JPH11193247A

JPH11193247A - 造影剤としてのエマルジョンおよびその使用方法

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Publication number: JPH11193247A
Application number: JP10292638A
Authority: JP
Inventors: Rolf Lohrmann; ローマンロルフ; Kenneth J Widder; ジェイ．ワイダーケネス; Ashwin M Krishnan; エム．クリシュナンアシェウィン; Dung K Hong; ケイ．ホンドン; Jialun Meng; メンジアルン
Original assignee: Molecular Biosystems Inc
Current assignee: Molecular Biosystems Inc
Priority date: 1993-06-04
Filing date: 1998-10-14
Publication date: 1999-07-21
Also published as: EP0701451B1; EP0852145A2; GR3027727T3; US5716597A; US5536489A; DK0701451T3; EP0852145A3; EP0701451A1; WO1994028939A1; ATE169828T1; US6030603A; JP3016592B2; ES2120053T3; DE69412610D1; CA2164410C; JPH08509984A; DE69412610T2

Abstract

(57)【要約】本発明によれば、気体形成性化学物質が液体状態で安定
であり得、そして超音波エネルギーを与えたときに微小
気泡を生成する、部位特異的なエマルジョンが提供され
る。【課題】超音波画像化剤として使用するためのエマル
ジョンであって、少なくとも１種の水不溶性の気体形成
性化学物質および少なくとも１種の安定剤を含有し、該
エマルジョンが超音波エネルギーの印加により微小気泡
を形成し得る、エマルジョン：ただし、該エマルジョン
は、37℃未満の沸点を有する、少なくとも１種の水不溶
性の気体形成性化学物質と、37℃において、大気圧で、
かつ超音波エネルギーへの曝露の前に、該気体形成性化
学物質を液体状態に維持するのに十分な量の疎水性化合
物または両親媒性化合物を含む、少なくとも１種の安定
剤とを共に含有しない。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は診断用超音波イメー
ジングおよびそれに用いる造影剤に関する。より詳細に
は、超音波を照射したときに気体の微小気泡を形成し得
るエマルジョンを含有する超音波造影剤、ならびにその
診断用イメージングにおける使用のための方法に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】診断用超音波イメージングは、関心のあ
る領域に音波エネルギーの焦点を当て得、そしてその画
像を形成するように音波エネルギーを反射させ得るとい
う原理に基づく。使用される超音波スキャナーを、画像
化すべき領域に重ねて体表面上に置き、そして音波をそ
の領域に向けて発射する。スキャナーは反射した音波を
検出し、そしてこのデータを画像に変換する。超音波エ
ネルギーが物質を伝播するとき、反射するエネルギーの
量は、伝播（ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ）速度およびそ
の物質の音響学的性質に依存する。物質の音響学的性質
（例えば、音響的インピーダンス）の変化は、液体−固
体または液体−気体のような異なる物質の界面において
最も顕著になる。従って、超音波エネルギーが媒体を通
って発射されるとき、音響学的性質の変化は、超音波ス
キャナーによって検出するためのより強い音波反射シグ
ナルを与える。

【０００３】特に重要な超音波画像化剤（ｉｍａｇｉｎ
ｇａｇｅｎｔ）は、気体含有物質から構成され、これ
は循環系に注入されると、向上した音の反射および画像
の鮮明度を提供する。気体含有画像化剤のひとつのクラ
スは、生体適合性物質から形成される殻によって取り巻
かれた気体の微小球体から成る。これらのもっとも代表
的なものはＡＬＢＵＮＥＸ（登録商標）（Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，Ｃ
ａｌｉｆｏｒｎｉａ：米国特許第４，５７２，２０５
号；第４，７１８，４３３号；第４，７４４，９５８
号；４，８４４，８５２号；および第４，９５７，６５
６号）であり、これはアルブミンの殻で取り巻かれた空
気の微小球体である。他のこのような微小球体画像化剤
は、Ｈｏｌｍｅｓらによって記載されている。これらの
微小球体は、ミセルを形成する、非タンパク質性（ｎｏ
ｎ−ｐｒｏｔｅｉｎａｃｅｏｕｓ）の、架橋または重合
した両親媒性部分（ＰＣＴＷＯ９２／１７２１２）、
または架橋したタンパク質（ＰＣＴＷＯ９２／１７２
１３）から成り、これらは両方とも、窒素、ＳＦ₆、お
よびＣＦ₄のような気体をカプセル化する。

【０００４】超音波画像化剤の別のクラスは、マイクロ
カプセルマトリックス中に製造時に取り込まれた気体を
含む、固体または半固体物質のマイクロカプセルとして
記述され得る。Ｇｌａｊｉｃｈら（米国特許第５，１４
７，６３１号）は、Ｏ₂、ＣＦ₄、パーフルオロエタン、
およびアルゴンのような取り込まれた気体または液体を
含む、無機材料の多孔性粒子の形成を記載している。Ｅ
ｒｂｅｌら（米国特許第５，１３７，９２８号）は、空
気、アルゴン、およびクリプトンのような気体を取り込
むことができる、ポリアミノ−ジカルボン酸−共（ｃ
ｏ）−イミド誘導体を記載している。Ａｌｂａｙｒａｋ
ら（欧州特許明細書第０３５７１６３号）は、窒
素、クリプトン、ＳＦ₆、シクロプロパン、およびペン
タンのような気体を取り込んだ、結晶複合体を記載して
いる。これはタンパク質またはグリセロールのような水
性ビヒクル中に溶解し、気泡の放出を引き起こす。この
水性ビヒクルは、溶液中に複数の微小気泡を有するよう
になり、次いで、注入可能な超音波画像化剤として使用
されるための準備ができる。Ｓｔｅｉｎら（欧州特許明
細書第３２７４９０号）は、気体または沸点６０℃未
満の液体を取り込んだ、アミロースまたは合成の生分解
性ポリマーを含む微小粒子を記載している。

【０００５】気体含有画像化剤の別のクラスは、脂質ベ
シクルまたはリポソームである。Ｕｎｇｅｒ（米国特許
第５，０８８，１４９号および第５，１２３，４１４
号）は、リポソーム中にカプセル化された気体または気
体前駆体、より詳細にはｐＨ勾配によって気体前駆体を
活性化するためのイオノホアを含むリポソームを記載し
ている。Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎら（ＰＣＴＷＯ９２／１
５８２４）は、気体が充填されたセンターコアを有する
脂質ベシクルを記載している。

【０００６】画像化剤のさらに他のクラスは、溶液中の
気体の微小気泡から構成されている。例えば、Ｔｉｃｋ
ｎｅｒら（米国特許第４，２７６，８８５号）は、液化
ゼラチン中に分散した微小気泡を記載している。より最
近、Ｑｕａｙ（ＰＣＴＷＯ９３／０５８１９）は、溶
液中に選択された気体の微小気泡を含有する超音波画像
化剤を記載している。特定の実施態様において、Ｑｕａ
ｙは、デカフルオロブタンの気体−液体エマルジョンの
形成を記載している。この文献には、生体適合性の気体
の水性分散体を含有する画像化剤もまた開示されてい
る。これらの気体のうちのいくつかは室温で気体状であ
り、そして他の気体は、画像化される被検体の体温にお
いて気体化する。

【０００７】超音波画像化剤としての気体の効率は、
Ｊ．ＯｐｈｉｒおよびＫ．Ｊ．ｐａｒｋｅｒ、超音波診
断における造影剤、ＵｌｔｒａｓｏｕｎｄｉｎＭｅｄ
ｉｃｅｎｅａｎｄＢｉｏｌｏｇｙ（１９８９）、１
５（４）巻、３１９〜３３３頁、に記載されている。し
かし、インビボおよびインビトロにおいて気体が充分な
持続性に欠けること、および静脈系中に気体を導入する
ことによる毒性という、気体を超音波画像化剤として使
用する欠点は存在し続けている。

【０００８】本発明は、部位特異的（ｓｉｔｅｓｐｅｃ
ｉｆｉｃ）水中油型エマルジョンに関し、そしてそれは
気体形成性化学物質のエマルジョンが液体状態で安定で
あり得、そして超音波エネルギーを与えたときに微小気
泡を生成するという、予期せぬ知見に基づいている。こ
の利点は、このようなエマルジョンが、前述の気体含有
画像化剤の大部分よりも安定であり、そして超音波エネ
ルギーを与えたときに微小気泡を形成する能力のため
に、部位特異的になり、そして静脈系に導入する気体の
全体量が少なくてすむため本来毒性が低いことである。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】気体形成性化学物質が
液体状態で安定であり得、そして超音波エネルギーを与
えたときに微小気泡を生成する、部位特異的エマルジョ
ンを提供すること。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明は、超音波画像化
剤として使用するためのエマルジョンであって、少なく
とも１種の水不溶性の気体形成性化学物質および少なく
とも１種の安定剤を含有し、該エマルジョンが超音波エ
ネルギーの印加により微小気泡を形成し得る、エマルジ
ョンであって、３７℃未満の沸点を有する、少なくとも
１種の水不溶性の気体形成性化学物質と、３７℃におい
て、大気圧で、かつ超音波エネルギーへの曝露の前に、
該気体形成性化学物質を液体状態に維持するのに十分な
量の疎水性化合物または両親媒性化合物を含む、少なく
とも１種の安定剤とを共に含有しない、エマルジョンに
関する。

【００１１】好適な実施態様では、上記エマルジョンに
おいて、上記安定剤が疎水性化合物である。

【００１２】好適な実施態様では、上記エマルジョンが
界面活性剤を含む。

【００１３】好適な実施態様では、上記エマルジョンに
おいて、上記安定剤が両親媒性化合物である。

【００１４】好適な実施態様では、上記エマルジョンに
おいて、上記両親媒性化合物が、

【００１５】

【化２】であり、該化合物の平均分子量が８３５０であるよう
に、平均値ｎ＝７５および平均値ｐ＝３０である。

【００１６】好適な実施態様では、上記エマルジョンが
増粘剤を含む。

【００１７】好適な実施態様では、上記エマルジョンが
抗酸化剤を含む。

【００１８】好適な実施態様では、上記エマルジョン
が、該エマルジョンに器官または組織の標的特異性を与
える化合物を含む。

【００１９】本発明はまた、上記のエマルジョンを含む
送達ビヒクルを含有する、超音波画像化剤に関する。

【００２０】好適な実施態様では、上記超音波画像化剤
において、上記送達ビヒクルが、天然ポリマーマトリッ
クス、合成ポリマーマトリックス、またはリポソームか
らなる群から選択される。

【００２１】好適な実施態様では、上記超音波画像化剤
において、上記天然ポリマーマトリックスが、アルブミ
ンマトリックスである。

【００２２】好適な実施態様では、上記エマルジョンに
おいて、上記水不溶性の気体形成性化学物質が、ノナフ
ルオロ−ｔ−ブチルメタンである。

【００２３】好適な実施態様では、上記エマルジョンに
おいて、上記水不溶性の気体形成性化学物質が、パーフ
ルオロペンタンであり、そして上記安定剤がレシチンで
ある。

【００２４】本発明はまた、超音波画像において組織お
よび器官のコントラストを増強するための組成物であっ
て、（ａ）少なくとも１種の水不溶性の気体形成性化学
物質であって、画像化される動物の体温より低い沸点を
有し、かつ該動物の体温において気体を形成し得る、気
体形成性化学物質、（ｂ）少なくとも１種の安定剤であ
って、該気体形成性化学物質よりも高い沸点を有し、か
つ該気体形成性化学物質の沸点よりも高い温度において
該気体形成性化学物質を液体状態で維持し得る、安定
剤、および（ｃ）水、を含有し、該組成物が超音波エネ
ルギーに曝されると、該気体形成性化学物質が気化され
て気体の微小気泡を形成し得る、組成物に関する。

【００２５】本発明はまた、超音波画像において組織お
よび器官のコントラストを増強するための、上記のいず
れかに記載のエマルジョンまたは画像化剤の使用であっ
て、該エマルジョンまたは画像化剤が、充分な超音波エ
ネルギーの印加によって気体の微小気泡を形成する、使
用に関する。

【００２６】本発明は、超音波画像化剤として使用され
得るエマルジョンを提供する。このエマルジョンは、少
なくとも１種の水不溶性の気体形成性化学物質および少
なくとも１種の安定剤から作製される。このエマルジョ
ンは、超音波エネルギーを印加すると、気体の微小気泡
を形成し得る。安定剤は、気体形成性化学物質より沸点
が高い、疎水性化合物または両親媒性化合物のいずれか
であり、そして気体形成性化学物質と共にエマルジョン
中に存在しているときに、超音波エネルギーが印加され
るまで、安定剤（気体形成性化学物質を液体状態で維持
する）として作用する化合物である。安定剤は、気体形
成性化学物質の有効沸点（ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｂｏｉ
ｌｉｎｇｐｏｉｎｔ）を上昇させ、それによって、気
体形成性化学物質が大気圧（７６０ｎｍ）におけるその
沸点を超える温度に到達するまでその気化を防ぐ。この
方法によって、超音波エネルギーを印加すると、乳化し
た化学物質は気化し、そして気体の微小気泡を生成す
る。特定の実施態様において、水不溶性の気体形成性化
学物質はパーフルオロペンタンであり、そして安定剤は
レシチンである。本発明はまた、患者に送達するため
に、エマルジョンを安定化するさらなる手段をも提供す
る。これらの手段は、天然ポリマーマトリックス、合成
ポリマーマトリックス、またはリポソームのような送達
ビヒクルを包含する。より詳細には、天然ポリマーマト
リックスはアルブミンマトリックスであることが提供さ
れる。このアルブミンマトリックスは、ポリエチレング
リコールを含むように誘導体化され得る。

【００２７】本発明はまた、超音波画像において組織お
よび器官のコントラストを増強する方法であって：
（ａ）少なくとも１種の安定化された水不溶性気体形成
性化学物質を患者に注入する工程；（ｂ）この化学物質
を気化して微小気泡を放出させるに充分な量の超音波エ
ネルギーを印加する工程；および（ｃ）超音波画像を検
出する工程を包含する方法を提供する。水不溶性気体形
成性化学物質は、疎水性または両親媒性の安定剤によっ
て安定化される。

【００２８】

【発明の実施の形態】発明者らは、水不溶性気体形成性
化学物質のエマルジョンを調製することによって、特に
有効な部位特異的超音波造影剤が得られ得ることを見い
だした。これらの気体形成性化学物質は、安定剤による
乳化によって安定化される。さらに、気体形成性化学物
質（これらはたいてい水に不溶性である）の乳化によっ
て、造影剤をより可溶性にすることができ、そしてその
ため、患者に投与可能になる。水不溶性の気体形成性化
学物質は、画像化される動物の体温において気体を形成
可能でなければならず、そして一般的に体温より低い沸
点を有する。本明細書中で述べるように、沸点とは、大
気圧（７６０ｎｍ）において、化学物質の分子の熱エネ
ルギーが、これらの分子を互いに液体状態（または、昇
華し、従って液体状態を有さない化学物質については固
体状態）に保持する凝集力に打ち勝つに充分に大きくな
る温度を言う。超音波エネルギーを印加するまで気体形
成性化学物質を液体状態に安定化するために、気体形成
性化学物質よりも高い沸点を有する安定剤が必要であ
る。安定剤は、気体形成性化学物質が気化して気体にな
る温度をその沸点を超える温度まで引き上げる原因とな
る。このように、気体形成性化学物質は、実際には、同
時に、安定化され（その沸点を超えても液体状態で維持
され）、かつ不安定化される（超音波エネルギーに曝さ
れると気化し得る）。本発明のエマルジョンが超音波エ
ネルギー（例えば５．０ＭＨｚにおいてトランスミット
パワー５０％）に曝されることによって気化するとき、
気体の微小気泡が形成され、そしてエマルジョンから放
出され、その結果、画像化されるべき領域の超音波反射
率が増加する。

【００２９】本発明において有用な水不溶性の気体形成
性化学物質は、無毒性であり、生理学的に適合性であ
り、そして一般に沸点３７℃未満、そして好ましくは２
６℃と３４℃との間であることでさらに特徴づけられ得
る。本発明において有用な気体形成性化学物質のうちの
いくつか、ならびにその大気圧における沸点を示す。表１気体形成性化学物質沸点 ℃ ペンタン３６１−ペンテン３０パーフルオロペンタン２９．５２−メチルブタン（イソペンタン）２７．８テトラメチルシラン２６２−ブロモ−１，１，１−トリフルオロエタン２６ジブロモジフルオロメタン２５フルオロトリクロロメタン２４２Ｈ−パーフルオロ−ｔ−ブタン１３シクロブタン１２ヘプタフルオロプロピルブロミド１２１−クロロ−１，１，２，２−テトラフルオロエタン１０．２ネオペンタン９．５テフルラン（ｔｅｆｌｕｒａｎｅ）８２−クロロ−１，１，１−トリフルオロエタン６．９デカフルオロブタン４ブタン −０．５２−クロロ−１，１，１，２−テトラフルオロエタン−１２２Ｈ−ヘプタフルオロプロパン −１５ヨードトリフルオロメタン −２２．５シクロプロパン −３３パーフルオロエチルアミン −３５オクタフルオロプロパン −３６ＳＦ₆−（六フッ化イオウ） −６４本発明の安定剤は、疎水性または両親媒性（疎水性部分
（ｅｎｔｉｔｙ）および親水性部分の両方を含む）化合
物であり得る。疎水性化合物には、ジ−およびトリグリ
セリド；飽和および不飽和の炭化水素；パーフルオロヘ
キサンまたはパーフルオロデカリンのようなパーフルオ
ロカーボン；脂肪および脂肪油、例えばトリオレインが
包含される。

【００３０】両親媒性化合物には、ホスファチジン酸、
ホスファチジルグリセロール、およびホスファチジルイ
ノシトールのようなリン脂質；脂肪酸のアルカリ塩；ド
デシル硫酸ナトリウムのようなイオン性界面活性剤；非
イオン性界面活性剤、例えばＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商
標）Ｆ−６８[ポリオキシエチレンおよびポリオキシプ
ロピレンのブロックコポリマーであるポロキサマー（ｐ
ｏｌｏｘａｍｅｒ）１８８の商品名（ＣＡＳ−９００３
−１１−６）

【００３１】

【化３】ここで、該化合物の平均分子量が８３５０であるよう
に、平均値ｎ＝７５および平均値ｂ＝３０である]、お
よびポリソルベート（ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ）８０;
ホスファチジルコリン（レシチン）、ホスファチジルエ
タノールアミン、およびホスファチジルセリンのような
両性イオン界面活性剤；アルブミンのような、親水性部
分と疎水性部分を有するアミノ酸ポリマーまたはタンパ
ク質が包含される。

【００３２】フッ素化気体形成性化合物の安定剤として
特に有用な両親媒性化合物は、それ自体フッ素化物であ
る。これらの化合物は、該２つの化合物間のフッ素−フ
ッ素相互作用のため、フッ素化気体形成性化合物の安定
剤および可溶化剤の両方として作用する。このようなフ
ッ素化安定剤は、一般に、ポリエーテル、糖、カルボキ
シレート、スルホネート、または４級アンモニウム基の
ような親水性部分に連結した、疎水性のフルオロカーボ
ン鎖を有する。フッ素化安定剤の例は、米国特許第５，
０７７，０３６号、第５，０８０，８５５号、および第
４，９８７，１５４号に見いだされ得、これら各文献は
本明細書中に参考として援用される。

【００３３】気体形成性化学物質の沸点が、エマルジョ
ンを調製し、そして貯蔵する温度より低い場合（例えば
２４℃未満）、気体形成性化学物質と強い疎水性相互作
用し得、気体形成性化学物質をその沸点を超える温度に
おいて液体状態に維持する安定剤を用いて、本発明の、
液体−液体型の水中油型エマルジョンを形成することも
また、可能である。この目的のために特に有用な安定剤
は、Ｃ５からＣ２０までのパーフルオロカーボンまたは
炭化水素であり、そして疎水性または親水性のいずれで
あっても良い。

【００３４】本発明のエマルジョンにおいて、安定剤は
単独で用いられ得、あるいは種々の組合せとして用いら
れ得る。しかし、安定剤が疎水性化合物である場合、エ
マルジョンを可溶化し、そしてそのことによってエマル
ジョンを生理学的に許容される（ｔｏｒｅｌａｔｅｄ）
ようにするために、エマルジョン内またはエマルジョン
と組み合わせて、界面活性剤もまた存在する必要があ
る。界面活性剤（ｓｕｒｆａｃｅａｃｔｉｖｅａｇ
ｅｎｔまたはｓｕｒｆａｃｔａｎｔ）は、２つの液体間
の表面張力を低下させる物質として特徴づけられる。界
面活性剤は、一般的に、上述のように両親媒性の化合物
であるか、あるいはカチオン性またはアニオン性の化合
物であり得る。さらに、ホスファチジルコリンとＰＬＵ
ＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−６８のような界面活性剤と
共界面活性剤との組合せもまた意図される。

【００３５】安定剤が両親媒性の場合、さらなる疎水性
化合物の存在は一般に必要ではない。特に、ＰＬＵＲＯ
ＮＩＣ（登録商標）Ｆ−６８は、さらなる疎水性化合物
の非存在下で、気体形成性化学物質を十分に可溶化およ
び安定化することが見いだされた。

【００３６】本発明のエマルジョン中に存在する安定剤
の量は、エマルジョンの他の成分の濃度および性質に依
存し、そし原則的に気体形成性化学物質の量および性質
に依存して、広範囲にわたって変化する。このことは実
施例の項で例示する。

【００３７】増粘剤が、任意にエマルジョン中に存在す
る。この増粘剤は、一般にグリセロール、ソルビトー
ル、ラクトース、スクロース、およびデキストランのよ
うな、ポリアルコールまたは糖質であり、そして好まし
くは濃度５〜１５％（ｗ／ｖ）のグリセロールである。
他の任意の構成成分は、α−トコフェロールのような抗
酸化剤であり、好ましくは濃度０．１〜０．２５％（ｗ
／ｖ）である。さらに他の任意の成分のクラスは、エマ
ルジョンに器官または組織標的特異性を与える化合物で
ある。これらの化合物は、コレステロールのようなステ
ロイド、タンパク質、リポタンパク質、および抗体を包
含し得る。

【００３８】本発明のエマルジョンは、それ自体で、あ
るいは送達ビヒクルと組み合わせて、超音波画像化剤と
して有用であり得る。この送達ビヒクルは、インビトロ
およびインビボの両方におけるより高い安定性、あるい
は組織または器官の標的特異性を与えるために使用され
得る。このような送達ビヒクルの１つは、アルブミンマ
トリックスのような、気体形成性化学物質のエマルジョ
ンが入ったマルチプルチャンバー（ｍｕｌｔｉｐｌｅ
ｃｈａｍｂｅｒ）を有するマトリックスを形成する天然
ポリマーから作製され得る。このように記載されたアル
ブミンマトリックスの表面はまた、ポリエチレングリコ
ールのようなポリマーを含むように改質され得、インビ
ボにおける細網内皮系（ｒｅｔｉｃｕｌａｒｅｎｄｏ
ｔｈｅｒｉｃａｌｓｙｓｔｅｍ）の取り込みを低減し
得る。

【００３９】送達ビヒクルのさらなる例は、本明細書中
に参考として援用される米国特許第５，１９０，９８２
号に記載されるポリアミノジカルボン酸−共−イミド誘
導体のような合成ポリマー、または本明細書中に参考と
して援用される米国特許第５，１４９，５４３号に記載
のポリホスファジンのような架橋可能な合成ポリマーの
使用を包含する。他の送達ビヒクルは、リポソームを包
含し得る。記載した送達ビヒクルに加えて、疎水性化合
物（治療用化合物または診断用化合物にかかわらず）が
患者に投与可能になるように設計された任意の送達ビヒ
クルもまた意図されることが理解される。

【００４０】本発明のエマルジョンは、送達ビヒクル中
に組み込まれているものもそうでないものも、一般に、
８．０μより小さいサイズを有し、そして好ましくは
５．０μより小さいサイズを有する。さらに、本発明に
よって、サイズ１．０μより小さいマイクロエマルジョ
ンを調製し得ることも明らかである。

【００４１】

【実施例１】気体形成性化学物質を安定化するために有
用なエマルジョンを、減圧下で撹拌（ｒｏｔａｔｉｎ
ｇ）して以下の成分を共に混合することによって作製し
た。グリセロールトリオレエート（トリオレイン）１．２５ｇ１，２−ジオレオイル−グリセロ−３−ホスホコリン１５ｍＬ（クロロホルム中２０mｇ／ｍＬ）コレステロール０．０５ｇ α−トコフェロール０．０１２ｇ高減圧下で室温（２０℃〜２５℃）で乾燥して残留溶媒
を除去した。１６時間後、１．５８ｇのグリセロール
（１．２６ｇ／ｍＬ）および０．２ｇのパーフルオロペ
ンタンを添加した。次いで、ＰＯＬＹＴＲＯＮ（登録商
標）ＰＴ３０００（Ｂｒｉｎｋｍａｎ，Ｗｅｓｔｂｕｒ
ｙ，ＮｅｗＹｏｒｋ）中、１０，０００ｒｐｍで０℃
で２分間混合している間に、９．６ｍＬの水をゆっくり
添加した。得られたエマルジョンをさらに３０，０００
ｒｐｍで３分間ホモジナイズした。

【００４２】

【実施例２】実施例１のエマルジョンの超音波イメージ
ング特性を、セクターモードで５ＭＨｚの振動子を有す
る（焦点ゾーン＝３．５ｃｍ）ＨＰＳＯＮＯＳ１００
超音波イメージングシステム（Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ
ＩｍａｇｉｎｇＳｙｓｔｅｍ）（Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐ
ａｃｋａｒｄ、ＰａｌｏＡｌｔｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎ
ｉａ）を用いて調べて、試料溶液のスキャッタリング能
力を検出した。コンプレッションを調節して、可能な限
り最大のダイナミックレンジ（すなわち、６０ＤB）を
得た。画像化されるイメージセクターが最適であると見
た目に判断されるまで、超音波システムの時間ゲイン補
償制御を調節した。

【００４３】３７℃、２％のトランスミットパワー（ｔ
ｒａｎｓｍｉｔｐｏｗｅｒ）、１．０Lの水として記
述されるように装置を最適化することによってイメージ
ングシーケンスを開始した。次いで、１．０ｍＬの試料
を水に注入した。その後、２分毎に、トランスミットパ
ワーを、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６
０％、７０％、８０％、９０％、および９９％と調節し
て上げていった。イメージの全体のシーケンスを、保存
および分析のためにビデオテープ（この超音波システム
に取り付けられている）で記録した。

【００４４】この実験の定量的な結果を作成するため
に、ビデオデンシトメトリー（ｖｉｄｅｏｄｅｎｓｉｔ
ｏｍｅｔｒｙ）分析を行った。ビデオテープに保存され
た、選択されたビデオフレームを、ＤａｔｅＴｒａｎ
ｓｌａｔｉｏｎＱｕｉｃｋＣａｐｔｕｒｅフレームグ
ラバーボード（ｆｒａｍｅｇｒａｂｂｅｒｂｏａｒ
ｄ）を装備したＡｐｐｌｅＭａｃｋｉｎｔｏｓｈＩ
Ｉコンピューターを用いてデジタル化した。これらのフ
レームをＣｉｎｅＰｒｏｂｅ（登録商標）バージョン
１．０（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、
ＳａｎＤｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）のイメー
ジプロセッシングソフトウェアーを用いて分析した。ビ
ーカー内の目的の領域（ＲｅｇｉｏｎｏｆＩｎｔｅ
ｒｅｓｔ）（ＲＯＩ）を選択し、そして領域内の平均画
素強度（ビデオ輝度）を測定した。次いで、目的の領域
内の平均ビデオ密度（ｖｉｄｅｏｄｅｎｓｉｔｙ）につ
いて各フレームを分析した。水ブランクのビデオ密度を
差し引き、そして得られたビデオ密度を、ビデオ輝度
（ＶｉｄｅｏＢｒｉｇｈｔｎｅｓｓ）または標準化さ
れたビデオ輝度（ＮｏｒｍａｌｉｚｅｄＶｉｄｅｏＢ
ｒｉｇｈｔｎｅｓｓ）（比較のために初期値を１００に
セットする場合）として表す。

【００４５】ＡＬＢＵＮＥＸ（登録商標）（Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、ＳａｎＤｉｅｇ
ｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）（米国特許第４，５７２，
２０３号；同第４，７１８，４３３号；同第４，７４
４，９５８号；同４，８４４，８８２号および同４，９
５７，６５６号に記載のように調製されるタンパク質殻
で取り巻かれた微小気泡）コントロールもまた調製し、
そして３７℃の１．０リットルの水にＡＬＢＵＮＥＸ
（登録商標）（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｓｙｓｔｅ
ｍｓ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）の
試料１．０ｍＬを注入することによって、記載されたよ
うに分析した。

【００４６】この実験の結果を図１および図２に示す。
ＡＬＢＵＮＥＸ（登録商標）（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢ
ｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆ
ｏｒｎｉａ）試料中に存在する微小気泡の数は変化しな
いので、トランスミットパワーとビデオ輝度との間は線
形関係であることが予想される。この線形関係を図１に
示す。対照的に、実施例１のエマルジョンを用いる場
合、超音波エネルギーに曝される際に形成される微小気
泡ついてのキャビテーションのある種の閾エネルギーの
ために、ビデオ輝度とトランスミットパワーとの間は、
双一次またはステップ状の関数であることが予想がされ
る。このような関係が観測された。これらの結果を図２
に示す。

【００４７】

【実施例３】以下の成分を共に添加し、そして１０ｍＬ
の超純水をゆっくり添加しながら、ＰＯＬＹＴＲＯＮ
（登録商標）（Ｂｒｉｎｋｍａｎ，Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，
ＮｅｗＹｏｒｋ）中、１０，０００ｒｐｍで０℃で３分
間ホモジナイズした：トリオレイン０．６ｇグリセロール１．５７ｇレシチン０．６ｇパーフルオロペンタン１．５ｇこれらの成分を、３０，０００ｒｐｍでさらに２分間、
さらにホモジナイズして、乳白色のエマルジョンを生成
した。このエマルジョンを、５μおよび１．２μのフィ
ルターによって連続して濾過した。粒子サイズは、９５
％が３．８μ未満であることがＮｉｃｏｍｐ７７０（Ｐ
ａｒｔｉｃｌｅＳｉｚｉｎｇＳｙｓｔｅｍｓ、Ｓａ
ｎｔａＢａｒｂａｒａ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）で測
定された。このエマルジョンは４℃で数日間安定（目に
見えるほどの相分離または粒子サイズの増加なし）であ
った。実施例２に記載されたように画像化される場合、
このエマルジョンは、超音波画像で観察したとき、トラ
ンスミットパワー４０％を超えると微小気泡形成を示し
た。

【００４８】

【実施例４】以下の成分を一緒に添加し、そして２０ｍ
Ｌの水をゆっくり添加しながら、ＰＯＬＹＴＲＯＮ（登
録商標）（Ｂｒｉｎｋｍａｎ，Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，Ｎｅ
ｗＹｏｒｋ）中、１０，０００で０℃で３分間ホモジナ
イズした：トリオレイン１．０ｇグリセロール１．０ｇ α−トコフェロール０．０２ｇＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−６８０．２ｇ気体形成性化学物質以下のいずれか１つの１．５ｇエマルジョンＡ：ＦＣＣｌ₃（フルオロトリクロロメタン）エマルジョンＢ：Ｂｒ₂Ｆ₂Ｃ（ジブロモジフルオロメタン）エマルジョンＣ：ＴＭＳ（テトラメチルシラン）エマルジョンＤ：２−メチルブタン（イソペンタン）上記のエマルジョンを１．２μフィルターによって濾過
し、そして粒子サイズを実施例４に記載されるように測
定した：Ａ９５％が２．９７μ未満Ｂ９５％が４．０２μ未満Ｃ９５％が２．１８μ未満Ｄ９５％が２．９９μ未満

【００４９】

【実施例５】以下の成分を一緒に添加し、そして２０ｍ
Ｌの水をゆっくり添加しながら、ＰＯＬＹＴＲＯＮ（登
録商標）（Ｂｒｉｎｋｍａｎ，Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，Ｎｅ
ｗＹｏｒｋ）中で１０，０００ｒｐｍで０℃で５分間ホ
モジナイズした：トリオレイン１．０ｇグリセロール３．０ｇ α−トコフェロール０．０２ｇレシチン１．０ｇパーフルオロペンタン１．０ｇこのエマルジョンを、２０，０００ｒｐｍで３分間さら
にホモジナイズし、そして５μおよび１．２μのフィル
ターによって連続して濾過した。このエマルジョンの超
音波イメージング特性を、実施例２に記載されたように
調べると、超音波画像で観測したとき、トランスミット
パワー４０％を超えると微小気泡形成を示した。

【００５０】

【実施例６】微小気泡の生成に対する超音波エネルギー
の影響をさらに調べるために、実施例５（パーフルオロ
ペンタン）のエマルジョンを、２つの別な実験（連続的
または３０秒間隔のいずれか）で画像化した。各実験に
ついて、エマルジョンの１．０ｍＬの試料を、３７℃、
１．０リットルの水に添加した。第１の実験において、
実施例２に記載されたような超音波イメージングをトラ
ンスミットパワー９９％で連続的に３０分間行った。第
２の実験において、５分毎ごとに３０秒間継続的に超音
波イメージングを行った（断続的イメージング）。画像
輝度を実施例２に記載されるように数量化した。結果を
図３に示す。これらの結果は、連続的な超音波エネルギ
ーを用いると、不断の微小気泡の生成およびエマルジョ
ンの気泡形成能力の減少のために、画像輝度は３０分間
の終わりではっきりと減少したということを示す。対照
的に、断続的なイメージングを用いると、エマルジョン
は不断のイメージングと比較すると１／１０のエネルギ
ーにしか曝されない（５分毎に３０秒）ので、エマルジ
ョンの微小気泡形成能力は持続し、そして実質的な量の
微小気泡が、３０分後でさえ連続して生成された。

【００５１】

【実施例７】別のエマルジョン処方は、増粘剤、両親媒
性である安定剤、および気体形成性化学物質を含有し、
最終容量５０ｍＬとなる水中で以下の成分を一緒に混合
することによって形成される：増粘剤：安定剤：エマルジョンＡＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−６８スクロース（０．５ｇ）（８．６ｇ）エマルジョンＢドデシル硫酸ナトリウムスクロース（１．４４ｇ）（８．６ｇ）エマルジョンＣＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−６８ラクトース（０．５ｇ）（９．０ｇ）エマルジョンＤドデシル硫酸ナトリウムラクトース（１．４４ｇ）（９．０ｇ）上記から得た溶液を０．２μフィルターによって濾過し
た。上記の各々の１０ｍＬアリコートを、ＰＯＬＹＴＲ
ＯＮ（登録商標）（Ｂｒｉｎｋｍａｎ，Ｗｅｓｔｂｕｒ
ｙ，ＮｅｗＹｏｒｋ）中で０．１６８ｍＬのパーフル
オロペンタンと、１０，０００ｒｐｍ〜２０，０００ｒ
ｐｍで０℃で１〜３分間、次いで２０，０００ｒｐｍで
さらに５分間混合した。これら４つのエマルジョンの各
々は、実施例２に記載されたように調べたときにトラン
スミットパワー４０％を超える超音波画像で観測される
ように、微小気泡形成を示した。

【００５２】これらのエマルジョンに対する超音波エネ
ルギーへの連続暴露対断続的暴露の影響を調べるため
に、エマルジョンＣの１．０ｍＬの試料を、３７℃で
１．０リットルの脱気した水に入れた。この溶液を、実
施例６に記載されたように連続的または間欠的のいずれ
かで超音波的に画像化した。この結果を図４に示す。

【００５３】

【実施例８】ノナフルオロ−ｔ−ブチルメタンＣ₄Ｆ₉Ｃ
Ｈ₃の合成開始物質（ヨウ化メチルおよびフッ化セシウム）をＡｌ
ｄｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙから入
手し、そしてパーフルオロイソブチレンガスをＦｌｕｒ
ａＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手した。プロトン（
¹Ｈ）またはフッ素（¹⁹Ｆ）共鳴の測定用に調整された
２００ＭＨｚの装置を用いて核磁気共鳴スペクトルを得
た。

【００５４】気体入口、メカニカルスターラー、および
ドライアイスコンデンサーを備えたフラスコに、乾燥フ
ッ化セシウム（４２．５ｇ、０．２７９ｍｏｌ）のジグ
ライム（２００ｍＬ）懸濁液を入れ、パーフルオロイソ
ブチレンガス（５５．５ｇ、０．２７８ｍｏｌ）でバブ
リングした。ガスはすぐにフッ化セシウムと反応して、
黄色溶液となった。混合物を３０分間攪拌し、次いでヨ
ウ化メチル（３８．５ｇ、０．２７１ｍｏｌ）を滴下し
た。反応はわずかに発熱性であり、そしてヨウ化セシウ
ムが分離した。混合物を３時間攪拌し、そして一晩放置
した。冷溶液（２Ｍ、塩化ナトリウム、５００ｍＬ）
を、冷却（５℃）しながら３０分間かけて混合物に添加
した。ヨウ化ナトリウム、およびジグライム溶媒のほと
んどが水相に溶解した。次いで固形物から水相をデカン
トして、４５ｇ（約４０％）の粗収率を得た。蒸留によ
りこの化合物は３５℃〜３９℃の加熱温度で昇華し、そ
して浴温度は５０℃〜５５℃を超すことはなかった。生
成物を、ドライアイスとエタノールによって−３０℃ま
で冷却した受け器に回収した。ＣＤＣl₃溶液のプロトン
¹ＨＮＭＲスペクトルは、シングル共鳴（ｓｉｎｇｌｅ
ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）；ＴＭＳに対して１．６５
（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃）ｐｐｍを示し（図５参照）、そし
て同じ溶媒での¹⁹Ｆスペクトルもまた、ＣＤＣｌ₃に対
して−６９．９９（ｓ，９Ｆ）に１つのシングル共鳴を
示した（図６参照）。

【００５５】ノナフルオロ−ｔ−ブチルメタンＣ₄Ｆ₉Ｃ
Ｈ₃は、以下の化学式のいずれかにより示される：

【００５６】

【化４】

【００５７】

【実施例９】以下の成分を一緒に混合し、そして１０ｍ
Ｌの超純水をゆっくり添加しながら、ＰＯＬＹＴＲＯＮ
（登録商標）（Ｂｒｉｎｋｍａｎ，Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，
ＮｅｗＹｏｒｋ）中で１０，０００ｒｐｍで０℃で３
分間ホモジナイズした：トリオレイン１．０１ｇグリセロール１．０５ｇ α−トコフェロール０．０２ｇＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−６８０．０９９ｇＣ₄Ｆ₉ＣＨ₃ ０．７８０ｇ得られたエマルジョンを、５μのフィルターによって濾
過した。実施例４に記載されたように粒子サイズを測定
すると、４．３０ミクロン未満であった。

【００５８】エマルジョンの超音波イメージング特性
を、実施例２に記載されたように調べた。気泡の形成
は、低いトランスミットパワー（≦２５％）の設定でさ
え観測され、トランスミットパワーをゆっくり９９％ま
で増加するにつれて明るくなった。

【００５９】また、比較としてＣ₄Ｆ₉ＣＨ₃を用いない
対照実験が、以下の成分を混合することによって行われ
た：トリオレイン１．０１ｇグリセロール１．０５ｇ α−トコフェロール０．０２１ｇＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−６８０．２０４ｇエマルジョンを上記のように調製した。上記の超音波イ
メージング実験と対照的に、微小気泡の形成は、９９％
トランスミットパワーでさえ観察されなかった。

【００６０】

【実施例１０】以下の成分を一緒に混合し、そして１０
ｍＬの水をゆっくり添加しながら、ＰＯＬＹＴＲＯＮ
（登録商標）（Ｂｒｉｎｋｍａｎ，Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，
ＮｅｗＹｏｒｋ）中で１０，０００ｒｐｍで０℃で２分
間ホモジナイズした：トリオレイン１．０ｇグリセロール１．０ｇ α−トコフェロール０．０３ｇＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ−６８０．１ｇイソペンタン０．１５ｇｎ−ペンタン０．８５ｇこのエマルジョンを、さらに３０，０００ｒｐｍで６分
間ホモジナイズし、そして１．２μのフィルターによっ
て濾過した。エマルジョンの超音波イメージング特性
を、実施例６に記載されたように調べ、連続イメージン
グよりも断続的イメージングの方がより高レベルのビデ
オ輝度が観測された。

【００６１】

【実施例１１】エマルジョン含有アルブミン微小粒子本発明のエマルジョンは、以下のようなマルチチャンバ
ーアルブミンマトリックスを含む送達ビヒクルにカプセ
ル化され得る：一次エマルジョンを、最初に２．０ｇの
ヒト血清アルブミンを２０．０ｍＬのバッファー（０．
４５ＮＮａ₂ＣＯ₃、ｐＨ９．８）中に溶解し、次いで
１．０ｇのパーフルオロペンタンを添加することによっ
て調製する。この混合物を、高スピードで１０分間オス
テライザー（ｏｓｔｅｒｉｚｅｒ）で乳化する。

【００６２】次いで、連続して１０分間混合しながら、
１０％（ｖ／ｖ）のソルビタントリオレエートを含む１
００ｍＬのクロロホルム：シクロヘキサン（１：４ｖ／
ｖ）を添加し、二重エマルジョン（ｄｏｕｂｌｅｅｍ
ｕｌｓｉｏｎ）を調製する。

【００６３】さらに２．５ｇのテレフタロイルクロライ
ドを含有する１００ｍＬのクロロホルム：シクロヘキサ
ン（１：４ｖ／ｖ）を、混合しながら、添加し、そして
連続してさらに３０分間混合することによってアルブミ
ンを架橋する。５ｇ％［？？？］のポリソルベートおよ
び１０％（ｖ／ｖ）のエタノールアミンを含有する１０
０ｍＬのシクロヘキサンで反応をクエンチする。マイク
ロカプセルをシクロヘキサン：エタノール（１：１ｖ／
ｖ）で３回洗浄し、その後５％のポリソルベート−９５
％のエタノールで２回、９５％のエタノールで２回、そ
して水で２回洗浄する。次いで微小粒子を通常の生理食
塩水に再懸濁する。そして微小粒子は、内部乳化マトリ
ックスのパーフルオロペンタンを含有するマルチチャン
バーのベシクルを含んでいる。

【００６４】本発明を主に特定の実施態様および好まし
い実施態様と関連して記載したが、本発明の範囲から逸
脱することなく改変し得ることが理解されるべきであ
る。上記の特許請求の範囲は、一般に本発明の本質に従
う全ての改変（本発明の使用または適用）をカバーする
ことを意図し、そして例えば、本発明に関係する分野で
の公知実施または慣習的実施内に入るような、または当
業者にとって明白であるような本発明の開示からの発展
を包含する。

【００６５】

【発明の効果】本発明によれば、気体形成性化学物質が
液体状態で安定であり得、そして超音波エネルギーを与
えたときに微小気泡を生成する、部位特異的なエマルジ
ョンが提供される。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＡＬＢＵＮＥＸ（登録商標）（Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，
Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）の存在下における、超音波エネ
ルギートランスミットパワー（ｔｒａｎｓｍｉｔｐｏ
ｗｅｒ）増大の、超音波シグナルの反射率に対する影響
（ビデオ輝度で表す）を示す。

【図２】実施例１のパーフルオロペンタンエマルジョ
ン存在下における、図１に記載されたのと同様の影響を
示す。

【図３】実施例５のエマルジョンが連続的に超音波エ
ネルギーに曝された場合と、５分間隔で３０秒間曝され
たのみの場合で観察される、ビデオ輝度の差を示す。

【図４】実施例７のエマルジョンＣが連続的に超音波
エネルギーに曝された場合と、５分間隔で３０秒間曝さ
れたのみの場合で観察される、ビデオ輝度の差を示す。

【図５】ノナフルオロ−ｔ−ブチルメタン（Ｃ₄Ｆ₉Ｃ
Ｈ₃）のＣＤＣl₃溶液の¹ＨＮＭＲスペクトルを示す。

【図６】ノナフルオロ−ｔ−ブチルメタン（Ｃ₄Ｆ₉Ｃ
Ｈ₃）のＣＤＣl₃溶液の¹⁹ＦＮＭＲスペクトルを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (71)出願人 596045915 10030 ＢａｒｎｅｓＣａｎｙｏｎＲｏａｄ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ 92121−2789，ＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓｏｆＡｍｅｒｉｃａ (72)発明者ケネスジェイ．ワイダーアメリカ合衆国カリフォルニア 92067, ランチョサンタフェ，エルカミノロード 16231 (72)発明者アシェウィンエム．クリシュナンアメリカ合衆国カリフォルニア 92127, サンディエゴ，マティナルロード 17462 (72)発明者ドンケイ．ホンアメリカ合衆国カリフォルニア 92105, サンディエゴ，レッドウッドストリート 5734 (72)発明者ジアルンメンアメリカ合衆国カリフォルニア 92126, サンディエゴ，ケローナロードナンバー26 11173

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】超音波画像化剤として使用するためのエ
マルジョンであって、少なくとも１種の水不溶性の気体
形成性化学物質および少なくとも１種の安定剤を含有
し、該エマルジョンが超音波エネルギーの印加により微
小気泡を形成し得る、エマルジョン：ただし、該エマル
ジョンは、３７℃未満の沸点を有する、少なくとも１種の水不溶性
の気体形成性化学物質と、３７℃において、大気圧で、
かつ超音波エネルギーへの曝露の前に、該気体形成性化
学物質を液体状態に維持するのに十分な量の疎水性化合
物または両親媒性化合物を含む、少なくとも１種の安定
剤とを共に含有しない。
【請求項２】前記安定剤が疎水性化合物である、請求
項１に記載のエマルジョン。
【請求項３】前記エマルジョンが界面活性剤を含む、
請求項２に記載のエマルジョン。
【請求項４】前記安定剤が両親媒性化合物である、請
求項１に記載のエマルジョン。
【請求項５】前記両親媒性化合物が、【化１】であり、該化合物の平均分子量が８３５０であるように、平均値
ｎ＝７５および平均値ｐ＝３０である、請求項４に記載
のエマルジョン。
【請求項６】前記エマルジョンが増粘剤を含む、請求
項１に記載のエマルジョン。
【請求項７】前記エマルジョンが抗酸化剤を含む、請
求項１に記載のエマルジョン。
【請求項８】前記エマルジョンが、該エマルジョンに
器官または組織の標的特異性を与える化合物を含む、請
求項１に記載のエマルジョン。
【請求項９】請求項１に記載のエマルジョンを含む送
達ビヒクルを含有する、超音波画像化剤。
【請求項１０】前記送達ビヒクルが、天然ポリマーマ
トリックス、合成ポリマーマトリックス、またはリポソ
ームからなる群から選択される、請求項９に記載の超音
波画像化剤。
【請求項１１】前記天然ポリマーマトリックスが、ア
ルブミンマトリックスである、請求項１０に記載の超音
波画像化剤。
【請求項１２】前記水不溶性の気体形成性化学物質
が、ノナフルオロ−ｔ−ブチルメタンである、請求項１
に記載のエマルジョン。
【請求項１３】前記水不溶性の気体形成性化学物質
が、パーフルオロペンタンであり、そして前記安定剤が
レシチンである、請求項１に記載のエマルジョン。
【請求項１４】超音波画像において組織および器官の
コントラストを増強するための組成物であって、（ａ）
少なくとも１種の水不溶性の気体形成性化学物質であっ
て、画像化される動物の体温より低い沸点を有し、かつ
該動物の体温において気体を形成し得る、気体形成性化
学物質、（ｂ）少なくとも１種の安定剤であって、該気
体形成性化学物質よりも高い沸点を有し、かつ該気体形
成性化学物質の沸点よりも高い温度において該気体形成
性化学物質を液体状態で維持し得る、安定剤、および
（ｃ）水、を含有し、該組成物が超音波エネルギーに曝
されると、該気体形成性化学物質が気化されて気体の微
小気泡を形成し得る、組成物。
【請求項１５】超音波画像において組織および器官の
コントラストを増強するための、請求項１〜１３のいず
れかに記載のエマルジョンまたは画像化剤の使用であっ
て、該エマルジョンまたは画像化剤が、充分な超音波エ
ネルギーの印加によって気体の微小気泡を形成する、使
用。