JPH11507934A

JPH11507934A - 胃腸障害の予防及び治療のための医薬用及び食餌用処方

Info

Publication number: JPH11507934A
Application number: JP9503576A
Authority: JP
Inventors: ドゥ・アーン，クリストフ; ゴッツィーニ，ルイージア
Original assignee: ブラッコ・エッセ・ピ・ア
Priority date: 1995-06-23
Filing date: 1996-06-19
Publication date: 1999-07-13
Also published as: ES2194107T3; US6007808A; HUP9901707A2; AU6357596A; EP0833644A1; DE69626818D1; NO976048L; DE833644T1; ITMI951359A0; DK0833644T3; MX9709238A; ITMI951359A1; BR9609413A; IT1276783B1; ATE234623T1; CA2219739A1; HUP9901707A3; WO1997000688A1; EP0833644B1; CN1188413A

Abstract

(57)【要約】本発明は、胃腸障害の予防及び治療のための医薬用及び食餌用処方に関する。

Description

【発明の詳細な説明】胃腸障害の予防及び治療のための医薬用及び食餌用処方本発明は、胃腸障害の予防及び治療のための医薬用及び食餌用処方に関する。ウイルス、細菌及び原生動物感染症、更には慢性炎症性疾患、又は放射線損傷を含む胃腸障害は、胃腸細胞にストレスをかけている。胃腸管の粘膜細胞の主な栄養分は、グルタミンである。この通常非必須のアミノ酸は、このアミノ酸の十分量を生成する個人の能力以上のグルタミン要求量を特徴とする病気においては「条件つきで必須」となる。グルタミンの経腸的又は非経腸的投与により、患者の栄養管理及び回復が改善される（Castel LM ら，(1994)Amino Acids 7，231-2 43; Lacey JM，Wilmore DW（1990）Nutr．Rev．48(8)，297-309）。グルタミンは、腸細胞及びリンパ球のような増殖の速い細胞の好適な燃料であることに加えて、アンモニアの生成による酸−塩基平衡の調節物質でもある。腸細胞は、エネルギー源としてグルタミンを利用する小腸の最も重要な細胞である（Wu Gら，（ 1995）Am．J．Physiol．266，R334-R342; Nagy LE，Kretchmer N(1988)J．Nutr ．118(2)，189-193)。実際、腸の細胞は、食餌により供給される著しい量のグルタミンを吸収し、このアミノ酸の供給が低下すると必ず、このアミノ酸を血液から取り入れる。例えば、グルタミナーゼの投与などにより動物において実験的に低レベルのグルタミンを誘導すると、腸障害、例えば、慢性下痢、絨毛の萎縮(v illous atrophy)などを引き起こし(Castel LMら，(1994)Amino Acids 7，231-24 3)、こうして腸に対するグルタミンの重要性が確認される。結論として、グルタミンは、ある種の胃腸管の障害において不足する場合がある。このようなグルタミン欠乏状況において、胃腸細胞は脆弱になり、このため、例えば、感染性物質又は電離放射線により引き起こされる傷害を受けやすくなる。逆に言えば、胃腸細胞に対する傷害及びストレスは、これらのエネルギー需要、ひいては生存又は回復のためのこれらのグルタミンの需要を増大させうる。結果として、グルタミンの投与は、胃腸細胞が傷害に対して抵抗する能力を増大させうる。加えて、グルタミンの投与が胃腸細胞に及ぼす上述の正の効果は、免疫系と創傷治癒速度の両方に作用するアルギニンの添加により更に増強することができる(Wu Gら，(19 95)Am．J．Physiol．266，R334-R342)。炭水化物は、グルタミンと共同で作用すると考えられているが、単独ではグルタミンの代用にはなりえない(Wu Gら，(19 95)Am．J．Physiol．266，R334-R342)。溶液中で、グルタミンは完全に安定ではない。特に、グルタミン溶液の加熱滅菌により、ピログルタミン酸塩及びグルタミン酸が形成されうる。グルタミン含有ポリペプチドは、はるかに安定である。このようなポリペプチドを摂取すると、プロテアーゼにより胃及び腸においてグルタミンが放出される。したがって、例えばＬ−アラニル−Ｌ−グルタミン又はグリシル−Ｌ−グルタミン又はグリシル−グリシル−Ｌ−グルタミンのような、グルタミンを含有する大小のポリペプチドを投与することにより、十分なグルタミン量を達成することができる。健常なヒト又は動物の胃腸管から単離される、乳酸菌、特に乳酸桿菌（Lactob acilli）及び他の細菌は、胃腸感染症に対し予防的及び治療的効果を生み出すことが以前から知られている（Zoppi G.ら，(1982)Eur．J． Pediatrics 139，18- 21）。このような細菌は、良性細菌(eubiotic bacteria)の名で通っている。幾つかの細菌種は、栄養分及び／又は胃腸粘膜上の付着部位に関して病原菌と競合するであろう。加えて、これらはｐＨを正常値に戻す傾向にある。例えば、最初にブタの腸から単離された、Enterococcus faeciumＳＦ６８（以前はStreptococcus faecium ＳＦ６８と呼ばれていた）は、臨床試験において有効であることが証明されている（Borgia Mら，(1982)Curr．Ther．Res．31(2)，265-271; BellomoG ら，(1980)Curr．Th er．Res．28(6)，927-936; Camarri Eら，(1981)Chemotherapy 27，466-470; Wu nderlich PFら，(1989)J．Int．Med．Res．17，333-338）。胃腸粘膜に対するこの細菌の低い親和性のため、長期の規則的な投与が必要とされる。これとは対照的に、粘膜に対する良好な付着性を示す細菌で治療される患者は、治療を達成するのに、より低い投与頻度及びより短い投与期間しか必要としないであろう。ヒトの胃腸粘膜に付着することができるため、同様な付着性を有する病原菌と競合する、乳酸桿菌(Lactobacillus)属に属する細菌が、健常人から単離されており、これらの特徴は、米国特許第4,839,281 号、米国特許第5,032,399 号、及びWO特許出願95/33046号に開示されている。例えば、米国特許第4,839,281 号及び5,032,399 号は、成人から単離され、良好な付着性を特徴とする、Lactobacil lus acidophilus のＡＴＣＣ５３１０３株を開示している。この株の学問上の分類は、更に最近になって修正され、この株はLactobacillus casei のrhamnosus 亜種として分類された。幾つかの国では、一般にLactobacillus GGと呼ばれるこの株に基づく栄養食品が市販されるに至っている（例えば、フィンランドのGefi lus（登録商標）発酵乳及びGefilus（登録商標）発酵乳清飲料）。劇的に付着性が改善された乳酸桿菌属に属する他の株は、ＣＮＣＭＩ−１３９０株、ＣＮＣＭＩ−１３９１株、ＣＮＣＭＩ−１３９２株、及びＣＮＣＭＩ−１４４７株である。これらは、WO特許出願95/33046号に開示されている。優れた付着性に加えて、これらは、製造と保存に関して技術上好ましい性質を特徴としている。抗生物質は急性感染症を治療するのに広く使用されている。胃腸の細菌叢は痩せてしまう。乳酸桿菌の投与は、十分に機能する細菌叢を復旧するために利用することができる。このような場合に、抗生物質に耐性の細菌を選択することが有用であろう。実際、多くの細菌は、抗生物質に対する本来備わった耐性を示す。他の場合、抗生物質の耐性は突然変異誘発により、例えば、正常な突然変異率を加速する物質を使用することによって、誘導することができる。次に突然変異株を、よく知られている方法により選択する。あるいは、遺伝子工学の広く知られている技術により、抗生物質に対する特異的な耐性が賦与された細菌を産生することができる。幾つかの良性細菌は、病原菌に対して静菌性又は更に殺菌性の挙動を示す。これらの活性は、一部は、乳酸、酢酸、及び過酸化水素のような代謝物の産生に起因しており、これらは周囲の環境を病原菌の増殖にとって好ましくないものにする。加えて、幾つかの乳酸菌は、抗生物質及びバクテリオシンのような他の物質を産生することが知られている。そして明らかにこれらの細菌は、特別な興味を集めている。同時にグルタミンが存在することが、良性細菌の増殖に影響しうるかどうかを確認するために、インビトロの実験を行った。良性細菌株を、４％グルタミンの非存在下及び存在下で、ＭＲＳブロス（乳酸桿菌株）又はＢＨＩブロス（Entero coccus faecium）中で５％ＣＯ₂雰囲気下３７℃でインキュベートした。１２時間、２４時間及び４８時間後に細菌数の計数を行った。結果は表Ｉに要約する。ａ値はｌｏｇCFU/mLとして表す。CFU ＝コロニー形成単位（Colony Forming Unit）。データは、培地中に同時にグルタミンが存在することが、細菌の増殖を阻害しないことを示している。胆汁の存在下及び異なるｐＨ値において同様な実験を行った。これらの試験においても、グルタミンの存在は、試験細菌の増殖を妨害しなかった。本発明の一部として、治療用細菌と、グルタミン又はグルタミン含有ポリペプチドの組合せのおかげで、この組合せの各成分を単独でとるのに比ベて驚くほど好ましい治療効果を示す、非常に進歩した医薬製剤を製造できることが見い出された。特に、良性細菌による治療が回復を促進するという徴候が得られた。医薬処方において、良性細菌はその安定性を保つために、米国特許第3,897,30 7 号及びヨーロッパ特許出願EP-A-259739 号に開示されるように、通常凍結乾燥される。幾つかの場合に、細菌の凍結乾燥には、長い氷の結晶の形成を抑制するため水相中での安定剤の使用を必要とする。これは、例えば、炭水化物、アミノ酸、ポリペプチド、タンパク質、合成ポリマー及びジメチルスルホキシドを含む。米国特許第3,897,307 号は、乾燥の前に、「増強剤（potentiators）」、詳細にはＬ−アスコルビン酸と水溶性の食用塩を、増殖した培養物に添加することによる、安定化乾燥細菌株の調製を開示している。この過程に使用することができる別の化合物としては、トレハロースがある。驚くべきことに今やグルタミン又はグルタミンを含むポリペプチドも、特に、添加された炭水化物及び／又はその他の動物若しくは植物由来の抽出物の複合混合物（例えば、酵母若しくは肉抽出物又はドライミルクなど）の存在下で、凍結乾燥中の細菌を安定化するために使用できることが見い出された。あるいは、凍結乾燥中に、当業者に知られている任意の通常法により細菌を安定化し、医薬製剤の他の成分（即ち、好ましくはアルギニン又は炭水化物又はドライミルクなどのような添加物と一緒の、グルタミン又はその誘導体）を含む顆粒混合物の形で保存することができる。良性細菌単独で行った凍結乾燥実験、及び、４％グルタミン、又はグルタミンとドライミルクの混合物の存在下で行った凍結乾燥実験により、上記の記載を確認した。あるいは、凍結乾燥細菌とその添加物、及びグルタミン又はグルタミン含有ポリペプチドとその添加物を別々の小包（sachets）に入れて保存し、製剤の２つの各成分の水への溶解又は懸濁後、同時に摂取されるようにする。現在、幾つかの細菌製剤は、カプセルに入れた凍結乾燥粉末である。明らかに、本発明の１つの特定の実施としては、他の成分、グルタミン又はグルタミン含有ポリペプチドと、これに加えてアルギニンのような添加されることもあり得る物を水に溶解／懸濁することにより調製される飲料と共に摂取される、この細菌含有カプセル剤の調製が考慮される。この場合に、カプセルとアミノ酸を含む小包は、２つの異なる成分の正しい単回投与量を確保する単一の糖菓剤中に一緒に包装することができる。実施例１凍結乾燥したEnterococcus faeciumＳＦ６８１０⁶〜１０¹²細胞を含むカプセルをブリスターパックに包装した。グルタミン３ｇ及びショ糖６ｇの顆粒を含む、カプセルと同数の小包を一緒にブリスターパックに包装した。単回用量を調製するためには、小包の内容物を水１００〜１５０mLに溶解／懸濁し、次にこの調製した溶液／懸濁液により、必要であれば更に水を追加して１個のカプセルをのみ込む必要がある。実施例２ Lactobacillus casei のcasei 亜種のＣＮＣＭＩ−１３９１株をＭＲＳブロスで増殖させ、遠心分離により細胞を回収した。細胞を約１０¹⁰細胞/mL の濃度で、Ｌ−グルタミン７５g/L 及びショ糖１５０g/L よりなるフィルター滅菌溶液に再懸濁して、次に凍結乾燥した。得られた凍結乾燥産物を、密閉した小包に９ｇ用量で分配した。各用量は、水１００〜１５０mLに溶解／懸濁される１つの小包の内容物とした。実施例３乳酸桿菌ＣＮＣＭＩ−１３９０株及びＣＮＣＭＩ−１４４７株の混合物を各株約１０⁹細胞/mL の濃度で使用することにより、実施例２の処方と同様な処方を得た。実施例４グルタミン３ｇ、ショ糖６ｇ、及びLactobacillus acidophilus ＣＮＣＭＩ −１４４７少なくとも１０⁷細胞の混合物よりなる顆粒を含む小包を調製した。水１００〜１５０mLに小包の内容物を希釈後、この処方を投与した。実施例５同じ濃度のＡＴＣＣ５３１０３株により実施例４の処方を調製した。実施例６グリシル−グリシル−Ｌ−グルタミン４ｇ、Ｌ−アルギニン３ｇ及びブドウ糖５ｇよりなる顆粒を含む小包、及びLactobacillus casei のcasei亜種のＣＮＣＭＩ−１３９１株少なくとも１０⁶細胞をデキストラン安定化凍結乾燥剤型として含む小包を、調製した。各種類の小包の内容物は、目的の治療用、予防用又は食餌用の用量を得るために水１００〜１５０mLに溶解／懸濁する必要があった。実施例７既に２日間旅行者下痢症の典型的な症状を示していた志願患者２名に、グルタミン３ｇ及びショ糖６ｇと共に、Streptococcus faecium ＳＦ６８（Bioflorin （登録商標）、Bracco S.p.A．、ミラノ）を含むカプセル１個を、３日目と４日目の朝、昼及び夕に与えた。急速な緩解感を観察し、症状が戻ることはなかったため、２日後に治療を停止した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．−少なくとも、１用量当たり１０⁶〜１０¹²細胞、好ましくは１用量当たり１０⁸〜１０¹¹細胞の範囲の量の腸内良性細菌株、 −１用量当たり０．５〜１０ｇ、好ましくは１用量当たり２〜５ｇの範囲の量のグルタミン、を含むことを特徴とする、医薬用又は食餌用組成物。２．グルタミンが、グルタミン含有ポリペプチドにより置換されている、請求項１記載の組成物。３．組成物が、更に、０．５〜１０ｇ、好ましくは２〜５ｇの量のＬ−アルギニンを含むことを特徴とする、請求項１又は２記載の組成物。４．組成物が、更に、０〜１０ｇの範囲の量のショ糖、ブドウ糖若しくはデンプンのような単純若しくは複合炭水化物、又は医薬製剤技術において通常使用される他の任意の安定剤を含むことを特徴とする、請求項１〜３記載の組成物。５．組成物が、更に、０．５〜１０ｇの量の動物又は植物由来の抽出物の混合物を含むことを特徴とする、請求項１又は２記載の組成物。６．少なくとも１つの成分が、凍結乾燥されている、請求項１〜５記載の組成物。７．安定剤が、凍結乾燥の前又は後に加えられる、請求項６記載の組成物。８．該安定剤が、グルタミン、グルタミン含有ポリペプチド、アミノ酸、アスコルビン酸、トレハロース及びデンプンを含む炭水化物から選択される、請求項７記載の組成物。９．該細菌が、凍結乾燥される、請求項１〜５記載の組成物。１０．安定化されているか又はされていない、該凍結乾燥された細菌が、他の成分を含む顆粒と混合される、請求項９記載の組成物。１１．凍結乾燥された細菌が、他の化合物とは別個に包装され、２つの包装が医薬製剤の用量を構成する、請求項９記載の組成物。１２．該細菌が、乳酸菌である、請求項１記載の組成物。１３．該細菌が、乳酸桿菌である、請求項１２記載の組成物。１４．該細菌が、腸粘膜に付着することができる乳酸桿菌である、請求項１２記載の組成物。１５．該乳酸桿菌が、健常人の胃腸管から単離される、請求項１３記載の組成物。１６．該乳酸桿菌が、ＣＮＣＭＩ−１３９０株、ＣＮＣＭＩ−１３９１株、ＣＮＣＭＩ−１３９２株、ＣＮＣＭＩ−１４４７株、ＡＴＣＣ５３１０３株の１つに属する、請求項１３記載の組成物。１７．該細菌が、病原菌に対して殺菌性又は静菌性の作用を示す、請求項１記載の組成物。１８．該細菌が、Enterococcus faeciumＳＦ６８である、請求項１記載の組成物。１９．該細菌が、その本来持っている耐性により選択されたか、又は１つ以上の抗生物質に対して耐性になるように突然変異させられたか若しくは遺伝子操作されている、請求項１記載の組成物。２０．胃腸障害の予防及び／又は治療のための医薬用又は食餌用組成物の調製のための、グルタミン又はグルタミン含有ポリペプチドと組合せた腸内良性細菌の用途。