JPH1192497A

JPH1192497A - ペプチド及びその用途

Info

Publication number: JPH1192497A
Application number: JP9251758A
Authority: JP
Inventors: Saburo Saito; 三郎斉藤; Junko Kawaguchi; 淳子川口; Kazuki Hirahara; 一樹平原; Akio Shiraishi; 明郎白石; Nobuki Serizawa; 伸記芹澤; Masashi Kurimoto; 雅司栗本; Katsuhiko Hino; 克彦日野
Original assignee: Sankyo Co Ltd; Hayashibara Biochemical Laboratories Co Ltd
Current assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK; Sankyo Co Ltd
Priority date: 1997-09-17
Filing date: 1997-09-17
Publication date: 1999-04-06
Anticipated expiration: 2017-09-17
Also published as: JP3939401B2

Abstract

(57)【要約】【解決手段】本発明は、配列番号１のアミノ酸配列を
含むことから成るペプチド等に関する。【効果】本発明のペプチドは、スギ花粉アレルゲンに
特異的なイムノグロブリンＥ抗体に実質的に反応しない
ので、ヒトを含む哺乳類一般に投与すると、実質的にア
ナフィラキシーを引起こすことなく、スギ花粉アレルゲ
ンに特異的なＴ細胞を活性化することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この発明は、スギ花粉アレル
ゲンに特異的に反応するＴ細胞を不活性化するペプチ
ド、及び、そのペプチドを有効成分として含んでなる免
疫療法剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】ここ数十年来、我国においては、春先に
なるとスギ花粉症による鼻炎や結膜炎を訴える人の数が
増加し続けている。スギ花粉症はアルレギー症の一種で
あり、その主因はスギ花粉中の抗原性物質、すなわち、
スギ花粉症アレルゲンであるといわれている。大気中に
飛散したスギ花粉がヒトの体内に侵入すると、スギ花粉
アレルゲンに対するイムノグロブリンＥ抗体が産生す
る。この状態で次にスギ花粉が侵入すると、その花粉中
のアレルゲンとこのイムノグロブリンＥ抗体が免疫反応
を起し、アレルギー症状を呈することとなる。

【０００３】スギ花粉中に抗原性の相違する少なくとも
二種類のアレルゲンの存在することが現在までに知られ
ている。その一つは、ヤスエダ等が『ジャーナル・オブ
・アレルギー・アンド・クリニカル・イムノロジー』、
第７１巻、第１号、第７７〜８６頁（１９８３年）に報
告しているアレルゲンであり、今日、これは「Ｃｒｙｊ
１」と呼称されている。なお、Ｃｒｙｊ１はその全長
アミノ酸配列が決定され、国際出願されている（ＷＯ
９３／０１２１３）。

【０００４】もう一つは、タニアイ等『エフ・イー・ビ
ー・エス・レターズ』、第２３９巻、第２号、第３２９
〜３３２頁（１９８８年）やサカグチ等『アレルギ
ー』、第４５号、第３０９〜３１２頁（１９９０年）に
報告されているアレルゲンであり、今日、これは「Ｃｒ
ｙｊ２」と呼称されている。なお、Ｃｒｙｊ２
はその全長アミノ酸配列が決定され、国際出願されてい
る（ＷＯ９４／１１５１２）。また、 Komiyama らも
別個にＣｒｙｊ２の全長アミノ酸配列を決定しているが
（ Biochem. Biophys. Res, Comm., vol.201, No.2, 10
21-1028, (1994))、ＷＯ９４／１１５１２記載のアミ
ノ酸配列とはアミノ酸残基が４か所異なっている。

【０００５】スギ花粉中には、通常、Ｃｒｙｊ１とＣｒ
ｙｊ２が約５０：１乃至５：１の割合で存在し、花粉症
患者から採取した血清の殆どがＣｒｙｊ１にもＣｒｙｊ
２にも反応すると云われている。澤谷らは、『アレルギ
ー』、第４２巻、第６号、第７３８〜７４７頁（１９９
３年）において、Ｃｒｙｊ２は、皮内反応試験やＲＡＳ
Ｔ試験において、Ｃｒｙｊ１と同程度の抗原性を発揮す
ると報告している。

【０００６】このように、スギ花粉アレルゲンが既に幾
つか単離され、その性質、性状もある程度解明されたこ
とから、精製スギ花粉アレルゲンをヒトに投与して減感
作することにより、スギ花粉症を治療・予防できる見通
しがついてきた。最近ではそのための減感作剤も幾つか
考案されており、例えば、特開平１−１５６９２６号公
報や特開平３−９３７３０号公報には、Ｎ末端からのア
ミノ酸配列がＡｓｐ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ
−Ｓｅｒ又はＡｌａ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ
−Ａｓｎで表わされるスギ花粉アレルゲンに糖質を共有
結合せしめ、生成した複合体を減感作剤としてヒトに投
与する提案が為されている。

【０００７】しかしながら、アレルギー症の診断や減感
作療法には、通常、高純度のアレルゲンが大量に必要と
され、スギ花粉中のアレルゲンは僅少であるうえに安定
性が低く、スギ花粉症の診断剤や減感作剤をスギ花粉だ
けで賄おうとすると、多大の困難が伴なう。このような
ことから、最近のアレルギー疾患の治療・予防において
は、これまでのように、患者にアレルゲン全体を投与す
るのではなく、アレルゲン中のＴ細胞が特異的に認識す
る最小領域、すなわち、本質的にＴ細胞エピトープのみ
からなる低分子のペプチドを投与する免疫療法が注目さ
れている。

【０００８】一般に、アレルゲンは、マクロファージな
どの抗原提示細胞に取込まれると、そこで消化され、消
化断片が免疫提示細胞表層のＨＬＡ（Human Leucocyte
Antigen ）蛋白質に結合し、抗原提示されることとな
る。抗原提示される断片は、ＨＬＡ蛋白質に対する親和
性などにより、アレルゲンにおける一部の特定領域に限
られ、斯かる領域のうち、Ｔ細胞が特異的に認識する領
域は、通常、「Ｔ細胞エピトープ」と呼称される。実質
的にＴ細胞エプトープのみからなるペプチドを投与する
免疫療法には、 (i) ペプチドがＢ細胞エピトープを欠いている、すな
わち、アレルゲンに特異的なイムノグロブリンＥ抗体が
反応しないので、従来の粗製又は精製アレルゲンで頻発
していたアナフィラキシーなどの副作用が起こり得な
い。 (ii) 少量からスタートし、有効投与量に達するまでの
期間が、従来の減感作剤に比較して、大幅に短縮でき
る。 (iii) 経口免疫寛容を誘導し、アレルゲンに対するアレ
ルギー反応を減弱することができる。などの利点がある。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、上記Ｔ
細胞エピトープを構成する最小単位のアミノ酸配列を見
出し、本発明を完成した。この発明の第一の課題は、本
質的にスギ花粉アレルゲンのＴ細胞エピトープのみから
なるペプチドを提供することにある。この発明の第二の
課題は、有効成分として上記ペプチドを含んでなる抗ス
ギ花粉症剤を提供することにある。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明は、（１）配列
番号１のアミノ酸配列から成るペプチド、（２）配列
番号１のアミノ酸配列を含むことから成るペプチド、
（３）配列番号２のアミノ酸配列から成るペプチド、
（４）配列番号２のアミノ酸配列を含むことから成る
ペプチド、（５）配列番号３のアミノ酸配列から成る
ペプチド、（６）配列番号３のアミノ酸配列を含むこ
とから成るペプチド、（７）配列番号４のアミノ酸配
列から成るペプチド、（８）配列番号４のアミノ酸配
列を含むことから成るペプチド、（９）配列番号５の
アミノ酸配列から成るペプチド、（１０）配列番号５の
アミノ酸配列を含むことから成るペプチド、（１１）配
列番号６のアミノ酸配列から成るペプチド、（１２）配
列番号６のアミノ酸配列を含むことから成るペプチド、
（１３）配列番号７のアミノ酸配列から成るペプチド、
（１４）配列番号７のアミノ酸配列を含むことから成る
ペプチド、（１５）配列番号８のアミノ酸配列から成る
ペプチド、（１６）配列番号８のアミノ酸配列を含むこ
とから成るペプチド、（１７）配列番号９のアミノ酸配
列から成るペプチド、（１８）配列番号９のアミノ酸配
列を含むことから成るペプチド、（１９）配列番号１０
のアミノ酸配列から成るペプチド、（２０）配列番号１
０のアミノ酸配列を含むことから成るペプチド、（２
１）配列番号１１のアミノ酸配列から成るペプチド、
（２２）配列番号１１のアミノ酸配列を含むことから成
るペプチド、（２３）配列番号１のアミノ酸配列から成
るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤、（２４）
配列番号１のアミノ酸配列を含むことから成るペプチド
を有効成分とする抗スギ花粉症剤、（２５）配列番号２
のアミノ酸配列から成るペプチドを有効成分とする抗ス
ギ花粉症剤、（２６）配列番号２のアミノ酸配列を含む
ことから成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症
剤、（２７）配列番号３のアミノ酸配列から成るペプチ
ドを有効成分とする抗スギ花粉症剤、（２８）配列番号
３のアミノ酸配列を含むことから成るペプチドを有効成
分とする抗スギ花粉症剤、（２９）配列番号４のアミノ
酸配列から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症
剤、（３０）配列番号４のアミノ酸配列を含むことから
成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤、（３
１）配列番号５のアミノ酸配列から成るペプチドを有効
成分とする抗スギ花粉症剤、（３２）配列番号５のアミ
ノ酸配列を含むことから成るペプチドを有効成分とする
抗スギ花粉症剤、（３３）配列番号６のアミノ酸配列か
ら成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤、（３
４）配列番号６のアミノ酸配列を含むことから成るペプ
チドを有効成分とする抗スギ花粉症剤、（３５）配列番
号７のアミノ酸配列から成るペプチドを有効成分とする
抗スギ花粉症剤、（３６）配列番号７のアミノ酸配列を
含むことから成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉
症剤、（３７）配列番号８のアミノ酸配列から成るペプ
チドを有効成分とする抗スギ花粉症剤、（３８）配列番
号８のアミノ酸配列を含むことから成るペプチドを有効
成分とする抗スギ花粉症剤、（３９）配列番号９のアミ
ノ酸配列から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉
症剤、（４０）配列番号９のアミノ酸配列を含むことか
ら成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤、（４
１）配列番号１０のアミノ酸配列から成るペプチドを有
効成分とする抗スギ花粉症剤、（４２）配列番号１０の
アミノ酸配列を含むことから成るペプチドを有効成分と
する抗スギ花粉症剤、（４３）配列番号１１のアミノ酸
配列から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症
剤、（４４）配列番号１１のアミノ酸配列を含むことか
ら成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤、に関
する。

【００１１】以下、本発明を詳しく説明する。本発明に
おける好ましいペプチドの例は表１の通りである。

【００１２】

【表１】

【００１３】なお、上記のペプチド１は、配列表の配列
番号１のアミノ酸配列で示されるペプチド、上記のペプ
チド２は、配列表の配列番号２のアミノ酸配列で示され
るペプチド、上記のペプチド３は、配列表の配列番号３
のアミノ酸配列で示されるペプチド、上記のペプチド４
は、配列表の配列番号４のアミノ酸配列で示されるペプ
チド、上記のペプチド５は、配列表の配列番号５のアミ
ノ酸配列で示されるペプチド、上記のペプチド６は、配
列表の配列番号６のアミノ酸配列で示されるペプチド、
上記のペプチド７は、配列表の配列番号７のアミノ酸配
列で示されるペプチド、上記のペプチド８は、配列表の
配列番号８のアミノ酸配列で示されるペプチド、上記の
ペプチド９は、配列表の配列番号９のアミノ酸配列で示
されるペプチド、上記のペプチド１０は、配列表の配列
番号１０のアミノ酸配列で示されるペプチド、上記のペ
プチド１１は、配列表の配列番号１１のアミノ酸配列で
示されるペプチド、をそれぞれ示す。

【００１４】上記（１）乃至（１１）に記載のペプチド
は、「固相法」又は「液相法」として知られる斯界にお
いて慣用のペプチド合成法により、容易に調製すること
ができる。例えば、社団法人日本生化学会編『新生化学
実験講座』、第１巻、「タンパク質ＶＩ」、第３〜４４
頁、１９９２年、東京化学同人発行などにはペプチド合
成の詳細が記載されている。また、該ペプチドは、マル
チペプチドシンセサイザー SYMPHONY （プロティンテク
ノロジー社製）を用い、Fmoc (9-fluorenyl methyloxyc
arbonyl) 固相合成法にて同装置のプロトコールに従っ
て合成することができる。すなわち、合成する各ペプチ
ドのＣ末端に相当するアミノ酸が導入されている Fmoc-
L-アミノ酸 Wang 樹脂を上記ペプチド合成装置の反応容
器にセットし、デプロテクション溶液を用いて Fmoc を
除く。さらにＣ末端から２番目のアミノ酸に相当するア
ミノ酸溶液とアクチベーター溶液を反応せしめ、反応後
再び Fmoc 基のデプロテクションを行い、同様の操作を
繰り返すことにより、目的とするペプチドを合成するこ
とができる。

【００１５】本発明のペプチドは化学合成により調製さ
れたものに限定されず、例えば、スギの花粉又は雄花か
ら採取するか、組換えＤＮＡ技術により調製したスギ花
粉アレルゲンを適宜分解し、分解物から採取したもので
あってもよく、また、例えば、上記（１）乃至（１１）
に記載されたペプチドをコードするＤＮＡを調製し、こ
れを自律複製可能なベクターに挿入して組換えＤＮＡと
し、これを大腸菌、枯草菌、放線菌、酵母などの適宜宿
主に導入して形質転換体とし、その培養物からこの発明
のペプチドを採取してもよい。

【００１６】さらに、この発明のペプチドは、斯くして
得られるペプチドに糖質やポリエチレングリコールを付
加して得られる複合体としての形態、さらには、ペプチ
ドをアセチル化、アミド化及び／又は多官能試験により
架橋重合させて得られる誘導体又は重合体としての形態
であってもよい。

【００１７】この発明のペプチドは、比較的粗な形態で
投与しても所期の治療・予防効果を発揮するが、通常は
使用に先立って精製される。精製には、例えば、濾過、
濃縮、遠心分離、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン
交換クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィ
ー、アフィニティークロマトグラフィー、ゲル電気泳
動、等電点電気泳動などのペプチド乃至蛋白質を精製す
るための斯界における慣用の方法が用いられ、必要に応
じて、これら方法を適宜組合せればよい。そして、最終
使用形態に応じて、精製したペプチドを濃縮、凍結乾燥
して液状又は固状にすればよい。本発明のペプチドがＴ
細胞エピトープとしての活性を有することは、スギ花粉
アレルゲンに特異的なＴ細胞のトリチウム化チミジンの
取込を計測することにより確認することができる。

【００１８】すなわち、フィコール・ハイパック比重遠
心法等により花粉症患者の末梢血単核細胞群を分離し、
この細胞群をＲＰＭＩ１６４０等の培地に浮遊させ、９
６穴マイクロプレート上に分注する。次に、被検物質で
あるペプチドを加え培養する。この培養の温度、時間等
の条件は各実験毎に適宜調整することができるが、３７
℃、３日間が好適である。その後トリチウム化チミジン
を培地に加え、さらに一定時間培養を続け、単核細胞群
におけるトリチウム化チミジンの取込み量を測定するこ
とにより、本発明のペプチドのＴ細胞エピトープとして
の活性を算定することができる。なお、本発明では、同
時にペプチドを含まない系を設けてこれを陰性対照と
し、トリチウム化チミジンの取込み量が陰性対照の２倍
以上に達した系を「陽性」、達しなかった系を「陰性」
とした。

【００１９】

【作用】本発明のペプチドは、スギ花粉アレルゲンに特
異的なイムノグロブリンＥ抗体に実質的に反応しないの
で、ヒトを含む哺乳類一般に投与すると、実質的にアナ
フィラキシーを引起こすことなく、スギ花粉アレルゲン
に特異的なＴ細胞を不活性化することができる。

【００２０】有効成分としてかかるペプチドを含んでな
る本発明の抗スギ花粉症剤は、ヒトを含む哺乳類一般に
投与すると、実質的にアナフィラキシーを引起こすこと
なくスギ花粉症に対して顕著な治療・予防効果を発揮す
る。有効成分としてこの発明のペプチドを含んでなる抗
スギ花粉症剤は、スギ花粉症に罹患したヒトを含む哺乳
類一般に投与すると、アナフィラキシーなどの副作用を
実質的に引起こすことなく、スギ花粉症を治療すること
ができる。一方、この発明の抗スギ花粉症例を、スギ花
粉が飛散し始める前に健常な個体や潜在的なスギ花粉症
の個体に投与するときには、スギ花粉症に対して顕著な
予防効果を発揮するとともに、発症時のアレルギー症状
の緩解に著効を発揮する。

【００２１】この発明の抗スギ花粉症剤につきさらに詳
しく説明すると、この発明の抗スギ花粉症剤は、通常、
この発明によるペプチドの１種又は２種以上を0.０１乃
至１００％(w/w) 、望ましくは、0.０５乃至５０％(w/
v) 、さらに望ましくは、0.５乃至5.０％(w/w) 含んで
なる。この発明の抗スギ花粉症剤は、当該ペプチド単独
の形態はもとより、その以外の生理的に許容される、例
えば、血清アルブミン、ゼラチン、ぶどう糖、果糖、し
ょ糖、麦芽糖、乳糖、トレハロース、ソルビトール、マ
ンニトール、マルチトール、ラクチトール、りん酸緩衝
液剤もしくはクエン酸緩衝液剤を主体とする担体、賦形
剤、免疫助成剤および安定剤、さらには、必要に応じ
て、スギ花粉に特異的な公知のＴ細胞エピトープ、ステ
ロイドホルモンやクリモグリク酸ナトリウムなどの抗炎
症剤や抗ヒスタミン剤及び免疫抑制剤を含む１種又は２
種以上の他の薬剤との組成物としての形態を包含する。
さらに、この発明の抗スギ花粉症剤は、投薬単位形態の
薬剤をも包含し、その投薬単位形態の薬剤とは、この発
明のポリペプチドを、例えば、１日当たりの用量又はそ
の整数倍（４倍まで）又はその約数（１／４０まで）に
相当する量を含有し、投与に適する物理的に分離した一
体の剤形にある薬剤を意味する。このような投薬単位形
態の薬剤としては、散剤、細粒剤、顆粒剤、丸剤、錠
剤、カプセル剤、トローチ剤、シロップ剤、乳剤、軟こ
う剤、硬膏剤、パップ剤、坐剤、点眼剤、点鼻剤、噴霧
剤、注射剤などが挙げられる。

【００２２】この発明の抗スギ花粉症剤の使用方法につ
いて説明すると、この発明の抗スギ花粉症剤は、スギ花
粉症の治療・予防を目的に、ヒトを含む哺乳類一般に経
皮、経口、点鼻、点眼又は注射投与される。ヒトにおけ
る投与量は、投与の目的や症状に依っても変わるが、通
常、対象者の症状や投与後の経過を観察しながら、成人
１日当たり本発明のポリペプチドの量にして0.０１乃至
1.０g 、望ましくは、0.０１乃至0.１g を目安に、毎週
１回乃至毎月１回の頻度で、約１乃至６カ月間、通常、
用量を増やしながら反復投与される。

【００２３】本発明のポリペプチドの急性毒性常法により、生後２０日のマウスに後述の製剤例１乃至
４の方法により得た免疫治療剤を経口又は腹腔内投与し
た。その結果、これら抗スギ花粉症剤は、いずれの投与
経路によっても２００mg/kg 以上のLD₅₀であることが判
明した。このことは、この発明のペプチドが、ヒトを含
むほ乳類に対する抗スギ花粉症剤に安全に配合使用し得
ることを示している。

【００２４】試験例１スギ花粉症患者由来のＴ細胞を用い、本発明のペプチド
１ないし１１がスギ花粉症抗原Ｔ細胞エピトープ活性を
有することを以下に記載する方法により確認した。抗ス
ギ花粉アレルゲンIgE反応に陽性を示す患者から４０ｍ
ｌの末梢血を採取した。遠心分離後、バフィーコートを
得て、さらにフィコール・ハイパック比重遠心法によ
り、末梢血単核球（Peripheral Blood Mononuclear Cel
ls; ＰＢＭＣ）を採取した。このＰＢＭＣを培地（５％
のヒトＡＢ型血清を含むＲＰＭＩ）に懸濁した。

【００２５】９６穴の平底プレートに１ウェルあたり５
×１０⁵個の細胞を分注し、各ウェル２００ｎｇのペプ
チド１ないし１１を含む２００μｌの培地中で３７℃、
５％炭酸ガス下で７２時間培養した。また別に、ペプチ
ドを含まない培養群を設けてこれを陰性対照とした。そ
の後、０．５μＣｉのトリチウム化チミジンを加え、さ
らに１６時間培養した。セルハーベスターを用いて各ウ
ェルの細胞をガラス繊維フィルター上に集め、それぞれ
液体シンチレーションカウンターで細胞に取込まれたト
リチウム化チミジン量を測定した。取込みチミジン量が
陰性対照群の取込み量の２倍以上であった群をＴ細胞エ
ピトープ活性「陽性」とし、達しなかった系を「陰性」
とした。この結果を以下の表２に示す。

【００２６】

【表２】

【００２７】以上の結果より、これらのペプチドは、Ｃ
ｒｙｊ１アレルゲンのＴ細胞エピトープを含有している
ことが示された。配列表における配列番号１乃至１１に
示すアミノ酸配列を有するＴ細胞エピトープは未だ知ら
れておらず、新規Ｔ細胞エピトープと判断される。以上
のように、本発明のペプチドは、ヒトを含む哺乳類一般
に投与すると、実質的にアナフィラキシーを引起こすこ
となく、スギ花粉アレルゲンに特異的なＴ細胞を不活性
化することができる。

【００２８】有効成分として斯かるペプチドを含んでな
る本発明の抗スギ花粉症剤は、ヒトを含む哺乳類一般に
投与すると、実質的にアナフィラキシーを引起こすこと
なくスギ花粉症に対して顕著な治療・予防効果を発揮す
る。有効成分としてこの発明のペプチドを含んでなる抗
スギ花粉症剤は、スギ花粉症に罹患したヒトを含む哺乳
類一般に投与すると、アナフィラキシーなどの副作用を
実質的に引起こすことなく、スギ花粉症を治療すること
ができる。一方、この発明の抗スギ花粉症剤を、スギ花
粉が飛散し始める前に健常な個体や潜在的なスギ花粉症
の個体に投与するときには、スギ花粉症に対して顕著な
予防効果を発揮するとともに、発症時のアレルギー症状
の緩解に著効を発揮する。

【００２９】

【発明の実施の形態】以下、実施例、製剤例により本発
明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらによりそ
の技術的範囲が限定されるものではない。〔実施例１〕ペプチド１の合成樹脂に固定したアミノ酸誘導体に、１個ずつアミノ酸を
カルボキシル末端側から結合させていく方法（固相合成
法）でペプチドを化学合成した。各サイクルで使用する
アミノ酸はアミノ基および残基部分の反応基が保護基で
ブロックされた特殊なアミノ酸誘導体を用いた。ここ
で、それぞれのアミノ基がFmoc (9-フルオレニル・メチ
ロキシカルボニル）によりブロックされているアミノ酸
を用いた（Fmoc法)。またペプチド合成は樹脂に結合し
たアミノ酸のアミノ基のFmocを脱保護し、次にカルボキ
シル基が活性化したアミノ酸誘導体を結合させるという
反応を順次繰り返して行なった。

【００３０】ペプチド１のぺプチドは、マルチペプチド
シンセサイザー（シンフォニー；プロテインテクノロジ
ー社製）を用い、上記のFmoc固相合成法にて同装置のプ
ロトコールに従って合成した。すなわち、合成するペプ
チドのＣ末端残基に相当するアミノ酸（Gly)が導入され
ているFmoc-Gly-Wang樹脂（０．６５ｍｍｏｌ／ｇ）の
２５μｍｏｌ相当を上記ペプチド合成装置の反応容器に
セットし、デプロテクション溶液（２０％ピぺリジン／
ジメチルホルムアミド）１．２５ｍｌを５分間２回反応
させ、樹脂に結合しているアミノ酸のFmoc基を除いた。
樹脂をジメチルホルムアミド液１．２５ｍｌで３０秒間
６回洗浄し、Ｃ末端側から２番目のアミノ酸に相当する
１００ｍＭのFmoc-Pheジメチルホルムアミド溶液１．２
５ｍｌに、１００ｍＭのアクチベーター溶液（１００
ｍＭ２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル−）
−１、１、３、３−テトラメチルウロニウム−ヘキサフ
ルオロホスフェート／４００ｍＭＮ−メチルモルフォ
リン／ジメチルホルムアミド）１．２５ｍｌを加え
（結合アミノ酸に対して５倍等量）、２０分間室温で
反応させた。ここで生成した Fmoc- Phe-Gly-Wang 樹脂
をジメチルホルムアミド１．２５ｍｌで３０秒間６回洗
浄後、再びFmoc基のデプロテクションを行い、ジメチル
ホルムアミド１．２５ｍｌで３０秒間６回洗浄後、Fmoc
-Gln(Trt) 溶液とアクチベーター溶液を加え反応させ
た。

【００３１】同様の操作を繰り返すことにより保護ペプ
チド樹脂(Fmoc- Met-Lys(Boc)-Val-Thr(tBu)-Val-Ala-P
he-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Phe-Gly -Wang樹脂 )を合成し
た。本実施例以下のペプチド合成に使用したアミノ酸は
以下の通りである： Fmoc-Asp(OtBu) Fmoc-Asn(Trt) Fmoc-Ala Fmoc-Glu(OtBu) Fmoc-Gln(Trt) Fmoc-Gly Fmoc-His(Trt) Fmoc-Ile Fmoc-Leu Fmoc-Lys(Boc) Fmoc-Met Fmoc-Phe Fmoc-Pro Fmoc-Ser(tBu) Fmoc-Thr(tBu) Fmoc-Trp(Boc) Fmoc-Tyr(tBu) Fmoc-Val （（）内は残基部分の反応基を保護する保護基を表わ
す。；（株）パーキンエルマージャパンアプライドバイ
オシステムズ事業部製）

【００３２】まず、上記のように合成し得られた保護ぺ
プチド樹脂 (Fmoc- Met-Lys(Boc)-Val-Thr(tBu)-Val-A
la-Phe-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Phe-Gly -Wang樹脂 )にデプ
ロテクション溶液 1.25ｍｌを5分間2回反応させてＮ末
端 Fmoc基を脱保護した。次に1.25mlのＤＭＦにて６回
洗浄後、ジクロロメタンにて９回洗浄し、さらに窒素ガ
スを吹き付けることにより２０分間乾燥させた。

【００３３】樹脂を取り出し、クリベージ溶液（トリフ
ルオロ酢酸（以下「ＴＦＡ」という）：フェノール：
水：チオアニソール：エタンジチオール＝82.5：5：5：
5：2.5）を４ｍｌ加え、室温で２時間反応させることに
より樹脂からのペプチドの切断およびアミノ酸側鎖保護
基の除去を行い、ペプチド溶液を得た。［King,D.S.(19
90)Int.J.peptide Protein Reg. 36,255]。このぺプチ
ド溶液をフィルターを用いて濾過し、濾液を遠心管に回
収した。これに、１０ｍｌの冷エーテルを加え、ペプチ
ドを沈殿させた。しばらく冷却後、これを遠心して（３
０００ｒｐｍ，１０分間）沈殿物を集め、再び冷エーテ
ルを加えて分散させては回収する操作を４回繰り返して
ペプチドを洗浄した。得られたペプチドを乾燥させ、粗
ペプチドを得た。以下、上記の操作を「クリベージ反
応」という。

【００３４】得られた粗ペプチドのうち１１．７ｍｇを
０．１％のＴＦＡを含む３０％アセトニトリル水溶液に
溶解後、高速液体クロマトグラフィー（以下「ＨＰＬ
Ｃ」という）に供した。ＨＰＬＣの条件は以下の通りで
あった。カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラムＯＤＳ，
２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社製）移動相：
２５−２８％アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ，
１５分流速：５ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２２０ｎｍ１２〜１４分に溶出された画分を分取し、濃縮後、凍結
乾燥を行い目的とするペプチド４．９ｍｇを得た。こ
の合成したペプチド１００ｐｍｏｌについて、アミノ酸
配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作所（株）社製）
を用いてアミノ酸配列分析を行なったところ、配列表の
配列番号１に示されるアミノ酸配列が確認された。

【００３５】［実施例２］ペプチド２の合成 C末端がProであるペプチドの合成にはFmoc-Pro-2-Chlor
otrityl樹脂を用い実施例１と同様の操作により、保護
ペプチド樹脂 (Fmoc- Ser(tBu)-Met-Lys(Boc)-Val-Thr
(tBu)-Val-Ala-Phe-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Phe-Gly-Pro-2-
Chlorotrityl樹脂 )を合成しクリベージ反応を行なっ
て、粗ペプチドを得た。得られた粗ペプチドのうち１
０ｍｇを０．１％のＴＦＡを含む２０％アセトニトリ
ル水溶液に溶解後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの条件
は以下の通りであった。

【００３６】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫｇｅｌＯ
ＤＳ−８０Ｔ，７．８ｍｍｘ３００ｍｍ；東ソー
（株）社製）移動相：３０％アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ，
３０分流速：０．７ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２３０ｎｍ２１〜２２分に溶出された画分を分取し、濃縮
後、凍結乾燥を行い目的とするペプチド１．３ｍｇを
得た。この合成したペプチド１００ｐｍｏｌについて、
アミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作所
（株）社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったとこ
ろ、配列表の配列番号２に示されるアミノ酸配列が確認
された。

【００３７】［実施例３］ペプチド３の合成実施例１と同様の操作により、保護ペプチド樹脂 (Fmo
c-Tyr(tBu)-Gly-Leu-Val-His(Trt)-Val-Ala-Asn(Trt)-A
sn(Trt)-Asn(Trt)-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Pro-Trp(Boc)-T
hr(tBu)-Ile Wang 樹脂 )を合成しクリベージ反応を行
なって、粗ペプチドを得た。得られた粗ペプチドのうち
８．９ｍｇを０．１％のＴＦＡを含む２０％アセトニ
トリル水溶液に溶解後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの
条件は以下の通りであった。

【００３８】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラ
ムＯＤＳ，２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社
製）移動相：２０−３０％アセトニトリル／０．１％
ＴＦＡ，２０分流速：８ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２２０ｎｍ１７〜２０分に溶出された画分を分取し、濃縮
後、凍結乾燥を行い目的とするペプチド５．０ｍｇを
得た。この合成したペプチド１００ｐｍｏｌについて、
アミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作所
（株）社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったとこ
ろ、配列表の配列番号３に示されるアミノ酸配列が確認
された。

【００３９】［実施例４］ペプチド４の合成実施例１と同様の操作により、保護ペプチド樹脂 (Fmo
c-Tyr(tBu)-Gly-Leu-Val-His(Trt)-Val-Ala-Asn(Trt)-A
sn(Trt)-Asn(Trt)-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Pro-Trp(Boc)-
Wang 樹脂 )を合成しクリベージ反応を行なって、粗ペ
プチドを得た。得られた粗ペプチドのうち９ｍｇを
０．１％のＴＦＡを含む２０％アセトニトリル水溶液に
溶解後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの条件は以下の通
りであった。

【００４０】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラ
ムＯＤＳ，２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社
製）移動相：２０−３０％アセトニトリル／０．１％
ＴＦＡ，２０分流速：８ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２２０ｎｍ１３〜１６分に溶出された画分を分取し、濃縮
後、凍結乾燥を行い目的とするペプチド６．４ｍｇを
得た。この合成したペプチド１００ｐｍｏｌについて、
アミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作所
（株）社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったとこ
ろ、配列表の配列番号４に示されるアミノ酸配列が確認
された。

【００４１】［実施例５］ペプチド５の合成実施例１と同様の操作により、保護ペプチド樹脂 (Fmo
c-Gly-Leu-Val-His(Trt)-Val-Ala-Asn(Trt)-Asn(Trt)-A
sn(Trt)-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Pro-Trp(Boc)-Thr(tBu) W
ang 樹脂 )を合成しクリベージ反応を行なって、粗ペプ
チドを得た。

【００４２】得られた粗ペプチドのうち８ｍｇを
０．１％のＴＦＡを含む２０％アセトニトリル水溶液に
溶解後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの条件は以下の通
りであった。

【００４３】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラ
ムＯＤＳ，２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社
製）移動相：２０−３０％アセトニトリル／０．１％
ＴＦＡ，２０分流速：８ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２２０ｎｍ８〜１１分に溶出された画分を分取し、濃縮後、
凍結乾燥を行い目的とするペプチド４．１ｍｇを得
た。

【００４４】この合成したペプチド１００ｐｍｏｌにつ
いて、アミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作
所（株）社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったと
ころ、配列表の配列番号6に示されるアミノ酸配列が確
認された。

【００４５】［実施例６］ペプチド６の合成 C末端がProであるペプチドの合成にはFmoc-Pro-2-Chlor
otrityl樹脂を用い、実施例１と同様の操作により、保
護ペプチド樹脂 (Fmoc-Tyr(tBu)-Gly-Leu-Val-His(Tr
t)-Val-Ala-Asn(Trt)-Asn(Trt)-Asn(Trt)-Tyr(tBu)-Asp
(OtBu)-Pro-2-Chlorotrityl樹脂 )を合成しクリベージ
反応を行なって、粗ペプチドを得た。

【００４６】得られた粗ペプチドのうち５．５ｍｇ
を０．１％のＴＦＡを含む２０％アセトニトリル水溶液
に溶解後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの条件は以下の
通りであった。

【００４７】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラ
ムＯＤＳ，２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社
製）移動相：２１−２６％アセトニトリル／０．１％
ＴＦＡ，１５分流速：５ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２２０ｎｍ９〜１０．５分に溶出された画分を分取し、濃縮
後、凍結乾燥を行い目的とするペプチド２．８ｍｇを
得た。

【００４８】この合成したペプチド１００ｐｍｏｌにつ
いて、アミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作
所（株）社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったと
ころ、配列表の配列番号６に示されるアミノ酸配列が確
認された。

【００４９】［実施例７］ペプチド７の合成実施例１と同様の操作により、保護ペプチド樹脂 (Fmo
c- Ser(tBu)- Ser(tBu)-Gly-Lys(Boc)-Tyr(tBu)-Glu(Ot
Bu)-Gly-Gly-Asn(Trt)-Ile-Tyr(tBu)-Thr(tBu)-Lys(Bo
c)-Lys(Boc)-Glu(OtBu)-Ala-Phe-Asn(Trt)-Val−Wang樹
脂）を合成しクリベージ反応を行なって、粗ペプチドを
得た。得られた粗ペプチドのうち１１ｍｇを０．１
％のＴＦＡを含む１５％アセトニトリル水溶液に溶解
後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの条件は以下の通りで
あった。

【００５０】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラ
ムＯＤＳ，２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社
製）移動相：１５−２５％アセトニトリル／０．１％
ＴＦＡ，２０分流速：８ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２２０ｎｍ１０〜１２分に溶出された画分を分取し、濃縮
後、凍結乾燥を行い目的とするペプチド５．９ｍｇを
得た。

【００５１】この合成したペプチド１００ｐｍｏｌにつ
いて、アミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作
所（株）社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったと
ころ、配列表の配列番号７に示されるアミノ酸配列が確
認された。

【００５２】［実施例８］ペプチド８の合成実施例１と同様の操作により、保護ペプチド樹脂 (Fmo
c- Ser(tBu) -Gly-Lys(Boc)-Tyr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-G
ly-Asn(Trt)-Ile-Tyr(tBu)-Thr(tBu)-Lys(Boc)-Lys(Bo
c)-Glu(OtBu)-Ala-Phe-Asn(Trt)-Val-Glu(OtBu)−Wang
樹脂）を合成しクリベージ反応を行なって、粗ペプチド
を得た。

【００５３】得られた粗ペプチドのうち１１ｍｇを
０．１％のＴＦＡを含む１５％アセトニトリル水溶液に
溶解後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの条件は以下の通
りであった。

【００５４】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラ
ムＯＤＳ，２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社
製）移動相：１５−２２％アセトニトリル／０．１％
ＴＦＡ，２０分流速：８ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２２０ｎｍ１０〜１２分に溶出された画分を分取し、濃縮
後、凍結乾燥を行い目的とするペプチド６．４ｍｇを
得た。

【００５５】この合成したペプチド１００ｐｍｏｌにつ
いて、アミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作
所（株）社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったと
ころ、配列表の配列番号８に示されるアミノ酸配列が確
認された。

【００５６】［実施例９］ペプチド９の合成実施例１と同様の操作により、保護ペプチド樹脂 (Fmo
c- Ser(tBu)-Gly-Lys(Boc)-Tyr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Gl
y-Asn(Trt)-Ile-Tyr(tBu)-Thr(tBu)-Lys(Boc)-Lys(Boc)
-Glu(OtBu)-Ala-Phe-Asn(Trt)-Val −Wang樹脂）を合成
しクリベージ反応を行なって、粗ペプチドを得た。

【００５７】得られた粗ペプチドのうち１１ｍｇを
０．１％のＴＦＡを含む１５％アセトニトリル水溶液に
溶解後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの条件は以下の通
りであった。

【００５８】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラ
ムＯＤＳ，２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社
製）移動相：１５−２０％アセトニトリル／０．１％
ＴＦＡ，２０分流速：８ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２２０ｎｍ１６〜１８分に溶出された画分を分取し、濃縮
後、凍結乾燥を行い目的とするペプチド４．８ｍｇを
得た。

【００５９】この合成したペプチド１００ｐｍｏｌにつ
いて、アミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作
所（株）社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったと
ころ、配列表の配列番号９に示されるアミノ酸配列が確
認された。

【００６０】［実施例１０］ペプチド１０の合成実施例１と同様の操作により、保護ペプチド樹脂 (Fmo
c-Gly-Lys(Boc)-Tyr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Gly-Asn(Trt)
-Ile-Tyr(tBu)-Thr(tBu)-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Glu(OtBu)
-Ala-Phe-Asn(Trt)-Val-Glu(OtBu)−Wang樹脂）を合成
しクリベージ反応を行なって、粗ペプチドを得た。

【００６１】得られた粗ペプチドのうち５．４ｍｇ
を０．１％のＴＦＡを含む２０％アセトニトリル水溶液
に溶解後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの条件は以下の
通りであった。

【００６２】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラ
ムＯＤＳ，２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社
製）移動相：２０−３０％アセトニトリル／０．１％
ＴＦＡ，１５分流速：５ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２３０ｎｍ９〜１０分に溶出された画分を分取し、濃縮後、
凍結乾燥を行い目的とするペプチド３．６ｍｇを得
た。この合成したペプチド１００ｐｍｏｌについて、ア
ミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作所（株）
社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったところ、配
列表の配列番号１０に示されるアミノ酸配列が確認され
た。

【００６３】［実施例１１］ペプチド１１の合成実施例１と同様の操作により、保護ペプチド樹脂 (Fmo
c- Glu(OtBu)-Gly-Gly-Asn(Trt)-Ile-Tyr(tBu)-Thr(tB
u)-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Glu(OtBu)-Ala-Phe-Asn(Trt)-Va
l−Wang樹脂）を合成しクリベージ反応を行なって、粗
ペプチドを得た。得られた粗ペプチドのうち５ｍｇ
を０．１％のＴＦＡを含む２０％アセトニトリル水溶液
に溶解後、ＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの条件は以下の
通りであった。

【００６４】カラム：ＯＤＳカラム（ＴＳＫガードカラ
ムＯＤＳ，２１．５ｍｍｘ７５ｍｍ；東ソー（株）社
製）移動相：２０−３５％アセトニトリル／０．１％
ＴＦＡ，１５分流速：５ｍｌ／ｍｉｎ．検出波長：２３０ｎｍ９．５〜１０．５分に溶出された画分を分取し、
濃縮後、凍結乾燥を行い目的とするペプチド３．５ｍ
ｇを得た。

【００６５】この合成したペプチド１００ｐｍｏｌにつ
いて、アミノ酸配列装置（ＰＰＳＱ−１０型；島津製作
所（株）社製）を用いてアミノ酸配列分析を行なったと
ころ、配列表の配列番号１１に示されるアミノ酸配列が
確認された。

【００６６】製剤例１．液剤実施例１乃至１１記載の方法により得た１１種類のペプ
チドのいずれかを最終濃度0.１g/mlになるように安定剤
として１％(w/v) 精製ゼラチンを含む蒸留水に溶解し、
常法により滅菌濾過して１１種類の液剤を得た。本発明
のペプチドに対する感受性は個体毎に変わるのが通例で
あるから、本品は個々の個体に最も適した組成になるよ
う、１１種類の液剤を適宜配合して使用する。本品は安
定性に優れているので、スギ花粉症を治療・予防するた
めの点眼剤、点鼻剤、口腔内噴霧剤用の液剤として有用
である。

【００６７】製剤例２．注射剤安定剤として１％(w/v) ヒト血清アルブミンを含む生理
食塩水に実施例１乃至１１記載の方法により得た２４種
類のペプチドをそれぞれ最終濃度0.01、0.１又は１mg/m
l になるように溶解し、滅菌濾過した後、滅菌バイアル
瓶に２mlずつ分注し、凍結乾燥し、密栓した。本品は投
与に先立ち、まず、バイアル瓶内に注射用蒸留水等を１
ml加え、次いで、内容物を均一に溶解して使用する。安
定性に優れ、有効成分として本発明による１１種類のポ
リペプチドを含んでなる本品は、スギ花粉症を治療・予
防するための乾燥注射剤として有用である。

【００６８】製剤例３．錠剤平均分子量約20,000ダルトンの精製プルラン２g を蒸留
水１００mlに均一に溶解し、溶液に塩化シアヌルの1.７
％(w/v) アセトン溶液を２ml加え、５％(w/v)炭酸ナト
リウム水溶液でpHを７付近に保ちつつ、攪拌下、５℃で
２時間反応させた。その後、同様にして反応物のpHを７
付近に保ちながら、４℃の冷水に対して一晩透析し、活
性化プルランを含む水溶液２０mlを得た。実施例１乃至
１１記載の方法により得たペプチドをそれぞれ0.２mg加
え、溶液のpHを７付近に保ちつつ、穏やかに攪拌しなが
ら、３７℃で１２時間反応させた。反応後、反応物にグ
リシンを４g を加え、穏やかに攪拌しながら、３７℃で
５時間インキュベートし、未反応の活性基をブロックし
た。

【００６９】反応物を濃縮し、あらかじめ0.１M リン酸
緩衝液（pH 7.0) で平衡化させておいたセファデックス
G-50 カラムに負荷し、カラムに新鮮な同一緩衝液を通
液して、この発明のペプチドとプルランの複合体を含む
画分を採取した。収量は、原料ペプチド固形分当たり、
約３０％であった。常法に従って、この画分を滅菌濾過
し、濃縮し、凍結乾燥し、粉砕後、マンニトールを均一
に混合し、混合物を打錠して製品１錠（200mg）当たり
複合体を２、１０又は５０mg含む錠剤を得た。摂取性、
安定性に優れた本品は、スギ花粉症を治療・予防するた
めの舌下剤として有用である。

【００７０】製剤例４．シロップ剤大腸菌由来の精製リポ多糖１g を１０mMリン酸カルシウ
ム溶液１００mlに溶解し、溶液に１００mM過ヨウ素酸ナ
トリウムを６ml加え、室温下で２０分間反応させてリポ
多糖を活性化した。反応物を４℃の１M グリシン−塩酸
緩衝液（pH 4.4) に対して一晩透析して未反応の過ヨウ
素酸を除去した後、0.１M 炭酸水素ナトリウム緩衝液に
よりpH 9.5付近に調整する一方、別途、実施例１乃至１
１記載の方法により得た１１種類のペプチドを0.１M リ
ン酸緩衝液（pH 7.0) １００mlにそれぞれ１０mgずつ溶
解し、活性化リポ多糖を含む上記反応物に加え、室温下
で１２時間静置して反応させた。その後、新たに得られ
た反応物を製剤例３の方法により精製し、得られた本発
明のペプチドとリポ多糖の複合体を含む画分を濃縮し、
凍結乾燥し、粉砕して固状物とした。収量は、原料ペプ
チド固形分当たり、約３０％であった。

【００７１】この固形物を蔗糖をそれぞれ最終濃度が0.
１若しくは１mg/ml 又は５０％(w/w) になるように安定
剤として精製ゼラチンを１％(w/w) 含む蒸留水に溶解
し、溶液を常法により滅菌濾過してシロップ状物を得
た。このシロップ状物を２mlずつ滅菌バイアル瓶に分注
し、密栓して製品とした。安定性に優れ、有効成分とし
てこの発明のペプチドとリポ多糖の複合体を含む本品
は、スギ花粉症を治療・予防するためのシロップ剤とし
て有用である。

【００７２】

【発明の効果】本発明により、本質的にスギ花粉アレル
ゲンに特異的なＴ細胞エピトープのみからなる新規ペプ
チド群、さらにはそれらのポリペプチドを有効成分とし
て含んでなる抗スギ花粉症剤を提供することができた。
そして、本発明のペプチドは、スギ花粉アレルゲンに特
異的なイムノグロブリンＥ抗体に実質的に反応しないの
で、ヒトを含む哺乳類一般に投与すると、実質的にアナ
フィラキシーを引起こすことなく、スギ花粉アレルゲン
に特異的なＴ細胞を不活性化することができる。

【００７３】

【配列表】

配列番号：１配列の長さ：１１配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド

【００７４】配列番号：２配列の長さ：１３配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Ser Met Lys Val Thr Val Ala Phe Asn Gln Phe Gly Pro 1 5 10

【００７５】配列番号：３配列の長さ：１６配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Tyr Gly Leu Val His Val Ala Asn Asn Asn Tyr Asp Pro Trp Thr Ile 1 5 10 15

【００７６】配列番号：４配列の長さ：１４配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Tyr Gly Leu Val His Val Ala Asn Asn Asn Tyr Asp Pro Trp 1 5 10

【００７７】配列番号：５配列の長さ：１４配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Gly Leu Val His Val Ala Asn Asn Asn Tyr Asp Pro Trp Thr 1 5 10

【００７８】配列番号：６配列の長さ：１３配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Tyr Gly Leu Val His Val Ala Asn Asn Asn Tyr Asp Pro 1 5 10

【００７９】配列番号：７配列の長さ：１９配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Ser Ser Gly Lys Tyr Glu Gly Gly Asn Ile Tyr Thr Lys Lys Glu 1 5 10 15 Ala Phe Asn Val

【００８０】配列番号：８配列の長さ：１９配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Ser Gly Lys Tyr Glu Gly Gly Asn Ile Tyr Thr Lys Lys Glu Ala 1 5 10 15 Phe Asn Val Glu

【００８１】配列番号：９配列の長さ：１８配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Ser Gly Lys Tyr Glu Gly Gly Asn Ile Tyr Thr Lys Lys Glu Ala 1 5 10 15 Phe Asn Val

【００８２】配列番号：１０配列の長さ：１８配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Gly Lys Tyr Glu Gly Gly Asn Ile Tyr Thr Lys Lys Glu Ala Phe 1 5 10 15 Asn Val Glu

【００８３】配列番号：１１配列の長さ：１４配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列ＧｌｕＧｌｙＧｌｙＡｓｎＩｌｅＴｙｒＴｈｒＬｙｓＬｙｓ
ＧｌｕＡｌａＰｈｅＡｓｎＶａｌ１５
１０

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者平原一樹東京都品川区広町１丁目２番58号三共株式会社内 (72)発明者白石明郎東京都品川区広町１丁目２番58号三共株式会社内 (72)発明者芹澤伸記東京都品川区広町１丁目２番58号三共株式会社内 (72)発明者栗本雅司岡山県岡山市学南町２丁目７番25号 (72)発明者日野克彦岡山県岡山市奥田１丁目７番10−204号

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】配列番号１のアミノ酸配列から成るペプ
チド。
【請求項２】配列番号１のアミノ酸配列を含むことか
ら成るペプチド。
【請求項３】配列番号２のアミノ酸配列から成るペプ
チド。
【請求項４】配列番号２のアミノ酸配列を含むことか
ら成るペプチド。
【請求項５】配列番号３のアミノ酸配列から成るペプ
チド。
【請求項６】配列番号３のアミノ酸配列を含むことか
ら成るペプチド。
【請求項７】配列番号４のアミノ酸配列から成るペプ
チド。
【請求項８】配列番号４のアミノ酸配列を含むことか
ら成るペプチド。
【請求項９】配列番号５のアミノ酸配列から成るペプ
チド。
【請求項１０】配列番号５のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチド。
【請求項１１】配列番号６のアミノ酸配列から成るペ
プチド。
【請求項１２】配列番号６のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチド。
【請求項１３】配列番号７のアミノ酸配列から成るペ
プチド。
【請求項１４】配列番号７のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチド。
【請求項１５】配列番号８のアミノ酸配列から成るペ
プチド。
【請求項１６】配列番号８のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチド。
【請求項１７】配列番号９のアミノ酸配列から成るペ
プチド。
【請求項１８】配列番号９のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチド。
【請求項１９】配列番号１０のアミノ酸配列から成る
ペプチド。
【請求項２０】配列番号１０のアミノ酸配列を含むこ
とから成るペプチド
【請求項２１】配列番号１１のアミノ酸配列から成る
ペプチド。
【請求項２２】配列番号１１のアミノ酸配列を含むこ
とから成るペプチド
【請求項２３】配列番号１のアミノ酸配列から成るペ
プチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項２４】配列番号１のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項２５】配列番号２のアミノ酸配列から成るペ
プチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項２６】配列番号２のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項２７】配列番号３のアミノ酸配列から成るペ
プチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項２８】配列番号３のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項２９】配列番号４のアミノ酸配列から成るペ
プチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３０】配列番号４のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３１】配列番号５のアミノ酸配列から成るペ
プチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３２】配列番号５のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３３】配列番号６のアミノ酸配列から成るペ
プチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３４】配列番号６のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３５】配列番号７のアミノ酸配列から成るペ
プチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３６】配列番号７のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３７】配列番号８のアミノ酸配列から成るペ
プチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３８】配列番号８のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項３９】配列番号９のアミノ酸配列から成るペ
プチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項４０】配列番号９のアミノ酸配列を含むこと
から成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項４１】配列番号１０のアミノ酸配列から成る
ペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項４２】配列番号１０のアミノ酸配列を含むこ
とから成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項４３】配列番号１１のアミノ酸配列ことから
成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。
【請求項４４】配列番号１１のアミノ酸配列を含むこ
とから成るペプチドを有効成分とする抗スギ花粉症剤。