JPS5829712A - 海蛇脂質類の抽出分離法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は、海蛇の全体、ことにその腹腔内における脂
質塊より、魚臭を有しない脂質類を簡便に抽出分離する
方法に関する。

この発明の発明者は、先に海蛇全体又はその内臓部から
、五十肩、ギツクリ腰、鞭打ち症後遺症、変形性腰椎症
、坐骨神経痛などの治療に卓効を有するリン脂質を全く
含まない薬効有刃物質である単純脂質物質の抽出製造法
を見出した（特開開開−１６７２２５号）。

しかし、このようにして得られた脂質類はいずれも魚臭
を有するだけでなく抽出分離するのに長い工程を要し、
とくに単純脂質を精製するにはカラムクロマトグラフィ
を用いる必要があった。

この発明の発明者は、この後、更に研究をす＼め、海蛇
原料を有機溶媒を用い且つ簡単な工程で抽出し、魚臭を
有しない脂質類を抽出分離する方法を見出したのである
。すなわちこの発明は、海蛇の全体、ことにその腹腔内
における脂質塊のそのま＼又はその細片を、アセトン、
クロロホルム−メタノール混液もしくはｎ−ヘキサン−
エタノール−水混液のいずれかの溶媒中で抽出処理し、
抽出液から脂質類を単離することを特徴とする海蛇脂質
類の抽出分離法を提出するものである。

混液で分画抽出して石油エーテル画分から単純脂質を、
またアルコール、両分より類脂質を単離することを特徴
とする海蛇脂質類の抽出分離法を提供するものである。

すなわち、この発明によれば以下のようにして海蛇の脂
質類を抽出することができる。

捕獲された海蛇〔海蛇とはエラブウナギＬａｔｉｃａｎ
ｄａ　１ｅｎｉｆａｓｃｉａｔｅ　Ｒｅｉｎｗ＋及びそ
の間属の海蛇属（Ｈｙｄｒｏｐｈｉｓ　　８ｐ、）の総
称〕は、捕獲後すぐには抽出処理を行わず輸送、一時保
管などの時間を経過してから抽出する場合が多いが、ま
ず捕獲後すぐに海蛇全体ことにその腹腔内の脂質塊るそ
のま＼か適当な大きさに切断したものをアセトン、クロ
ロホルム−メタノール混液もしくは。−慣すンーエタノ
ール体混液などの抽出溶媒中に浸漬して空気から遮断す
るのが望ましい。これによって脂質類が酸化されて変質
するのが防止されると共に冷浸が行われる。そして適当
なときに抽出を完了させる。すなわち、例えばこの溶媒
に浸漬した海蛇をそのま＼ホモジナイザーなどｌこがけ
て細片に粉砕される。この粉砕の程度は細かい程よいが
、かゆ状に粉砕するのが好ましい。細小溶媒としてはア
セトンが好ましく、まり溶媒１ｊに対する海蛇原料の閂
は５０〜５００７か適切であり、好ましいのは１００〜
３００Ｐである。なお海蛇の捕獲直後に抽出処理すると
きは捕獲後の溶媒浸漬時間が短いことを除いて上記と同
様に処理される。

上記のようにして得られた海蛇原料と溶媒の混合物を遠
心分離又はｐ過して上層の透明な抽出液を採取する。な
お下層の沈降部に最初に用いた溶１ 媒の約丁〜邪の容量の溶媒を添加し攪拌して抽出処理を
３〜８回繰返し、得られた上層の透明な抽出液を上記の
抽出液とひとつに合わせる。この抽出液をなるべく減圧
下（１０〜２０ｍ水銀柱）ロータリーエバポレーターな
どを用い３５℃以下で濃縮し、水分を凍結乾燥法で除く
と淡黄褐色無臭の半固体状の海蛇の脂質類が得られる。

この脂質類は冷凍庫中−４０℃以下で保存される。

上記の抽出は、通常、常温下でよいが、場合により使用
する溶媒の沸点以下の加温下であってもよいＯ また上記抽出法において、特に腹腔内の脂質塊２原料と
する場合、溶媒で抽出する前に次のような方法で脂質を
分離してもよい。すなわち、該脂質塊を取り出し、でき
るだけ早（ガーゼ袋に入れ、これを金属容器内に入れこ
の金属容器を沸水中につける。ガーゼ袋中の脂質塊が軟
化し液状となれば手早くガーゼ袋をしぼることによって
無臭の粗脂質類が得られる。この粗脂質類は、前記の溶
媒を用いるこの発明の方法−こよって極めて容易に精製
することができる。

次いで、上記脂質類を、更に次のようにして抽出分離し
て単純脂質と類脂質とに分離される。

まず石油エーテルとエタノール又はメタノール水溶液（
好ましくは９０％エタノール）の等量を混合してよく振
盪した後放置して上下２層の溶媒（上層をＡ、下層をＢ
と称する）を作る。得られた上層と下層とに上記脂質類
を分配し、上層の石油エーテル層に単純脂質が、下層の
アルコール層番こ類脂質が分画される。具体的には次の
よう≦こ行われる。

このＡとＢとをはゾ３：１の容量比で混合し、この混合
溶媒の１ノに対し１００〜２００ｙの比率で上記脂質類
を入れ充分振盪して溶解する。得られた溶媒の上層ａｌ
と下層ｂ１を分離し、この下層ｂ１に最初に使用したＡ
とはゾ同量の新たなＡを添加してよく振盪する。、得ら
れた上層ａ２と下層ｂ２を分離する。一方上層ａｌには
最初に用いたＢとはゾ同社の新たなりを添加してよく振
盪した後、これを前記上層ａ２と混合してよく振盪し、
得られた上層為３と下層ｂ３とを分離し、ｂ３は前記ｂ
２とひとつに合わせる。次いでこの上層２３に最初に用
いたのとは望装置の新たな下層Ｂを加えよく振盪して上
層ａ４と下層ｂ４に分離し、この下＠ｂ４を上記ｂ２と
ｂ３とに合する。こ＼で得られた上層ａ４１こ対して前
記上層ａ３に行ったのと同じ処理を数回繰り返して行い
その都度得られた下層をひとつに合わせる。かようにし
て得られた上層と下層とをそれぞれロータリーエバポレ
ーターなどを用い減圧下（１０〜２０園水銀柱）３５℃
以下で濃縮する。そして下履の濃縮物の水分は凍結乾燥
で除去される。

上記のようなこの発明の方法によって上層からは単純脂
質、下層からは類脂質かえられる。これらは従来法のご
とく水中で加熱したりすることなどがないため、実質的
に魚臭がなく優れた製品といえる。それぞれ以下のよう
な性質を有している。

イ、上層から得られた単純脂質 何）淡黄色の蟻状物質で軟化点が４０〜５５℃である。

（ロ）水に不溶、エタノールに難溶、アセトンに可溶、
クロロホルム、エーテル、石油エーテル、ヘキサン、ベ
ンゼン、トルエンに易溶である。

（ハ）水晶１ｙをアセトン１００−に溶解した溶液の液
性は中性である。

に）赤外線吸収スペクトル：　ＩＲ（ＣＨＣノリ２９６
０．２８７０，１７３０，１４６０ｃｍ　　”（ホ）　
薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）１）水晶１ｆをクロロ
ホルム１００−に溶解した溶液について、添付量：１０
４、担体ニジリカゲルＧ（メルク社）、展開溶剤：石油
エーテル／エーテル／酢酸（８５：１５　：　１．５）
、展開距離：１５ＱＩｌ、検出＝０．２チ、２’、　７
’−ジクロロフルオレセインのエタノール溶液を噴霧し
乾燥＆３６６ｔｍの紫外線を照射の条件でＴＬＣに付す
とＲｆ値約０．６の位置６Ｃ黄色呈色した大きいスポッ
トを示す（第１図の１に示した）。

Ｉ）１）で用いた試料液について、添付量＝１０μノ、
担体ニジリカゲルＧ（メルク社）、展開溶媒：ｎ−ヘキ
サン／イソプロピルエーテル／酢酸（６０：５０：０．
４）、展開距離：１５ＣＩ＋。

検出：モリブデン試薬の条件でＴＬＣに付すとＲｆ値約
０．８に単一の大きなスポットを出現する（第２図の１
に示したい。

（へ）　この物質中にリン脂質が全く含有されていない
ことはディトマー氏−レスター氏改良法の検出法によっ
て確認した。

口、下層から得られた類脂質 （イ）常温で粘稠な油状で、各種の有機溶媒、植物油に
可溶である。

（０）　　化学的組成は、リン脂質３７，４％、ホケン
化物３．５４囁を含み、更に脂肪酸組成は、Ｃｓｓ　２
３，９憾、ｃｐｓ口０．５％、Ｃ＊＠ｔｘ０．４嘴、Ｃ
１ｒ　Ｏ，２％、Ｃ□４．３％、６□８目９．４％、Ｃ
Ｉ！！５４．３憾、ｃｐｓ：　！　　７．０％である。

（ハ）　ＴＬＣ 前記単純脂質について行ったＴＬＣ１）及び■）と同様
な”Ｉ’　Ｌ　Ｃに付してそれぞれ第１図の２及び第２
図の２のクロマトグラムが得られた。

次にこの発明の方法を実施例によって説明するがこの発
明を限定するものではない。

実施例１゜ 分離 エラブ海蛇を沖縄で捕獲後すぐにその腹腔内の脂質環（
約２０（１）アセトンの入った缶に入れ次いでその缶の
口までアセトンを満たしくアセトン量約１ノ）空気から
遮断し、密栓して室温で保管し、大阪に輸送した。この
原料をアセトンに浸漬したま＼ホモジナイザーで室温で
２分間攪拌してかゆ状にした。これを遠心分離して上層
のアセトン溶液を取り分け、沈降部の下層にアセトン（
１００−）を加え２分間攪拌した。そして得られた上層
のアセトン溶液を取り分は最初に得たアセトン溶液とひ
とつに合わせた。この新たなアセトンを加えて行う操作
を５回繰返した。このようにして集めて得たアセトン溶
液をロータリーエバポレーターと水流ポンプを用い減圧
下（１０〜２０１１１＋水銀柱）３０℃で濃縮した。濃
縮エキス中の水分は凍結乾燥法で除き、淡黄褐色無臭の
半固体状の脂質を得た。これを冷凍庫中−４０℃で保存
した。また溶媒としてアセトンの代りにクロロホルム−
メタノール混液（容置比ｌ：２）又はｎ−ヘキサン−エ
タノール−水混液（１０：９：１）を用いても同様の生
成物が得られた。

実施例２゜ 抽出分離 石油エーテルと９０％エタノールの等量をよく振盪し放
置して上下２層（上層をＡ、下層をＢと称す）をなす溶
媒を作製してこの人及びＢを用いて実施例１で得た脂質
を分画抽出した。

実施例１で得た脂質（１０１１）を、Ａ（４５＋１１／
）とＢ（１５ａ／）と共に分岐ｐ斗（Ｉ）に入れ、よく
振盪し溶解した。得られた下層ｂｌ（約１５−）を新た
なＡ（４ｓａｒ）を予め入れておいた分液ｐ斗（６）に
入れ充分振盪し溶解した後得た上層１２（約４５．ｌＩ
／）と下層ｂ２（約１５−）の中下層ｂ２をフラスコ（
Ｉ）に取り出した。一方分液Ｆ斗（Ｉ）に残っている上
層ａｌ（約１５−）に新たなり　（１５１１１／）を加
えてよ（振盪した後、これを上記上層１２（約４５−）
の入っている分液Ｐ斗（５）に入れ充分振盪し上層＠３
（約９０−）と下層ｂ３（約１５−）とを得、この下層
ｂ３（約１５−）をフラスコ（Ｉ）に取り出し下層ｂ２
と合した。次いで上層ａ３（約（４）−）の残っている
分液Ｐ斗（６）に新たなり　（１５ｇ／）を入れ充分振
盪した後得られた上層ａ４（約９０ｄ）と下層ｂ４（約
１５−）の中、下層ｂ４をフラスコ（Ｉ）に取り出し下
層ｂ２及びｂ３と合した。

残った上層ａ４（約９０−）を新たなり　（１５ｄ）で
処理する操作を更に３回繰り返した。

以上の操作によって得られた上層（９０，／）と下４（
９０，ｚ）とをそれぞれエバポレーターと水流ポンプを
用い減圧下（１０〜２ｏ■水銀柱）　３０℃で濃縮した
。下層中の水分は凍結乾燥法によって除いた。このよう
にして−）Ｊ（約９０．／）から前記のごとき性質を有
する単純脂質（９９，９０％）を、下層（約９０ｄ）か
ら前記性質を有する類脂質を（０，７ｆ、７％）を得た
。

【図面の簡単な説明】

ｇＪ１図の１及び２並びに第２図の１及び２はこの発明
の方法によって得られた脂質類の薄層クロマトグラムで
ある。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、海蛇の全体、ことにその腹腔内における脂質環のそ
   のま＼又はその細片を、アセトン、クロロホルム−メタ
   ノール混液もしくはｎ−ヘキサン−エタノール−水混液
   のいずれかの溶媒中で抽出処理し、抽出液から脂質類を
   単離することを特徴とする海蛇脂質類の抽出分離法。 ２、抽出溶媒がクロロホルム−メタノール混液（容量比
   １：２）である特許請求の範囲第１項記載の抽出分離法
   。 ３、抽出溶媒かｎ−ヘキサン−エタノール−水混液（容
   量比１０：９：１）である特許請求の範囲第１項記載の
   抽出分離法。 ４、抽出溶媒がアセトンであり、これに脂質環を浸漬し
   た後に細切して抽出を完了させる特許請求の範囲第１項
   記載の抽出分離法。 ５、海蛇の全体、ことにその腹腔内における脂質環のそ
   のま＼又はその細片を、アセトン、クロロホルム−メタ
   ノール混液もしくはｎ−ヘキサン−エタノール−水混液
   のいずれかの溶媒中で抽出処理し、抽出液から脂質類を
   単離し、これを石油エーテルと水性エタノール又は水性
   メタノールとの混液で分画溶出して石油エーテル画分か
   ら単純脂質をまたアルコール画分より類脂質を単離する
   ことを特徴とする海蛇脂質類の抽出分離法。 ６、抽出溶媒がクロロホルム−メタノール混液（容置比
   １：２）である特許請求の範囲第５項記載の抽出分離法
   。 ７、抽出溶媒がｎ−ヘキサン−エタノール−水混液（容
   置比１０：９；１）である特許請求の範囲第５項記載の
   抽出分離法。 ８、抽出溶媒がアセトンであり、これに脂質塊を浸漬し
   た後に細切して抽出を完了させる特ｉｆＦ、ｉｊ！求の
   範囲第５項記載の抽出分離法。 ９、分画溶媒が、等量の石油エーテルと水性エタノール
   を混合振盪して得た上下層液の上層−下層（容量比３：
   １）である特許請求の範囲第５項記載の抽出分離法。