JPS5919556B2 - 新規ヌクレオシドおよびその製法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はペントース部位がアラビノース構造を有する新
規なヌクレオシドおよびその製法に関する。

この種のネクレオシドは公知であり、そのなかには９−
β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニンや９−β−Ｄ−ア
ラビノフラノシルシトシンのように制がん作用を有する
ものがある。しかしｚ位の置換基がアミノ基であるもの
は知られていなかつた。さて意外にも一般式〔旧（式中
ｘおよびＹは同一でも異なつてもよく、アミノ基、水酸
基、チオール基または水素を表わす）で表わされる化合
物を還元することによつて、ペントース部位がアラビノ
ース構造で、ｚ位の置換基がアミノ基である新規なヌク
レオシドを得ることができ、しかもこのヌクレオシドが
制がん作用を示すことが認められた。

なお上記の式〔ｌ〕の化合物も新規化合物である。本発
明は上記の知見に基くものである。本発明の目的はペン
トース部位がアラビノース構造を有する新規なヌクレオ
シドおよびその製法を供することにある。なお、本出願
人の出願に係る特願昭４８−２６０６１号（特開昭４９
−１１０８９１号）明細書には、式（Ｘ）で示される化
合物の開示があり、本発明化合物を文言上含んでいるよ
うにみえる。

しかしながら、特願昭４８−２６０６１号を優先権主張
して出願された米国特許第３，９８７，０３０号によれ
ば、上記特許公開公報記載の化合物は式（Ｘ）のペント
ース環ｉ位のアミノ基がα位であることがわかる。本発
明化合物はアラビノフラノシル型であるのでｚ位のアミ
ノ基がβ位であるから上記特許公開公報記載の化合物な
らびに上記米国特許記載の化合物とは異なる化合物であ
る。本発明化合物が特開昭４９−１１０８９１号記載の
化合物と比較しても抗腫瘍活性において優れていること
は、後記実験例２によつて明らかである。本発明により
供されるヌクレオシドは次の一般式〔１〕で示されるこ
とを特徴としている。

（式中ｘおよびＹは前記と同一の意義を有する）式〔１
〕で表わされるヌクレオシド類の理化学的性状の例は次
のとおりである。（イ） ９−（２−デオキシ−２−ア
ミノ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−グアニン（実施
例２参照）以上によつて式〔１〕で表わされるヌク【ノ
オシド類は新規であり、（イ）の場合は、式〔１〕にお
いてｘが水酸基でＹがアミノ基であるもの、すなわち９
−（２−デオキシ−２−アミノ−β−Ｄ−アラビノフラ
ノシル）−グアニンであり、（０）の場合は式〔１〕に
おいてＸがアミノ基で、Ｙが水素原子であるもの、すな
わち９−（２−デオキシ−２−アミノ−β−Ｄ−アラビ
ノフラノシル）−アデニンであることが確認された。

次に本発明は上記の新規なヌクレオシド〔１〕の製法を
供することを目的としている。

本発明により、上記のヌクレオシドは式〔〕（Ｘおよび
Ｙは前記と同一の意義を有する）の化合物を還元するこ
とによつて得られる。この式〔〕の化合物と水素とを用
いて触媒の存在下に接触還元するのは、アジド基をアミ
ノ基に変換するための有利な方法である。

触媒としては、パラジウム炭素、酸化白金、ラネーニツ
ケル等が用いられるが、亜硫酸水素ナトリウム、硫化ナ
トリウム等のアジド基の還元に常用される還元剤を用い
てもよい。反応時の水素圧は一般に常圧でよい。

反応温度は一般に室温でよいが１０℃から８０℃の範囲
で行なうこともできる。反応時間は３０分ないし２４時
間で、反応温度、水素圧等の条件によつて異なる。反応
に用いる溶媒は、原料を溶解しうるもので、反応に参加
しないものならばとくに限定されないが、たとえば水性
メタノール、水性エタノール等が用いられる。

原料と同等量以上（好ましくは１〜１０倍当量）の鉱酸
（たとえば塩酸）または有機酸（たとえば酢酸）を溶媒
に含有させて反応を行なうと、反応産物を対応する酸の
付加塩として得ることができる。本発明はさらに式〔ｌ
〕（ＸおよびＹは前記と同一の意義を有する）で表わさ
れる新規化合物およびその製法を供する。

この式〔ｌ〕の化合物は、本発明により式…〕 （ただし、ＸおよびＹは前記と同一意味を表わし、Ｒは
アルキル基またはアリール基を表わす）で表わされるｉ
−スルフオニルオキシ化合物をアジ化水素酸塩と反応さ
せることによつて得ることができる。

式〔〕において、Ｒとしてはメチル、エチル、ｐ−トリ
ル、ｐ−ニトロフエニル基等が具体的にあげられる。

この反応は一般式〔〕で表わされる化合物のスルホニル
基の立体配置の転位を伴なうアジド基への置換反応であ
つて、用いられる溶媒はとくに限定はないが、ジメチル
ホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホ
キシド、ヘキサメチルホスホリツクトリアミド等の溶媒
中で行なうのが好ましい。

アジド化剤としては、親核置換反応を行なうものであれ
ばとくに限定はないが、アジ化ナトリウム、アジ化リチ
ウム等のようなアジ化水素酸塩を用いるとよい。反応温
度は１００〜１８『Ｃ程度であるが、副反応を最少限に
するために、好ましい温度は１３０〜１５０℃である。
反応時間は、反応温度、溶媒によつて異なるが、通常は
１時間ないし２４時間である。上記の式…〕で表わされ
るＺ−スルホニルオキシ化合物のうち、Ｘが水酸基で、
Ｙは水素原子で、Ｒがｐ−トリル基であるものと、Ｘが
アミノ基で、Ｙが水素原子で、Ｒがｐ−トリル基である
ものは公知である。

式Ｉ〕で表わされる化合物は、式（至）（式中ｘおよび
Ｙは前記と同一の意義を有する）で表わされるリボヌク
レオシドをジ一ｎ−ブチル錫オキシドと反応させ、次い
で塩基の存在下スルホニル化剤と反応させることによつ
て得られる。

ここでジ一ｎ−ブチル錫オキシドとの反応について述べ
れば、反応に用いられる溶媒はとくに限定はないが、例
えばメタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ
プロパノールのような脂肪族低級アルコール類が好適で
ある。反応温度はとくに限定はないが、通常、使用する
溶媒の沸点付近で加熱還流するのが好ましく、反応時間
は約１ないし１０時間である。この反応で生成されるＩ
，３′−０−ジブチルスタニレン化合物は一般には単離
することなく、そのまま次のスルホニル化反応に用いる
。すなわち、次のスルホニル化反応は、上記反応液に有
機塩基（たとえばトリエチルアミン、トリメチルアミン
、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、トリアミル
アミンのような第３級アミンまたはピリジンのような異
項環アミン等）を触媒として加え、スルホニル化試剤と
反応させる。スルホニル化試剤としては、メタンスルホ
ニルクロリド、エタンスルホニルクロリド、ｐ−トルエ
ンスルホニルクロリド、ｐ−トルエンスルホニルプロミ
ド、ｐ−ニトロベJャ[ンスルホニルクロリド等のアルキ
ルあるいはアリールスルホニルハライドがあげられるが
、一般にはｐ−トルエンスルホニルクロリドが好ましい
。反応温度は通常は室温付近で行なう。反応時間は主と
して反応温度、反応材料、溶媒等によつて異なるが、通
常は約５分間ないし５時間である。本発明により供され
るアミノヌクレオシド類は新規であり、以下の実施例に
示すように抗がん作用を有する。

実施例 １ 人がん細胞としてＨｅＬａ−Ｓ３細胞を使用した。

ＹＬＥ培地に小牛血清およびペニシリン・ストレプトマ
イシンをそれぞれ１００９／１１および１００ｕ／ｄと
なるように添加することにより測定用培地（ＰＨ７．２
）を調整した。ＨｅＬａ−Ｓ３細胞を測定用培地中で３
７℃で培養する。

培養開始後２４時間目に被５検化合物、すなわち、９−
（２−デオキシ−２−アミノ−β−Ｄ−アラビノフラノ
シル）グアニンまたは９−（２−デオキシ−２−アミノ
−β−Ｄ−アラビノフラノシル）アデニンの燐酸緩衝生
理食塩水←ＰＢＳ）（ＰＨ７．２）溶液を表１に記した
濃度となるように添加してさらに培養を続ける。培養９
６時間目に培地を遠心分離によつて除去する。

得られたＨｅＬａ−Ｓ３細胞にクリスタルバイオレツト
を０．２９／ｌを含む０．１Ｍクエン酸溶液を加えて、
細胞核数を顕微鏡で数える。コントロールとして被検化
合物を含まない燐酸緩衝生理食塩水（ＰＨ７．２）を培
養開始後２４時間目に加え、同様に細胞核数を数える。
被検化合物の場合の細胞核数をコントロールの細胞核数
で除した値に１００を乗じたものをＩ％（阻止％）とし
て算出し、Ｉ％が５０％になるような化合物の濃度をＩ
Ｃ５Ｏ（５０％増殖抑制濃度）として算出する。

結果を表１に示す。

表１から本発明化合物が抗がん活性を有することが明ら
かである。

実験例 ２ 抗ザルコーマ一１８０試験 ザルコーマ一１８０の５Ｘ１０６細胞をＤｄ系マウス１
群５匹の右腋下に皮下移植し、２４時間後に特開昭４９
−１１０８９１号公報実施例１で得られる化合物１００
０ＴＩ１ｆ／Ｋｇ、本発明実施例１記載の化合物５００
ＴＶ／Ｉ＜９を腹腔内に１回投与する。

移植１週間後の、薬剤処理群（Ｔ）と未処理対照群（０
の腫瘍容積の比（Ｔ／Ｃ）をもつて制癌効果を表わす。
以下、本発明を実施例により説明する。

実施例 １ （イ）９−（２−デオキシ−２−アジド−β−Ｄ−アラ
ビノフラノシル）−アデニンの製造法９−（２−デオキ
シ−２−０−トシル一β−Ｄ−リボフラノシル）−アデ
ニン６００ＴＶとアジ化ナトリウム５６０ηをヘキサメ
チルホスホリツクトリアミド６ｍ１中、１３０℃で６時
間加熱する。

溶媒を減圧溜去し、残渣を５０７０水性メタノールに溶
解し、ダウエツクス１Ｘ２（０１０カラム（１００ｍ０
に通塔し、カラムを水洗後、ムの２倍容通塔後、９９％
メタノールで溶出される２６０ｍμでの吸光度５以上の
区分を集め、減圧濃縮後１００％エタノールから再結晶
すると１９０ｍｇの白色結晶が得られる。第１図にこの
化合物の核磁気共鳴スペクトルを示し、第６図に赤外吸
収スペクトルを示す。

これらの物性値より、この化合物は９−（２−デオキシ
−２−アジド−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−アデニ
ンと同定される。収率４５．７％ｏ ］） ９−（２−デオキシ−２−アミノ−β−Ｄ−アラ
ビノフラノシル）−アデニンの製造法９−（２−デオキ
シ−２−アジド−β−Ｄ一アラビノフラノシル）−アデ
ニン１．０９を６７？水性メタノール１５０ｄに溶解し
、１０％パラジウム炭素５００ηを触媒にして水素ガス
を攪拌しながら５時間導入する。

メタノールをほぼ減圧溜去後、熱水１００ｍｊを加えて
、ろ過助剤（セライト５４５）を用いろ過し、ろ液を濃
縮乾固させ、エタノユルから再結して粉末３９０ηを得
る。第２図にこの化合物の核磁気共鳴スペクトルを示し
、第７図に赤外吸収スペクトルを示す。

これらの物性値より、この化合物は９−（２ーデオキシ
−２−アミノ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−アデニ
ンと同定される。収率６８．５ｅ実施例 ２ （イ）９−（２−デオキシ−２−アジド−β−Ｄーアラ
ビノフラノシル）−グアニンの製造法９−（２−デオキ
シ−２−０−トシル一β一Ｄ−リボフラノシル）−グア
ニン３．６９とアジ化ナトリウム３．２９をヘキサメチ
ルホスホリツクトリアミド４５ｄ中１４０℃で７時間加
熱する。

溶媒を減圧溜去し、残渣をエーテル中でよく洗い、さら
によく砕いて洗う。エーテルをろ別後の固形物に２００
ｍ１の３３％水性メタノールを加え、熱時攪拌して、不
溶物を除去後、ろ液を沈殿物が生成しない程度に、一部
減圧溜去する。これをダウエツクス１Ｘ２（０Ｈ）カラ
ム（２００ｄ）に通塔する。カラムを水洗後、５０％お
よび８０７０水性メタノールを順次、カラムの約４倍容
通塔後、０．３Ｍ塩化リチウム溶液で溶出される２６０
ｍμでの吸光度５以上の区分を集め、希塩酸でＰＨ６．
８とした後、３０ｍ１となるまで濃縮して、ダ不ヤイオ
ンＨＰｌＯ樹脂（三菱化成）（３００ｍ１！）に通塔す
る。カラムを水洗後、１０％水性メタノールでカラムの
約２倍容通塔後、２０％水性メタノールで溶出を行なう
。溶出後は４０ｍ１ずつ分画する。第１４〜２１分画部
のものを集め、減圧濃縮すると２２０ηの薄層的に単一
な淡黄色粉末を得る。薄層クロマトグラフイー：Ｒｆ値
０．４６第３図にこの化合物の核磁気共鳴スペクトル
を示し、第８図に赤外吸収スペクトルを示す。これらの
物性値より、この化合物は９−（２−デオキシ−２−ア
ジド−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−グアニンと同定
される。収率１０．８％。］） ９−（２−デオキシ−
２−アミノ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−グアニン
の製造法９−（２−デオキシ−２−アジド−β−Ｄ−ア
ラビノフラノシル）−グアニン１３０７Ｖを３３％水性
メタノール４５ｄに溶解し、１０％パラジウム炭素６０
ｍｇを触媒として加え、攪拌しながら水素ガスを３時間
導入する。

メタノールをほぼ減圧溜去後、熱水５０ｍｊを加えて、
ろ過助剤（セライト５４５）を用いろ過し、ろ液を濃縮
乾固させ、水から再結して白色粉末９０ｍｇを得る。上
記粉末は明確な融点を示さなかつた。第４図にこの化合
物の核磁気共鳴スペクトルを示し、第９図に赤外吸収ス
ペク２トルを示す。

これらの物性値より、この化合物は９−（２−デオキシ
−２−アミノ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−グアニ
ンと固定される。収率７５．６Ｓ考例 １９−（２−デ
オキシ−２−０−トシル一β−Ｄ−リボフラノシル）−
グアニンの製造法グアノシン５．６６９とジ一ｎ−ブチ
ル錫オキシ！５．００９を１．１１のメタノールに懸濁
させ、３与間加熱還流する。

反応液を５℃に冷却後、トリチルアミン４２ｄ＜！１，
Ｐ−トルエンスルホニルクロリド５７．２９を添加し、
室温で４５分間攪拌を行なう。メタノールを減圧溜去後
、残渣に水６００ｍ１を加え、エーテル６００ｍ１で３
度水層を洗滌する。水層およびエーテル層に不溶の沈殿
物と、水層を約３００ｍ１に濃縮後、冷蔵庫に放置し析
出した結晶とを合わせ、８００ｄの８０％水性エタノー
ルに熱時溶解させ、不溶物を除去後、溶媒を６０ｍ１に
減圧濃縮後、０℃に冷却保存して得られる沈殿物をろ取
し、白色結晶４．２９を得る。第５図にこの化合物の核
磁気共鳴スペクトルを示し、第１０図に赤外吸収スペク
トルを示す。これらの物性値より、この化合物は９−（
２−デオキシ−２−０−トシル一β−Ｄ−リボフラノシ
ル）−グアニンと同定される。収率４８．０７００参考
例 ２９−（２−デオキシ−２−０−トシル一β−Ｄ−
リボフラノシル）−アデニンの製造法アデノシン７．０
９とジ一ｎ−ブチル錫オキシド５．０９を５００ｍ１の
メタノールに懸濁させ、３０分間還流下に加熱する。

得られた透明な溶液を５℃に冷却した後、トリエチルア
ミン４２．０７０１＜１５Ｐ−トルエンスルホニルクロ
リド５７．２９を添加し、室温で１０分間攪拌を行なう
。メタノールを減圧溜去後、残渣に水６００ｍ１を加え
、エーテル５００ｍ１で３度水層を洗滌する。水層およ
びエーテル層に不溶の沈殿物と、水層を約３００ｍ１に
濃縮後、冷蔵庫に放置し析出した結晶とを合わせ、３０
０ｄの８０％水性エタノールに熱時溶解させ、不溶物を
除去後、溶媒を３０ｍ１に減圧濃縮後、Ｏ℃に冷却保存
して得られる沈殿物をろ取し、白色結晶６．３９を得る
。第１１図にこの化合物の核磁気共鳴スペクトルを示し
、第１２図に赤外吸収スペクトルを示す。

これらの物性値より、この化合物は９−（２−デオキシ
−２−０−トシル一β−Ｄ−リボフラノシル）−アデニ
ンと同定される。収率５７．０％ｏ

【図面の簡単な説明】

第１図および第６図は９−（２−デオキシ−２−アジド
−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−アデニンの核磁気共
鳴スペクトルおよび赤外吸収スベクトルをそれぞれ表わ
す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式〔 I 〕 ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I 〕（式中、Ｘ
   はアミノ基または水酸基を表わし、Ｙは水素またはアミ
   ノ基を表わす）で表わされる化合物。 ２ 式〔 I 〕において、Ｘがアミノ基でＹが水素であ
   る特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ３ 式〔 I 〕において、Ｘが水酸基でＹがアミノ基で
   ある特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ４ 一般式〔II〕 ▲数式、化学式、表等があります▼〔II〕（式中、Ｘは
   アミノ基または水酸基を表わし、Ｙは水素またはアミノ
   基を表わす）で表わされる化合物を還元することを特徴
   とする式〔 I 〕▲数式、化学式、表等があります▼〔
   I 〕（式中、ＸおよびＹは前記と同一の意義を有する
   ）で表わされる化合物の製法。