JPS5818345A - 環状ヘキサペプチドの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 環状へキサペプチド、ソマトスタチン同族体、シクロ−
（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＶａＪ−Ｐｈｅ−Ｎ　−Ｍｅ　
−Ａ　ｌ　ａ−Ｔｙ　ｒ）を、対応する鎖状ペプチドヒ
ドラジドの環化にＪニジ少量で合成する場合、合成方法
は環化反応系を希釈した条件下で行い、三量化を防ぐ必
要がある。多量の環状へキサペプチドが必要な場合は、
非常に大きな反応容器を用いて、上述の希釈量にする事
が必要である、本発明の方法は多量の環状へキサペプチ
ドを合成出来るが、さらに濃縮した反応混合物で行う事
が出来、多量の溶媒が必要でなくなる。結果として多量
の生成物を合成する場合、費用を節約出来る。

本発明は、鎖状ペプチドの反応性が予期し得ない桿菌く
、ふつう以上に高濃度の反応溶液を用いる事が出来るよ
うな溶液合成法を用いた環状へキサペプチドソマトスタ
チン同族体、シクロ−（Ｄ−Ｔｉｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−
Ｐｈｅ　−Ｎ　−（４） Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ）の合成法に関連している。この
よう々環化反応工程を記述するのが本発明の目的である
。更に本発明の目的は、この環状へキサペプチドの種々
の鎖状前駆体を記述する事にあり、又、その鎖状前駆体
の−っの可能な製法を記述する事にある。更に又以下に
述べる事から他の目的は明らかになろう。

環状へキサペプチド、シクロ−（Ｄ　−Ｔｒｐ−Ｌｙｅ
−Ｖａｌ−Ｐｈａ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ　）は
原ソマトスタチン分子の１４位置中の６位置を利用した
ソマトスタチン同族体である。この化合物はグルカゴン
、成長ホルモン、インシュリンの放出を阻害する。本化
合物はソマトスタチンよシ活性が高く、彦性の持続時間
が長い。このように本化合物は、ソマトスタチンよりも
選択的な生物活性を有する。本化合物は、末端肥大症、
糖尿病、糖尿病性網膜症の治療に有益である。

本願において、アミノ酸成分、保護基、試薬、溶媒に略
号を用いる。略号の意味を表Ｉに示す。

表　　Ｉ 略号　　　　　アミノ酸 Ｌｙｓ　　　　　　リジン Ｐｈｅ　　　　　　フェニルアラニン Ｔｒｐ　　　　　　）リプトファン Ｔｈｒ　　　　　　スレオニン Ａｈａ　　　　　　７−アミノへブタン酸’ｌ”ｙｒ　
　　　　　チロシン Ｖａｌ　　　　　バリン Ａｂｕ　　　　　　α−７ミノ酪酸 Ｓｅｒ　　　　　　セリン Ａｓｎ　　　　　　アスパラギン Ｐｒｏ　　　　　　プロリン Ａｓｕ　　　　　　アミノスベリツクアシドＣｙｓ　　
　　　　システィン ｌＮ０Ｃイソニコチニロキレ力ルボニルＢＯＣｔａｒｔ
−ブチロキシカルボニルＯＭｅ　　　　　　メチルエス
テル 略号　　　　　　保護基 Ｂｕ　　　　　　　ｔｅｒｔ−ブチル Ｃｂｚ　　　　　　ベンジロキシカルボニルＢｚｌ　　
　　　　ペンシル ２−ＣＩ−Ｃｂｚ２−クロロベンジロキシカルボニルＡ
ｃｍ　　　　　　アセトアミドメチルＭｅ　　　　　　
　メチル ＯＮｐ　　　　　　　ｐ−二トロフェニルエステルＨ８
Ｅ　　　　　　　　Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエス
テルＨＢＴ　　　　　　　　１−ヒドロキシヘンソトリ
アソールＤＣＣＩ　　　　　　シシクロヘキシル力ルポ
ジイミトＴＦＡ　　　　　　　）リフルオロ酢酸ＴＥＡ
　　　　　　トリエチルアミン Ｄ　Ｉ　ＰＥＡ　　　　　ジイソプロピルエチルアミン
ＥＤＴ　　　　　　　エタンジチオールＤＰＰＡ　　　
　　　ジフェニルホスホリルアジド５ＤＰＰ　　　　　
　Ｎ−スクシンイミジルジフェニルホスフェート （７） 略号　　　　　　溶　媒 ＥＰＡＷ　　　　　　酢酸エチル−ピリジン−酢酸−水
ＢＡＷ　　　　　　ブタノール−酢酸−水ＣＭＷ　　　
　　クロロホルム−メタノール−水ＤＭＦ　　　　　　
ジメチルホルムアミドＴＨＦ　　　　　　テトラヒドロ
フラン本発明は特に鎖状ヘキサペプチドを上述の環状へ
キサペプチドに環化する反応に言及する。多くの異った
鎖状ペプチドを、１つの環状ペプチド合成のために用い
る事が出来る事を理解されたい。これは一度、鎖状化合
物が環化してしまえば、それが合成された前駆体の鎖状
化合物を決定出来ないためである。環状ペプチドを製す
るのに用いる事の出来る６種の可能な鎖状ペプチドのう
ち５種が本方法で用いる高濃度での反応を行うのに十分
反応性がある。これらの鎖状ヘキサペプチドは、Ｈ−Ｄ
−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ
ａ　−Ｔｙｒ−ＯＨ Ｈ−Ｔｙ　ｒ−Ｄ−Ｔｒ　ｐ−Ｌｙ　５−Ｖａ　１−Ｐ
ｈ　ｅ−Ｎ−Ｍｅ　−Ａ　１　ａ−ＯＨ （８） Ｈ−Ｐｈｅ−Ｎ−Ｍｅ−ＡＩ’ａ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ
−Ｌｙｓ−Ｖａｌ　−０Ｈ Ｈ−Ｖａ　ｌ−Ｐｈｅ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ−Ｔｙｒ−
Ｄ−Ｔｒｐ　−Ｌｙｓ−ＯＨ Ｈ−Ｌｙｓ−Ｖａ　ｌ−Ｐｈｅ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ−
Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔ　ｒ　ｐ　−ＯＨ 良好な鎖状ペプチドは上述の最初のペプチドである。

上述のペプチドの環化はリジン側鎖を保護して行う。こ
の場合、ペプチドの分野で良く知られた多くの保護基を
用いる事が出来るがベンジロキシカルボニル（Ｃｂｚ）
が良好である。その他の保護基の例としては、環１サブ
チロキシカルボニル、９−フ九オレニルメチロキシ力ル
ボニル、ｐ−１ルエンスルホニル、ベンゼンスルホニル
の芳香環置換形、アセチル、ハロゲン化アセチルイソニ
コチニロキシ力ルボニル、フタルイミド、４．５−ジフ
ェニル−４−オキサゾリン−２−オン、トリチルスルフ
ェニル、アリールスルフェニル、及びその塩、である。

上述の保護基ＵＬｙｓアミノ酸の保護に用いられるが、
反応工程を通じ、ペプチド鎖の他の官能基を保護する事
が出来る。特に、混合無水縮合反応において反応性アミ
ノ酸のＮ末端水素を保護するのにｔｅｒｔ−ブチロキシ
カルボニル（ＢＯＣ）を用いる。

本鎖状ペプチドの特異性ハ環化反応が多くの環化反応で
みられる反応速度よりも速い。

結果として通常のペプチド環化反応に用いる場合よりも
高濃度で反応を行う事が出来る。

このため、鎖状ペプチドの量に対して用いる反応系の量
が大巾に減少できる。この結果、かさ高い反応系を用い
ずに、多量の環状へキサペプチドを合成出来る。反応は
一般に０．５〜０．００１モル濃度で行うが、０．００
８モル濃度を用いると良好である。この濃度は通常のペ
プチド環化反応に用いる濃度の１０〜１００倍である。

反応ＵＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスル
ホキサイドの溶媒中、三級アミン又は無機塩基の如き塩
基及び環化剤の存在下で行う。三級アミンはトリエチル
アミン、無機塩基は炭酸水素ナトリウムが良好である。

炭酸水素ナトリウムを過剰に用いるのが最も艮い。環化
剤は次に示すものから選ぶ。

ジフェニルホスホリルアジド Ｎ−スクシンイミジルジフェニルホスフェート ジフェニルホスホリルシアニデート ジシクロヘキシル力ルポジイミト（１−ヒドロキシベン
ゾトリアソール及びＮ−ヒドロキシスクシンイミドの如
き添加求核触媒の存在する条件下） イソブチルクロロホルメート及び他のアルキルクロロホ
ルメート エトキシアセチレン Ｎ−エチル−５−フェニルイソオキサツリウム−３′−
スルホネート １−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒ
ドロキノリン ジアルキルジスルフィドを併うトリフエニ　。

ルホスフイン 良好な環化剤はジフェニルホスホリルアジＦ　（ＤＰＰ
Ａ　）及びＮ−スクシンイミジルジフェニルホスフェー
ト（５ＤＰＰ　）であり、ＤＰＰＡが最も良好である。

環化反応はＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド中−３０〜＋
２５°Ｃで行い、１〜５０時間で完了する。

溶媒を留去し、この分野で精進した者にとって良く知ら
れた方法で生成物を単離する。

上述の方法により環化する鎖状ペプチドστ般に鎖状ペ
プチドを合成するのに用いる多くの方法で製する。この
方法は出発物質のペプチドの源として、多くの特殊な合
成工程に依存しない。

しかし、それ自体満足のいく一つの方法を次の反応工程
図で概略する。この反応工程は、環化に用いる事の出来
る鎖状ペプチド、すなわち、Ｈ−Ｄ　−Ｔｒ　ｐ−Ｌｙ
ｓ　−Ｖｏ　Ｉ−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ　−Ａｌ　ａ−Ｔ
ｙｒ−ＯＨを製するものである。鎖状ペプチドは、保護
して、多くの期待されない副反応を防ぐ。

ＢＯＣ−Ｎ−Ｍｅ　−Ａｌ　ａ　−ＯＨｆ’ｌｌ↓ ＢＯＣ−Ｎ−Ｍｅ−ＡＣａ−Ｔｙｒ　−ＯＭｅ　（ｍｌ
↓ ■ Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ
−Ａｌａ−Ｔｙｒ−ＯＨ，（■）シクロ−（Ｄ−Ｔｒｐ
−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙ
ｒ）　　ＩＩＫＩ↓ シクロ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ　−Ｎ
−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ）　　ｆｘｌ上に示した反応工
程において、化合物■、旧、■、■及び■を合成する縮
合反応は混合無水物法で行う。アミノ酸又はペプチドに
、アミノ酸又はペプチドを加える方法は全て、基本的に
同じ化学を包含している。保護化アミノ酸又はペプチド
をイソブチルクロロホルメートと、当量の、例えばＮ−
メチルモルホリンの如き塩基の存在下、反応せしめて混
合無水物を得る。反応は一３５〜０°Ｃで行うのが良く
、５〜３０分で完了する。次に保護化した、縮合すべき
アミノ酸又はペプチドを加え一１０〜０°Ｃで１〜５時
間時間反応物を攪拌する。反応により、炭酸ガスとイソ
ブチルアルコールが発生する。生成物は、この分野で精
通した者にとって良く知られた方法で単離する。

混合無水物縮合反応に先たち、基質を選択的に保護基を
除去し、目的の反応部位で反応を行うようにしなくては
ならない。化合物■、璽、■の場合、ＢＯＣ保護基の除
去である。

ＢＯＣ−保護ペプチドは塩化水素ガス又はトリフルオロ
酢酸を用いて、酸触媒により除去する。化合物■の保護
基を除去する場合トリフルオロ酢酸が良好であり、他の
場合は塩化水垢カスが良い。酢酸エチル、ジオキサン、
テトラヒドロフラン等の溶媒中塩化水素カスの飽和又は
１５％以上の溶液を一５０°〜＋１５°Ｃで２分〜９０
分攪拌下、ゆっくり加える。

酢酸エチルが、この場合良好であり、−１０°Ｃで行う
のが良い。トリフルオロ酢酸を用いる場合、メチレンク
ロライド中１：１混合液が一般に良好であるが、場合に
より１００チドリフルオロ酢酸でも１い。反応は一３０
°Ｃ〜室温で５分〜３時間行うが、−１０°Ｃで行うの
が良好である。

形成するペプチド又は反応を行うペプチド中にＴｒｐが
存在する場合、エタンジオール又は他の強求核試薬の如
き当量の捕捉剤を加えてＴｒｐ残基での副反応を防ぐ。

化合物■の合成において、ケン化及びＢＯＣ除去の工程
が存在する。これはＣ−末端メチルエステルを除去し塩
化のためのペプチドを製するためのものである。エステ
ルは水酸化ナトリウム又は、他の張水酸化塩基と反応せ
しめる。溶媒は水及び水に可溶の有機溶媒の混合液で、
少くとも５０％の水が必要である。

テトラヒドロフラン、ジオキサン、メタノール、エタノ
ール等を用いる事が出来る。この場合テトラヒドロフラ
ンが良好である。ｐｌｌを９〜１２５に保つが、この範
囲の高いｐＨが良好である。反応は、ラセミが起きるた
めに、ｐＨ１２，５を起えてはならない。反応はふつう
室温で３０分〜１２時間行う。

こうして製した化合物（■）を次に、以下に述べる如く
環化する。

最終生成物を製するため、Ｌｙｓ残基上の保護基を除去
しなくてはならない。一般にＣｂｚ基を用いるが、この
場合、触媒水素化分解により最も効率良く除去出来る。

還元する水素に、この場合、キ酸から発生させる。（一
般にはキ酸溶媒又はキ酸アンモニウムとして存在せしめ
る）触媒はパラジウム−炭素金柑いる。パラジウムは一
般に、炭素担体中１０％重量を含有せしめる。触媒量は
ペプチド重量の５〜１００％を用いる。他の水素発生化
合物として、■、４−シクロへキサジエン、シクロヘキ
サンを用いる事が出来るがキ酸が良好である。反応はメ
タノール、エタノールの如き、アルコール溶媒中、０〜
５０　’（３で行なうが、室温が良好である。反応は３
０分〜２４時間で完了する。生成物を単離し、この分野
で精通する者にとってよく知られた方法で精製する。

ジペプチド■を製する他の方法を次に概略する。

Ｃｂｚ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｃｂｚ
ＶＩ　　　　　　　　　　　　　　　　　　ＸＩ保護化
リジン（ＸＩ）をメタノール中、三フッ化ホウ素エーテ
ル溶液と、３０〜６５°ｃで１０〜４０時間加熱せしめ
てメチルエステル塩酸塩（Ｘｌｌ）に変換する。次に化
合物知を上述の如き混合無水物法を用いてＢＯＣ保護Ｔ
ｒｐと反応せしめて縮合する。メチルエステルは、上述
の■→■の方法と同じくケン化する。

次の実施例は本発明をよく理解されるために示したもの
であり、本発明を限定するためのものではない。

実施例１ ＢＯＣ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ−Ｔｙ　ｒ−ＯＭｅ１リッ
トルの酢酸エチルを室床カス下−５〜Ｏ’Ｏに冷却する
。イソブチルクロロホルメート（３７６ｔｎ１１２９０
ミリモル）を加え、Ｎ−メチルモルホリン（３１，９ｍ
１．．２９０ミリモル）を加える。粘性のある固形物が
出来る。１０分後、ＢＯＣ−Ｎ−メチルアラニン（５８
９グラム、２９０ミリモル）を加えると、顆粒状の固形
部が出来る。２０分後、チロシンメチルエステル塩酸塩
（５７，９３グラム、２５０ミリモル）を加える。さら
にＮ−メチルモルホリン（２７，９ｍｌ、　２５０ミリ
モル）を加えてｐＨ８にする。２５時間混合物を攪拌し
、５００ｍ７の１Ｎ炭酸水素ナトリウムで３回洗浄し、
５００−の０．５モルクエン酸溶液で３回洗浄する。こ
れを硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下濃縮すると結晶性
の次に示す生成物を得る。

収穫Ａ　　３４．６３グラム融点　１２４−１２５″０
収穫Ｂ　　３１．５６グラム融点　１１６−１２３°Ｃ
収穫Ｃ１６，２２グラム　融点　１．２２−１２３．５
°Ｃ実施例２ ８２．２４グラム（２１６ミリモル）のＢＯＣ−Ｎ−Ｍ
ｅ　−Ａ　１　ａ−Ｔｙ　ｒ−ＯＭｅ及び５００ｍ１！
の酢酸エチルを混合し、窒素ガス下−１０°Ｃに冷却す
る。塩化水素カスを混合物中に導入し、５分後に飽和溶
液が出来る。温度を９°Ｃに上げると固形物が混合物中
から分離し始める。塩化水素カスを、さらに１０分導入
する。温度を一７°Ｃにし窒素ガスを２５分間混合液中
に導入する。冷却浴を除去し、エーテル（３００−）を
加えた後、混合物を濾過する。これを、エーテル−ヘキ
サン１：１混合液（２００ｍｌ）で洗浄し、次にヘキサ
ン２００　ｍｌ！で洗浄する。

固形物を真空下五酸化リンの存在下で室温にて乾燥する
。乾燥生成物は６８．３グラム収量融点１４０−１４２
°Ｃ０ 実施例３ 実施例１の方法に従い、１リツトルの酢酸エチル、３０
６８艷のイソブチルクロロホルメート、２６．０Ｏｔｎ
ｌのＮ−メチルモルホリン、６２．７２グラムのＢ　Ｏ
Ｃ−フェニルアラニン、６８グラムのＮ−Ｍｅ−Ａｌａ
−Ｔｙｒ−ＯＭｅ　ｆ用いて反応せしめ次の如く３種の
収穫を得る。

収穫Ａ、５５．７８グラム、　融点、１．４．５−１４
６．５°Ｃ収穫Ｂ、　　　５．９２グラム、　融点、１
４５−１４．６°Ｃ収穫Ｃ，１２，１７グラム、　融点
、］−４５−１４，６°Ｃ実施例４ 基除去 実施例２の方法に従い、５００ａｌｌ！の酢酸エチル中
７３．３７グラムのＢＯＣ−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ　−Ａ
ｌａ−Ｔｙｒ−ＯＭｅを用い、塩化水素ガスを導入して
、次の如＜　”　Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ＝Ａｌａ−Ｔｙｒ
　−ＯＭｅ″′の３種の収穫を得る。

収穫Ａ５８．２１グラム、 収穫Ｂ　　　６．０５グラム 収穫Ｃ２，４７グラム。

実施例５ 実施例１の方法に従い、４８０−の酢酸エチル、１９．
８４−のイソブチルクロロホルメート、１６．８１．ｍ
ｅのＮ−メチルモルホリン、３３２１グラムのＢＯＣ−
Ｖａｌ　、実施例４の生成物を用い、さらに１０７のＮ
−メチルモルホリンを用いて反応せしめ６６．６６グラ
ムの”　Ｖａ　ｌ−Ｐｈｅ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ−Ｔｙ
ｒ−ＯＭｅ　”を得る。

実施例６ ＢＯＣ−Ｖａ　１−Ｐｈ　ｅ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａ　ｌ　ａ
−Ｔｙ　ｒ−ＯＭｅの保護基除去 １９．０ｒｎｌのメチレンクロライド中４．１．６　ｇ
（６６４ミリモル）のＢＯＣ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ　−Ｎ−
Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−ＯＭｅの懸濁液を窒素ガス下（
ゆっくり流す）１０分間攪拌し、５〜１０°Ｃに冷却す
る。反応混合物を１９０１ｎｌの１００係ＴＦＡと反応
せしめる。この場合１分以内に溶解する。混合物を５′
Ｏ（氷）で３５分間攪拌する。溶液を１５００−のあら
かじめ−２０°Ｃに冷却して攪拌したエーテル中にすば
やく注ぎ入れると、すぐい沈澱が出来る。５〇−のメチ
レンクロライドを用いて侵出する。

５分径１６００−の３０〜６０°石油エーテルを加え、
さらに５分間攪拌する。混合物を０°０で３０分間放置
し、沈澱を完了させる。

濾過して生成物を単離し、６００−ずつ３回５０％エー
テル／石油エーテルで洗浄し、真空下乾燥し、４０３ｇ
のＶａｌ−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ　−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｏ
Ｍｅを得る。これは元素分析、ペプチド分析ＨＰＬＣ分
析により確認。

実施例７ ２０−のテトラヒドロフラン中に１５２グラムのＢＯＣ
−Ｄ−Ｔｒｐを溶かし一５°Ｃに冷却し０、７　ｍｌの
ＴＦｉＡを加える。次に０．６’　５　ｍｅのイソブチ
ルクロロホルメート、１．４０グラムのＣｂｚ−Ｌｙｓ
を加える。Ｃｂｚ−Ｌｙｓは、あらかＬ）ａ６］ＯｍＪ
（７）０．５Ｎ水酸化ナトリウムにあらかじめ溶かして
おく。滴加後すぐに沈澱゛が出来る。反応混合物に、更
に２７ゴのテトラヒドロフランと５　ｎｔの水を加える
。史にＴＥＡを加えてｐＨ７，６〜７．８に保ろ。反応
混合物を５°Ｃで１晩放置する。１００−の水を加え、
１０〜１５％の塩酸を加えてｐＨを２７にする。

３０ｍ１の酢酸エチルで３回抽出する。酢酸エチルを硫
酸ナトリウムで乾燥し真空上留去し約３ｇの物質を得る
。これを５００ｍ’のシリカゲルカラムに乗せ、クロロ
ホルム：メタノール：濃アンモニア８５：１５：１．５
の溶媒系で溶出させる。２５７！ずつ分画を取り、６４
〜１０５分画を合併し、その前後の４２〜６３．１０６
〜１１４分画も取る。溶媒を除去し、中心分画（ｃ’ｅ
ｎｔｅｒｃｕｔ　）　（６４〜１０５）から０８２１グ
ラム、側分画 （５ｉｄｅｃｕｔｓ）　（４’　２〜６３．１０６〜１
１４）から１．２５７４グラムを得る。中心分画から得
たものを四塩化炭素に溶かし、四塩化炭素を留去してメ
チレンクロライド／エーテルヲ加え結晶化する。側分画
から得た物も同様の操作を行い０．５１’ｌｌグラム及
び０．６６６６グラムの”　ＢＯＣ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｃｂ
ｚ−Ｌｙｓ　　”をそれぞれ得る。

実施例８ Ｃｂｚ ■ ＢＯＣ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ”ｏ）（ジペプチドとＶａ
ｌ−Ｐ　ｈ　ｅ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙ’ｒ−ＯＭ
ｅテトラペプチドの縮合 ７５０ｍ７！の酢酸エチルに４．３．３　ｍｙのＢＯＣ
−Ｄ−Ｔｒｐ−（Ｃｂｚ）−Ｌｙｓ　−ＯＲを溶かす。

８．２　ｍｌのＮ−メチルモルホリンを加え、−５℃に
冷却する。９，７−のイソブチルクロロホルメートを加
え１２分間攪拌する。４．５．９のＶａｌ−Ｐｈｅ　−
Ｎ−Ｍｅ−Ａｔ　ａ−Ｔｙｒ−ＯＭｅのトリフルオロ酢
酸を、ＤＭＦ　（１５０ｍｇ）中に溶かしたＮ−メチル
モルホリン溶液６，５−と共に加える。

さらにＮ−メチルモルホリン（４，２７）を加えてｐｎ
を約７．５に保つ。混合物を２時間−５℃にて攪拌し、
１２０ｍ７！の水を加える。１晩放置後酢酸エチル溶液
を水５００ｍｇ、０．５Ｍクエン酸溶液５００−１水５
００−１０．５Ｍ炭酸水素ナトリウム水５００ｒｎ１．
、水５０〇−（２回）、飽和食塩水５００ゴでそれぞれ
洗浄する。酢酸エチル層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾
過し真空上留去して７８．１グラムのＢＯＣ−Ｄ−Ｔｒ
ｐ−（Ｃｂ　ｚ　）−Ｌｙｓ　−Ｖａ　１−Ｐｈｅ　−
Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ−Ｔｙｒ　−ＯＭｅ　を得る。

実施例９ ＢＯＣ−Ｄ−Ｔｒ　ｐ−Ｃｂ　ｚ−Ｌｙ　ａ−Ｖａ　ｌ
　−Ｐｈ　ｅ−Ｎ−Ｍｅ　−６，３，、！ｉ＋　（５，
８６ミリモル）の粗ＢＯＣ−Ｄ−Ｔｒ　ｐ−（Ｃｂｚ　
）　Ｌｙｓ−Ｖａ　ｌ−Ｐｈｅ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ−
Ｔｙｒ　−ＯＭｅを６０ｒｎ１．の過酸化物の無いＴＨ
Ｆに溶かし、３０ｍ１の水を攪拌下加える。次に２．５
Ｎ水酸化ナトリウム水を加え（ｐＨ１０，ＯＯ標準液−
ＴＨＦＩ：２で較正した電極によるｐＨメーターを用い
）ｐＨ１０，７５にし、１７２　時間ｐＨ１０，５−１
１，０に保つ。ｐＨが少しずつ下がり１時間後に１１．
３となる。さらに２１時間ｐｉｆを１１０〜１１．５に
保ち、３時間１２．０に保つ。２．５　Ｎ　Ｈαを用い
てｐｉ（６，５にし、１晩放置する。

ｐＨを３以下に調節し、３５−４０℃で留去してゴム状
ペーストを得る。これに２００−の酢酸エチルと８０１
ｎＩ！の水を加える。層を分離し、水層を１　ｍｅ以下
の２．５　Ｎ　Ｈｌ！でｐ１１３にする。酢酸エチルを
加えて層を分離する。有機層を８０ｍｅの水、８０顎の
５０％食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥する。こ
れを沖過し、留去して油状物を得る。１５ｍ１のメチレ
ンクロライド、３０−の酢酸エチルで処理し、糊状固形
物を得る。次に２ｏｒｎｌの酢酸エチル、３５ｒｎｌの
メチレンクロライドを加え、２０°Ｃで２時間、０°Ｃ
で１時間放置する。

４０ｙｄの冷却した５０チ酢酸エチル−メチレンクロラ
イドを加え混合物を粉砕する。冷却下瀘過しＥ逸物を４
０艷の冷却した酢酸エチル−メチレンクロライド−メチ
レンクロライドで洗浄する。真空下乾燥し、４．０７，
９のＢＯＣ−Ｄ−Ｔｒｐ−（Ｃｂｚ）−Ｌｙｓ−Ｖａ　
１−Ｐｈｅ　−Ｎ　−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−ＯＨを得
る。ｍ、　ｐ、　１１５−１３５°Ｃ（分解）、第二収
穫０．８１ｇ。

実施例１０ （２７） −Ｔｙｒ−ＯＨ 実施例９の生成物、４．８１．！７（４，５３ミリモル
）を１００艷の酢酸エチルに溶かし、窒素ガス下（ゆっ
くり流す）−５０″Ｃに冷却する。ＨＣＩ！ガスを、す
ぐに暖かくなるような速度で導入し、８〜１０分で飽和
になる（温度−１５℃）。−１００／−１５”０で１５
分間飽和状態を保持し、３０分間窒素ガスを導入してＨ
Ｃｌカスを追放する（温度は５分間−４゜°Ｃに下げ、
ゆっくり−２０°ＣＫ加温）、１００ｍ１のエーテルを
３５分後に加え、５分後に、粉砕して沈澱物を得る。こ
れを濾過し、固形物を３回、５０ｍ１のエーテルで洗浄
する。固形物を真空乾燥し、３．６０．９のＨ−Ｄ−Ｔ
ｒｐ−Ｃｂｚ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｎ−Ｍｅ−Ａ
ｌ　ａ−Ｔｙｒ−ＯＨを得る。

上述炉液に５０艷のエーテルを加えて、更に固形沈澱物
全得、１５分間放置し濾過して上述の如く洗浄し、０．
５３９を得る。これは薄層クロマトグラフィー及びＨＰ
ＬＣ分析で確（２８） 認する。

実施例１１ シクロ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｃｂｚ　＝Ｌｙｓ　−Ｖａ　］
−Ｐｈｅ　−Ｎ実施例１１の、保護した鎖状ヘキサペプ
チＦ４３Ｔｎｇを６ｍｌ！の脱気したジメチルホルムア
ミドに溶かす。−２０°Ｃに冷却し、ｉ：＋、ｏｏ７６
−のＤＩＰＥＡを加え、次に０．００９５ｍ１のＤＰＰ
Ａを加えてｐＪｌを７．４にする。反応混合物を１晩こ
の温度に保ち、さらに、０．００９５−のＤＰＰＡを加
える。ＤＩＰＥＡでｐＪｌ　７．６にする。混合物を２
口径０　’Ｑに加温し、この温度で４１日間保持する。

溶媒を真空下留去し、残渣に水を加える。沈澱を遠心分
離し、水をデカントして除く。固形物を真空乾燥し ０．０３７６グラムのシクロ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｃｂｚ　−
Ｌｙｓ−■ａｌ−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ
）を得る。

実施例１２ シクロ（Ｄ　−Ｔｒｐ−Ｃｂｚ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈ
ｅ　−Ｎ−実施例１２の方法に従い、こ＼で用いたＤＰ
Ｐ、Ａの代りに５ＤＰＰを用いて反応せしめ０．０３６
グラムのシクロ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｃｂｚ　−Ｌｙｓ　−Ｖ
ａ　１−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ−Ｔｙｒ）を得
る。

実施例１３ シクロ（Ｄ　−Ｔｒｐ−Ｃｂｚ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈ
ｅ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ） Ｈ−Ｄ　−Ｔｒ　ｐ−Ｃｂ　ｚ−Ｌｙ　ａ−Ｖａ　１−
Ｐｈｅ　−Ｎ＝Ｍｅ　−Ａｌ　ａ−Ｔｙｒ−ＯＨの塩酸
塩３．５．９　（，３，５０８５ミリモル）を４３７；
　５　ｔｎｌの脱気したジメチルホルムアミドに溶かす
。この溶液はｐＨ５である。混合物を水浴中で冷却し窒
素カスを流す。

０．８３２−のＤＰＰＡを加え次に１．６７３５ｇの炭
酸水素ナトリウムを一度に加える。温度の変化は無く、
反応を０°Ｃで６７時間攪拌下続ける。１１５−の混合
した樹脂を加え、５時間攪拌する。濾過し固形物を洗浄
し、４０−の８０％ＤＭＦで３回スラリーにする。Ｐ液
と洗浄液を合併し４０°Ｃで真空下留去する。

１００ｍ１の水を加え１晩０°Ｃで放置し、濾過して、
２５＋＋＋Ｊの水で３回スラリーにする。固形物を乾燥
し３１５ｇのシクロ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｃｂｚ−Ｌｙｓ−Ｖ
ａｌ−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ）を得る。

実施例１４ シクロ（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ　−Ｖａ　１−Ｐｈｅ　−
Ｎ−Ｍｅ　−Ａｌａ−Ｔｙｒ） 実施例１１．１２．１３の生成物２０．３　ｍｙ、４．
４■の１０係パラジウム−炭素の混合物を１．５−の８
８チギ酸：メタノール、５：９５、混合物と合併する。

混合物を２時間攪拌し、あらかじめ５チギ酸−メタノー
ルで洗浄したセライトで濾過する。次に１艷のメタノー
ルで２回洗浄する。Ｐ液を凍結乾燥し、１７■のシクロ
（Ｄ”Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｎ−Ｍｅ　−
Ａｌａ−Ｔｙｒ　　）を得る。

上述の反応を、１０．８■及び２０．９　ｍｙの触媒を
用いてくり返し、はマ同量の生成物を得る。

（３１） ３５５−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキ
   サイド又は、その混合物による溶媒室中、所望により１
   つ以上の保護基を付けることのできる以下に示す鎖状ペ
   プチド；Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−’Ｐｈｅ　
   −Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ　−０Ｂ Ｈ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌ’ｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ　
   −Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ　−０Ｈ Ｈ−Ｐｈｅ　−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ−Ｔｙｒ　−Ｄ−Ｔ
   ｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａ　ｌ　−０Ｈ Ｈ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−”Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ−Ｔｙｒ　
   −Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ　−０Ｈ Ｈ−Ｌｙ　ａ−Ｖａ　ｌ−Ｐｈｅ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌ　ａ
   −Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ＝ＯＨ のうちの一つを０．５〜０．００１モル濃度用い、塩基
   及び環化剤の存在下反応せしめて環化する事を特徴とす
   るシクロ−（Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−Ｎ
   −Ｍｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ）の製法。 ２、　　Ｈ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ’−Ｐｈｅ　
   −Ｎ−Ｍｅ”Ａｌａ−Ｔｙｒ−ＯＨ又はその保護誘導体
   を出発物負として用い反応を行う特許請求の範囲第１項
   の方法。 ３　反応を約０．００８′−Ｅニル濃度で行う特許請求
   の範囲第２項の方法。 ４、塩基が三級アミンである特許請求の範囲第３項の方
   法 ５、　三級アミンがトリエチルアミンである特許請求の
   範囲第４項の方法。 ６、塩基が無機塩基である特許請求の範囲第３項の方法
   。 ７、　無機塩基が炭酸水素ナトリウムである特許請求の
   範囲第６項の方法。 ８、環化剤が、 ジフェニルホスホリルアジド、゛ Ｎ−スクシンイ“ミジルジフエニ”ルホスフエート ジフェニルホスホリルシアニデート １−ヒドロキシベンツトリアソール及びＮ−ヒドロキシ
   スクシンイミドよシ選んだ添加物を含んでいてもよいジ
   シクロヘキシルカルボジイミド、 アルキルクロロホルメート、 エトキシアセチレン Ｎ−エチル−５−フェニルイソオキサソ、リウムー３′
   −スルホネート、 １−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒ
   ドロキノリン、 ジアルキルジスルフィドを併うトリフェニルホスフィン より選んだものである特許請求の範囲第３項の方法。 ９、環化剤がジフェニルホスホリルアジド又はＮ−スク
   シンイミジルジフェニルホスフェートである特許請求の
   範囲第８項の方法。 １０、反応を一３０〜＋５°Ｃで１〜５０時間行（３） う特許請求の範囲第３項の方法。