JPH11504028A

JPH11504028A - 油／水エマルジョンを作り出す自己乳化性配合物

Info

Publication number: JPH11504028A
Application number: JP8532202A
Authority: JP
Inventors: ベニタ，サイモン; クレインスターン，ジャッキー; ジェシャニク，タティアナ
Original assignee: イースムリサーチディベロップメントカンパニーオブザヒーブルユニバーシティオブエルサレム
Priority date: 1995-04-24
Filing date: 1995-04-24
Publication date: 1999-04-06
Also published as: AU2449195A; AU692255B2; WO1996033697A1; US5965160A

Abstract

(57)【要約】本発明は、油成分と界面活性剤を含む自己乳化性配合物（SEOF）であって、その油成分が油状媒体とカチオン脂質を、そして場合により親油性油状脂肪アルコールを含むことを特徴とするSEOFに関する。本SEOFを混合することにより作られる油／水エマルジョンは、正電荷をもつ油滴を含む。

Description

【発明の詳細な説明】油／水エマルジョンを作り出す自己乳化性配合物本発明の分野本発明は、自己乳化性の本質的に疎水性の配合物、すなわち、水との混合の間、自発的に崩壊して油／水エマルジョンを形成する配合物、に関する。本発明は、（ｉ）親油性医薬のドラッグ・デリバリー媒体、又は（ii）その後に疎水性医薬のドラッグ・デリバリー媒体として有用な油／水エマルジョンの調製のための前駆体、の両方としてのこのような配合物の医薬としての使用にも関する。本配合物の１の適用は、胃腸（gastro intestinal(GI)）管内に吸収され、そしてその後血液又はリンパ系を介してその標的臓器に達することを意図された医薬の経口投与にある。このような投与形態を、本明細書中“経口全身投与(oral systemic administration)”という。上記の好ましい態様の特別な適用は、フィゾスティグミン(physostigmine)、プロブコール（probucol）、シクロスポリンＡ(cyclosporin A)、モルフィン塩基(morphine base)、ペンクロメジン（penclomedine）、その他の如き医薬の経口全身投与にある。先の従来技術に関する本明細書中の知見は、この技術がいかなる方法においても、本明細書中に定義する本発明の特許性に関する言及に関係することを認めるものと解釈されてはならない。本発明の背景医薬の経口全身投与は、一般に、長期間にわたり繰り返しての医薬の投与を必要とする、外来患者のための処置養生法における好ましい投与モードである。経口全身投与は、水溶性医薬に関してひじょうに有効であるけれども、それは、疎水性医薬又は限定された水溶性をもつ医薬、例えば、フィゾスティグミン塩基（physostigmine base）、イスラジピン（isradipine）、バージニアマイシン（virginiamycine）、シクロスポリンＡ(cyclosporin A) 、モルフィン(morphin)、ブプレノルフィン(buprenorphine)、ナロルフィン（na lorphine）、メトルファン(methorfan)、プロブコール（probucol）、その他に関して、やっかいな投与経路であることが判明している。経口投与された疎水性医薬により達成される僅かな全身的効果は、多数の要因に起因する。１については、疎水性医薬は、水に溶解せず、そして水溶液中で分離相を形成し、そしてこれ故、GI管の壁を通しての吸収のために容易に利用されることができない。さらに、主に、小腸の壁を通して、特に空腸を通して吸収されるいくつかの疎水性医薬は、いわゆる“ファースト・パス効果(first pass ef fect)”、すなわち、その血液系に達する前の、その肝臓内への医薬の通過を、経験することができる。これらの要因の全体的な効果は、ほんの低く、しばしば有効でない量の経口投与された疎水性医薬が、最終的に標的臓器に達するということ、すなわち、経口投与された疎水性医薬が、一般に、低い生物学的利用能をもつということである。これは、その医薬の投与量を増加させることにより克服されることができるが、このような増加は、迷走性の、かつ、可変性の間主観的な吸収に因る、副作用の増加した兆候をもたらす。疎水性医薬の生物学的利用能を増加させるためのさまざまな提案がなされてきた。例えば、溶解された親油性医薬を含むオレイン酸を使用した先の研究は、医薬の生物学的利用能に対する有益な効果を示している(Stella et al，1978，J． Pharm．Sci，67，1375-137 7)。最近、経口投与後のプロプラノールオールの生物学的利用能が、その医薬を、主にオレイン酸を含む脂質配合物に溶解し、そしてそれを、密封され腸溶コートされた硬質ゼラチン・カプセル内に充填することにより、改善されることができることが示された(Barnwell et al，1992，Int．J．Pharmaceutics，88，423- 432)。エマルジョンが、一般に疎水性医薬の経口配合物中の担体として(Pal et al， 1984，J．Int．Pharm，33．99-104; Myers et al，1992，Int．J．Pharm．78，2 17-226)、そして特にフィゾスティグミンの如き医薬のために(Rubinstein et al ，1991，J．Pharm．Res，80，643-647; Friedman et al，1989，Drug Design an d Delivery，4，135-142; Benita et al，1989，Drug Delivery Design，4，143 -153)、提案されてきた。上記医薬を担持するエマルジョンのコロイド粒子は、空腸内に吸収され、そして胸管を通じて主にリンパによりたぶん運搬され、これ故肝臓をバイパスし、そして上記ファースト・パス効果をかなり減少させる。実際、いくつかの親油性医薬の経口による生物学的利用能は、それらの経口全身投与のための媒体としてのエマルジョンを使用していくぶん改良されることができることが示された。しかしながら、多くの場合において、エマルジョン配合物は、水性配合物中でのそれらの投与に対して、疎水性医薬の生物学的利用能における改善を全く提供しなかった。これは、エマルジョン・コロイド粒子の油／水（ｏ／ｗ）界面フィルム内のエマルジョン中に局在化する両親媒性医薬であるフィゾスティグミンの如き医薬に関する場合に、特にそうである。消化管を通してのフィゾスティグミンを含むエマルジョンの通過の間、事実上無限に希釈されるエマルジョンが、その中に含まれた医薬を速やかに放出する。この問題は、エマルジョンのコロイド粒子の安定性を減少させる傾向をもつ胃内のひじょうに強い酸性により、だんだんに増大する。特定の脂質溶液は、それらの成分によって、油／水エマルジョンを作り出す穏やかな撹拌の後に水相中に導入されるとき、自発的な乳化を経験する能力をもつ。このような脂質溶液は、自己乳化性デリバリー・システムと文献中に定義されている(Charman et al，1992，Pharm．Res，9，87-93)。自己乳化性デリバリー・システムは、それらのまさにその性質に依存して、自己乳化性ドラッグ・デリバリー・システムの基礎を作ることができるであろう、中鎖トリグリセリド油及び非イオン界面活性剤を使用して配合されてきた(Pouton，1985a，Int．J．Phar m．27，335-348; Pouton 1985b，Int．J．Pharm．37，1P; Pouton et al，1987 ，Proc．Int．Symp．Control．Rel．Bioacta．Mater, 14，113-117; Wakerly e t al，1986，ACS．Symp．Ser．311，242-255; Wakerly et al，1987，J．Pharm ．Sci，67，1375-1377)。これらの配合物は、正確で、かつ、便利な単位投薬系を作り出すために、軟質ゼラチン・カプセル又は密封された硬質ゼラチン・カプセル内に封入されることができる。小腸における初期の研究は、吸収性細胞の内部は、粘膜溶液に対して負であることを、はっきりと証明した（Csaky，IL(Ed.)，Handbook of Experimental Pha rmacology，Vol 70，Springer-Verloy，Berlin，(1984)，324-325）。GI管のpH 範囲にわたり完全にイオン化しているいくつかの疎水性カチオン医薬は、それらの僅かな水溶性にも拘らず、速く吸収されることも報告されている（Iseky，K， Hirano，T，Fukushi，Y，Kitamura，Y，Miyazaki，S，Takada，M; Sugawara，M ，Saitou，H and Miyazaki，K．(1992)，J．Pharm．Pharmacol，44: 9，722-726 ; Saitou，H，Kawai，S，Iseki，K，Miyazaki，K and Arita，T，(1988)，J．Ph arm．Pharmacol，41，200-202）。その上、いくつかの内因性化合物は、そのNH₂ −末端により内皮表面に結合し、その静電作用の生理学的重要性を示している（21）。溶解された医薬を含む油滴の形成は、その油とその周囲の水相との間の医薬の分配のための大きな界面領域を提供しながら、GI管を通しての医薬の分配を引き起こす。従って、GI管内で僅かに吸収される限定された水溶性をもつ医薬のために、ひじょうに細かく分散された油滴へのその脂質相の自発的崩壊が、吸収の速度及び範囲の両方における改善を提供することができる。今日まで知られた自己乳化性ドラッグ・デリバリー・システムの全てが、中性又は電気的に陰性の電荷をもつ油状滴の形成をもたらす非イオン(例えば、トウィーン（商標）(Tween^R) 、スパン(商標)(Span^R))又はアニオン界面活性剤（例えば、リン脂質）である（ 50％までの）高濃度の界面活性剤を含む。最近の報告(Elbaz et al，1993，Int．J．Pharm．96，R1-R6)において、乳化されたドラッグ・デリバリー・システムであって、そのコロイド粒子が正電荷を担持するものが開示されている。しかしながら、その刊行物中、経口全身ドラッグ・デリバリー媒体としてのこのようなエマルジョンを使用する可能性についての言及は全くない。本発明の目的は、親油性医薬のドラッグ・デリバリー・システムとして有用な自己乳化配合物を提供することである。本発明のさらなる目的は、親油性医薬の全身的経口投与のための新規のドラッグ・デリバリー・システムを提供することである。本発明のさらなる目的は、親油性医薬の新規投与方法を提供することである。本発明のさらなる目的は、自己乳化性油状調製物の使用によるエマルジョンの製法を提供することである。本発明の一般的説明本発明に従って、新規の自己乳化性油状配合物（self-emulsifying oily form ulation(SEOF)）が提供される。本発明の配合物が水性溶液と混合され、そしてその混合物が撹拌されるとき、油／水エマルジョンが形成される。本発明の好ましい態様に従えば、そのように形成された滴は、約 0.2μｍ未満の直径をもつ。本発明に従って得られることができるような小さな滴をもつエマルジョンは、これまで、複雑な装置の使用を含む複雑な均質化手順を使用することによってのみ得られることができた（例えば、Benita et al，1989，Drug Delivery Design，4 ，143-153を参照のこと。）。本発明のSEOFの追加の特徴は、その形成されたエマルジョン中の滴が、正電荷をもち、従来技術のSEOFにより達成された負電荷をもつエマルジョンとは異なるということである。本発明のSEOFは、中鎖トリグリセリド(MCT)油、長鎖トリグリセリド(LCT)油、及び油状脂肪酸誘導体であることができる油状担体を含む。さらに、SEOFは、カチオン脂質をも含む。本発明により、親油性アルコールの添加が、サブミクロン（＜１μｍ）範囲内のエマルジョン滴を得るために要求されることが判明している。本発明のSEOF中に親油性アルコールが含有されることが、これ故に好ましい。従って、本発明は、油成分と界面活性剤を含む自己乳化性油状配合物（SEOF）であって、その油成分が油状担体とカチオン脂質を、そして場合により、親油性アルコールを含み、そのSEOFの混合の間に形成される油／水エマルジョンが、正電荷をもつ油状滴をもつ、ことを特徴とするSEOFを提供する。本発明のSEOFは、疎水性医薬のためのデリバリー媒体として使用されることができる。その中に医薬が溶解されているこのようなデリバリー媒体が体液に接触するとき、それは自発的（自然に）乳化して、その中に医薬が含まれている小さな油状滴を形成する。このような医薬デリバリー媒体の１つの特定の例は、疎水性医薬の経口全身投与を意図されるものである。このような投与のために、溶解された医薬をもつSE OFは、好ましくは、カプセルに包まれる。従って、本発明は、液体担体中に溶解された疎水性医薬の有効量を含む医薬調製物であって、その担体が上記SEOFであることを特徴とするものを提供する。用語“有効量”は、治療効果を発揮するのに有効な医薬投与量を意味すると理解されなければならない。本発明の経口調製物のために、用語“有効量”は、GI 管の壁を通って体中にそれが吸収された後に、標的臓器（器官）に対して治療効果を発揮するのに有効である血中医薬濃度を作り出す、医薬投与量を意味する。本発明は、その調製物が体液と接触する場合に、体内の部位、例えば、GI管、血中等に、疎水性医薬を投与する方法であって、上記SEOFである油状媒体中の医薬を投与することを含む方法をも提供する。本発明のSEOFの他の使用は、特に、サブミクロン範囲内の滴をもつようなエマルジョン（サブミクロン・エマルジョン）の製法におけるものである。特定の態様は、疎水性医薬を含み、そして医薬調製物として使用されることを意図されたエマルジョンの製法におけるものである。従って、本発明は、上記SEOFを水性溶液と混合し、そしてその混合物を撹拌することを含む、エマルジョンの製法を提供する。エマルジョンが疎水性医薬の担体として使用されることを予定される場合、そのSEOFは、その中に上記医薬が溶解されるであろう。本発明の詳細な説明本発明に従って、新規自己乳化性油状配合物が調製されている。このSEOFは、医薬調製物中、疎水性医薬の担体として使用されることができ、又はエマルジョン、特に、サブミクロン・エマルジョンの調製のための前駆体として使用されることができる。本発明のSEOFは、界面活性剤と油成分であってカチオン脂質及び、 MCT、 LCT と油状脂肪酸誘導体の中の少なくとも１を含む油成分を含む。この油成分は、任意成分として油状脂肪アルコールを含む。さらに、この油成分は、以下に特記するように他の成分をも含むことができる。自明であるが、使用される成分の全てが生理学的に適合性でなければならない。 MCTは、その炭水化物鎖が平均約８−12炭素原子をもつようなトリグリセリド油である。 MCT油の例は、その脂肪酸鎖の約95％が８又は10のいずれかの炭素原子をもつトリグリセリドの混合物である TCM^TM（Societe des Oleagineux，Fran ce）；又はグリセリンとカプリル酸及びカプリン酸のトリエステル混合物である MYGLYOL 812^TM(Dynamit Nobel，Sweden)である。 LCT油は、その炭水化物鎖が、12を上廻る炭素原子の平均鎖長をもつ、トリグリセリド油である。本発明に従って使用されることができる LCT油の例は、アラキス(arachis)油、サフラワー油、ゴマ油、大豆油、綿実油、オリーブ油である。油状脂肪酸誘導体は、さまざまな親油性の置換脂肪酸、例えばアルキル・アルコールとのエステル、例えば、脂肪酸のメチル又はエチル・エステル、例えば、オレイン酸エチルであることができる。カチオン脂質は、正電荷極性基をもつ脂質である。カチオン脂質の例は、Ｃ₁₀ −Ｃ₂₄脂肪アルキルアミンとＣ₁₂−Ｃ₂₄脂肪アルカノイルアミンであり、Ｃ₁₂− Ｃ₁₈脂肪アルキルアミンとＣ₁₂−Ｃ₁₈脂肪アルカノイルアミンが好ましい。カチオン脂質の特定の例は、ステアリルアミンとオレイルアミンである。カチオン脂質に加えて、上記油成分は、カチオン界面活性剤、例えば、カチオン・コレステロール・エステル及びカチオン・コレステロール誘導体、例えば、むことができる。油状脂肪アルコールは、さまざまな親油性アルコール、例えば、脂肪酸アルコール、例えば、オレイル・アルコール、又はアリール・アルコール、例えば、ベンジル・アルコール、エチル・アルコール又は他のいずれかの非毒性アルコールを含む。上記成分に加えて、上記油成分は、他のタイプの植物油、鉱物油及びイソプロピル・ミリステートを含むさまざまな他の油状成分をも含むことができる。さらに、この油成分は、中性又はアニオン脂質であって、そのエマルジョン滴の正電荷を充分に除去しないようなものをも含むことができる。本発明のSEOF中で使用されることができる界面活性剤は、それ自体知られたもののいずれかであることができる。この界面活性剤は、好ましくは、非イオン性界面活性剤であり、そして、例えば、 Tween、例えば、Tween 80とTween 85；Sp an、例えば、 Span 80；又はグリコシル化ポリオキシエチレン化グリセリド、例えば、LABRAFIL M 1944 CS^TM（Gattefosse Corp，USA）であることができる。非イオン界面活性剤の他の例は、ソルビトールと脂肪酸のエステル、例えば、ソルビタン・モノオレエート、及び油状スクロース・エステル、例えば、スクロース・モノ−、ジ−又はトリ−パルミテートである。非イオン界面活性剤に加えて、リン脂質の如きイオン界面活性剤が使用されることができ、このようなイオン界面活性剤の量は、そのエマルジョン滴の正電荷を除去しないようなものでなければならない。時に、異なる界面活性剤の組合せ、例えば、Tween 80と Span 80又はTween 85と Span 80の組合せを使用することが有用である。本発明のSEOFの典型的な医薬としての適用は、疎水性医薬の経口全身投与におけるものである。この投与のために、その中に医薬が溶解されたSEOFは、好ましくは、密封された軟質又は硬質ゼラチン・カプセル内に封入されるであろう。このカプセルは、典型的には、そこでその内容物を放出するGI管の特別の領域内に溶解されるようなものである。このようなカプセルの例は、腸溶コートされた軟質又は硬質ゼラチン・カプセルである。それ自体知られた腸溶コートは、胃液中での溶解に耐性であるが、その腸内で崩壊する物質又は物質の組合せによるコーティングである。腸溶コーティングの例は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートBPである。この腸溶コーティングの結果として、そのカプセルは、その消化管の上部内での溶解に耐性であり、そしてこれ故、例えば、空腸内の胆汁酸及び塩との接触の結果として、その腸内でのみ溶解する。特に、例えば大豆油のような LCTを含むエマルジョン滴は、小腸から遠くに胸管を通して運ばれ、これ故肝臓をバイパスする、キロミクロン中に、リンパ系を介して空腸内で吸収されるようである。このような吸収は、これ故、肝臓内で医薬分解のファースト・パス効果をかなり減少させる。商業的に入手可能なカプセルは、約 0.7mlの内容量をもつようなサイズまでのサイズにある。本発明に従って行われた実験から、この容量は、全身的効果を達成するために、フィゾスティグミンの如き医薬の有効量のデリバリーのために十分なものであることが判明した。本発明のSEOFの医薬としての使用のために、保存料、例えば、メチル・パラベン、プロピル・パラベン、ブチル・パラベン又はこれらの組合せ、並びに抗酸化剤、例えば、プロピル没食子酸塩、 BHT又はジメルカプロールが、使用されることができる。さらに、使用に先立って、その調製物は、好ましくは、濾過により滅菌される。本発明を、以下の実施例及び添付の図面中にさらに説明する。図面の簡単な説明図面中、図１は：水相中のSEOFの希釈のレベルの関数としての平均滴サイズを示す。このSEOFは、25％ Tween 80 、12.5％ベンジル・アルコール、 2.5％オレイルアミン及び 100％までのエチル・オレエートから成る。これらの実験の詳細を実施例 IVに記載する。図２は：同じく実施例IVに報告する図１に示すものと同様の実験の結果を示す。但し、Tween 80の濃度は35％であった。図３は：実施例IVに記載する実験の結果を示す。ここでその平均滴サイズは、水相中のSEOFの３つの異なる希釈において時間の経過にわたりテストした。SEOF は、25％ Tween 80 、12％ベンジル・アルコール、 2.5％オレイルアミン及び 1 00％までのエチル・オレエートから成る。水相のpHレベルは、 5.0であった。図４は：同じく実施例IVに記載する、図３のものと同様の実験の結果を示す。但し、水相のpHレベルは 2.5であった（フタレート・バッファーで調節した）。図５は：フィゾスティグミンの３つの異なる配合物のPO投与後の時間に対するコリンエステラーゼ阻害の実験結果を示す。図６は：医薬を含有する正SEOFと負SEOF、並びに水中プロゲステロン懸濁液及びブランク配合物の投与後の、プロゲステロン血清濃度を示す。実験方法（ｉ）粒子サイズ評価：崩壊性SEOFの粒子滴サイズを、粒子サイズが光子相関スペクトロスコピーにより評価されるスーパー・ナノサイザー装置（super nanosizer apparatus(Coulte r N4)）を使用して測定した。評価に先立ち、調製物を、濾過し、そして音波処理した2.25％グリセリン溶液を使用して希釈した。（ii）エマルジョンの電荷：エマルジョンの電荷を、電気泳動移動度により測定した。標準的な負電荷をもつ脂肪エマルジョン、2.25％グリセリン溶液中に浸されたIntralipid^(R)（Kabi- Vitrum，Sweden）は、その分散された油滴の負電荷に因り、正電極の方に動く。（胃又は腸液、 USP中の）各種乳化油配合物は、負電極に向って、その反対方向に移動し、その油滴が正電荷をもつことを証明した。（iii）ゼータ電位：ゼータ電位を、移動境界電気泳動技術を使用して測定した。自発的に形成された油滴のゼータ電位値を、希釈剤として2.25％のグリセリン溶液を使用して Zet asizer^TM(DELSA 440 Coulter)を使用して測定した。（iv）肉眼的観察： SEOF配合物の安定性の程度及び上記配合物から得られたエマルジョン中の相分離の程度を、所定の時間間隔において肉眼で評価した。目に見えるいずれの変化も記録されなかった。実施例Ｉ SEOFの調製 SEOFを以下の段階により調製した：１．脂肪アルコールとほとんどの油状担体をフラスコ内で混合した。２．次に界面活性剤を添加し、そして撹拌により可溶化した。３．次にカチオン脂質を添加し、そして上記混合物中に溶解した。ステアリルアミンの場合には、約37℃までの穏やかな加熱がこの成分を可溶化するために必要であった。４．上記組成物の最終重量を、残りの油状担体の添加により確定した。５．医薬を、上記混合物への添加に先立って脂肪アルコール中に溶解しても、又は上記油状担体による最終重量の確定前のその配合物の他の成分の取り込み後に添加してもよい。６．実施例VI〜Ｘにおいてのみ、医薬が含有されており、実施例II〜Ｖは、医薬を含んでいなかった。エマルジョン配合物のために、調製されたSEOFを２段蒸留された水又は擬似 V SP胃及び腸液と混合した。実施例II 250μｍ未満の直径をもつ油滴に崩壊するSEOF さまざまなSEOFを以下の成分から調製した：スパン、Tween 85、ステアリルアミン及びアラキス油。以下の表は、上記４成分を列記し、そのテストされた濃度レンジ、及びその好ましい濃度レンジ、及び最小粒子サイズを作り出す各成分についての典型的な濃度を示す。各配合物は、37℃において液体中で透明であり、そして室温において乳光色に、そして粘性になった。これらの配合物から形成されたエマルジョンは、数時間室温において安定であった。穏やかな撹拌の後のエマルジョン中の油滴の粒子サイズは、50〜 250μｍの範囲にあった。アラキス油に加えて、サフラワー油、ゴマ粗、大豆油、綿実油及びオリーブ油を含む他の LCT油をテストした。上記レンジ（50〜 250μｍ）内にあるエマルジョンは、これらの LCT油の全てによって達成された。上記レンジの下限にある滴をもつ最適エマルジョンは、アラキス油とサフラワー油を用いて得られた。さらに、アラキス油の代わりに MCT油をもテストし、そして同一レンジ内のサイズの滴を同様に生じることが示された。実施例III サブミクロン油滴に崩壊するSEOF SEOFを、以下の成分から調製した：Tween 80、 Span 80、オレイル・アルコール、オレイル・アミン及びエチル・オレエート。典型的な配合物の成分、各成分についてのテストされた濃度レンジ、好ましい濃度レンジ及び最小サイズの滴を作り出す典型的な濃度を、以下の表II中に示す。上記SEOFから作られたエマルジョンの滴サイズは、直径 160〜 200nm、標準偏差60−70nmの範囲にあった。この油状滴は、正電荷をもっていた。エマルジョンは全て、数週間室温において安定であった。脂質溶液中のオレイル・アルコールの濃度は、最終滴サイズに影響を及ぼすことが判明した。結果を、以下の表III に示す。 Tween 85を、Tween 80の代わりに使用したとき、７〜８％までのオレイルアミンの濃度上昇が、正電荷エマルジョンを達成するために必要であった。このケースにおける得られた分散滴の最終粒子サイズは、１〜２μｍの範囲にあった。エチル・オレエートは、サブミクロン範囲にあるエマルジョンを作り出すことができた、テストされた唯一の溶媒であった。実施例IV 20〜 200nmの範囲にある油滴に崩壊するSEOF SEOFを、以下の成分から調製した：Tween 80、ベンジル・アルコール、オレイル・アミン及びエチル・オレエート。各々についてのテストされた濃度レンジにおける成分を以下の表IVに示す。 0.5％未満のベンジル・アルコールを含む配合物は、安定ではなかった。50％を上廻るベンジル・アルコールが含有されるとき、安定したサブミクロン・エマルジョンは達成されなかった。以下の表Ｖは、（１：１の水相による一定希釈下での）トウィーン80とベンジル・アルコールの関数としての粒子サイズを示す。表から分かるように、最小の滴直径は、40％ Tween 80 と40％ベンジル・アルコール配合物を用いて達成された。図１は、25％ Tween 80 、12.5％ベンジル・アルコール、 2.5％オレイルアミン及び 100％の全体まで添加されたエチル・オレエートから成るSEOFにより得られた結果を示す。図１から分かるように、粒子サイズは、約１：500 の希釈までの水相希釈の増加に伴って、減少した。１：1000までのさらなる希釈は、滴サイズの僅かな増加をもたらした。図２に見られるように、図１のSEOFと同じ挙動タイプが、25％の代わりに35％のTween 80を含む異なるSEOFを用いても見られた。図１、図２と表VIは、有効な自己乳化が、高pH依存性を示さないが、pH増加の関数としての滴サイズ拡大のいくぶんの傾向が観察された。 pHと時間の関数としての平均滴サイズに対するpHの影響それらの平均滴サイズを反映して、エマルジョンの安定性が一定時間の経過にわたりテストされたところの実験からの結果を示す図３と４を参照する。両ケースにおいてSEOFは、25％ Tween 80 、12.5％ベンジル・アルコール（BA）、 2.5 ％オレイルアミン（OA）及び 100％まで添加されたエチル・オレエート（EO）から成っていた。図３に示された実験においては、そのpHは、 5.0であり、一方、図４の実験においては、 2 .5であった。これらのことから分かるように、形成されたエマルジョンは、テストされた条件下で30日間にわたり安定であった。１：100 未満の希釈下では、エマルジョンは、約１週間だけ安定であったことは注目に値する。さらに、 7.4を上廻る水相のpHの下では、エマルジョンは、同じく、ほんの１週間の期間にわたり安定であった。実施例Ｖ SEOFから作られた滴のゼータ電位定量的なゼータ電位計測を、実施例３に記載したSEOFから調製したエマルジョンを用いて、構成した。これらのエマルジョンは、異なる量のオレイルアミン(0 .5％)を含んでいた。表VII は、2.25％グリセリン溶液中で計測された、異なる量のオレイルアミン（０− 0.5％）を含むSEOF希釈（１：10）から得られたエマルジョンのゼータ電位を示す。表から分かるように、オレイルアミンを含むSEOF は、正電荷をもつ滴を作り出すことができた。実施例VI 医薬を含むSEOF フィゾスチグミン、シクロスポリンＡ、プロブコールとインスリン（インスリンは、浴音波処理装置を使用して５分間の音波処理により油配合物中に細かく分散された）を、SEOF中に導入し、そしてその配合を、以下の表VIIIに示す。実施例VII ラットにおける経口投与されたフィゾスティグミンによるコリンエステラーゼの阻害ラットに対する経口投与されたフィゾスティグミン（PS）の薬理学的効果を、 Steffens(Steffens A．B 1969，Physiology and Behavior，4，833-836)により先に報告された方法を修正したものによりテストした。雄 Sebraラットに、実験の１日前に頸静脈を通して長期にわたりカニューレ挿入し、麻酔されないラットからの頻繁な血液サンプリングを可能にした。目がさめたラットの各群（各群３〜４匹）に、３つのPS配合物の中の１を経口（PO）投与した。配合物の全てを、 0.5mg／kgの PS投与量において投与した。 0.1mlの血液サンプルを、医薬投与後５時間まで特定の時間間隔において採取し、そしてJohnson & Russelの放射計測アッセイ(Joh nson C．D and Russel R．L，1975，Anal．Biochem，64，229-238)に従って、コリンエステラーゼ活性について分析した。テストされた配合物は以下のようなものであった：配合物１：９mg P.S、 8.5ｇ大豆油、 8.5ｇオレイン酸、 1.0ｇ Labrafil M 1944Cs、0. 02ｇ没食子酸イソプロピル、0.02ｇ PHT、0.02ｇジメルカプトール及び0.02ｇブチル・パラベン。配合物２：５mg P.S、１mlエタノール（95％）、 1.0ｇ Lipaid-E80 、0.02ｇ α−トコフェロール、0.21ｇステアリルアミン及び 8.0ｇ大豆油。配合物３：６mg P.S、３mg Span 80、 0.6ｇ Tween 85 、0.36ｇステアリルアミン及び12 ｇまでのアラキス油。各配合物によるコリンエステラーゼ阻害の結果を表５に示す。表から分かるように、カチオン脂質の添加を伴わない大豆油中に溶解されたP.S(配合物１)は、約20％のコリンエステラーゼ活性を阻害することができたが、この阻害は、長い時間期間にわたり維持されなかった。カチオン脂質を含む大豆油配合物中に溶解された P.Sは、医薬の投与３時間後においてさえ20％を超えるコリンエステラーゼ活性の阻害を保ち続けた。５時間以上にわたる20％を超える最も深遠な阻害は、カチオン脂質との組合せにおける油状担体としてのアラキス油の使用により達成された。実施例VIII 糖尿病ラットにおけるグルコース・レベルに対する経口投与されたインスリンの効果実験方法：体重 200ｇの Sebra雄ラットに、生理食塩中にストレプトゾシンを溶解することより調製した、 100mg／kgの投薬におけるストレプトゾシンを腹膜内注射した。この生理食塩水のpHは、 0.1Ｎクエン酸溶液で 4.4に調整した。ストレプトゾシン（Streptozocin）は、グルコース代謝に影響を及ぼし、そしてこの用量において、内因性インスリンを消耗させて、ラットに糖尿病を与える。この糖尿病形成効果を、注射後24時間、 Reagent Stripテストを使用してグルコース血中レベルをモニタリングすることにより、評価した：尾からのラット血液の一滴を Glucostix^TM(Miles Ltd，Ames Division，Slough，England)テスト・パッド上に適用した。グルコース・レベルを、製造者の指示書に従ってGlucom eter II（Miles Lab，Ames Division，Elkhart，In USA）を使用して測定した。このグルコメーターの最大限界は 400mg／dlであることに留意すべきである。ラットをエーテルを用いて麻酔し、そして腹の部分をそる。メスを使用して、腹筋と腹膜内で小さく開口し、そして腸の空腸領域を晒し、そして生理食塩水で濡らした。各種液体配合物を、最初に、２段蒸留水で希釈し（１：５）、穏やかに混合し、空腸内に直ちに注射した（１mgのインスリンを含有する得られた最終エマルジョン１ml）。これら調製物を、ラット内に液体がないことを確認しながら投与前に希釈した。次に腹筋と皮膚を縫合した。医薬投与前に時刻“０”とした。実験の残りを、動物の目をさまさせて、そして血液を所定の時間間隔でラットの尾から採取しながら、行った。テストされた配合物は、以下のようなものであった：正電荷配合物：表VI（第４番）に示すSEOFインスリン配合物。これは、正電荷エマルジョン滴を作り出す。負電荷配合物：オレイルアミンを含まない正電荷配合物と同じ配合物。これは、負電荷エマルジョン滴を作り出す。ブランク配合物：インスリンを含まない正電荷配合物と同様の配合物。インスリン水性懸濁液：生理食塩水中のインスリンの懸濁液。市販インスリン調製物：Novoにより市販されたインスリン調製物。結果を以下の表IXに示す。表IX中に示す結果から、インスリンの水性分散物は、その大量投薬の結果としていくぶんの吸収が生じたけれども、あまり活性ではなかったことが分かる。市販されたインスリン溶液は、糖尿病ラットに腹膜内注射（８ユニット／ラット）されたとき、その血中グルコース・レベルを顕著に減少させた。これは、比較モデルとしてのこれらのラットの使用の有効性を示している。インスリンを除く全ての賦形剤を含むブランク脂質配合物は、予想されたように、血糖値低下効果のいずれをも誘導しなかった。正電荷エマルジョン滴をもつ正電荷エマルジョンは、水性インスリン懸濁液のものよりもかなり大きく有効な血糖値低下効果を顕出した。実施例IX 各種配合物投与後の血清プロゲステロン濃度プロゲステロンは、かなりのファースト・パス効果のために経口投与されない内因性の親油性化合物である。その経口による生物学的利用能を改善するSEOFの能力を、本試験においてテストした。 24〜28日齢の Sabra雌ラットの４群（１群６ラット）に、プロゲステロンを含有する３つの配合物とブランク配合物を受容させた。各動物を、医薬を含まないか又は１kgの体重当り４mgのプロゲステロンを含む適切な配合物 0.5mlで飼養した。テストされた配合物は以下のようなものであった：ブランク配合物：実施例VI中に記載されたSEOF（第５番）、２段蒸留水(DDW)での１：50希釈、医薬なし。懸濁液： DDW中に懸濁されたプロゲステロン。負電荷配合物：実施例VI中に記載されたSEOF（第５番）、 DDWによる１：50希釈、オレイル・アミンを含有せず。正電荷配合物：実施例VI中に記載されたSEOF（第５番）、 DDWによる１：50希釈。プロゲステロン濃度を、ImmuChem^TM Coated tube kit，ICN Biomedicals，Inc ，Costa Miesa，California，USAを使用して、 RIAにより測定した。結果を図６に示す。各種配合物中でのその投与後に得られたプロゲステロンの薬理学的パラメーター、及び懸濁液と比較してのSEOFの比生物学的利用能を表Ｘに示す。実施例Ｘ BALB／c マウスおけるSEOFの急性毒性実施例２〜４中に記載した配合物の急性毒性を、30日間にわたりBALB／c マウスにおいて調べた。１：10に希釈した(300倍を超える過剰用量の)及び１：100 希釈した（30倍を超える過剰用量の）各SEOF 0.5mlを、４〜６マウスの群に腹膜内注射した。動物の症状を、上記手順後数時間にわたり、そしてその後１ケ月間毎日、検査した。実施例IIに記載したSEOFの両希釈物、及び（12.5％と30％のBAを含有する）実施例IVに記載した配合物の１：100 希釈物を受容したマウスは、中毒（intoxica tion）の兆候を全く示さなかった。12.5％のBAを含むSEOFの１：10希釈物は、毒性効果のいずれをも引き起こさなかった。他方において、30％のベンジル・アルコールを含有する配合物の１：10希釈物は、即時的な神経学的ショックを誘導することが判明し、そしてさらなる部分的改良と、数日後の動物の死をもたらした。同一配合物の半分の投与量も未だ神経毒性の兆候を引き起こしたが、マウスは生存していた。表XIから分かるように、同一の毒性効果は、 1.5％と３％のBA水溶液の注射後にも観察され、これは、配合物の 300倍の過剰投与量毒性におけるその役割を確信させた。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９７年５月８日【補正内容】請求の範囲１．油成分と界面活性剤を含有する自己乳化性油状配合物（SEOF）を含む医薬組成物であって、その油成分が、油状担体とカチオン脂質、そして場合により親油性油状脂肪アルコールを含み、そのSEOFの混合の間に形成される油／水エマルジョンが、サブミクロン直径の正電荷をもつ油状滴をもち、そして医薬活性成分がその油状滴内に溶解していることを特徴とする医薬組成物。２．前記カチオン脂質がＣ₁₀−Ｃ₂₄−脂肪アルキルアミン又はＣ₁₂−Ｃ₂₄−脂肪アルカノイルアミンである、請求項１に記載の医薬組成物。３．前記カチオン脂質がＣ₁₂−Ｃ₁₈−脂肪アルキルアミン又はＣ₁₂−Ｃ₁₈−脂肪アルカノイルアミンである、請求項１又は２に記載の医薬組成物。４．前記カチオン脂質がステアリルアミン又はオレイル・アミンである、請求項１〜３のいずれか１項に記載のSEOF。５．前記油状担体が、中鎖トリグリセリド(MCT)油、長鎖トリグリセリド(LCT) 油及び油状脂肪酸誘導体から成る群の中の１以上である、請求項１〜４の中のいずれか１項に記載の医薬組成物。６．前記 LCTが、アラキス油、サフラワー油、ゴマ油、大豆油、綿実油及びオリーブ油から成る群の中の１以上である、請求項１〜５の中のいずれか１項に記載の医薬組成物。７．前記油状脂肪酸誘導体が、アルキル・アルコールとの脂肪酸のエステルである、請求項１〜６の中のいずれか１項に記載の医薬組成物。８．前記誘導体がエチル・オレエートである、請求項７に記載の医薬組成物。９．前記親油性油状脂肪アルコールが脂肪酸アルコール、アリール・アルコール又はエチル・アルコールである、請求項１に記載の医薬組成物。 10．前記親油性脂肪アルコールが、オレイル・アルコール、ベンジル・アルコール又はそれらの組合せである、請求項９に記載の医薬組成物。 11．前記界面活性剤が非イオン界面活性剤である、請求項１〜10の中のいずれか１項に記載の医薬組成物。 12．トウィーン（商標）又はスパン（商標）である、請求項11に記載の医薬組成物。 13．医薬の投与のための請求項１〜12のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、担体と有効量の疎水性医薬を含むことを特徴とする医薬組成物。 14．前記医薬がインスリン又はその誘導体である、請求項13に記載の医薬組成物。 15．疎水性医薬の経口全身投与のための、請求項14に記載の医薬組成物。 16．カプセル内に封入されたSEOFを内に含有された疎水性医薬の経口全身投与のための、請求項１〜12のいずれか１項に記載の医薬組成物。 17．前記カプセルが軟質又は硬質ゼラチン・カプセルである、請求項16に記載の医薬組成物。 18．前記カプセルが、腸溶コートされた、請求項１〜12のいずれか１項に記載の医薬組成物。 19．水性媒体と請求項１〜12のいずれか１項に記載のSEOFを混合することを含む正電荷をもつ油／水エマルジョンの製法。 20．疎水性医薬を含む油／水エマルジョンの調製のための請求項 15に記載の方法であって、請求項１〜12の中のいずれか１項に記載の正電荷をもつ油滴の中にその医薬を取り込むことを含む方法。 21．医薬組成物の使用のための、請求項１〜12のいずれか１項に記載のSEOF。 22．疎水性医薬の経口全身投与のための医薬組成物の使用のための、請求項１〜12のいずれか１項に記載のSEOF。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ジェシャニク，タティアナイスラエル国，93847 イェルサレム，ジロ，マーガリットストリート 306／25

Claims

【特許請求の範囲】１．油成分と界面活性剤を含有する自己乳化性油状配合物（SEOF）であって、その油成分が、油状担体とカチオン脂質、そして場合により親油性油状脂肪アルコールを含み、そのSEOFの混合の間に形成される油／水エマルジョンが、正電荷をもつ油状滴をもつことを特徴とするSEOF。２．前記カチオン脂質がＣ₁₀−Ｃ₂₄−脂肪アルキルアミン又はＣ₁₂−Ｃ₂₄−脂肪アルカノイルアミンである、請求項１に記載のSEOF。３．前記カチオン脂質がＣ₁₂−Ｃ₁₈−脂肪アルキルアミン又はＣ₁₂−Ｃ₁₈−脂肪アルカノイルアミンである、請求項２に記載のSEOF。４．前記カチオン脂質がステアリルアミン又はオレイル・アミンである、請求項３に記載のSEOF。５．前記油状担体が、中鎖トリグリセリド(MCT)油、長鎖トリグリセリド(LCT) 油及び油状脂肪酸誘導体から成る群の中の１以上である、請求項１〜４の中のいずれか１項に記載のSEOF。６．前記 LCTが、アラキス油、サフラワー油、ゴマ油、大豆油、綿実油及びオリーブ油から成る群の中の１以上である、請求項１〜５の中のいずれか１項に記載のSEOF。７．前記油状脂肪酸誘導体が、アルキル・アルコールとの脂肪酸のエステルである、請求項１〜６の中のいずれか１項に記載のSEOF。８．前記誘導体がエチル・オレエートである、請求項７に記載のSEOF。９．前記油状脂肪アルコールが脂肪酸アルコール又はアリール・アルコールである、請求項１〜８の中のいずれか１項に記載のSEOF。 10．前記脂肪アルコールが、オレイル・アルコール、ベンジル・アルコール又はそれらの組合せである、請求項９に記載のSEOF。 11．前記界面活性剤が非イオン界面活性剤である、請求項１〜10の中のいずれか１項に記載のSEOF。 12．トウィーン（商標）又はスパン（商標）である、請求項11に記載の非イオン界面活性剤。 13．疎水性医薬の投与のための医薬調製物であって、担体と有効量の前記医薬を含み、その担体が請求項１〜11の中のいずれか１項に記載のSEOFである医薬調製物。 14．前記医薬がインスリン又はその誘導体である、請求項13に記載の医薬調製物。 15．前記医薬の経口全身投与のための、請求項12に記載の医薬調製物。 16．カプセル内に封入された、請求項１〜11の中のいずれか１項に記載のSEOF を含む疎水性医薬の経口全身投与のためのドラッグ・デリバリー・システム。 17．前記カプセルが軟質又は硬質ゼラチン・カプセルである、請求項14に記載のドラッグ・デリバリー・システム。 18．前記カプセルが、腸溶コートされた、請求項９に記載のドラッグ・デリバリー・システム。 19．疎水性医薬を用いて治療の必要とされる被験体を治療する方法であって、本質的に油状媒体中の上記医薬を投与することを含み、上記媒体が請求項１〜11 の中のいずれか１項に記載のSEOFであることを特徴とする方法。 20．疎水性医薬の経口全身投与のための、請求項18に記載の方法。 21．前記SEOFがカプセル内に封入される、請求項19に記載の方法。 22．水性媒体と、請求項１〜11の中のいずれか１項に記載のSEOFとを混合することを含む、エマルジョンの製法。 23．疎水性医薬を含む油／水エマルジョンの製法のための、請求項21に記載の方法であって、請求項１〜11の中のいずれか１項に記載のSEOF中にその医薬を導入することを含む方法。