JPH11318483A - 光学活性シクロプロパンカルボン酸の製造法 - Google Patents
光学活性シクロプロパンカルボン酸の製造法Info
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- JPH11318483A JPH11318483A JP13327298A JP13327298A JPH11318483A JP H11318483 A JPH11318483 A JP H11318483A JP 13327298 A JP13327298 A JP 13327298A JP 13327298 A JP13327298 A JP 13327298A JP H11318483 A JPH11318483 A JP H11318483A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】ピレスロイドエステルの酸成分として有用な
（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／
Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロ
パン−１−カルボン酸の工業的に有利な製造法を提供す
ること。 【解決手段】一般式 化１ 【化１】 [式中、ＲはＣ１〜Ｃ４のアルキル基を表す。]で示され
る２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
エステルに、該エステルに作用し、（１Ｒ）−トランス
−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
（Ｉ）とそのジアステレオマーのエステルとに不斉水解
する能力を有するエステラーゼを作用させ、（Ｉ）とそ
のジアステレオマーのエステルとに分割し、（Ｉ）を分
離、回収する（Ｉ）の製造法。
（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／
Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロ
パン−１−カルボン酸の工業的に有利な製造法を提供す
ること。 【解決手段】一般式 化１ 【化１】 [式中、ＲはＣ１〜Ｃ４のアルキル基を表す。]で示され
る２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
エステルに、該エステルに作用し、（１Ｒ）−トランス
−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
（Ｉ）とそのジアステレオマーのエステルとに不斉水解
する能力を有するエステラーゼを作用させ、（Ｉ）とそ
のジアステレオマーのエステルとに分割し、（Ｉ）を分
離、回収する（Ｉ）の製造法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は（１Ｒ）−トランス
−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
の製造法に関する。
−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
の製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】式
化２
化２
【化２】 で表される２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−
クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カ
ルボン酸は、優れた殺虫効力を有するいわゆる合成ピレ
スロイドと総称されるエステルの酸成分を構成する。こ
れらのシクロプロパンカルボン酸にはそのＣ1位および
Ｃ3位に不斉炭素が存在し、4種の異性体が存在する。こ
のような各異性体が酸成分を構成するピレスロイドの殺
虫効力は対象害虫、製剤形の種類等によって異なること
から、目的とする上記のシクロプロパンカルボン酸の特
定の異性体を工業的に有利に製造する方法の開発が切望
されている。
クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カ
ルボン酸は、優れた殺虫効力を有するいわゆる合成ピレ
スロイドと総称されるエステルの酸成分を構成する。こ
れらのシクロプロパンカルボン酸にはそのＣ1位および
Ｃ3位に不斉炭素が存在し、4種の異性体が存在する。こ
のような各異性体が酸成分を構成するピレスロイドの殺
虫効力は対象害虫、製剤形の種類等によって異なること
から、目的とする上記のシクロプロパンカルボン酸の特
定の異性体を工業的に有利に製造する方法の開発が切望
されている。
【０００３】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、このよう
な状況の下、（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−
３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビニル）
シクロプロパン−１−カルボン酸の工業的に有利な製造
法について鋭意検討を重ねた結果、アルスロバクタ−
（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）属に属する微生物由来の
エステラ−ゼが、一般式 化３
な状況の下、（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−
３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビニル）
シクロプロパン−１−カルボン酸の工業的に有利な製造
法について鋭意検討を重ねた結果、アルスロバクタ−
（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）属に属する微生物由来の
エステラ−ゼが、一般式 化３
【化３】 [式中、ＲはＣ１〜Ｃ４のアルキル基を表す。]で示され
る２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
エステルに作用してこれを不斉加水分解しうることを見
出し、本発明に至った。即ち本発明は、上記一般式 化
３で示される２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２
−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−
カルボン酸エステルに、該エステルに作用し、（１Ｒ）
−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２
−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−
カルボン酸とそのジアステレオマーのエステルとに不斉
水解する能力を有するエステラーゼを作用させ、（１
Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−
（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−
１−カルボン酸とそのジアステレオマーのエステルとに
分割し、（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−
（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビニル）シク
ロプロパン−１−カルボン酸を分離、回収する（１Ｒ）
−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２
−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−
カルボン酸の製造法を提供するものである。
る２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
エステルに作用してこれを不斉加水分解しうることを見
出し、本発明に至った。即ち本発明は、上記一般式 化
３で示される２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２
−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−
カルボン酸エステルに、該エステルに作用し、（１Ｒ）
−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２
−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−
カルボン酸とそのジアステレオマーのエステルとに不斉
水解する能力を有するエステラーゼを作用させ、（１
Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−
（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−
１−カルボン酸とそのジアステレオマーのエステルとに
分割し、（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−
（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビニル）シク
ロプロパン−１−カルボン酸を分離、回収する（１Ｒ）
−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２
−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−
カルボン酸の製造法を提供するものである。
【０００４】
【発明の実施の形態】本発明の原料として用いられる前
記一般式 化３で示される２，２−ジメチル−３−（Ｅ
／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプ
ロパン−１−カルボン酸エステルは、例えば、Ｃｈｅｍ
ｉｃａｌ Ｌｉｓｔｙ ５２，６８８（１９５８）に記載
の方法に準じて製造することができ、メチルエステル、
エチルエステル、プロピルエステル、ブチルエステル等
が使用できるが、メチルエステル、エチルエステルが好
適である。
記一般式 化３で示される２，２−ジメチル−３−（Ｅ
／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプ
ロパン−１−カルボン酸エステルは、例えば、Ｃｈｅｍ
ｉｃａｌ Ｌｉｓｔｙ ５２，６８８（１９５８）に記載
の方法に準じて製造することができ、メチルエステル、
エチルエステル、プロピルエステル、ブチルエステル等
が使用できるが、メチルエステル、エチルエステルが好
適である。
【０００５】本発明に用いることができるエステラーゼ
は、上記の２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−
クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カ
ルボン酸エステルに作用し、（１Ｒ）−トランス−２，
２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フ
ルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸とその
ジアステレオマーのエステルとに不斉水解する能力を有
するエステラーゼであり、例えば、アルスロバクター属
に属し前記の不斉水解能を有する微生物由来のエステラ
ーゼをあげることができる。かかるエステラーゼは、例
えば、アルスロバクタ−（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）
ＳＣ−６−９８−２８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−３６５８；
特開平４−２３４９９１号公報に記載のＦＥＲＭ Ｐ−
１１８５１号より国際寄託へ移管）等から得ることがで
き、より好ましくは、上記エステラ−ゼをコードする遺
伝子が導入され該エステラーゼを産生できる遺伝子組換
え微生物、具体的には特開平５−５６７８７号公報に記
載の遺伝子組換え微生物等から得ることができる。本発
明に用いうるエステラーゼを上記のような微生物に産生
させるには、通常、常法に従い、滅菌した液体培地に微
生物を接種し、２０〜４０℃で１〜８日間、好気条件下
で培養するとよい。また、培養中に培地を加える流加培
養等を行うこともできる。培地の組成については、通常
の微生物の培養に用いられるもので、上記微生物により
利用可能なものであれば特に問題なく、例えば炭素源お
よび窒素源として、グルコ−ス、グリセロ−ル、澱粉、
デキストリン、糖蜜、油脂類、大豆粉、コ−ンスティ−
プリカ−、酵母エキス、肉エキス、ポリペプトン等の動
植物蛋白等の加水分解物等を用いることができる。ま
た、有機ないし無機塩としては、カリウム、ナトリウ
ム、マグネシウム、カルシウム、鉄、マンガン、コバル
ト、亜鉛等の塩化物、硫酸塩類、酢酸塩類、炭酸塩類お
よびリン酸塩類、具体的には、塩化カリウム、塩化ナト
リウム、塩化コバルト、硫酸マグネシウム、硫酸第一
鉄、硫酸マンガン、硫酸亜鉛、硫酸銅、酢酸ナトリウ
ム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸水素1カ
リウム、リン酸水素2カリウム、リン酸水素1ナトリウ
ム、リン酸水素2ナトリウム等をあげることができ、硫
酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム
等のアンモニウム塩、尿素等も使用することができる。
また、場合によっては、培地中に脂肪酸エステル類また
は前記の一般式 化３で示されるエステル化合物を添加
することも可能である。遺伝子組換え微生物の場合は、
微生物の対数増殖期の適当な時期にイソプロピルチオ−
β−Ｄ−ガラクトシド（ＩＰＴＧ）等の遺伝子発現誘導
剤を添加してもよい。
は、上記の２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−
クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カ
ルボン酸エステルに作用し、（１Ｒ）−トランス−２，
２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フ
ルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸とその
ジアステレオマーのエステルとに不斉水解する能力を有
するエステラーゼであり、例えば、アルスロバクター属
に属し前記の不斉水解能を有する微生物由来のエステラ
ーゼをあげることができる。かかるエステラーゼは、例
えば、アルスロバクタ−（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）
ＳＣ−６−９８−２８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−３６５８；
特開平４−２３４９９１号公報に記載のＦＥＲＭ Ｐ−
１１８５１号より国際寄託へ移管）等から得ることがで
き、より好ましくは、上記エステラ−ゼをコードする遺
伝子が導入され該エステラーゼを産生できる遺伝子組換
え微生物、具体的には特開平５−５６７８７号公報に記
載の遺伝子組換え微生物等から得ることができる。本発
明に用いうるエステラーゼを上記のような微生物に産生
させるには、通常、常法に従い、滅菌した液体培地に微
生物を接種し、２０〜４０℃で１〜８日間、好気条件下
で培養するとよい。また、培養中に培地を加える流加培
養等を行うこともできる。培地の組成については、通常
の微生物の培養に用いられるもので、上記微生物により
利用可能なものであれば特に問題なく、例えば炭素源お
よび窒素源として、グルコ−ス、グリセロ−ル、澱粉、
デキストリン、糖蜜、油脂類、大豆粉、コ−ンスティ−
プリカ−、酵母エキス、肉エキス、ポリペプトン等の動
植物蛋白等の加水分解物等を用いることができる。ま
た、有機ないし無機塩としては、カリウム、ナトリウ
ム、マグネシウム、カルシウム、鉄、マンガン、コバル
ト、亜鉛等の塩化物、硫酸塩類、酢酸塩類、炭酸塩類お
よびリン酸塩類、具体的には、塩化カリウム、塩化ナト
リウム、塩化コバルト、硫酸マグネシウム、硫酸第一
鉄、硫酸マンガン、硫酸亜鉛、硫酸銅、酢酸ナトリウ
ム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸水素1カ
リウム、リン酸水素2カリウム、リン酸水素1ナトリウ
ム、リン酸水素2ナトリウム等をあげることができ、硫
酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム
等のアンモニウム塩、尿素等も使用することができる。
また、場合によっては、培地中に脂肪酸エステル類また
は前記の一般式 化３で示されるエステル化合物を添加
することも可能である。遺伝子組換え微生物の場合は、
微生物の対数増殖期の適当な時期にイソプロピルチオ−
β−Ｄ−ガラクトシド（ＩＰＴＧ）等の遺伝子発現誘導
剤を添加してもよい。
【０００６】本発明の製造法において、前記一般式 化
３で示される２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２
−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−
カルボン酸エステルの不斉加水分解反応は、該エステル
と上記のエステラーゼを混合し、攪拌または振とうする
ことにより行われる。使用しうるエステラーゼとして
は、例えば、上記微生物を培養した培養液、菌体懸濁
液、菌体破砕液、エステラ−ゼ抽出液もしくは濃縮液な
どのエステラ−ゼ含有物、またはこれらの処理物、例え
ば粗製エステラ−ゼもしくは精製エステラ−ゼを含有す
る水溶液等をあげることができ、必要に応じて、微生物
またはエステラ−ゼを固定化して用いることも可能であ
る。反応温度は、使用されるエステラーゼの反応至適温
度および熱安定性にもよるが、一般に２０〜７０℃が適
当であり、あまり高温ではエステラーゼの安定性が低下
しやすいことおよび低温では反応速度が遅いことから３
０〜６０℃が好ましい。反応中のｐＨは、使用されるエ
ステラーゼの反応至適ｐＨおよび安定性にもよるが、一
般にｐＨ４〜１１が適当であり、ｐＨ７〜１０であるこ
とが望ましい。次にこのようにして不斉加水分解反応を
行った後、生成した（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメ
チル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビ
ニル）シクロプロパン−１−カルボン酸と未反応のエス
テルとを分離回収する。この分離回収に際しては溶媒抽
出、カラムクロマトグラフィ−、分別蒸留などの操作を
適宜採用することができる。例えば、反応液をメチルイ
ソブチルケトン、酢酸エチル、エ−テルまたはトルエン
などの有機溶媒で抽出することにより、未反応のエステ
ルを分離取得する。次いで水層をろ過した後、塩酸、硫
酸などの無機酸または酢酸などの有機酸を加えてｐＨを
酸性とし、メチルイソブチルケトン、酢酸エチル、エ−
テルまたはトルエンなどの有機溶媒で抽出し、油層をろ
過した後、有機溶媒を留去することにより、（１Ｒ）−
トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−
クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カ
ルボン酸を回収する。なお、未反応のエステルはラセミ
化などの処理を施した後、本発明の製造法における原料
として利用することができ、また、目的により、これを
加水分解等の処理を施した後、ピレスロイドエステルに
導くこともできる。
３で示される２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２
−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−
カルボン酸エステルの不斉加水分解反応は、該エステル
と上記のエステラーゼを混合し、攪拌または振とうする
ことにより行われる。使用しうるエステラーゼとして
は、例えば、上記微生物を培養した培養液、菌体懸濁
液、菌体破砕液、エステラ−ゼ抽出液もしくは濃縮液な
どのエステラ−ゼ含有物、またはこれらの処理物、例え
ば粗製エステラ−ゼもしくは精製エステラ−ゼを含有す
る水溶液等をあげることができ、必要に応じて、微生物
またはエステラ−ゼを固定化して用いることも可能であ
る。反応温度は、使用されるエステラーゼの反応至適温
度および熱安定性にもよるが、一般に２０〜７０℃が適
当であり、あまり高温ではエステラーゼの安定性が低下
しやすいことおよび低温では反応速度が遅いことから３
０〜６０℃が好ましい。反応中のｐＨは、使用されるエ
ステラーゼの反応至適ｐＨおよび安定性にもよるが、一
般にｐＨ４〜１１が適当であり、ｐＨ７〜１０であるこ
とが望ましい。次にこのようにして不斉加水分解反応を
行った後、生成した（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメ
チル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビ
ニル）シクロプロパン−１−カルボン酸と未反応のエス
テルとを分離回収する。この分離回収に際しては溶媒抽
出、カラムクロマトグラフィ−、分別蒸留などの操作を
適宜採用することができる。例えば、反応液をメチルイ
ソブチルケトン、酢酸エチル、エ−テルまたはトルエン
などの有機溶媒で抽出することにより、未反応のエステ
ルを分離取得する。次いで水層をろ過した後、塩酸、硫
酸などの無機酸または酢酸などの有機酸を加えてｐＨを
酸性とし、メチルイソブチルケトン、酢酸エチル、エ−
テルまたはトルエンなどの有機溶媒で抽出し、油層をろ
過した後、有機溶媒を留去することにより、（１Ｒ）−
トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−
クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カ
ルボン酸を回収する。なお、未反応のエステルはラセミ
化などの処理を施した後、本発明の製造法における原料
として利用することができ、また、目的により、これを
加水分解等の処理を施した後、ピレスロイドエステルに
導くこともできる。
【０００７】
【実施例】以下、実施例および参考例により、本発明を
より詳細に説明するが、本発明は、これらに限定される
ものではない。
より詳細に説明するが、本発明は、これらに限定される
ものではない。
【０００８】実施例 ５００ｍｌ三角フラスコに液体培地（水１Ｌにグリセロ
−ル５ｇ、酵母エキス６ｇ、リン酸１カリウム９ｇおよ
びリン酸2カリウム４ｇを溶解し、ｐＨ７．０とす
る。）１００ｍｌを入れて滅菌した後、アンピシリンを
５０μｇ／ｍｌになるように加え、後記参考例記載のア
ルスロバクタ−ＳＣ−６−９８−２８株由来のエステラ
−ゼ遺伝子導入大腸菌株を斜面培養から１白金耳接種
し、３０℃で２４時間回転振とう培養した。次に３Ｌ容
の小型培養槽（丸菱バイオエンジ社製、ＭＤＬ型）に滅
菌した液体培地（水１Ｌにグリセロ−ル１５ｇ、酵母エ
キス２５ｇ、リン酸１カリウム０．４ｇ、硫酸マグネシ
ウム２ｇおよび硫酸第一鉄０．１ｇを溶解し、ｐＨ７．
０とする。）１５００ｍｌを入れ、これに上記の培養液
１５ｍｌを接種した。３０℃で通気攪拌培養し、対数増
殖期中期（培養開始１０〜１５時間後）にＩＰＴＧ（イ
ソプロピルチオ−β−Ｄ−ガラクトシド）を終濃度１ｍ
Ｍとなるように培養液に添加した後、滅菌した培地を流
加し、さらに培養を続け４０時間培養し、培養液を得
た。この培養液の希釈液（０．５Ｍ炭酸緩衝液、ｐＨ
９．５）８０ｍｌに２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）
−（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン
−１−カルボン酸メチルエステル（１Ｒ体／１Ｓ体＝５
０／５０、トランス体／シス体＝９８／２）４ｇを加え
てｐＨ９．５となるよう調整しながら４５℃で２０時間
攪拌した。ここで反応液の一部を取り塩酸を加え酸性と
した後、酢酸エチルで抽出し、該抽出物に内部標準物質
（けい皮酸メチル）を加えガスクロマトグラフィ−（カ
ラム：ＨＲ２０−Ｍ ０．５３φ ３０ｍ １ミクロン
ＵＬＢＯＮ製）により分析し、加水分解率を求めたとこ
ろ４８％であった。残りの反応液にトルエンを加え、抽
出分液しトルエン層を分離除去した。次いで水層をろ過
し、塩酸を加え酸性とした後トルエンを加え抽出分液
し、トルエン層からトルエンを濃縮留去し、２，２−ジ
メチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロ
ビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸１．６ｇを得
た。この２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−ク
ロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カル
ボン酸を液体クロマトグラフィ−（カラム：ＣＨＩＲＡ
ＬＣＥＬ ＯＤ ４．６φ×２５０ｍｍ ダイセル製）
で分析し立体異性体比を求めたところ、１Ｒ−トランス
体／１Ｓ−トランス体／１Ｒ−シス体／１Ｓ−シス体＝
１００／０／０／０であった。
−ル５ｇ、酵母エキス６ｇ、リン酸１カリウム９ｇおよ
びリン酸2カリウム４ｇを溶解し、ｐＨ７．０とす
る。）１００ｍｌを入れて滅菌した後、アンピシリンを
５０μｇ／ｍｌになるように加え、後記参考例記載のア
ルスロバクタ−ＳＣ−６−９８−２８株由来のエステラ
−ゼ遺伝子導入大腸菌株を斜面培養から１白金耳接種
し、３０℃で２４時間回転振とう培養した。次に３Ｌ容
の小型培養槽（丸菱バイオエンジ社製、ＭＤＬ型）に滅
菌した液体培地（水１Ｌにグリセロ−ル１５ｇ、酵母エ
キス２５ｇ、リン酸１カリウム０．４ｇ、硫酸マグネシ
ウム２ｇおよび硫酸第一鉄０．１ｇを溶解し、ｐＨ７．
０とする。）１５００ｍｌを入れ、これに上記の培養液
１５ｍｌを接種した。３０℃で通気攪拌培養し、対数増
殖期中期（培養開始１０〜１５時間後）にＩＰＴＧ（イ
ソプロピルチオ−β−Ｄ−ガラクトシド）を終濃度１ｍ
Ｍとなるように培養液に添加した後、滅菌した培地を流
加し、さらに培養を続け４０時間培養し、培養液を得
た。この培養液の希釈液（０．５Ｍ炭酸緩衝液、ｐＨ
９．５）８０ｍｌに２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）
−（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン
−１−カルボン酸メチルエステル（１Ｒ体／１Ｓ体＝５
０／５０、トランス体／シス体＝９８／２）４ｇを加え
てｐＨ９．５となるよう調整しながら４５℃で２０時間
攪拌した。ここで反応液の一部を取り塩酸を加え酸性と
した後、酢酸エチルで抽出し、該抽出物に内部標準物質
（けい皮酸メチル）を加えガスクロマトグラフィ−（カ
ラム：ＨＲ２０−Ｍ ０．５３φ ３０ｍ １ミクロン
ＵＬＢＯＮ製）により分析し、加水分解率を求めたとこ
ろ４８％であった。残りの反応液にトルエンを加え、抽
出分液しトルエン層を分離除去した。次いで水層をろ過
し、塩酸を加え酸性とした後トルエンを加え抽出分液
し、トルエン層からトルエンを濃縮留去し、２，２−ジ
メチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロ
ビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸１．６ｇを得
た。この２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−ク
ロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カル
ボン酸を液体クロマトグラフィ−（カラム：ＣＨＩＲＡ
ＬＣＥＬ ＯＤ ４．６φ×２５０ｍｍ ダイセル製）
で分析し立体異性体比を求めたところ、１Ｒ−トランス
体／１Ｓ−トランス体／１Ｒ−シス体／１Ｓ−シス体＝
１００／０／０／０であった。
【０００９】参考例 上記実施例で使用したアルスロバクタ−ＳＣ−６−９８
−２８株由来のエステラ−ゼ遺伝子導入大腸菌株は特開
平５−５６７８７号公報記載の方法に準じて調製した。
即ち、特開平５−５６７８７号公報記載のアルスロバク
ターＳＣ−６−９８−２８株由来のエステラーゼ遺伝子
を含むプラスミドｐＡＧＥ−１を、制限酵素Ｎｓｐ(752
4)ＶおよびＨｉｎｄIIIで消化することによりエステラ
ーゼ遺伝子の翻訳領域を含むＤＮＡ断片を切り出し、こ
れを特開平５−５６７８７号公報に記載のようにエステ
ラーゼ遺伝子の開始コドンとその近傍のＤＮＡ配列を変
換するために合成したＤＮＡ断片、およびｌａｃプロモ
ーターを有する発現ベクターｐＵＣ１１８（宝酒造株式
会社）の制限酵素ＢａｍＨI、ＨｉｎｄIII消化物とライ
ゲーションした。この様にして、ｌａｃプロモーターの
下流にアルスロバクターＳＣ−６−９８−２８株由来の
エステラーゼ遺伝子を有する大腸菌用発現プラスミドを
調製し、これをエシェリキア コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃ
ｈｉａ ｃｏｌｉ）ＪＭ１０５株に導入した。
−２８株由来のエステラ−ゼ遺伝子導入大腸菌株は特開
平５−５６７８７号公報記載の方法に準じて調製した。
即ち、特開平５−５６７８７号公報記載のアルスロバク
ターＳＣ−６−９８−２８株由来のエステラーゼ遺伝子
を含むプラスミドｐＡＧＥ−１を、制限酵素Ｎｓｐ(752
4)ＶおよびＨｉｎｄIIIで消化することによりエステラ
ーゼ遺伝子の翻訳領域を含むＤＮＡ断片を切り出し、こ
れを特開平５−５６７８７号公報に記載のようにエステ
ラーゼ遺伝子の開始コドンとその近傍のＤＮＡ配列を変
換するために合成したＤＮＡ断片、およびｌａｃプロモ
ーターを有する発現ベクターｐＵＣ１１８（宝酒造株式
会社）の制限酵素ＢａｍＨI、ＨｉｎｄIII消化物とライ
ゲーションした。この様にして、ｌａｃプロモーターの
下流にアルスロバクターＳＣ−６−９８−２８株由来の
エステラーゼ遺伝子を有する大腸菌用発現プラスミドを
調製し、これをエシェリキア コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃ
ｈｉａ ｃｏｌｉ）ＪＭ１０５株に導入した。
【００１０】
【発明の効果】本発明により、ピレスロイドエステルの
酸成分として有用な（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメ
チル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビ
ニル）シクロプロパン−１−カルボン酸を工業的にも有
利に製造することが可能となる。
酸成分として有用な（１Ｒ）−トランス−２，２−ジメ
チル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−２−フルオロビ
ニル）シクロプロパン−１−カルボン酸を工業的にも有
利に製造することが可能となる。
Claims (3)
- 【請求項１】一般式 化１ 【化１】 [式中、ＲはＣ１〜Ｃ４のアルキル基を表す。]で示され
る２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
エステルに、該エステルに作用し、（１Ｒ）−トランス
−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ−
２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン酸
とそのジアステレオマーのエステルとに不斉水解する能
力を有するエステラーゼを作用させ、（１Ｒ）−トラン
ス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−（２−クロロ
−２−フルオロビニル）シクロプロパン−１−カルボン
酸とそのジアステレオマーのエステルとに分割し、（１
Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−
（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−
１−カルボン酸を分離、回収することを特徴とする（１
Ｒ）−トランス−２，２−ジメチル−３−（Ｅ／Ｚ）−
（２−クロロ−２−フルオロビニル）シクロプロパン−
１−カルボン酸の製造法。 - 【請求項２】エステラーゼが、アルスロバクター属に属
する微生物由来のエステラーゼである請求項１記載の製
造法。 - 【請求項３】エステラーゼが、アルスロバクターＳＣ−
６−９８−２８株（ＦＥＲＭ ＢＰ−３６５８）由来の
エステラーゼである請求項１または２記載の製造法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13327298A JPH11318483A (ja) | 1998-05-15 | 1998-05-15 | 光学活性シクロプロパンカルボン酸の製造法 |
| IN519MA1999 IN187779B (ja) | 1998-05-15 | 1999-05-03 | |
| EP99109557A EP0959139A1 (en) | 1998-05-15 | 1999-05-12 | Method for producing optically active cyclopropanecarboxylic acid |
| US09/310,920 US6207429B1 (en) | 1998-05-15 | 1999-05-13 | Method for producing optically active cyclopropanecarboxylic acid |
| CN99106485A CN1262330A (zh) | 1998-05-15 | 1999-05-13 | 具有光学活性的环丙烷羧酸的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13327298A JPH11318483A (ja) | 1998-05-15 | 1998-05-15 | 光学活性シクロプロパンカルボン酸の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11318483A true JPH11318483A (ja) | 1999-11-24 |
Family
ID=15100758
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13327298A Pending JPH11318483A (ja) | 1998-05-15 | 1998-05-15 | 光学活性シクロプロパンカルボン酸の製造法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11318483A (ja) |
| IN (1) | IN187779B (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006325504A (ja) * | 2005-05-27 | 2006-12-07 | Sumitomo Chemical Co Ltd | 光学活性シクロプロパンカルボン酸の製造方法 |
-
1998
- 1998-05-15 JP JP13327298A patent/JPH11318483A/ja active Pending
-
1999
- 1999-05-03 IN IN519MA1999 patent/IN187779B/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006325504A (ja) * | 2005-05-27 | 2006-12-07 | Sumitomo Chemical Co Ltd | 光学活性シクロプロパンカルボン酸の製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IN187779B (ja) | 2002-06-22 |
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