JPH11501661A - アポプトシス速度向上のためのＲＡＲ−γ−特異的アゴニストリガンドの使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 ＲＡＲ−γタイプのレセプターの活性化によってアポプトシスを誘発することのできる少なくとも１つの細胞群におけるアポプトシス速度を向上させるための製薬組成物の調製における、ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的な少なくとも１つのアゴニストリガンドの使用が開示される。この組成物は、ＲＡＲ−γタイプのレセプターの活性化によってアポプトシスを誘発することのできる少なくとも１つの細胞群におけるアポプトシスの不十分な速度に伴う疾患または障害の治療に特に有用である。化粧品組成物におけるアポプトシス誘発剤としての、ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的な少なくとも１つのアゴニストリカンドの使用も開示される。前記組成物は、皮膚の光老化または経時的老化の防止及び／または抑制に用いることができる。

Description

【発明の詳細な説明】 アポプトシス速度向上のための ＲＡＲ−γ−特異的アゴニストリガンドの使用 本発明は、特定のレチノイド類の、アポプトシス速度を向上させるための製薬 組成物の調製における使用に関する。これらのレチノイド類は、特に光誘発性ま たは経時的な老化の防止及び／またはそれと闘うための化粧品組成物においても 使用できる。 細胞死には２つのメカニズムが含まれる。第１は、古典的なタイプで、壊死と 呼ばれる。モルホロジー的に、壊死は、ミトコンドリア及び細胞質の膨張と核の 歪み、並びに、それに続く細胞の破壊とその自己分解を特徴とし、後者は炎症現 象をともなう。壊死は、受動的かつ偶発的に起こる。組織の壊死は、一般的に、 例えば物理的外傷を受けた細胞によって、または化学的毒素によって起こる。 細胞死の他の形態は、アポプトシス（枯死）と呼ばれる［Kerr，J.F.R．and W yllie，A.H.，Br.J.Cancer，265，239(1972)］が、壊死とは異なり、アポプトシ スは炎症現象をもたらさない。アポプトシスは、種々の生理学的状況下で起こり 得ることが報告されている。これは細胞自滅の高度に選択的な形態であり、容易 に観察可能なモルホロジー的及び生化学的現象によって特徴づけられる。即ち、 エンドヌクレアーゼ活性の有無によらないクロマチンの凝縮、アポプトシス体の 形成、及びエンドヌクレアーゼの活性化によるデオキシリポ核酸（ＤＮＡ）の１ ８０−２００塩基対ＤＮＡフラグメント（これらのフラグメントは、アガロース ゲル電気泳動によって観察できる）への断片化が特に観察される。 アポプトシスは、組織成長、分化及び再生に含まれるプログラムされた細胞死 として認識され得る。また、細胞の分化、成長及び成熟は、アポプトシスと密接 に関連し、細胞の分化、成長及び成熟において役割を演ずることのできる物質も またアポプトシスの現象に関連していると考えられている。 医学の分野において、いくつかの病理学的状態が、調節不能であるか否かに関 わらず修正されたアポプトシスメカニズムを示す。即ち、アポプトシスを誘発又 は抑制することによるアポプトシスの意図的な修正が、多くの疾患、特に癌、自 己免疫疾患及びアレルギーの場合のような細胞の過剰増殖を伴う疾患、あるいは 、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）免疫不全症候群、神経退行性疾患（アルツハ イマー病）または心筋梗塞の間に誘発される過剰損傷の場合のような細胞消滅を 伴う疾患の治療を可能にすることが報告されている 特に腫瘍学において、デキサメタソン、シクロホスファミド及びカプサイシン といった多くの抗新生薬がアポプトシスを誘発できることが注目されている。 化粧品分野では、皮膚の老化の徴候は、本質的に皮膚の主要な生物学的メカニ ズムの機能低下の結果生ずるもので、特にアポプトシスのメカニズムを利用する 。従って、アポプトシスのメカニズムを誘発する全ての製品が老化の出現及び大 小の皺といった既に存在している老化の徴候の防止及び／またはそれと闘うのに 適した製品であると考えることが出来る。 レチノイド類の分野では、全トランス−レチン酸が、多くの正常及び形質転換 された細胞タイプの分化及び増殖の調節剤（例えば、阻害剤、あるいは、処理す る細胞の性質によっては刺激剤）であることが知られている。例えば、表皮のケ ラチン細胞等の上皮細胞の分化を阻害する。また、黒色腫細胞などの形質転換さ れた多くの細胞の増殖を阻害ずる。増殖及び分化に対するこれらの効果は、例え ばＨＬ−６０プロミエロサイト細胞の場合のように一又は同じタイプの細胞刺激 に影響を与えうる。よって、これらの細胞の増殖が全トランス−レチン酸によっ て阻害されること、同時にそれらの顆粒球への分化及びそれらのアポプトシスが 誘発されることが知られている。 一般的に、全トランス−レチン酸が、ＲＡＲ（レチン酸レセプター）と呼ばれ 細胞核に存在する核レセプターと相互作用することによって細胞の分化及び増殖 に作用することが知られている。今日までに、各々ＲＡＲ−α、ＲＡＲ−β及び ＲＡＲ−γと呼ばれるＲＡＲレセプターの３つのサブタイプが同定されている。 リガンド（例えば全トランス−レチン酸）に結合した後、これらのレセプターは 、レチン酸に調節される遺伝子のプロモータ領域の特異的な反応成分（ＲＡＲＥ ）と相互作用する。ＲＸＲの天然リガンドは、９-シス-レチン酸である。ＲＸＲ はマスタ−調節タンパク質であるとして認識されるが、それらが、ＲＡＲとの相 互 作用と同様に、ビタミンＤ３のレセプター（ＶＤＲ）、トリヨードチロキシンの レセプター（ＴＲ）及びＰＰＡＲ（ペルオキシソーム増殖因子活性化レセプター ）といったステロイド／甲状腺レセプターのスーパーファミリーの他の成員と相 互作用して、ヘテロダイマーを形成するからである。さらに、ＲＸＲは特異的反 応成分（ＲＸＲＥ）とホモダイマーの形態で相互作用しうる。これらの複合体相 互作用、及び、組織及び細胞タイプに依存して異なって発現される多数のＲＡＲ 及びＲＸＲレセプターの存在は、実質的に全ての細胞における多面発現性の効果 を説明する。 通常は「レチノイド類」と呼ばれる、全トランス−レチン酸又は９-シス-レチ ン酸の合成構造類似物の多くが文献に記載されている。これらの分子の中には、 ＲＡＲあるいはＲＸＲに結合し、特異的に活性化できるものもある。さらに、幾 つかの類似物は、ＲＡＲレセプターの特別なサブタイプ（α、βまたはγ）に結 合して特異的に活性化できる。最後に、他の類似物は、これらの異なるレセプタ ーに対して特別な選択的活性を示さない。この点において、一例として、９-シ ス-レチン酸は、ＲＡＲとＲＸＲの両方を活性化し、これらいずれのレセプター にも特筆すべき選択性を持たない（非特異的アゴニストリガンド）が、全トラン ス−レチン酸は、サブタイプによらずＲＡＲを選択的に活性化する（ＲＡＲ特異 的アゴニストリガンド）。一般的に、かつ定性的に、与えられた物質（即ちリガ ンド）は、与えられたレセプターファミリーに（またはこのファミリーの特定の レセプターに対して）特異的であると言われるのは、前記物質が、このファミリ ーの全てのレセプター（または、このファミリーの特定のレセプター各々）に対 して、他のファミリーの全てのレセプター（または、このファミリーに属するか 否かに関わらず、他の全てのレセプター各々）に対して示す親和性より強い親和 性を示すときである。 ９-シス-レチン酸及び全トランス−レチン酸がアポプトシスの調節剤（特に細 胞タイプに依存する活性化剤又は阻害剤）であること、並びに、９-シス-レチン 酸がこれら２つの調節剤の中でより活性が高いことが報告され、この観察結果が 、全トランス−レチン酸はＲＡＲのみを活性化するのに対して、９-シス-レチン 酸はＲＡＲとＲＸＲの両方を活性化するという事実によって説明できるというこ と も報告されている。 従来から述べられている観点から、アポプトシスの新規な調節剤を見出すこと は興味深いことである。 この点において、本出願人は、ＲＡＲ−γタイプに特異的なレセプターのアゴ ニストリガンドが、種々の細胞タイプ、特に胸腺細胞におけるアポプトシスの優 れた誘発剤であることを見出した。 よって本発明は、ＲＡＲ−γタイプのレセプターの活性化によってアポプトシ スを誘発することのできる少なくとも１つの細胞群におけるアポプトシス速度を 向上させるための製薬組成物の調製における、ＲＡＲ−γタイプのレセプターに 特異的な少なくとも１つのアゴニストリガンドの使用に関する。 また本発明は、化粧品組成物における、ＲＡＲ−γタイプのレセプターの活性 化によってアポプトシスを誘発することのできる少なくとも１つの皮膚の細胞群 におけるアポプトシス誘発剤としての、ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的 な少なくとも１つのアゴニストリガンドの使用にも関する。 即ち、この組成物は、特に、その回復機能に欠陥を生じ、経時的に蓄積される 皮膚の細胞を、アポプトシスにより取り除くことによって、光誘発または経時的 な皮膚の老化を防止し、及び／またはそれと闘うことができる。 従って、最後に本発明は、光誘発または経時的な老化を防止する及び／または それと闘う化粧方法に関し、この方法は上記の様なアポプトシス誘発性組成物を 皮膚に適用することを特徴とする。 本発明の製薬または化粧品組成物は、生理学的に許容される媒体を含む。 本発明では、ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドは 、このリガンドのＲＡＲ−αタイプのレセプターに対する解離定数の、このリガ ンドのＲＡＲ−γタイプのレセプターに対する解離定数に対する比率Ｒが１０以 上であり、Ｆ９細胞の分化を誘発する全てのアゴニストリガンドを意味すると解 される。 即ち、全トランス−レチン酸及びその類似物の幾つかは、マウスの胚奇形癌細 胞（Ｆ９細胞）の分化を誘発することができることは知られており；従って、そ れらはＲＡＲレセプターのアゴニストであると認められている。この分化に伴う プラスミノーゲン活性化因子の分泌は、レチノイド類に対するＦ９細胞の生物学 的反応の指標である（Skin Pharmacol.，1990; 3: pp．256-267）。 解離定数は、当業者に標準的な試験を用いて決定される。これらの試験は、特 に以下の参考文献に記載されている： 本発明の他の特徴、態様、目的及び利点は、以下の説明、及び、例示をするた めの非限定的な種々の特別な実施例を読むことにより、さらに明らかになるであ ろう。 ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドとしては、以下 のものを挙げることが出来る。６-３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェ ニル）-２-ナフタノン酸(naphtanoic acid)、（Ｅ）-４-（１-ヒドロキシ-１-（ ５，６，７，８-テトラヒドロ-５，５，８，８-テトラメチル-２-ナフチル）-２ -プロペニル）安息香酸、４-［（Ｅ）-２-（３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロ キシフェニル）-１-プロペニル］安息香酸、５’，５’，８’,８’-テトラメチ ル-５’，６’，７’，８’-テトラヒドロ-［２，２’］ビナフタレニル-６-カ ルボン酸、２-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ- ナフタレン-２-イル）-ベンゾ［ｂ］チオフェン-６-カルボン酸、４-（５，５， ８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフト［２，３-ｂ］チオ フェン-２-イル）安息香酸、６-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７， ８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-カルボニル）ナフタレン-２-カルボン酸、３， ７-ジメチル-７ -（１，２，３，４-テトラヒドロ-１，４ａ,９ｂ-トリメチル-１，４-メタノ-ジ ベンゾフラン-８-イル）-２，４，６-ヘプタトリエノール酸、６-（１，２，３ ，４-テトラヒドロ-１，４ａ,９ｂ-トリメチル-１，４-メタノ-ジベンゾフラン- ８-イル）-ナフタレン-２-カルボン酸、６-［ヒドロキシイミノ-（５，５，８， ８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-メチル ］ナフタレン-２-カルボン酸、４-［（６-ヒドロキシ-７-（１-アダマンチル）- ２-ナフチル］安息香酸、５-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８- テトラヒドロ-アントラセン-２-イル）-チオフェン-２-カルボン酸、（−）-６- ［ヒドロキシ-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ- ナフタレン-２-イル）-メチル］-ナフタレン-２-カルボン酸、６-（３-アダマン タン-１-イル-４-prop-２-イニロキシ(ynyloxy)-フェニル）-ナフタレン-２-カ ルボン酸、４-［２-オキソ-２-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８ -テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-エトキシ］-安息香酸、４-［２-オキソ- ２-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン- ２-イル）-アセチルアミノ］安息香酸、４-［２-フルオロ-２-（５，５，８，８ -テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-アセチル アミノ］安息香酸、６-［３-（１-アダマンチル-４-（２-ヒドロキシプロピル） フェニル］-２-ナフトン酸、５-［３-オキソ-３-（５，５，８，８-テトラメチ ル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-プロペニル］-チオフ ェン-２-カルボン酸、６-［３-（１-アダマンチル-４-（２，３-ジ-ヒドロキシ プロピル）フェニル］-２-ナフトン酸、４-［３-ヒドロキシ-（５，６，７，８- テトラヒドロ-５，５，８，８-テトラメチル-２-ナフチル）-１-プロピニル］安 息香酸、４-［３-オキソ-３-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８- テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-prop-１-イニル］安息香酸、４-［（３-（ １-メチルシクロヘキシル）-４-ヒドロキシフェニル）エテニル］安息香酸、４- ［（Ｅ）２-（３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル-エチニル］安息 香酸、４-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル-エチニル］安息香 酸、５-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシ-フェニルエチニル］-２-チオ フェンカルボン酸、５-［３-（１-アダマンチル）-４-メトキシフェニルエチニ ル］-２-チオフェンカルボン酸、 ４-［２-（３-tert-ブチル-４-メトキシフェニル）プロペニル安息香酸、４-｛ ２-［４-メトキシ-３-（１-メチル-シクロヘキシル）フェニル］-プロペニル｝- 安息香酸、６-［３-（１-アダマンチル）-４-（３-メトキシ-２-ヒドロキシプロ ピル）-フェニル］-２-ナフト酸(naphthoic acid)、２-ヒドロキシ-４-［３-ヒ ドロキシ-３-（５，６，７，８-テトラヒドロ-５，５，８，８-テトラメチル-２ -ナフチル）-１-プロピニル］安息香酸、６-（５，５，８，８-テトラメチル-５ ，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イロキシ）-ナフタレン-２-カルボ ン酸、６-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフ タレン-２-イルスルファニル）-ナフタレン-２-カルボン酸、４-［２-プロポキ シイミノ-２-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナ フタレン-２-イル）-アセチルアミノ］安息香酸、６-（５，５，８，８-テトラ メチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-１Ｈ-ピロール-２ -カルボン酸、１-メチル-４-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８- テトラヒドロアントラセン-２-イル）-１Ｈ-ピロール-２-カルボン酸、２-メト キシ-４-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-アント ラセン-２-イル）安息香酸、４-［２-ノニルオキシイミノ-２-（５，５，８，８ -テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）アセチルア ミノ］安息香酸、（−）-２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５，８ ，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-prop- １-イニル］安息香酸、（＋）-２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５ ，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-p rop-１-イニル］安息香酸、２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５， ８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-but -１-イニル］安息香酸、６-（３-ブロモ-５，５，８，８-テトラメチル-５，６ ，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イロキシ）-ナフタレン-２カルボン酸、 ３-［（５，６，７，８-テトラヒドロ-５，５，８，８-テトラメチル-２-ナフチ ル）-２Ｈ-１ベンゾピラン］-７-カルボン酸、４-［３-（３，５-ジ-tert-ブチ ル-４-ヒドロキシフェニル）-prop-１-イニル］安息香酸、４-［３-（５，５， ８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-pro p-１-イニル］安息香酸、４- ［３-（５，６，７，８-テトラヒドロ-５，５，８，８-テトラメチル-２-ナフチ ル）-１-プロピニル］-サリチル酸、４-［｛３-（１-アダマンチル）-４-（２- ヒドロキシエチル）フェニル｝エチニル］安息香酸、及び、４-［｛３-（１-ア ダマンチル）-４-（３-ヒドロキシプロピル）フェニル｝エチニル］安息香酸 本発明においては、５０以上の比率Ｒを示すＲＡＲ−γタイプのレセプターに 特異的なアゴニストリガンドを用いるのが好ましい。例えば次のものが好ましい 。６-３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル）-２-ナフタノン酸、６- （５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２- カルボニル）ナフタレン-２-カルボン酸、６-（１，２，３，４-テトラヒドロ- １，４ａ,９ｂ-トリメチル-１，４-メタノ-ジベンゾフラン-８-イル）-ナフタレ ン-２-カルボン酸、６-［ヒドロキシイミノ-（５，５，８，８-テトラメチル-５ ，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-メチル］ナフタレン-２-カ ルボン酸、５-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ- アントラセン-２-イル）-チオフェン-２-カルボン酸、（−）-６-［ヒドロキシ- （５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２- イル）-メチル］-ナフタレン-２-カルボン酸、６-［３-（１-アダマンチル-４- （２-ヒドロキシプロピル）フェニル］-２-ナフトン酸、６-［３-（１-アダマン チル-４-（２，３-ジ-ヒドロキシプロピル）フェニル］-２-ナフトン酸、４-［ ３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル-エチニル］安息香酸、５-［３ -（１-アダマンチル）-４-メトキシフェニルエチニル］-２-チオフェンカルボン 酸、５-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシ-フェニルエチニル］-２-チオ フェンカルボン酸、６-［３-（１-アダマンチル）-４-（３-メトキシ-２-ヒドロ キシプロピル）-フェニル］-２-ナフト酸、１-メチル-４-（５，５，８，８-テ トラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロアントラセン-２-イル）-１Ｈ-ピロー ル-２-カルボン酸、（−）-２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５， ８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-pro p-１-イニル］安息香酸、２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５，８ ，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-but- １-イニル］安息香酸。 ６-３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル）-２-ナフタノン酸が特 に 好ましい。 よって、ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドを含有 する製薬組成物は、アポプトシスの速度を向上させる必要のあるときに使用する ことができる。当然のことながら、この効果は、特に、胸腺から誘導された細胞 の場合のように、ＲＡＲ−γタイプのレセプターの活性化によってアポプトシス が誘発される細胞群、従って、ＲＡＲ−γタイプのレセプターが存在する細胞群 においてのみ達成される。 主に２つの場合においてアポプトシスの速度を向上させる必要があることがわ かる。第１の場合は、アポプトシスの速度が不十分なことによる疾患または障害 に関する。第２の場合は、移植中に、移植臓器を拒絶する傾向の影響を低下させ るために必要とされる処置に関する。即ち、アポプトシス速度を向上させること によって、Ｔ細胞の免疫反応を低下させることにより、移植臓器に対する免疫寛 容を向上させることができると考えられる。 アポプトシスの不十分な速度に伴う疾患または障害で、特に挙げられるものは 、ある種の細胞群の増殖の結果といえる全癌性状態又は癌による疾患、自己免疫 疾患、アレルギーまたは炎症反応であり、そこでは多過ぎる数の障害を起こした 細胞が観察され、あるいはまた、ある種のウイルス感染であり、そこではウイル スのタンパク質が抗アポプトシス効果を持つ。自己免疫疾患の場合、特に、イン シュリン依存性糖尿病、活性慢性肝炎、慢性関節リウマチ、天疱瘡、多発性硬化 症、筋無力症、全身紅斑性狼瘡、クローン病、及び乾癬を挙げることが出来る。 全癌性状態について、化学線角化症を挙げることもできる。癌の場合、特に、リ ンパ腫、ＥＮＴ球体の癌といった上皮性癌腫、及び卵巣癌といったホルモン依存 性主要を挙げることができる。上記のウイルス感染の中で、特に挙げられるもの は、ヘルペスウイルス、アデノウイルス及び天然痘ウイルス（ポックスウイルス ）である。挙げることのできるアレルギーまたは炎症反応は、接触皮膚炎、アト ピー性皮膚炎、喘息、及び蕁麻疹である。 本発明の組成物は、経腸、腸管外、局所または目によって投与することができ る。製薬組成物は、全身経路（注射または潅流）で投与するのに適した形態にパ ッケージするのが好ましい。 経腸経路で投与する場合、組成物、特に製薬組成物は、錠剤、硬質ゼラチンカ プセル、被覆錠剤、シロップ、懸濁液、溶液、粉末、顆粒、エマルション、マイ クロ球体またはナノ球体、あるいは、放出制御できる脂質またはポリマー小胞の 形態とするこができる。腸管外経路で投与される場合、組成物は、潅流または注 射用の溶液または懸濁液の形態であってよい。 本発明で用いられるＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガ ンドは、通常は、体重１ｋｇ当たりに０．０１から１００ｍｇの１日の投与量で あり、１から３回投与される。 局所経路で投与されるとき、本発明の製薬または化粧品組成物、特に皮膚及び 粘膜の処置をするためのものは、軟膏、クリーム、ミルク、ポマード、パウダー 、吸収バッファー、溶液、ゲル、スプレー、ローション又は懸濁液の形態である 。また、マイクロ球体又はナノ球体、あるいは脂質又はポリマー小胞、あるいは ポリマーパッチ及びヒドロゲルの形態でもよく、それらは放出制御が可能である 。 この局所投与される組成物は、無水形態でも水性形態でもよい。 目の経路で投与するとき、組成物は主に点眼剤の形態である。 ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドは、局所又は目 に用いられる場合は、組成物の全重量に対して、０．００１から１０重量％、好 ましくは０．１から１重量％の濃度で含有される。 本発明は最後に、上記のようにアポプトシスを誘発する化粧品組成物、即ち、 化粧品に許容される媒体中に、ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的な少なく とも１つのアゴニストリガンドを含んでなり、アポプトシスを誘発する化粧品組 成物を皮膚に適用することを特徴とする、光誘発または経時的な老化を防止する 及び／またはそれと闘う化粧方法に関する。 当然のことながら、上記の組成物は、不活性または薬力学的な活性添加剤、あ るいはこれらの添加剤の複数をさらに含んでもよく、特に、湿潤剤；ヒドロキノ ン、アゼル酸(azelaic acid)、カフェー酸またはコウジ酸等の脱色素剤；皮膚軟 化剤；グリセリン、ＰＥＧ４００、チアモルホリノン及びその誘導体、又は尿素 等の加湿剤；Ｓ−カルボキシメチルシステイン、Ｓ−ベンジル−システアミン、 及びそれらの塩又は誘導体、または過酸化ベンゾイル等の抗脂漏剤又は抗アクネ 剤；ケトコナゾールまたはポリメチレン-４，５-イソチアゾリドニン-３-オン等 の抗真菌剤；抗菌剤、カロチノイド、特にβ−カロチン；アントラリン及びその 誘導体等の抗乾癬剤；そして最後に、エイコサ-５，８，１１，１４-テトライン 酸(tetrainoic acid)及びエイコサ-５，８，１１-トリン酸(trynoic acid)及び それらのエステル及びアミドが挙げられる。 また、これらの組成物は、味覚向上剤、パラヒドロキシ安息香酸エステル等の 防腐剤、安定化剤、水分調節剤、ｐＨ調節剤、浸透圧修正用の薬剤、乳化剤、Ｕ Ｖ−Ａ及びＵＶ−Ｂフィルター、酸化防止剤、α−トコフェロール、ブチルヒド ロキシアニソールまたはブチルヒドロキシトルエン等を含んでもよい。 当業者は、考えられる添加によって、本来本発明が有する有利な特性が変化す ること又は実質的に変化することのないように、これらの組成物に添加すべき可 能な化合物（類）を当然に確認するであろう。 ここに、本発明を例示するための、非限定的な複数の実施例を与える。 実施例１ この実験は、ＲＡＲ−γに特異的なアゴニストリガンドの、アポプトシス誘発 剤としての in vivo での有効性を示すものである。 ４週齢の雌ＮＭＲＩマウス（Godollo，ハンガリー，LATI から販売）を用いた 。胸腺にアポプトシスを誘発するために、これらの雌マウスに、0.8mlの生理食 塩水と0.2mlのエタノールの混合液中に溶解した、0.5mgのデキサメタソンまたは 0.5mgの６-３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル）-２-ナフタノン酸 のいずれかを注射した。 デキサメタソンは、周知のアポプトシス誘発剤である。このようにして、胸腺 の退縮が観察された。即ち、上記の処理の４８時間後に、胸腺の重量が約７５％ 減少した。同様の効果が、６-３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル ）-２-ナフタノン酸でも観察されたが、この場合は、処理の４８時間後に胸腺重 量が約６０％減少した。 さらに、この試験と同様の方法で処理した動物又は処理しない動物から、処理 後の異なる時点において胸腺サンプルを取り出した。洗浄及びホモジナイゼーシ ョンの後、［³Ｈ］プトレシンのＮ，Ｎ’-ジメチルカゼインへの取り込みを検出 することにより、それらのトランスグルタミナーゼ活性を測定した。トランスグ ルタミナーゼの活性は、１時間当たりにタンパク質に取り込まれる［³Ｈ］プト レシンのナノモルで計算した。 組織トランスグルタミナーゼは、アポプトシスの誘発に含まれる成分であるこ とが報告されている［Piacentini，M．等，(1994)Apoptosis: The Molecular Ba sis of Apoptosis in Disease．Curr.Comm．Cell & Mol．§Biol．8（Tomei L． D> and Cope，F.O．編）143-165頁］。 このように、上記の胸腺の退縮は、マウスをＲＡＲ−γ特異的アゴニストリガ ンドで処理した結果であり、それは、組織トランスグルタミナーゼの活性に付随 し、それに比例する出来事であることが観察された。 さらに引き続いて行った、処理胸腺から回収したＤＮＡのアガロースゲル電気 泳動による分析により、この胸腺の退縮は、ＤＮＡフラグメントの出現と関連づ けられた（詳細な方法は実施例２に示す）。 実施例２ この実施例は、他のタイプのレチノイドと比較した、ＲＡＲ−ガンマ特異的ア ゴニストリガンドのアポプトシス誘発剤としての in vitro での有効性を示すも のである。 細胞の培養及び調製 未処理の４週齢の雌ＮＭＲＩマウス（Godollo，ハンガリー，LATI から販売） の胸腺から、胸腺細胞懸濁液を調製した。用いた媒質は、Sigma RPMI 1640 媒質 であり、それに Gibco のウシ胎児血清、2mMのグルタミン及び100 IUのペニシリ ン並びに1ml当たり100μgのストレプトマイシンを添加した。次いで、胸腺細胞 を洗浄し、最終濃度が１０⁷細胞/mlとなるように希釈した後、加湿インキュベー タ内で、5%ＣＯ２及び95%空気の雰囲気下、３７℃でインキュベートした。細胞 死は、トリパンブルー(trypan blue)の取り込みによって測定した。 ＤＮＡの定性的及び定量的分析 胸腺細胞を、24 well において、異なる濃度の試験すべき種々の化合物ととも のインキュベートした。６時間のインキュベートの後、0.8mlの細胞懸濁液を、0 .5%(v/v)のTriton X-100、10mMのTris、20mMのEDTAを含み、pH 8.0の溶解バッフ ァー 0.7ml を添加することにより溶解し、次いで、13,000gで１５分間遠心分離 した。 ・ＤＮＡの定量分析：ＤＮＡを上清に含有せしめ（フラグメント）、ペレット （無傷のクロマチン）を、等量の10%トリクロロ酢酸で沈降させ、5%トリクロロ 酢酸で再懸濁し、次いでジフェニルアミン試薬を用いて定量した（Burton，K., （1956）Biochem,J.，62，315-322）。 ・ＤＮＡの定性分析：平行して、上清を0.15mMのＮａＣｌを含むエタノール中 で終夜沈降させた。ペレットを、10mMのTris、1mMのEDTAを含み、pH 8.０ のバ ッファーに再度溶解させ、次いでこれらの溶液を、ＲＮａｓｅで処理し；さらに 続いて等容量のフェノール及びクロロホルム／イソアミルアルコール（２４／１ ）で抽出し、その後、ＤＮＡをエタノール中で沈降させた後、1.8%アガロースゲ ル中で、６０Ｖで３時間電気泳動させた。次いで、ゲルを臭化エチジウムで染色 した後にＤＮＡフラグメントをＵＶ光で可視化した。得られたゲルは、ＤＮＡフ ラグメントの梯子模様を提供し、それは１８０から２００の塩基対の多重であり 、アポプトシス誘発に典型的である。実験を通して、断片化の程度は、死亡して トリパンブルー試験に陽性な細胞の数に関連する。 定量分析の結果を下記の表１にまとめる。 この表のＤＮＡフラグメントのパーセントは、処理した胸腺で得られたＤＮＡ フラグメントのパーセントと、非処理胸腺で得られたＤＮＡフラグメントのパー セント（これらの胸腺のアポプトシスの基本速度）との違いに相当する。 これらの結果は、Ｒが増加するとＤＮＡフラグメントのパーセントが明らかに 向上することを示している。よって、ＲＡＲ−γのリガンドの特異性が増加する と、アポプトシス誘発効果は向上する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/35 ＡＣＳ Ａ６１Ｋ 31/35 ＡＣＳ ＡＤＡ ＡＤＡ ＡＤＰ ＡＤＰ ＡＤＳ ＡＤＳ 31/38 ＡＤＵ 31/38 ＡＤＵ 31/40 ＡＢＦ 31/40 ＡＢＦ 31/60 ＡＤＹ 31/60 ＡＤＹ // Ｃ０７Ｄ 207/34 Ｃ０７Ｄ 207/34 307/91 307/91 311/58 311/58 333/38 333/38 (72)発明者 レイシャール，ユーヴェ フランス国 06620 ポン−デュ−ループ アンシャン シュマン ドゥ フェル 73 ヴィラ ヴァルローズ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．ＲＡＲ−γタイプのレセプターの活性化によってアポプトシスを誘 発することのできる少なくとも１つの細胞群におけるアポプトシス速度を向上さ せるための製薬組成物の調製における、ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的 な少なくとも１つのアゴニストリガンドの使用。 ２．ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドが、 ６-３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル）-２-ナフタノン酸、（Ｅ ）-４-（１-ヒドロキシ-１-（５，６，７，８-テトラヒドロ-５，５，８，８-テ トラメチル-２-ナフチル）-２-プロペニル）安息香酸、４-［（Ｅ）-２-（３-（ １-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル）-１-プロペニル］安息香酸、５’ ，５’，８’,８’-テトラメチル-５’，６’，７’，８’-テトラヒドロ-［２ ，２’］ビナフタレニル-６-カルボン酸、２-（５，５，８，８-テトラメチル- ５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-ベンゾ［ｂ］チオフェン- ６-カルボン酸、４-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒ ドロ-ナフト［２，３-ｂ］チオフェン-２-イル）安息香酸、６-（５，５，８， ８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-カルボニル）ナ フタレン-２-カルボン酸、３，７-ジメチル-７-（１，２，３，４-テトラヒドロ -１，４ａ，９ｂ-トリメチル-１，４-メタノ-ジベンゾフラン-８-イル）-２，４ ，６-ヘプタトリエノール酸、６-（１，２，３，４-テトラヒドロ-１，４ａ，９ ｂ-トリメチル-１，４-メタノ-ジベンゾフラン-８-イル）-ナフタレン-２-カル ボン酸、６-［ヒドロキシイミノ-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７， ８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-メチル］ナフタレン-２-カルボン酸、 ４-［（６-ヒドロキシ-７-（１-アダマンチル）-２-ナフチル］安息香酸、５-（ ５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-アントラセン-２- イル）-チオフェン-２-カルボン酸、（−）-６-［ヒドロキシ-（５，５，８，８ -テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-メチル］- ナフタレン-２-カルボン酸、６-（３-アダマンタン-１-イル-４-prop-２-イニロ キシ-フェニル）-ナフタレン-２ -カルボン酸、４-［２-オキソ-２-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７ ，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-エトキシ］-安息香酸、４-［２-オキ ソ-２-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレ ン-２-イル）-アセチルアミノ］安息香酸、４-［２-フルオロ-２-（５，５，８ ，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-アセ チルアミノ］安息香酸、６-［３-（１-アダマンチル-４-（２-ヒドロキシプロピ ル）フェニル］-２-ナフトン酸、５-［３-オキソ-３-（５，５，８，８-テトラ メチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-プロペニル］-チ オフェン-２-カルボン酸、６-［３-（１-アダマンチル-４-（２，３-ジ-ヒドロ キシプロピル）フェニル］-２-ナフトン酸、４-［３-ヒドロキシ-（５，６，７ ，８-テトラヒドロ-５，５，８，８-テトラメチル-２-ナフチル）-１-プロピニ ル］安息香酸、４-［３-オキソ-３-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７ ，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-prop-１-イニル］安息香酸、４-［（ ３-（１-メチルシクロヘキシル）-４-ヒドロキシフェニル）エテニル］安息香酸 、４-［（Ｅ）２-（３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル-エチニル ］安息香酸、４-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル-エチニル］ 安息香酸、５-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシ-フェニルエチニル］- ２-チオフェンカルボン酸、５-［３-（１-アダマンチル）-４-メトキシフェニル エチニル］-２-チオフェンカルボン酸、４-［２-（３-tert-ブチル-４-メトキシ フェニル）プロペニル安息香酸、４-｛２-［４-メトキシ-３-（１-メチル-シク ロヘキシル）フェニル］-プロペニル｝-安息香酸、６-［３-（１-アダマンチル ）-４-（３-メトキシ-２-ヒドロキシプロピル）-フェニル］-２-ナフト酸、２- ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，６，７，８-テトラヒドロ-５，５， ８，８-テトラメチル-２-ナフチル）-１-プロピニル］安息香酸、６-（５，５， ８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イロキシ） -ナフタレン-２-カルボン酸、６-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７， ８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イルスルファニル）-ナフタレン-２-カルボン 酸、４-［２-プロポキシイミノ-２-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７ ，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-アセチルアミノ］安息香酸、６-（５ ，５，８，８-テトラメチル-５， ６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-１Ｈ-ピロール-２-カルボン酸 、１-メチル-４-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ アントラセン-２-イル）-１Ｈ-ピロール-２-カルボン酸、２-メトキシ-４-（５ ，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-アントラセン-２-イ ル）安息香酸、４-［２-ノニルオキシイミノ-２-（５，５，８，８-テトラメチ ル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）アセチルアミノ］安息 香酸、（−）-２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５，８，８-テトラ メチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-prop-１-イニル］ 安息香酸、（＋）-２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５，８，８-テ トラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-prop-１-イニ ル］安息香酸、２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５，８，８-テト ラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-but-１-イニル ］安息香酸、６-（３-ブロモ-５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テ トラヒドロ-ナフタレン-２-イロキシ）-ナフタレン-２カルボン酸、３-［（５， ６，７，８-テトラヒドロ-５，５，８，８-テトラメチル-２-ナフチル）-２Ｈ- １ベンゾピラン］-７-カルボン酸、４-［３-（３，５-ジ-tert-ブチル-４-ヒド ロキシフェニル）-prop-１-イニル］安息香酸、４-［３-（５，５，８，８-テト ラメチル-５．６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-prop-１-イニル ］安息香酸、４-［３-（５，６，７，８-テトラヒドロ-５，５，８，８-テトラ メチル-２-ナフチル）-１-プロピニル］-サリチル酸、４-［｛３-（１-アダマン チル）-４-（２-ヒドロキシエチル）フェニル｝エチニル］安息香酸、及び、４- ［｛３-（１-アダマンチル）-４-（３-ヒドロキシプロピル）フェニル｝エチニ ル］安息香酸から選択されることを特徴とする請求項１に記載の使用。 ３．ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドが、 ５０以上の比率Ｒを示すことを特徴とする請求項１または２に記載の使用。 ４．ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドが、 ６-３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル）-２-ナフタノン酸、６-（ ５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-カ ルボニル）ナフタレン-２-カルボン酸、６-（１，２，３，４-テトラヒドロ-１ ， ４ａ,９ｂ-トリメチル-１，４-メタノ-ジベンゾフラン-８-イル）-ナフタレン- ２-カルボン酸、６-［ヒドロキシイミノ-（５，５，８，８-テトラメチル-５， ６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-メチル］ナフタレン-２-カル ボン酸、５-（５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ア ントラセン-２-イル）-チオフェン-２-カルボン酸、（−）-６-［ヒドロキシ-（ ５，５，８，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イ ル）-メチル］-ナフタレン-２-カルボン酸、６-［３-（１-アダマンチル-４-（ ２-ヒドロキシプロピル）フェニル］-２-ナフトン酸、６-［３-（１-アダマンチ ル-４-（２，３-ジ-ヒドロキシプロピル）フェニル］-２-ナフトン酸、４-［３- （１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル-エチニル］安息香酸、５-［３-（ １-アダマンチル）-４-メトキシフェニルエチニル］-２-チオフェンカルボン酸 、５-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシ-フェニルエチニル］-２-チオフ ェンカルボン酸、６-［３-（１-アダマンチル）-４-（３-メトキシ-２-ヒドロキ シプロピル）-フェニル］-２-ナフト酸、１-メチル-４-（５，５，８，８-テト ラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロアントラセン-２-イル）-１Ｈ-ピロール -２-カルボン酸、（−）-２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５，８ ，８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-prop- １-イニル］安息香酸、２-ヒドロキシ-４-［３-ヒドロキシ-３-（５，５，８， ８-テトラメチル-５，６，７，８-テトラヒドロ-ナフタレン-２-イル）-but-１- イニル］安息香酸であることを特徴とする請求項１から３のいずれかに記載の使 用。 ５．ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドが、 ６-３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル）-２-ナフタノン酸である ことを特徴とする請求項４に記載の使用。 ６．製薬組成物が、アポプトシスの不十分な速度に伴う疾患または障害 の治療用である請求項１から５のいずれかに記載の使用。 ７．アポプトシスの不十分な速度に伴う疾患または障害が、癌、前癌性 の状態、自己免疫疾患、アレルギー、炎症反応、及びある種のウイルス感染から 選択されることを特徴とする請求項６に記載の使用。 ８．自己免疫疾患が、インシュリン依存性糖尿病、慢性関節リウマチ、 活性慢性肝炎、天疱瘡、多発性硬化症、筋無力症、全身紅斑性狼瘡、クローン病 、及び乾癬から選択されることを特徴とする請求項７に記載の使用。 ９．癌が、ＥＮＴ球体癌または卵巣癌であることを特徴とする請求項７ に記載の使用。 １０．アレルギーまたは炎症反応が、接触皮膚炎、アトピー性皮膚炎、 喘息、または蕁麻疹であることを特徴とする請求項７に記載の使用。 １１．製薬組成物が、移植臓器を拒絶する効果を低下させるためのもの であることを特徴とする請求項１から５のいずれかに記載の使用。 １２．化粧品組成物における、ＲＡＲ−γタイプのレセプターの活性化 によってアポプトシスを誘発することのできる少なくとも１つの皮膚の細胞群に おけるアポプトシス誘発剤としての、ＲＡＲ−γタイプのレセプタ−に特異的な 少なくとも１つのアゴニストリガンドの使用。 １３．ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドが 、請求項２に挙げた化合物から選択されることを特徴とする請求項１２に記載の 使用。 １４．化粧品に許容される媒体中に、ＲＡＲ−γタイプのレセプターに 特異的な少なくとも１つのアゴニストリガンドを含んでなり、アポプトシスを誘 発する化粧品組成物を皮膚に適用することを特徴とする、光誘発または経時的な 老化を防止する及び／またはそれと闘う化粧方法。 １５．ＲＡＲ−γタイプのレセプターに特異的なアゴニストリガンドが 、請求項２に挙げた化合物から選択されることを特徴とする請求項１４に記載の 方法。