JPS5834361A - ポリアデノシンジリン酸リボ−ス感作ラテツクス試薬、その製造法およびそれを用いるヒト体液中のポリアデノシンジリン酸リボ−ス抗体の検出方法 - Google Patents
ポリアデノシンジリン酸リボ−ス感作ラテツクス試薬、その製造法およびそれを用いるヒト体液中のポリアデノシンジリン酸リボ−ス抗体の検出方法Info
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- JPS5834361A JPS5834361A JP13258481A JP13258481A JPS5834361A JP S5834361 A JPS5834361 A JP S5834361A JP 13258481 A JP13258481 A JP 13258481A JP 13258481 A JP13258481 A JP 13258481A JP S5834361 A JPS5834361 A JP S5834361A
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はプリアデノシンジリン酸リポース（以下Ｐｏ１
ｙ ＡＤＰＲと略記する）感作ラテツクス試薬およびそ
の製造法ならびにこれを用いるヒト体液中のＰｏ１ｙ
ＡＤＰＲ抗体の検出方法に関する。さらに詳しくは、本
発明はラテックス粒子に合成Ｐｏ１ｙＡＤＰＲ？感作さ
せｆｃ Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ感作ラテツクス試薬および
その製造法ならびにこれを用いるマイクロタイター法又
はスライｙ凝集法による検出方法に関するものである。
ｙ ＡＤＰＲと略記する）感作ラテツクス試薬およびそ
の製造法ならびにこれを用いるヒト体液中のＰｏ１ｙ
ＡＤＰＲ抗体の検出方法に関する。さらに詳しくは、本
発明はラテックス粒子に合成Ｐｏ１ｙＡＤＰＲ？感作さ
せｆｃ Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ感作ラテツクス試薬および
その製造法ならびにこれを用いるマイクロタイター法又
はスライｙ凝集法による検出方法に関するものである。
Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲＢ、真核細胞の核中に存在する合成
酵素によって、ニコチンアミＶアデニンジヌクレオチド
（ＮＡＤ ）から合成されるホモプリマーであり、そ
の生理的機能は末だ不明である。
酵素によって、ニコチンアミＶアデニンジヌクレオチド
（ＮＡＤ ）から合成されるホモプリマーであり、そ
の生理的機能は末だ不明である。
近年、全身性エリテマトーデス（以下ＳＬＥと略する）
患者血清中にｐｏｌｙ ＡＤＰＲ抗体が存在することが
見い出され、本抗体の測定がＳＩＪの診断上、注目され
ている。Ｐｏ１ｙ ＡＤＰ −ｒ１ｂｏｇｅ抗体ＵＳＬ
Ｅ以外の疾患例えば汎発性強皮症、Ｓｊｏｇｒｅｒ症候
群においても高値のものが見い出されているが、ＳＬＥ
に対して特異性が高い。関節リューマチでは高値のもの
は見い出されていない。
患者血清中にｐｏｌｙ ＡＤＰＲ抗体が存在することが
見い出され、本抗体の測定がＳＩＪの診断上、注目され
ている。Ｐｏ１ｙ ＡＤＰ −ｒ１ｂｏｇｅ抗体ＵＳＬ
Ｅ以外の疾患例えば汎発性強皮症、Ｓｊｏｇｒｅｒ症候
群においても高値のものが見い出されているが、ＳＬＥ
に対して特異性が高い。関節リューマチでは高値のもの
は見い出されていない。
Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体の測定法としては、放射性同位
元素で標識したＰｏ１）ｒ ＡＤＰＲｅ用いて測定する
方法〔ニュークレイツク・アシンｐ 、リサーチ（Ｎｕ
ｃｌｅｉｃＡ、ｃｉｄｓ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）、 ４
ｔ８）、２９０３−２９１５（１９７７））すなわち、
ラジオイムノアッセイ法が確立されているが、ラジオイ
ムノアッセイ法では放射性物質という危険物質を扱うた
めの危険性があり、充分な管理と設備を必要とし、従っ
て充分な設備と管理態勢を整備したところでなければ実
施できないという難点がある。
元素で標識したＰｏ１）ｒ ＡＤＰＲｅ用いて測定する
方法〔ニュークレイツク・アシンｐ 、リサーチ（Ｎｕ
ｃｌｅｉｃＡ、ｃｉｄｓ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）、 ４
ｔ８）、２９０３−２９１５（１９７７））すなわち、
ラジオイムノアッセイ法が確立されているが、ラジオイ
ムノアッセイ法では放射性物質という危険物質を扱うた
めの危険性があり、充分な管理と設備を必要とし、従っ
て充分な設備と管理態勢を整備したところでなければ実
施できないという難点がある。
本発明者らは、ラジオイムノアッセイ法に代る簡便で、
かつ高感度でＰｏ１ｅ’ ＡＤＰＲ抗体を測定する方法
を開発すべく鋭意研究全行なった結果、Ｐｏ１ｙ ＡＤ
ＰＲ感作ラテックスおよび該感作ラテン、 （３） クス粒、子を含む組成物全製造することに成功し、さら
にこれを用いた簡便かつ高感度のＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗
体定抗体定量室することに成功し本発明を完成するに至
った。すなわち本発明の目的は、Ｐｏ１ｙＡＤＰＲ感作
ラテックスおよび該感作ラテツクス粒子を含む組成物（
Ｐｏｌｙ ＡＤＰＲ感作ラテツクス試薬）′ｆｔ提供す
ることである。
かつ高感度でＰｏ１ｅ’ ＡＤＰＲ抗体を測定する方法
を開発すべく鋭意研究全行なった結果、Ｐｏ１ｙ ＡＤ
ＰＲ感作ラテックスおよび該感作ラテン、 （３） クス粒、子を含む組成物全製造することに成功し、さら
にこれを用いた簡便かつ高感度のＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗
体定抗体定量室することに成功し本発明を完成するに至
った。すなわち本発明の目的は、Ｐｏ１ｙＡＤＰＲ感作
ラテックスおよび該感作ラテツクス粒子を含む組成物（
Ｐｏｌｙ ＡＤＰＲ感作ラテツクス試薬）′ｆｔ提供す
ることである。
本発明の第２の目的は、Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ感作ラテッ
クス試薬の製造法を提供することである。
クス試薬の製造法を提供することである。
本発明の第３の目的は、該感作ラテックス試薬ケ用いた
Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体の検出方法を提供することであ
る。
Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体の検出方法を提供することであ
る。
次に、本発明をさらに詳細に説明する。本発明に用いる
Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲは各種動物臓器より抽出したＰｏ１
ｙ ＡＤＰＲ合成酵累を用いて、ＮＡＤ から合成す
ることができる。このように【７て合成した相Ｐｏ１ｙ
ＡＤＰＲ１に精製するＶＣは、ＤＮａｓｅ、几Ｎａ５
ｅ、プロナーゼ処理およびフェノール抽出による杉材ら
の方法（Ａｒｃｈ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ
、、 １４７．６６０−６６５（１９７１）、’による
ことができる。
Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲは各種動物臓器より抽出したＰｏ１
ｙ ＡＤＰＲ合成酵累を用いて、ＮＡＤ から合成す
ることができる。このように【７て合成した相Ｐｏ１ｙ
ＡＤＰＲ１に精製するＶＣは、ＤＮａｓｅ、几Ｎａ５
ｅ、プロナーゼ処理およびフェノール抽出による杉材ら
の方法（Ａｒｃｈ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ
、、 １４７．６６０−６６５（１９７１）、’による
ことができる。
゛（４）
本発明の感作ラテックス試薬？製造するための、マイク
ロタイター法用の高比重ラテックス粒子としては、たと
えばスチレン、ビニルトルエン、クロロスチレン、メタ
クリル酸メチル、塩化ビニル。
ロタイター法用の高比重ラテックス粒子としては、たと
えばスチレン、ビニルトルエン、クロロスチレン、メタ
クリル酸メチル、塩化ビニル。
塩化ビニＩＪデン等の均一重合体もしくは共重合体ラテ
ックスなどが有利に用いられ、これらのラテックスのな
かでもクロロスチレン、メタクリル酸メチル、塩化ビニ
リデンの均一重合体あるいはこれらと他の七ツマ−（た
とえばスチレン）との共重合体などが好都合に用いられ
る。これらのラテックス粒子は従来通常の怖消学的凝集
反応用担体として使用されているポリスチレン粒子（比
重１、０５ ）より高比重であ匂、とりわけ比重１．１
〜１．３程度好ましくは比重１，２±０．０５のものを
使用するのが好ましい。
ックスなどが有利に用いられ、これらのラテックスのな
かでもクロロスチレン、メタクリル酸メチル、塩化ビニ
リデンの均一重合体あるいはこれらと他の七ツマ−（た
とえばスチレン）との共重合体などが好都合に用いられ
る。これらのラテックス粒子は従来通常の怖消学的凝集
反応用担体として使用されているポリスチレン粒子（比
重１、０５ ）より高比重であ匂、とりわけ比重１．１
〜１．３程度好ましくは比重１，２±０．０５のものを
使用するのが好ましい。
スライＶグラス法に用いるラテックス粒子の比重には特
に制限はない。
に制限はない。
これ等のラテックス粒子は一般に平均粒子径０．１〜１
、μ程度の、ものを用いることが出来るが、とりわけ０
．３〜０．９μ程度の粒子径を持つものを用いるとマイ
クロプレートのウェル内で約１０時間以内で完全に沈降
し実施上好都合である。
、μ程度の、ものを用いることが出来るが、とりわけ０
．３〜０．９μ程度の粒子径を持つものを用いるとマイ
クロプレートのウェル内で約１０時間以内で完全に沈降
し実施上好都合である。
上記したラテックス粒子線、特開昭５１−９７１６号公
報（昭和５１年１月２６日付公開：特願昭４９−７８６
０４号）記載の方法に従ってエチレンオキシド系非イオ
ン界面活性剤を吸着させたものを用いるのが好ましい。
報（昭和５１年１月２６日付公開：特願昭４９−７８６
０４号）記載の方法に従ってエチレンオキシド系非イオ
ン界面活性剤を吸着させたものを用いるのが好ましい。
このエチレンオキシド系非イオン界面活性剤としては、
エチレンオキシドとポリオキシプロピレングリコールの
ブロックコポリマー、ポリオキシエチレンアルキルエー
テル。
エチレンオキシドとポリオキシプロピレングリコールの
ブロックコポリマー、ポリオキシエチレンアルキルエー
テル。
ポリオキシエチレンアルキルアリルエーテルなどが好都
合に用いられる（特開昭５１−９７１６号公報参照）。
合に用いられる（特開昭５１−９７１６号公報参照）。
かくして得られる抗原である所のＰｏ１ｙ ＡＤＰＲで
前記ラテックス粒子を感作するに際しては、当核ラテッ
クス粒子と抗原とを水性媒体（たとえば水、生理食塩液
、各種緩衝液など）中で接触さ、せるのがよく、一般に
ラテックス粒子の水性媒体浮遊液と抗体とを混合し、放
置することにより行なわれるが、所望により攪拌もしく
は振盪して接触時間全短縮するようにしてもよい。本感
作処理は、一般に、ＰＨ約６前後、約４〜２０Ｃの温度
で行なうのが好寸［７い。また、感作は、メチル化牛血
清アルブミン（ＭＢＳＡ）の存在下で行なうのが好寸し
い。感作処理後水性媒体で洗浄することにより、過剰の
抗体が除去される。本感作処理後、さらにラテックス粒
子に吸着される性状を有する物質たとえばウシなどの血
清アルブミン、かどで粒子の残余面を飽和するようにし
てもよい。
前記ラテックス粒子を感作するに際しては、当核ラテッ
クス粒子と抗原とを水性媒体（たとえば水、生理食塩液
、各種緩衝液など）中で接触さ、せるのがよく、一般に
ラテックス粒子の水性媒体浮遊液と抗体とを混合し、放
置することにより行なわれるが、所望により攪拌もしく
は振盪して接触時間全短縮するようにしてもよい。本感
作処理は、一般に、ＰＨ約６前後、約４〜２０Ｃの温度
で行なうのが好寸［７い。また、感作は、メチル化牛血
清アルブミン（ＭＢＳＡ）の存在下で行なうのが好寸し
い。感作処理後水性媒体で洗浄することにより、過剰の
抗体が除去される。本感作処理後、さらにラテックス粒
子に吸着される性状を有する物質たとえばウシなどの血
清アルブミン、かどで粒子の残余面を飽和するようにし
てもよい。
このようにして得られるラテックス試薬ね１、一般に水
性溶媒に浮遊せしめた状態で使用される。
性溶媒に浮遊せしめた状態で使用される。
通常的０．５〜１％（容量）程度のラテックス粒子浮遊
液として使用するのが好着しい。
液として使用するのが好着しい。
かくして製造される本発明のラテックス試薬は安定であ
るが、たとえばこれを凍結乾燥することによりさらに長
期間保存することができる。凍結乾燥品は使用に際して
希釈用液を加えて溶解させるだけで新鮮製品と全く同様
にして使用することができる。
るが、たとえばこれを凍結乾燥することによりさらに長
期間保存することができる。凍結乾燥品は使用に際して
希釈用液を加えて溶解させるだけで新鮮製品と全く同様
にして使用することができる。
本発明のラテックス試薬はＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体によ
り凝集されるので、これをヒトの血清などの体液もしく
（グその希釈液と本発明のラテックス試薬を例えばマイ
クロタイター用のプレート上又ハスライＶグラス上で接
触させ、ラテックスの管底凝集像を観察することに２よ
り、Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体の存在全判定することがで
きる。
り凝集されるので、これをヒトの血清などの体液もしく
（グその希釈液と本発明のラテックス試薬を例えばマイ
クロタイター用のプレート上又ハスライＶグラス上で接
触させ、ラテックスの管底凝集像を観察することに２よ
り、Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体の存在全判定することがで
きる。
本発明は下８ｄの効果？奏するものである、すなわち担
体（Ｃラテックスを用いているために、担体に対する抗
体がありえないので、被検血清を何ら前処理する必要音
生じない。マイクロブ１／−トのウェルに血清、他の体
液もしくはその希釈液ケ入れ、これにラテックス試薬を
滴下するだけでよい。
体（Ｃラテックスを用いているために、担体に対する抗
体がありえないので、被検血清を何ら前処理する必要音
生じない。マイクロブ１／−トのウェルに血清、他の体
液もしくはその希釈液ケ入れ、これにラテックス試薬を
滴下するだけでよい。
あるいは、スライｒグラス上でこの凝集を判定してもよ
い。
い。
現在１でにラテックス粒子にＰｏ１ｙ ＡＤＰＲｆ感作
した例は全く文献未載であり、マイクロタイター法又扛
スライド凝集法によるＰｏ１ｙ ＡＤＰＲの受身ラテッ
クス凝集反応は全く新規なものである。
した例は全く文献未載であり、マイクロタイター法又扛
スライド凝集法によるＰｏ１ｙ ＡＤＰＲの受身ラテッ
クス凝集反応は全く新規なものである。
以下に、ＩｔＬＶ製例及び実施例により本発明をさらに
具体的に説明するが、これが本発明の範囲を制限するも
のではない。
具体的に説明するが、これが本発明の範囲を制限するも
のではない。
調製例Ｉ Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ合成酵累の調製ウシ胸
腺２００ｆを緩衝液Ａ １０００ ａｒｅに浸し、ホモ
ジエナイズ【２、遠心分離によって沈殿全分取し、緩衝
液Ａ４００ｇｇに懸濁した。これに２ＭＮａＣ／を８０
ＩＥ７Ｉ加え、ホモジュナイズＬ７、遠心分離してその
上澄を得た。これｖｒ−Ｐｏｌｙ ＡＤＩ’Ｒ合成ｍ緊
標品とした。
腺２００ｆを緩衝液Ａ １０００ ａｒｅに浸し、ホモ
ジエナイズ【２、遠心分離によって沈殿全分取し、緩衝
液Ａ４００ｇｇに懸濁した。これに２ＭＮａＣ／を８０
ＩＥ７Ｉ加え、ホモジュナイズＬ７、遠心分離してその
上澄を得た。これｖｒ−Ｐｏｌｙ ＡＤＩ’Ｒ合成ｍ緊
標品とした。
昔緩衝液Ａ
０．２５Ｍ ５ｕｃｒｏ８ｅ （ショ糖）１０ｍＭ
Ｔｒｉｓ−Ｈ（Ｊ （ｐ’７．９ ）１０ ｍＭ Ｍ
ｆＣ１２ １４ｍＭ２−メルカプトエタノール ５０ｍＭ Ｎａ２８２０ｇ Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ合成酵素とＮＡＤ ？反応液
中で２５°・〜３７℃で、５分から１０分間反応させた
後、反応液の２倍量のエタノールと０．１２倍量の５Ｍ
酢酸緩衝液（ＰＩ１５．Ｏ）？反応液に加え、−２０℃
で一夜放置した。これ全遠心分離して、沈殿を分取し、
５０ ｍＭＴｒｌｓ−Ｈ（Ｊ緩衝液１００− に懸濁し
た。この懸濁液に２■デオキシリがヌクレアーゼと２１
１Ｆのりがヌクレアーゼを加えて３７Ｃで３０分間イン
キュベートし、さらにその後、プロナーゼ１００■を加
えて３７０で５時間以上インキユヘートした。これに同
量のフェノールを加え、１０分以上激しくかく拌した後
、遠心分離して、水層を分取し、蒸留水に対して透析し
た。これによってＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ約４０Ｍｌ１が得
られ、標品中には、ＤＮＡ１ｊＱ４％以下、タンパク質
は約６％含まれていた。本標品のＯｆ）’、ｌｌ、＋
／ＤＰ ｔａ。は０．２８〜０．３３ であった。
Ｔｒｉｓ−Ｈ（Ｊ （ｐ’７．９ ）１０ ｍＭ Ｍ
ｆＣ１２ １４ｍＭ２−メルカプトエタノール ５０ｍＭ Ｎａ２８２０ｇ Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ合成酵素とＮＡＤ ？反応液
中で２５°・〜３７℃で、５分から１０分間反応させた
後、反応液の２倍量のエタノールと０．１２倍量の５Ｍ
酢酸緩衝液（ＰＩ１５．Ｏ）？反応液に加え、−２０℃
で一夜放置した。これ全遠心分離して、沈殿を分取し、
５０ ｍＭＴｒｌｓ−Ｈ（Ｊ緩衝液１００− に懸濁し
た。この懸濁液に２■デオキシリがヌクレアーゼと２１
１Ｆのりがヌクレアーゼを加えて３７Ｃで３０分間イン
キュベートし、さらにその後、プロナーゼ１００■を加
えて３７０で５時間以上インキユヘートした。これに同
量のフェノールを加え、１０分以上激しくかく拌した後
、遠心分離して、水層を分取し、蒸留水に対して透析し
た。これによってＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ約４０Ｍｌ１が得
られ、標品中には、ＤＮＡ１ｊＱ４％以下、タンパク質
は約６％含まれていた。本標品のＯｆ）’、ｌｌ、＋
／ＤＰ ｔａ。は０．２８〜０．３３ であった。
簀脣反応液
５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｔＪ（７，９）１０ｍＭ
ＭｆＣｌｗ ０．４ｍＭ ジチオスレイトール １ ｍＭ ＮＡＤ＋ （１３Ｍ／６０ 、…７．２のＰＢＳ で、ｌη／−
としたＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ５ｄと、同ＰＢＳで１１８１
７７ｄとしたメチル化牛血清アルブミン１ｍ１ｆ混和し
て１時間以上室温で放置し、これに四Ｐ Ｂ ８４５
ｗｅ ｆ加えた。この混合液に、同Ｐ Ｂ Ｓで０．２
５％としたラテックス５ＤＬ５９浮遊液（武田薬品工業
株式会社）全同量加え室温で６０分〜９０分感作した◎ （２）次いで、ＰＢＳで３回、希釈用液 で１回洗浄し
、同希釈用液で０２５％ラテックス浮遊液とし、感作ラ
テツクスを調製した。
ＭｆＣｌｗ ０．４ｍＭ ジチオスレイトール １ ｍＭ ＮＡＤ＋ （１３Ｍ／６０ 、…７．２のＰＢＳ で、ｌη／−
としたＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ５ｄと、同ＰＢＳで１１８１
７７ｄとしたメチル化牛血清アルブミン１ｍ１ｆ混和し
て１時間以上室温で放置し、これに四Ｐ Ｂ ８４５
ｗｅ ｆ加えた。この混合液に、同Ｐ Ｂ Ｓで０．２
５％としたラテックス５ＤＬ５９浮遊液（武田薬品工業
株式会社）全同量加え室温で６０分〜９０分感作した◎ （２）次いで、ＰＢＳで３回、希釈用液 で１回洗浄し
、同希釈用液で０２５％ラテックス浮遊液とし、感作ラ
テツクスを調製した。
餐Ｉ ＰＢＳ
Ｍ／１５． ｐ）（７，２ＰＢＳ ２５ｗｘｌ生理
食塩液 ７５ｉｄ アジ化ナトリウム ０．１１！ 骨！希釈用液 Ｍ／６０ ｐ１４７．２ＰＢｓ Ｉ ００＊１牛血
清アルグミン ０．０７Ｆ アジ化ナトリウム ０．１ｆ （３）凍結乾燥するには、０，２容の凍結乾燥用メ肴３ ジウム に懸濁し、液体窒素中で急速に凍結したのち
、凍結乾燥した。
食塩液 ７５ｉｄ アジ化ナトリウム ０．１１！ 骨！希釈用液 Ｍ／６０ ｐ１４７．２ＰＢｓ Ｉ ００＊１牛血
清アルグミン ０．０７Ｆ アジ化ナトリウム ０．１ｆ （３）凍結乾燥するには、０，２容の凍結乾燥用メ肴３ ジウム に懸濁し、液体窒素中で急速に凍結したのち
、凍結乾燥した。
簀３ 凍結乾燥用メジウム
希釈用液 １０〇−グリシン
０．５ｔマイクロタイター法による
凝集反応 （１） 血清、その他の体液などの被検液に固形物が
混在している時は、これを遠心によって除去する。これ
以外は全く処理をし々い。
０．５ｔマイクロタイター法による
凝集反応 （１） 血清、その他の体液などの被検液に固形物が
混在している時は、これを遠心によって除去する。これ
以外は全く処理をし々い。
（２） ラテックス試薬が凍結乾燥品の場合は、５容
の希釈用液を加えて溶解する。
の希釈用液を加えて溶解する。
（３１Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体の定量を行うにはマイク
ロデレー）（Ｕ型、Ｖ型いずれでも良い）に０．０２５
ゴのトゞロツパーで希釈用液を０．０２５ｓｆずつ分注
し、第１番目のウェルに被検液ｆ Ｏ，０２５ｍ／加え
る。グイリュータ−で倍数希釈を行ったのち、それぞれ
のウェルにラテックス試薬ｋ ０．０２５＋／ずつ滴下
し、十分に混和後−夜室温で静置する。
ロデレー）（Ｕ型、Ｖ型いずれでも良い）に０．０２５
ゴのトゞロツパーで希釈用液を０．０２５ｓｆずつ分注
し、第１番目のウェルに被検液ｆ Ｏ，０２５ｍ／加え
る。グイリュータ−で倍数希釈を行ったのち、それぞれ
のウェルにラテックス試薬ｋ ０．０２５＋／ずつ滴下
し、十分に混和後−夜室温で静置する。
翌日管底の凝集像を判定し、凝集陽性を示す被検液の最
大希釈倍数？ Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体価とする。
大希釈倍数？ Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体価とする。
なお、定性のみが必要であれば、被検液０．０２５１の
みを分注したウェルにラテックス試薬を００２５−滴下
して、上記と同様に凝集像を判定するだけでよい。
みを分注したウェルにラテックス試薬を００２５−滴下
して、上記と同様に凝集像を判定するだけでよい。
結果を次表に示す。
注）
ＳＬＥ：全身性エリテマトーデス
ｐｓｓ：汎発性強皮症
ＲＡ ：関節リューマチ
ＰＭ ：汎発性筋炎
十：凝集すなわち陽性、−：非凝集すなわち陰性３２９
−
−
Claims (5)
- （１） ラテックス粒子ｔポリアデノシンジリン酸り
が一ス（Ｐｏｌｙ ＡＤＰＲ）で感作してなることを特
徴とするＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ感作ラテツクス試薬。 - （２） ラテックス粒子の比重が１．１〜１．３の高
比重である特許請求の範囲第１項記載のラテックス試薬
。 - （３） ラテックス粒子をポリアデノシンジリン酸リ
ボース（Ｐｏ１ｙ ＡＤＰＲ）で感作すること全特徴と
するＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ感作ラテツクス試薬の製造法。 - （４） ポリアデノシンジリン酸りが一ス（Ｐｏｌｙ
ＡＤＰＲ） で感作し次ラテックス試薬をヒトの体液
もしく扛その希釈液と接触させ、凝集偉會観察すること
を特徴とするＰｏ１ｙ ＡＤＰＲ抗体の検出方法。 - （５）凝集反応全マイクロタイター法によって行がうこ
とを特徴とする特許請求の範囲第４項記載の検出方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13258481A JPS5834361A (ja) | 1981-08-26 | 1981-08-26 | ポリアデノシンジリン酸リボ−ス感作ラテツクス試薬、その製造法およびそれを用いるヒト体液中のポリアデノシンジリン酸リボ−ス抗体の検出方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13258481A JPS5834361A (ja) | 1981-08-26 | 1981-08-26 | ポリアデノシンジリン酸リボ−ス感作ラテツクス試薬、その製造法およびそれを用いるヒト体液中のポリアデノシンジリン酸リボ−ス抗体の検出方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5834361A true JPS5834361A (ja) | 1983-02-28 |
Family
ID=15084747
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13258481A Pending JPS5834361A (ja) | 1981-08-26 | 1981-08-26 | ポリアデノシンジリン酸リボ−ス感作ラテツクス試薬、その製造法およびそれを用いるヒト体液中のポリアデノシンジリン酸リボ−ス抗体の検出方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5834361A (ja) |
-
1981
- 1981-08-26 JP JP13258481A patent/JPS5834361A/ja active Pending
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ARCHIVES OF BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS=1971 * |
| NUCLEIC ACIDS RESERCH=1977 * |
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