JPS5859952A - 新規合成基質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は下記一般式　　　ＣＩ） （ただし、式中Ｘｌ　　は結合基、または置換基を有し
てもよいアルキレン基、Ｘ２　　はフェニル基、置換フ
ェニル基、低級アルキル基、−Ｃ０ＯＨ，−５ｏ３Ｈ１
または低級アルキルチオ基よりなる置換基を示す）で表
わされる化合物、またはその塩に関する。

さらに詳しくは、本発明は 下記一般式　　　（ＩＩ） Ｒ８゜ （ただし、式中Ｘ１　　は結合基、まだは、　ＣＨ３ま
たは−ＯＨ基よりなる置換基を有してもよａ低級アルキ
レフ基、Ｒｏは水素、　ＣＨ３、−０ＣＨ３、ＣＩ、−
Ｎ０２、−ＯＨまたは−ＣＯＯＨ基、Ｒ２は水素、−〇
ＣＨ３または−ＯＨ基を示す）で表わされる化合物、ま
たはその塩および 下記一般式　　　（ＩＩＩ） （ただし、Ｘｌ　　はＸ３　　と結合してアルキル基を
示し、または、Ｘｌ　　は結合基または低級アルキレン
基、Ｘ３　　は−〇〇〇Ｈ，−８ｏ３Ｈ，または低級ア
ルキルチオ基を示す）で表わされる化合物またはその塩
に関するものである。

本発明の化合物は、ロイシンアミノベプチダーＷ　（Ｔ
ｒｕｅ　ＬＡＰともいう）やアリルアミダーゼ（Ｃｌ　
１ｎｉｃａｌ　　Ｌ　Ａ　Ｐともいう、以下時としてＡ
Ａと称する）などのアミノペプチダーゼ（以下、Ｔｒｕ
ｅＬＡＰとＣ１１ｎｉｃａｌ　　ＬＡＰを併せて単にＬ
ＡＰと称する）の活性測定用基質として有用な新規化合
物である。

ＬＡＰは生体内のあらゆる組織に広く分布し、血清中に
も存在するもので、また病的条件によって増加すること
が知られている。ＬＡＰ活性の測定は、種々の病変の診
断および予後の観察に必要な臨床検査の対象となってお
り、その臨床化学的分析値としてＧ−Ｒ単位（Ｇｏｌｄ
ｂａｒｇ　Ｒｕｔｅｎｂｕｒｇ　）を使用し、Ｇ−ＦＬ
単位＝　２，７２　ｘ　ＬＡ　Ｐ国際単位（ｍＵ、／　
ｍｌ　）としティる〔Ｃａｎｃｅｒ、　１１．２８３（
１９５８））。

ＬＡＰ活性の測定法としては種々知られているがいずれ
も一長一短があり、現在、一般に用いられている測定法
としては、Ｌ−ロイシンとアミン化合物よりなる合成基
質を用いてＬＡＰの酵素作用に、より生成されるアミン
化合物の比色定量法である。この比色定量法において、
合成基質を用いる場合には、その合成基質としてｌ−＝
インルーｐ−ニトロアニリドを用い、ＬＡＰの酵素作用
で生成するｐ−ニトロアニリンの黄色を比色している。

しかしこの比色定量に当っては、その合成基質と生成し
たｐ−ニトロアニリンは比色の際に測定波長がオーバー
ラツプする欠点があり、また血清成分、特にビリルビン
系色素による測定への影響も免れることができないなど
という欠点があった。さらにＬ−ロイシル−β−ナフチ
ルアミドを基質として用いる場合には、生成するβ−ナ
フチルアミンに、５−ニトロ？−２−アミノメトキシベ
ンゼンジアゾテートなどをカップリングさせて色素を形
成させるか、または生成するβ−プフチルアミンを亜硝
酸ナトリウムでジアゾ化し、Ｎ−（１、ナフチル）−エ
チレンジアミンにカップリングさせるか、もしくはｐ−
ジメチル−アミノベンズアルデヒドまたＦｉｐ−ジメチ
ルアミノグイ皮アルデヒドを縮合させＣ色素を形成せし
め、次いでこれを比色定量する方法がとられている。し
かしこれらの比色定量法は、反応過程が複雑で、かつ厳
密な操作を必要とするために、検査法としてはなお不便
なものであった。また標準物質として使用されるβ°−
ナフチルアミンは、毒性が著しく、特に近年膀胱の腫瘍
および癌を発生することが明らかと々す、発癌物質とし
てその使用に特に厳密な注意を要するものであった。そ
の他、酵素を用いるＬＡＰ活性の測定法としては、その
基質としてＬ−ロイシナミド（Ｌ　−Ｌｅｕｃｉｎａｍ
ｉｄｅ　）を用い、ＬＡＰにより生成したアンモニアを
、α−ケトグルタル酸、グルタミン酸脱水素酵素および
還元型ニコチンアデニンジヌクレオグド（ＮＡＤＨ２）
と反応せしめてグルタミン酸に変化せしめ、この際に反
応系のＮＡＤＨ２の減少を分光学的に追跡する方法が知
られている。またＬ−ロイシル−Ｌ−アラニンを基質と
して用いた場合には、ＬＡＰの作用により生じたＬ−ア
ラニ／に、α−クトグルタル酸および、グルタミン酸−
ビルピンｆｆ−トランスアミナーゼを用いて反応せしめ
、ピルビン酸を生成させ、このピルビン酸を乳酸脱水素
酵素を用いて乳酸に変化せしめ、その際に消費されるＮ
ＡＤＨ２を分光学的に追跡する方法も知られている。さ
らにＬ−ロイシン脱水素酵素を用いる測定法も知られて
いる。即ち、Ｌ−ロイシル−グリシンなどの基質を用い
て、ＬＡＰにより生成したＬ−ロイシンを、Ｌ−ロイシ
ン脱水素酵素を用いて反応させ、その際に変化するＮＡ
ＤＨ２を分光学的に測定してなる方法である。（特開昭
５４−１１９２９０号）。また、Ｌ−ロイシナミドを基
質として用い、生成するＬ−ロイシンをＬ−、アミノ酸
酸化酵素を用いて反応させ、反応系に生ずる過薫化水素
を比色定量してなる測定法も知られている〔ファルマシ
ア、１４．８７２（１９７８）〕。

しかしながら、これらの酵素を用いる測定法は、反応系
が複雑であり、かつ比色による測定法であるがために、
血清中のビリルビン系色素などや乳濁血清などによる白
濁の影響も大きく、そのために必ずブランクを取らねば
ならない。特にＬ−アミノ酸酸化酵素を用いる測定法に
おいては、ＬＡＰによって生成するＬ−ロイシンの量に
比べて相当量のＬ−アミノ哨が血清中に存在している上
に、この血清中のＬ−アミノ酸含量も栄養剤や食事等の
摂取により著しく変化しているために、ＬＡＰを用いた
Ｌ−ロイシンの定量には血清中の多量のＬ−アミノ酸の
影響が著しく強く現われ、ＬＡＰよりのｌ−ロイシンの
定量が著しく困難である、等の欠点があった。

本発明者らは、かかる欠点を有する従来のＬＡＰ活性の
測定法を改善すべく鋭意研究した結果、全く意外にも、
血清中に存在しない置換メチルアミン化合物またはＤ−
アミノ酸化合物をＬ−ロイシンｙｃ結合せしめて得られ
る合成基質はＬＡＰにより定量的に分解されて著しく良
好に置換メチルアミン化合物、例えばチラミンなどや、
Ｄ−アミノ酸を生成せしめ得ることを知った。さらにこ
の合成基質にＬＡＰを作用せしめて生成する置換メチル
アミン化合物またはＤ−アミ／酸化合物に、対応する酸
化酵素を作用させ、次いで反応によって消費される酸素
または生成される過酸化水素の量を測定し、ＬＡＰ活性
の測定を行うことにｒす、従来の如き複雑な方法を行う
ことのない簡便かつ良好な再現性を示すＬＡＰ活性の新
規な測定法を見い出した。またそれに有用な新規な合成
基質である下記式 で表わされるＮ−Ｌ−ロイシルーチラミ／を見い出した
（特願昭５５−４６０８５号参照）。

またさらに本発明者らは下記式 （ただし、式中Ｒは低級アルキル基、特にメチルおよび
イソブチル基を示す）で表わされる化合物が、ＬＡＰの
作用により良好にチラミンを遊離、生成せしめ、この生
成するチラミンを、対応する酸化酵素にて酸化せしめ、
次いで反応に１って消費される酸素または生成される過
酸化水素の量を測定してＬＡＰ活性の測定を行うことが
できることを見い出した（特願昭５５−１７１２６８　
）。

さらに本発明者らは種々研究した結果、下記式（ただし
、式中Ｘ１　　およびＸ２　　は前記と同じ意味を示す
。）で表わされる化合物、またはその塩で表わされる新
規なＮ−Ｌ−口イシル−置換メチルアミド化合物が、Ｌ
ＡＰの作用により良好に置換メチルアミン化合物を遊離
、生成せしめ、この生成する置換メチルアミン化合物に
、対応する酸化酵素を作用せしめ、次いで反応によって
消費される酸素または生成される過酸化水素の量を測定
することによってＬＡＰ活性の測定を行うことができる
ことを見い出した。

本発明は、上記の知見に基いて完成されたもので、下記
一般式ＣＩ） （ただし、式中Ｘｌ　　およびＸ２　　は前記と同じ意
味を示す。）で表わされる化合物、またはその塩に関す
るもので、ＬＡＰ活性の測定に有用な新規化合物である
。

本発明の化合物を製造するに当っては、ペプチド合成の
だめの常法・手段に従って、 Ｌ−ロイシンと、 Ｘ２−Ｘｌ−ＣＨ２−ＮＨ，で表わされる置換メチルア
ミン化合物の縮合反応により行われる。

反応に際しては、必要に応じて官能基が保護される。保
護基としては、ペプチド合成反応において汎用される通
常の保護基をあげることができる。

例えば、Ｌ−ロイシンのα−アミン基を、通常の保護基
、例えばｔ−ブトキシカルボニル、ｔ−アミルオキシカ
ルボニル、アダマンチルオキシカルボニル、ベンジルオ
キシカルボニル、０−ニトロフェニルチオ、ニトロ置換
ベンジルオキシカルボニル基などにて保護すればよい。

ついでそのカルボキシル基は、例えば酸アジド、酸無水
物、酸イミダゾリドまたは活性エステル、例えばシアン
メチルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、２，４
−ジニトロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシン
イミドエステル、Ｎ−ヒドロキシフタル酸イミドエステ
ルなどに変換することによって、あるいはカルボジイミ
ド、Ｎ、Ｎ′−カルボニル−ジイミダゾールまたはイン
オキサシリウム塩、例えばウッドワード反応剤などを使
用して反応せしめて活性化せしめる。さらにこの活性化
した化合物と置換メチルアミン化合物とを反応せしめる
。置換メチルアミン化合物の具体例として、フェネチル
アミン、フェニルプロピルアミン、ｐ−メチルフェネチ
ルアミン、ｐ−メトキシフェネチルアミン、ｐ−クロロ
フェネチルアミン、ｐ−ニトロフェネチルアミン、３．
４−ジメトキシフェネチルアミン、ドーパミン、ｐ−ニ
トロベンジルアミン、β−メチルフェネチルアミン、β
−ヒドゴキシフエネチルアミン、ｐ−カルボキシフェネ
チルアミン、ベンジルアミン、３−メチル−４−ヒドロ
キシヘンシルアミン、オクトハミン、インアシルアミン
、ｎ−ヘキシルアミン、Ｅ−アミノカプロン酸、エチル
アミン、ｎ−ブチルアミン、ｎ−オクチルアミン、ｎ−
デシルアミン、ラウリルアミン、３−メチル−チオ−プ
ロピルアミン、２−エチル−ｙオクチルアミンカどがあ
げられる。

好ましい縮合反応手段としては、上述したようにカルボ
ジイミド法、アジド法、活性エステル法や酸無水物法で
ある。また反応に当っては不活性溶媒、例えばジメチル
ホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホ
キサイド、テトラヒドロフランなどの溶媒中にＬ−ロイ
シンと置換、メチルアミン化合物の両者はぼ等モル量を
溶解し、約−３０°Ｃ〜室温中にて攪拌すればよい。一
般に反応は３０分〜５０時間で完了する。反応後、α−
アミノ基の保護基を脱離せしめる。脱離反応は好ましく
はｔ７−ブトキシカルボニル基の場合では２Ｎ−ＨＣＩ
の酢酸溶液やトリフルオロ酢酸を用いて、またはベンジ
ルオキシカルボニル基の場合ではパラジウム−炭素を用
いる接触還元手段またはＨＢｒの酢酸溶液を用いて行わ
れる。目的物は分離手段、例えば抽出、洗浄、クロマト
操作、結晶化など操作により得ることができる。さらに
目的物は、塩形成に適する酸、例えば塩酸、臭化水素酸
、リン酸などの無機酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シ
ュウ酸などの有機酸と反応させることによって相当する
塩を形成することができる。

このようにして得られた本発明の目的物たるＮ−Ｌ−口
イシル−アミド化合物またはそれらの塩などの一般式〔
Ｉ〕で表わされる化合物またはその塩は、ＬＡＰ活性の
測定のだめの合成基質として用いられるものである。例
えばそのＬＡＰ活性測定の一例をあげればこの合成基質
に、ＬＡＰ含有被検液を作用せしめ、その酵素活性によ
り生成される置換メチルアミン化合物を、対応するその
酸化酵素、例えばアミンオキシダーゼ、好ましくは豚や
牛血清またはアスペルギルス・ニガー々どより得られた
酵素やサルシナ・ルテア・ＩＡＭ１０９９より得られた
酵素（Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ。

Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍｎ、　、　２７．８５０　（１９６
７）、Ｍｅｔｈｏｄｓｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、　
１７．７２２（１９７１））や市販のアミンオキシダー
ゼを用いて反応せしめ、反応によって消費される酸素ま
たは生成される過酸化水素の量を測定する方法をあげる
ことができる。

測定反応に使用される酸化酵素は固定化酵素として使用
してもよい。この場合には、自動分析装置へ組み込んで
測定を行うことが可能となり、酸素電極や過酸化水素電
極にて測定を行うことにより、有用かつ高価な酵素の使
用を著しく少量ならしめることができるため特に有効で
ある。さらに酵素電極たる固定化酵素と上記電極とを組
み合わせたセンサーとして用いることにより、迅速に、
しかも種々の試薬も必要とせず、さらに繰り返し測定に
利用でき、さらにまた有色物質を含むＬＡＰ活性測定用
試料にも適用できるために極めて有効な測定方法とする
ことができる。またこの固定化酵素は、公知の種々の固
定化手段により調製できる。

例えば、アクリルアミドで包括固定化する方法、アルブ
ミンなどゐ蛋白質と共に混合した後、蛋白質同士を架橋
して固定化する方法、コラーゲンやフィブロインなどに
包括するか、またはこれを共有結合せしめて固定化する
方法、多孔性有機高分子樹脂に吸着または共有結合にて
固定化する方法、光硬化性樹脂を用いて包括固定化する
方法なとり種々の包括、吸着、結合等の手段が用いられ
る。

このようにして調製された固定化酵素は酵素電極用の形
として使用に好ましい膜状繊維状物、粒状またはチュー
ブ状として加工使用される。・つぎに、ＬＡＰ活性測定
を行う場合の例を以下に述べる。まず本発明の合成基質
の一定濃度溶液を調製し、これと、ＬＡＰ活性測定用被
検液、例えば血清、および緩衝液を加えて反応せしめる
。

反応にあたっては通常３７℃近辺にて行えばよく、反応
時間としてはＬＡＰにより合成基質から置換メチルアミ
ン化合物が生成される時間であれば特に限定されるもの
ではない。次いで反応後、生じた置換メチルアミン化・
合物を対応する酸化酵素によシ酸化せしめる。その際反
応終了液と対応する酸化酵素が反応し、それによって酸
素が消費され、また過酸化水素が生成されればよい。通
常対応する酸化酵素の溶液を添加して反応せしめるか、
または対応する酸化酵素の固定化酵素に接触せしめて反
応を進行せしめればよい。反応は通常８７℃近辺にて行
なわれる。反応後、消費される酸素または生成される過
酸化水素の量を測定するのであるが、好ましくは酸素電
極または過酸化水素電極にて測定すればよい。この測定
は上記固定化酵素と電極とを組み合せてなる酵素電極を
使用することによってより簡便に行なわれる。さらにこ
れらの電極によって測定された値は電気的変化として、
必要に応じて記録するか表示し、ＬＡＰ活性値として換
算すればよい。また上記過酸化水素の量の測定に当って
は、４−アミノアンチピリン、フェノール、パーオキシ
ダーゼを含有する呈色試薬やルミ°ノー°ルなどの発光
試薬を用いて定量してもよく、適量公知の種々の過酸化
水素の定量手段を用いることができる。

またＬＡＰ活性測定のだめの系としては、例えば、ＬＡ
Ｐ活性測定用試料、合成基質溶液、反応媒体たる緩衝液
の注入口を、合成基質より置換メチルアミン化合物を生
成せしめるためのＬＡＰ反応槽に導き、さらに反応によ
って生成した置換メチルアミン化合物に対応する酸化酵
素を作用せしめ、酸素または過酸化水素の量を検出する
ことより反応−検出槽を有する測定系をあげることがで
きる。また好ましくは、そＯ反応−検出槽において、対
応する酸化酵素の固定化酵素カラム部と検出のための電
極部とに分離してもよい。さらに、または電極部の検知
部にその固定化酵素を具備した酵素電極部として一体化
せしめたものであってもよい。さらに、ＬＡＰ反応槽と
反応−検出槽とは対の系に限定されるものではなく、例
えば複数のＬＡＰ反応槽よりサンプリング装置にて順次
反応−検出槽に測定サンプルを注入し、順次検出、洗浄
を繰り返すことよりて′なる２以上のＬＡＰ反応槽と反
応−検出槽を有する測定系であってもよい。

本明細書中の記載の略記号は、次の意味を有するもので
ある。

ＢｏＣｓｔ−ブトキシカルボニル基 ＨＯ８ｕ：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドＨｏＢｔ：１
−ヒドロキシベンゾトリアゾールＯ８ｕ：Ｎ−ヒドロ上
シスクシ／イミドエステルＤＣＣ，：　Ｎ、Ｎ’−ジシ
クロへキシルカルボジイミドＴＨＦ：テトラヒドロフラ
ン ＤＣＵ：　Ｎ、Ｎ’−ジシクロへキシルウレアｎ−Ｂｕ
ＯＨ：ｎ−ブチルアルコール ＢｔＯＨ：エチルアルコール ＡｃＯＨ：酢酸 ＤＭＦニジメチルホルムアミド ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン Ｚ：ペンジルオキシカルボニル基 さらに赤外線吸収スペクトルの測定において、シロップ
状物は食塩板に塗布した後に測定に供し、また他のもの
は通常のＫＢｒ法に基いて測定に供して行なった。

次に、本発明の実施例を挙げて具体的に述べるが、本発
明はこれらによって何んら限定されるものではない、。

実−施例（１）　Ｎ　−Ｌ−ロイシル−フェネチルアミ
ド（ＨＬｅ　ｕ　ＮＨＣＨ２ＣＨ２−０）Ｚ　−Ｌ　−
ｏイシン（４，’１２？、１７．８ｍＭ）をＴ　Ｉ−（
Ｆ（２０ｍｌ）に溶解させて、Ｎ−ヒドロキシベンゾト
リアゾール（２゜６４２．１９．５ｍＭ）、フェネチル
−アミ７　（２，４５ｍ１．１９．５ｍＭ）を加えて０
℃でＤＣＣ（４，ＯＢ？、１９．５ｍ、／りのＴＨＦ（
２０ｍｌ）溶液を滴下した。

室温にて一夜攪拌して、析出したＤＣＵを炉去し、涙液
を減圧にて濃縮して、酢酸エチル（５０ｍ１）に溶解し
た。飽和炭酸水素す）　ＩＪウム溶液（２０ｍｌ　）　
テ２回、飽和食塩水（２０ｍｌ　）　、冷ＩＮ−ＨＣＩ
（２０ｍｌ　）　テ２回、飽和食塩水（２０＋＋＋ｌ’
）で２回夫々洗浄し、無水Ｍｇ５Ｏ，で乾燥した。酢酸
エチルを留去し残渣に２５％ＨＢｒの酢酸溶液（１０ｍ
／’）を加えて室温で１時間攪拌した。８０℃以下で減
圧留去し、油状の残渣に水（２０ｍｌ　）を加え不溶物
をのぞいて冷４Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを約１１に調節した
。クロロホルム（８０ｍ／）で８回抽出して抽出液を合
わせ、飽和食塩水で洗浄し無水Ｍｇ８０４で乾燥した。

クロロホルムを留去して油状のＮ−Ｌ−ロイシン−フェ
ネチルアミドを得た。

収率　：　２．５Ｏｆ　（６０チ） 〔α）２２＝−２，９（Ｃ＝１．０、ＥｔＯＨ）Ｒｆ　
　＝０．６８（ｎ−ＢｕｏＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝４：
１：１）（シリカゲル−薄層クロマトグラフィー）実ｍ
　例（２）Ｎ−Ｌ−ロイシルーフェニルグロピルアミド
（ＨＬｅｕ　−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２４）ＢｏＣ−Ｌ
ｅｕ−ＯＨ（４，６ＬＰ、２０ｍＭ）、フェニルプロピ
ルアミ７　（２，７Ｏｆ、２０ｍＭ）をＴＨＦ（５０ｒ
ｎｌ　）に溶解し、−５〜０℃でＤＣＣ（４，１８？。

２０ｍＭ）ＯＴＨＦ　（１００ｍ／）溶液を滴下した。

反応混合物を一夜室温で攪拌し、析出したＤＣＵを炉去
する。涙液を３０℃以下で減圧濃縮して酢酸エチル（８
００ｍ１）に溶解する。飽和Ｎａ　ＨＣＯｓ、飽和食塩
水、ｌＮ−ＨＣｌ、飽和食塩水（各５０ｍ１りで３回洗
浄を繰シ返し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥する。

酢酸エチルを濃縮して残渣をシリカゲルクロマトグラフ
ィ（溶媒系：クロロホルム：酢酸エチル＝１：１）によ
り精製した。得られたＢｏＣ−Ｌｅｕ　−ＮＨＣＨ，Ｃ
Ｈ２ＣＨ２−０（８，４８ｆ、１０ｍＭ）に室温にて２
Ｎ−ＨＣＩの酢酸溶液２０　ｍｌを加え１時間攪拌し３
０℃以下で酢酸を留去した。残渣に水（１０ｍｌ　）を
加えて不溶物をのぞき冷４Ｎ−ＮａＯＨでｐＨ約１１と
した。クロロホルム（５０ｍｊ！Ｘ８）で３回抽出して
飽和食塩水（５０ｍＪ）で２回洗浄、無水ＭｇＳＯ４で
乾燥した。

クロロホルムヲ留去シてＮ−Ｌ−ロイシル−フェニルプ
ロピルアミドを得た。

収率　：　１．５１ｙ　　（６１，０ＬＩＩ）シロップ
状〔α）”＝＋４．６　　（Ｃ＝１．０．ＥｔＯＨ）Ｒ
ｆ　　＝０．５５　　（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ＋Ｈ２
０＝４：１：１）実施例（３）Ｎ−Ｌ−口イシル−Ｐ−
メチルフェネチルアミド（Ｈ−Ｌｅｕ−ＮＨＣＨ２ＣＨ
２−◇ｘＣＨｓ）ＢｏＣ−Ｌｅ　ｕ−ＯＨ（４，６８ｆ
ｌ、　２０ｍＭ）、ｐ−メチルフェネチルアミド（２，
７Ｏｆ、２０ｍＭ）、を’ｒＨＦ（５０ｍ）に溶解させ
て一５℃でＤＣＣ（４，１３ｆ、２０ｍＭ）のＴＨＦ（
１００ｍｌ）溶液を滴下した。

反応混合物を一夜室温で攪拌し、析出したＤＣＵを戸去
する。Ｆ液を３０℃以下で減圧濃縮して酢酸エチル（８
００ｍＪ）に溶解する。飽和Ｎａ　ＨＣＯ３、飽和食塩
水、ＩＮ−ＭＣＩ、飽昭食塩水（各５０　ｍｔ　）で３
回洗浄を繰り返し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥する。

酢酸エチルを濃縮して残渣をシリカゲルクロマトグラフ
ィ（溶媒系：クロロホルム：酢酸エチル＝１：１）によ
り精製した。得られたＢｏＣ−Ｌｅｕ−Ｎｌ（ＣＨ２Ｃ
Ｈ２−（）−ＣＨｓ　　（８，４８ｆ、１０ｍＭ）に室
温にて２Ｎ−ＨＣＩの酢酸溶液（２０ｍｌ）を加えて１
時間攪拌した。３０℃以下で酢酸を減圧留去し、残渣に
水（１０ｍｌ）を加えて不溶物を除去し、冷４Ｎ−ＨＣ
ＩでｐＨを約１１に調節した。クロロホルム（５０ｍｌ
　）で３回抽水して飽和食塩水（５０ｍｌ　）で２回洗
浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。

クロロホルムを留去してＮ−Ｌ−ロイシル−Ｐ−メチル
フェネチルアミドを得た。

収率　：　１．６８ｆ　　（６５，６チ）融点　：　４
８−５０°Ｃ 〔α）２２＝５．５　　（Ｃ＝１．０．ＥｔＯＨ）’Ｆ
Ｌｆ　　　＝０．５４　　（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：
Ｈ２０＝４：１：１）元素分析値（Ｃ，５Ｈ２４Ｎ２０
（２４８，３７０）として〕Ｃチ　　　　　Ｉ４チ　　
　　　Ｎチ 測定値　：　　７２．６０　　９．８５　　１１．００
計算値　：　　７２，５４　　９．７４　　１１．２８
実施例（４）Ｎ−Ｌ−口イシル−ｐ−メトキンフェネチ
ルアミド（Ｈ−Ｌｅｕ　−ＮＩ（ＣＨ２ＣＨ２−◇ＸＯ
ＣＨ３）Ｂｏ　Ｃ−Ｌｅ　ｕ−ＯＨ（４，６３ｆｌ、、
　２０ｍＭ）、ｐ−メトキシフェネチルアミン（８，８
８ｆ、２０ｍＭ）をＴ　Ｉ−ＴＦ（５０ｍｇ）に溶解し
て一５〜０℃でＤＣＣ（４，１３？、２０ｍＭ）のＴＨ
Ｆ（１００ｍ１！ｌ）溶液を滴下した。

反応混合物を一夜室温で攪拌し、析出したＤＣＵを涙去
する。ろ液を３０℃以下で減圧濃縮して酢酸エチル（８
００ｍ／りに溶解する。飽和ＮａＨＣＯ３、飽和食塩水
、ＩＮ−ＭＣＩ、飽和食塩水（各５０ｍ１）で３回洗浄
を繰り返し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥する。

酢酸エチルを濃縮して残渣をシリカゲルクロマトグラフ
ィ（溶媒系：クロロホルム：酢酸エチル＝１＝１）によ
り精製した。得られた油状のＢｏＣ−Ｌｅｕ−ＮＨＣＨ
２Ｃ口２−（Ｄ←ＯＣＨ３に室温で２．Ｎ　−ＨＣｌの
酢酸溶液（２０ｍｌ　）を加えて１時間攪拌した。３０
℃以下で酢酸を減圧留去し、残渣に水（１０ｍｌ）を加
えて不溶物を除去し、冷４Ｎ−ＨＣＩでｐＨを約１１に
調節した。クロロホルム（５０ｍｌ　）で８回抽水して
飽和食塩水（５０ｍｌ　）で２回洗浄し、無水ＭｇＳＯ
４で乾燥した。

クロロホルムを留去してＮ−、−Ｌ−：イシ＞−ｐ−メ
トキシフェネチルアミドを得た。

収率　：３゜Ｏ（１５６゜７％ 融点　：５１−５２°Ｇ 〔α）２２　：ｌ：　　２゜４　　　（Ｃ＝１．０．Ｅ
ｔＯＨ）Ｒｆ　　　＝　０．５１　（ｎ−ＢｕＯＨ：Ａ
ｃＯＨ：Ｈ２０＝４：１：１）元素分析値（Ｃｌ５Ｈ２
４０□（２６４，８７０としゼ〕Ｃチ　　　Ｈチ　　Ｎ
チ 測定値　　６８，７９　　９．６８　　１０．６６計算
値　　６８．１’５　　９．１５　　１０．６０実ｔｔ
ｆｎ　例（５）　Ｎ−Ｌ−ロイシル−ｐ−クロロフェネ
チルアミド（Ｈ−Ｌｅｕ−ＮＨＱ（２Ｇ（２−０ＸＣ’
）ＢｏＣ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６３Ｓ’、２０ｍＭ）、
ｐ−クロロフェネチルアミｙ　（８，ＩＩｆ、２０ｍＭ
）をＴＨＦ（５０ｍｌ　）に溶解し一５″〜０℃でＤＣ
Ｃ（４，１８？、２０ｍＭ）（７）ＴＨＦ　（１００ｍ
１）溶液を滴下した。

Ｎ応混合物を一夜室温で攪拌し、析出したＤＣＵを涙去
する。ろ液を３０℃以下で減圧濃縮して酢酸エチル（３
００ｍｌ）に溶解する。飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯ３、飽和食
塩水、ｌＮ−ＨＣｌ、飽和食塩水（各５０　ｍｌ　）で
３回洗浄を繰り返し、無水ＭｇＳＯ４で乾燐する。

酢酸エチルを濃縮して残渣をシリカゲルクロマトグラフ
ィ（溶媒系：クロロホルム：酢酸エチル＝１：１）によ
シ精製した。得られたＢｏＣ−Ｌｅｕ−ｐ−クロロフェ
ネチルアミン（８，６９９，１０ｍＭ）に室温で２Ｎ−
ＨＣＩの酢酸溶液（２０ｍｌ）を加え１時間攪拌した。

８０℃以下で酢酸を減圧留去し、残渣に水（１ｏｍｌ）
を加えて不溶物を除去し、冷４Ｎ−ＭＣＩでｐＨを約１
１に調節した。クロロホルム（５０ａｔ　）で３回抽水
して飽和食塩水（５０ｍＡ’）で２回洗浄し、無水Ｍｇ
ＳＯ４で乾燥した。

クロロホルムヲ留去シてＮ−Ｌ−口イシル−〇−クロロ
フェネチルアミドを得た。

収率　：　１．６８ｆ　　（６２，８チ）融点　：４１
−４８°Ｃ 〔α虜＝Ｊ、９　　（Ｃ＝ｔ、Ｏ，ＥｔＯＨ）Ｒｆ　　
　＝０．５６（ｎ−ＢｕＯＨ：Ａｃ０）１：Ｈ２０＝４
：１：１）元素分析値（Ｃ１４Ｈ２１Ｎ２０ＣＩ・−Ｈ
，Ｏとして〕８ Ｃチ　　　Ｈチ　　　８％　　　Ｃ１チ測定値　６２，
５６　８゜１６　９，７４　１３．１０計算値　６２．
８８　７．８９　１０．８８　１８．１４実施例（６）
Ｎ−Ｌ−ロイシル−ｐ−ニトロフェネチルアミド（Ｈ−
Ｌｅｕ　−ＮＨＣ）Ｔ２　ＣＨ２−＠→ｏ２）ＢｏＣ−
Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６８ｆ、２０ｍＭ）ｐ−二）。

フェネチルアミン塩酸塩（５，１２９，２０ｍＭ）をＴ
）（Ｆ（５０ｍｌ）に懸濁して０℃でトリエチルアミｙ
　（２，８ｍｌ、　２０ｍＭ）を加え３０分攪拌した。

０〜−５℃でＤＣＣ（４゜１８ｆ、２０ｍＭ）のＴ）１
Ｆ（１００ｄ）溶液を滴下した。

反応混合物を一夜室温で攪拌し、析出したＤＣＵを戸去
する。ろ液を３０℃以下で減圧濃縮して酢酸：ｒ−ｆｋ
（８００＋＋＋ｌ）に溶解する。飽和ＮａＨＣＯ３、飽
和食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ、飽和食塩水（各５０ｍＡ’）
で３回洗浄を繰り返し、無水Ｍｇ８０４で乾燥する。

酢酸エチルを濃縮して残渣をシリカゲルクロマトグラフ
ィ（溶媒系：クロロホルム：酢酸エチル−１：１）によ
り精製した。得られたＢｏＣ−ｐ−ニトロフェネチルア
ミン（４，１６ｆ、１０ｍＭ）に室温で２Ｎ−ＨＣＩの
酢酸溶液（２０ｍｌ　）を加え１時間攪拌した。’３０
℃以下で酢酸を減圧留去し、残渣に水（１０ｍ／）を加
えて不溶物を除去し、冷４Ｎ−ＨＣＩでｐＨを約１１に
調節した。クロロホルム（５０ｍｌ　）で３回抽水して
飽和食塩水（５０ｍｌ　）で２回洗浄し、無水ＭｇＳＯ
４で乾燥した。

クロロホルムヲ留去シてｆｌ−Ｌ−ロインルーｐ−ニト
ロフェネチルアミドを得だ。

収率　：　１．８２グ　（６５，０％）融点　：　１０
５−１０８°Ｃ 〔α）：　＝＋２．５　　（Ｃ＝１．０．ＥｔＯＨ）Ｒ
ｆ　　＝０．６６（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝
４：１：１）ＢｏＣ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６３ｔ、２０
ｍＭ）、３，４−ジメトキシフェネチルアミン（３，８
８ｍｌ、　２０ｍＭ）をＴＨＦ（５０ｍ／）に溶解し、
−５℃−ｒ：Ｄｅｃ　（４，１８９，２０ｍＭ）のＴＨ
Ｆ（１００ｍＪ）溶液を滴下した。

反応混合物を一夜室温で攪拌し、析出したＤＣＵを渥去
する。ｐ液を８０℃以下で減圧濃縮して酢酸”−ｆｋ　
（ＢＯＯｍｌ　）に溶解する。飽和ＮａＨＣＯ３飽和食
塩水、ｌＮ−ＨＣｌ、飽和食塩水（各５０ｍ１）で３回
洗浄を繰り返し、無水Ｍｇ８０４で乾燥するっ酢酸エチ
ルを濃縮して残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（溶媒
系：クロロホルム：酢酸エチル＝１＝１）により精製し
た。得られたＢｏＣ−Ｌｅｕ　−３，４−ジメトキシフ
ェネチルアミド（８，９５ｆ。

１０ｍＭ）に室温で２Ｎ−ＨＣＩの酢酸溶液（２０ｍ／
）を加え１時間攪拌した。

無水エーテル（１００ｍ／）を加え、生じた白色沈殿を
濾過採取して、Ｎ−Ｌ−ロイシル−３，４−ジメトキシ
フェネチルアミド塩酸塩を得た。

収率　：　２．ＯＢ？　　（６１，４チ）融点　ニア６
−７９℃ 〔α）：　＝　−４，Ｏ（Ｃ＝１．０．　ＥｔＯＨ）Ｒ
ｆ　　　＝０．４９（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０
＝４：１：１）実施例（８）Ｎ−ｉ−ロイシル−３，４
−ジヒドロキシフェネチルアミド塩酸塩ドーパミン増酸
塩（６，２１？、　８２．７ｍＭ）を０°ＣでＩ）ＭＰ
　（５０ｍ１）に懸濁してトリエチルアミン（４，５８
ｍｌ、　８２．７ｍＭ）を加えて８０分反応した。

次にＢｏＣ−Ｌ−Ｌｅ　ｕ−ＯＨ（８゜６０グ、３２．
７ｍＭ）。

ＨｏＢｔ（４，４２ｆ、８２．７ｍＭ）を加えて一５℃
でＤＣＣ（６，７５９，３２，７ｍＭ）のＤＭＦ（５０
ｍｌ）溶液を滴下して室温で一晩攪拌した。生じたＤＣ
Ｕの沈殿をのぞいて３０′℃以下でＤＭＦを留去乾燥し
た。酢酸エチル（８０ｏｍｌ）に溶解させて、飽和Ｎａ
ＨＣＯ３，飽和食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ、飽和食塩水（各
５０ｍ／）で３回洗浄して無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。

酢酸エチルを濃縮して残渣をシリカゲルクロマトグラフ
ィ＝（溶媒系：クロロホルム：酢エチー１＝１）により
精製した。収量１１．’１（９２，６チ）。

Ｂｏ　Ｃ−Ｌ　−Ｌｅ　ｕ　−８、４−ジヒトロキシフ
エネチルアミド（８，６６ｔ、１０ｍＭ）に２　Ｎ−Ｈ
Ｃｌ　／　Ａｃ０Ｈ（２０ｍｌ　）を加えて室温にて１
時間攪拌した。無水エーテル（１００＋＋＋Ａりを加え
て生じた白色沈殿を口取乾燥して、Ｎ−Ｌ−口イシル−
３，４−ジヒドロキシフェネチルアミド塩酸塩を得た。

収率　：　２，７５ｆ　　（９０，８％）融点　：８１
−８５°Ｃ 〔α　）２２　　＝＝　　　　ｓ　。　ｔ　　　　（Ｃ
＝　１．Ｏ，ＥｔＯＨ）Ｒｆ　　＝　０．６６　（ｎ−
ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝４：１：１）実施例（９
）Ｎ−Ｌ−ロイシル−ｐ−ニトロベンジルア檀ド塩酸塩
（ＨＣｌ−Ｈ−Ｌｅｕ−ＮＩ（ｃＨ２＋ＮＯ□）ＢｏＣ
−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ，（４，６３Ｆ、２０ｍＭ）、　　
ｐ−ニトロベンジルアミｙ　−ＨＣＩ　（Ｌ　７７ｆ、
２０ｍＭ）をＴＦ’Ｈ（５０ｍｌ）に溶解し０℃でＴ　
ＥＡ　（２，８０ｍ１！、２０ｍＭ）を加えた。３０分
後にＤＣＣ（４，１８ｒ、２０ｍＭ）のＴＨＦ（１００
ｍ／）溶液を滴下して室温にて一晩攪拌した。

生じたＤＣＵの沈殿を除去し、３０℃以下でＴＨＦを減
圧留去乾燥した。酢酸エチル（８００ｍＪ）に溶解させ
て、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ、飽
和食塩水（各５０ｍ１）で３回洗浄して無水ＭｇＳＯ４
で乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮して残渣をシリカゲ
ルクロマトグラフィ（溶媒系：クロロホルム：酢酸エチ
ル＝（１：１）にて精製した。得られたＢｏＣ−Ｉ、ｅ
ｕ−ｐ−ニトロベンジルアミド（Ｃ６６り、１０ｍＭ）
に室温で２Ｎ−ＨＣＩの酢酸溶液（２０ｍｌ　）を加え
１時間攪拌した。

無水エーテル（１００ｍｌ）を加え生じた白色沈殿を炉
取し、乾燥してＮ−Ｌ−口イシル−ｐ−ニトロベンジル
アミド塩酸塩を得た。

収率　：　２．５４９　　（８４，２％）融点　：　１
７８−１７５°Ｃ 〔α〕２２＝＋２４．２　　（Ｃ＝１．０．ＢｔＯＨ）
Ｒｆ　　＝　０．５４　（ｎ−ＢＬｌｏＨ：ＡＣＯＨ：
Ｈ２０＝４：１：１）元素分析値（Ｃ１３ＨｔｓＮ３０
３・ＨＣＩとして〕６％　　Ｈチ　　Ｎ％　　Ｃ１％ 測定値　５１．６２　６．７１　１８．９４　１１．８
０計算値　５１．７４　６．６８　１３，９２　１１．
７５実施例（転）Ｎ−Ｌ−ロイシル−β−メチル・フェ
ネチルアミドＢｏ　Ｃ−Ｌｅ　ｕ−ＯＨ（４，６８ｆ、
　２０ｍＭ）、β−メチルフェネチルアミ７　（２，７
Ｏｆ、２０ｍＭ）をＴＨＦ（５０ｍ／）に溶解して一５
〜Ｏ℃ｆＤｅｃ（４，１８Ｆ、２０ｍＭ）のＴＨＦ（１
００ｍＡ’）溶液を滴下した。

生じたＤＣＵの沈殿を除去し、３０℃以下でＴＨＰを減
圧留去乾燥した。酢酸エチル（８００ｍ／りに溶解させ
て、飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯ３、飽和食塩水、ｌＮ−ＭＣＩ
、飽和食塩水（各５　Ｑ　ｔｎｌ　）で３回洗浄して無
水ＭｇＳＯ４で乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮して残
渣をシリカゲルクロマトグラフィ（溶媒系（８，４８ｆ
、１０ｍＭ）に室温で２Ｎ−ＨＣＩ　／Ａ　ｃ　０Ｈ（
２０＋＋＋Ｊ）を加えて１時間攪拌し、３０℃以下で酢
酸を留去した。

残渣に水（１０ｍｌ）を加えて不溶物を除去し、冷４Ｎ
−ＮａＯＨでｐＨを約１１に調節した。クロロホルム（
５０ｍｌ　）で３回抽出して、抽出液を合わせ、飽和食
塩水（５０＋＋＋／）で２回洗浄し、無水硫酸マグネシ
ウムで乾燥した。

クロロホルム溶液を減圧乾固して油状のＮ−Ｌ−ロイン
ルーβ−メチルフェネチルアミドラ得る。

収率　：　１．８５Ｆ　　（７５，０％）シロップ状〔
α）２２　＝−５，５（Ｃ＝１．０．ＥｔＯＨ）棧ｒ　
　　＝ｏ。５５　（ｎ−Ｂｕｏｌｌ　：　ＡｃＯＨ：　
Ｈ２０＝４：１：２）実施例α１）Ｎ−Ｌ−ロイシル下
β−ヒドロキシ・フェネチルアミドＢｏＣ−Ｌｅ　ｕ−
ＯＨ（４，６３９，２０ｍＭ　）　、　２−アミノ−１
−フェニルエタノール（２，７４ｒ、２０ｍＭ）をＴＨ
Ｆ（５０ｍｌ）に溶解して一５〜０℃でＤＣＣ（４，１
８グ、　２０ｍＭ）ノＴ　ＨＦ　（１００ｍ１　）溶液
を滴下した。

生じたＤＣＵの沈殿を除去し、３０℃以下でＴＨＦを減
圧留去乾燥した。酢酸エチル（８００ｍｊ’）に溶解さ
せて、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ、
飽和食塩水（各５０　ｍｌ　）で３回洗浄して無水Ｍｇ
８０．’で乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮して残渣を
シリカゲルクロマトグラフィ（溶媒系：クロロホルム：
酢酸エチル＝（１：１）にて精０Ｈ （３゜５０９．１０ｍＭ）に室温で２Ｎ−Ｈｅｌの酢酸
溶液（２０ｍｌ）を加え１時間攪拌し、３０℃以下で酢
酸を留去した。

残渣に水（ｌＱｍ／’）を加えて不溶物を除去し、冷４
Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを約１１に調節した。クロロホルム
（５０ｍ、ｌ　）で３回抽出して、抽出液を合わせ、飽
和食塩水（５、Ｑ　ｍｌ　）で２回洗浄し、無水硫酸マ
グネシウムで乾燥した。

クロロホルム溶液を減圧乾固して油状のＮ−Ｌ−ロイシ
ル−β−ヒドロキンフェネチルアミドを得た。

収率　：　１，２６ｆ　　（５０，２チ）〔ατ＝−６
．５　　（Ｃ＝１．０．ＥｔＯＨ）Ｒｆ　　＝０．６２
ｆ（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝４：１：１）実
ｍ　例１）ａＮ−Ｌ＝ロイシル−ｐ−カルボキシフェネ
チルアミド塩酸塩（ＨＣｌ　・Ｈ−Ｌｅｕ−ＮＨＣＨ２
ＣＨ２−ＧトＣ０ＯＨ）ＢｏＣ−Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＨ，（
４，６３１，２０ｍＭ）、ｐ　−カルボキシフェネチル
アミン（８，８０ｆ、２０ｍＭ）をＴＨＦ（５０ｍ／）
に溶解してＯ〜−５℃でＤＣＣ（４，ＩＥＦ、　２０ｍ
Ｍ）　ノＴＨＦ　（１００ｍ／り溶液を滴下した。

生じたＤＣＵの沈殿を除去し、３０℃以下でＴＨＦを減
圧留去乾燥した。酢酸エチル（８００ｍ／）に溶解させ
て、飽和ＮａＨＣ’０３、飽和食塩水、ＩＮ−ＨＣｌ、
飽和食塩水（各５０ｍ／）で３回洗浄１．て無水’Ｍｇ
ＳＯ４で乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮して残渣をシ
リカゲルクロマトグラ−フイ（溶媒系：クロロホルム：
酢酸エチル＝（１：１）にて精製した。得られたＢｏＣ
−Ｌｅｕ−ｐ−カルボキンフェネチルアミド（３，７８
ｆ、１０ｍＭ）に室温で２Ｎ−ＨＣＩ（７）酢酸溶液（
２０ｍｌ）を加え、室温にて１時間攪拌した。無水エー
テル（１００ｍｌ）を加えて生じた白色沈殿を戸数し、
乾燥してＮ−Ｌ−ロイシル−ｐ−カルボキシフェネチル
アミド塩酸塩を得た。

収率　：　１，５６ｆ（６１，９チ） 融点　：２２８−２８０°Ｃ 〔α）２２＝−４，１’（Ｃ＝１．０．ＥｚＯＨ）Ｒｆ
　　＝　０．６６　（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０
＝４：１：ｌ）実施例（１８） Ｎ−Ｌ−ロイシル−（２−Ｐ−ヒドロキンフェニル−２
−ヒドロキシ）−エチルアミド塩酸塩Ｈ Ｂｏａ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６８９，２０ｍＭ）、ｄｌ
−オクトハミン（２−Ｐ−ヒドロキシフェニル−２−ヒ
ドロキシ−エチルアミン）　ＨＣ／　（８，７９ｇ、　
２０ｍＭ）、トリエチルアミ７　（２，８ｍｌ、　２０
ｍＭ）をＴＨＦ（５０ｍｌにに溶解し、−５〜θ℃でＤ
ＣＣ（４，１８９，２０ｍＭ）のＴＨＦ（１００ｍｌ）
溶液を滴下して室温で一晩攪拌する。

生じたＤＣＵの沈澱を除去し、３０℃以下でＴＨＦを減
圧留去し乾燥した。酢酸エチル（８００ｍｌ　）に溶解
させて、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ
、飽和食塩水（各５０　ｍｌ　）　ｆ　ａ　回洗浄して
無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮して
残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（溶媒系：クロロホ
ルム：酢酸エチル＝（１：１）にて精製した。得られた
Ｂｏ　ｃ−Ｌｅ　ｕ−ＮＨ−ＣＨ２−ＯＨ に−’Ｃ２Ｎ−ＨＣｌの酢酸溶液（２０ｍｌ　）を加え
１時間攪拌した後、無水エーテル（１００ｍｌ）を加え
て結晶化した。無水エーテルで洗浄後、結晶を沖集して
乾燥した。

収率−２，６６９（８７，８％） 融点＝１９６〜２００°Ｇ（分解） 〔α）”　＝＋２０　、９　（Ｃ＝１．０．　ＥｔＯＨ
）Ｒｆ＝０．５８（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝
４−１：１） 実施例（１４） Ｎ−Ｌ−口イシル−３−メトキシ−４−ヒドロキシベン
ジルアミド・塩酸塩 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６８９，２０ｍＭ）、３−
メ　ト　キシ−４・ヒドロキシベンジルアミンＨＣ１（
８，８０，９，２０ｍＭ）、トリエチルアミン（２，８
ｍＪ。

２０ｍＭ）をＴＨＦ（５０ｍｌ）に溶解上、ｒ−５〜０
℃でＤＣＣ（４，１８ｇ、２０ｍＭ）のＴＨＦ（１００
ｍＪ）溶液を滴下して室温で一晩攪拌した。

生じたＤＣＵの沈澱を除去し、３０℃以下でＴＨＦを減
圧留去して乾燥した。酢酸エチル（３００ａｔ　）に溶
解させて、飽和Ｎ　ａ　ＨＣ０３，飽和食塩水、ｌＮ−
ＨＣｌ、飽和食塩水（各５０ｍ１）・−で３回洗浄して
無水Ｍｇ８０４で乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮して
残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（溶媒系：クロロホ
ルム：酢酸エチル＝　（１：　１　’）６．６ｍＭ）に
室温にて２Ｎ−Ｈ（Ｊの酢酸溶液（１８ｍｌ）を加え１
時間攪拌した後、無水エーテル（１００ｍｌ）を加えて
結晶化した。無水エーテルで洗浄後、結晶をｐ集して乾
燥した。

収率：　１．７４ｇ（８７，７％） 融点：４０〜４８°Ｃ 〔α）　　＝＋４　、２　（Ｃ＝１．０．　Ｅｔ　ｏＨ
）Ｒｆ　＝　０．４６　（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：　
Ｈ２Ｏ＝４：１：１） 実施例（１５） Ｎ−Ｌ−ロインルーベンジルアミド Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４６３ｇ、２０ｍＭ）、ベンジ
ルアミン（８，２１９，８０ｍＭ）をＴＨＦ　（５０ｍ
ｌ　）に溶解し、−５〜０℃でＤＣＣ（４，１３ｇ。

２０　ｍ　Ｍ　）のＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液を滴下し
、た。

生じたＤＣＵの沈澱を除去し、３０℃でＴＨＦを減圧留
去して乾燥した。酢酸エチル（８００ｍＪ）に溶解させ
て、飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯ３、飽昭食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ
、飽和食塩水（各５０　ｍｌ　）　ｆ　８回洗浄して無
水ＭｇＳＯ４で乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮して残
渣をシリカゲルクロマトグラフィ（溶媒系゛クロロホル
ム：酢酸エチル＝（１：　１）にて精製した。得られた ｍ　Ｍ　）に室温にて２Ｎ−ＨＣｌの酢酸溶液（２０ｍ
ｌ　）を加え１時間攪拌し、３０℃以下で酢酸を留去し
た。残査に水（１９ｍｌりを加えて不溶物を除き、冷４
Ｎ−ＮａＯＨでｐＨ約１１に調節し、クロロホルム（５
０ｍＪ）で３回抽出して、抽出液を合わせて飽和食塩水
（５０ｍｌ）で２回洗浄、無水硫酸マグネシウムＭｇＳ
Ｏ４で乾燥した。クロロホルムを減圧留去してＮ−Ｌ−
口イシル−ベンジルアミドを得た。

収率：１．１９！ｊ（５４，０％） 融点：５６〜５７℃ 〔α：ｌ　　　＝＋５．４（Ｃ＝１．ＥｔＯＨ）Ｒｆ　
＝０．５５　（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝４：
１：１） 実施例（１６） Ｎ−Ｌ−ロイシル−Ｐ−スルホンアミド−ベンジルアミ
ド （Ｈ−Ｌｅｕ−ＮＨ−ＣＨ２（■５Ｏ２ＮＨ２）　　’
Ｂｏ　ｃ−Ｌｅ　ｕ−ＯＨ（２，８２，９，、１０ｍＭ
）、Ｐ−７ミノメチルベンゼンスルホアミド塩酸塩（２
，２２ｇ。

１０　ｍ　Ｍ　）、トリエチルアミン’（１、４０ｍｌ
、１０ｍ　Ｍ　）をＴＨＦ（２５ｍｌ）に溶解した。次
に０〜＝５℃でＤＣＣ（２，０７ｇ、１０ｍＭ）のＴ）
（Ｆ”（５０ｍｌ）溶液を滴下し室温で一晩攪拌した。

生じたＤＣＵの沈澱を戸別して、３０℃以下でＴＨＦを
留去した。残渣を酢酸エチル（３００ｍｌ　）に溶解し
て゛飽和ＮａＨＣＯ３、飽和食塩水、ＩＮ−Ｉ（Ｃｌ　
％飽和食塩水（各５０　ｍｌ　）　ノ順で３回洗浄して
無水硫酸マグネシウムで乾燥する。酢酸エチルを濃縮し
て残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶媒系：クロ
ロホルム：酢酸−１：１）により精製した。

Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｐ−スルホンアミド−ベンジルアミド
（１，６０ｇ、４ｍＭ）に室温で２Ｎ−ＨＣ７の酢酸溶
液（８ｍｌ）を加えて室温にて１時間攪拌した。無水エ
ーテル（５Ｑ　ｍｌ　）を加えて結晶化させ、生じた結
晶を戸数して減圧乾燥した。

収率：１．１０ｇ（８１，９％） 融点＝１２０〜１２３℃ 〔α）、＝＋ｉ　１，９　（Ｃ＝１．エタノール）実施
例（１７） Ｎ−Ｌ−口イシル−イソアミルアミド Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６８９、２０ｍＭ　）、イ
ンアミルアミｙ　（１，９２’９．２２ｍＭ）をＴＨＦ
（５０ｍｌ　）溶液に溶解して一５〜０℃でＤＣＣ（４
，１８ｇ、２０ｍＭ）のＴＨＦ（１００ａｔ）溶液を滴
下して一晩攪拌した。生じたＤＣＵの沈澱を除去して８
０℃以下でＴＨＦを留去した。残渣を酢酸エチル（８０
０ｍｌ　）に溶解して飽和ＮａＨＣＯ３、飽和食塩水、
ｌＮ−ＨＣｌ、飽和食塩（各５　Ｑ　ｍｅ　）での順に
８回洗浄して無水硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エ
チルを濃縮して残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（
溶媒系：クロロホルム：酢酸＝ｌ：１）により精製した
。

Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−イソアミルアミド（８，０１ｇ。

１０ｍＭ）に室温で２Ｎ−ＨＣＩの酢酸溶液（２０ｍｌ
　）を加えて１時間攪拌し、８０℃以下で酢酸を留去し
た。残査に水（１０ｍｌ）を加えて不純物をのぞき、冷
Ｎ−ＮａＯＨでｐＨ約１１に調節した。

クロロホルム（５０＋＋＋ｌ）で３回抽出して抽出液を
合わせて飽昭食塩水（５０ｍｌ　）で２回洗浄し、無水
硫酸マグネシウム士乾燥した。クロロホルムを留去シて
Ｎ−Ｌロイシル−イソアミルアミドを得た。

収率：１．６０ｇ（８０，０％）シロ−ツブ状〔α）　
　＝＋５．５　（Ｃ＝Ｉ　ＥｔＯＨ）Ｒｆ＝０．８０　
（ｎＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２Ｏ＝４：１：１） 実施例（１８） Ｎ−Ｌ−ロイシルニロ−へキシルアミド（Ｈ−Ｌｅｕ−
ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ？ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨ５）Ｂｏｃ
−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６８ｇ、２０ｍＭ）ｎ−ヘキシル
アミｙ　（８，９６ｍｌ、　８０ｍＭ）をＴＨＦ（５０
ｍｌ　）に溶解して２５〜０℃でＤＣＣ（４，１８ｇ。

２０　ｍ　Ｍ　）のＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液を滴下し
て一夜攪拌した。生じたＤＣＵの沈澱を除去して３０℃
以下でＴＨＦを留去し、残渣を酢酸エチル（３００ａｔ
　）に溶解した。酢酸エチル溶液を飽和ＮａＨＣＯ３、
飽和食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ、飽和食塩水（各５０ｍ１　
）の順に３回ずつ洗浄した後無水硫酸マグネシウムで乾
燥した。酢酸エチル溶液を減圧濃縮して得られた残渣を
シリカゲルクロマトグラフィ（溶媒系：クロロホルム：
酢酸＝ｔ：ｉ）により精製した。得られたＢｏｃ−Ｌｅ
ｕ−ｎ−へキシルアミドに室温で２Ｎ−ＨＣｌの酢酸溶
液（４０ｍｌ　）を加えて１時間攪拌し、３０℃以下で
ＡｃＯＨを減圧留去した。残渣に水（１０＋＋Ａ’）を
加えて不溶物を除き、冷ｌＮ−ＮａＯＨでｐＨを約１１
に調節した。

クロロホルム（５０ｍｌ　）で３回抽出して、抽出液を
合わせ、飽和食塩水（５Ｑ　ｍｌ　）で２回洗浄した後
、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。クロロホルムを減
圧留去して、Ｎ−Ｌ−口イシル−〇−へキシルアミドを
得た。

収率：　２．６０９（６０，６％）シロップ状〔α）、
＝＋ｅ、ｏ（ｃ＝１．ＥｔＯＨ）Ｒｆ＝０．８０　　（
ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２Ｏ＝４：ｌ：１） 実施例（１９） Ｎ−Ｌ−口イシル−５−カルボキシヘキシルアミド （ＨＩ、ｅｕ　　ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨｚＣＨ２
ＣＯＯＨ）Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６８ｇ、２０ｍ
Ｍ）、Σ−アミノカブｏ７酸（２，６２，ｊ７．２０ｍ
Ｍ）をＴＨＦ（５０ｍｌ　）に溶解して一５〜θ℃でＤ
ＣＣ（４，１８ｊｊ。

２０ｍＭ）のＴＨＦ（１００ａｔ’）を滴下して一晩攪
拌した。

生じたＤＣＵの沈澱を除去し、３０℃以下でＴＨＰを減
圧留去して乾燥した。酢酸エチル（３００ｍｌ　）に溶
解させて、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和食塩水、ｌＮ−ＨＣ
ｌ、飽和食塩水（各５０　ｍｌ）で３回洗浄して無水Ｍ
ｇＳＯ４で乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮して残渣を
シリカゲルクロマトグラフィ（溶媒系：クロロホルム：
酢酸エチル＝（１：１）にて精製した。得られたＢｏｃ
−Ｌｅｕ−５−カルボキンヘキシルアミド（８，４４ｇ
、１０ｍＭ）に室温で２Ｎ−ＨＣｔ２ｏ酢酸溶液（２０
ｍｌ　）を加え、１時間攪拌し、８０℃以下でＡｃＯＨ
を留去した。

残渣に水（１０ｍｌ）を加えて不溶物を除き、冷ｌＮ−
ＮａＯＨでｐＨを約１１に調節した。クロロホルム（５
０ｍｌ　）で３回抽出して、抽出液を合わせ、飽和食塩
水（５０ｍｌ）で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥した。クロロホルムを減圧留去して、Ｎ−Ｌ−
ロイシル−５−カルボキシヘキシルアミドを得り。

収率：　１．２０９　（４９，１％） 融点：１０５〜１０８℃ 〔α）”　＝＋　１７　、　１　　（Ｃ＝’ｌ、　Ｅｒ
　ＯＨ）Ｒｆ＝０．６８（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ
２０＝４：１：１） 実施例（２０） Ｎ−Ｌ−ロイシル−エチルアミド （Ｈ−Ｌｅ　ｕ−ＮＨＣＨ２ＣＨ３） Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６８９，２０ｍＭ）、エチ
ルアミ：／（２，４５９，８０ｍＭ）をＴＨＦ（５０ｍ
ｌ　）に溶解して一５〜０℃でＤＣＣ（４，１８ｇ。

２０ｍＭ）のＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液を滴下して一夜
攪拌した。生じたＤＣＵの沈殿を除去して８０℃以下で
ＴＨＦを留去し、残渣を酢酸エチル（３００ｍｌ　）に
溶解した。酢酸エチル溶液を飽和ＮａＨＣＯ３、飽和食
塩水、ｌＮ−ＨＣｌ、飽和食塩水（５０ｍｌ）の順に８
回ずつ洗浄した後無水硫酸マグネシウムで乾燥した。酢
酸エチル溶液を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲル
クロマトグラフィ（溶媒系：クロロホルム：酢酸＝１：
１）により精製した。

Ｂ、ｏｃ−Ｌｅｕ−エチルアミド（１２９ｇ、５ｍＭ）
に室温で２Ｎ−ＨＣｌの酢酸溶液（１０ｍ／りを加え、
１時間攪拌し、３０℃以下でＡ　ｃ　ＯＨを留去した。

残渣に水（ｔｏｍｌ）を加えて不溶物を除き、冷ｌＮ−
ＮａＯＨでｐＨを約１１に調節した。

クロロホルム（５０ｍｌ）で３回抽出して、抽出液を合
わせ、飽和食塩水（５０ｍｌ）で２回洗浄した後、無水
硫酸マグネシウムで乾燥した。クロロホルムを減圧留去
して、Ｎ−Ｌ−口イシル−エチルアミドを得だ。

収率：０．５８．！１１（６７，８％）シロップ状〔α
〕：、”　＝＋５．５　（Ｃ＝１　、ＥｔＯＨ）実施例
（２１） Ｎ−Ｌ−口イシル−ｎ−ブチルアミン （Ｈ−Ｌ　ｅ　ｕ−ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ，ＣＨ２ＣＨ２）
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６８９，２０ｍＭ）、ｎ−
ブチルアミン（２、ｊ９．ｌｉ＋、８０ｍＭ）をＴＨＦ
（５０ｍ７りに溶解して一５〜θ℃ｆＤｅｃ（４，１８
ｇ。

２０　ｍ　Ｍ　）のＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液を滴下し
て一夜攪拌した。生じたＤＣＵの沈澱を除去して３０℃
以下でＴＨＦを留去し、残渣を酢酸エチル（８００ｍｌ
）に溶解した。酢酸エチル溶液を飽和Ｎ　ａ　ＨＣ０３
、飽和食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ、飽和食塩水（各５０ｄ）
の順に３回ずつ洗浄した後無水硫酸マグネシウムで乾燥
した。酢酸エチル溶液を減圧濃縮して得られた残渣をシ
リカゲルクロマトグラフィ（溶媒系：クロロホルム：酢
酸＝１：１）により精製した。得られたＢｏｃ−Ｌｅｕ
−ｎ−ブチルアミド（２，８６，！９．１０ｍＭ）に室
温で２Ｎ−ＨＣ／の酢酸溶液（２０ｍｌ　）を加え、１
時間攪　・拌し、８０℃以下で酢酸を留去した。

残渣に水（１０＋＋＋ｌ）を加えて不溶物を除き、冷ｌ
Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを約１１に調節した。クロロホルム
（５０ｍｌ）で３回抽出して、抽出液を合わせ、飽和食
塩水（５０＋＋＋ｌ）で２回洗浄した後、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥した。クロロホルムを減圧留去して、Ｎ
−Ｌ−ロイシル−ロープチルアミドを得た。

収率：　０．８８ｇ（４７，２％）シロップ状〔α）　
　＝＋５．６　（Ｃ＝１．Ｅ［）Ｈ）Ｒｆ＝０．５４（
ｎ−ＢｕＯＨ：Ａｃ−ＯＨ：Ｈ２０＝４：１：２） 実施例（２２） Ｎ−Ｌ−口インル−８−メｆルチオープ口ピルアミド （Ｈ−Ｌ　ｅ　ｕ　−ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−８−
ＣＨ３）Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，６８ｇ、２０ｍＭ
　　）、Ｓ−メチルプロピルアミン（２，１０，ｊ９．
２０ｍＭ）をＴＨＦ（５０ｍｌ）に溶解して一５〜０℃
でＤＣＣ（４，１８ｇ、２’ＯｍＭ）のＴＨＦ　（１０
０ｍ１）溶液を滴下して一夜攪拌した。生じたＤＣＵの
沈澱を除去して３０℃以下でＴＨＦを留去し、残渣を酢
酸エチル（８００ｉｌ）に溶解した。酢酸エチル溶液を
飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯ３、飽和食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ。

飽和食塩水（各５　Ｑ　ｍｌ　）の順に３回ずつ洗浄し
た後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル溶
液を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグ
ラフィイ（溶媒系：クロロホルム：酢酸＝１：１）によ
り精製した。得られたＢｏｃ−Ｌｅｕ−８−メチルプロ
ピルアミド（ｓ、ｉｓｇ、ｉ。

ｍＭ）に室温で２Ｎ−ＨＣｌの酢酸溶液（２０ｍ／）を
加えて１時間攪拌し、３０℃以下で酢酸を留去した。残
渣に水（ｌｏｍ／）を加えて不溶物を除き、冷ｌＮ−Ｎ
ａＯＨでｐＨを約１１に調節した。クロロホルム（５０
ｍｌ　）で３回抽出して、抽出液を合わせ、飽和食塩水
（５０ｍ／）で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウム
で乾燥した。クロロホルムを減圧留去して、Ｎ−Ｌ−口
イシル−３−メチルチオ−プロピルアミドを得た。

収率：　１，５８９（７０，５％）シロップ状〔α）２
３＝＋　５　、８　（Ｃ＝　ｊ、’　−ＥｔＣＨ（）Ｒ
ｆ＝０．５８（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝４：
１：１） 実施例（２３） Ｎ−Ｌ−口イシル−２−エチルチオエチルアミド （Ｌｅｕ−ＮＨＣＨｚＣＨ２８−ＣＨ２ＣＨ３）Ｂｏｃ
−Ｌｅｕ−ＯＨ（４６８ｇ、２０ｍＭ）、エチルチオエ
チルアミンＨｃｌ　（２，８４９，２０ｍＭ）をＴＨＦ
（５０ｍｌ）に溶解して一５〜０℃でＤＣＣ（４，１８
ｊｉ、２０ｍＭ）のＴＨＦ（１００ｍ／り溶液を滴下し
て一晩攪拌した。生じたＤＣＵの沈澱を除去して８０℃
以下でＴＨＦを留去し、残渣を酢酸エチル（３００ｍＪ
）に溶解した。酢酸エチル溶液を飽和ＮａＨＣＯ３、飽
和食塩水、ｌＮ−ＨＣｌ飽和食塩水（各５０ｍ１）の順
に３回ずつ洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し
た。酢酸エチル溶液を減圧濃縮して得られた残渣をシリ
カゲルクロマトグラフィ（溶媒系；クロロホルム：酢酸
＝１：１）により精製した。得られたＢｏｃ−Ｌｅｕ＝
２−エチルチオエチルアミド（８，８６，９，１０ｍＭ
）に室温で２Ｎ−ＨＣＩの酢酸溶液（２０ｍｌ）を加え
て１時間攪拌し、３０℃以下で酢酸を留去した。残渣に
水（１０＋＋＋／）を加えて不溶物を除き、冷ｌＮ−Ｎ
ａＯＨでｐＨを約１１に調節した。クロロホルム（５０
ｍｌ）で３回抽出して、抽出液を合わせ、飽和食塩水（
５０ｍｌ　）で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウム
で乾燥した。クロロホルムを減圧留去して、Ｎ−Ｌ−ロ
イシル−２−エチルチオ−エチルアミドを得た。

収率：　１．７０．９　（７７、９％）シロップ状〔α
〕。＝＋２．４　（Ｃ＝１．ＥｚＯＨ）Ｒｆ＝０　６０
（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝４：１：１） 実施例（２４） Ｎ−Ｌ−ロインルーｎ−オクチルアミド（ＨＬ　ｅ　ｕ
　　ＮＨ（ＣＨ２）７　ＣＨ３＞Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ
２，８２９（１０ｍＭ）、ｎ−オクチ／Ｉ／　７ミｙ　
１　、５５９　（１２ｍＭ　）、ＤＣＣ２，０７，９（
１０ｍＭ）、Ｔ　ＨＦ　７５　ｍｉを用いて実施例１７
と同様に行なってＢｏｃ−Ｌｅｕ　−ＮＨ−（ＣＨ２）
７−ＣＨ３３゜２６．ｐ（９，５ｍＭ）を得、さらに２
Ｎ−ＨＣｌの酢酸溶液２０ｍ１を用いて、以下実施例１
７と同様にして保護基を脱離せしめ、Ｎ−Ｌ−ロインル
ーローオクチルアミドを得り。

収率：　２．００９（８０，９％）、シロップ状〔α）
２０＝＋９．５　（Ｃ＝ｌ　　Ｏ，ＥｔＯＨ，）Ｒｆ＝
０．６２（ｎ　　ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝４：１
：１） 実施例（２５） Ｎ−Ｌ−口イシル−〇−デシルアミド （Ｈ−Ｌｅ　ｕ　−ＮＨ−（ＣＨ２）　ｇ−ＣＨ３）Ｂ
ｏｃ−Ｌｅ　ｕ−ＯＨ２，８２１７（１０ｍ　Ｍ　）、
ｎ−デンルアミ７１．９４ｇ（１２ｍＭ）、ＤＣＣ２０
７，９（１０ｍＭ）、ＴＨＰ７５ｍｌを用いて実施例１
７と同様に行、なって、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＮＨ−（ＣＨ
２）ｇ−ＣＨ３８５５ｇ（９６ｍＭ）を得、さらに２Ｎ
−ＨＣｌの酢酸溶液を用いて保護基を脱離せしめ、Ｎ−
Ｌ−口イシル−〇−デシルアミドを得た。

収率；　１．６２ｇ（６２，４％）シロップ状〔α）ｏ
＝＋４．８　（Ｃ＝１．０．ＥｔＯＨ）Ｒｆ＝０．６２
（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝４：１：１） 実施例（２６） Ｎ−Ｌ−ロイシル−ラウリルアミド （ＨＬｅｕ　　ＮＨ（ＣＨ２）１１　　ＣＨ３）Ｂｏｃ
−Ｌｅｕ−ＯＨ２，８２９（１０ｍＭ）、ラウリルアミ
ン２．２２９　（１２ｍＭ）、ＤＣＣ２，０７ｇ（１０
ｍＭ）、ＴＨＦ７５ｍｌを用いて、実施例１７と同様に
行なって、Ｂｏ　ｃ−Ｌｅ　ｕ−ＮＨ（ＣＨ２）Ｂ−Ｃ
Ｈ３を得、さらに２Ｎ−）（Ｃ／の酢酸溶液２０ｍ１を
用いて保護基を脱離せしめ、Ｎ−Ｌ−ロイシル−ラウリ
ルアミドを得た。

収率：　１．６６、ｇ（５８，５％） 融点二３６〜８８°Ｃ 〔α）２３＝＋２　　４　（Ｃ＝１．ＥｔＯＨ）Ｒｆ　
＝　０．６５　（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２０＝４
：Ｉ：１） 参考例　Ｉ Ｎ−Ｌ−ロイシル−β−ヒドロキシフユネチルアミド、
アミンオキシダーゼを用いるＬＡＰ活性測定法 前記実施例１１で得られたＮ−Ｌ−口イシル−β−ヒド
ロキシフエネルアミドを、０．１Ｍ−ＩＪン酸Ｂｕｆｆ
ｅｒ（ｐＨ７０）に溶解して基質溶液（２５ｍ　Ｍ　）
とした。又、この基質溶液を用いて、以下の通りの組成
を有する溶液〔Ｉ〕を調製した。

０．１Ｍリン酸バッフ７−（ｐＨ７，０）　　　　　０
．１　　　ｍ１８ｒｒｙ／ｍ１４−７ミノアンチビリン
　　　　　　　０００５ｍ１０．３％　３−メチル−Ｎ
−エチル−Ｎ（β−ヒドロキシエチル）Ｎ−エチルアニ
リン　　　　　　　　　　　０．０５ｍ１０．５■／ｍ
ｅ　　パーオキシダーゼ （７グマ社製、ｙｙｐｅ−１）　　　　　　０．０５　
　ｍ１２″５　　ｍＭ　　基質（Ｎ−Ｌ−口イシル−β
−ヒドロキシフェネチルアミド）　　　　　　　　　　
　　　　　　　　Ｏ，１ｍ１９．５Ｕ／ｍｌ　　７ミン
オキシダーゼ（起源：Ｅｕｒｏｔｉｕｎｃｈｅｖａｌｉ
ｅｒｉ　　Ｍ２ＳＯ４：ＦＥＲＭ−ＰＮａ５８６９　　
。

特願昭５６−２４２８１）　　　　　　　　　　　０．
０１　　ｍｅｌｏｏｍＭ　　ＭｇＣｌ２　　　　　　　
　　　　０．０２５ｍ１上記の組成の溶液ＣＩ）の１．
４５ｍ１へ、患者血清（Ａ、Ｂ、Ｃ）５０μｌを加え、
３７℃、１０分間インキュベートせしめ、反応後、５５
０ｎｍの波長にて吸光度変化を測定した。

別に、ＬＡＰ活性既知の血清（セラクリアＮ。

１２２Ｇ−４１単位１日本商事社製）を用いて同様に操
作を行い、上記各血清中のＬＡＰ活性値を算出した。

その結果は、第１表に示す通りであった。

又、上記の測定法の比較として、既知のＬＡＰ活性測定
法（ヤトロン社製、イアトロセツ）ＬＡＰＲＭ１５４−
Ｋ）によシ、上記の各血清を用いてそのＬＡＰ活性の測
定を行った。

その結果、第１表に示す通りであった。

この第１表に示す通り、本発明におけるＮ−Ｌ−ロイシ
ルーβ−ヒドロキシフエネチルアミトハへ血清中のＬ　
Ａ　Ｐ活性を適格にとらえる事の出来る良好な合成基質
であると認められる。

参考例　２ Ｎ−Ｌ−口イシル−２−エチルチオエチルアミド、アミ
ンオキシダーゼを用いるＬＡＰ活性測定法 前記実施例２３で得られたＮ−Ｌ−ロインルー２〜エチ
ルチオエチルアミドを、０．ＩＭ−リン酸バッフ７−（
１））１７．０）に溶解して基質腋液（２５ｍＭ）とし
た。また、前記参考例１における基質Ｎ−Ｌ−ｏイシル
ーβ−ヒドロキシフエネルアミドの代りに、Ｎ−Ｌ−ロ
イシル−２−エチル−チオ−エチルアミドを含む上記基
質溶液を用いて、溶液Ｃｌ１Ｆを調製した。この溶液〔
１０１４５ｍ１を用いて前記参考例１記載と同様に患者
血清中のＬＡＰ活性を測定して第２表に示す結果を得だ
。

この第２表に示す通り、本発明におけるＮ−Ｌ−ロイシ
ル−２−エチルチオエチルアミドは、前記参考例１と同
様に人血清中のり、ＡＰ活性を適格にとらえる事の出来
る良好な合成基質であると認められる。また、他の合成
基質も同様の操作を行う事により、良好に測定する事が
できた。

明の物質の赤外線吸収スペクトル図を示す。

第１図：Ｎ−Ｌ−ロイシルフキネチルアミド第２図：Ｎ
−Ｌ−ロイシルフェニルプロピルアミド 第８図：Ｎ−Ｌ−ロイシル−Ｐ−メチルフェネチルアミ
ド 第４図：Ｎ−Ｌ−口イシル−Ｐ−メトキシフェネチルア
ミド 第５図：　Ｎ−Ｌ−ロイシル−Ｐ−クロロフェネチルア
ミド 第６図：　Ｎ−Ｌ−口イシル−Ｐ−ニトロフェネチルア
ミド 第７図：Ｎ−Ｌ−ロイシル−３，４−ジメトキ７フエネ
チルアミド塩酸塩 第８図：　Ｎ−Ｌ−口イシル−３，４−ジヒドロキシフ
ェネチルアミド塩酸塩 第９図：Ｎ−Ｌ−ロイシル−Ｐ−ニトロペンシルアミド
塩酸塩 第１０図二Ｎ−Ｌ−ロインルーβ−メチルフェネチルア
ミド 第１１図：Ｎ−Ｌ−口イシル−β−ヒドロキシフェネチ
ルアミド 第１２図：Ｎ−Ｌ−ロイシル−Ｐ−カルボキシフェネチ
ルアミド塩酸塩 第１８図：Ｎ−Ｌ−口イシルベンジルアミド第１４図：
Ｎ−Ｌ−口イシル−３−メトキシ−４−ヒドロキシベン
ジルアミド塩酸塩 第１５図：Ｎ−Ｌ−口イシル−（２−Ｐ−ヒドロキシフ
ェニル−２−ヒドロキシ）−エチルアミド塩酸塩 第１６図：Ｎ−Ｌ−ロイシル−Ｐ−スルホンアミド−ベ
ンジルアミド 第１７図：Ｎ−Ｌ−口イシル−インアミルアミド第１８
図二Ｎ−Ｌ−ロイシル−３−メチルチオ−プロピルアミ
ド 第１９図：Ｎ−Ｌ−ロイシル−２−エチルチオ−エチル
アミド

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記一般式　　　（１） （ただし、式中Ｘ１　　は結合基、または置換基を有し
   てもよいアルキレン基、Ｘ２　はフェニル基、置換フェ
   ニル基、低級アルキル基、−ＣＯＯＨｌ−８０３Ｈ，ま
   たは低級アルキルチオ基よりなる置換基を示す）で表わ
   される化合物、またはその塩。
2. （２）下記一般式　　　（ＩＩ） （ただし、式中Ｘ１　　は結合基、または、−ＣＨｓま
   たは一〇Ｈ基よりなる置換基を有してもよい低級アルキ
   レン基、Ｒ１は水素、−ＣＨ３、−０ＣＨ３、−ＣＩ、
   −Ｎｏ□、−０’Ｈまたは−ＣＯＯＨ基、Ｒ２は水素、
   −０ＣＨ３または−ＯＨ基を示す）で表わされる特許請
   求の範囲第１項記載の化合物、またはその塩。
3. （３）　　下記一般式　　　（ＩＩ） （ただし、ＸＩ　　はＸ３　　と結合してアルキル基を
   示し、または、ＸＩ　　は結合基またはアルキレン基、
   Ｘ３　　は−ＣＯＯＨ，−８０３）ル、まだは低級アル
   キルチオ基を示す）で表わされる特許請求の範囲第１項
   記載の化合物またはその塩。