓを用いて実施例１の方法で得
た反応液２０ｍ１をイオン交換樹脂（アミネツクスＡ５
：商品名）のカラムに通してソルビトールを精製した。
た反応液２０ｍ１をイオン交換樹脂（アミネツクスＡ５
：商品名）のカラムに通してソルビトールを精製した。
得られたソルビトールは１６１μｍｏｌｅｓであった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ キャンデイダ属微生物を五炭糖を主栄養源とする培
地を用いて好気的に培養して得られた生菌体、処理菌体
、菌体破砕物及び菌体抽出物の少くとも１種を還元型ニ
コチンアミド アデニン ジヌクレオチド ホスフェイ
トの共存下にブドウ糖に作用せしめてソルビトールを製
造することを特徴とする微生物によるソルビトールの製
造法。 ２ キャンデイダ属微生物がキャンディダ トロピカリ
スである特許請求の範囲第１項の微生物によるソルビト
ールの製造法。 ３ キャンディダ トロピカリスがＩ Ａ Ｍ １２２
０２株である特許請求の範囲第２項の微生物によるソル
ビトールの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5325182A JPS5934357B2 (ja) | 1982-03-31 | 1982-03-31 | 微生物によるソルビト−ルの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5325182A JPS5934357B2 (ja) | 1982-03-31 | 1982-03-31 | 微生物によるソルビト−ルの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58170485A JPS58170485A (ja) | 1983-10-07 |
| JPS5934357B2 true JPS5934357B2 (ja) | 1984-08-22 |
Family
ID=12937566
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5325182A Expired JPS5934357B2 (ja) | 1982-03-31 | 1982-03-31 | 微生物によるソルビト−ルの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5934357B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102094490A (zh) * | 2011-03-11 | 2011-06-15 | 湖南大学 | 一种局部约束混凝土梁 |
-
1982
- 1982-03-31 JP JP5325182A patent/JPS5934357B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS58170485A (ja) | 1983-10-07 |
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