JPS59112263A - メラノサイトおよび黒色腫に対する単クロ−ン抗体 - Google Patents
メラノサイトおよび黒色腫に対する単クロ−ン抗体Info
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- JPS59112263A JPS59112263A JP58226686A JP22668683A JPS59112263A JP S59112263 A JPS59112263 A JP S59112263A JP 58226686 A JP58226686 A JP 58226686A JP 22668683 A JP22668683 A JP 22668683A JP S59112263 A JPS59112263 A JP S59112263A
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- antibody
- cells
- cell
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
- C07K16/3053—Skin, nerves, brain
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- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1045—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants
- A61K51/1066—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants the tumor cell being from skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2123/00—Preparations for testing in vivo
-
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- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
は、メラノサイトおよび黒色腫の内部のあるいはそれら
の表面の抗原標識（ａｎｔｉｇｅｎｉｃ ｍａｒｋｅｒ
）に磁北し、分化の段階にしたがって黒色服細胞を分
類する。これらの標識（マーカー； ｍａｒｋｅｒ ）
に基づいてのメラノサイトおよび黒色腫の免疫検定が可
能となった。
の表面の抗原標識（ａｎｔｉｇｅｎｉｃ ｍａｒｋｅｒ
）に磁北し、分化の段階にしたがって黒色服細胞を分
類する。これらの標識（マーカー； ｍａｒｋｅｒ ）
に基づいてのメラノサイトおよび黒色腫の免疫検定が可
能となった。
１９７５年にケーラー（Ｋｔｉｈｌｅｒ ）とミルシュ
タイン（Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎ ）とによって導入された
ハイブリドーマを用いる単クローン抗体の製造に関する
全く新しい革命的な手法により、寸分ちがわずまた再現
性のある特異性をもった抗体をほぼ無限に生産すること
が可能となった。動物を腫瘍細胞あるいは他の抗原によ
り免疫化することにより得られる従来の抗血清は特異性
および性質の相違する無数の抗体を産生ずるが、−・イ
ブリドーマは均一の特性をもつ単一の抗体を産生ずる。
タイン（Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎ ）とによって導入された
ハイブリドーマを用いる単クローン抗体の製造に関する
全く新しい革命的な手法により、寸分ちがわずまた再現
性のある特異性をもった抗体をほぼ無限に生産すること
が可能となった。動物を腫瘍細胞あるいは他の抗原によ
り免疫化することにより得られる従来の抗血清は特異性
および性質の相違する無数の抗体を産生ずるが、−・イ
ブリドーマは均一の特性をもつ単一の抗体を産生ずる。
ケーラー−ミルシュタインの手法は、免疫化した動物か
らの肺細胞と永続骨髄＠細胞系との融合を伴なう。融合
細胞（−・イブリドーマ）から、所望の特異性をもつ抗
体を産生ずるクローンが選択される。−・イブリドーマ
細胞は無限に培養でき、また、液体窒素中に凍結保存で
きるので、抗体を安定して供給することが可能となる。
らの肺細胞と永続骨髄＠細胞系との融合を伴なう。融合
細胞（−・イブリドーマ）から、所望の特異性をもつ抗
体を産生ずるクローンが選択される。−・イブリドーマ
細胞は無限に培養でき、また、液体窒素中に凍結保存で
きるので、抗体を安定して供給することが可能となる。
抗体は、抗原として知られる他の分子と磁北して結合す
る能力を有するプロティンである。
る能力を有するプロティンである。
単クローン抗体は、その特性が非常に均一であること、
および、唯一の抗原あるいは決定基として知られる抗原
のプロティンと磁北することの他は他の抗体と変わると
ころがない。
および、唯一の抗原あるいは決定基として知られる抗原
のプロティンと磁北することの他は他の抗体と変わると
ころがない。
細胞の場合、磁北する決定基は、細胞中のあるいは細胞
上の抗原であり、それは抗体と反応する。特定の抗体が
特定の種類の細胞に磁北する、即ち反応するのは、この
細胞抗原を通してである。このように細胞抗原は細胞を
同定する標識となる。
上の抗原であり、それは抗体と反応する。特定の抗体が
特定の種類の細胞に磁北する、即ち反応するのは、この
細胞抗原を通してである。このように細胞抗原は細胞を
同定する標識となる。
これらの抗原標識は、細胞分化の正常プロセスを観察す
るのに、また、ある細胞系の異常をつきとめるのに用い
られる。分化のプロセスには表面の抗原表現型の変化が
伴ない、適当な抗原が用いられれば、異なる分化系譜に
属する細胞を区別する抗原あるいは同じ分化系譜の異な
る相の細胞を区別する抗原を観察することができる。抗
原のＴＬ、 ’ｒｈｙ−１およびＬｙｔ シリーズ
の記述ならびにマウスのＴ−細胞白血病の表面抗原（５
ｕｒｆａｃｅ ａｎｔｉｇｅｎ ）の分析を通して初め
て分化抗原が認識された。ヒトおよびマウスの正常Ｔ細
胞およびＢ細胞を利用することによりＴ細胞分化抗原の
分析は非常に簡単になり進歩したが、他の種類に属する
正常および新生細胞に示された分化抗原については殆ど
知られていない。これは適当な正常細胞型を容易に得る
のが難しいからである。正常な肌からメラノサイトを培
養する技術が最近発見されたことにより（Ｅｉｓｉｎｇ
ｅｒ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ参照）、メラノサイトの
表面抗原を規定することが可能になった。この方法によ
り、メラノサイト分化抗原の分析のために増殖細胞の補
充源が提供される。同様に、黒色腫に由来する数多（の
細胞系が確立され、これにより黒色腫表面抗原の分析が
容易になった。
るのに、また、ある細胞系の異常をつきとめるのに用い
られる。分化のプロセスには表面の抗原表現型の変化が
伴ない、適当な抗原が用いられれば、異なる分化系譜に
属する細胞を区別する抗原あるいは同じ分化系譜の異な
る相の細胞を区別する抗原を観察することができる。抗
原のＴＬ、 ’ｒｈｙ−１およびＬｙｔ シリーズ
の記述ならびにマウスのＴ−細胞白血病の表面抗原（５
ｕｒｆａｃｅ ａｎｔｉｇｅｎ ）の分析を通して初め
て分化抗原が認識された。ヒトおよびマウスの正常Ｔ細
胞およびＢ細胞を利用することによりＴ細胞分化抗原の
分析は非常に簡単になり進歩したが、他の種類に属する
正常および新生細胞に示された分化抗原については殆ど
知られていない。これは適当な正常細胞型を容易に得る
のが難しいからである。正常な肌からメラノサイトを培
養する技術が最近発見されたことにより（Ｅｉｓｉｎｇ
ｅｒ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ参照）、メラノサイトの
表面抗原を規定することが可能になった。この方法によ
り、メラノサイト分化抗原の分析のために増殖細胞の補
充源が提供される。同様に、黒色腫に由来する数多（の
細胞系が確立され、これにより黒色腫表面抗原の分析が
容易になった。
悪性黒色腫の表面抗原に関しての知見により、ＭＡＲの
出現が非常に加速化された。
出現が非常に加速化された。
本発明の単クローン抗体により、黒色腫とメラノサイト
の細胞標識が同定された。型に分けられた単クローン抗
体のパネルが選択され、これはメラノサイトおよび黒色
腫両方の成熟のそれぞれの段階で分化抗原特性と磁北す
る。これらの分化抗原はメラノサイトおよび黒色腫を分
類するのに用いることができ、また、それらを特徴的な
サブセットにグループ化するのに用いることができる。
の細胞標識が同定された。型に分けられた単クローン抗
体のパネルが選択され、これはメラノサイトおよび黒色
腫両方の成熟のそれぞれの段階で分化抗原特性と磁北す
る。これらの分化抗原はメラノサイトおよび黒色腫を分
類するのに用いることができ、また、それらを特徴的な
サブセットにグループ化するのに用いることができる。
このように、サブセット内のメラノサイトおよび黒色腫
の免疫検定は可能となる。
の免疫検定は可能となる。
本発明の単クローン抗体はケーラー−ミルシュタイン法
により調製され、ここで培養された黒色肺細胞、腎臓癌
細胞またはメラノサイト・グリオマ（ｍｅｌａｈｏｃｙ
ｔｅ ｇｌｉａｍａ ）で免疫化されたマウスからの肺
臓細胞は骨髄腫（ミエローマ）細胞と融合され、ハイブ
リドーマを形成する。これらのハイブリドーマからの抗
体が成熟の種々の段階でのメラノサイトおよび黒色腫細
胞上の分化抗原と磁北することが見い出された。これら
の分化抗原に基づいてメラノサイトおよび黒色腫を分類
するシステムが案出され、上記の標識に単クローン抗体
を用いる分化の種々の段階での黒色腫およびメラノサイ
トについての血清学的検定が開発された。これらの検定
は黒色腫の初期の診断に特に有用である。
により調製され、ここで培養された黒色肺細胞、腎臓癌
細胞またはメラノサイト・グリオマ（ｍｅｌａｈｏｃｙ
ｔｅ ｇｌｉａｍａ ）で免疫化されたマウスからの肺
臓細胞は骨髄腫（ミエローマ）細胞と融合され、ハイブ
リドーマを形成する。これらのハイブリドーマからの抗
体が成熟の種々の段階でのメラノサイトおよび黒色腫細
胞上の分化抗原と磁北することが見い出された。これら
の分化抗原に基づいてメラノサイトおよび黒色腫を分類
するシステムが案出され、上記の標識に単クローン抗体
を用いる分化の種々の段階での黒色腫およびメラノサイ
トについての血清学的検定が開発された。これらの検定
は黒色腫の初期の診断に特に有用である。
本発明の検定は、黒色腫細胞抗原に磁北する抗体、好ま
しくは抗原システムＭ１ないしＭ３４の１またはそれ以
上の抗原に対する単クローン抗体と黒色肺細胞を含む組
織をさせ、ついで、上記単クローン抗体と抗原との抗原
反応を観察することを包含する。本発明の好ましい実施
態様において、接触される組織はＪｌ、−試μであり、
抗原反応は放射線免疫検定法または酵素結合免疫検定（
ＥＬＩＳＡ （エライザ） 、（ｅｎｚｙｍｅ −１１
ｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏａｓ８ａｙ ） 〕により観察さ
れる。本発明の他の実施態様において、検定すべき組織
は先ず切り取られ、ついで新鮮に、または公知の方法に
よりパラフィンに埋め込まれるか冷凍された後に、上記
の単クローン抗体と接触される。この実施態様において
抗体は、酵素のような色形成物質または着色した基、好
ましくはペルオキシダーゼまたはその基質、螢光物質あ
るいは放射性元素が付けられ、これにより抗体の所在が
トレースされる。切り取られた組織の血清学的検定も本
発明の実施態様に含まれる。受動血液凝集、抗体阻害検
定あるいはグリコリビ ト／媒介免疫粘着検定（ｇｌｙ
ｃｏｌｉｐｉｄ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ａ
ｄｈ−ｅｒｅｎｃｅ ａｓｓａｙ）が用いられる。同様
に抗マウス免疫グロブリン検定（ａｎｔｉ−ｎｌｏｎｓ
ｅ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ａｓｓａｙ ）プ
ロティンＡ検定（Ｐｒｏｔｑｉｎ Ａ ａｓｓａｙ ）
が使用できる。
しくは抗原システムＭ１ないしＭ３４の１またはそれ以
上の抗原に対する単クローン抗体と黒色肺細胞を含む組
織をさせ、ついで、上記単クローン抗体と抗原との抗原
反応を観察することを包含する。本発明の好ましい実施
態様において、接触される組織はＪｌ、−試μであり、
抗原反応は放射線免疫検定法または酵素結合免疫検定（
ＥＬＩＳＡ （エライザ） 、（ｅｎｚｙｍｅ −１１
ｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏａｓ８ａｙ ） 〕により観察さ
れる。本発明の他の実施態様において、検定すべき組織
は先ず切り取られ、ついで新鮮に、または公知の方法に
よりパラフィンに埋め込まれるか冷凍された後に、上記
の単クローン抗体と接触される。この実施態様において
抗体は、酵素のような色形成物質または着色した基、好
ましくはペルオキシダーゼまたはその基質、螢光物質あ
るいは放射性元素が付けられ、これにより抗体の所在が
トレースされる。切り取られた組織の血清学的検定も本
発明の実施態様に含まれる。受動血液凝集、抗体阻害検
定あるいはグリコリビ ト／媒介免疫粘着検定（ｇｌｙ
ｃｏｌｉｐｉｄ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ａ
ｄｈ−ｅｒｅｎｃｅ ａｓｓａｙ）が用いられる。同様
に抗マウス免疫グロブリン検定（ａｎｔｉ−ｎｌｏｎｓ
ｅ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ａｓｓａｙ ）プ
ロティンＡ検定（Ｐｒｏｔｑｉｎ Ａ ａｓｓａｙ ）
が使用できる。
本発明の他の好ましい実施態様において、検定すべき組
織は個体の無傷の体またはその全プロティンを含み、抗
体は放射性のあるいは他のエネルギーを生じる元素が付
けられており、体全体あるいはその一部は黒色腫細胞の
位置の放射活性の部位について外部からスキャンされる
。
織は個体の無傷の体またはその全プロティンを含み、抗
体は放射性のあるいは他のエネルギーを生じる元素が付
けられており、体全体あるいはその一部は黒色腫細胞の
位置の放射活性の部位について外部からスキャンされる
。
本発明の方法は、また、患者の黒色腫の治療を含み、こ
こで、黒色腫細胞の細胞抗原、好ましくは細胞分化抗原
に磁北する単クローン抗体が、黒色腫細胞の生長または
増殖を禁止するに効果的な量で患者に投与される。この
方法の好ましい実施態様において、抗体は黒色腫細胞の
破壊を引きおこすポテンシャル組織破壊剤が付けられる
。組織破壊剤の具体例としては、ケモトキシック剤（ｃ
ｈｅｍｏｔｏｘｉｃ ａｇｅｎｔ ）、化学療法剤放射
性核種、毒素、補体活性化因子、凝血活性化因子などが
ある。
こで、黒色腫細胞の細胞抗原、好ましくは細胞分化抗原
に磁北する単クローン抗体が、黒色腫細胞の生長または
増殖を禁止するに効果的な量で患者に投与される。この
方法の好ましい実施態様において、抗体は黒色腫細胞の
破壊を引きおこすポテンシャル組織破壊剤が付けられる
。組織破壊剤の具体例としては、ケモトキシック剤（ｃ
ｈｅｍｏｔｏｘｉｃ ａｇｅｎｔ ）、化学療法剤放射
性核種、毒素、補体活性化因子、凝血活性化因子などが
ある。
不発明の方法は、また、個体の色素細胞の疾病を治療す
る方法を包含し、この方法はメラノサイトのａ胞抗原に
磁北する単クローン抗体を個体に投与することを含む。
る方法を包含し、この方法はメラノサイトのａ胞抗原に
磁北する単クローン抗体を個体に投与することを含む。
母斑あるいは皮膚血管腫は治療される色素細胞疾病の一
例である。
例である。
以下の記載は本発明を具体的に説明することを指図する
ものであり、ここに記載されたノ・イブリドーマ、単ク
ローン抗体、細胞系と実質的に機能的に均等なるものは
勿論のこと、いかなる態様においても本発明を制限する
ものではない。
ものであり、ここに記載されたノ・イブリドーマ、単ク
ローン抗体、細胞系と実質的に機能的に均等なるものは
勿論のこと、いかなる態様においても本発明を制限する
ものではない。
本発明で使用するために選ばれた単クローン抗体は、本
技術分野でよ（知られた融合方法による〔ケーラー（Ｋ
ｏｈｌｅｒ ）参照〕、黒色腫、グリオーマ（ｇｌｉｏ
ｍａ ） 、腎臓癌あるいはメラノサイトによって免疫
化されたマウスの肺細胞に由来する。以降パネルとよば
れる単クローン抗体のグループが選択され、これらがメ
ラノサイトの特定の細胞表面抗原に感能することが見い
出された。このパネルおよび感能する抗原システムを第
１表に示した。鳥。＊ Ｉ＋！ ＊ ＬＨｔ Ｋ５ｗ
工２４およびＲ８で示された単クローン抗体はディボル
ド（Ｄｉｐｐｏｌｄ ）らによって報告されており（Ｐ
ｒｏｃ。
技術分野でよ（知られた融合方法による〔ケーラー（Ｋ
ｏｈｌｅｒ ）参照〕、黒色腫、グリオーマ（ｇｌｉｏ
ｍａ ） 、腎臓癌あるいはメラノサイトによって免疫
化されたマウスの肺細胞に由来する。以降パネルとよば
れる単クローン抗体のグループが選択され、これらがメ
ラノサイトの特定の細胞表面抗原に感能することが見い
出された。このパネルおよび感能する抗原システムを第
１表に示した。鳥。＊ Ｉ＋！ ＊ ＬＨｔ Ｋ５ｗ
工２４およびＲ８で示された単クローン抗体はディボル
ド（Ｄｉｐｐｏｌｄ ）らによって報告されており（Ｐ
ｒｏｃ。
Ｎａｔ′ｌ、 Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、 Ｕ、 Ｓ、 Ａ
、、 ７７６１１４（１９８０））（米国出願！３０７
，０６０）、ｖ２およびＳ６で示された単クロン抗体は
ウエダ（Ｕｅｄａ）うによって報告され（Ｐｒｏｄ、
Ｎａｔ’ｌ、 Ａｃａｄ、 Ｓｅｔ、 Ｕ、Ｓ、入。
、、 ７７６１１４（１９８０））（米国出願！３０７
，０６０）、ｖ２およびＳ６で示された単クロン抗体は
ウエダ（Ｕｅｄａ）うによって報告され（Ｐｒｏｄ、
Ｎａｔ’ｌ、 Ａｃａｄ、 Ｓｅｔ、 Ｕ、Ｓ、入。
７８．５１２２（１９８１）（米国出願Ａ ４１３．８
６１）、また、抗体Ｍｅｌ−１はホートン（Ｒｏｕｇｈ
ｔｔ＋ｎ ） らによって報告されている（ Ｐｒ
ｏｄ、 Ｎａｔ’１．Ａｃａｄ。
６１）、また、抗体Ｍｅｌ−１はホートン（Ｒｏｕｇｈ
ｔｔ＋ｎ ） らによって報告されている（ Ｐｒ
ｏｄ、 Ｎａｔ’１．Ａｃａｄ。
Ｓｅｔ、 Ｕ、 Ｓ、 Ａ、、 ７７、４２６０． （
１９８０））。
１９８０））。
以下余白
類別化された抗体のこのパネルにより検出されたメラノ
サイト抗原（標識）は以下の（１）〜（４）の４つのカ
テゴリーにグループ化される。
サイト抗原（標識）は以下の（１）〜（４）の４つのカ
テゴリーにグループ化される。
（１）新しく生まれたメラノサイト（Ｈｅｗｂｏｒｎｍ
ｅｌａｎｏｃｘｔｅ ）または成長したメラノサイト（
ａｄｕｌｔｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ ）に検出されなかっ
たが、黒色腫のサブセットによって示されたもの： Ｅ
（ＬＡ−ＤＲ。
ｅｌａｎｏｃｘｔｅ ）または成長したメラノサイト（
ａｄｕｌｔｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ ）に検出されなかっ
たが、黒色腫のサブセットによって示されたもの： Ｅ
（ＬＡ−ＤＲ。
Ｍ−１、Ｍ−３゜
（２）新しく生まれたメラノサイトには検出されたが、
成長したメラノサイトには検出されなかつプこもの二Ｍ
−４〜Ｍ−８゜ （３）成長したメラノサイトには検出されたが、はとん
どの新しく生まれたメラノサイトには弱くしかまたは全
く検出されなかったもの；Ｍ−９、Ｍ−１０゜ （４）新しく生まれたメラノサイトおよび成長したメラ
ノサイトに同等に検出されたもの二Ｍ−１１〜Ｍ−３４
゜ 第１表に示されるように、同じ分子の異なりたエピトー
プ（ｅｐｉｔｏｐｅ ）あるいは同じエビ）−プを同定
するとして知られる単クローン抗体は同じ抗原系にグル
ープ化される。Ｍ−１９抗原は４つのマウスの単クロー
ン抗体によって検出された９５ｋｄグリコプロテインで
あり、Ｍ −２０は５つの異なったマウスの単クローン
抗体によって検出された１３０ｋｄグリコプロテインを
示し、Ｍ−２３は２つの抗体によって検出された１４５
ｋｄと１００ｋｄの２つのグリコプロティンダイマーで
ある。
成長したメラノサイトには検出されなかつプこもの二Ｍ
−４〜Ｍ−８゜ （３）成長したメラノサイトには検出されたが、はとん
どの新しく生まれたメラノサイトには弱くしかまたは全
く検出されなかったもの；Ｍ−９、Ｍ−１０゜ （４）新しく生まれたメラノサイトおよび成長したメラ
ノサイトに同等に検出されたもの二Ｍ−１１〜Ｍ−３４
゜ 第１表に示されるように、同じ分子の異なりたエピトー
プ（ｅｐｉｔｏｐｅ ）あるいは同じエビ）−プを同定
するとして知られる単クローン抗体は同じ抗原系にグル
ープ化される。Ｍ−１９抗原は４つのマウスの単クロー
ン抗体によって検出された９５ｋｄグリコプロテインで
あり、Ｍ −２０は５つの異なったマウスの単クローン
抗体によって検出された１３０ｋｄグリコプロテインを
示し、Ｍ−２３は２つの抗体によって検出された１４５
ｋｄと１００ｋｄの２つのグリコプロティンダイマーで
ある。
第３表は細胞表面抗原に関し新しく生まれたおよび成長
したメラノサイトの血清学的類別を示す。
したメラノサイトの血清学的類別を示す。
血清学的分類は、たとえば上記のデボルドら（Ｄｉｐｐ
ｏｌｄ、Ｗ、Ｇ、 ｅｔ ａｌ、 ５ｕｐｒａ （１９
８０） ）やプフロイントシュー、 Ｍ （Ｐｆｒｅ
ｕｎｄａｃｈｕｈ、Ｍ、）ら（Ｐｒｏｃ。
ｏｌｄ、Ｗ、Ｇ、 ｅｔ ａｌ、 ５ｕｐｒａ （１９
８０） ）やプフロイントシュー、 Ｍ （Ｐｆｒｅ
ｕｎｄａｃｈｕｈ、Ｍ、）ら（Ｐｒｏｃ。
Ｎａｔ’ｌ、Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、Ｕ、 Ｓ、 Ａ、、
７５．５１２２（１９８０））によって記述された従
来方法によって、抗マウス免疫グロブリン（ａｎｔｉ
−Ｉｇ ）検定やプロティアＡ（ＡＰ）検定によりなさ
れた。好ましい手法において、′指示細胞（１ｎｄｉｃ
ａｔｏｒ ｃｅｌｌ ）は０．１係塩化クロムを用いて
抗マウス免疫グロブリンあるいはプロティンＡをヒト赤
血球に結合することにより調製される。検定はファルコ
ン３０４０マイクロテスト■プレート（Ｆａｌｃｏｎ
３０４０Ｍ１ｃｒｏｔｅｓｔ ｌ ｐｌａｔｅ ）で行
なわれた。血清バターゲット細胞と共に１時間インキュ
ベートされた。
７５．５１２２（１９８０））によって記述された従
来方法によって、抗マウス免疫グロブリン（ａｎｔｉ
−Ｉｇ ）検定やプロティアＡ（ＡＰ）検定によりなさ
れた。好ましい手法において、′指示細胞（１ｎｄｉｃ
ａｔｏｒ ｃｅｌｌ ）は０．１係塩化クロムを用いて
抗マウス免疫グロブリンあるいはプロティンＡをヒト赤
血球に結合することにより調製される。検定はファルコ
ン３０４０マイクロテスト■プレート（Ｆａｌｃｏｎ
３０４０Ｍ１ｃｒｏｔｅｓｔ ｌ ｐｌａｔｅ ）で行
なわれた。血清バターゲット細胞と共に１時間インキュ
ベートされた。
プレートを洗い、光学顕微鏡によりロゼツテイング（ｒ
ｏｓｅｔｔｉｎｇ ）を評価した。力価は５０係のポジ
ティブ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ ）ターゲット細胞を与える
血清希釈（ｓｅｒｕｍ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ）に対応し
た。吸収テストはＫｉｐｐｏｌｄ （前述）およびＰｆ
ｒｅｕｎｄｓｃｈｕｈ （前述）の方法により行なわれ
た。腫瘍をもっているマウス、クローン化したノ・イブ
リドーマを接種したヌーヌーマウス（ｎｕ ｎｕ ｍｏ
ｕｓｅ ） （スイヌ原産）からの血清を血清学的分
析に用いた。
ｏｓｅｔｔｉｎｇ ）を評価した。力価は５０係のポジ
ティブ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ ）ターゲット細胞を与える
血清希釈（ｓｅｒｕｍ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ）に対応し
た。吸収テストはＫｉｐｐｏｌｄ （前述）およびＰｆ
ｒｅｕｎｄｓｃｈｕｈ （前述）の方法により行なわれ
た。腫瘍をもっているマウス、クローン化したノ・イブ
リドーマを接種したヌーヌーマウス（ｎｕ ｎｕ ｍｏ
ｕｓｅ ） （スイヌ原産）からの血清を血清学的分
析に用いた。
これらの血清は黒色腫あるいはメラノサイト培養に〉１
０−’、’通常≧１０−５の最大フィルターを有してい
た。ｂ−２低分子グロブリンに対する従来のウサギ抗血
清およびマウス単クローン抗体はＡｃｃｕｒａｔｅ Ｃ
ｈ６ｍｉｃａｌ ａｒｉｄ ５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃ
ａｒｐ。
０−’、’通常≧１０−５の最大フィルターを有してい
た。ｂ−２低分子グロブリンに対する従来のウサギ抗血
清およびマウス単クローン抗体はＡｃｃｕｒａｔｅ Ｃ
ｈ６ｍｉｃａｌ ａｒｉｄ ５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃ
ａｒｐ。
（ｌ［（ｉｃｋａｖｉｌｌ Ｎ、 Ｙ、、 Ｕ Ｓ Ａ
）から購入できる。
）から購入できる。
ＡＢＥ（血液グループ抗原ならびに腎臓癌、肺癌および
卵巣癌の一連の分化抗原を検出する２５の他の単クロー
ン抗体は、これらの選別テストに包含される。これら１
ｖＩＡｂに関しては、新しく生まれたあるいは成長した
メラノサイトと何ら反応しなかったので、パネルから除
外した。
卵巣癌の一連の分化抗原を検出する２５の他の単クロー
ン抗体は、これらの選別テストに包含される。これら１
ｖＩＡｂに関しては、新しく生まれたあるいは成長した
メラノサイトと何ら反応しなかったので、パネルから除
外した。
第１表に示されたグループ化された抗体のパネルは、黒
色腫表面抗原を同定するのに用いられた。第２表は培養
された黒色細胞系に関し、パネルの各々の活性度および
力価を示す。
色腫表面抗原を同定するのに用いられた。第２表は培養
された黒色細胞系に関し、パネルの各々の活性度および
力価を示す。
以下余白
第１表に挙げられた抗体は一般に、黒色腫細胞系のある
部分とのみ反応し、それゆえ、抗原表現型に基ずいて、
黒色腫を区別しうるサブセットに分けられることが判る
。Ｍ−２５のような抗原は殆どの黒色腫細胞系により表
わされ（２３／ ２６系）、Ｍ−４、Ｍ −６の抗原は
細胞系の約半分に検出され、Ｍ−１０抗原は３３の黒色
Ｉｉ系のわずか５つに見られる。ＭＥ（Ｃプロダクト（
ｐｒｏｄｕｃｔ ）に関し、ｈＬｈ−ＤＲ表現は２１の
細胞系の中１３に見られる。ＨＬＡ −Ａ。
部分とのみ反応し、それゆえ、抗原表現型に基ずいて、
黒色腫を区別しうるサブセットに分けられることが判る
。Ｍ−２５のような抗原は殆どの黒色腫細胞系により表
わされ（２３／ ２６系）、Ｍ−４、Ｍ −６の抗原は
細胞系の約半分に検出され、Ｍ−１０抗原は３３の黒色
Ｉｉ系のわずか５つに見られる。ＭＥ（Ｃプロダクト（
ｐｒｏｄｕｃｔ ）に関し、ｈＬｈ−ＤＲ表現は２１の
細胞系の中１３に見られる。ＨＬＡ −Ａ。
Ｂ、 Ｃおよびｂ−２低分子グロブリンに対する抗体は
殆どすべての黒色腫細胞系と反応し、２つの細胞系、す
なわちＳＫ−ＭＥＬ−１９およびＳＫ−ＭＥＬ−３３と
反応しない。吸収テストによりこれらの抗原はＳＫ−Ｍ
ＥＬ−１９上に検出され、ＳＫ−ＭＥＬ−３３に検出さ
れない。
殆どすべての黒色腫細胞系と反応し、２つの細胞系、す
なわちＳＫ−ＭＥＬ−１９およびＳＫ−ＭＥＬ−３３と
反応しない。吸収テストによりこれらの抗原はＳＫ−Ｍ
ＥＬ−１９上に検出され、ＳＫ−ＭＥＬ−３３に検出さ
れない。
このように、同定された標識（ｍａｒｋｅｒ ）は、
黒色腫を分類し、評価する新しい手法を提供する。たと
えば、黒色腫初期の、中間のおよび後期の分化抗原の表
現を基にして、３つの一般クラス０１つに分類される。
黒色腫を分類し、評価する新しい手法を提供する。たと
えば、黒色腫初期の、中間のおよび後期の分化抗原の表
現を基にして、３つの一般クラス０１つに分類される。
培養された黒色腫系の表面抗原表現型と他の分化特性、
たとえば形態学、着色、チロシナーゼ活性とは明らかな
相関がある。初期の標識を示すが中期および後期の標識
を欠く黒色腫は、上皮形態をもち、着色ヲ欠キ、チロシ
ナーゼが低レベルである。対称的に、Ｍ−９、Ｍ−１０
のように後期標識を示す黒色腫は、紡錘体形あるいは多
樹枝体（ｐｏｌ−ｄｅｎｒｉｔｉｃ ） 形態をもち
、着色し、高レベルのチロシナーゼを有する。中期のク
ラスの黒色腫は、中期のメラノサイト標識をもつことに
より区別され、これらは紡錘型形態をもち、わずかにし
。
たとえば形態学、着色、チロシナーゼ活性とは明らかな
相関がある。初期の標識を示すが中期および後期の標識
を欠く黒色腫は、上皮形態をもち、着色ヲ欠キ、チロシ
ナーゼが低レベルである。対称的に、Ｍ−９、Ｍ−１０
のように後期標識を示す黒色腫は、紡錘体形あるいは多
樹枝体（ｐｏｌ−ｄｅｎｒｉｔｉｃ ） 形態をもち
、着色し、高レベルのチロシナーゼを有する。中期のク
ラスの黒色腫は、中期のメラノサイト標識をもつことに
より区別され、これらは紡錘型形態をもち、わずかにし
。
か着色せず、チロシナーゼは低レベルである。
チロシナーゼ活性はボマランツ（Ｐｏｍｅｒａｎｔｚ
）によって記載された検定法の改良法により測定される
（ Ｐｏｍｅｒａｎｔｚ、 Ｓ、 Ｈ，、Ｊ、Ｂｉｏｌ
、Ｃｈｅｍ、２４１゜１６Ｂ１９６６））。〔３Ｈ〕チ
ロシン（特異活性５３、 Ｉ Ｃｉ ／ ｍ Ｍｏｌ
） はニューイングランド・ニュークリア（Ｎｅｗ’
Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ ）から購入できる
。テストすべき細胞系は２５ｃｒ／ｌの７ァルコンフラ
スコ内でフラスコ当たりｌＸ１０６細胞の密度でまかれ
る。１２時間後、培地は除かれ、培地中に５．ｕｃｉの
〔３Ｈ〕チロシンを含む新鮮な培地４ ｒｎ！で置き換
えられ、活性炭で吸着されて除かれ、ダウエックス５０
ｗカラム（ＤｏＷｅｘ５０ ｃｏｌｕｍｎ ）を通
される。溶離剤中の三重水素化されたＨ２０（チロシナ
ーゼ活性により生じル）はＬ Ｓ ９０００ ベラマ
ン・シンチレーション・カウンター（ＬＳ ９０００
ＢｅｃｋｍａｎＳｃｉ−ｎｔｉｌ、１ａｔｉｏｎ
Ｃｏｕ ｎｔｅｒ ）中で３回カウントされる。
）によって記載された検定法の改良法により測定される
（ Ｐｏｍｅｒａｎｔｚ、 Ｓ、 Ｈ，、Ｊ、Ｂｉｏｌ
、Ｃｈｅｍ、２４１゜１６Ｂ１９６６））。〔３Ｈ〕チ
ロシン（特異活性５３、 Ｉ Ｃｉ ／ ｍ Ｍｏｌ
） はニューイングランド・ニュークリア（Ｎｅｗ’
Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ ）から購入できる
。テストすべき細胞系は２５ｃｒ／ｌの７ァルコンフラ
スコ内でフラスコ当たりｌＸ１０６細胞の密度でまかれ
る。１２時間後、培地は除かれ、培地中に５．ｕｃｉの
〔３Ｈ〕チロシンを含む新鮮な培地４ ｒｎ！で置き換
えられ、活性炭で吸着されて除かれ、ダウエックス５０
ｗカラム（ＤｏＷｅｘ５０ ｃｏｌｕｍｎ ）を通
される。溶離剤中の三重水素化されたＨ２０（チロシナ
ーゼ活性により生じル）はＬ Ｓ ９０００ ベラマ
ン・シンチレーション・カウンター（ＬＳ ９０００
ＢｅｃｋｍａｎＳｃｉ−ｎｔｉｌ、１ａｔｉｏｎ
Ｃｏｕ ｎｔｅｒ ）中で３回カウントされる。
チロシナーゼ活性は、黒色腫細胞系によって生じた三重
水素化されたＨ８０／コントロールの非着色腎臓癌細胞
系（ＳＫ−Ｒｅ−７）によって生じた三重水素化された
Ｅ（、Ｏの比で表わされる。
水素化されたＨ８０／コントロールの非着色腎臓癌細胞
系（ＳＫ−Ｒｅ−７）によって生じた三重水素化された
Ｅ（、Ｏの比で表わされる。
２４の黒色肺細胞系は、Ｍ−２、Ｍ−３、ｔ（ＬＡ−Ｄ
Ｒ，Ｍ −４、Ｍ−６、Ｍ−９およびＭ−１０抗原の表
現に関し、分類される。これら抗原が黒色腫のサブセッ
トを規定し、発生の（ｆｅｔａｌ ）／新しく生まれた
および成長したメラノサイトの表現の特異なパターンを
有することから、これら７つの抗原が選択された。３つ
の抗原、すなわちｆ（ＬＡ−ＤＲ，Ｍ −２およびＭ−
３はメラノサイトの初期の標識であると考えられる。抗
原Ｍ−４およびＭ−６は発生のおよび新しく生まれたメ
ラノサイトに見られるが成長したメラノサイトには見ら
れず、それゆえメラノサイトの分化の中期相のシグナル
である。Ｍ−９およびＭ−１０はメラノサイトの系譜の
後期の標識である。というのは、それらは発生のまたは
新しく生まれたメラノサイトに比較して、成長したメラ
ノサイトに強く示されるからである。第４表は、抗−Ｉ
ｇ 検定により、これらｆ（ＬＡ−ＤＲ，Ｍ −４お
よびＭ−１０細胞表面に関し、黒色腫およびメラノサイ
トの血清学的類型化を示す。
Ｒ，Ｍ −４、Ｍ−６、Ｍ−９およびＭ−１０抗原の表
現に関し、分類される。これら抗原が黒色腫のサブセッ
トを規定し、発生の（ｆｅｔａｌ ）／新しく生まれた
および成長したメラノサイトの表現の特異なパターンを
有することから、これら７つの抗原が選択された。３つ
の抗原、すなわちｆ（ＬＡ−ＤＲ，Ｍ −２およびＭ−
３はメラノサイトの初期の標識であると考えられる。抗
原Ｍ−４およびＭ−６は発生のおよび新しく生まれたメ
ラノサイトに見られるが成長したメラノサイトには見ら
れず、それゆえメラノサイトの分化の中期相のシグナル
である。Ｍ−９およびＭ−１０はメラノサイトの系譜の
後期の標識である。というのは、それらは発生のまたは
新しく生まれたメラノサイトに比較して、成長したメラ
ノサイトに強く示されるからである。第４表は、抗−Ｉ
ｇ 検定により、これらｆ（ＬＡ−ＤＲ，Ｍ −４お
よびＭ−１０細胞表面に関し、黒色腫およびメラノサイ
トの血清学的類型化を示す。
要約すると、２５の黒色腫系の表面表現型は、メラノサ
イト分化の初期、中期および後期の相に対応すると考え
られる。５つの黒色腫が初期の標識であり、１０個が中
期の標識であり、 ｉ。
イト分化の初期、中期および後期の相に対応すると考え
られる。５つの黒色腫が初期の標識であり、１０個が中
期の標識であり、 ｉ。
個が後期の標識である（第４表）。これらの相違が著し
いことは、表面抗原のパターンを、着色性、形態学、チ
ロシナーゼなどの他の分化特性と比較してみれば明らか
である。初期の抗原標識を示す黒色腫の殆どは上皮様で
、これらの黒色腫は着色性およびチロシナーゼ活性を欠
く。
いことは、表面抗原のパターンを、着色性、形態学、チ
ロシナーゼなどの他の分化特性と比較してみれば明らか
である。初期の抗原標識を示す黒色腫の殆どは上皮様で
、これらの黒色腫は着色性およびチロシナーゼ活性を欠
く。
後期のメラノサイト標識を示す黒色腫はしばしば多相枝
状形態で、成長したメラノサイトに似ており、重い着色
と高レベルのチロシナーゼ活性を有する。
状形態で、成長したメラノサイトに似ており、重い着色
と高レベルのチロシナーゼ活性を有する。
第３表は黒色肺細胞表面抗原に関する、新しく生まれた
および成長したメラノサイトの血清学的類型化を示す。
および成長したメラノサイトの血清学的類型化を示す。
第３表において、各々の印は個体についてのテストを示
し、特定の抗原に関する個々のテストは、異なる個体か
らのメラノサイトに関しなされた。マウスの単クローン
抗体についてのテストの場合、◎は抗体力価１．１４
〜１．１０ を示し、○は１：５００〜１ 二５０００
を示し、Δは１：２５０を示す。Ｍ−１４抗原を検出す
るとヒト類型血清に関するテストの場合、◎は力価１：
５００〜１ ： １０４を示し、○は１：１０〜１：２
５０を示シ、Δは反応せず（１：１０）を示す。
し、特定の抗原に関する個々のテストは、異なる個体か
らのメラノサイトに関しなされた。マウスの単クローン
抗体についてのテストの場合、◎は抗体力価１．１４
〜１．１０ を示し、○は１：５００〜１ 二５０００
を示し、Δは１：２５０を示す。Ｍ−１４抗原を検出す
るとヒト類型血清に関するテストの場合、◎は力価１：
５００〜１ ： １０４を示し、○は１：１０〜１：２
５０を示シ、Δは反応せず（１：１０）を示す。
以下余白
第４表はメラノサイト分化標識に関し２５の黒色腫細胞
系の血清学的類鳳を示す。表中、◎は黒色腫細胞系によ
る抗原表現を示し、これはマウス単クローン抗体に関し
１：５００〜に１０７の力価で決定し、Ｍ−１０抗原を
検出するヒト血清の場合ｌ：１０〜１ ： １０５で決
定した。
系の血清学的類鳳を示す。表中、◎は黒色腫細胞系によ
る抗原表現を示し、これはマウス単クローン抗体に関し
１：５００〜に１０７の力価で決定し、Ｍ−１０抗原を
検出するヒト血清の場合ｌ：１０〜１ ： １０５で決
定した。
形態学においてＥは上皮様を、Ｓは紡錘形をＤは多相枝
状を示す。着色は、細胞ペレット中の茶あるいは黒色素
の強度にエリ目視夕刊定した。
状を示す。着色は、細胞ペレット中の茶あるいは黒色素
の強度にエリ目視夕刊定した。
チロシナーゼ活性は黒色腫培養により生じた三重水素化
Ｈ２０／非看色Ｉオ臓帰培養（標準）の比で示した。
Ｈ２０／非看色Ｉオ臓帰培養（標準）の比で示した。
以下余白
３８５−
本明細書の記載には、また、以下の治療方法についての
発明も包含される。
発明も包含される。
（１）黒色腫の細胞抗原に感能する単クローン抗体を、
抗−黒色腫有効量で患者に投与することを特徴とする黒
色腫の治療方法。
抗−黒色腫有効量で患者に投与することを特徴とする黒
色腫の治療方法。
（２）前記単クローン抗体が有効な粗織破壊剤について
いる（１）に記載の治療方法。
いる（１）に記載の治療方法。
（３） メラノサイトの細胞抗原に感能する単クロー
ン抗体を個体に投与することを特徴とする色素細胞の疾
病の治療方法。
ン抗体を個体に投与することを特徴とする色素細胞の疾
病の治療方法。
（４） 前記疾病が母斑である（３）の治療方法。
特許出願人 スローンーケツタリング インステイテユ
ート第１頁の続き ＣＩ２ Ｒ１／９１ ） （ル発 明 者 ジエイ・グレゴリ−・カイルンクロス カナダ国オンタリオ・ロンドン ・シアーウッド・アヴエニュ２２ ９番 ・老発 明 者 マグダレヌ・エイジンガーアメリカ合
衆国ニュー・シャー シー・デマレスト・チン・テラ ス３０番地 ｆ７２）発 明 者 アラン・エヌ・ホートンアメリカ
合衆国ニュー・ヨーク ・ニュー・ヨーク・イースト６３ ストリート４５０番地 ０発 明 者 ロイド・オールド アメリカ合衆国ニュー・ヨーク ・ニュー・ヨーク・ウェスト・ エンド・アヴエニュ６００番地
ート第１頁の続き ＣＩ２ Ｒ１／９１ ） （ル発 明 者 ジエイ・グレゴリ−・カイルンクロス カナダ国オンタリオ・ロンドン ・シアーウッド・アヴエニュ２２ ９番 ・老発 明 者 マグダレヌ・エイジンガーアメリカ合
衆国ニュー・シャー シー・デマレスト・チン・テラ ス３０番地 ｆ７２）発 明 者 アラン・エヌ・ホートンアメリカ
合衆国ニュー・ヨーク ・ニュー・ヨーク・イースト６３ ストリート４５０番地 ０発 明 者 ロイド・オールド アメリカ合衆国ニュー・ヨーク ・ニュー・ヨーク・ウェスト・ エンド・アヴエニュ６００番地
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 メラノサイトの細胞抗原に感能することを特徴と
する単クローン抗体。 ２、 前記細胞抗原が分化抗原である特許請求の範囲第
１項記載の単クローン抗体。 ３、 メラノサイトの細胞抗原に感能する単クローン抗
体を生産することを特徴とする抗体生産ハイブリドーマ
細胞系。 ４、 骨髄腫由来の細胞株と、培養されたヒト・メラノ
サイトにより免疫化された非霊長動物に由来する牌細胞
とを融合することにより形成されたことを特徴とする抗
体生産ハイブリドーマ細胞系。 ５、 骨髄腫由来の細胞株と、培養−されたヒト・メラ
ノサイトで免疫化された非霊長類由来の牌細胞とを融合
することを特徴とする抗体生産ハイブリドーマ細胞系の
形成方法。 ６、前記細胞標識がＭｌｔ Ｍ２Ｆ ＭＢ２ Ｍ４１
Ｍ５Ｆ Ｍ６／ Ｍ７Ｆ ＭｓｔＭ９’ Ｍｌｏ”１１
”１２”１３’ Ｍ１４” １５”１６” １７’ Ｍ
１８’’１９”２０”２１”２２”２３”２４”２５’
Ｍ２Ｒ”２７”２８’Ｍ２９Ｆ Ｍ３０’ Ｍ３１７
Ｍ３２Ｆ Ｍ３３ＦまたはＭ３４抗原系である特許請
求の範囲第１項記載の単クローン抗体。 ７、 ヒト黒色肺細胞の細胞抗原に感能する単クローン
抗体。 ８、 前記細胞抗原が分化抗原である特許請求の範囲第
７項に記載の単クローン抗体。 ９、 前記細胞標識がＭ１１Ｍ２１Ｍ３１Ｍ４Ｆ Ｍｓ
ｒＭ６１Ｍ７／ Ｍ ｓ〆Ｍ９”１０”１１’ Ｍ１２
”１３”１４”１５”１６”１７”１８’Ｍ１９”２０
”２１・Ｍ２２”２３・Ｍ２４”’２５・Ｍ２Ｒ”２７
”２８’Ｍ２９”３０・ＭＢ２・Ｍ３２”３３・または
Ｍ３４抗原系である特許請求の範囲第７項記載の単クロ
ーン抗体。 １０、 ヒト黒色膝組・胞の細胞抗に感能する単クロ
ーン抗体を生産することを特徴とする抗体生産ハイブリ
ドーマ細胞系。 １１、 骨髄肺由来の細胞株と、ヒト黒色腫細胞系で
免疫化された非霊長類動物に由来する肺細胞とを融合し
て形成されたことを特徴とする抗体生産−・イブリドー
マ細胞系。 １２、 前記肺細胞がヒト黒色腫細胞系ＤＸ−２，Ｓ
Ｋ−ＭＥＬ−１９，ＳＫ−ＭＥＬ−３３，ＳＫ−ＭＥＬ
−９３またはＳＫ−Ｍｌ−３１で免疫化されたマウスま
たはラットに由来したものである特許請求の範囲第１１
項記載の抗体生産ノ・イブリドーマ細胞系、１３、骨髄
腫由来の細胞株と、ヒト黒色腺樹立細胞系で免疫した非
霊長類動物に由来する肺細胞とを融合することを特徴と
する抗体生産ノ・イブリドーマ細胞系の形成方法。 １４、 前記肺細胞がヒト黒色肺樹立細胞系ＳＫ−Ｍ
ＥＬ−９３−ＤＸ−２，ＳＫ−ＭＥＬ−１９またはＳＫ
−ＭＥＬ−３１で免疫化されたマウスまたはラットに由
来したものである特許請求の範囲第１３碑に記載の方法
。 −１５，メラノサイト抗原についての種々の表現型化さ
れた単クローン抗体を含むパネルに対しての、メラノサ
イト細胞の反応を決定することを特徴とするメラノサイ
ト細胞の表現型化方法。 １６、 メラノサイト抗原についての種々の表現型化
された単クローン抗体を含む、パネルに対しての、メラ
ノサイト細胞の反応を決定することを特徴とする黒色肺
細胞の表現型化方法。 １７、 メラノサイト抗原系Ｍ１〜Ｍ３４ に感能す
る単クローン抗体を含むことを特徴とする抗体を表現型
化するパネル。 １８、 Ｍ３４細胞表面抗原系の検定を含むことを特
徴とする、黒色腫細胞とメラノサイトの識別方法。 １９、 前記検定が単クローン抗体Ｓ６を用いる免疫
検定である特許請求の範囲第１８項記載の方法。 ２０、 細胞分化抗原の検定を含むことを特徴とする
、黒色腫細胞の成熟度の段階の決定方法。 ２１、 Ｍｌ、 Ｍ２またはＭ３抗原系に感能する単
クローン抗体を用いて細胞抗原を免疫検定することを含
む、未熟の黒色腫細胞を検出するための特許請求の範囲
第２０項に記載の方法。 ２２、Ｍ４９Ｍ５９Ｍ６１Ｍ７９Ｍ８ 抗原系に感能す
る単クローン抗体を用いて細胞抗原のパネルを免疫検定
することを含む発生のまたは新しく生まれた黒色腫細胞
を検出するための特許請求の範囲第２０項に記載の方法
。 ２３、 Ｍ９またはＭＩＯ抗原系に感能する抗体を用
いて細胞表面抗原を免疫検定することを含む、成長した
黒色肺細胞を検出するための特許請求の範囲第２０項に
記載の方法。 ２４、抗原反応に適した条件下で、哺乳動物の組織と黒
色肺細胞抗原に対する抗体とを接触し、この抗原反応を
観察することを特徴とする、哺乳動物中の黒色腫細胞の
検定法。 ２５、前記抗体が単クローン抗体である特許請求の範囲
第２４項に記載の検定法。 ２６、 前記細胞抗原が分化抗原である特許請求の範
囲第２４項に記載の検定法。 ２７、 前記細胞抗ｉ １ｔ’Ｌ 抗Ｍ 系Ｍ１”ｚ
’ Ｍ３’ Ｍ４”ｓ’ Ｍ６’Ｍ７”８”９ ”１０
”１１”１２”１３”１４”１５’ Ｍ１６’Ｍ１７”
１８”１９”２０’ Ｍ２１”２２’ Ｍ２３”２４’
Ｍ２５’ Ｍ２６’Ｍ２７・Ｍ２Ｓ・Ｍ２９’ Ｍ２
Ｏ・Ｍ３１・・Ｍ３２・Ｍ３３・またはＭ３４に属する
特許請求の範囲第２４項に記載の検定法０ ２８、血清学的検定を含む特許請求の範囲第２４項に記
載の検定法。 ２９、 前記組織が哺乳動物からの血液試料である特
許請求の範囲第２４項に記載の検定法。 ３０、 前記検定法が放射線免疫検定法である特許請
求の範囲第２９項に記載の検定法。 ３１、 前記検定法が酵素結合免疫検定である特許請
求の範囲第２９項に記載の検定法。 ３２、前記組織が哺乳動物から切り取られた試料である
特許請求の範囲第２４項に記載の検定法。 ３３、 前記切り取られた試料が、色形成基、螢光基
または放射活性基のついた抗体と接触される特許請求の
範囲第３２項に記載の検定法°。 ３４、 前記色形成基がペルオキシダーゼまたは基質
である特許請求の範囲第３３項に記載の検定法。 ３５、 前記組織が検定の間前記哺乳動物の体中に残
っており、前記抗体が前記哺乳動物に投与され、前記抗
体に放射性元素がついており、また、前記抗原反応が局
在化した放射線活性を外部からスキャニングすることに
より観察される特許請求の範囲第２４項に記載の検定法
。 ３６、神経外胚葉起始（ｎｅｕｒｏｅｃｔｏｄｅｒｍａ
ｌ ｏｒｉｇｉｎ ）の細胞の分化抗原に磁北する単ク
ローン抗体を生産するための培養メラノサイトの使用。 ３７、 前記細胞がメラノサイト、黒色腫または色素
細胞である特許請求の範囲第３６項に記載の使用。 ３８、黒色腫細胞の分化抗原に対する抗血清。 ３９、 メラノサイトの分化抗原に対する抗血清。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US44556182A | 1982-11-30 | 1982-11-30 | |
| US445561 | 1982-11-30 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59112263A true JPS59112263A (ja) | 1984-06-28 |
Family
ID=23769398
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58226686A Pending JPS59112263A (ja) | 1982-11-30 | 1983-11-30 | メラノサイトおよび黒色腫に対する単クロ−ン抗体 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0110716A3 (ja) |
| JP (1) | JPS59112263A (ja) |
| CA (1) | CA1254846A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6012973A (ja) * | 1983-03-11 | 1985-01-23 | スロ−ン−ケツタリング・インステイテユ−ト・フオ−・キヤンサ−・リサ−チ | 悪性黒色腫のある患者のリンパ球からのヒトの単一クロ−ン抗体 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009028968A1 (en) * | 2007-08-28 | 2009-03-05 | Auckland Uniservices Limited | Cell marker of melanocyte cell lineage and uses thereof |
| AU2016263198C1 (en) | 2015-05-15 | 2023-10-05 | The General Hospital Corporation | Antagonistic anti-tumor necrosis factor receptor superfamily antibodies |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS54143513A (en) * | 1978-04-28 | 1979-11-08 | Wistar Inst | Production of antibody for malignant tumor |
| JPS5982317A (ja) * | 1982-11-02 | 1984-05-12 | Katsu Taniguchi | モノクロ−ナル抗メラノ−マ抗体 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4507391A (en) * | 1982-04-02 | 1985-03-26 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Method for detecting the presence of GD3 ganglioside |
| DE3228233A1 (de) * | 1982-07-28 | 1984-02-02 | Wolfgang Dr. 6500 Mainz Dippold | Verwendung des antikoerpers r-24 und verfahren zur inhibierung des zellwachstums von melanomzellen |
| JPS5990052A (ja) * | 1982-11-16 | 1984-05-24 | Katsu Taniguchi | モノクロ−ナル特異抗体を用いたメラノ−マ診断薬 |
| US4693966A (en) * | 1983-03-11 | 1987-09-15 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Human monoclonal antibodies from lymphocytes of patients with malignant melanoma |
| EP0143367A3 (en) * | 1983-11-30 | 1987-11-25 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Method for production of monoclonal antibodies for cancer diagnosis and therapy |
-
1983
- 1983-11-29 CA CA000442159A patent/CA1254846A/en not_active Expired
- 1983-11-30 JP JP58226686A patent/JPS59112263A/ja active Pending
- 1983-11-30 EP EP83307297A patent/EP0110716A3/en not_active Withdrawn
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS54143513A (en) * | 1978-04-28 | 1979-11-08 | Wistar Inst | Production of antibody for malignant tumor |
| JPS5982317A (ja) * | 1982-11-02 | 1984-05-12 | Katsu Taniguchi | モノクロ−ナル抗メラノ−マ抗体 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6012973A (ja) * | 1983-03-11 | 1985-01-23 | スロ−ン−ケツタリング・インステイテユ−ト・フオ−・キヤンサ−・リサ−チ | 悪性黒色腫のある患者のリンパ球からのヒトの単一クロ−ン抗体 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0110716A3 (en) | 1986-05-14 |
| EP0110716A2 (en) | 1984-06-13 |
| CA1254846A (en) | 1989-05-30 |
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