JPS5841885A - 新規なチアミンコバルチクロロフイリン錯化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明線、コ／（ルチクロロフイリン錯化合物１分子に
チオール型テア（７１分子を配位させた新規なテアイン
コバルチクロロフィリン錯化合物に関する。

本発明によって得らｎるテアばノコパルチクロロフイリ
ン錯化合物は、医薬として有用な物質であ）ｆｌえば消
化管系潰瘍において医ｌｌ効釆を有する他に多くの生理
的作用が期待できる。

従来テアぽンコパルテクロｐフィリン系錯化合物につい
ては％会昭５０−２００５号および特公昭５１−２８６
８７号各公報に記載さｎた技術が知らｎている。すなわ
ち養分１８５０−２００５号公報においてはクロロフイ
リ７の食塩飽和１駿水溶１［Ｋコバルト塩または鉄塩を
投入しそしてｐＨ９ｌｌｌ整（ｐｌｉ５〜７）Ｋよｐク
ロロフィリンＨＡルト鋤化合物を析出させ次いでテアオ
ンのアルカリ性浩液を加えて再度ｐＨを４〜６ＫＩｌ１
１整して生成物を得ている。

ｔた製分１８５１−２８６８７号公報の方法はチアばン
添加時のｐｕｔ一層アルカリ性餉として反応を行う仁と
を骨子としているものである。しかしながらいずｆ’Ｌ
Ｋしてもコバルチクロロフィリン錯化合物に対して１轟
量のテアインが配位したすなわち１分子のチオール型チ
アイ／を１配位子とし次チアインコバルチクロロフィリ
ン鉛化合物はとｎまで確認さｎておらず、またそｎを造
択的に＃！造する方法も知らｎていない。

従って、本発明によｎば、コバルチクロロフィリン錯化
合物１分子にチオール型チアハフ１分子が配位した新規
なテアずンコパルチクロロフイリン錯化合物を提供する
ものである。本発明のテアをンコバルチクロロフイリン
錯化合物は次の工１！ＩＫよって製造される。第１工程
としては水不含酢酸溶液好ましくはアルコール性例えに
メタノール性酢酸溶液としたタロロフイリ７に１１素の
存在下に酢酸コバルト塩のよりな二価コバルト塩を作用
させて錯化することＫよりコバルチクロロフィリン錯化
合物とし、このもの管真空減圧下に溶媒を除去して高純
度の結晶コバルチクロロフィリン錯化合物をうる０＃！
２工程として鉱島１工程で得らｎた高純度コバルチクロ
曹フィリン錯化合物をメタノールに溶解し、あらかじめ
アルカリ性メタノール溶液としたチアインを混合反応さ
せてテアインコバルチクロロフィリン錯化合物を形成さ
せそして反応混合物からメタノールを可及的に除去する
。最後に精製工程として上記のようＫして得た粗テアイ
ンコバルチクロロフィリン錯化合物をベンジルアルコー
ル／水系による液−液抽出（未反応のチアインおよびそ
ｎから由来し友分解物の除去）そしてシリカゲルクロマ
トグラフィおよびゲル濾過クロマトグラフィ（りｐロフ
イリンおよび反応中に生成した副生成物の除去）Ｋ付す
る。を次他の手段としては粗テアインコバルチクーロフ
ィリン俸化合物を例えば含水アルコールに溶解し、Ｉｌ
ｉ！水性多孔性ポリマーのカラムクロマトグラフィーお
よびゲルー過りｐマドグラフィに封する方法がある。

以下に本発明を更に具体的に観明する。本発明において
原料として使用さｎるクロロフィリンは植物葉縁体由来
のものであシ、例えば桑葉、アルファルファ、チモシー
グラス集などの高等植物葉、りｐレラ、セネデスムスな
どの藻ＷＡ％あるい＃ｉまた植物葉緑体の高度濃縮粒で
ある垂真などから溶剤抽出、鹸化および酸性化ｔそして
溶剤分別抽出、分別晶析およびクロマトグラフ分離など
の精製操作によ〕得ることができる。

このものは主としてり四リン−６からなるがクロ９７９
６％バーブリンフなどの一部混入することは差支えない
。

原料のクロロフィリンを酢酸溶液の状態となすＫあたっ
てアルコールを共存せしめるのが好オしく、メタノール
、エタノール、インプロパツールなどが利用できるが好
ましくはメタノールである。この場合酢酸含量社５〜８
０％好ましくは１０〜！ｌＯ％である。二価コバルト塩
としては塩化コバルト、硫酸コバルト、酢ｌｌコバルト
などが利用できるが酢酸コバルトが好ましい、この二価
コバルト塩祉例えばメタノール溶液として反応に供さｎ
る１反応源度は常温から５０〜６０℃までの範囲であり
望ましく嬬４０〜５０℃である。この除水の存在はてき
るだけ避けるのが生成物の品質および収率の点で肝要で
ある。

本発明においては前記の反応を酸素の存在下に行うもの
である１発明者は極々検討の結果、過酸化水素の添加は
不安定なりロリン１１に対する影響を最小１にとどめそ
の結果高純度の生成物を得らｎることを発見した。すな
わち反応系に導入すべＩコバルト塩の溶液に予め過酸化
水素を添加することによシ通常数時間を必要とする反応
Ｆｉ１時間以内に完了させることができる。

反応を空気または酸素を吹込みつつ実施することも可能
である。反応完了彼真空濃縮によシ浴媒を除去するかあ
るいは反応液に反応生成物が不溶化する溶媒′ｆｒ添加
して生成する沈殿物を戸別することｋよ〕高純度コバル
チクロロフィリン錯化合物が得られ皮、前記反応生成物
か不溶化する溶媒としては例えば水、エーテル、インプ
ロピルエーテル、クロロホルムが挙けらｎる。

また他の方法としてアルカリを加えてｐＨ＠整をして沈
殿晶析せしめることもできるがこｒｔは工業的に問題の
みならず品質上にも影響を与えるのでさほど好ましくな
い。本発明者轡の前記知見によれば生成したコバルチク
ロロフィリン錯化合物はアルコール酢酸混合溶媒ではあ
る程度加熱しても安定であシ、高純度コバルチクロロフ
ィリン錯化合物を反応液から直接に減圧＃Ｉｍによシ回
収しうろことは意想外であった。

このようｋして得らｎたコバルチクロロフィリン錯化合
物は高純度でありその１１次の工程に提供できる。コバ
ルチクロロフィリン錯化合物とチアずン（ビタイ７Ｂ１
）の塩酸塩、硝酸塩もしくは遊離塩基のメタノール溶液
ｔ　ｐＨ７〜１１に―整し原料のチアミンをチオール撒
として混合反応させる。コバルチクロロフィリン錯化合
物１モル当シ２モルよシ少ない量のチアはンを便用すべ
きである。実質上等モル量を使用するのが好ましい。こ
の際ｐＨ０−整には必要によ〕アンモニア緩衝液ｔ−利
用することができる１反応社ｗｋ、素を蓮断しつつ好ま
しくは透光条件下で室温〜５０℃において実施するのが
望ましい。

反応液を減圧濃縮すると粗チアインコ／２ルテクロロフ
イリン鉛化合物が得らｎる。Ｓ製のためＫはこｎｔイン
ジルアルコールに溶解しそして水で洗浄して未反応のテ
アインおよび七ｎから由来した分解物を水層に移行させ
る。

この過程で目的物たるテアはンコパルテクロａフィリン
錯化合物は損失することがなくｔた安定にベンジルアル
コール相Ｋｗまる。このベンジルアルコール相をシリカ
ゲルのカラムを通過させてりｐマドグラフ分別を行なう
・こ−の際ベンジルアルコールを濃縮すること社必賛な
い。

メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトンなど
の単独浴ｊｌＩ！または混合溶媒を展−剤として利用で
きるが、工業的にはメタノールが望ましい、ベンジルア
ルコールが溶出した後に所定のテアインコパルチクｐロ
フイリン銀化合物が溶出される。その際可視部吸収スペ
クトル吸光比および薄層クロｉトゲラフによって所定生
成物の前後に流出する不純物および分解物を排除するこ
とフ（できる＝またこのシリカゲルカラムクロマトグラ
フィによって次に行う最終精製操作たるゲル濾過カラム
クロマトグラフィにおけるゲル担体の汚染もをくするこ
とができる。

ｔた他のＰＩＩ＃法としては粗テアインコバルチクロ四
フィリン錯化合物を３θ〜７０％含水アルコールに溶解
してｐＨ３〜７％　好ましくはｐＨ４〜６ＫＩＩ整し、
疎水性多孔質ポリマーのカラムクｏ　ｖ　）グラブ分別
を行うこともできゐ、前記多孔質ポリマーとしては樹脂
の単位表面積が大きい程好適であるが、通常１００　ｍ
２７ｆ以上好ましくは４　Ｑ　Ｏｍ２７ｆ以上のもので
ある。多孔性合成樹脂の孔径は通常ｓ、ｏＸ以上が好適
であ夛、且つ平均孔径が大きいほど好ましい結果が得ら
ｎる。これらの多孔質ポリマーとじて扛例えば２チレ／
−ジビニルベンゼン共重合領アンパーラ（トＸｋＤ　＠
＋　２　（ローム・アンド・ハース社製）％ダイヤイオ
７　ＨＰ（三菱化成工業株式会社製）〕が挙げらｎる。

前記のように積層さｎたチアミンコバルチクロロフィリ
ン錯化合物区分をゲル濾過クロマトカラムを通すことに
よって一定の品質のチアミンクバルチクロロフイリン錯
化合物をうる。ゲル濾過クロマトグラフ担体としては例
えばセファデックスＬＨ−２０などのデキストラノゲル
またはト璽ノセールＭＷ−４０などの合成ゲルＰ遍剤が
望オしい、展開溶媒としてはメタノール、エタノール、
アセトンなどが適当であるが望ましくはメタノールであ
る。チアずンコパルチクロロフイリン匈化合物分画区分
の確認は可視部吸収スペクトルおよび薄層クロマトグラ
フによって行う− このようＫして得られ几チアインコバルテク＆！ロフイ
リン錯化合物区分から濃縮乾（支）−噴霧乾燥などによ
シ黒縁色光沢性微粉末状のチアばンコパルチクロロフイ
リン錯化合物が得らｎる。

仁のものは極めて純度が高く、このまま医ＪＩ＆品原料
として提供できるものである・ このよう圧して得念チアばンコパルチクロロフイリン錯
化合物は次の推定構造式を有する。

または ０４６Ｈ５５０ｏＮ６０１　（１Ｂ（分子量９７１．０
８）としての元素分析結果は下記のとおりであシ、この
実測値はクロ、ロフイリノ（クロリン・４）１分子に対
してコバルト１１ＩＬ子およびビタばンＢ１　（チオー
ル型チアイン）１分子が結合し友ものとする理論値とよ
く一致する。

０ｔ％ＪｉＩ（％ｊ　　　Ｍ％Ｉ　　　０％　　　８４
％Ｊ　　００（％）理論値：５６Ｊ３９　５．７２　１
１．５４　１６．４８　　ｕＯ４０７実−値：５７．６
３　５．５５　１１．７６　１７．０７　　＆２５　５
．９９こζに得らｎたチアイノコパルチクロロツイリン
錨化合物社更に次のような物理学的性状を有する。

１）　　本発明のチアインコバルチクロ四フィリン錯化
合物は、弱い！＃異臭をもつ暗緑色の不定形ないし光沢
のある黴塊である。このものはメタノール、エタノール
にきわめて溶けやすく、水ＫＦｉ溶ｆｆＫ＜＜、エーテ
ル、クロロホルム、ベンゼン、酢酸エテル忙はとんど溶
けない。

２）本発明のチアインコバルチクロロフィリン錯化合物
約１００１１５１を精密に秤量しｔメタノールを加えて
溶解し、正確に５０−とする、その液１−をと夛、メタ
ノールを加えて正確＃ｃ５〇−とする。さらに％この液
２−をとル、メタノ−ル５−を加えて試料液とする。試
料液をメタノールを対照液として日本薬局方一般試験法
陣光度掬定法」により可視部吸収スはクトルを沖」定す
ると波長４２８−４３２ｎｍおよび６４０〜６６７ｎｍ
ｌｃ極大吸収を有し、吸収の強さは４２８〜４３２ｎｍ
＞　６４０〜６６７　ｎｍの順である。

３）赤外線吸収スペクトルによる分析 本発明によるチアずンコバルチクロロフイリン化合物、
コバルチクロロフィリン（コバルチクロリン・６）、お
よびクロロフィリン（クロリン６４）Ｋついて赤外吸収
スペクトル（ＫＢｒ錠剤法）鵞欄足し友、その赤外スは
クトル祉そｎぞｎ第１．２および３図のとおりであった
。原料クロロフィリンのＮＨおよび水に由来する３４０
０ａｍ−１の吸収（第３図）が、コバルチクロロフィリ
ン錯化合物では３４３０３１−ＩＫ移行し、それと同時
にコバルチクロロフィリン錯化合物（第２コバルチ錯化
に由来す：ｂ　１０８０ｍ−１（ｙ　０ｏ−Ｎ）の吸収
が生ずる（第１図）。このことからテアインコバルチク
ロロフィリン及びコバルチクロロフィリン錯化合物中の
コバルト金属は、原料クロ田フィリンのピロール核のＭ
原子４個と錯結合していることが推棚される。ｔた、本
発明の錯化合物の１６２５ａＲ−１（Ｎｌｌｌ）および
１０４０１１−１（０−０）のテアイン（ビタミンＢ１
）Ｋ由来すると考えらｎる吸収（前者はチアインの第１
７ｔ７に由来、後者はテアインの一０２Ｈ４０１１Ｋ由
来）は、コバルチクロロフィリンならびにりａａフィリ
ンＫｌｉ存在しなかったものである。

以上の結果から、本発明の錯化合物中のコバルトはクロ
ロフィリンのピロール核のＭ原子４個と配位結合してお
シ、そして本発明の錯化合物中ＫＦｉテアイノが結合し
ていると推定さｎた。

４）可視部吸収スペクトルによる分析 本発明のチアインコバルチクロロフィリン化合物、その
前駆体であるコバルチクロロフィリン錯化合物ｔおよび
原料であるクロロフィリンの三者について、メタノール
溶媒、層長１０ｓｗａで３４０〜７００ｎｍの可視吸光
測定を行なった。可視部吸収スペクトルを第４図に、そ
して結果のｔとめを次表に示した・ 可視吸収スはクトルにおける極大吸収部本発明の錯化合
物ならびにコバルチクロロフィリン錯化合物の可視部吸
収スペクトルにおいて社クロロフィリンの特徴的な５０
０〜５３０　ｎｍの吸収帯がほとんど消失し、赤色バン
ド蝶着干短皺長部へ、ｔた、ツレ−のバンド（８ｏｒｅ
ｔ’ｓ　ｂａｎｄ）は長披長部へ移動しｓｇ＠［ｍ減少
している。こｎらの変化は本発明の錯化合物およびコパ
ルチクｗａフィリン錯化合物において、りロロフイリン
と金属コバルトとの錯結合を示すものと考えら詐る。

本発明により得らｎるチアインコバルチクロロフィリン
化合物の毒性は次のとお９である。

ストレス法および拘束コーチシン法による実験的胃潰瘍
に対するチアインコバルチクロロフィリンの薬理学的作
用を次に示す。

動物としてはウィスター系雄性ラット（体重２００〜！
００２）を各群１０匹とした。投与薬剤はすべて生理食
塩液に溶解して用いた。投与量Ｆｉ１日当り１００　Ｑ
／Ｄ体重とし、対照である生食群には生理食塩液を１ｄ
ずつ投与した。ストレス法における急性潰瘍の予防試験
においてはストレス負荷前７日間連続経ロ投与した。ま
た拘束コーチシン法における慢性潰瘍の治療試験では拘
束の除去後７日関連続経口投与し友。

ストレス法による実験的潰瘍の生成は「ＯＭｍ。

Ｐｈａｒｍ、Ｂｕｌｌ、Ｊ第１２巻第４６５頁（１９６
４）Ｋよｐ％また拘束コーチシン法による実験的潰瘍の
生成Ｆｉｒ日本消化器病学会誌」第６２（１２）巻ＩＩ
　１５３３頁（１９６５）Ｋよった。結果は次表に示す
。

ストレス法 拘束コーチシン法 次に臨床試験結果を示す。

試験方法 チアインコバルチクロロフイリ／錯化合物を５＃含有す
る胃溶性被覆の内服剤１に１日４囲（毎食前１時間と就
寝前）１回につき１錠ないし２飼を６週間投゛与した。

その試験結果を示せば下表のとおシである。

以上の試験結果から明らかなように、本発明の活性成分
化合物は、静脈内注射、皮下注射、筋内内注射、経口等
の方法で投与さｎ、特に経口投与シよび筋肉内注射が好
ましい。成人の治療に用いられる場合の睨与ｔは、−日
に１０〜１２０＃の範囲特に２０〜４０ηが好ましい。

次に本発明の具体的な製剤例を挙けるが本発明は以下の
製剤例に限足さｎるものではない。

本発明の活性成分を経口投与する場合には錠剤％顆粒剤
、粉末剤とすｎＪｄよ〈特に顎粒斎１および粉末剤扛必
９に応じてカプセル＊Ｊとして単位量投与形態とするこ
とができる−こｎら経口投与用固形剤扛通常用いられる
賦形斉１、例えば無水ケイ酸、メタケイ酸アルミン酸マ
グネシウム、合成ケイ酸アルミニウム、乳糖、砂糖、と
うもろこし殿粉、微結晶セルロース、ノ〜イドロキシゾ
ロピルースターチ、ｔたはグリシン、結合剤例えばアラ
ヒ゛ヤゴム、ゼラチン、トラガント、ハイドロキシプロ
ピルセルロース、ｔたはポリビニルピロリドン、ｆＡ清
御１例えばステア１）ン酸マグネシウム、タルクｔたは
シリカ、崩壊剤例えば馬鈴薯殿粉、カルボキシメチルセ
ルロースカルシウムあるいは湿潤却ｊ例えばポリエチレ
ングリコール、ソルビタンモノオレート、ポリオキシエ
チレン硬化ヒ實シ油、ツウ１Ｊル硫酸ナトリウム等を含
有しても良い。錠押ｊは常法に従ってコーティングして
もよい。

経口用液体製剤は水性または油性乳濁剤溶液、シロップ
剤等にすｎばよく、あるいは使用する前に適当なビヒク
ルで再溶解しうる乾燥生成物にしても良い。このような
液体製剤は普通に用いらｎる添加剤例えば乳化補助剤で
あるソルビットシロップ、メチルセルロース、ゼラチン
、ハイドロキシエチルセルロースなど、また乳化剤例え
ばレシチンソルビタノモノオレート、ポリオキシエテレ
ノ硬化ヒマシ油、非水性ビヒクル例えば分別ココナツト
油、アーモンド油、ラッカセイ油、防腐剤例えｔｆｐ−
ハイド四キシ安息香酸メチル、ｐ−ハイドロキシ安息香
酸プロピルまたはソルビン酸を添加してもよい。

更にｔたこれらの経口投与用製剤ＫＦｉ必畳に応じて保
存剤、安定化剤などを含有せしめても艮いＯ 次にこの化合４ｙｔ−注射剤に用いる場合には油溶液、
乳化液、水溶液のような形１ａＫすｎば良く、仁れらの
溶剤は通常用いられる乳化剤、安定化剤などを含有して
も良い。

とｎら組成物は投与方法によシ当該化合物を１％以上、
好ましくは３％〜６％を含有させることができる・ 実施例　１ りｐロフイリン（クロリン・６）５．Ｏｆをメタノール
５００ｄおよび木酢＃１００ｍの混合溶媒に溶解する、
別に酢酸コバルト４水塩１αＯｆｔ″メタノール５０ｍ
に溶解したものに５０％過酸化水累水Ｑ、７５ｗ１ｆ加
え、そして得らｎる溶液を先Ｋ１１ｌｌたクロロフィリ
ン液に５０℃で攪拌しつつ滴下する。さらに５０℃で１
時間攪拌して反応を完結させる６反応混合物から不溶物
ｔＦ去後、減圧濃縮乾固し、セして残渣を水洗および乾
燥してコバルチクロロフィリン４、１２　Ｆを得る（収
率７１．４％）。

コパルチクロロフイリ７４０ｔを２８０−のメタノール
に溶解する。別にチアミン塩酸塩！Ａ、Ｏｆをメタノー
ル１８０ｄＫ溶解し且つ苛性ソーダのメタノール溶液で
ｐＨ１αＯＫ調整した後、ここに得られる溶液をコバル
チクロロフィリンメタノール溶液に４０℃窒累気流中で
攪拌しつつ滴下する・さらに、窒素気流中４０℃で３時
間攪拌する０反応混合物から不溶物をＰ去した後、減圧
濃縮して粗チアインコバルチクロロフィリン＆１６Ｆを
得る（収＄１０９．２％）。

粗チアインコバルチクロロフィリン５．Ｏｆｔばノジル
アルコール５０４に溶解し、各回５〇−の水で２回洗浄
し、次いでこのベンジルアルコール溶液をシリカゲルカ
ラムに仕込み、アセトン／メタノール（５：２）５００
−で洗浄して不純物を除去した後、メタノール４００−
で目的物区分を溶出する。溶出液を減圧濃縮して精製チ
アイン；パルチクロロフイリ７６４５■を得る（収＄１
２．９％）。

セファデックスｐｍ−２ｏ　ｓ　ｏ　ｆおよびメタノー
ルで３ａ＋Ｘ３Ｑａａのカラムを調製し、こｎに精製テ
アζンコパルチクレロフイリ７６００厘ｇのメタノール
溶液を載せ、メタノールで展開溶出しそして分画する。

不純物区分を除去して得らｒした溶出液を減圧濃縮して
チアインコバルチクロルフィリン３８０〜を得る（収率
６ム５％）。

クロロフィリン（クロリン・６）からの通算収率Ｆｉ６
．３７％である。

実施例　２ クロロフィリン（クロリンｅ６）　５．　Ｏｆをメタノ
ール５０ＯＮｔおよび木酢＃１１００ＩＩ１の混合溶Ｉ
ＩＸＫ溶解する。別に酢酸コバルト４水塩１αＯｔをメ
タノール５０−に溶解して得られ友治液を先のクロロフ
ィリン液に空気を流通しつつ４０℃で攪拌しながら滴下
する。さらに、空気流通下に５０℃で５時間攪拌して反
応させる。不溶物をＰ去後、反応液を減圧Ｓ縮乾固しセ
して残渣を水洗および乾燥してコバルチクロロフィリン
五８８ｔを得る（収＄　６７．２％）・コバルチクロロ
フィリン五５ｆを２５０−のメタノールに溶解する。別
にテアくン塩酸塩２．６３ｆｔメタノール１６０−に溶
解しｐＨ１［ＬＯＫ−整した溶液を前記のコバルチクロ
ロフィリンのメタノール溶液に４０℃で攪拌しつつ滴下
する・滴下後さらに５時間攪拌を継続する。不溶物ｔＰ
去した後、反応液を減圧Ｉｍ！縮する・次いで残渣をエ
タノールＫ１１ｌ解して不溶物をＰ去し、そしてＰ液を
減圧濃縮して粗テアインコ／シルテクロロフイリン４．
６２　Ｆを得る（収率９五７％）− 粗チア（ンツバルチクロロフイリン４．５　ｆ　ｔベン
ジルアルコール４５ｍに溶解し、各回４５−の水で２回
洗浄し、次いでとのにンジルアルコール溶液ヲシリカゲ
ルカラムに仕込み、アセトン／メタノール（！１：２）
　５００−で洗浄して不純物を除去した後、メタノール
４００−で目的物区分を溶出する。溶出液を減圧濃縮し
て精製テアずンコパルチクロロフイリノ７５４Ｑｌを得
る（収率１＆３％）Ｃ ト曹パールＨＷ　−４０Ｆおよびメタノールで５１×３
０１のカラムを勇製し、とｎＫ精精製チアインコバルチ
クロロフリリンフ００ｑメタノール溶液を載せ一メタノ
ールで展開溶出して分画する。不純物区分を除去して得
た分１ｊｔ−減圧績縮してチアずンコパルチクロロフイ
リ７５６９増を得る（収率５２．７％・）、クロロフィ
リン（クロリンｅ４）からの通算収率５．４１％である
・実施例　３ クロロフィリン（クロリン・６）５．Ｏｆをエタノール
５００−および氷酢酸１００ｓｄの混合溶媒に溶解する
。別に酢酸コバルト４水塩５．Ｏｆをエタノール１００
ｓ＋＋［溶解して得た溶液を先のクロロフィリン液に空
気を流通しつつ４０℃で攪拌しながら滴下する。さらに
空気流通下５０℃で５時間攪拌して反応管完結させる・
不溶物をＰ去後、反応液を減圧鎖線乾固しセして残渣を
水洗および乾燥してコパルテクロロフイリ７１４５ｆｔ
得る（収率５９８％）。

コバルチクロロフィリン五〇ｔを２１０ｍｇのエタノー
ルＫｆ＃解する。チアミン塩酸塩２．２５ｆをｘｐノー
ル２７０ｍＫ溶解しｐＨ１（ＬＯＫＭ整した溶液を前記
のコバルチクロロフィリンエタノール溶液に５０℃で攪
拌しつつ滴下する。その後さらに３時間攪拌する。不溶
物をＰ去した後反応ａｔ減圧濃縮して粗チアインコノ（
ルチクロロフイリｙ４．４１　ｆｔ−得る（収率１Ｇ４
３％）。

粗チアミンコバルチクロロフィリンｔｏｒｅベンジルア
ルコール４０−に溶解し、各回４〇−の水で２回洗浄し
、次いでこのベンジルアルコール溶液をシリカゲルカラ
五に仕込み、アセトン／メタノール（Ｓ：２）５００−
で洗浄して不純物を除去した後、メタノール４００ｄで
目的物区分を溶出する。所望の溶出液を減圧濃縮して精
製チアミノ＝バルチクロロフイリ７４３２呼を得る（収
率１α８％）・ セファデックスＬＨ−２０５Ｏｆおよびメタノールで３
ａｍＸ３Ｑａ＋のカラムを調製し、その頂部ＫＮ製チア
インコバルチクロロフィリン４００■のメタノール溶液
を載せ、メタノールで展開溶出して分画する。不純物区
分を除去して得７を溶出液を減圧濃縮してチアをンコバ
ルチクロロフイリ７５２６■を得る（収率８１．５％）
・クロロフィリン（クロリンｅ６）からの収車は５．．
４９％である。

実織例　４ りｐロフイリン（クロリフ・６）５．Ｏｒをメタノール
５００−および氷酢酸１００ＩＩｔ、の混合溶媒に溶解
する。別に塩化コバルト６水塩１αＯｔをメタノール５
０ＩＮｔＫ溶解して得た溶液を先のクロロフィリン液に
空気を流通しつつ４０℃で攪拌しながら滴下する。さら
に空気流通下に５０℃で３時間攪拌して反応を児結させ
る。不溶物會−去俵、反応液を減圧濃縮乾固しセして残
渣を水洗および乾燥してコバルチクロロフィリン４、４
５　Ｆを得る（収率７７．１％）。

このコバルチクロロフィリン４．Ｏｆを２８０−のメタ
ノールに溶解する。チアイン硝酸塩五〇ｆをメタノール
１８０ｍＫ！解しＩ）１１（ＬＯＫ調整した溶液を前記
のコバルチクロロフィリンメタノール溶液に４０℃で攪
拌しつつ滴下し、さらに４０℃で３時間攪拌する。不溶
物を２去した後１反応液を減圧濃縮して粗チアインコバ
ルチク四ロフイリン６．４８Ｆを得る（収車１１４９％
）・ 粗チアイノコバルチクロロフィリン＆Ｏｆをベンジルア
ルコール６０−に溶解し、各回６〇−の水で２回洗浄し
次いでこのベンジルアルコール溶液をシリカゲルカラム
に仕込み、その後アセトン／メタノール（３：２）　５
００−で洗浄して不純−１除去する。メタノール４００
−で目的物区分管溶出し、溶離液を減圧濃縮して精製チ
アインコバルチクロロフィリン４５３ｗ１ｇを得る（収
車７．５５％）・ セファデックスＬ）Ｉ−２０５０ｔおよびメタノールで
３ｃｘＸ３０（Ｘのカラムｔ−ｐ製し、このカラムの頂
部に精製チアミンツバルチクロロ°フィリン４００噌の
メタノール溶液を載せ、メタノールで展開溶出して分画
する。不純物区分を除去して得た溶液を減圧濃縮してテ
アミンコパルテタロロフイリ７５８０■を得る（収率５
Ｑ、５％）。

クロロフィリン（クロリン・６）からの収率は五３６％
である。

！Ｉ！總例　５ クロロフィリン（クロリフｅ６）　Ｓ、ｏ　ｔをメタノ
ール５００−および木酢９１００ｍｇの混合溶媒に溶解
する。別に酢酸コバルト４水塩１０．Ｏｆ管メタノール
５０ｍＫ溶解し几溶液にさらに３０％過酸化水素水α７
５−を加え、得らｎる溶液を先に調製したクロロフィリ
ン溶液に５０℃で攪拌しつつ滴下する。さらに同温度で
１時間攪拌した後攪拌を続けながら室温まで冷却する。

反応溶液から不溶物を２別した後減圧下に溶剤を留去し
得らｎた乾固物を約１００−の水に懸濁させ、グラスフ
ィルターで戸遇し、グラスフィルター上で同量の水を流
して洗浄する０次いで残渣を乾燥してコバルチクロロフ
ィリン４．２６ｔ（収率７五７％）ｔ−得た。

このコバルチクロロフィリン’に５００ｄのメタノール
に溶解する。別にチアイン塩酸塩３．２゜ｆをメタノー
ル１９０−に溶解しさらに約５％の水酸化ナトリウムを
含有するメタノール溶液でｐＨ１ａ５に調整す、−・こ
の溶液を先のコバルチクロロフィリンのメタノール溶液
に４０℃にシいて攪拌しつつ滴下する１滴下後さらに！
１時間攪拌を継続する６反応中に生じ几不溶物ｔＦ別し
そしてＰ液管減圧下で濃縮乾固して粗チアインコバルチ
クロロフィリン５．１ｓｔ（収率６五５％）を得た・ 次にあらかじめ４０％メタノールにダイヤイオンＨＰ−
２０６０ｍを懸濁させカラムに充填し、疎水性多孔質ポ
リマーのカラムを調製する。

前記の粗チアばンコノイルチクロロフイリンを４０％メ
タノール約１００＋ｄＫ溶解し、約５％の水酸化ナトリ
ウムを含有するメタノール溶液でｐＨ５，ＯＫ調整した
後、生じた沈殿を？３ａＫよ〕除去する。このＰ液を前
記した疎水性多゛孔質ポリマーダイヤイオンＵＰ−２０
（三菱化成工業■社製〕を充填したカラム（直径２．５
　ａｍ　ｓポリマ一部の長さ１５ｄｌｌ）Ｋ５０ｍ／時
で通過させる。

次いで約′５００１１ｔの４０％メタノールを５０ｄ／
時で通過させる。さらに約２００ＩＩＩｇの純メタノー
ルを１００１ｄ／時でカラムを通過させ、緑色を呈する
溶出区分（約１ｏａｄ）を分取する。

分取した溶出液を減圧下にメタノールを留去し、暗緑色
のチアインコバルチクロロフィリン９４２■（収電１ａ
３％＞１＊る。

次にセファデックスＬＨ−２０５ＯｆをメタノールＫＪ
Ｉ濁したものを直径３傷長さ３０５１１のカラムに充填
してクロマトグラフィカラムを調製する。このカラムに
、先に得たテアインコバルチクロロフィリン４２ηを約
１０−のメタノールに溶解して載せ、次いでメタノール
で展開溶出する。溶出液の薄層クロマトグラフィーおよ
び可視吸収スはクトル吸光比によってチアインコバルチ
２１１フ４９フ区分的１００ｓ７！を分取し、減圧下に
メタノールを留去して暗緑色のチア建ンコパルチクロロ
フィリン粉末４６０ＱＣ収率４ａ８％）ｔ−得た・ このテアインコバルチクロロフィリン粉末をメタノール
に溶解して試料液として可視吸収スペクトル測定を行う
とｓ４！ｉ０ｎｍおよび６４６ｎｍの波長に極大吸収が
存在し次、りｐロフィリン（クロリンθ６）からの通算
収率は５．６５％である。

！Ｊ！施例　６ 実施例５と同様にして得らｒｂｅ枡チアばンコパルチク
ロロフィリン４．８８　Ｆを７０％メタノール約１００
ｄＫ溶解し、約５％の水酸化ナトリウムを含有するメタ
ノール溶液でｐＨ４，０に調整した後生じた沈殿をＰ別
する。

次にあらかじめ７０％メタノールにダイヤイオンＵＰ−
２０（三菱化成工業株式会社製）３０〇−を懸濁させカ
ラムに充填し、疎水性多孔質ポリマーのカラムを調製し
ておく。前記Ｐ液を疎水性多孔質ポリ！−を充填し几カ
ラム（直径４Ｄ信ポリマ一部の長さ２５ｆｆｉ）Ｋ５０
ｗｔ／時で通過させる。

次いで約２００−の７０％メタノールを７０ｍ／時で通
過させる。さらに約３００−の純メタノールを１００ｍ
／時で通過させ緑色を呈する溶出区分（約２００ｍ）を
分取する０分取した溶出液を減圧下にメタノールを留去
し、暗緑色のチアインコバルチクロロフイリ７７５２Ｎ
（収率１５４％）を得る・ 次にセファデックスＩ、Ｈ−２０（ファルマシア社製）
５０ｆをメタノールに懸濁し、直径Ｓ傷長さ３０１のカ
ラムに充填し、クロマトグラフィカラムを調製しておく
、このカラムに九に得たテアインコパルチクロロフイリ
７７５２■を約１０８１ｇのメタノールに溶解して載せ
１次いでメタノールで展開溶出する。溶出液の薄層りＯ
ｆｆトダラフイーおよび可視吸収スペクトル吸光比によ
ってチアインコバルチクロロ７１９７区分約８０ａｄｔ
分取しも減圧下にメタノールを留去して暗緑色のテアイ
ンコバルチクロロフィリン粉末５８９１Ｃ収率５１．７
％）を得た。

このチアはンコパルチクロロフィリン粉末をメタノール
に溶解して試料液とし可視吸収スペクトル測定を行うと
４３０ｎｍおよび６４６ｎｍの波長に極大吸収が存在し
た・ 実施例　７ 実施例５と同様にして得らｒｔた粗チアはンヲパルチク
ロロフイリン４．９２　ｆを３０％メタノール約１００
ｔＫ溶解し、約５％の水酸化ナトリウムを含有するメタ
ノール溶液でｐＨ６，０に調整した後生じた沈殿′＠：
Ｆ別する。

次にあらかじめ３０％メタノールにダイヤイオンＵＰ−
２０（三菱化成工業株式会社製）６０ｄを懸濁させカラ
ムに充填し疎水性多孔質ポリマーのカラムを隣製してお
く、前記−液を疎水性多孔質ポリマーを充填したカラム
（Ｎ径２．５　ｆｉポリマ一部の長さ１０１０Ｃ１１）
Ｋ５（１／時で通過させる。

次いで約４００−の５０％メタノールを１０〇−７時で
通過させる。さらに約２００−の８０％メタノールｔ’
１００ｍ／時で通過させ緑色を呈する溶出区分（約１５
０ｍ）を分取するｅ分取した溶出液を減圧下にメタノー
ルを留去し、暗緑色のテアばノコバルチクロロフ（ＩＪ
ン９６４＃（収率１９．６％）を得る。

次にセファデックスＬＨ−２０（７アルマシア社製）５
０ｔをメタノール溶液濁し、直径５ｔｓ長さ３０１のカ
ラムに充填し、クロマトグラフィカラムｆ：＊製してお
く、このカラムにさきに得たチアインコバルチクロロフ
ィリン９６４＃を約１０１１ＩのメタノールＫｆ＃解し
て載せ１次いでメタノールで展開溶出する。溶出液の薄
層りｐｉトゲラフイーおよび可視吸収スはクトル吸光比
によってチアインコパルチクロロフイリ７区分約８０１
Ｉｔｔ分取し、減圧下にメタノールを留去して暗緑色の
チアズンコパルチクロロフイリン粉末４５７穆（収率４
７．４％）を得た。

このチアインコバルチクロロフィリン粉末をメタノール
に溶解して試料液とし可視吸収スばクトル測定會行うと
４３０ｎｍおよび６４６ｎｍの波長に極大吸収が存在し
た・ 実施例　８ クロロフィリン（クロリンｅ６）　２．００　ｆｈ酢酸
コバルト４水塩１．００　ｆをメタノール２０−および
木酢１ｌ１１！６−の混合溶媒に溶解し、１５０ｄ／時
間で通気しながら５０〜５５℃で２時間攪拌した・ 反応物を減圧てＳ、Ｓｔまで濃縮したのち、イソプロピ
ルエーテル３０−を加え、攪拌後濾過してコバルチクロ
ロフィリンを得友・ このコバルチクロロフィリンおよび塩酸チアミン１．５
０　ｆをメタノール３０ｍに溶解しもこの溶液に１０％
考性ソーダ・メタノール溶液を加えてｐＨ７３０〜７．
２０で１．５時間室温下に攪拌した・ 次に、３規定塙酸−メタノールでＩ）ＨＩ３．１０に調
整したのち減圧下に濃縮乾固して粗テアばンコバルチク
ロロフイリン五１０ｆを得た・この粗チアばンコパルチ
クロロフイリンを実施例５と同様に精製して暗緑色のチ
アインコバルチクロロフィリン粉末１６５Ｆを得几、ク
ロ四フィリン（クロリン・６）からの通算収率＃１１　
？、　９％である。

このチアインコバルチクロロフィリン粉末をメタノール
に溶解して試料液とし可視吸収スペクトル測定を行うと
％４３１ｎｍおよび６４１１ｎｍの波長に極大吸収が存
在した。

実施＠　９ クロロフィリン（クロリンｅ６）２．０Ｏｒおよび酢酸
コバルト４水塙１．　ＯＯｆをメタノール２〇−および
氷酢酸６−の混合溶媒に溶解し５５〜５５℃で２時間攪
拌した。

反応物を減圧下１１Ｃ５，Ｓ　ｆＫまで濃縮したのち、
イソプロピルエーテルＳｏｄ￥を加え、攪拌後−過して
コバルチクロロフィリンを得た。

前記で得たコバルチクロロフィリンおよび塩酸テアイン
１．５０　ｆをメタノール３０ｍｇＫ溶解し、１０％苛
性ソーダ・メタノール溶液を加え、ｐＨ７付近で３時間
、室温で攪拌した。次にｔ３Ｎ塩酸−メタノールでｐＨ
５，１０に胸整し丸後濃縮乾固して粗テアミンコパルチ
クａロフイリン五０５ｆｔ得た。以下実施例４と同様に
精製してチアインコバルチクロロフィリンα５６ｆｔ−
得た。クロロフィリン（クロリンｓ６）からの通算収率
Ｆ１１７．２％である。

製剤例１　経日用硬カプセル剤 ？フィンコバルチクロに’７’（’）ン１７１およヒホ
リオキシエチレンとマシ油にツコール■ ＨＯＯ６０）７．５　ｆをアセトンに溶解し次に無水ケ
イ酸２５Ｆを混合する・アセトンを蒸発した後、サラに
カルボキシメチルセルロースカルシウム５　ｔ　ｓ　と
うもろこし殿粉５　ｆ　ｓハイドロキシフ胃ヒルセルロ
ール（ＨＰＯ−ψ）　７．５　Ｆおよび微結晶セルロー
ス２０ｆ１に混合し３０−の水を加えて練合し、粒状化
する。とｎｔ−ム２４メツシュ（Ｂ、８．沙スクリーン
を附し次造粒機（エックベレツター、不二〕ｉｔウダル
ＩＩ（製）にて造粒した。ｓ１粒は水分５％以下に乾燥
しムラ６メツシエ（Ｂ、８．狗ふるいでふるっ友・次に
この粒子をカプセル充填機にて１カプセルに１９Ｑｌｆ
充填した・ 製剤例２　経日用軟カプセル剤 テアインコバルチクロロフィリン１４ｆおよび分別ココ
ナツト油（イグリオール８１２）ＩＷｔを混合し均一な
溶液とする。別にセラチン９３ｆ１グリセリン１９２％
Ｄ−ソルビトール１゜ｆ、パラオキシ安息香酸エチルα
４Ｆ、パラオキシ安息香酸プロピルα２ｔおよび酸化ブ
タン（Ｌ４Ｆの組成からなるゼラチン溶液を作りとｎを
カプセル皮膜剤として手動式平板打抜法にょシ内容物１
８０■を含有するソフトカプセルを製造した。

パ製剤９１１３　　注射剤 チアインコバルチクロロフィリ７１Ｆ、’５Ｆッカセイ
油適量およびイノジルアルコール１ｆＹｒ混合しさらに
ラッカセイ油を使用して全量を１０００ｅとする１本溶
液を無菌操作によりアンプルＫ　Ｉ　ｃｃ分注し溶閉す
る。

【図面の簡単な説明】

添付図１１１ｃおいて第１図、第２図および第５図は本
発明のチアインコバルチクロロフィリン、錯化合物、中
間体たるコバルチクロロフィリンおよび原料たるクロロ
フィリンのそｎぞｎ赤外吸収スペクトル白線でＩｈシ、
第４図祉前記三省の可視部吸収を示す曲線である。 特許出願人　　株式会社　イ　ド　リ　十　字間　　日
清製粉株式会社 手続補正書（方式） 昭和５７年９月５０日 特許庁長官　苦参　和夫　殿 １、事件の表示 昭和５７年特許願第　５２２７＄　号 ２、発明の名称 新規なテア電ｙ−３メルチクロロツイリン錯化合物３、
補正をする者 事件との関係　特許出麗人 住所　　大阪市東区命橋１丁目１５番地の１名称　株式
金社電トリ十字　　　（外１４）４、代理人 ５、補正命令の日付 ２補正の内容 図ｇｉｏ浄書（内１１Ｋ変更なし） ａ添付書類の目録 図　　面（第１〜４図）　　　　１　通風上 第１頁の続き ０発　明　者　福島恒和 神戸市垂水区塩屋台３丁目１８番 ２号 ■出　願　人　日清製粉株式会社 東京都中央区日本橋小網町１９番 １２号

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. クロロフィリンのピロール核のＮｆｊ子４個とコバルト
   が配位結合しているコバルチクロロフィリン錯化合物１
   分子に対してチオール型チアば７１分子が配位せしめら
   ｎたチ・アミンコバルチクロロフィリン錯化合物。