JPS58147403A - 抗腫瘍物質およびその製造方法 - Google Patents
抗腫瘍物質およびその製造方法Info
- Publication number
- JPS58147403A JPS58147403A JP3101482A JP3101482A JPS58147403A JP S58147403 A JPS58147403 A JP S58147403A JP 3101482 A JP3101482 A JP 3101482A JP 3101482 A JP3101482 A JP 3101482A JP S58147403 A JPS58147403 A JP S58147403A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- substance
- culture
- properties
- positive
- reaction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、新規な抗腫瘍性物質であるＧ６６ム物質及び
その製造方法に関する。さらに詳しく述べれば、本発明
は歓生智によつて生産される抗總優性高分子多１１１ｍ
１ｉ１． Ｇ６６ムー質、ま九アルカリ土類金属に属す
るＧ６６Ａ智質生産−を培養して、鋏培書物からＧ６６
Ａ物質を採取することからなる新規抗１ｍ１１Ｆ瘍性１
質、 Ｇ６６Ａ吻質の表造法に閑する〇本発ＩｊＩ者ら
は、アルカリ土類金属に属す一株を用いて倉抗膣緩性智
質の＊ｍを行りた所、該属に属するＡｌｃａｌｉｇ＠ｎ
＊ｓ ｓｐ、 Ｇ−６６（値工研＠％６３４４号）の培
養物中に従来に紘ない高分子多ＩＩ＠を見い出し丸。咳
吻質をＧ６６Ａ物質と名づけ、これを単一し物塩的、化
学的、生物学的性状を調ぺ九結果、腋物質は新規で礁め
て彊い抗腫瘍効果を有することを明らかにし本発明を完
成させ友。
その製造方法に関する。さらに詳しく述べれば、本発明
は歓生智によつて生産される抗總優性高分子多１１１ｍ
１ｉ１． Ｇ６６ムー質、ま九アルカリ土類金属に属す
るＧ６６Ａ智質生産−を培養して、鋏培書物からＧ６６
Ａ物質を採取することからなる新規抗１ｍ１１Ｆ瘍性１
質、 Ｇ６６Ａ吻質の表造法に閑する〇本発ＩｊＩ者ら
は、アルカリ土類金属に属す一株を用いて倉抗膣緩性智
質の＊ｍを行りた所、該属に属するＡｌｃａｌｉｇ＠ｎ
＊ｓ ｓｐ、 Ｇ−６６（値工研＠％６３４４号）の培
養物中に従来に紘ない高分子多ＩＩ＠を見い出し丸。咳
吻質をＧ６６Ａ物質と名づけ、これを単一し物塩的、化
学的、生物学的性状を調ぺ九結果、腋物質は新規で礁め
て彊い抗腫瘍効果を有することを明らかにし本発明を完
成させ友。
本発明にかかる新規抗腫瘍性物質Ｇ６６Ａ物策は次の吻
性値又は特徴を有する。
性値又は特徴を有する。
１、性 状：白色粉末、明確な融点、分解点は示さない
２、＃ｌｌ解性：水工エタノールクロロホルムニ不溶で
、ｐ Ｈ１２，０以上のアルカリ水溶液に可溶 ３、分子量：平均分子量約２３０．０００ （ゲル濾
過法）ｔｓ１図に示す ４、分子式： （Ｃ−−１）ｔｓ ）Ｈ＆ＩＩＪｉ成：
？ムノース、マンノースおよびＮ−アセチルグルコサミ
ンよシなる。その比 は３：１：１ ６、呈色反応：フェノール硫酸反応 陽性モーリッジ
、反応 陽性 アンスロン愼酸反応 陽性 ７、比旋光度： −１３（ｃ ＝ １ 、０．１ＭＮａ
ＯＨ）８、 ＩＲ：第２図に示す ３４００、２９００．１６５０．１５４０．１０００〜
１１０（ｍにおいて特異的吸収を示す０ ９、 ＵＶ ：末ｅｔａ収 ｓ １０、 Ｃ−ＮＭＲ： ｆｉｇ ３図に示す本発明のＧ
６６Ａ物質社、マウスのザルコーマ（Ｓａｒｃｏｍａ
） １８０固臘膣優に対して抗腫瘍活性を有する。すな
わちずルコーマ（Ｓａｒｃｏｍａ ） １８０ ｍ１１
１９Ｉ細胞を皮下に軽罹し九ｄｄＹマウスに対して、本
発明１ｌｌＩＩＪＩＬｔ膳瘍移罹後７日目から１日おき
に６−臘腔内投与し、４０日後に腫瘍重量を針側すると
、対ＭＷに対し、腫瘍の過秦率は０２ ｗＶｌｑ・ｄａ
ｙ 投与では７１） 、 Ｉ ＩＩＩＩ／Ｉ＃＊ｄａ
ｙ投与では９２％ 、 ５１Ｉｖ１１＃・ｄａｙ投与で
は９０１Ｇ 、 ２５１ｖ１ｑ＊ｄａｙ投与では１００
−を示した。
、ｐ Ｈ１２，０以上のアルカリ水溶液に可溶 ３、分子量：平均分子量約２３０．０００ （ゲル濾
過法）ｔｓ１図に示す ４、分子式： （Ｃ−−１）ｔｓ ）Ｈ＆ＩＩＪｉ成：
？ムノース、マンノースおよびＮ−アセチルグルコサミ
ンよシなる。その比 は３：１：１ ６、呈色反応：フェノール硫酸反応 陽性モーリッジ
、反応 陽性 アンスロン愼酸反応 陽性 ７、比旋光度： −１３（ｃ ＝ １ 、０．１ＭＮａ
ＯＨ）８、 ＩＲ：第２図に示す ３４００、２９００．１６５０．１５４０．１０００〜
１１０（ｍにおいて特異的吸収を示す０ ９、 ＵＶ ：末ｅｔａ収 ｓ １０、 Ｃ−ＮＭＲ： ｆｉｇ ３図に示す本発明のＧ
６６Ａ物質社、マウスのザルコーマ（Ｓａｒｃｏｍａ
） １８０固臘膣優に対して抗腫瘍活性を有する。すな
わちずルコーマ（Ｓａｒｃｏｍａ ） １８０ ｍ１１
１９Ｉ細胞を皮下に軽罹し九ｄｄＹマウスに対して、本
発明１ｌｌＩＩＪＩＬｔ膳瘍移罹後７日目から１日おき
に６−臘腔内投与し、４０日後に腫瘍重量を針側すると
、対ＭＷに対し、腫瘍の過秦率は０２ ｗＶｌｑ・ｄａ
ｙ 投与では７１） 、 Ｉ ＩＩＩＩ／Ｉ＃＊ｄａ
ｙ投与では９２％ 、 ５１Ｉｖ１１＃・ｄａｙ投与で
は９０１Ｇ 、 ２５１ｖ１ｑ＊ｄａｙ投与では１００
−を示した。
尚、本発明のＧ６６Ａ愉質の急性壽性（ＬＤ、）はｄｄ
Ｙマウス（♂）の腹腔内投与で７５輪である。
Ｙマウス（♂）の腹腔内投与で７５輪である。
次に本発明の抗膿瘍性物質Ｇ６６ＡＣ）製造法について
説明する。本発明のＧ６６Ａ物質を生成蓄積せしめる微
生物として紘アルカリ土類金属に属する１１Ａ ｉｌ
Ａｌｃａｌ ｉｇ＠ｎ＊ｓ Ｉｐ、 Ｇ−６６（Ｉｌｃ
工研曹寄第６３４４号）がある。この−株の麿学的性状
線下記の通シである。観察は主に駒形らによる［微生物
の分類と同定Ｊ １９７５年 東大出版会に記載の方法
に従って行り九。
説明する。本発明のＧ６６Ａ物質を生成蓄積せしめる微
生物として紘アルカリ土類金属に属する１１Ａ ｉｌ
Ａｌｃａｌ ｉｇ＠ｎ＊ｓ Ｉｐ、 Ｇ−６６（Ｉｌｃ
工研曹寄第６３４４号）がある。この−株の麿学的性状
線下記の通シである。観察は主に駒形らによる［微生物
の分類と同定Ｊ １９７５年 東大出版会に記載の方法
に従って行り九。
−）形 履
肉汁寒天上で生育した＃ｌｌｌ胞紘０．５〜０．７ Ｘ
１．０〜２．０建クロンの桿菌であｐ活発に運動する
。多くの細胞は２−６本の周毛性べん毛を有し、壕れに
低唱様べん毛のａｍが認められる。胞子形成は認められ
ず、多形性も示さ構い。グラム染色性、抗酸Ｉｋ社とも
に陰性である。
１．０〜２．０建クロンの桿菌であｐ活発に運動する
。多くの細胞は２−６本の周毛性べん毛を有し、壕れに
低唱様べん毛のａｍが認められる。胞子形成は認められ
ず、多形性も示さ構い。グラム染色性、抗酸Ｉｋ社とも
に陰性である。
（ｂ）培養的性質
１、 肉汁寒天培養二曹体は黄茶色を呈してクリーム様
に増殖し、培養が古くなると粘着性をおびる。拡散性色
素の生成紘−められない。
に増殖し、培養が古くなると粘着性をおびる。拡散性色
素の生成紘−められない。
２、 肉汁液体培養二線しめ培養液全体が混濁し、遅れ
てｐ面に増殖リングと一体沈一物を形成する。
てｐ面に増殖リングと一体沈一物を形成する。
３、 肉汁ゼラチン穿刺培養；ａ化される。
４、 ミルク培養：凝固中液化などの纏着な変化は認め
られない。
られない。
（ｃ）生理的性質
１、硝酸塩の還元 ：陰性
２ 脱輩反応 ：陰性
３、 ＭＲテスト ：陰性
４、 ＶＰテスト 二階性
５、 インドールの生成：陽性
６、健化水素の生成 ：陰性
７、 鹸扮の加水分解 ：陽性
＆ クエン酸の利用 二ＭＩ性
９． アンモニウム塩を唯一のＮ源として生育する。
１０、 水溶性および非水溶性色素の生成は認められ
ない。
ない。
１１、 ウレアーイ・テスト ：擬陽性ｌλ オキシ
ダーゼ・テスト：陽性 １：４． カタラー（・テスト ：陽性１４、 生
育の範ｉ！ｌ ： １５℃〜４１℃の範囲で生育し、生
育至適は３２℃〜３７℃である。５℃以下あるいは４５
℃以上での生育は−められない。
ダーゼ・テスト：陽性 １：４． カタラー（・テスト ：陽性１４、 生
育の範ｉ！ｌ ： １５℃〜４１℃の範囲で生育し、生
育至適は３２℃〜３７℃である。５℃以下あるいは４５
℃以上での生育は−められない。
壕九ｐＨ６〜ｐＨ８のｐＨ範囲では、よく生育するが、
ｐＨ４，５以下あるいはｐＨ９，５以上での生育は、陽
性か、あるいは強＜ｔｉｌｌｖされる。
ｐＨ４，５以下あるいはｐＨ９，５以上での生育は、陽
性か、あるいは強＜ｔｉｌｌｖされる。
１＆ 嫌気条件下での生育社線められない。
１６、 ０−Ｆテスト（Ｈｕｇｈ−Ｌｅｌｆｓｏｎ法）
：パラフィン・シールした培地のｐＨ指示薬は変化しな
いが、他方の培地唸、アルカリ側となシ、指示薬社青色
を菫す。
：パラフィン・シールした培地のｐＨ指示薬は変化しな
いが、他方の培地唸、アルカリ側となシ、指示薬社青色
を菫す。
１７、 下記の糖から鐵およびガスの生成は認められ
ず、培地社アルカリ側に移動するＯ Ｌ−アツビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グルコース、
Ｄ−マンノース、Ｄ−ガラクトース。
ず、培地社アルカリ側に移動するＯ Ｌ−アツビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グルコース、
Ｄ−マンノース、Ｄ−ガラクトース。
麦芽糖、シｗｓｅ乳楯、トレノ１０−ス、Ｄ−ツルビッ
ト、Ｄ−マンニット、イノジット、ラムノース、メリビ
オース １８、 耐塩性：２％ＮａＣＬ添加肉汁培地ではおく
れて生育し、３４ ＮａＣＡ添加肉汁培地では生育しな
い。
ト、Ｄ−マンニット、イノジット、ラムノース、メリビ
オース １８、 耐塩性：２％ＮａＣＬ添加肉汁培地ではおく
れて生育し、３４ ＮａＣＡ添加肉汁培地では生育しな
い。
１９、 ポリ・β・ハイドロキシブチレートの菌体内
蓄積：陽性 ２０、 ＤＮＡ ＧＣ含量＝６９モル−以上の１学的
性質を有するＧ−６６株をパーシーズ争！二為アル・オ
プ嗜デター電ネーティプ争バクテリオ四ジー８版１９７
４年に従って同定し、ダラム陰性桿−で胞子を作らす周
毛性べん毛で運動すること、また絶対好気性であること
などからフルカリゲネス（ムｌｃａｌｉｇ＠ｎ＊ｓ ）
１ｇに所属すると判定した。
蓄積：陽性 ２０、 ＤＮＡ ＧＣ含量＝６９モル−以上の１学的
性質を有するＧ−６６株をパーシーズ争！二為アル・オ
プ嗜デター電ネーティプ争バクテリオ四ジー８版１９７
４年に従って同定し、ダラム陰性桿−で胞子を作らす周
毛性べん毛で運動すること、また絶対好気性であること
などからフルカリゲネス（ムｌｃａｌｉｇ＠ｎ＊ｓ ）
１ｇに所属すると判定した。
本１ｉｌｌ）Ｇ６６ム物質の生産■の培養は通常の培養
法が用いられる。すなわち鼓物質生童曹株を適幽な卑天
培地に＄植し、適温で好ましくは２５℃〜３７℃で数日
間培養し、これを母菌として、液体培地あるいは一雛培
地にＩｉｋ柚して、培養を行う０培地としては通常ａｍ
の培養に使用するすべての培地が使用できるが炭素源と
しては、例えばグルコース、フックドース、ｌｉラクト
ースなどのヘキソース、キシロースなどのペントースや
シェークロースなどの炭水化−が利用し易い０１１票源
としては、例えばペグトン、肉エキス、麦芽エキス、コ
ーンステイープリカー、＃母エキス、アミノ酸類などの
有機窒素源やアンモニウム塩、Ｍｌｌ塩類などＯｍ嶺化
合−などが単独または組合せて用いられる。その外必豐
に応じて少量の無機塩類、例えば４１１ｍ１マグネクク
ムやリン戚カリクムなどを造画に添加することができる
。
法が用いられる。すなわち鼓物質生童曹株を適幽な卑天
培地に＄植し、適温で好ましくは２５℃〜３７℃で数日
間培養し、これを母菌として、液体培地あるいは一雛培
地にＩｉｋ柚して、培養を行う０培地としては通常ａｍ
の培養に使用するすべての培地が使用できるが炭素源と
しては、例えばグルコース、フックドース、ｌｉラクト
ースなどのヘキソース、キシロースなどのペントースや
シェークロースなどの炭水化−が利用し易い０１１票源
としては、例えばペグトン、肉エキス、麦芽エキス、コ
ーンステイープリカー、＃母エキス、アミノ酸類などの
有機窒素源やアンモニウム塩、Ｍｌｌ塩類などＯｍ嶺化
合−などが単独または組合せて用いられる。その外必豐
に応じて少量の無機塩類、例えば４１１ｍ１マグネクク
ムやリン戚カリクムなどを造画に添加することができる
。
培養法として社、液体培養法が好適である。培養の初発
ｐＨは中性付近好ましくは６．５〜７．５、培養温度唸
３０〜４０℃が望ましい。培養時間は培養条件によりて
異なるが、液体培養で通常１〜２日間培養を行うとＧ６
６人物質が培養液中に生成蓄積される。培養液中の生成
量が最大に達し九時に培養を停止し、培養Ｆ１［中より
目的物を単−ｎｌｌする０ 培養Ｆ液からＧ６６Ａ物質を単離ｆｌ製するには、まず
培養液を一過法等により一体を除去した後、培養Ｆ液か
らおもにエタノール沈澱とゲルー過法の組み合わせによ
シ単魅することができる。培憤ＦＷｋを活性炭で脱色し
、好ましくは１１５〜１／１Ｇ量に１＆ｍし、約３倍量
のエタノールを加え、攪拌後−夜装置する。生じ九沈象
を遠心分離によりて集め、少量の蒸留水ｔｃｌｉ濁し再
び遠心分−によ）不溶−を除去するＯＪ！に沈澱にエタ
ノールを加え、攪拌後−夜装置する０沈厳を遠心分−で
集め少量０ＩＩ奮水に分散し、４０１）リクロル酢酸ｖ
３容を加えて一夜放置する。生じた沈澱を一過で除き、
透析後、クロロホルム：ブタノール（５： １）をＶ５
容加えて激しく攪拌する。タンパク質量、変性してゲル
状とな夛、遠心分離すると水とクロロホルムの境界に層
をなすので上層の水相を分取する。この操作をゲルが生
じなくなるまで繰）返し九後、２倍量のエタノールを加
え、沈澱をとる。
ｐＨは中性付近好ましくは６．５〜７．５、培養温度唸
３０〜４０℃が望ましい。培養時間は培養条件によりて
異なるが、液体培養で通常１〜２日間培養を行うとＧ６
６人物質が培養液中に生成蓄積される。培養液中の生成
量が最大に達し九時に培養を停止し、培養Ｆ１［中より
目的物を単−ｎｌｌする０ 培養Ｆ液からＧ６６Ａ物質を単離ｆｌ製するには、まず
培養液を一過法等により一体を除去した後、培養Ｆ液か
らおもにエタノール沈澱とゲルー過法の組み合わせによ
シ単魅することができる。培憤ＦＷｋを活性炭で脱色し
、好ましくは１１５〜１／１Ｇ量に１＆ｍし、約３倍量
のエタノールを加え、攪拌後−夜装置する。生じ九沈象
を遠心分離によりて集め、少量の蒸留水ｔｃｌｉ濁し再
び遠心分−によ）不溶−を除去するＯＪ！に沈澱にエタ
ノールを加え、攪拌後−夜装置する０沈厳を遠心分−で
集め少量０ＩＩ奮水に分散し、４０１）リクロル酢酸ｖ
３容を加えて一夜放置する。生じた沈澱を一過で除き、
透析後、クロロホルム：ブタノール（５： １）をＶ５
容加えて激しく攪拌する。タンパク質量、変性してゲル
状とな夛、遠心分離すると水とクロロホルムの境界に層
をなすので上層の水相を分取する。この操作をゲルが生
じなくなるまで繰）返し九後、２倍量のエタノールを加
え、沈澱をとる。
この沈蒙を（ゲル濾過クロｉトグツフイー用分離担体、
東洋曹這社製）トヨパールＨＷ ６５のカラムクロマト
グラフィーで好ましくは１／ＩＯＭリン酸水嵩二カリウ
ムー水酸化ナトリウム緩衝液で溶出する。活性画分を透
析後、凍結乾燥すると白色粉末として本物質が得られる
。
東洋曹這社製）トヨパールＨＷ ６５のカラムクロマト
グラフィーで好ましくは１／ＩＯＭリン酸水嵩二カリウ
ムー水酸化ナトリウム緩衝液で溶出する。活性画分を透
析後、凍結乾燥すると白色粉末として本物質が得られる
。
以下に実施町をあげて本発明を説明するが、本発明はこ
れによって何ら拘束されるもので社ない。
れによって何ら拘束されるもので社ない。
実施例
（１）生産■の培養
３０１のジャーファーメンタ−を用い、ｌｓｔ中にブド
ウ糖３０Ｏｆ 、肉エキス１５Ｇ ？ 、ペプトンｉｓ
。
ウ糖３０Ｏｆ 、肉エキス１５Ｇ ？ 、ペプトンｉｓ
。
ｔを含む生産培地で本１の培養を行った。培養初期のｐ
Ｈは７．０とし、発１ＩＩｌｌ＆は３７℃、発酵中の通
気は１ｔのプロスあ九り０．５Ｌである。生産量線約３
０時間後にピークに達した。
Ｈは７．０とし、発１ＩＩｌｌ＆は３７℃、発酵中の通
気は１ｔのプロスあ九り０．５Ｌである。生産量線約３
０時間後にピークに達した。
（２）ｎ 製
プロス５ｏｔｔｐ過して１体を除去した後、１９１の活
性炭で脱色する。活性炭を除いてから、減圧下で約７ｔ
ｔでｌｌ＆縮し、３倍重のエタノールを加え攪拌後−夜
装置する。沈ｗ（約５０ｆ）を遠心で集めて３０〇−蒸
留水に分散し、遠心で不ＷＩＩ愉を除去する。溶液に２
倍量のエタノールを加え、攪拌後−夜装置する。遠心で
集めた沈威約３２ Ｆを少量の蒸留水（約４５０ｗＩｔ
）に分散し、４０１１１）リクロル酢＠！ １／３容を
加えて一夜放置する。沈澱を一過で除色透析後、クロロ
ホルム：ブタノール（Ｓ：１ ） Ｙｋ１１５容加えて
激しく攪拌する。タンパク質量変性してゲル状となシ、
遠心分離すると水とクロロホルムの境界に層をなすので
、上層の水相を分は龜る。この操作をゲルが生じなくな
るまでく〉返した後、約４＠ｏｗｔに績細し、２倍量の
エタノールを加え沈澱をとる。この沈澱約１１ ｔを
ト冒バー ＃ ＨＷ ６５のカラムにかけ０．１Ｍ Ｋ
１ＨＰＯ４−ＮａＯＨｌ＆衝ｉ［（ｐＨ１２，０）で溶
出する０活性−分を透析後、凍結乾燥すると白色粉末と
して本物質２ｆが得られる。比旋光度−１３° （ｃ
＝ １ 、０．１ＭＮａＯＨ）楯の定量 得られ九白色粉末を加水分解し、得られる楯をトリメチ
ルシリル化試薬（ＴＭ８−ＰＺ 、東京化成ＩＩ）によ
）トリメチルシリル化（ＴＭＳ化）シ、ガスクロマドグ
ツフィーで分析した。カラムａ １．５＊ ０Ｖ−１（
１６５℃）を用−標準サング／−（単機のトリメチルシ
リル化物）と比較して糖を同定し、ピークの百横よシ定
食した。その結果本発明物質拡ラムノース、マンノース
およびＮ−アセチルグルコサミンよシ構成され、その比
ｄ３：１：１であつ九。
性炭で脱色する。活性炭を除いてから、減圧下で約７ｔ
ｔでｌｌ＆縮し、３倍重のエタノールを加え攪拌後−夜
装置する。沈ｗ（約５０ｆ）を遠心で集めて３０〇−蒸
留水に分散し、遠心で不ＷＩＩ愉を除去する。溶液に２
倍量のエタノールを加え、攪拌後−夜装置する。遠心で
集めた沈威約３２ Ｆを少量の蒸留水（約４５０ｗＩｔ
）に分散し、４０１１１）リクロル酢＠！ １／３容を
加えて一夜放置する。沈澱を一過で除色透析後、クロロ
ホルム：ブタノール（Ｓ：１ ） Ｙｋ１１５容加えて
激しく攪拌する。タンパク質量変性してゲル状となシ、
遠心分離すると水とクロロホルムの境界に層をなすので
、上層の水相を分は龜る。この操作をゲルが生じなくな
るまでく〉返した後、約４＠ｏｗｔに績細し、２倍量の
エタノールを加え沈澱をとる。この沈澱約１１ ｔを
ト冒バー ＃ ＨＷ ６５のカラムにかけ０．１Ｍ Ｋ
１ＨＰＯ４−ＮａＯＨｌ＆衝ｉ［（ｐＨ１２，０）で溶
出する０活性−分を透析後、凍結乾燥すると白色粉末と
して本物質２ｆが得られる。比旋光度−１３° （ｃ
＝ １ 、０．１ＭＮａＯＨ）楯の定量 得られ九白色粉末を加水分解し、得られる楯をトリメチ
ルシリル化試薬（ＴＭ８−ＰＺ 、東京化成ＩＩ）によ
）トリメチルシリル化（ＴＭＳ化）シ、ガスクロマドグ
ツフィーで分析した。カラムａ １．５＊ ０Ｖ−１（
１６５℃）を用−標準サング／−（単機のトリメチルシ
リル化物）と比較して糖を同定し、ピークの百横よシ定
食した。その結果本発明物質拡ラムノース、マンノース
およびＮ−アセチルグルコサミンよシ構成され、その比
ｄ３：１：１であつ九。
Ｇ６６Ａ物質の構造
Ｇ６６Ａを箱守法により完全メチル化し、加水分解後、
生成した単糖のメチルエーテルをアルジトールアセテー
ト誘導体に変換してガスクロマドグツフィー−質量スペ
クト、ルで分析を行ったところ、＼ ２．３−ジー０−メチル−１，４，５−トリー〇−アセ
チルーラムニトール ２モル、３−モノ−ローメチル−
１，２，４，５−テトラ−０−アセチルーツム二トール
１モル、３．４．６−）ジ−０−メチル−１゜２．５
−）ジ−０−アセチル−マンニトール １４ル、３，４
．６−）ソー０−メチル−１，５−ジー０−アセチル−
２−Ｎ−メチルアセチル−グルコｔｔ二トール １モル
を得九。従ってＧ６６ムの各単糖の結合位置は、→４）
−Ｒｈａ−（１→Ｘ２ 、 →２ 、４） −Ｒｈａ−
（１−ｔ Ｘｉ 、→２） −Ｍａｎ−（１−４ＸＩ
、 ＧｌｅＭＡｃ −（１→×１である０ Ｇ６６Ａを４３％ｍ１ｍ敵でｉｏｏ℃ ２時間加水分解
すると、Ａ、Ｂ、０３種のオリゴ糖が得られる０オリゴ
纏ムのメチル化物を加水分解すると、３．４−ジー０−
メチルツムノース、２，３．４．６−チトラー〇−メチ
ルｉンノース各１モルが得られるので、オリゴＩＩＡの
構造はＭａｎ−（１−９２）−Ｒｈａである０オリゴ１
ｍ１Ｂ、ｃはともに０．ＩＮ炭酸ナトリクムで１００℃
１時間加水分解するとオリゴ糖Ａを与え、メチル化後
の加水分解物はそれぞれ２．３−ジ−ローメチルラムノ
ース １４ル、３，４−ジー０−メチル２ムノース １
モル、２，３．４．６−チトラーＯ−メチル！ンノース
１モルおよび２，３−ジ−ローメチルツムノース ２
モル、３．４−ジーＯ−メチＡ／ツムノース １モル、
２，３．４．６−テトラ−０−メチルマンノース １モ
ルである。従ってオリゴ糖Ｂの構造はＭａｎ−（１→２
） −Ｒｈａ−（１−＋４） −Ｒｈａ 、オリゴＳＣ
の構造はＭａｎ−（１４２） −Ｒｈａ−（１４４）
−Ｒｈａ−（１−＋４）−ＲｈａであゐＯ ま九Ｇ６６Ａ ｔ−Ｉ Ｎ硫酸で１００℃１２時間加水
分解すると塩基性のオリゴ着りが得られる。メチル化後
、加水分解すると、２．３−ジー０−メチルラムノース
、３，４．６− ）ジ−０−メチル−２−Ｎ−メチルゲ
ルコサ建ン各１モルを与えゐことから、その構造はＧｌ
ｅＮ−（１→４） −Ｒｈａである。
生成した単糖のメチルエーテルをアルジトールアセテー
ト誘導体に変換してガスクロマドグツフィー−質量スペ
クト、ルで分析を行ったところ、＼ ２．３−ジー０−メチル−１，４，５−トリー〇−アセ
チルーラムニトール ２モル、３−モノ−ローメチル−
１，２，４，５−テトラ−０−アセチルーツム二トール
１モル、３．４．６−）ジ−０−メチル−１゜２．５
−）ジ−０−アセチル−マンニトール １４ル、３，４
．６−）ソー０−メチル−１，５−ジー０−アセチル−
２−Ｎ−メチルアセチル−グルコｔｔ二トール １モル
を得九。従ってＧ６６ムの各単糖の結合位置は、→４）
−Ｒｈａ−（１→Ｘ２ 、 →２ 、４） −Ｒｈａ−
（１−ｔ Ｘｉ 、→２） −Ｍａｎ−（１−４ＸＩ
、 ＧｌｅＭＡｃ −（１→×１である０ Ｇ６６Ａを４３％ｍ１ｍ敵でｉｏｏ℃ ２時間加水分解
すると、Ａ、Ｂ、０３種のオリゴ糖が得られる０オリゴ
纏ムのメチル化物を加水分解すると、３．４−ジー０−
メチルツムノース、２，３．４．６−チトラー〇−メチ
ルｉンノース各１モルが得られるので、オリゴＩＩＡの
構造はＭａｎ−（１−９２）−Ｒｈａである０オリゴ１
ｍ１Ｂ、ｃはともに０．ＩＮ炭酸ナトリクムで１００℃
１時間加水分解するとオリゴ糖Ａを与え、メチル化後
の加水分解物はそれぞれ２．３−ジ−ローメチルラムノ
ース １４ル、３，４−ジー０−メチル２ムノース １
モル、２，３．４．６−チトラーＯ−メチル！ンノース
１モルおよび２，３−ジ−ローメチルツムノース ２
モル、３．４−ジーＯ−メチＡ／ツムノース １モル、
２，３．４．６−テトラ−０−メチルマンノース １モ
ルである。従ってオリゴ糖Ｂの構造はＭａｎ−（１→２
） −Ｒｈａ−（１−＋４） −Ｒｈａ 、オリゴＳＣ
の構造はＭａｎ−（１４２） −Ｒｈａ−（１４４）
−Ｒｈａ−（１−＋４）−ＲｈａであゐＯ ま九Ｇ６６Ａ ｔ−Ｉ Ｎ硫酸で１００℃１２時間加水
分解すると塩基性のオリゴ着りが得られる。メチル化後
、加水分解すると、２．３−ジー０−メチルラムノース
、３，４．６− ）ジ−０−メチル−２−Ｎ−メチルゲ
ルコサ建ン各１モルを与えゐことから、その構造はＧｌ
ｅＮ−（１→４） −Ｒｈａである。
以上の実験結果を総会してＧ６６Ａのく〕返し構造は次
のように決定された。
のように決定された。
＋２） −Ｍａｎ−（１−＋ｚ） −Ｒｈａ−Ｑ−ｎ）
−Ｒｈａ −Ｑ−ｎ） −Ｒｈａ−（ＩＪ會 １ｃＮＡｃ よって、Ｇ６６Ａ物質の分子式は（偽声−〇〇入となる
。
−Ｒｈａ −Ｑ−ｎ） −Ｒｈａ−（ＩＪ會 １ｃＮＡｃ よって、Ｇ６６Ａ物質の分子式は（偽声−〇〇入となる
。
第１図は本発明によるＧ６６Ａのゲルー過り四マドグツ
フィー用カツム（２，５φ×６−）分離担体ト曹パー＃
ＭＷ ６５ Ｋより 、 ０．１Ｍ Ｋ１肝０４ ・
ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ１１！、０ ） ２０ ｌｂ 、
１ ｆｒ ＝ ５−で溶出したゲルｆ過分布を示す。 第２図社本発１ｉＫよるＧ６６ＡＯＡ化力リウム錠中で
測定した赤外部徴収−１１０ 第３ａｌｌは本１１ＷｓＫよるＧ６６Ａの重水中での嶽
素ｌ１ｌＩ核碑気共鳴スペクトルを示すＯ脣許出願人
Ｍｍａｌ果株式金社
フィー用カツム（２，５φ×６−）分離担体ト曹パー＃
ＭＷ ６５ Ｋより 、 ０．１Ｍ Ｋ１肝０４ ・
ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ１１！、０ ） ２０ ｌｂ 、
１ ｆｒ ＝ ５−で溶出したゲルｆ過分布を示す。 第２図社本発１ｉＫよるＧ６６ＡＯＡ化力リウム錠中で
測定した赤外部徴収−１１０ 第３ａｌｌは本１１ＷｓＫよるＧ６６Ａの重水中での嶽
素ｌ１ｌＩ核碑気共鳴スペクトルを示すＯ脣許出願人
Ｍｍａｌ果株式金社
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、下記に示す物性で４Ｉ愼づけられる多楯体Ｇ６６Ａ
曽質 ■性 状：白色粉末 ■溶解性：水、エタノール、クロロホルＡ Ｋ不溶でｐ
Ｈ１２，０以上のアルカリ水 溶液に可溶 ■平均分子′ｊｌ：約２３０，０００ （グル濾過法）
■分子式’ （ｃ−−ｏ、）ｎ （りＩＩ ｍｌ成：２ムノース、ｉンノースおよびＮ−
アセチルグルコサミンよシなる。 その比はａ：ｔ：ｉ ■呈色反応ニアエノール硫酸反応 陽性モーリッジ為
反応 陽性 アンスロン懺鐵反応 ＃性 ■比１ｉ！ｊｔ７１ニー１３ （ｅ＝１．０．１ＭＮ
ａ０Ｈ）■ ＩＲ：第２図に示す ０ ＵＶ：末端吸収 ＠ ”Ｃ−ＮＭＲ： ＩＩＩ ３図に示す２、 Ｇ６６
Ａ物質生童能を有するアルカリ土類金属に属する−を培
養して、その場ＩＩ吻よｆｉ Ｇ６６人物質を採取す
ることを特徴とする Ｇ６６Ａ物質の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3101482A JPS58147403A (ja) | 1982-02-27 | 1982-02-27 | 抗腫瘍物質およびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3101482A JPS58147403A (ja) | 1982-02-27 | 1982-02-27 | 抗腫瘍物質およびその製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58147403A true JPS58147403A (ja) | 1983-09-02 |
Family
ID=12319682
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3101482A Pending JPS58147403A (ja) | 1982-02-27 | 1982-02-27 | 抗腫瘍物質およびその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58147403A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002336004A (ja) * | 2001-05-14 | 2002-11-26 | Achilles Corp | 履物用の静電防止材及び履物 |
-
1982
- 1982-02-27 JP JP3101482A patent/JPS58147403A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002336004A (ja) * | 2001-05-14 | 2002-11-26 | Achilles Corp | 履物用の静電防止材及び履物 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4254256A (en) | Amino sugar compound | |
| KR870001814B1 (ko) | 고분자 β-1, 3-글루칸의 제조방법 | |
| JPH0216756B2 (ja) | ||
| Forsyth et al. | Polysaccharides synthesized by aerobic mesophilic spore-forming bacteria. | |
| US6436680B1 (en) | Marine bacterial strain of the genus vibrio, water-soluble polysaccharides produced by said strain and their uses | |
| CA1126184A (en) | Polysaccharide, process for producing the same and hypocholesterol composition containing the same | |
| US4908310A (en) | Water insoluble polysaccharide polymer and method thereof | |
| KR100418104B1 (ko) | 운남 ｓｌ-001 균 | |
| US5332667A (en) | Method for producing biologically active polysaccharide RON substance | |
| US5565342A (en) | Process for producing polysaccharide ron substance with a synthetase | |
| JPS58147403A (ja) | 抗腫瘍物質およびその製造方法 | |
| WO1990010010A1 (fr) | Nouvelle substance, trehalostatine, et sa production | |
| JPH0372084B2 (ja) | ||
| JP3083858B2 (ja) | 酸性ヘテロ多糖類、硫酸化多糖類、およびその製法 | |
| JP3920073B2 (ja) | 新規α−１，２−マンノシダーゼ及び該酵素を用いたα−マンノシル糖化合物の製造法 | |
| JP3107455B2 (ja) | 新規抗生物質ｍｉ４８１−４２ｆ４−ａ及びその製造方法 | |
| GB2087878A (en) | Preparation of nocardicin by fermentation | |
| JPS58121799A (ja) | 多糖類ｍｐ−８６物質およびその製造法 | |
| JP2008237100A (ja) | エンテロバクター属の微生物を用いたアルドン酸の製造方法 | |
| JP2797295B2 (ja) | 新規微生物および新規微生物を使用するメナキノン−４の製造法 | |
| JPH025763B2 (ja) | ||
| JP2594085B2 (ja) | 新規抗腫瘍抗生物質ｓｆ２５７５物質ならびにその製造法 | |
| JP3026312B2 (ja) | キチン分解物の製造法 | |
| JPS6192589A (ja) | ラミナリペンタオ−スの製造法 | |
| JP2901458B2 (ja) | ゲンチアノースの製造方法 |