JPS58118518A - 脱パイロジエン方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 生物医学の分野で使用される生成物や物質は非イオン性
の両親媒性物質（１ｍｐｈｉｐｈｉｌｅ）ノ約ｏ、ｉ〜
約１０＠看憾の溶液又は懸濁液との長期間の接触番こよ
り脱パイロジェンされる。前記両親媒性物質は一般式Ｒ
Ｃ６Ｈ４（０ｃ２Ｈ４）　ｎ０Ｆ−１を有する物質から
成るグＭ−プより選ばれ、ここで艮はオクチル又はノニ
ルであり、ｎは少なくとも３である。次に脱パイロジェ
ンされた生成物又は物質から前記両親媒性物質を液相分
離する。

、生物医学の分野で使用される特定の生成物や物質を調
製するにおいて、パイロジエン（菌体内毒素）による汚
染がいつでも問題となる。

パイロジエンはダラム陰性菌の細胞の外壁より得られる
リボ多糖類である。パイロジエンは「菌体内毒素」とし
て知られる有毒な物質であり、生きたままの（１ｎＬａ
ｃｔ　）細菌によって合成されたり分泌されたりする有
毒な物質とは区別される。パイロジエンは多数の生物学
的活性を（’ｆしており、それらには発熱、凝血機構の
活性化、及びショックの誘発が含まれている。したかつ
て生物医学的最終生成物又は物質に殺菌又は他のそのよ
うな処置をすることによって原因となる細菌を環害化し
たり１発熱性物質の除去又は不活性化をすることは必須
である。

パイロジエンを不活性化する先行方法は、加熱、酸又は
アルカリで長くきびしい処置をしたり、不溶パイロジエ
ンの濾過、又はゲル、イオン交換樹脂及びその他多くの
同様な吸着物質による吸着除去から成っている。これら
の方法のほとんどは、やっかいで、多くの時間を要し。

コストも高くつく。

更に、パイロ仮の特性や効果についての背景の情報は下
記文献を参照すれば得られる。

Ｗｏｌｓｔｅｎｈｏｌｍｅ　　　ａｎｄ　　　Ｂｉｒｃ
ｈ　　編　ＣｈｕｒｃｈｉｌｌＬｉｖｉｎｇｉｔｏｎｅ
発行「’Ｐｙｒｏｇｅｎｓ　ａｎｄ　Ｆｅｖｅｒ　ＪＣ
ｉｈａ　Ｆｏｅ＝＝＊ｎｄＨｔｉｏｎ　Ｓｙｍｐｏｓｉ
ｕｍ、　１９７１　ｓ２３〜４７ページのＥｌｉｚ２ｂ
ｅｔｈ　Ｗｏｒｋの論文「Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ、Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ　２ｎｄ　Ｐｒｏｐｅｗｔｉｅｓ　　ｏ
ｆ　Ｂａｃｔｅｒｉ２１　　Ｐｙｒｏｇｅｎｓ　　２ｎ
ｄ　Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ　にＡｍｅｒｓ　Ｊａ　Ｐ２
ｔｈＯ１ｈ　９３１２ｋ　５２７−６０１（１９７８）
中のり、αＭｏｒｒｉｓｏｎとＬＪ。

［ＪＩ　ｅｖ　ｉ　ｔ　ｃｈとの論文［Ｔｈｅ　Ｅｆｆ
ｅｃｔｓ　ｏｆＢａｃｔｅｒｉａＩ　　Ｅｎｄｏｔｏｘ
ｉｎｓ　　ｏｎ　　日ｏ　ｓ　ｔ　Ｍｅｄ　ｉ　−２ｔ
ｉｏｎ　ＳｙｓｔｅｍＪ 本発明者は最近・米国特許出願第Ｌ９４．２６３号にお
いて蛋白質の生物学的、薬学的生成物の脱パイロジエン
方法を開示した。この方法は前記生成物を、非変性め０
両親媒性物質０溶液又は；ヒ濁液と長門間接触させるこ
とにより処理すること、蛋白性生成物を蛋白質沈殿剤で
沈殿させること、及び次に両親媒性物質と、解離又は離
解された菌体内毒素とを含む上澄みを沈殿から分離する
ことから成っている。生物医学の分野で使用される特定
の生成物や物質は非蛋白性の性質か又は物理構造に起因
して、蛋白質沈殿剤ではうまく沈殿しない。つまり、そ
れらは木質的に、前記方法により沈殿しないものである
か、又は好ましくは沈殿以外の手段により分離されるも
のである。そのような場合には・本１頭に開示され請求
された改良法によって、生物医学用生成物又は物質から
両親媒性物質と解離又は離解された菌体内毒素とを分離
除去するのが好ましい。

本発明に従えば以下のよう１こなる。生物医学の分野で
使用される生成物や物質は非イオン性の両親媒性物質の
約０．１〜約１０市量係の溶液又は懸濁液との長期間の
接触により脱パイロジェンされる。前記両親媒性物質は
一般式ＲＣ６＃Ｉ４（ＯＣ２Ｈ４）ｎＯ）１を有する物
質から成るグループより選ばれ、ここで艮はオクチル又
はノニルであり、ｎは少なくとも３である。次に脱パイ
ロジェンされた生成物又は物質から前記両親媒性物質を
液相分離する。

本明細書中では、「両親媒性物質」とは親水性・水溶性
にしてかつ疎水性・非水溶性の群を有する物質を意味す
る。

前述の一般式の好ましい両親媒性物質はオクチルフェノ
キシポリエトキシエタノールである。

後者のタイプの非イオン性物質はＲｏｈｒｇ　＆１１２
ａｓＱ、により「ＴｒｉｔｏｎＸＪの商標のもとに商業
的に利用０Ｔｔ？である。その中にはたとえばＴｒｉｔ
ｏｎＸ−１００，ＴｒｉｔｏｎＸ−１５５、Ｔｒｉ　ｔ
ｏｎＸ−２０５、ＴｒｉｔｏｎＸ−３ｎ５及びＴｒ　ｉ
　ｔ　ｏｎ　Ｘ−４０５等がある。

で 他の本のような非イオン性物質はノニＭフェノキシポリ
エトキシエタノールであり、　ｒｒｒｉＬｏｎＮ−１０
０Ｊの商標のもとに商業的に利用可能であるＯ 両親媒性物質を用いる生物医学用の生成物又は物質の処
理は製造手順のどの段階でも実施可能である。好ましく
は、脱パイロジエン処理はパイロジエンでの汚染が生じ
がちな最終段階に続いて実施される。前の脱パイロジェ
ンに続く製造段階でパイロジエン汚染が生じた場合には
。

本発明の方法Ｉこ従って生成物又は物質をもう一度脱パ
イロジエン処理する必要がある。

生物医学用の生成物又は物質を両親媒゛什物質と接触さ
せる時間は、菌体内毒素が解離、離解又は非活性化され
るに充分に与えられねばならない。通常、希望される解
離、１Ｉｉｌ解又は非活性化が行なわれるには、約４〜
約３７℃の温度で約３０分〜約４時間が適切である。し
かしながら多くの場合・時間が長くても有害にはならな
む）。

適切な脱パイロジェンが確実に行なわれるようにするた
め、パイロジエンの存在を分析するミ゛Ｌ のにウサギを用いた標準的で定性的なパイロゼミ°゛こ ン分析用発熱反応試験又はパイロ誉ン分析用リムルス　
リゼイト　アミーボサイト　アッセイの手順（Ｌｉｍｕ
ｌｕｓ　Ｌｙｓａｔｅ　３ｍｅｌ）Ｏｃｙｔｅ　ａｌｓ
ａＹｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ　、Ｌ　Ａ　Ｌ試験）によっ
て試験される。

後者の試験はパイロジエン処理することによってカブト
ガニ（アメリカカプトが二）の遊走細胞のリゼイトがゲ
ル化することを利用している。

ＬＡＬ試験の典型的な例は、例えば米国特許４．０３８
，０２９．同４，０９６，０９１．同４，２２１．８６
５−８６６を参照。

生物医学用生成物又は物質と両親媒性物質との接触は生
成物又は物質を両親媒性物質の溶液又は懸濁液で洗滌す
ることによって、あるいは生成物又は物質をそのような
溶液又は懸濁液に浸すかしめずことによって、あるいは
、そのような溶液又は懸濁液と混合することによって行
なわれる。

本発明は、生物医学の分野におけるどのような非蛋白性
又は非沈殿性の生成物又は物質にも適用できる。そして
このような生成物又は物質は、生物医学的の又は治療の
目的のために人体に使用することを意図されたものであ
るか、又は１人体に使用若しくは適用することを意図さ
れた他の生成物及び物質の処理に使用することを意図さ
れたものであるために、ノくイロジエンを有してはなら
ず、又はその他の方法により無菌でなければならない。

本発明に従って脱ノくイロジエンできる生物医学用の生
成物や物質の例としては次のものがあるＯ 非経口用の生成物たとえば非蛋白性の静脈注射用水溶液
１例をあげるとデギストラン・デキストロース及びマン
ニトール； 生物医学用の挿入管例えば心臓弁、ポンプ、生物医学及
び薬学の生成物の濾過に使用され生物医学及び薬学の生
成物の分離に使われる濾過、ゲＭ瀘過及びイオン交換用
原料にはビーズ、繊維及び膜例えば綿、セルロース、ナ
イロン、ヂギストラン、アガロースｈ　５ｅｐｈ２ｄｅ
ｘ（登録商標；架橋デキストラン）、ＤＥＡＥ−５ｅｐ
ｈ３ｄｅｘ、　Ｄ　Ｅ　Ａ　Ｅ−セ／ｌ１０−ス、Ｄｏ
ｗｅｘ　（登録商標）及びＡｍ１）ｅｒｌｉｔｅ　（登
録商標）のイオン交換樹脂（ジビニルベンゼン架橋ポリ
スチレン）。

ＢｉｏＣｅｌ　（登録商標）Ｐ（ポリアクリルアミＶゲ
生 ル）及び抗他物質、ビタミン、アミノ酸、ペプチド、蛋
白質並びに類似の物質の分離、精製及び再生に使用する
その他の類似の物質３熱及びｐＨに影響されやすいもの
であるか、生 又は仮にそうでない場合には抗性物質及びへＩｓリンの
ごとく、熱又はＰＨ副調整より、充分に脱パイロジェン
することができない非蛋白性の生物学的薬学的生成物。

本発明の他の特徴によれば、前記の脱ノくイロジエン及
び分離方法は蛋白質の沈殿剤ではうまく沈殿しないか又
は、沈殿以外の手段で両親媒性物質から分離される方が
好ましいような蛋白性物質に応用され得る。そのような
物質の例として、ナイロン、ナイロン繊維及びカゼイン
プラスチック材がある。他の例としては、低分子量のペ
プチドや蛋白質があり１例えばインターフェロン、硫酸
プロタミン及び同様の物質がある。

両親媒性物質の脱パイロジェンされた生物医学用の生成
物又は物質からの液相分離は種々の手段によって実施さ
れ得る。例えば１両親媒性物質は溶解するが、生物医学
用生成物又は物質は溶解しないような溶媒物質で洗浄ま
たは抽出する手段がある。適当な溶媒の例としてはメタ
ノール、エタノール、イソプロパツール、ブタノ−Ｍ１
クロロホルム、塩化メチレン、トルエン・キンレン及び
他の有機溶媒がある。

いくつかの場合、両親媒性物質がカラムを通過する間に
、脱パイロジェンされた生成物がイオン交換樹脂に吸着
されるのにカラムクロマトグラフィーの分離技術を利用
できる。吸着された生成物（例えば蛋白質）はその後、
吸着された生成物を放つためのＰＨやイオン濃度の調節
のような適当な溶離技術によってカラムから溶離され得
る。

脱パイロジェンされた生成物又は原料から両親媒性物質
を液相分離するための他の適当な手段は限外濾過による
ものである。限外濾過の技術は分子の大きさ、形、及び
化学結合によって多成分溶質を分離したり、又は溶質を
溶媒から分離する圧力をかけられた濾過膜の能力を利用
したものである。前もって選んだ分子の大きさ以下の物
質は水圧によって膜を通過する一方、より大きな分子は
通過しない。

特定の分子量の溶質（残存物）を９０憾以り保持する一
方、保持される物質の分子量の半分だけの分子量を有す
る溶質（透過物）が完全に通過するように前記の膜を形
成することかできる。そのような膜の適当な例としては
、例えば米国特許３，１３３，１３２や同３，１３３，
１３７に述べられているようにＬｏｅｌ）タイプの異方
性酢酸セルロース膜がある。本発明で使用する適当な限
外濾過システムの一例としてはＭｉｌ目ｐｏｒｅＣａｒ
ｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能なＭ目１ｉ４ｏｒｅＰｅ
ｌ目ｃｏｎ（登録向ａ）カセットシステ介かある。ダイ
アフイ〃トレイジョン（ｄｉ３ｆｉｌｔｒＨｔｉｏｎ）
又は単なる透析によって、脱パ・ｆロジエンされた生成
物又は物質から両親媒性物質も除去され得る。圧縮可能
な材料（例えば綿や毛の繊維や織物）の場合、脱パイロ
ジェンされた生成物を処理液から除去した後、すべての
残っている液相を十分に絞り取ることが可能である。

いくつかの場合、両親媒性物質の除去は脱パイロジエン
工程の後に曇り点まで加熱して生じた沈殿を相分離によ
って除去することによって行ない得る。

以下の例は本発明をさらに説明するが、本発明はこれら
特定の例に限゛定されるものではない。

実施例１ アルブミン溶液の脱パイロジェンとそれに続く限外濾過 人間の血清アルブミンの４．５係の水溶液（４５０ｍｔ
）は大腸菌の菌体内毒素が約１００ｎｒ／ｍｔ（分析値
はｇｇｎｌＦ／ｍｔ）含まれたことによってだいなしに
なった。次にＴｒｉｔｏｎＸ−１００を濃度が２係にな
るまで加え混合物を室温（約２２−２５℃）で培養した
。２時間そして更に４時間培養した後、菌体内毒素の値
は各々１．２９と０．０８６　ｎｆ／ｍｌに下がったＯ
　この値は本質的には脱パイロジェンが完全に行なわれ
たことに相当する。次に脱ノ（イロジエンされたアルブ
ミン溶液は、分子量１０，０００の遮断能力を有し、ダ
イアフィルトレイジョン用流体（通常は０．９％のＮａ
Ｃｔを含む）を６倍容曖（例えば４５０ｍｔＸ６）使う
Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ　（登録商標）カセットを用いて限
外濾過する必要がある。アルブミンを含む残存物と塩水
中にＴｒｉｔｏｎＸ　−１００を含む透過物との両方と
もに本質的に菌体内毒素を含まないことが見い出された
（それぞれ０．１０３と０．１９６　ｎｆ／ｍｌの値を
示すカ、コレらの値は菌体内毒素の出発時の値である約
１００ｎｆ／ｍｔと比べると、１．２９や０．０８６　
ｎｆ／ｍｌの値と著しい相違があるとは言えない）。

実施例２ 水の脱パイロジェンとそれに続（ＣＨＣｔ３抽出ｆａｌ
水のサンプルが大腸菌の菌体内毒素を１００μＳ’／ｍ
ｔ　含んでだいなしにされた。次に％前記サンプルを０
．１　＝２のＴｒｉｔｏｎＸ−１００で処理した後室温
で２時間培養した。処理されたサンプルを等容量のクロ
ロホルムで抽出した後、リムルス　リゼイト　アミーボ
サイト　アッセイ（ＬへＬ試＊）で水相中の菌体内毒素
を分析した。

林、績 ＬＡＬ古雲埠は１反復試験において、陰性の結果を示す
ような終点になるまで水相を希２釈して行なわれた（力
価は０．０　Ｉ　ｎｆ／ｍｌに達した）定性試験テはＴ
ｒ　ｉ　ｔ　ｏｎ　Ｘ−１００がクロ９ホＭム抽出で除
去されたことは、水相を振っても泡立たないことで立証
された。一方、そのように振っている間に泡立てば前記
両親媒性物質が存在することが明らかである。

ｌｂｌ水溶性薬品が処理された水溶液中に含まれている
場合、Ｌ記パート１ａ１中のクロロホルムを塩化メチレ
ン、ギシレン及びトＭエンのような有機溶剤のどれかで
置き換えても、脱パイロジェン及びＴｒｉｔｏｎＸ−１
ＱＱの除去はかなりよく似た結果となる。

実施例３ 仝 ＴｒｉｔｏｎＸ−１００濃度を０．１％のかわりに１憾
とすること以外は、実施例２（ａｌの試験手順を繰り返
した。クロロホルム抽出後の水相のＬＡＬ試験をすると
、反復試験で菌体内毒素が陰性になる終点では力価は０
．０５　ｎｆ　／ｍｌに達した。

実施例４ 抗生物質の脱パイロジェンとそれに続くクロロホルム抽
出 ｆａｌ抗生物質のサンプ／Ｉ／（硫酸ジヒドロストレプ
トマイシン、バｌレク）を溶かして１００＋ｔｌ／ｍｌ
の水溶液とした。続いて、前記抗生物質溶液を１憾のＴ
ｒｉｔｏｎＸ−１００で処理した後室温で１時間半培養
した。処理されたサンプルを等容量のクロロホルムで３
度抽出（１００ｍｔのサンプルを毎回１００　ｍｔのＣ
ＨＣ７３で）しその後、水相の抗生物質濃度と菌体内毒
素の含有量を試験した。抗生物質の濃度は未処理サンプ
ルでは６３８ｍｆ／９に対して処理したものでは６４６
ｍｔ／？であった（そんなに差はない）。

反復試験で未処理の出発原料では菌体内毒素の含有量が
３１〜３５　ｎｆ／ｍｌであるのに対して処理したサン
プ〜では１〜１．１３ｎｆ／ｍｔに減った。

ｉｂｌ上記（ａ’においてクロロホルムのかわりにブタ
ノールを使っても、似たような結果が得られた。

実施例５ 二゛よ りＥＡＥ−デキストランビーズの脱パイロ１インとそれ
に続くイソプロパツールによる洗浄米国特許４，１８９
，５３４及び同４，２９３．６５４に記載されておりｒ
　５ｕｐｅｒｈｅ２ｄｓ　Ｊ　としてＦｌｏｗ１４ｔ）
ｏｒ２ｃｏｒｉｅｓ　　から入手可能なジエチルアミノ
エチル基（Ｌ）ＥＡ’Ｅ）でおおわれた架橋デキストラ
ンビーズをリン酸塩で緩和され、た塩水（ＰＢＳ）の懸
濁液中に入れた（１００ｍｔビーズ）。

次にＴｒｉｔｏｎＸ−１００を濃度が２４になるように
加えて、前記懸濁液をスピンナーフラスコ（Ｓｐｉｎｎ
ｅｒ　Ｆ１３ｓｋ）中で２時間混合した。前記ビーズを
等容量のＰＢＳで３度洗浄した。３度目の洗浄後もまだ
かなりの発泡が観察された（ＴｒｉｔｏｎＸ−１００の
存在を示す）。次に前記ビーズを等容量のイソプロパノ
−Ｉしで洗浄するとその後振っても発泡しなかった。従
ってＴｒｉｔｏｎＸ−１００が除去されたことが示され
た。菌体内毒素のＬＡＬ試験では処理ビーズは１：１の
希釈でさえ陰性だったのに対して未処理ビーズは１：８
０の希釈でもまだ陽性であった。

実施例６ アガロースの脱パイロジェン ０．８係のアがロース懸濁水を２憾のＴｒｉｔｏｎＸ−
１００で処理して室温で２時間培養し、た。次にアガロ
ースの処理サンプルおよび未処理サンプルを塩水で洗浄
し菌体内毒素をＬＡＬ試験で試験した。処理サンプルは
陰性であったが一方未処理サンプルはｌ：１および１：
１０の希釈の双方で陽性であった。

実施例７ 濾過膜の脱パイロジェン セルロースの濾過膜（Ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ　（登録商
りＦ−Ｚｏｏ）をＴｒｉｔｏｎＸ−１００の２憾含有水
溶液に浸した（３０ｍｔの溶液中に膜５枚）。

２時間培養後・前記溶液を傾瀉してパイロジエンを含ま
ない水をａｏｍｚ加えた。更に３０分培養を続けた。照
合して確かめる目的で他の５枚の膜に、ＴｒｉｔｏｎＸ
−１００を加えずしかもパイロジエンを含まない水中で
類似の処理をした。

ＬＡＬ試験で前記サンプルの菌体内毒素の試験をした。

ＴｒｉｔｏｎＸ−１００で処理したサンプルは陰性だっ
たが一方照合用すンプｙは陽性だったＯ 実施例８ ナイロン繊維の脱パイロジェン ナイロンの糸（６，６−ナイロンの７デニールの糸）及
びナイロンテープ−巻（６，６−ナイロンで織られたも
の）とを−諸に、０．５％のＴｒｉｔｏｎｘ−ｉｏｏ水
溶液２００　Ｏｍｔ中に浸す。以前の試験によれば２．
５２の糸をパイロジエンを含まない水４０ｍｔで抽出し
た場合、抽出水１ｍｔ中に５００〜７５０　ｐｔの菌体
内毒素が含まれていることが知られた。”ｌ”ｒｉｔｏ
ｎＸ−１００で処理されたナイロン繊維のサンプルをパ
イロジエンを含まない水での陰性の対照および溶液１ｍ
ｔ中に細菌の菌体内毒素５０Ｐ２を含む陽性の対照と比
較した。室温で２時間培養後、陰性の対照とＴｒｉｔｏ
ｎＸ−Ｚｏｏで処理されたサンプルとはＬＡＬ試験にお
いてパイロジエンは陰性であったが、−力場性の対照は
また゛゛陽性あった。

実施例９ ヘパリンの脱パイロジェンとそれに続く（：ＨＣｚ３抽
出 抗凝血剤のヘパリンを含有し献血センターで使われてい
る市販の血液サンプル採集チューブはＬＡＬ試験で陽性
であることが発見された。

ヘパリンをＴτ１ｔｏｎＸ−１００の１％水溶液の入っ
たチューブに加えて処理した。前記チューブを室温で１
時間立てておき１等容量のクロロホルムで抽出後型に１
時間立てておいた。水層はわずかにオパールのような閃
光を放ちＬＡＬ試験でパイロジエンを試験すると陰性で
あった。

実施例１０ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００の熱沈殿 物 非沈殿性の生Ｍ昧医学用の生成物又は物質）脱パイロジ
ェン番こ使ったＴｒｉｔｏｎ　Ｘ　−１００（７）１憾
水溶液を曇り点（約６５〜６９℃）−４で加熱すると白
色の沈殿物が生成し１次に溶液から相分離で除去できた
。

実施例１１ ｒｌワクチン脱パイロジェン 多量の菌体内毒素を含有する実験用の非蛋白性ポリ多糖
類のワクチンをＴｒｉｔｏｎＸ−１００の３％水溶液で
処理し、室温で３時間培養して脱・（イロジエンした。

前記ワクチンをポリエチＬ／７グリコール（６０００で
沈殿させパイロジエンを含まない水で碍懸濁させ、ＬＡ
Ｌ試験で・くイロジエンを試験した。パイロジエンが５
分の１に減少しているのが確駅された。

実施例１２ 綿繊維の脱パイロジェン 菌体内毒素を生成するダラム陰性菌を付加した綿繊維を
Ｔｒ　ｉ　ｔ　ｏｎ　Ｘ　−１００の５憾水溶液中に６
０℃で約１４時間浸した。処理された綿繊維を次に絞り
水溶液を絞り出した後に乾燥した。

Ｌ記処理により処理済の綿繊維中の菌体内毒素は１００
分の１に減少した。

当業者にとり本願の開示を読めば、本発明の゛精神と範
囲から離れることなく他の様々な実施例を想到しうるで
あＡう。しかしてそれらの実施例はすべて添付の特許請
求の範囲に含まれるものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ｌ、生物医学的生成物又は物質を脱パイロジェンする方
   法であって、前記生成物又は物質を・一般式ＲＣ６Ｈ４
   （ＯＣ２）１４　）ｎ０１−１を有する物質から成るグ
   ループから選択された非イオン性の両親媒性物質の約０
   ．１〜約１０＠量係の溶液又は懸濁液と長期間接触させ
   て処理しく前記にはオクチル又はノニルであり、前記ｎ
   は少なくとも３である）、しかる後、前記工程によす脱
   パイロジェンされた生成物又は物質カラ液相分離によっ
   て前記両親媒性物質を分離することを特徴とする生物医
   学的生成物又は物質ヲ脱パイロジエンする方法。 ２、両親媒性物質がオクチルフェノキシポリエトキシエ
   タノールである特許請求の範囲第１項記載の方法。 ３、液相分離がイソプロパツールでの溶媒洗浄から成る
   特許請求の範囲第１項記載の方法。 ４、　液相分離が、ブタノール、クロロホルム・トルエ
   ン、キシレンおよび塩化メチレンカラ成るグループより
   選択された有機溶媒で溶媒相抽出することから成る特許
   請求の範囲第１項記載の方法。 ５、液相分離が限外濾過、ダイアフィルトレイジョン（
   ｄｉｓｔｉｌ　ｔｒＨｔｉｏｎ）又は透析から成る特許
   請求の範囲Ｓ１項記載の方法。 ６、両親媒性物質がオクチルフェノキシポリエトキシエ
   タノールである特許請求の範囲第５項記載の方法。 ７、　生物医学用の生成物又は物質が濾過膜である特許
   請求の範囲第１項記載の方法。 おおわれた架橋デキストランビーズである特許請求の範
   囲第１項記載の方法。