JPS5843996A - 安定なｓ−アデノシルメチオニン塩、それらの製造法及び活性成分としてこれらを含む治療組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は昇温下でかり実際上無期限に極めて安定である
５−７ｒノシルメチオニｙ（ｓＡｙ）塩の新しいｓ知に
かんする。

Ｓ−アデノシルメチオニンがすべての生物に存在する自
然起源の生成物でありそれは特定の＃木により活発に台
底さｎ１仄の式に相当することが知られている： ＳＡＭは人間の生体にとって基本的に重要な大多数の代
謝方法に参加し、従ってその欠乏は多くの有機的機能不
全の基礎にかかれる。

この生成物の生物学的重要性にｖ千年間知られているが
、これをテストし薬物としてオリ用する可能性Ｆｉｏ　
’ａをこえる温度での榛めて不安定のため巌近になって
始めて出てきた。

４５℃で良好な安定性を肩するいくつかの塩を展進する
ことに成功した（　Ｕ　８　Ｐ　３９５４７２６／トリ
パ？）ルエンスルホネートを述べ、ＵＳＰ３９５４７２
６／１９７６はＳＡＭジサルフエートジパラトルエンス
ルホネートを述べ、又はＵ　Ｓ　Ｐ　４０５７６８６／
１９７７は８ＡＭ、４Ｒ８（４Ｈ又ｎ８ＡＭ−３Ｒ８Ｏ
ｓｋｉ（こ＼でＲ８０１Ｈは硫酸根により部分的に置換
されつるスルホン酸基を示す）として示されうるＳＡＭ
塩のグループを述べている。

出願人は先行技術の一トでつくられたＳＡＭ塩（即ちモ
ノクロライド−Ｕ　８　Ｐ　２９６９３５３及びジサル
フエートー西独４８許出顧１８０３９７８）はせいぜい
４℃に維持されたなら１時と共に安定性が制限されたと
き、１１′１故特定のクレームされた塩のみが安定で冴
ノる＼かを説明できないし、また何故トリメセラトルエ
ンスルホネートが２５℃まで安定であるがゾサルフエー
トジパラトルエンスルホネートが４５℃までも安定であ
るかを説明できないと述べている。

今や全く予期せさることに、ＳＡＭかｐＫが２．５木満
の有機スルホン酸の５モルで塩化（５ｍ１ｌｆｙ）され
るとき安ボなＳＡＭ塩が傅られることを見出し、本発明
に到達した。

と＜　ｉｃ　ｓ篇ろくべきことに％ＳＡＭがｐＫ２．５
床満の有機スルホン酸の５モルで鳩化すれるとき、最大
の安定性の塩が得られることが見出された。

酸の４又は６モルを含む塩は安定性をセするが、それは
未だ良好とはいえ、確かに低い。

酸の１〜３モルを含む塩はそれらが減数現象を現わすと
いう点で治療用途には絶対に受入れられないものである
。

本発明による新しい塩はすべて人間の治療に応用される
ので減成した生成物が少閂のパーセントですら存在すれ
ば受入れられない（何故ならそれＦｉ活性の相当するロ
スを、を昧するのみでなく、またそしてとくＫそれは僅
かに毒性があシ、また生物学的方法□に干渉する性質七
壱することが判明した代ＷＭ産物が生成されることを示
すからである）。

また、新しいＳＡＭ塩の安定性に直接環境の榛性に１勺
影響され、かくしてとくに存在する水分の量により影響
さ几、そのためこの水分ｔｏに近いイーまで減少させる
ｉ段が見出され、これは本発明の別の主題でもある。

本発明による地は下記の一般式に相当する：（式中ＸＵ
ＰＫが２５未満の有機スルホ／＃！の酸部分に相当する
）。

とくに電通の安定性のｔ４はＸがＣＨｓ　−８０１又Ｆ
ｉＣＨ１−（４）１１−８ｕｍ−のとき得られることが
見出された。これら二つの酸のｐＫは久のとおシ： メタンスルホン酸　　　ｐＫ（０，５ ｐ−）ルエンスルホンｆ１ｊｌｐＫ＜０．５これらの新
しい塩は様々の治療分野でたとえは後述するとおシヘ／
４トプロテクターとして有用であることが判明した。

これらは次の本雀的工程よシなる方法で製造され、各工
程はすべて絶対的に一定であり西・現性のある薬剤的に
純粋な生成物をつる目的のため臨界的である： ａ）　粗８ＡＭ塩の濃縮水浴液を既知の方法によりつ〈
シ； ｂ）　クロマトグラフによシ、弱酸イオン父換衝脂カラ
ムを通過させることＫよシ上紀浴液ｔ−Ｓ負し； ｅ）ＳＡＭを所定の酸の希釈水浴液で浴出させ： ｄ）＃出液°を滴定し、酸容′ｌｌｌを存在するＳＡＭ
に対する厳密に化学墓−９１に―贅し；・）　溶出液を
濃縮し； ｆ）　凍結乾鎌。

工程（１）でつくられた水浴液は明らかＫ１１Ｊ浴性の
ＳＡＭ塩を含むことができる、というのはアニオンはカ
ラムによる次工程で消去され従って方法の後の工程に干
渉しない、一般に濃縮とＳＡＭの酵母からの抽出を會む
通常の方法でＦｉＳ　ＡＭ　　イオンと８０４−″　イ
オンを含む溶液が得られる。

すべての場合、溶液の”ｐｉ＋は６〜７に、好ましく　
ｆｌ　６．５　Ｋ−幣さｆる。　　　　　　　□クロマ
トグラフによる４＊製工程１ｂｌは好ましくはアンバー
ライトＩＲＣ５０又はアンバーライトＣＧ５０にニジ行
なわｎる。

工程１’ｅｌの浴出は好ましくｉ、ｔｐｇＫ定の酸の０
．ＩＮ水溶液で行なわれる。

溶出液の滴定（工程ｄ）が存在する酸の門が５未満であ
ることを示すならは、これは通常の場合であるが、その
ときは欠乏に正確に相当する酸のｎはａｌ！縮された市
販の水浴液の形で添加される。しかし、そｎがもし過剰
の飯が存在することを示すならば、これは０）１”−型
の強塩基イオン父換側脂たとえばアンパーライトＩＲＡ
−４０１で溶液を処理することＫよシ消去される。

■程Ｃ・：ては溶出液が次の伸結乾燥のため麺適の麺Ｋ
ｊ２１Ｊち５０ないし１００ＩＩ／を好ましくは７０Ｉ
Ｉ／′ｔの値まで１１１Ｉｌ縮される。

最終の凍結乾燥は通常方法により行われ、１００１！純
粋の完全に結晶性塩が得られる。

凍結乾燥は適当な不活性物質の存在下で行なわれると生
成物は水分が一層少なく、従って一層安定である。

とくに製造された塩が注射用薬剤の用途に用いられる場
合は、凍結乾燥がマンニトールの存在下で行なわれるべ
きである。しかしもし塩が経口錠剤の処方ＪｌＣＲ用さ
れるならば、凍結乾燥は粉末珪酸の存在下で行わＩしる
べきである。

新しい生成物を一層容易に内税性とするため、いくりか
の実さい的製−ｆ７ＩＩｐＨが単に脱明の１的のために
下記に示さｆ’Ｌ　４）　。

実施例１ エチルアセテート１１０ｔと水１１０ｔを、シュレンク
（エンサイモロシア、２９．２８３（１９６５））Ｋ従
ってＳＡＭ（６，８８，？／ゆ）を含有するイース）９
００ｋｌｉｌに墳境気腐で加えた。

３０分間はげしく攪拌した優、０．３５Ｎ＠酸５００ｔ
を加え、更に１時間牛攪拌をつづけた。

混合物を濾過し残渣を水洗しＳＡＭ４．４０Ｅ／ｌ（こ
れは出発原料中に存在するものの９９、５　％に相当す
る）を含むｆ６＠１４００１１に侍た。

ビクロロン酸１１．５．９のカーブタノール１２０を中
の溶液を撹拌し乍ら上記浴液７００−１Ｋ加えた。

一晩放直後、沈−物全遠心分陥し水洗した。

沈澱物を攪拌し乍ら、メタノール中の蝋飯のＩＮ浴液の
３１　ｔＫ１１償気−で溶解さゼた。

ついでベンゼン２５０　ｔｆ加えた。

沈澱物を完全に沈降させた後、上Ｍ液を傾瀉させ不溶性
残渣を少蓋のエーテル−Ｃ洗浄したＯ 沈澱物を蒸留、水４００１にと力）Ｌ、８兄色チャーコ
ール１に９を加え混合物音濾過し１こ。

Ｈ型のアンバーライトＩ　ＲＣ５０桐月旨の＋ カラムを用意し注意採〈蒸留水で洗浄した。

木酢＠　４．８時を攪拌し乍ら先きに得ら庇た水溶液に
添加しついで２　Ｎ　ＮａＯＨ１ｋｐ口６．５となる迄
加えた。

水浴＃を４００．ｔ／ｂの速さで極月ｈカラム７に通し
、これはその方法の間一定Ｉｔｃｈ持された。

蒸留水２００ｔ、０．１Ｍ酢緻１６００を及び＃貿水史
に２００ｔをつぎつぎにＸＩｎ遇させたＯ イオン父換カラムからのＳＡＭをメタンスルホン酸０゜
ＩＮ浴欣の２００１テ＃ｔｉ３Ｇセｒｓ。

浴出ｆｉ！ＬｔＪＩＩ空下で３　ｏ　ｔｒｃ＊餡させ、
そｌフ後メタンスルホン絃の元分量を、ｌｌン、＜ｔｖ
ホンｉ！ｉｌ’／　８　Ａ　Ｍモル比が５：１となるま
で加え、ついで溶液を凍結乾燥した。

次の組成−を有する生成物＋に９が得られた二８ＡＭ”
　４４．７４　；　ＣＨｍＳＯｌＨ５３，８憾；馬０１
．５唾 生成物は２０憾以上の８！度普で水に可溶であるが一層
の有機溶剤には殆んど溶解しない。

薄層クロマトグラフィはこの生成物が不純物を全く含ま
ないことケ示す。

分析値は次のとおり： 実験式　（４＠ＨａｍＮ＠０ａｏ８＠　・０．５Ｈ倉Ｏ
Ｎ嗟　　　ｓ＊　　　ＳＡＭ噛 計算ｌ　　　９．４７　２１．６５　４４．９分析値　
　９．４１　２１．６８　４４．７カツム嬉ｔｔｉＫ　
ｐ　−）ルエンスルポンｔＩＩｋを用いることを除いて
上記方法を同様にくり返すの塙をうろことができる。分
相データは次のとおシ： 実験式　Ｃｓ＠ＨｕＮ＠０ｘｏＳｓ　・０．５Ｈ１ＯＮ
４　　　　　Ｓ嘔　　ＳＡＭ嘔 計算値　６．６３　１５．１５　３１．４分析１１　６
．８１　１５．４３　３１．５実施例１記載の方法がカ
ラム浴出にかんして同様Ｋｌ！施された。

５Ａｈｓｔ水性の０．５Ｎメタンスルホン＃７０．５Ｎ
＠酸浴液を用いて浴出した。

真空下での濃縮及び活性炭での沖過の後に１溶１１＆を
滴定し、塩８　ＡＭ　＠　１．５ＨＩＳ　０４　’　２
ＣＨｓＳＯｓＨ・０．５ＨｍＯを得るための正確な修の
２つのｅｉｋｔ−添加した。

この塩は＃液の凍結乾燥によシ医薬品市純度で得られた
。

その分析データは以）の通シでめる： Ｎ％　　　　　Ｓ噛　　　　ＳＡＭ憾 計算値　　１１．２６　１９．３０　５３．４分析値　
　１１．１３　．１８．９８　５３．３明らか忙２つの
飯の比′４を変えることＫより、全ての可能な混合塩（
ｍｌｘ＠ｄ易ａ　ｌ　ｔ　、）が−製できる。

溶出Ｋ　ｐ・トルエンスルボンｅｌｌ／ｉｒＬ＠混合物
を用いることを除いて同様にして方法が繰返さｎ１以下
の複塩が得られた： ８　ＡＭ　”　１．５　Ｈｇ８０４　”　２　ＣＨｓ　
−ｃ１８４−８０１）（’　０．５Ｈ＠０その分析デー
タは以下の通）である： 実験式：　ｃｌ＠）ｉ４ｔＮ＠ｏｙｓ４−１０５ＨｓＯ
ＮＡＧ　　　８１　　５）Ｊ１１４ 計算１１　　９．３５　１６．０４　４４．３分析値　
　９．２７　１５．９５　４４．１Ｅ１１２５６ｍｍ＝
１６２ （６ＮＨ諺ＳＯ，） この場合も、添加する２つの咳の比率＋ｒ変えることに
よシ一連の混合塩を得ることができる。

五盈上ユ 凍結乾燥前に溶液に２．５０ｋｌｉ！の無発熱性マンニ
トールを添加することを除いて、実施例１に記載の方法
が繰り返された。

次に、溶液を常法によシ凍結乾燥した。

凍結乾燥支持体としてのマンニトールの添加により、残
留水分−・０．１４の生゛敢物が伸られる。

この様にして得られた生成物は江入条剤形とするのに適
している。

実施例４ 実施例１の方法が行われた。凍結乾燥の前に浴１［Ｋ２
に＃のエアロゾル（粉砕ケイ酸）を箔加し、生成コロイ
ド状懸滴象を凍結乾燥した。

凍結ｗｉ、ｓ支持体としてのエアロジルの拾加により、
残留水分＠　０．２　％の生地物が−得らＩＬる。

この方法により得られた生版物は経口用錠剤とするのに
適している。

上記の方法で！！！造’−ｇｎだ塩について、４５℃で
一定時間後の塩基性ＳＡＭ　　としての残留塩のパーセ
ンテージを測定することによシ安定性テストが行われた
。

指定された時間における残留ＳＡＭパーセンテージは以
下に記載される新規な方法にＬり測定された。この方法
によｆＬばＳＡＭが全ての可能な諏成生成物から完全に
分離されるので最大鞘度の−ｊ定か保証される。

これに対し、ＤＯＷ＠Ｘ　５０イオン交換衛脂の分析カ
ラムによる従来の方法（５ｃｈｌ・ｍｋ　ａｎｄＤａ　
Ｐａｌｍａ　：　Ｊ、　Ｂｌ＠１．　Ｃｈｓｒｏ、　２
２’９　（１９５７））ってＳＡＭの安定性ｔ−計価す
る際にエラーが生じ、実際１プ艮好に表現石扛ていた。

本発明におけるＳＡＭ測定法はＨＰＬＣの使用によるも
のである。

用いられた分析条件： カラＡ　　ＰＡＲＴＩＳＴＯＬ　１０５ＣＸ−２，５Ｘ
２５（１ｍ溶出液　ＨＰ’ＬＣＫ対し２０噛のメタノー
ルを含むｐｈ　４の０．１　Ｍギ緻アンモニウム 渡　Ｍ　　１ｍ／分 ＳＡＭ保持時間　約４００秒 表　１ ＳＡＭ＠ｗ＊　ＣＨ＠８０＠Ｈ １１問弗５８ｉ：（１９Ｇ　（６） 表　　２ 表　　３ ＳＡＭ、　１．５Ｈ１ＳＯ４”ｎ　Ｃｈ＠ＳＯｇＨ表　
　　　４− 表１．２．３及び４のデータから、全く予期せざるとと
に１酸の５当量１ｒ合む”時にＲＡＭ珈が衆人の安定性
をもつことが明らかである。

４゛又は６当量の塙は良好な安定性に４をする力ζ供い
酸当量の塩は不安定性の故に実相には供し得な竜ハ。

ｐＫ（２，５の鳴機スルホン酸を便用する眠りは安定性
扛同じ・母ターンを示すことも明らかである。

鈑の４〜６当１ｔ−言むｐＫ、＞２．５Ｑ顛で塩を作る
ことは不可能であった。

実施例３及び４に従い１ｌＩｌＩ＆′Ｉ乾燥支持体の存
在下で製造された壌につい−しも同じ方法で安定性テス
トが行われた。

その＋ＩＩＩ＋足組釆ｒユ以下の衣５及び６に示さｌ’
Ｌる。支持体の存在下で凍結乾燥が行われる★合の塩の
総合的安定性とともに水分型の急激な減少が明らかであ
る。

表　　５ ＲＡＭ−５ＣＨ，Ｓ（１，Ｈ 表　　　　６ ＳＡＭ＋１５ＣＨｓ　−ＣａＨａ　−８ＯｓＨ塩８　Ａ
Ｍ　”　５　ＣＨｌＳ　Ｏ２Ｈ＆ヒＳＡＭ＃５　ＣＨｌ
−ＣａＨａ−８ＯｓＨは広範囲の医薬品スクリーニング
試験でテストされ、全ての場合において、ＳＡＭＫ結台
するアニオンに無関係の棲めて興味ある粘性及び毒性を
示した。新規塩の活性は、メチル基のドナーとして、リ
ピド（１ｉｐ１ｄ　）、ｆａチド（ｐｒｏｔｊ、ｄ＠）
及びグルシド（ｇｌｕｃｉｄｅ　）の代謝の基礎市反応
に作用する奴多くのトツンスメチラー・ゼ＃素の天然基
負として働く組に実質的に依存（７ていることが一層さ
れた。

かくして、この新規塩のｉ伸性は、４５’（’！までの
温度で絶対的に安定な５−７ｒノシルメチオニンを作り
、従ってＳＡＭ”Ｋよりｌ内性化される生物学的プロセ
スで干渉する有毒減成生成物の形成の危険性なしに人体
の組織におけるトランスメチル化活性をｙ、　ｏ　ｏ　
壬利用できるという点にもとついでいる。　　゛」１Ｌ マウスにおける急性桁性がしらべられ、次の値が両方の
塩について得られる： 峰ロ投与によるＬＤｉｏ＞３．！Ｆ／ゆ静脈内投与Ｋｊ
るＬ　Ｄｉｏ　　！、　１　、！Ｔ’　／ｋｌｉ’許容
度及び慢性＃Ｓ性テストがウィスター及びスプラグード
ゥリイストックのねずみについてΔミ取物をＩＢ当Ｆ）
２０ｘｖ１４１２月間投与することにより行われた。処
理のＰｒシにさいし種々の器官や組織には柄埋字的変化
は見られなかった。

胚子奇形発生テストが兎について行われた。

最大の治療投与１＃工、９１０侶多い′塩の投与第が与
えられるとき胚又は来電胎児について胚子奇形作用又は
奇形作用は見られなかった。

２００Ｑ７に９までの静脈投与景は兎における発熱性徴
候を生じなかった。

兎やねずみＫおける４０Ｉｌｖ／ｍの静脈投与は頚動脈
圧、心臓及び呼吸器の振動数あるいは心電計トレースに
何の変化も生じなかった。

筋肉内注射の局部許容度に投与を３０〜６０日間くり返
した後でも、着た兎の外耳の周辺静脈における静脈内注
射の局部許容度はすぐれていた。

薬理作用 ねずみについて行われた一層のテストは新　　。

しい塩がハンドラーに準拠する過脂質−通蛋白貴ダイエ
ットによシ訪起逼几る肝脂゛肪症に　　　ｊおいて及び
ＳＡＭ＋を１０ｑ／に６Ｉｆ投与すると保護的及び分解
的作用を奏することが判明した。

たとえばトリトン・Ｓに工り訪起される、ねずみにおけ
る実験的過脂肪血症では新しい塩は用いられた投与蓋、
即ちｌＯ〜／に９（ＳＡＭ　で表現して）にかんして、
脂肪欠乏抑症活性の他の薬剤の棚台より一層強力であっ
た。

コレステロール及びフルクトーズＫＩＫｔｒダイエツト
によりアテローム性動脈硬化症とされた鶏においてｌＯ
〜／ゆの菫で新しい塩を非軽口投与するとコレステロー
ル抑症をへらし胸部及び腹部大動脈及び普だ一基部の小
さい細管Ｋかんするコンチロールにおいて遭遇する病巣
を有利に軽減する。

リン脂質代謝物にかんして、補償されない脂肪症のねず
みの肝ｌｌ１ｌ織でフォス７アチジルコリン蓋が増大す
ることが実績的に見出された。

フオスファチソルコリ／の明らかな増１１ホ又β／αリ
ポプロティン比にニジ化ずる実験的変ｉｉＫおける血液
内のα−リポノロディンの消費により決定さ゛れた。

これらすべてのテストは脂質代謝の憤゛化における新し
い塩の治癒的効果を明らかに示した。

ねずみＫついて行われた別の一連のテストによシｌｑ／
に９の投与量が肝臓及び筋肉レベルでの貯蔵グリコーゲ
ンの累積を生じこれは組織化学的方法及び定量分析の両
方に工り実証されることが判明した。アロ中サンにより
誘発された実験的糖尿病において、血糖ｍを通常に決す
るのに必要なインシュリンＩＩＦｉ８ＡＭ＋の０．５ｖ
／ｋｇに当量な投与によりかなり減少された。

この一連のテストは本発明による新しい化合物のグルシ
ド代謝に対する明瞭な積極的作用を実証した。

ｉ＆後に、実験的Ｋｌ’イ／ｆイス！ロチインイアを誘
発させたねずみを８ＡＭ１０１ｖ／〜の量で処理した。

この生成物は実質的にアルプ症値を通常に戻し、かくて
者しい蛋白質同化作用活性を示すことが見出された。

この及び他の類似のテストは単純蛋白質代謝の機能不全
における勅しい生成物の治癒的な力を鮭明した。

要するに１前述の薬理学テスト及び新しい塩の活性を人
間の生体のすべてのレベルで探究させることができた多
くの他のテストにもとづいて、新しい生成物の活性が、
急性及び慢性の肝臓中毒の場合における肝臓学で、抗抑
うつ症として神経学で、また変形関節炎の場合における
骨学で１尿的に確立された。

人間の治療の多くの他の分野での活性が研究中である。

新しい塩ｒｉｔ＋口に工りあるいは筋力内又は静脈内ε
射ＫＬり投与さｎる。

他の可能な投与形態は生薬、接眼装置、アエロゾル用の
液体あるいは局庚応用のための形態である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　　次の式、 ゝ゛、 Ｋ　　　　　（式中ＸはｐＫが２．５未満の有機スルホ
   ン酸の酸基である）のＳ−アデノノルメチオニン（ＳＡ
   Ｍ）塩。 （２）次の式、 （式中ＸはｐＫが２５未満の有機スルホン酸の酸基であ
   る）のＳ−アデノシルメチオニン（８ＡＭ）塩の製造方
   法において、粗８ＡＭ塩の＃細氷浴液を剥酸イオン交換
   掬脂カラムを通過させてｎ製し、そのＳＡＭｔ−所定の
   ｋｌＸ＠の希釈水溶液で解崩させ、　　、化学Ｓ鵬１１
   を正確忙達成するため修景な上　　゛配酸の獣を浴出液
   に加え、ついでこれｔ＋Ｓ縮し、高純度塩を凍結乾燥に
   よシ分離することを特徴とする、上記方法。 （３３８ＡＭ水＃！濠のｐｉｔを６ないし７、好ましく
   Ｆｉ６．５ｊｃｊＪ！！する第２項の方法。 （４〕弱酸イオン父換側脂がアンパーライトＩＲＣ５０
   又はアンバーライトｃＧ５ｏでおる第２項の方法。 （５）浴離削として用いるＨＸＩ！＆浴欣が０．　Ｉ　
   Ｎの濃度である第２項の方法。 （６）化学ｔ＊ｔにかんする）ＩＸ酸の不足が工業的濃
   縮水溶液の形で浴出准に加えられる第２項の方法。 （７）溶出液が化学針論ｉＫかんして過剰のＨＸ酸を會
   むとき、この過剰が強塩基イオン交換樹脂にょシ消去さ
   れる第２項の方法。 （８）　　溶出液がＳＡＭ５０ないし１００．＠／ｌの
   １１１度に濃縮される第２項の方法。 （９）　　凍結乾燥が不活性物質、好１しくにマンニト
   ール又は粉末珪酸の存在）で行なわれる第２項の方法。 ＯＱ　　活性成分として、式 （＆中ＸｔｉｐＫが２．５未滴の有機スルホン酸の酸基
   である）の塩と治療学的に受入れられる賦形剤及び希釈
   剤とを混合してなる治療活性組成物。