JPH11506763A

JPH11506763A - ニューモシスティス・カリニ肺炎の抑制方法及びそのために有効な化合物

Info

Publication number: JPH11506763A
Application number: JP9501062A
Authority: JP
Inventors: ティドウェル，リチャード・アール; ホール，ジェイムズ・イー; ボイキン，デイヴィッド・ダブリュー
Original assignee: ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・ノース・キャロライナ・アト・チャペル・ヒル; ジョージア・ステイト・ユニヴァーシティ・リサーチ・ファンデイション，インコーポレイテッド
Priority date: 1995-06-07
Filing date: 1996-06-03
Publication date: 1999-06-15
Also published as: US5668167A; WO1996040114A1; EP0831813A1; ATE287263T1; EP0831813B1; AU6148696A; DE69634200T2; US5668166A; EP0831813A4; DE69634200D1; ES2236734T3

Abstract

(57)【要約】本発明は、ニューモシスティス・カリニ肺炎の治療方法を提供する。この方法は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容可能なその塩を患者に投与することを含んでなり、式（Ｉ）中、Ｘは、パラまたはメタ位置にあり、低級アルキル、低級アルコキシ、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリール、アルキルアリール、ハロゲンまたは（ａ）（ここで、各Ｒ₂は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールからなる群から独立に選択されるか、または２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂〜Ｃ₁₀アルキレンを表すか、あるいは、２つのＲ₂基が、一緒になって（ｂ）（ここで、ｍは、１〜３であり、Ｒ₄は、Ｈ、（ｃ）または−ＣＯＮＨＲ₅ＮＲ₆Ｒ₇（ここで、Ｒ₅は、低級アルキルであり、Ｒ₆およびＲ₇は、Ｈおよび低級アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択され、各Ｒ₈は、Ｈ、低級アルキル、アルコシキアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールからなる群から独立に選択されるか、または、２つのＲ₈基が一緒になってＣ₂〜Ｃ₁₀アルキレンを表し、Ｒ₉は、Ｈ、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールであり）であり）を表し、Ｒ₃は、Ｈ、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールである）であり、、Ｒ₁は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリール、アルキルアリールまたはハロゲンである。

Description

【発明の詳細な説明】ニューモシスティス・カリニ肺炎の抑制方法及びそのために有効な化合物本発明は、国立衛生研究所からの承認番号5-U01-A133363-03の下に政府の支持の下に行われた。政府は、この発明に一定の権利を有する。発明の分野本発明は、ニューモシステイス・カリニ肺炎(Pneumocystis carinii pneumoni a)の治療に有効な方法及びそのために有効な化合物に関する。発明の背景ペンタミジンは、ニューモシスティス・カリニ肺炎(Pneumocystis carinii pn eumonia)すなわち「ＰＣＰ」の治療に使用されている。ペンタミジンの重要性は、ＰＣＰにかかった患者の顕著な増加により最近劇的に上昇してきた。罹患した患者人口の増加は、増加しつつある後天性免疫不全症候群（「エイズ(AIDS)」）の不幸なる結果である。エイズ患者のほぼ７０％がＰＣＰにかかっていると現在推測される。エイズ患者のＰＣＰの高い罹病率のために、ペンタミジンは、ＰＣＰの治療でばかりでなく、特にエイズ患者のＰＣＰの初期徴候または再発防止処置、又は、それらを遅延させる予防処置としての用途を見いだされている。現在、ペンタミジンは、静脈注入による治療薬としてまたエアロゾール投与による予防薬として最も普通に投与されている。しかしながら、不運にも、ペンタミジンの副作用は、その毒性にある。ペンタミジンで治療された患者のなかには、ひどい低血圧症、低血糖症および心臓不整脈により死亡した患者もいる。反対に、投与が不十分であると、肺を越えて病気が広がってしまうことも起こりうる。これは、予後が悪いことと関係がある。ペンタミジンは、費用と毒性とから、現在、使用が限定されている。治療的薬剤モニターリングが、使用されていないのは、高性能液体クロマトグラフィー分析および血漿の抽出を必要とする現在得られる検定技術の複雑さと費用とのためである。結果として、ペンタミジンの毒性は、有意的な関心事であるため、ペンタミジンの利用にまつわる望ましくない副作用を避けうるか最小としうるペンタミジン代替え品の開発が市場に望まれている。従って、本発明の目的は、Ｐ．カリニ肺炎の治療に有用な新規化合物を提供することである。発明の概要第１の態様として、本発明は、Ｐ．カリニ肺炎の治療方法を提供する。該治療方法は、そのような治療を必要とする患者に、Ｐ．カリニ肺炎の治療に有効な量の式Ｉの化合物または薬学的に許容可能なその塩を投与することを含む。式中、Ｘは、パラまたはメタ位置にあり、低級アルキル、低級アルコキシ、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリール(aryl)、アルキルアリール、ハロゲンまたは（ここで、それぞれのＲ₂は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールからなる群から独立に選択されるか、または２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂〜Ｃ₁₀アルキレンを表すか、あるいは、２つのＲ₂ 基が、一緒になって（ここで、ｍは、１〜３であり、Ｒ₄は、Ｈ、（ここで、各Ｒ₈は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールからなる群から独立に選択されるか、または、２つのＲ₈ 基が一緒になってＣ₂〜Ｃ₁₀アルキレンを表し、Ｒ₉は、Ｈ、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールを表す）、または、−ＣＯＮＨＲ₅ＮＲ₆Ｒ₇（Ｒ₅は、低級アルキルであり、Ｒ₆およびＲ₇ は、Ｈおよび低級アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択される）を表す）、Ｒ₃は、Ｈ、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールである）、Ｒ₁は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリール、アルキルアリールまたはハロゲンである。第２の態様として、本発明は、Ｐ．カリニ肺炎の治療に有用な化合物を提供する。該化合物は、上記の構造式（Ｉ）を有する。式Ｉの通常好ましい化合物には、２，７−ジアミジノカルバゾール二塩酸塩、３，６−ジイソプロピルアミジノカルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス（２−イミダゾリニル）−９−メチルカルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス〔１，４，５，６−テトラヒドロピリミジニル）〕−９−メチルカルバゾール二塩酸塩およびこれらの薬学的に許容可能な塩があるが、これらに限定されるものではない。第３の態様として、本発明は、処置を必要とする患者のクリプトコッカス・ネオフォーマンス(Cryptococcus neoformans)の処置方法を提供する。該方法は、そのような処置を必要とする患者に、Ｃ．ネオフォーマンスの処置に有効な量の上記式Ｉの化合物を投与することを含む。Ｃ．ネオフォーマンスの処置に有用な新規化合物も開示してある。第４の態様として、本発明は、クリプトスポリジウム・パーバム(Cryptospori dium parvum)の処置を必要とする患者のクリプトスポリジウム・パーバムの処置方法を提供する。該方法は、そのような処置を必要とする患者に、Ｃ．パーバムの処置に有効な量の上記式Ｉの化合物を投与することを含む。Ｃ．パーバムの処置に有用な新規化合物も開示してある。第５の態様として、本発明は、カンジダ・アルビカンス(Candida albicans)の処置を必要とする患者のカンジダ・アルビカンスの処置方法を提供する。該方法は、そのような処置を必要とする患者に、Ｃ．アルビカンスの処置に有効な量の上記式Ｉの化合物を投与することを含む。Ｃ．アルビカンスの処置に有用な新規化合物も開示してある。本発明の上記の目的、他の目的および態様は、以下の明細書に詳細に説明する。発明の詳細な説明本明細書において使用される、用語「低級アルキル」とは、Ｃ１〜Ｃ４の直鎖のまたは分岐したアルキル、たとえば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルを指す。メチルが通常は好ましい。本明細書において使用される、用語「シクロアルキル」は、Ｃ３〜Ｃ６の環状アルキル、たとえば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを指す。シクロヘキシルが通常は好ましい。本明細書において使用される、用語「アリール(aryl)」は、Ｃ３〜Ｃ１０の環状芳香族基、たとえば、フェニル、ナフチルなどを指し、置換アリール基たとえばトリルも含む。本明細書において使用される、用語「ヒドロキシアルキル」は、Ｃ１〜Ｃ４の直鎖のまたは分岐したヒドロキシ置換アルキルを指し、すなわち−ＣＨ₂ＯＨ、− （ＣＨ₂）₂ＯＨ等を指す。本明細書において使用される、用語「アミノアルキル」は、Ｃ１〜Ｃ４の直鎖のまたは分岐したアミノ置換アルキルを指し、本明細書において用語「アミノ」とは、基ＮＲ’Ｒ”（Ｒ’およびＲ”は、Ｈまたは上記に定義したような低級アルキルなどから独立に選択される）を指し、すなわち− ＮＨ₂、−ＮＨＣＨ₃、−Ｎ（ＣＨ₃）₂などである。本明細書において使用される、用語「オキシアルキル」は、Ｃ１〜Ｃ４の酸素置換アルキル、すなわち、−ＯＣＨ₃を指し、本明細書において使用される、用語「オキシアリール」は、Ｃ３〜Ｃ１０の酸素置換環状芳香族基を指す。上記したように、本発明の方法は、Ｐ．カリニ肺炎およびＣ．ネオフォーマンス、Ｃ．パーバムおよびＣ．アルビカンスにより起こされる感染を処置するのに有用である。本発明の方法は、該方法が、その状態の開始、発展あるいは広がりを抑制し、その状態の後退を起こさせ、その状態を治癒し、あるいは、その状態に罹患した患者、または罹患する危険のある患者の全体的健康を向上させるという点で、これらの状態を治療するのに有用である。本発明の方法により治療される患者は、典型的には、ヒト患者であるが、本発明の方法は、当業者に公知の任意の適当な被検対象に有用であり得る。上記したように、本発明は、下記により詳細に論じるようなエアロゾール投与、経口投与および非経口投与用の薬学的に許容可能な担体中に、式Ｉの上記の化合物または薬学的に許容可能なその塩を含む医薬製剤を提供する。本発明は、また、凍結乾燥された新規化合物またはその塩を提供する。その新規化合物又はその塩は、再構成して、静脈内注入または筋肉内注入により投与するための薬学的に許容可能な製剤としてもよい。いずれの特定の化合物の使用は、本発明の範囲であり、その治療有効投与量は、化合物毎に、患者毎にいくぶん異なり、また、患者の状態と投与方法とに依存しうる。通常の提案として、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇの投与量が、治療効果を有し、さらに高い投与量が、経口および／またはエアロゾール投与におそらく使用される。より高いレベルでの毒性の懸念は、約１０ｍｇ／ｋｇまでのような低いレベルまで静脈内投与量を制限するであろう（すべての重量は、塩が用いられる場合を含めて活性ベースの重量に基づき計算する）。典型的には、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの投与量が、静脈内および筋肉内投与に使用されるであろう。約１０ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇの投与量が、経口投与に使用されるであろう。治療の期間は、通常、２〜３週間にわたり１日１回とするか、Ｐ．カリニ肺炎が、実質的に制御されるまで、１日１回である。より低い投与量を頻度を下げて投与することは、感染の再発を防止又は減少させるために使用されてもよい。本発明によれば、式Ｉの化合物または薬学的に許容可能なその塩が、固体として経口的に投与されるかまたは吸入により投与されてよく、あるいは、溶液として、懸濁物としてまたはエマルジョンとして静脈内投与または筋肉内投与されてもよい。別法として、化合物または塩は、リポソーム懸濁物として吸入により投与されても、静脈内投与または筋肉内投与されてもよい。吸入により投与されるとき、化合物または塩は、約０．５〜約５ミクロン、好ましくは、約１〜約２ミクロンの粒子の大きさをもった多数の固体粒子または小滴の形態であるべきである。Ｐ．カリニ肺炎を治療する方法を提供する他に、式Ｉの化合物は、また、Ｐ．カリニ肺炎の少なくとも１回の症状の発現を経験しているが、治療時に肺炎の徴候を示さない、エイズ患者のように免疫力の低下した患者について、Ｐ．カリニ肺炎の予防の方法を提供する。Ｐ．カリニ肺炎は、免疫低下した患者にとって特に潜在的に壊滅的な病気であるので、Ｐ．カリニ肺炎が、症状を示した後に病気を治療するよりも、Ｐ．カリニ肺炎の発病を避けることが好ましい。従って、本発明は、予防有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容可能なその塩を患者に投与することを含むＰ．カリニ肺炎を予防する方法を提供する。この方法に従う化合物または塩の投与の形態は、Ｐ．カリニ肺炎患者を実際に治療する目的で使用されるのと同じであってもよい。本発明の追加の有用な態様は、Ｐ．カリニ肺炎の病状の発現を経験していない免疫低下した患者における、Ｐ．カリニ肺炎の初期の病状発現に対しても予防する方法である。この点について、Ｐ．カリニ肺炎の初期症状の発病前でも、免疫低下したと診断された患者、たとえば、エイズまたはＡＲＣ（AIDS related com plex; エイズ関連コンプレックス）を患っている人は、予防有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容可能なその塩を投与されることにより感染するのを避けるか、または、遅らせることができるであろう。化合物または塩は、Ｐ．カリニ肺炎患者の治療と同じように投与されてもよい。本発明は、また、静脈内または筋肉内注入に適する医薬組成物を提供する。医薬組成物は、薬学的に許容可能な任意の担体中に式Ｉの化合物または薬学的に許容可能なその塩を含んでなる。溶液が望ましいなら、水可溶性の化合物または塩について、水が担体に選ばれる。水不溶性の化合物または塩に関して、有機ビヒクルが適当であり、たとえば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールまたはそれらの混合物が適当である。後者の場合、有機ビヒクルは、かなりの量の水を含んでいてもよい。いずれの場合も、溶液は、適当な方法で、好ましくは、０．２２ミクロンのフィルターを通す濾過により滅菌されてもよい。滅菌の後、溶液は、適当な容器、たとえば、発熱物質が除かれたガラスバイアルに充填してもよい。当然、充填は、無菌法により行われるべきである。滅菌済のクロージャーをバイアルにつけ、また、所望なら、バイアルの内容物を凍結乾燥する。式Ｉの化合物またはその塩に加え、医薬組成物は、他の添加剤、たとえば、ｐＨ調節添加剤を含んでいてもよい。特に、有用なｐＨ調節剤には、塩酸のような酸、塩基、または緩衝剤たとえば乳酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、燐酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ほう酸ナトリウムまたはグルコン酸ナトリウムがある。さらに、組成物は、微生物防止剤を含んでいてもよい。有用な微生物防止剤には、メチルパラベン、プロピルパラベンおよびベンジルアルコールがある。微生物防止剤は、製剤を、多投与利用(multidose use)用に設計されたバイアルにいれるときに、典型的に使用される。示されているように、当然、本発明の医薬組成物は、本分野で周知の技術を用いて凍結乾燥されてもよい。本発明のさらにもう１つの態様では、密封容器に入れたユニット投与形態の式Ｉの化合物またはその塩を含む注入可能で、安定な滅菌組成物が提供される。該化合物または塩は、適当な薬学的に許容可能な担体により再構成して、人への注入に適する液体組成物の形態とすることができる凍結乾燥体の形態で提供される。ユニット投与形態は、典型的には、化合物またはその塩約１０ｍｇ〜約１０ｇを含む。化合物またはその塩が、実質的に水不溶性であるなら、生理学的に受け入れられる十分な量の乳化剤を、水性担体中に化合物または塩を乳化するに十分な量で用いてもよい。１つのそのような乳化剤は、フォスファチジルコリンである。他の医薬組成物、たとえば、水性ベースエマルジョンを、式Ｉの水不溶性化合物またはその塩からつくることもできる。そのような場合、組成物は、所望の量の式Ｉの化合物または塩を乳化させるように、十分な量の薬学的に許容可能な乳化剤を含むことになる。特に有用な乳化剤には、フォスファチジルコリンおよびレシチンがある。さらに、本発明は、式Ｉの化合物およびその塩のリポソーム製剤を提供する。リポソーム懸濁物をつくる技術は、本分野で周知である。式Ｉの化合物またはその塩が、水性の可溶性塩であるなら、慣用のリポソーム技術を用いて、式Ｉの化合物またはその塩を、脂質小胞に組み入れるようにしてもよい。そのような場合、化合物または塩の水可溶性に起因して、化合物または塩は、リポソームの親水性の中心すなわち芯内に実質的に収まることになる。使用される脂質層は、慣用の組成であってよく、また、コレステロールを含んでもよく、あるいはコレステロールを含まなくてもよい。問題の化合物または塩が、水不溶性であるなら、その場合も、慣用のリポソーム形成技術を用いて、塩が、リポソームの構造を形成する疎水性の脂質二重層内に実質的にいれられることになる。いずれの場合も、生成されるリポソームは、標準的な超音波処理技術および均質化技術の使用により、大きさが減少されてもよい。当然、式Ｉまたはその塩を含むリポソーム製剤は、凍結乾燥されてもよく、リポソーム懸濁物を再生できるように水のような薬学的に許容可能な担体により再構成される凍結乾燥体をつくるようにしてもよい。吸入によりエアロゾールとして投与するのに適する医薬製剤も、提供される。これらの製剤は、式Ｉの所望の化合物若しくはその塩の溶液若しくは懸濁物、または、該化合物または塩の多数の固体の粒子を含んでなる。所望の製剤は、小さなチャンバーに入れられ、霧状にすることができる。霧状化は、圧縮空気によりまたは超音波エネルギーにより達成され、化合物または塩からなる多数の液体の小滴または固体の粒子を形成する。液体の小滴または固体の粒子は、約０．５〜約５ミクロンの範囲の粒子の大きさを有すべきである。固体粒子は、式Ｉの固体化合物またはその塩を本分野で公知の適当な方法で処理することにより、たとえば、超微粉砕により得ることができる。最も好ましくは、固体の粒子または小滴の大きさは、約１〜約２ミクロンであろう。この点に関し、この目的を達成するための商業的霧作成機が入手可能である。好ましくは、エアロゾールとして投与するのに適する医薬製剤が、液体の形態であるなら、製剤は、水を含む担体中に式Ｉの水溶性化合物またはその塩を含むであろう。製剤の表面張力を十分に下げる界面活性剤を存在させて、霧状化させたとき所望の大きさの範囲の小滴を形成するようにしてもよい。示されているように、本発明は、水溶性および水不溶性の両方の化合物および塩を提供する。本明細書で使用されるように、用語「水溶性」とは、約５０ｍｇ／ｍＬまたはそれ以上の量で水に溶解する組成物を定義することを意味する。本明細書で使用されている用語「水不溶性」とは、水への溶解性が約２０ｍｇ／ｍＬより低い組成物を定義することを意味する。ある適用では、水溶性の化合物または塩が望ましく、他の適用では、水不溶性の化合物または塩が同様に望ましいであろう。上記の式Ｉの例示的化合物としては、次のものがあるが、これらに限定されるものではない（１）３，６−ジアミジノカルバゾール二塩酸塩（２）３，６−ジイソプロピルアミジノカルバゾール二塩酸塩（３）３，６−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩（４）３，６−ビス（２−イミダゾリニル）−９−メチルカルバゾール二塩酸塩（５）９−シクロヘキシルメチル−３，６−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩（６）３，６−ビス〔２−（１，４，５，６−テトラヒドロピリミジニル）〕−９−メチルカルバゾール二塩酸塩（７）３，６−ビス〔２−（１，４，５，６−テトラヒドロピリミジニル）〕−９−シクロヘキシルメチルカルバゾール二塩酸塩（８）３，６−ビス〔２−イミダゾリニル）−２−ベンズイミダゾイル〕カルバゾール四塩酸塩（９）２，７−ジアミジノカルバゾール二塩酸塩（１０）２，７−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩本発明を実施するのに用いる化合物は、特に下記の開示と例とに照らし、当業者に公知の技術に従い製造されよう。示されているように、本発明に使用される化合物は、薬学的に許容可能な塩として存在してもよい。そのような塩には、グルコン酸塩、乳酸塩、酢酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、燐酸塩、ほう酸塩、硝酸塩、硫酸塩および塩酸塩がある。本発明の塩は、通常は、２当量のピリミジン塩基化合物を所望の酸と溶液中で反応させることにより、製造され得る。反応が完了した後、その塩が不溶性である溶剤を適当量添加することにより、塩が溶液から結晶化される。上記式Ｉの化合物による治療方法は、実質的に、上記に示したのと同じようにして実施され、微生物撲滅のための式Ｉの化合物の医薬製剤は、実質的に、上記に示したのと同じようにして調整される。上記式Ｉの化合物によりＣ．ネオフォーマンス、Ｃ．パーバムおよびＣ．アルビカンスを撲滅する方法は、実質的に、上記に示したのと同じようにして実施され、Ｃ．ネオフォーマンス、Ｃ．パーバムおよびＣ．アルビカンスを撲滅するための式Ｉの化合物の医薬組成物は、実質的に、上記に示したのと同じようにして調整する。上記したように、本発明の化合物は、本分野で公知の方法に従って製造できる。たとえば、上記式Ｉの化合物は、適当な中間体たとえば２，４−ビス（４−ブロモフェニル）ピリジミジンを先ず調整することにより製造され得る。中間体は、R．Wagner，et al.，Chem．Ber．104: 2975(1971)の方法に従い、４−ブロモベンズアミジンと１−ジメチルアミノ−３−ジメチルイモニオ−１−（４−ブロモフェニル）−１−プロペンとの塩基促進した縮合により調整される。ビス−ニトリルは、このようにして得られた中間体を還流ＤＭＳ中でシアン化銅（Ｉ）と反応させることにより標準的技術に従い容易に得られる。J．Spychala et al.， European J．Med．Chem．29:363(1994)を参照。ビス−ニトリルは、B．Das et a l.，J．Med．Chem．20:1219(1977)に従い、Pinner法によりイミデートエステルに変換される。式Ｉの化合物は、公知の技術によりイミデートエステルから得られる。上記のDas et al.を参照。下記の図解１が、式Ｉの化合物を製造する上記の手順を概説する。以下の例は、本発明を説明するためにあるもので、本発明を制限するものと解釈されるべきではない。これらの例では、ｍＭは、ミリモルを意味し、ｍＬは、ミリリットルを意味し、ｍｍは、ミリメートルを意味し、ｃｍは、センチメートルを意味し、℃は、摂氏の度を意味し、ｇは、グラムを意味し、ｋｇは、キログラムを意味し、ｍ．ｐ．は、融点を意味し、ＭＨｚは、メガヘルツを意味し、Ｍは、モルを意味し、ｈは、時間を意味し、ｅＶは、電子ボルトを意味し、ｍＡは、ミリアンペアを意味し、ＩＲは、赤外線を意味し、ＦＴＩＲは、フーリエ変換赤外線を意味し、ＮＭＲは、核磁気共鳴を意味し、ＦＡＢは、高速電子衝突を意味し、ＥＩＭＳは、電子衝突イオン化質量分光測光を意味し、ＤＭＦは、ジメチルホルムアミドを意味し、ＥｔＯＨは、エチルアルコールを意味し、ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドを意味し、ＴＬＣは、薄層クロマトグラフィーを意味し、ＨＰＬＣは、高速液体クロマトグラフィーを意味し、ＵＶは、紫外線を意味し、ｓａｔは、飽和されていることを意味し、ｄｅｃは、分解点を意味する。以下の例では、未補正の融点は、トーマスフーバー毛管融点装置(Thomas Hoov er capillary melting point apparatus)またはMelt-Temp II装置により測定した。ＩＲスペクトルは、Perkin-Elmer1320またはMichelson100 FTIR(Bomen,Inc) 分光光度計によりヌジョールマル(Nujol mull)またはＫＢｒペレットで記録した。¹ＨＮＭＲおよび¹³ＣＮＭＲスペクトルは、Jeol GX-270、Bruker 300、Va rian Gemini 300およびXL400分光計で記録した。化学シフトは、テトラメチルシランまたは３−（トリメチルシリル）プロピオン酸ナトリウムに関連して１００万分率で表した。無水エタノールは、使用直前にＭｇを用い蒸留した。反応生成物は、７７℃または１１０℃、０．２ｍｍＨｇでＰ₂Ｏ₅を用いて乾燥させた。特にことわらない限り、反応は、シリカによるＴＬＣによりまたは逆相ＨＰＬＣによりモニターした。ＨＰＬＣクロマトグラムは、Dupont Zorbax Rx C8カラム(4. 6mm×25cm)とＵＶ検出(230nm)を用いて、Hewlett-Packard 1090クロマトグラフにより記録した。移動相は、１０ｍＭのテトラメチルアンモニウムクロリド、１０ｍＭのナトリウムヘプタンスルホネートおよび２．２ｍＭの燐酸を含む水に溶解したアセトニトリル（５〜６７．５％ｖ／ｖ）の混合物から構成した。クロマトグラフデータは、Hewlett-Packard 3396積分器を用いて記録し分析した。電子衝撃質量スペクトルは、VG 70-SE、VG 70-SEQハイブリッドまたはJMS O-100二重焦点分光光度計で記録した。ＦＡＢ質量スペクトルは、VG 70-SEQハイブリッド分光光度計（セシウムイオンガン、３０ＫＶ）で記録した。微量分析は、Atla ntic Microlab(Norcross，GA)により行われた。例１〜９では、次の化合物名を全体を通じて用いた。化合物番号名称１３，６−ジアミジノカルバゾール二塩酸塩２３，６−ジイソプロピルアミジノカルバゾール二塩酸塩３３，６−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩４３，６−ビス（２−イミダゾリニル）−９−メチルカルバゾール二塩酸塩５９−シクロヘキシルメチル−３，６−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩６３，６−ビス〔２−（１，４，５，６−テトラヒドロピリミジニル）〕−９−メチルカルバゾール二塩酸塩７３，６−ビス〔２−（１，４，５，６−テトラヒドロピリミジニル）〕−９−シクロヘキシルメチルカルバゾール二塩酸塩８３，６−ビス〔２−イミダゾリニル）−２−ベンズイミダゾイル〕カルバゾール四塩酸塩９２，７−ジアミジノカルバゾール二塩酸塩１０２，７−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩１１３，６−ジブロモカルバゾール１２３，６−ジブロモ−９−（メチル）カルバゾール１３３，６−ジブロモ−９−（シクロヘキシルメチル）カルバゾール１４３，６−ジシアノカルバゾール１５３，６−ジシアノ−９−（メチル）カルバゾール１６３，６−ジシアノ−９−（シクロヘキシルメチル）カルバゾール１７３，６−ジホルミルカルバゾール１８４−（２−イミダゾリニル）−１，２−フェニレンジアミン塩酸塩１９２，５−ジブロモニトロベンゼン２０２，２’−ジニトロ−４，４’−ジブロモビフェニル２１３，８−ジブロモベンゾ〔ｃ〕シンノリン２２２，２’−ジアミノ−４，４’−ジブロモビフェニル２３２，７−ジブロモカルバゾール２４２，７−ジシアノカルバゾール例１新規化合物１の合成新規化合物１〜８の合成と化学構造を図解１に示す。３．０ｍＬ（５１．２ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨと１５０ｍＬの乾燥１，４− ジオキサン中に、２．４８ｇ（１１．４ｍｍｏｌ）の３，６−ジブロモカルバゾールを含む攪拌した懸濁物を、氷−塩浴で冷却し、次に、反応温度が５℃未満に保たれるような速度でＨＣｌガスを飽和させる。次に、フラスコをしっかりと密封し、ＩＲ分析により少量のニトリルバンド（２２００ｃｍ^-1）のみが検出されるまで、この混合物を２１日間室温で保つ。反応混合物は、Ｎ₂ガスでパージしてから、エーテル（２００ｍＬ）で希釈する。粗ジイミデートをＮ₂の下で濾過し、直ちに、１００ｍＬの無水エタノール中に懸濁させる。懸濁物は、１００ｍＬのエタノール中に３．９７ｇのＮＨ₃（２３３ｍｍｏｌ）を含む溶液で希釈する。得られる溶液を、しっかり栓をしたフラスコ中で３５〜５０℃で一晩攪拌する。反応混合物をセライト５４５を用いて濾過してから、蒸発させる。残留物を熱湯とエタノールとの混合物中に溶解させ、濾過後、アセトンで希釈して沈殿を得る。沈殿物を集め、水−アセトンから数回にわたり再結晶させ０．３９３ｇ（１０．６％）の白色の結晶を得る。得られるスペクトルデータと分析データは、次のようである：m.p.〉360℃，¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)d12.61(br s，1 H)，9 .44(br s，4 H)，9.16(br s，4 H)，8.82(d,J=1.2Hz，2 H)，7.99(dd，J=8.6および1.2Hz，2 H)，7.79(d,J=8.6 Hz，2 H); FAB-MS m/z 252(遊離塩基のMH⁺)。分析(C₁₄H₁₃N₅・2HCl・H₂O)C，H，N 例２新規化合物２の合成３．０ｍＬ（５１．４ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨと１３０ｍＬのジオキサン中に１．６４５ｇ（７．５９ｍｍｏｌ）の３，６−ジシアノカルバゾール（図１の化合物１４）を含む攪拌した懸濁物に、上記したようにＨＣｌガスを飽和させる。１７日後に、粗ジイミデートを集め、３０ｍＬの無水エタノールと１５ｍＬのイソプロピルアミンに懸濁させる。混合物を４．５時間窒素の下で還流してから、さらにエタノールとイソロピルアミン（それぞれ１０ｍＬ）を加えた。この混合物を全部で２０．５時間還流する。溶剤をロータリーエバポレーターで蒸発させて油状の残留物を得、アルカリ性とし、次に酸性とし、多重蒸発により固体を得る。この物質をエタノール−水−アセトンから数回再結晶させて白色粉体０．３６８ｇ（１１．７％）を得る。得られるスペクトルと分析データを次に示す： m.p.317〜318℃;¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)d 12.59(br s，1 H)，9.61(br s，2 H ), 9.49(br s，2 H)，9.11(br s，2 H)，8.70(d，J=1.5Hz，2 H)，7.84(dd，J=8 .6および1.5Hz，2 H)，7.75(d，J=8.6，2 H)，4.14(m，2 H); FAB-MS m/z 336( 遊離塩基のMH⁺)。分析(C₂₀H₂₅N₅・2HCl)C，H，N。例３新規化合物３の合成２．０１ｇ（９．２７ｍｍｏｌ）の３，６−ジシアノカルバゾールと８．３６ｇ（６２．９ｍｍｏｌ）のエチレンジアミン二塩酸塩との混合物を、めのう乳鉢で微粉砕してから、砂浴中で３１０〜３２０℃で１５分間加熱する。反応混合物を、１５０ｍＬの沸騰水中にほぼ完全に溶解させる。不溶性の固体をセライト５４５を通して濾過する。濾液を約２５ｍＬまで濃縮し、粗生成物は、７５ｍＬのエタノールによる希釈により沈殿させる。この物質を、エタノールとメタノールとの混合物から、またはエタノールとメタノールとの混合物のエーテル希釈物から、数回再結晶させて淡黄色粉体０．３１０ｇ（８．９％）を得る。得られるスペクトルと分析データは、次のようである:m.p.〉320℃(dec);¹H NMR(300MHz，T FA-d)^d8.44(s，2 H)，7.93(d，J=8.6Hz，2 H)，7.75(d，J=8.6Hz，2 H)，4.26(s ，8 H); FAB-MA m/z 304(遊離塩基のMH⁺)。分析(C₁₈H₁₇N₅・2HCl・0.5H₂O)C，H，N 。例４新規化合物４〜７の合成環状アミジン４〜７を与える６ｍｍｏｌのジシアノ芳香族化合物３，６−ジシアノ−９−（メチル）カルバゾールおよび３，６−ジシアノ−９−（シクロヘキシルメチル）カルバゾール（図１の化合物１５および１６）およびジアミノアルカン（７５ｍｍｏｌの塩基と８０ｍｍｏｌの適当な二塩酸塩）の反応を、３００〜３１０℃（１５〜３０分）で砂浴中で行った。反応をＴＬＣにより完結させたとき、未反応ジニトリルをクロロホルムまたはアセトンにより抽出させる。生成物は、沸騰水から結晶化させる。メチル誘導体の塩酸塩は、シクロヘキシルメチルアミジンよりもさらに水に溶解性である。未変化の物質または分解した物質を濾過により除くことが好ましい。塩基は、２Ｍの水酸化ナトリウム溶液により沈殿させ、次に、エタノール塩化水素を用いて塩酸塩が得られる。分析データとスペクトルデータは、次のようである：化合物（４）：m.p.〉300℃; IR(KBr)3496，3433，3103，2984，1599，1491，14 06，1355，1317，1285cm^-1;¹H NMR(D₂O): d 7.25(d，2 H，J=8.3Hz)，7.16(s，2 H)，6.98(d，2 H，J=8.3Hz)，3.95(s，8 H)，3.30(s，3 H);¹³C NMR(D₂O)d166. 5，145.9，127.9，123.2，122.7，114.1，112.3，47.0，31.8; EIMS(75eV，0.3m A)m/z 317(遊離塩基のM⁺)。分析(C₁₉H₁₉N₅・2HCl・H₂O)C，H，N。化合物（５）：２．１６ｇ（７１％）の白色結晶：m.p.＞300℃，IR(KBr)3096， 2925，2844，1603，1493，1418，1361，1319，1288，1251cm^-1;¹H-NMR(300MHz,D MSO-d₆)d 10.79(br s，4 H)，8.97(s，2 H)，8.19(d，2 H，J=8.8Hz)，8.09(d， 2 H，J=8.8Hz)，4.40(d，2 H，J=7.0Hz)，4.06(s，8 H)，1.93(m，1 H)，1.62(m ，3 H)，1.47(m，2 H)，1.13(m，5 H);¹³C NMR(75MHz，DMSO-d₆)d 166.1，145.0 ，126.7，122.3，121.8，113.3，111.7，50.3，45.4，38.4，31.3，26.6，26.1; EIMS(75eV，0.3mA)m/z 399(遊離塩基のM⁺)。分析(C₂₅H₂₉N₅・2HCl・2H₂O)C，H，N 。化合物（６）：m.p.〉300℃; IR(KBr)3403，3161，3020，1631，1599，1493，14 43，1370，1316，1263cm^-1;¹H-NMR(D₂O)d8.04(s，2 H)，7.56(d，2 H，J=8.3Hz) ，7.31(d，2 H，J=8.3Hz)，3.72(br s 8 H)，3.52(s，3 H)，2.24(br s，4 H);¹ ³ C-NMR(D₂O)d 162.0，146.1，127.0，124.0，121.9，121.1，112.7，42.1，31.8 ，21.0; EIMS(75eV，0.3mA)m/z 345(遊離塩基のM⁺)。分析(C₂₁H₂₃N₅・2HCl・1.75H₂ O)C，H，N。化合物（７）：1.89g(白色の結晶61%，m.p.〉300℃，IR(KBr)3146，3016，2919 ，2849，1631，1598，1445，1375，1320cm^-1;¹H NMR(270MHz，DMSO-d₆)d 10.20( br s，4 H)，8.79(s，2 H)，7.99(d，2 H，J=8.8Hz)，7.85(d，2 H，J=8.8Hz)， 4.37(m，2 H)，3.54(m，8 H)，2.02(m，5 H)，1.65(m，5 H)，1.14(m，5 H);¹³C NMR(67.5MHz，DMSO-d₆)d 159.1，143.6，125.8，121.7，120.7，120.5，110.6 ，48.9，39.2，37.7，30.3，25.8，25.2，18.4; EIMS(75eV，0.3mA)m/z 427(遊離塩基のM⁺)。分析(C₂₇H₃₃N₅・2HCl・H₂O)C，H，N。例５新規化合物８の合成メタノール１００ｍＬ中に、０．２３５４ｇ（１．５０３ｍｍｏｌ）の３，６ −ジホルミルカルバゾール（図１の化合物１７）、０．６３８０ｇ（３．０００ｍｍｏｌ）の４−（２−イミダゾリニル）−１，２−フェニレンジアミン二塩酸塩（図１の化合物１８）および０．３８８２ｇ（３．５９１１ｍｍｏｌ）の１，４−ベンゾキノンを含む混合物を３．５時間還流し、その間空気にさらす。反応混合物を氷で冷却し、沈殿生成物（二塩酸塩として）を濾過する。この物質を３０ｍＬの熱水に溶解させ、四塩酸塩を１５ｍＬの４ＮのＨＣｌ溶液による希釈により沈殿させ、次のスペクトルと分析特性を有する明るい薄黄緑色の粉体０．４８９ｇ（４８．９％）を得る：m.p.〉360℃;¹H NMR(300MHz，TFA-d)d9.25(s，2 H)，8.74(s，2 H)，8.40(d，J=8.3Hz)，8.11(s，4 H)，7.89(d，J=8.3Hz，2 H) ，4.32(s，8 H); FAB-MS m/z 536(遊離塩基MH⁺)。分析(C₃₂H₂₅N₉・4HCl・3.25H₂O) C，H，N。例６新規化合物９および１０の合成２，７−置換化合物９および９の調整と化学構造を図解２に示す。下記の番号を付けた化合物は、図２において対応する番号を示す。化合物９および１０の調整は，先ず２，７−ジブロモカルバゾール（化合物２３）の調整を含む。この化合物の公表された３段階合成は、ビフェニル化合物２０を与える２，５−ジブロモニトロベンゼン（化合物１９）のウルマン反応、ジアミン化合物２２を与える錫／塩酸との２０のニトロ基の反応およびカルバゾール化合物２３を形成するナフィオンＨ(Nafion-H)によりに触媒される脱アミノ閉環を含む。Yamato，T．et al.，J．Org．Chem．56，6248-6250(1991)を参照。還流エタノール中での塩化第１錫二水和物による２０の還元により、文献の値よりも高いほぼ２０℃の融点を有するジアミン２２を最高純度で収率６３％で生じる。この収率は、文献の錫／ＨＣｌ還元からのものより僅かに低い。上記Yama to，et al.を参照。３，８−ジブロモベンゾ〔ｃ〕シンノリン（化合物２１）が、少量生成物として塩化第１錫または錫ＨＣｌ還元により単離される（収率は、それぞれ１７および１３％である）。還流エタノール中でヒドラジン水化物および炭素に担持した５％のルテニウムを用いることによる２０の還元により、２２の量は減少し、２１の量は増加する。この化合物も、水素化アルミニウムリチウムによる２０の還元により調整される。２１のようなベンゾ〔ｃ〕シンノリンも、硫化ナトリウム（Corbett，J．F．et al.，J．Chem．Soc．5029-5037(1961)参照）、ヒドラジン−ラネーニッケル(Barton，J．W．およびD．J．Lapham、 J．C． S．Perkin Trans．Ｉ1503-1505(1979)参照)、亜鉛による硝酸ニッケルの還元により得られる触媒を用いるヒドラジン（Yun，T．H. et al.，J．Chem．Res．Sy nop. 10，336-337(1992)を参照）による２，２’−ジニトロビフェニルの還元により、または、オキシ硫酸チタニウムを用いて電気化学的に（Martre A．-M.，e t al., Can J．Chem．71，1136-1146(1993)を参照）得られる。２１〜２３のナフィオン触媒による環化反応は、２００℃で８５％燐酸を用いて達成される。生成物２３の融点は、文献の値よりも高い約２５℃である。上記 Yamato，et al.を参照。ジニトリル化合物２４を与える還流ＤＭＦ中でのシアン化銅（Ｉ）によるジブロミド２３の反応は、９時間（３，６−位置異性体(3,6-r egioisomer)の７０時間と比較される）後に完了する。ジニトリル２４は、位置異性体１４よりもPinner合成条件に対して、より反応性に富む。２４のジイミデート誘導体の形成は、５日後に完了する。アンモニアとの２４のジイミデート誘導体の反応は、新規ジアミジン化合物９を与える。エチレンジアミン二塩酸塩との２４のニート融合(neat fusion)は、ジイミダゾリン１０を与える。化合物９を得るのには、３．０ｍＬ（５１．１２ｍｍｏｌ）の無水エタノールおよび１００ｍＬの乾燥１，４−ジオキサン中に１．６８ｇ（７．７４ｍｍｏｌ）の２，７−ジシアノカルバゾール（図２の化合物２２）を含む攪拌した懸濁物に、上記化合物１の合成で説明したようにＨＣｌガスで飽和させる。５日間の反応時間の後、粗ジイミデートを集める。１５ｍＬの無水エタノール中にジイミデートを含むようにした懸濁物を、８５ｍＬのエタノールに７．２６ｇのアンモニアを含む溶液で希釈し、栓をしたフラスコ中で４０℃で一晩攪拌する。冷却した反応混合物を１２５ｍＬの冷エーテル中に注ぎ、得られる沈殿を濾過する。この物質を水−エタノール−アセトンから１回、水アセトンから４回再結晶化させて、次に示すスペクトルと分析特性を有する０．４８２０ｇ（１９．２％）の明るい黄色の粉体を得る：m.p.〉360℃(dec);¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)d 12.53(s，1 H), 9.52(s，4H)，9.27(s，4 H)，8.49(d，J=8.8Hz，2 H)，8.08(s，2 H)，7.65(d, J=8.8Hz，2 H); FAB-MS m/z 252(遊離塩基のMH⁺)。分析(C₁₄H₁₃N₅・2HCl)C，H， N。化合物１０を得るには、０．９８８６ｇ（４．５５１１ｍｍｏｌ）の２，７− ジシアノカルバゾール（図２の化合物２２）と３．００ｇ（２２．６ｍｍｏｌ）のエチレンジアミン二塩酸塩との混合物を、めのう乳鉢中で微粉砕し、３２０℃ で３０分間加熱する。冷却した後、反応混合物を１００ｍＬの熱水に溶解させてから、セライト５４５を通して濾過する。濾液を沸騰させて約５ｍＬまで濃縮し、冷却により溶液から固体を沈殿させる。沈殿を集め、メタノールに溶解させ、溶液をノリットＡ(Norit-A)（３ｍｍ層）を通して濾過する。濃縮濾液からエーテルによる希釈により黄色の固体が沈殿し、次に、熱水−ＥｔＯＨ（各２０ｍＬ）からの再結晶により、次の性質を有する黄色の微結晶０．３８７８ｇ（２２．６％）が得られる：m.p.〉360℃;¹H NMR(300MHz，CF₃COOH-d₆)d 8.36(d，J=8.2H z，2 H)，8.19(s，2 H)，7.67(d，J=8.2Hz，2 H)，4.27(s，8 H); FAB-MS m/z 3 04(遊離塩基のMH⁺)。分析(C₁₈H₁₇N₅・2HCl・0.9H₂O)C，H，N。例７ニューモシスティス・カリニに対する新規化合物の活性Ｐ．カリニに対する化合物の活性を、確立された方法に従い行った。Tidwell, R．R.，et al.，J．Med．Chem．33，1252-1257(1990); Jones，S．K.，et al., Antimicrob．Agents Chemother．34，1026-1030(1990); Tedwell R．R.，et al .，Antimicrob．Agents Chemother．37，1713-1716(1993)を参照。Ｐ．カリニ肺炎（ＰＣＰ）の誘導と治療は、公表された方法にほんの僅かな変更を加えて行った。Frenkel et al.，Lab．Invest.15，1559(1966); Hughes W．T.，et al.，An timicrob．Agents Chemother．5，289(1974)を参照。手短に述べると、それぞれ１５０〜２００ｇの重さの雄のSprague-Dawleyラット（障壁を設けられた(barri er raised)、ウイルスを有さないことを証明されていない）を得た(Hilltop Lab oratories，Scottsdale，PA)。到着後直ちに、動物を個々にかごに入れ、低タンパク質（８％）食餌とテトラサイクリン（０．５ｍｇ／ｍＬ）とデキサメサゾン（１．０μ／ｍＬ）を含む飲料水とを開始した。この生活規制を８週間継続させた。第７週の初めに、動物を８匹以上の群に分け、テスト化合物を、毎日一回のＩＶ注入により１４日間投与した。通常、毎日の投与は、体重当たり５ｍｇ／ｋｇとし、塩類溶液０．４ｍＬに溶解させた。塩類溶液処理群およびペンタミジン処理群を、対照として含んだ。動物は、第８週の終わりにクロロホルム吸入により屠殺した。右の肺をin sit uで１０％ホルマリンにより膨張させ、組織検査のために固定した。肺の組織を長軸方向で切り、ＧＭＳ染色を行った。この染色は、Ｐ．カリニ嚢の壁を選択的に特定する。左の肺の重さを測り、Ｎｏ．６０ワイヤーメッシュ篩を通して粉砕し、カチオンを含まない１０ｍＭのβ−メルカプトエタノール−ハンクス液（ＨＢＳＳ）に１：１０（重量／容量）で懸濁させた。スライドは、β−メルカプトエタノールでＨＢＳＳ中に１：１０で希釈した５μＬの肺ホモジネートをスポティングすることにより調整した。スライドは、クレシル紫で染色し、嚢を盲プロトコール(b linded protocol)により計数した。初めの肺組織の１ｇ当たりの嚢の数を計算し、塩類溶液で処理した対照の百分率として報告した。表１に見られるように、テストした新規化合物の大多数は、Ｐ．カリニ肺炎のラットモデルで優れた活性を示した。抗Ｐ．カリニ活性は、未処理の対照に比較した処理済動物について肺組織の１ｇ当たりの嚢の数の減少により測定した。それぞれの化合物についての抗Ｐ．カリニ値は、対照群に比較した処理群の嚢のパーセントとして表す。化合物５、７および８だけが、抗Ｐ．カリニ活性を対照薬剤よりも有意的により効果的であることを示すことはなかった。化合物３は、ペンタミジンに比較して、ログな(log)大きい活性を示した。化合物３は、全てのカルバゾールと同様、ペンタミジンの投与量の半分でテストしたことに注目すべきである。シリーズとして、ここ数年でテストされた抗Ｐ．カリニ薬剤のなかで、最も有効とされる幾つかの抗Ｐ．カリニ薬剤を含む。 Jones,S.K．et al.，Antimicrob．Agents Chemother．34，1026-1030(1990); Ti dwell，R．R．et al.，Pneumocystis carinii（Walzer，p.,ed.; Marcel Decker : New York）p561-583(1993); Tidwell，R．R．et al.，J．Protozool．36，74S -76S(1989); Donkor，I．O．et al.，J．Med．Chem．37，4554-4557(1994); Tid well，R.R．et al.，Antimicrob．Agents Chemother．37，1713-1716(1993)を参照。化合物３は、先にテストした化合物の嚢の最も低いパーセントを与えた。例８ＤＮＡへの新規化合物の結合すでに報告された研究により、ＤＮＡへの２カチオン性分子の結合がその抗微生物活性に対し必要条件であることが確実となっているため、ＤＮＡ結合効果を、化合物のそれぞれについて測定した。たとえば、Tidwell，R．R．et al.，Ant imicrob．Agnets Chemother．37，1713-1716(1993); Bell，C．A．et al.，Anti microb．Agents Chemother．35，1099-1107(1991)を参照。新規化合物のＤＮＡ結合は、実験化合物へ結合したＤＮＡの融解の変化により測定された。この方法は、十分に証拠資料があり、ＤＮＡ結合力を測定する標準的方法と見なされる。 Cory，M．et al.，J．Med．Chem．25，431-438(1992)を参照。手短に述べると、キュベットチェインジャー(cuvette changer)を有するＵＶ−可視光分光光度計は、サンプルを１８℃／ｈの速度で加熱したときの２５９ｎｍでのＤＮＡ−吸光度データとキュベット温度を記録したマイクロコンピューターにインターフェイスした。子ウシ胸線ＤＮＡを、初期吸光度０．３Ａ₂₅₉で用いた。それぞれの変性曲線の中点は、それぞれの実験のそれぞれの曲線についての開始吸光度温度と終わり吸光度温度のコンピューターのグラフ選択の後、決定された。ＤＮＡまたは実験化合物に結合したＤＮＡは、各実験で処理され、ΔＴ_m _Sが、その実験についてのポリヌクレオチドＴ_mから決定された。融点の変化が大きければ大きいほど、分子のＤＮＡ結合は、より効果的である。表１に報告のデータは、ΔＴ_m _S の少なくとも２つの測定の平均を示す。表１は、ＤＮＡ結合の強度が、抗Ｐ．カリニ有効性と相関しないことを示している。しかしながら、強いＤＮＡ結合が、抗微生物活性に対する必要条件であるのに対し、ＤＮＡ結合の強度が、抗微生物作用の程度を必ずしも反映しないことが先に報告されている。Cory，M．et al.，J．Med．Chem．25，431-438(1992); Fairley，T．et al.，J．Med．Chem．36，1846-1753(1993)参照。興味深いことには、化合物８は、Ｐ．カリニ動物モデルで並の活性を示したが、ＤＮＡ結合剤として高度な有効性を示した。抗Ｐ．カリニ活性が劣ることは、このより大きな分子の溶解性が劣ることと分布とに原因があるかもしれない。例９他の日和見性病原体に対する化合物９の活性３つの追加のエイズ関連日和見性病原体に対する化合物９の活性を表２に示す。ラットモデルでのＰ．カリニ感染に対するこの化合物により示される有効性の他に、化合物は、クリプトスポリジウム・パーバム(Cryptosporidium parvum)感染の新生児のマウスモデルでも有効であった。このモデルは、先の報告で詳細に説明されている。Blagburn，B．L.，et al.，Antimicrob．Agents Chemother．3 5, 1520-1523(1991)を参照。Ｃ．バーマムに対する化合物の活性は、未処理の対照に比較した処理マウスの腸に検出される接合子嚢の数の減少により測定される。化合物９は、また、クリプトコッカス・ネオフォーマンス(Cryptococcus neof ormans)およびカンジダ・アルブミンス(Candida albumins)に対してin vitroで高度に活性であった。化合物の活性は、in vitro菌類細胞成長抑制検定の標準を用いて評価された（1992年、the Naional Committee for Clinical Laboratory Standardsにより確認された酵母菌のブロス希釈抗菌類性感受性テスト（提案された標準文書Ｍ２７−Ｐ））．手短に述べると、このブロス希釈手順は、ＰＭＩ培地および培地のみを含む１０４の対照チューブの接種を用いる。上記の手順で最少の阻害濃度を決定した後、成長が視認できないチューブを継代培養して、初めの接種物の０．０１％生存より少ない基準を用いて最少殺菌濃度を測定した。２つの生物体をテストした。（１）Ｈ９９、in vitroおよびin vivoでアゾールおよびポリエンに十分に影響され易いＣ．ネオフォーマンスの臨床単離体、（２）Ａ３９、アゾールおよびポリエンに十分に影響され易いＣ．アルビカンスの臨床単離体。これらの２つの重要なエイズ関連菌類感染に対する化合物９についてのＭＦＣ（最少殺菌濃度）を表２に示す。表２のデータは、このシリーズの化合物が広い範囲の抗菌活性を有する可能性を示す。ＭＦＣ＝最少殺菌投与量。ＭＩＣ＝最少阻害濃度。ＭＩＣ及びＭＦＣは、Ｃ．ネオフォーマンスとＣ．アルビカンスについての測定。ＭＩＣ測定は、ＮＣＣＬＳ提案標準Ｍ２７-Ｐ(1992)に従って行った。最少殺菌濃度（ＭＦＣ）はMcGinnis の方法により測定した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ティドウェル，リチャード・アールアメリカ合衆国、27312 ノース・キャロライナ、ピッツボロ、ダブリュー．アール．クラーク・ロード 390、ルート３ (72)発明者ホール，ジェイムズ・イーアメリカ合衆国、27514 ノース・キャロライナ、チャペル・ヒル、スプリングヴュー・テラス 2440 (72)発明者ボイキン，デイヴィッド・ダブリューアメリカ合衆国、30306 ジョージア、アトランタ、スプリングデイル・ロード−エヌイー 1369 【要約の続き】

Claims

【特許請求の範囲】１．ニューモシスティス・カリニ(Pneumocystis carinii)肺炎の治療を必要とする患者のニューモシスティス・カリニ肺炎に対する治療方法において、ニューモシスティス・カリニ肺炎の治療に有効な量の以下の式Ｉの化合物または薬学的に許容可能なその塩を、該患者に投与することを含んでなる治療方法。式中、Ｘは、パラまたはメタ位置にあり、低級アルキル、低級アルコキシ、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリール(aryl)、アルキルアリール、ハロゲンまたは（ここで、各Ｒ₂は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールからなる群から独立に選択されるか、または２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂〜Ｃ₁₀アルキレンを表すか、あるいは、２つのＲ₂基が、一緒になって（ここで、ｍは、１〜３であり、Ｒ₄は、Ｈ、（ここで、各Ｒ₈は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールからなる群から独立に選択されるか、または、２つのＲ₈ 基が一緒になってＣ₂〜Ｃ₁₀アルキレンを表し、Ｒ₉は、Ｈ、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールを表す）、または、−ＣＯＮＨＲ₅ＮＲ₆Ｒ₇（Ｒ₅は、低級アルキルであり、Ｒ₆およびＲ₇ は、Ｈおよび低級アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択される）を表す）、Ｒ₃は、Ｈ、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールである）、Ｒ₁は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリール、アルキルアリールまたはハロゲンである。２．該患者が、ニューモシスティス・カリニ肺炎に罹っている請求項１に記載の方法。３．該患者が、ニューモシスティス・カリニ肺炎に罹患する危険があり、該化合物が、予防有効量で投与される請求項１に記載の方法。４．Ｘが、パラ位置にある請求項１に記載の方法。５．Ｘが、メタ位置にある請求項１に記載の方法。６．Ｘが、であり、式Ｉの該化合物が、（ａ）Ｒ₁が、Ｈであり、各Ｒ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｂ）Ｒ₁が、Ｈであり、１つのＲ₂が、低級アルキルであり、１つのＲ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｃ）Ｒ₁が、Ｈであり、各Ｒ₂が、低級アルキルであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｄ）Ｒ₁が、Ｈであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｅ）Ｒ₁が、Ｈであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₃アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｆ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、各Ｒ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｇ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、１つのＲ₂が、低級アルキルであり、１つのＲ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｈ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、各Ｒ₂が、低級アルキルであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｉ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｊ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₃アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｋ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、各Ｒ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｌ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、１つのＲ₂が、低級アルキルであり、１つのＲ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｍ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、各Ｒ₂が、低級アルキルであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｎ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｏ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₃アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、化合物からなる群から選択される請求項１に記載の方法。７．式Ｉの該化合物が、３，６−ジアミジノカルバゾール二塩酸塩、３，６− ジイソプロピルアミジノカルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス（２−イミダゾリニル）−９−メチルカルバゾール二塩酸塩、９−シクロヘキシルメチル−３，６−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス〔２−（１，４，５，６−テトラヒドロピリミジニル）〕−９−メチルカルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス〔２−（１，４，５，６−テトラヒドロピリミジニル）〕−９−シクロヘキシルメチルカルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス〔２−イミダゾリニル）−２−ベンズイミダゾイル〕カルバゾール四塩酸塩、２，７−ジアミジノカルバゾール二塩酸塩および２，７−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩からなる群から選択される請求項１に記載の方法。８．下記式Ｉの化合物または薬学的に許容可能なその塩。式中、Ｘは、パラまたはメタ位置にあり、低級アルキル、低級アルコキシ、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリール、アルキルアリール、ハロゲンまたは（ここで、各Ｒ₂は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールからなる群から独立に選択されるか、または２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂〜Ｃ₁₀アルキレンを表すか、あるいは、２つのＲ₂基が、一緒になって（ここで、ｍは、１〜３であり、Ｒ₄は、Ｈ、（ここで、各Ｒ₈は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールからなる群から独立に選択されるか、または、２つのＲ₈ 基が一緒になってＣ₂〜Ｃ₁₀アルキレンを表し、Ｒ₉は、Ｈ、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールを表す）、または、−ＣＯＮＨＲ₅ＮＲ₆Ｒ₇（Ｒ₅は、低級アルキルであり、Ｒ₆およびＲ₇ は、Ｈおよび低級アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択される）を表す）、Ｒ₃は、Ｈ、ヒドロキシ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールである）、Ｒ₁は、Ｈ、低級アルキル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、シクロアルキル、アリール、アルキルアリールまたはハロゲンである。９．Ｘが、であり、式Ｉの該化合物が、（ａ）Ｒ₁が、Ｈであり、各Ｒ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｂ）Ｒ₁が、Ｈであり、１つのＲ₂が、低級アルキルであり、１つのＲ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｃ）Ｒ₁が、Ｈであり、各Ｒ₂が、低級アルキルであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｄ）Ｒ₁が、Ｈであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｅ）Ｒ₁が、Ｈであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₃アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｆ）Ｒ₁が、Ｈであり、２つのＲ₂基が、一緒になってを表し、ここで、Ｒ₄はであり（２つのＲ₈基はＣ₂アルキレンであり、Ｒ₉はＨである）Ｒ₃はＨである、（ｇ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、各Ｒ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｈ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、１つのＲ₂が、低級アルキルであり、１つのＲ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｉ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、各Ｒ₂が、低級アルキルであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｊ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｋ）Ｒ₁が、低級アルキルであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₃アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｌ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、各Ｒ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｍ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、１つのＲ₂が、低級アルキルであり、１つのＲ₂が、Ｈであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｎ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、各Ｒ₂が、低級アルキルであり、Ｒ₃が、Ｈである、（ｏ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₂アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、（ｐ）Ｒ₁が、シクロアルキルであり、２つのＲ₂基が、一緒になってＣ₃アルキレンを表し、Ｒ₃が、Ｈである、化合物からなる群から選択される請求項８に記載の化合物。１０．該化合物が、３，６−ジアミジノカルバゾール二塩酸塩、３，６−ジイソプロピルアミジノカルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス（２−イミダゾリニル）−９−メチルカルバゾール二塩酸塩、９−シクロヘキシルメチル−３，６−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス〔２−（１，４，５，６−テトラヒドロピリミジニル）〕−９−メチルカルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス〔２ −（１，４，５，６−テトラヒドロピリミジニル）〕−９−シクロヘキシルメチルカルバゾール二塩酸塩、３，６−ビス〔２−イミダゾリニル）−２−ベンズイミダゾイル〕カルバゾール四塩酸塩、２，７−ジアミジノカルバゾール二塩酸塩および２，７−ビス（２−イミダゾリニル）カルバゾール二塩酸塩からなる群から選択される請求項８に記載の化合物。