JPS5828278B2 - 白金−ジオキソピリミジン錯体混合物の製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 １９７３年１０月１０日付の同時係属出願第４０５１８
４号（この出願は１９７２年２月２９日付の米国特許出
願第２３０５３３号の継続出願であり、この第２３０５
３３号の出願は１９７０年４月２０日付の米国特許出願
第３０２３９号の継続出願である）には抗腫瘍剤として
有効な種々の白金配位化合物が開示しである。

１９７２年６月８日付の同時係属出願第２６０９８９号
には抗腫瘍剤として有効なもう１つの白金配位化合物群
すなわちマラナト白金化合物が開示されている。

１９７３年４月１３日付の同時係属出願第３５０９２４
号には白金配位化合物を利用するビールス症状の治療法
が開示されている。

上記の白金配位化合物は種々の腫瘍に対して非常に有効
であるが、（１）腎臓毒性が高く且つ（２）水に対する
溶解度が低Ｌ・という欠点がある。

水に対する溶解度が低いため治療上有効な組成物の製剤
が困難になる。

ある種の白金“青“錯体は抗腫瘍活性が高く、水溶性で
且つ腎臓毒性が低いと℃・うことが発見されている。

先行技術では古くからいわゆる“白金青“錯体が知られ
て（・る。

これらの青色錯体がそう名付けられた“白金青“はホフ
マンおよびブツゲ（Ｈｏｆｍａｎｎａｎｄ Ｂｕｇｇｅ
）（Ｂｅｒ、４１ ： ３１２３１４．１９０８）に
よって発見されたと一般に信じられている。

彼らはＡｇ２ＳＯ４と黄色白金（ＩＩ）配位化合物Ｐｔ
（ＣＨ３ＣＮ）２Ｃ１２とを水溶液中で反応させ、深青
色の無定形物質を単離した。

このものは２価の状態の白金を含む単量体であると考え
られた。

この発見以後、′白金青“および同様な青色生成物に関
する研究につ（・ての二、三の難文がでて℃・る。

ギラードとウィルキンソン（Ｊ。Ｃｈｅｍ、 Ｓｏｃ
、、２８３５−３７．１９６４． ） ハ“白金青“が
Ｐ ｔ （ＣＨｓ Ｃ０ＮＨ） ２・Ｈ２Ｏの実験式を
有し、重合体鎖、橋かげアセトアミド基および２価の白
金を含むと推定した。

ブラウンら（Ｊ。Ａ、Ｃ，Ｓ、９１ ： ｌ １ ：
２８９５−２９０２．１９６９および９０ ： ２０：
５６２１−５６２２．１９６８）は白金青がキレート
性アセトアミド配位子を含み且つ他の２つの配位位置に
ヒドロキシル基を含む白金■錯体であることを示そうと
企てた。

本発明者らは“白金青“反応から青色生成物と紫色生成
物の両方が単離でき、紫色の生成物の方がより高度に酸
化されている（下を見よ）ことを発見した。

この錯体の正確な性質については種々議論されている。

ブラウンら（向上）はまた例えばトリノチルアセトアミ
ドとＰｔ（ＣＨ３ＣＮ）２Ｃ１２またはに２〔ＰｔＣｌ
４〕のいずれかとを加熱することによる高度に着色した
白金錯体の製造を報告している。

この反応からクロマトグラフィーによって３つの成分が
確認された。

そのうちの２つは黄色結晶性物質であり、もう１つは青
色無定形粉末であった。

ブラウンらはこれらの生成物を確実に固定することはで
きなかったと報告しているが、青色物質は４価の白金を
含み、配位圏を完成する二座アミド陰イオンおよび塩素
配位子を持つと推定している。

アミドではなくシス−アミノ基を配位子として含む異常
に着色した白金化合物についての他の唯一の参考文献は
シス−ジクロロジアンミン白金（ＩＩ）と硫酸との混合
物に関するもの（ギラードら、同上）である。

この場合は青黒色の結晶が得られ、予備的Ｘ線回折研究
の結果ｐｔ−ｐｔの距離が３．０６入であり、強力な相
互作用のあることを示唆した。

ギラードらはこの錯体がｐｔ−ｐｔ結合によって結合さ
れた何層ものシス−ジクロロジアミン白金（Ｕ）から敗
り、硫酸イオンは配位アンモニア基に水素結合している
と結論した。

本発明はシス−シアコシアミン白金（ＩＩ）と２・４ジ
オキソピリミジンとの反応によって生成する“白金青“
錯体が腎臓毒性が低く且つ水に対する溶解度の高い抗腫
瘍、抗ビールスおよび抗菌剤であるという発見に基づく
ものである。

適当な２・４−ジオキソピリミジンは式 （上式中、Ｒ１とＲ２とは同じであっても異なってＬ・
でもよく、Ｈ１１個アルキル、ジー低級アルキルアミノ
、ジ−ハロ低級アルキルアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ
、ヒドロキシ低級アルキル、カルボ低級アルコキシから
成る群から選ばれ、Ｒ３とＲ４とは同じであっても異な
っていてもよく、Ｈ，低級アルキルリボシル、デオキシ
リボシル、トリアセチル−、トリベンゾイル−または２
′・３１低級アルキリテンリボシル、リボシル、リボシ
ルホスフェート、チオキシリボシルホスフェートから成
る群から選ばれる） を有する化合物またはその５・６−２Ｈ誘導体を含む。

本発明はまた上記２・４−ジオキソピリミジンとシス−
シアコシアンミン白金（ＩＩ）とを、ピリミジン対白金
化合物のモル比的２：１〜約１：ｌで、温度約Ｏ〜約５
５℃で錯体が生成するのに十分な時間反応させることに
よる白金−〔２・４−ジオキソピリミジン〕錯体の製造
法にも関する。

本発明はまた用量単位形で、薬学的に受容できる担体お
よび上記の２・４−ジオキソピリミジンと白金化合物と
の錯体約１ｍｇ／ｒｕ１．〜約５０■／ｍｌから成り、
腫瘍、細菌性およびビールス性感染ならびに関節炎症状
の治療に適した薬剤組成物にも関する。

本発明はまた腫瘍や細菌性およびビールス性感染に罹病
した生物に上記錯体を体重１ ｋｇ当り約１■〜約８０
０ｍ９投与することから成る腫瘍や細菌性およびビール
ス性感染の治療方法にも関する。

本発明の錯体は簡単のため“白金前“と呼ぷが、上述の
反応からの生成物は実際には混合物であり、分離は極め
て困難である。

分析および分子量測定により、幾つかの結論を引出すこ
とができた。

一般に、本発明の錯体は白金１分子に対して１分子のピ
リミジンを含んでいる。

大体において、１個の錯体は白金１分子につき２個のア
ンモニア配位子、１個のピリミジン陰イオン、１個の水
酸イオンを含んでいるが、その外に結合位置は不明であ
るが２個の酸素原子を含んでいる。

５−フルオロウラシル錯体は例外で、過剰の酸素を含ん
でいない。

本発明の錯体を構成するには白金のシス−ジアンミン構
成が不可欠のように思われる。

本発明の白金錯体の２・４−ジオキソピリミジン残基は
上記のように１．３．５．６の位置に種種の置換基を持
つことができるが、好ましい錯体はＲ１、Ｒ２、Ｒ３、
Ｒ４がそれぞれ水素であるものおよびＲ１、Ｒ３、Ｒ４
がそれぞれ水素でＲ２がＣＨ３であるものである。

この化合物はウラシルとチミンである。

ウラシルおよびチミンとシスシアコシアンミン白金（Ｉ
Ｉ）との反応で生成する錯体は本質的に有効な抗腫瘍、
抗菌および抗ビールス剤であることがわかった。

上述のように、現在の所これらの錯体の正確な構造は不
明である。

しかし、これら錯体は水に極めて良く溶ける。

これらの錯体は適当な２・４ジオキノピリミジンとシス
−シアコシアンミン白金（川とを水溶液中で、２・４−
ジオキソピリミジン対白金錯体のモル比的２：１〜約１
：１で、約０〜約５５℃の温度、好ましくは室温で、錯
体を生成するのに十分な時間、好ましくは約１〜約２１
日間反応させることによって製造することができる。

本発明の方法はｐＨが約３〜約８の範囲、好ましくはｐ
Ｈ約６．５の水性媒質中で行うことが好ましい。

本発明の化合物の最も顕著な特性は水に非常に溶けやす
いことであり、水１ＯＵｌｌに１′？程度溶解する。

このように水に溶は易いため本発明の錯体は生物の腫瘍
および細菌性およびビールス性感染の治療に特に適して
いる。

例えば、シス−シアコシアンミン白金−ウラシル錯体は
スイスホワイトマウスの腹水サルコマ−１８０腫瘍に対
して特に有効であることがわかった。

この錯体の毒性は極めて低く、スイスホワイトマウスは
この錯体を１回注射した場合体重１ ｋｇ当り５００■
まで全く死亡するものがなかった。

上記の錯体はまたフオウルボックス（ＦｏｗｌＰｏｘ）
ビールスをこの錯体と共に極めて短期間培養した後被接
種系としての胚芽卵に接種した場合このビールスに対し
て有効であることもわかった。

また、この錯体はビールス接種後に注射しても、生ビー
ルスが腹を侵す場合に典型的な膿庖の発生を十分防止す
ることができることも見出だされた。

白金−ウラシル錯体の広範囲の活性のもう１つの例とし
て試験管培養で生育した大腸菌に対して試験を行った。

極めて低濃度（すなわち５ｐｐｍ）でも、大腸菌は塊と
なり、糸形成は全く見られなかった。

高濃度（すなわち４０ｐｐｍ以上）では菌は完全に死滅
した。

白金−ウラシル錯体はＡＤＪ／ＰＣ６腫瘍系に対しても
有効であった。

本発明の錯体は腫瘍、細菌性およびビールス性感染の治
療用の薬剤組成物の製剤に用いる通常の調剤用担体と混
合することができる。

この薬剤組成物は、用量単位剤形で薬学的に受容できる
担体と約１■／ｒｎｌ〜約５０■／ｍｌの上記錯体とを
含むべきである。

白金−ウラシル錯体および関連錯体の投与形式は治療し
ようとする疾病の種類によって異なる。

溶液は腹腔内、筋肉内、皮下または静脈内注射によって
投与することができ、固体としては経口投与することが
できる。

以下、本発明を実施例で説明するが、これらの実施例は
本発明を限定するためのものではない。

実施例 １ ３１のシス−ジクロロジアンミン白金（ＩＩＫ ０．０
１モル）と０．０２モルの硝酸銀とを１００７７１１の
水中で、暗室中、２３℃で１夜間攪拌した。

銀は白金錯体から塩素を除去し、シス−シアコシアンミ
ン白金（ＩＩ）を１００％の収量で得る。

次に塩化銀を１過して取る。

銀イオンは溶液から完全に除く必要がある。

残留溶液の少量を取り、少量の０．１ ＭＨＣＩ を加
えて過剰の銀があるかどうかを試験する。

もし、溶液が濁ったら反応はまだ完了していないことに
なる。

溶液が透明のま〜であれば反応は完結したと考えられる
。

次に溶液を２． ＯＮ水酸化ナトリウムで中和し、最終
ｐＨ値を６と７の間にする。

次に、１．１２Ｐのウラシルを１００７ｒｌｌの水に溶
解してスラリーをつくる。

２．ＯＮ水酸化ナトリウムでｐＨを９に調節し、５０℃
に加温してウラシルを溶解させ、０，０１モルのウラシ
ルを含む溶液を得る。

次に、このウラシル溶液をシス−シアコシアンミン白金
（ＩＩ）錯体と１：１のモル比になるように混合する。

ｐＨを６と７の間に調節する。

容器に栓をして、アルミ箔でカバーし、３７℃の水浴中
に１週間放置して反応を完結させる。

約２４時間後に青色が生じる。

１週間後には少量の青色沈殿ができてＬ・る。

この溶液を１夜間Ｏ℃近くに冷却すると多量の青色沈殿
が得られる。

これを１過し、非常に少量の冷水で洗う。

ｒ液を多量（毎回的１５０ｍ０の沸騰している１００％
エタノールで３回洗い、存在する過剰のウラシルを除去
する。

３度目の洗浄エタノールは４後透明でなげればならない
。

これは溶液中にもはや遊離のウラシルが存在しないこと
を示す。

ｒ液を風乾し、次に４０℃で１２時間真空乾燥する。

この結果、純粋な白金−ウラシル錯体の暗青色粉末試料
が得られる。

最初の濾過の上澄液を元の容積の約２５％になるまで蒸
発し、等容のエタノールを加えた。

０℃に冷却すると青色沈殿と暗緑色溶液とが得られた。

この青色沈殿を１過し、１液をさらに濃縮した。

さらにエタノールを加えると淡緑色の沈殿が得られた。

従って、本発明の方法では明らかに“白金前“化合物の
複雑な混合物が得られる。

しかし、本発明は反応混合物の種々の成分全部を混合物
の形または単離された形のいずれかで含むものであると
解すべきである。

一般に、最初に得られた沈殿すなわち青色沈殿は水−エ
タノール混合物中への溶解度が低く、第２回目に得られ
た成分の方が水−エタノール系により可溶性である。

実施例 ２ ２′・３′・５′−トリアセチルウリジンを用Ｌ・、溶
液を蒸発乾固して錯体をエタノールに溶解する以外は実
施例１の操作を繰返した。

エーテルを加えると暗青色の吸湿性沈殿が得られ、これ
を集めてエーテルで洗った。

実施例 ３−１３ 実施例１の操作に従って第１表記載の錯体を製造した。

第１表には実施例１および３−１４の錯体の元素分析も
示しである。

本発明の“白金前“錯体の中には単量体、２量体および
３量体を含むオリゴマ一種の混合物もあると考えられる
。

この理由のため、錯体の赤外スペクトルから構造の特徴
を解釈するのはむずかしい。

これらの錯体は可視赤色領域に１個または２個のピーク
から成る吸収帯を持つことを特徴としており、このため
種々の錯体が特性的な緑色、青色または紫色を示す。

上で製４したシス−シアコシアンミン白金（ｌＩ）−ウ
ラシル錯体の吸収スペクトルは第１図に示しである。

赤外吸収スペクトルからアンミン配位子が存在し、環状
構造が依然として存在すると推定される。

これらの錯体は水に対する溶解度は高いが、ジメチルホ
ルムアミドやジメチルスルホキシドのような溶剤には溶
解度が非常に低い。

白金−ウラシル錯体はＸ線回折および電子線回折分析か
ら完全に無定形物質であることがわかっている。

導電性試験ではこの錯体が中性であることを示唆してい
る。

白金−ウラシル錯体の多数の種々の試料の可視スペクト
ルを濃度１０ｍ９７１０′ｒＩｌｌ（１ｍｙ／ ］ ｍ
Ｏの水溶液でＩＣＴＬの石英セルを用いてカリ−（Ｃａ
ｒｙ）１５分光光度計で測定した。

分子量が１２００であると分析された試料のスペクトル
には７２２ｎｍに吸光度的０．９の中心を持つ幅広い吸
収帯と５８２ｎｍ（光学密度−０，７４）の幅広い肩と
がある。

単量体（分子量約４００）と考えられる試料のスペクト
ルには６１７ｎｍ（光学密度０．６）に幅広い肩、５６
３ｎｍ（光学密度０．６２）に幅広い吸収帯、４６８
ｎ ｍ （光学密度０．４２）に吸収帯があった。

パリアンＡ５６／６０分光計で、ＤＳＳ （ＴＭＳの水溶形）を内部標準（Ｏｐｐｍにセットする
）として用い、Ｄ２０溶液中で白金−ウラシル、チミン
および５・６−シスチルウラシル錯体試料のプロトン磁
気共鳴（ＰＭＲ）スペクトルを測定した。

白金−ウラシル錯体は２．８４ ｐｐｍに中心を持つ鋭
い二重線（２，７６ｐｐｍおよび２．９２ｐｐｍにピー
ク）、４．４７ｐｐｍに溶媒によるピークおよび７．６
９ に弱く幅広い吸収ｐｍ （ｌｐｐｍ幅で１／２の高さ）を示した。

溶媒ピークを４．４７ ｐｐｍに調節した場合ｐｔ−チ
ミン錯体では、スペクトルは１．７１ に幅広い１
９ｍ （１／２高さで２ｐｐｍ幅）ピーク、２．８５ｐｐｍに
中心を持つ鋭い二重線（２，７７ｐｐｍ と２．９３ｐ
ｐｍにピーク）および７．５ｐｐｍ（おそらく未反応の
遊離塩基による）に弱く副広いピーク（ｌｐｐｍ幅）を
示した。

Ｄ２０の中の遊離ウリジンのＰＭＲスペクトルは７．６
５ｐｐｍにウラシルのＨ６に帰属する二重線および５．
８０ ｐｐｍにＨ５プロトンによる二重線（溶媒ピーク
４．５４ｐｐｍ 、Ｏｐｐｍ ＫＤＤＳのピーク）を示
した。

遊離チミンのｄ７−ＤＭＦ溶液のＰＭＲスペクトルは１
．７２ｐｐｍにメチルプロトンに帰属する鋭Ｌ・ピーク
および７．２０ｐｐｍ ＫＨ６に帰属する弱く幅広いピ
ークを示す（ＴＭＳのピークをＯｐｐｍにセットした場
合）。

５・６一ジ２メチルウラシル化合物のスペクトルは４．
４７ ｐｐｍのＨＤＯのピークに対して１．７６ｐｐｍ
および２゜Ｏ７ｐｐｍ にピークを示した。

これらのスペクトルから、これらの塩基中のプロ）・ン
の磁気環境は青色錯体中にこれら塩基が配位する場合に
変化してプロトンの遮蔽が増加するとだけ結論すること
ができる。

Ｘ線光電子分光学から白金の４ｆ電子の結合エネルギー
について化学分析のための電子散乱（ＥＳＣＡ）測定を
行うとシス Ｐ ｔ （１’Ｊ）（３）２ Ｃ１２７３，０２ｅＶの
値が得られる。

白金−ウラシル錯体中のｐｔでは７３．６ｅＶの値が得
られた。

このことは白金−ウラシル中の白金の原子価状態が■で
あって■ではないことを示唆している。

白金−ウラシル錯体の青色沈殿の電子吸収スペクトルは
５５０〜６５０ｎｍの付近に５００〜１０００７１モル
／ＣｒｒＬ程度の分子吸光係数を持つ幅広い吸収帯を示
す。

白金ウラシル錯体の緑色沈殿の方は７２０ｎｍ付近に同
様な強度の単一の幅広い吸収帯を示す。

これら青色化合物および緑色化合物は２９０Ｈｍ付近に
非常に強い吸収帯がある。

スイスホワイトマウスの腹水サルコマ１８０腫瘍を用い
て“白金前“錯体の化学療法活性を測定した。

試験方法は次のようにして行った。体重１８〜２０１の
無作為様の雌のスイスホワイトマウス（米国ミシガン州
、ウィリアムストン市スパータン研究所からの）を無作
為的に６匹ずつ群に分けた。

約１０日間を経た腹水腫瘍を持つマウスの腹膜腔から腹
水細胞を取った。

この細胞を０．８５％食塩水で数回洗い、毎回７５０
ｒ、 ｐ、ｍ。

で３〜５分間冷凍遠心機で遠心分離した。

細胞がら血液を除いた後、細胞を０．８５％食塩水で希
釈して血算計で勘定した。

最終的には食塩水中２×１０７細胞／ｍｌになるように
希釈した。

この懸濁液０．２ ｍｌ！を各マウスに与えた（４Ｘ］
０６細胞／１匹）。

これは各試験の第０日に腹膜腔内に注射した。

２つの群（１２匹）を負の対照群としてとっておき、試
験はこの負の対照群の平均死亡日数の２倍の日数で終了
した。

２つの群（１２匹）を正の対照群とし、第１日にシス−
ジクロロジアンミン白金（ＩＩ）の食塩水溶液を７ｙｎ
９／ｋｇの量で腹膜腔内注射した。

すべての試験化合物は第１日に化合物を水、生理的食塩
水または落花生油中に分散したもの０．５ ｒｎｌを腹
膜腔内注射した。

可溶性の化合物は常に適当な溶液の形で試験し、不溶性
の化合物はスラリーとして試験した。

スラリーは１０分間までツニケーションして（５ｏｎｉ
ｃａｔｅｄ ） 確実に一様に分散した後、直ちに注射
した。

一般に、各化合物につし・て倍量関係で４段階の投与量
で試験を行なった。

最高投与量でも十分な薬品毒性レベルに達しない場合に
は再試験を行なった。

試験終了時になお生存しているマウスは評価当日に死亡
したと考えた。

この日に腹部膨満（触疹または肉眼で）を示さないマウ
スは治癒したと考えた。

治癒したマウスの中には、細胞注射部位のまわりに後に
なって固い腫瘍を生じたものもある。

これは注射時に針の経路に沿って細胞が洩れたかあるい
は腹膜腔内の注射孔を通って後になって細胞が洩れたと
考えられる。

何れにしても、これは偶発的な作用であり、注射時に注
意し且つより細い注射針を用（・れば無視できるように
なるはずである。

試験した化合物は通常新しく製造して精製したものであ
る。

さらに後で試験するために保存する場合は真空テシケー
ターに入れ、これを冷暗所に保存して劣化を防いだ。

一般に、試験した化合物はすべて毒性レベルが２００ｍ
９／ｋｇまたはそれ以上であった。

毒性レベルは６匹のマウス中２匹以上が注射後８日以内
に死亡する場合の投与量と考える。

この時間後に死亡するマウスは負の対照群の初期死亡と
重複する。

試験した錯体の中には、高い投与量レベルで注射後間も
なくマウスの後脚がひどく伸びたものがある。

しかし、最初の２日間生存していたマウスは一般に毒性
による死亡の限界である８日を過ぎても生存していたが
、中には早期に死亡するものもあった。

白金錯体についての初期の経験と全く同様に、ひどい肝
臓傷害が極めて少ないかあるいは全くない（Ｐｔ（ＣＨ
３ＣＮ）２Ｃ１２、白金−メチルウラシルおよび白金−
５−ブロモ−１−メチルウラシル錯体は例外）。

後の時期（評価当日および治癒マウスで３か力抜まで）
に同様な症例数で腹膜炎が生じた。

２．３の化合物では高投与量の注射後間もなく神経筋障
害の症状が見られた（例えば白金−ウラシル緑色沈殿）
。

被検動物には中枢押えの障害の症状は全然見られなかっ
た。

固体サルコマ−１８０とは異なって、スイスホワイトマ
ウスの腹水腫瘍は自然退化は示さず（０／３３６ ）、
腫瘍にかかったマウスはすべてが死亡し、腫瘍にならな
かった百分率は０％であった。

平均死亡日数は１７．５日で、標準偏差は小さい（±２
２日） 試１験結果は第２表に示しである。

文字Ａは“青色“沈殿すなわち第１単離沈殿を示し、文
字Ｂは“緑色“沈殿すなわち第２沈殿を示す。

表中に記載したデータは担体、試験した投与量範囲、毒
性レベル（上記参照のこと）、最良寿命増加百分率（％
ＩＬＳ）（実験は負の対照群の平均寿命の２倍の日数で
終了したので最高は１００％である）、最良の％ＩＬＳ
を与える投与量レベル、接種剤の物理的状態（溶液また
はスラリー）および最後が治癒したマウスの数（各群の
６匹中の数）である。

第２表の結果は第１日に１回だけ腹膜腔内注射した場合
に得られた結果である。

この方法は治療法として最良ではないので、薬品試料を
選んで計画に従って試験を行なった。

この結果を第３表に示す。

最初の日に３時間毎に１ｍ９／ｋｇずつのシス−ジクロ
ロジアンミン白金（ｎ）を８回注射した場合、７ｍｇ／
ｋｇを１回注射した場合（正の対照群）より驚くほど良
好な結果が得られた。

第４〜７表には、Ｌ１２１０、ＭＣＤＶ１２（ビールス
によって誘起されたラウシャー白血病）、エーリンヒ腹
水症およびＡＤＪ ＰＣ６Ａ（骨髄★★腫）腫瘍に対
して本発明の錯体を用（・た場合に得られた結果を示す
。

腎臓毒性はシス−ジクロロジアンミン白金（ＩＩ）で治
療する際の高等動物および人間における服用量を制限す
る副作用である。

腎臓毒性がはるかに少ない他の白金製剤を見出だすこと
が望ましい。

ここに記述する組織病理学的試験結果はゝ白金−ウラシ
ル青“のグループＩＡはシス−ジクロロジアンミン白金
（ＩＩ）またはシス−ジクロロ（ビス）シクロペンチル
アミン白金（ＩＩ）より腎臓障害を起こす可能性が少な
く、これらとほぼ同程度の治療効果が得られることを示
した。

これらの試験は次のようにして行なった。

雌のスイスホワイトマウス６匹を１群とした。

腫瘍マウス群には第０日に固体サルコマ１８０腫瘍を移
植し、第１日から治療を開始し、第１０日にマウスを殺
し、腎臓を取り出して組織学的検査を行なった。

対照群としては腫瘍移植せず且つ治療も行わないマウス
群と腫瘍移植して治療は行わないマウス群を用いた。

各腎臓の種々の部分について検査シタ。

シス−ジクロロ（ビス）シクロペンチルアミン白金（Ｔ
Ｉ）は非常に難溶性であり且つ通常落花生油中のスラリ
ーとして試験されるので本発明者沫※らは他の薬品と比
較するため食塩水中の飽和溶液として試験する必要があ
ると感じた。

その飽和濃度は明示できず、概算で１■／１００１′Ｌ
ｌより少ないとしか言えない。

第８表にごく簡単な結果の概要を示す。

すべての場合に、組織病理学的退化性変化は投与量に依
存している。

シス−ジクロロジアンミン白金（ＩＩ）およびシス−ジ
クロロ（ビス）シクロペンチルアミン白金（ＩＴ）の投
与量レベルカ高い場合には近位的尿細管の一般的空胞性
（水滴様）変性が生じたが、′白金−ウラシル青“グル
ープＩＡの高投与量の場合にはひどい多重小壌死病巣が
いくらかあるが一般には軽度の退化性変化を生じただけ
である。

変性組織の病巣を含む腎臓の機能は全解剖学的および生
理学的領域（すなわち近位的尿細管）が含まれる腎臓の
場合よりも障害のひどさは少ないので、ゝ白金−ウラシ
ル青“グループＩＡはほぼ同等の治療効果を示す投与量
で比較する時、他の２つの上記錯体より腎臓毒性が低い
（腎臓の組織病理学的証拠に基づいて）と判断される。

白金錯体の抗菌活性を試験するため次の方法を用いた。

この試験は試験管培養で生育させた大腸菌（ワイルド型
）について行なった。

標準化方法を用い、種々の被検薬品添加後の両地中での
菌の成育状態を時間に対する培地の光学密度の増加を用
いて検査した。

また菌の伸張（糸形成）の証拠を得るため周期的に位相
差顕微鏡で検査した。

試験結果は第９表に示す。

本発明の白金錯体はかなり低濃度で細菌の凝集塊を生じ
る。

例えば、白金−ウラシルは！５ｐｐｍの濃度で凝集塊を
生じる。

より高濃度では凝集塊を増加し、ついには細菌を死滅さ
せる。

この結果は本発明の白金錯体が約４０ｐｐｍ程度の低濃
度で強力な抗菌剤となることを示すものと考えられる。

次の方法に従って本発明の白金錯体の抗ビールス活性を
試験した。

この方法ではフオウルボックス（Ｆｏｗｌ Ｐｏｘ）
ビールスと胚芽卵とを用いる。

第１の型の試験では、既知濃度のビールスを既知量の被
検薬品とともに種々の期間培養した後、この接種剤を胚
芽卵に注射し、第１０日にこの卵を開き、絨毛尿膜を除
き、痘癒病巣の数を勘定する。

ｋこの型の試、験では試験管内での新薬との直接の相互
作用によってフォルボックスビールスの試験管内不活性
化を測定する。

第２の型の試１験は既知の力価（ｔｉｔｅｒ ）のフォ
ルボックスビールスを胚芽卵に接種した後、被験薬品を
１同紙毛尿膜上に注射する。

数時間後にビールス粒子は消え、ピリオン（ｖｉｒｉｏ
ｎ ） が細胞中に組み入れられてその反覆サイクル
を開始している“蝕相（ｅｃｌｉｐｓｅｐｈａｓｅ ）
“中に入りこみので、この試、験は被検化合物が細胞中
に入ってビールスの繁殖過程を中断させる能力を示す。

この２つの型の試験結果は第１０表および第１１表に示
す。

試験管内不活性化試験では、白金−ウラシル錯体に曝露
するとほとんど直ちにビールスは完全に不活性化される
ことがわかった。

生存能力のあるピリオン（ｖｉｒｉｏｎｓ ）の不活性
化はほぼ１００％に近い。

約２６時間までの培養ではこのほぼ１００％の不活性化
を依然として示す。

この試験管内試験から本発明の白金錯体の抗ビールス活
性は極めて有効であることがわかる。

第１２表の生体内不活性化の結果から、本発明の白金−
ウラシル錯体はビールス接種後４時間まで痘癒病巣の数
を抑制する作用があり、かかる病巣数を６８％減少させ
ることがわかる。

この試験を繰返した結果を第１２表に示す。

この場合も、ビールスを接種してから４時間後に痘癒病
巣数の減少率は約８０％であった。

【図面の簡単な説明】

図面はシスージアクオジアミン白金（ＩＩ）ウーブルの
吸性スペクトルを示す。 フシル

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 白金−〔２・４−ジオキソピリミジン〕錯体混合物
   の製造方法にお（・て、式 （上式中、Ｒ１とＲ２とは同じであっても異なっていて
   もよく、Ｈ１低級アルキル、ジー低級アルキルアミノ、
   ジ−ハロ低級アルキルアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、
   ヒドロキシ低級アルキル、カルボ低級アルコキシから戒
   る群から選ばれ、Ｒ３とＲ４とは同じであっても異なっ
   ていてもよく、Ｈ１低級アルキルリボシル、チオキシリ
   ボシル、トリアセチル−トリベンゾイル−または２′・
   ３’ （ｆｉｇアルキリテンリボシル、リシジル、リボ
   ンルホスフエートおよびデオキシリボシルホスフェ−１
   ・から成る群から選ばれる） を有する２・４−ジオキノピリミジンまたはその５・６
   −２Ｈｉ導体とシス−シアコシアンミン白金（ＩＩ）と
   を、２・４−ジオキソピリミジン対シスシアコシアンミ
   ン白金（ＩＩ）のモル比約２：１〜約１：１で、約０〜
   約５５°Ｃの温度で上記錯体混合物を生成するのに十分
   な時間反応させ且つ上記錯体混合物を単離する事を特徴
   とする一ヒ記方法。