JPH1118777A

JPH1118777A - 新規スリット様ポリペプチド

Info

Publication number: JPH1118777A
Application number: JP9183683A
Authority: JP
Inventors: Akira Ito; 章伊藤; Seiji Sakano; 誠治坂野
Original assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1997-07-09
Filing date: 1997-07-09
Publication date: 1999-01-26

Abstract

(57)【要約】【課題】脳・神経系に発現する、新規細胞作用分子を
見出し、ポリペプチドとして提供することである。【効果】本発明により、脊髄に特異的に発現する新規
スリット様ポリペプチド、およびその遺伝子、およびそ
の製造方法、および該ポリペプチドを特異的に認識する
抗体が提供され、あらゆる神経疾患、甲状腺疾患、副腎
疾患、筋疾患の診断、治療への使用が可能である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ヒト由来の新規ス
リット様ポリペプチド、および該ポリペプチドをコード
するＤＮＡ、該ポリペプチドの製造方法および該ポリペ
プチドを特異的に認識する抗体に関する。

【０００２】

【従来の技術】高等脊椎動物の脳・神経系の形成は胎生
期に完了し、その損傷に対する再生は極めて困難であ
る。脳・神経系の形成過程を理解し、これに関連する分
子の各種脳・神経疾患への臨床応用が検討されている。
近年、神経系の発生および神経回路形成に関わる多くの
細胞−細胞間相互作用分子、もしくは細胞−基質間相互
作用分子が見出されている。これらの分子は、細胞−細
胞間で情報を伝達する細胞膜結合型リセプター分子とそ
のリガンド分子（リセプター−リガンド分子）、細胞−
細胞間の基質物質である細胞外マトリックス分子、およ
び細胞−細胞間もしくは細胞−基質間の接着を担当する
細胞接着分子に大別されている。

【０００３】リガンド分子の例として液性因子の神経成
長因子（ＮＧＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、
ニューロトロフィン３（ＮＴ−３）（特開平５−１６１
４９３）、グリア細胞株由来神経栄養因子（ＧＤＮ
Ｆ）、毛様体由来神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、ネトリン
（Ｎｅｔｒｉｎ）（Ｓｅｒａｆｉｎｉら，Ｃｅｌｌ，７
８，４０９−４２４，１９９４）、コラプシン（Ｃｏｌ
ｌａｐｓｉｎ）（Ｌｕｏら，Ｃｅｌｌ，７５，２１７−
２２７，１９９３）、また膜結合型因子としてノッチ
（Ｎｏｔｃｈ）ファミリーのリガンド分子であるデルタ
（Ｄｅｌｔａ）およびセレイト（Ｓｅｒｒａｔｅ）、Ｅ
ｐｈファミリーのリガンド分子群などが知られている。
これらの分子のいくつかは医薬としての開発研究がなさ
れている。

【０００４】細胞外マトリックス分子は、特に神経系に
限定されないコラーゲン、フィブロネクチン、ラミニン
のほか、主に中枢神経系に分泌されるリーリン（Ｒｅｅ
ｌｉｎ）（Ｄ’Ａｒｃｈａｎｇｅｌｏら，Ｎａｔｕｒ
ｅ，３７４，７１９−７２３，１９９５）や主に末梢神
経系に分泌されるアグリン（Ａｇｒｉｎ）（Ｒｕｐｐ
ら，Ｎｅｕｒｏｎ，６，８１１−８２３，１９９１）な
ど神経系に特異的な分子が知られている。また、細胞接
着分子の例としてＮ−カドヘリン、ＰＢ−カドヘリン、
Ｎ−ＣＡＭ、Ｌ１、インテグリン、ファシクリン（Ｆａ
ｓｃｉｃｌｉｎ）などが知られている（平野，蛋白質核
酸酵素，４０，７２４−７３５，１９９５）。

【０００５】ここでは分類上３つに大別したが、厳密な
意味で分類できるものではない。例えば、ここではリセ
プター−リガンド分子と分類したデルタは、ノッチに情
報を伝達する因子であると同時に、接着分子としての機
能を有することが知られている（Ａｒｔａｖａｎｉｓ−
Ｔｓａｋｏｎａｓら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６８，２２５
−２３２，１９９５およびＦｅｈｏｎら，Ｃｅｌｌ，６
１，５２３−５３４，１９９０）。また他の例では、接
着分子と分類したインテグリンは、細胞外マトリックス
のＲＧＤ（Arg Gly Asp）配列を認識し、細胞内に情報
を伝達しうるリセプター分子としての役割を果たす（原
著Ｗａｔｓｏｎら，監訳松原ら，細胞の分子生物学第３
版，教育社，９９５−１０００，１９９５）。したがっ
て、リセプター−リガンド分子、細胞外マトリックス分
子、細胞接着分子の分類は便宜上のものであり、これら
の分子の神経系の発生および神経回路形成に対する重要
性は、この分類によって区別されるものではない。そこ
で、本願ではこれらの分子を細胞作用分子と総称する。

【０００６】上記のような複数の細胞作用分子が多様に
作用することにより、神経細胞の発生、分化、組織構
築、局在化、神経繊維の伸長、神経軸索の束形成、神経
回路網の形成が連続的、同時並行して行われ、複雑でか
つ特異的な脳・神経系が構成されると考えられている。
しかしながら、多種の細胞作用分子が見出されているに
もかかわらず、神経系の発生および神経回路形成は不明
な点が多く、いまだ生物学的に最も未知な分野のひとつ
である。これは神経系の臓器が非均一な細胞群から構成
され、これらの細胞群を統合するために非常に多数の細
胞作用分子が存在し、さらにこれらの分子の濃度・密度
・親和性および時間・空間的発現が重要な働きをするた
めと考えられているが、現在理解されている細胞作用分
子の種類がまだ十分でなく、未同定の細胞作用分子が存
在し、これらが重要な働きを担っていると考えられる。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】脳・神経系に発現す
る、新規細胞作用分子を見出し、ポリペプチドとして提
供することである。

【０００８】

【課題を解決するための手段】ＥＧＦ（ｅｐｉｄｅｒｍ
ａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，上皮増殖因子）モ
チーフは、脳・神経系の発生および神経回路形成に関わ
る重要な細胞作用分子のいくつかに見出されている分子
構造である。本発明者らはこの点に着目し、ＥＧＦモチ
ーフを有する細胞作用分子が既知分子以外にも脳・神経
系に存在し、これらが脳・神経系発生及び神経回路形成
にとって重要な細胞作用分子として機能しているのでは
ないかと考えた。そして、遺伝子データベースの検索を
行い、ＥＧＦモチーフをコードする遺伝子配列を有する
ＥＳＴ（ｅｘｐｒｅｓｓｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅｔａ
ｇｓ）クローンを検索、選出し、これらの遺伝子情報を
基にＰＣＲ（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅ
ａｃｔｉｏｎ）プライマーを作製し、ヒト胎児脳由来の
ｃＤＮＡをテンプレートとしてＰＣＲを行うことによ
り、ＥＳＴクローンと相同の遺伝子断片を得た。この遺
伝子断片をプローブとして用いて、ハイブリダイゼーシ
ョン法によるスクリーニングを行い、得られたクローン
の塩基配列を決定し、該遺伝子断片の塩基配列を含みア
ミノ酸全長をコードするｃＤＮＡのクローニングに成功
した。

【０００９】この遺伝子配列から推定されるアミノ酸配
列は、４つのユニットからなるＬＲＲ（ｌｅｕｃｉｎｅ
ｒｉｃｈｒｅｐｅａｔ）配列と９つのＥＧＦモチー
フを有する新規配列であることを明らかにした。この配
列はショウジョウバエの中枢神経発生において重要な役
割を担うスリット（Ｓｌｉｔ）蛋白質（Ｒｏｔｈｂｅｒ
ｇら，ＧｅｎｅＤｅｖ，４，２１６９−２１８７，１
９９０およびＰＣＴ特許，ＷＯ９２／１０５１８）と
約４１％のホモロジーを有していた。このため本発明者
らは本分子をヒトスリットと命名し、特許を出願した
（出願番号：平８−１８６２１９、参考例１から３に取
得方法を記載した）。

【００１０】本発明者らはさらにヒトスリットの塩基配
列にホモロジーを有するＥＳＴクローンを見いだし、こ
のＥＳＴの元となるｃＤＮＡ断片を入手し、この断片の
一部をプローブとして用いて、ハイブリダイゼーション
法によるスクリーニングを行い、得られたクローンの塩
基配列を決定し、鋭意努力の結果、該遺伝子断片の塩基
配列を含みアミノ酸全長をコードするｃＤＮＡのクロー
ニングに成功した。この遺伝子配列から推定されるアミ
ノ酸配列は、先願のヒトスリットと約６６％のホモロジ
ーを有し、４つのユニットからなるＬＲＲ配列と９つの
ＥＧＦを有する先願のヒトスリットと同様のドメイン構
造を有する新規配列であることを明らかにした。このた
め本発明者らは本願の新規ポリペプチドをヒトスリット
２と命名した。新規ヒトスリット２をコードするＤＮＡ
のアンチセンス断片を用いてノザンブロッティングを行
った結果、ヒトスリット２はヒトの臓器中で脊髄に主に
発現し、脳に発現せず、先願のヒトスリット（本発明の
新規ヒトスリット２と区別するため、以下ヒトスリット
１と表記する）とは異なる臓器に発現することを明らか
にした。さらに本発明者らは該ヒトスリット２のポリペ
プチド全長をコードするＤＮＡを用いて、ヒトスリット
２の発現系を作製し、本願ポリペプチドのリコンビナン
ト標品を作製した。該ヒトスリット２のアミノ酸配列及
びそれをコードする核酸配列は、配列表の配列番号１か
ら３に示した。更に、該リコンビナント標品を免疫原と
して抗体を作製し、精製法を確立し本発明が完成した。

【００１１】すなわち、本発明は、（１）配列表の配列
番号１に記載のアミノ酸配列を含有するポリペプチドま
たはその変異体であるポリペプチド、（２）前記（１）
に記載のポリペプチドをコードするＤＮＡ、（３）前記
ＤＮＡが配列番号２に記載の塩基配列の２８３番から４
７９１番を含有するＤＮＡ、（４）前記（２）に記載の
ＤＮＡと、宿主細胞中で発現可能なベクターＤＮＡとを
連結してなる組換えＤＮＡ体、（５）前記（４）に記載
の組換えＤＮＡ体により形質転換された細胞、（６）前
記（４）に記載の組み換えＤＮＡ体を用いて作製された
当該アミノ酸配列を含有するポリペプチドの生産方法、
（７）前記（１）に記載したポリペプチドを特異的に認
識する抗体に関する。

【００１２】以下、本発明を詳細に説明する。配列表に
おいて、配列番号１に示したアミノ酸配列は、本発明の
ヒトスリット２のシグナルペプチドを除いた成熟型蛋白
質のアミノ酸配列である。配列番号２に示した塩基配列
は、本発明のヒトスリット２の翻訳領域、５’非翻訳領
域及び３’非翻訳領域を含むｃＤＮＡ配列である。なお
該配列の２８３番から４７９１番は配列番号１記載のア
ミノ酸配列をコードする塩基配列に相当する。配列番号
３に示したアミノ酸配列は本発明のヒトスリット２のシ
グナルペプチドを含む全アミノ酸配列である。配列番号
４に示した塩基配列はＧｅｎｂａｎｋ登録番号Ｈ５３５
７１のｃＤＮＡクローン２０２７３８のｃＤＮＡ配列で
ある。配列番号５はＧｅｎｂａｎｋ登録番号Ｈ１０９５
２のｃＤＮＡクローン４７３４４のｃＤＮＡ配列であ
る。配列番号６に示した塩基配列はマウススリット２ホ
モログのｃＤＮＡ配列である。配列番号７に示したアミ
ノ酸配列はマウススリット２ホモログのアミノ酸配列で
ある。配列番号８に示したアミノ酸配列は先願のヒトス
リット１のシグナルペプチドを除いた成熟型蛋白質のア
ミノ酸配列である。配列番号９に示した塩基配列は、先
願のヒトスリット１の翻訳領域、５’非翻訳領域及び
３’非翻訳領域を含むｃＤＮＡ配列である。配列番号１
０に示したアミノ酸配列は先願のヒトスリット１のシグ
ナルペプチドを含む全アミノ酸配列である。なお、配列
表で示した各アミノ酸配列は左端がアミノ基末端（Ｎ
末）、右端がカルボキシル基末端（Ｃ末）であり、各核
酸配列は左端が５’末端、右端が３’末端である。

【００１３】神経系の発生および神経回路形成に対す
る、細胞−細胞間および細胞−基質間相互作用分子の重
要性は先に述べた。神経系に限らず、細胞のこれらの相
互作用にかかわる分子の多くは構造上、接着・結合のた
めの保存されたドメイン構造を有する。このドメイン構
造には、イムノグロブリン（Ｉｇ）様ドメイン、カドヘ
リンモチーフ、ＩＩＩ型フィブロネクチンリピート（Ｆ
ＮＩＩＩ型リピート）、ＬＲＲ（ｌｅｕｃｉｎｅｒｉ
ｃｈｒｅｐｅａｔ）配列、ＥＧＦ（ｅｐｉｄｅｒｍａ
ｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ）モチーフなどが知ら
れている。

【００１４】Ｉｇ様ドメインはイムノグロブリン・スー
パーファミリーに属する多数の分子に含まれ、神経細胞
を含む各種細胞に発現する細胞接着分子のＮ−ＣＡＭ、
Ｌ１、ＩＩ型ファシクリンは共に５つのＩｇ様ドメイン
を有する（前出，細胞の分子生物学第３版，９６８−９
６９）。カドヘリンモチーフは神経冠細胞に発現するＮ
カドヘリンをはじめ、カドヘリンファミリーに通常５つ
のドメイン構造で含まれる（前出，細胞の分子生物学第
３版，９６６−９６８）。

【００１５】ＦＮＩＩＩ型リピートはＩＩＩ型フィブロ
ネクチンやテネシンなどの細胞外マトリックス分子、Ｎ
−ＣＡＭやＬ１などの細胞接着分子に含まれる。（前
出，細胞の分子生物学第３版，９８６−９８８）ＬＲＲ配列は最近報告されたマウス神経系細胞に発現す
るＮＬＲＲ−１（Ｔａｇｕｃｈｉら，ＭｏｌＢｒａｉ
ｎＲｅｓ，３５，３１−４０，１９９６）、ＮＬＲＲ
−３（Ｔａｎｉｇｕｃｈｉら，ＭｏｌＢｒａｉｎＲ
ｅｓ，３６，４５−５２，１９９６）に含まれ、結晶解
析により立体構造が明らかにされている（Ｋｏｂｅら，
Ｎａｔｕｒｅ，３７４，１８３−１８６，１９９５）。
またＬＲＲ配列を有するいくつかの分子において、ＬＲ
Ｒ配列のＮ末側、Ｃ末側にも保存領域が存在することが
報告されている（Ｒｏｔｈｂｅｒｇら，ＧｅｎｅＤｅ
ｖ，４，２１６９−２１８７，１９９０）。

【００１６】ＥＧＦモチーフは外胚葉のニューロブラス
トへの分化を抑制するノッチ、デルタなどのリセプター
−リガンド分子やテネシン、ラミニンなどの細胞外マト
リックス分子に含まれるモチーフであり、３ヶ所のジス
ルフィド結合と１ヶ所のＣａ ²⁺結合部位を有すると一般
に考えられている。ＥＧＦモチーフの立体構造は結晶解
析により明らかにされている（Ｒａｏら，Ｃｅｌｌ，８
２，１３１−１４１，１９９５）。これらの分子のいく
つかはＥＧＦモチーフがタンデムに並んだ構造を有し、
ノッチの例では３６個のＥＧＦモチーフがリピート構造
を取り、その１１番目と１２番目のＥＧＦモチーフがリ
ガンドとの結合に関与していることが明らかになってい
る（Ｆｅｈｏｎら，Ｃｅｌｌ，６１，５２３−５３４，
１９９０）。

【００１７】これらのドメイン構造を標的とする新規蛋
白質の遺伝子クローニングは、いくつかの方法が考え得
る。例えば、保存されたアミノ酸配列部分に対応する混
合ＰＣＲプライマーを作製し、ＰＣＲにより該当するア
ミノ酸配列に対応する遺伝子断片を取得する方法、ある
いは保存されたアミノ酸配列部分に対応するオリゴＤＮ
Ａプローブを作製し、ハイブリダイゼーション法により
スクリーニングを行う方法、あるいはファミリーを形成
している遺伝子群や異種に等価の遺伝子が知られている
場合には、既知遺伝子の保存領域に該当する核酸断片を
プローブとして特異性のやや低い条件でハイブリダイゼ
ーションを行う方法などが一般的に行われている。いず
れの場合もゲノムＤＮＡおよびｃＤＮＡをライブラリー
として使用することができる。

【００１８】近年、ＤＮＡシーケンス技術が向上し、ゲ
ノムＤＮＡやｃＤＮＡのライブラリをランダムにシーケ
ンスし、ヒト、線虫、シロイヌナズナなどの種の全ゲノ
ムＤＮＡおよび全ｃＤＮＡ配列の解明が試みられている
（ＧｅｎｏｍｅＤｉｒｅｃｔｏｒｙ，Ｎａｔｕｒｅ，
３７７，３Ｓ，１９９５）。ヒトのｃＤＮＡに関して、
ＴＩＧＲ（ＴｈｅＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＧｅ
ｎｏｍｉｃＲｅｓｅａｒｃｈ）によるＥＳＴプロジェ
クト、ワシントン大学−メルクによるＥＳＴプロジェク
ト、コロラド大学によるＳＴＳプロジェクトなどがこの
事業に参入している。これらの機関から提出されたｃＤ
ＮＡの部分塩基配列はＧｅｎｂａｎｋおよびＥＭＢＬの
遺伝子データベースに登録されており、開示されてい
る。１９９７年４月１５日発行のＧｅｎｂａｎｋリリー
ス１００によれば、ＥＳＴクローンの累積登録数は約８
９万クローンで、平均長は３６８塩基対（ｂｐ）である
ことがわかる。したがって、ＥＳＴクローンの塩基配列
を基にハイブリダイゼーション法のプローブを作製する
ことにより、所望のドメイン構造を有する新規遺伝子を
クローニングする事が可能である（前述ＮＬＲＲ−１お
よびＮＬＲＲ−３）。

【００１９】本発明者らは、前記の各種のドメイン構造
を有し、かつ神経系に発現する既知分子、約３０種類を
選出し、該当するドメイン構造をコードする塩基配列を
雛形として、遺伝子データベースのＧｅｎｂａｎｋリリ
ース９１（Ｇｅｎｅｔｙｘ−ＣＤ，ソフトウェア開発株
式会社）に登録されているＥＳＴクローンを対象にホモ
ロジー検索を行った。検索に用いたアルゴリズムはＧｅ
ｎｅｔｙｘ−ＣＤソフトウェア内蔵のプログラムを用い
た。この結果、およそ６０％以上の遺伝子配列のホモロ
ジーを有する約６００のＥＳＴクローンが候補となっ
た。これらのクローンの遺伝子配列は、相補的な配列と
共に１クローンにつき６通りのアミノ酸配列に翻訳し、
該当するアミノ酸配列を有するかどうかを調べた。この
とき、ＥＳＴクローンで報告されている塩基配列はしば
しば欠落や重複もしくはＮで示される不明配列があるた
め、アミノ酸フレームの変化を考慮して注意深くアミノ
酸配列を生成した。

【００２０】特に配列情報の両端の数十ｂｐは、見かけ
上の終止コドンの出現や不明配列のため、ほとんどのＥ
ＳＴクローンでアミノ酸フレームが全く組めず、両端合
わせて約１００ｂｐは実質上有用な配列情報でなかっ
た。また、およそ２００ｂｐ以下の短い断片情報しか有
さないＥＳＴクローンは、上記理由を考え合わせてスク
リーニングのためのハイブリダイゼーションのプローブ
として短すぎて適さないため、候補からはずした。最終
的に候補に残ったＥＳＴクローンのうち、Ｇｅｎｂａｎ
ｋ登録番号Ｈ１４２１６とＴ０８０４９の２つのクロー
ンは、ＥＧＦモチーフをコードする同一部分の塩基配列
情報を有することが判明し、本発明者らは参考例に示し
たごとく、該ＥＳＴクローンに相同の配列を有するＤＮ
Ａ断片を得、このＤＮＡ断片をプローブとしてヒトｃＤ
ＮＡライブラリのスクリーニングおよびＲＡＣＥ（ｒａ
ｐｉｄａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃＤＮＡ
ｅｎｄｓ）法により、該ヒトスリット１のオープンリ
ーディングフレーム全長を含むＤＮＡを得、配列表の配
列番号９記載の塩基配列を決定した。該塩基配列から推
定された該ヒトスリット１の成熟蛋白質のアミノ酸配列
を配列表の配列番号８に、シグナル配列を含む全アミノ
酸配列を配列番号１０に示した。

【００２１】なお、該ヒトスリット１のオープンリー
ディングフレームを含むＤＮＡを含有してなるプラスミ
ドｐＢＳＳｌｉｔは、大腸菌株ＤＨ５に遺伝子導入し、
該菌株Ｅ．ｃｏｌｉ：ｐＢＳＳｌｉｔは日本国通産省工
業技術院生命工学技術研究所に受託番号ＦＥＲＭＰ−
１５９２０として平成８年１０月２８日に寄託されてい
る。

【００２２】該アミノ酸配列のドメイン構造の解析によ
り、該ヒトスリット１はＬＲＲ配列、ＥＧＦモチーフの
他に、ＡＬＰＳ領域（Ｒｏｔｈｂｅｒｇら，Ｊ．Ｍｏ
ｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７，３６７−３７０，１９９
２）、システイン豊富領域をドメイン構造として含有す
ることが明らかになった。本発明者らは、該ヒトスリッ
ト１の塩基配列をテンプレートとして、遺伝子データベ
ースのＧｅｎｂａｎｋリリース９３（Ｇｅｎｅｔｙｘ−
ＣＤ，ソフトウェア開発株式会社）に登録されているＥ
ＳＴクローンを対象にホモロジー検索を行ない、類縁分
子の発見に努めた。検索に用いたアルゴリズムはＬｉｐ
ｍａｎ−Ｐｅａｒｓｏｎ法（Ｌｉｐｍａｎら，Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ，２２７，１４３５−１４４１，１９８５）を用
いた。この結果、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｈ５３５７１
は、先願のヒトスリット１のシステイン豊富領域にホモ
ロジーを有するアミノ酸配列をコードする塩基配列を有
し、またＧｅｎｂａｎｋ登録番号Ｈ１０９５２は、先願
のヒトスリット１のＬＲＲ配列にホモロジーを有するア
ミノ酸配列をコードする塩基配列を有することが判明し
た。本発明者らは実施例１のごとく、これらのＥＳＴの
ｃＤＮＡクローンを入手し（クラボウより入手可能）、
塩基配列を決定したが、本願のポリペプチドのアミノ酸
全長をコードする塩基配列は含まれていなかった。

【００２３】次に、これらのＤＮＡ断片を用いて、ヒト
のゲノム遺伝子ライブラリーあるいはｃＤＮＡライブラ
リーから目的遺伝子の全長を得ることは可能である。全
長のクローニングには、ＤＮＡ断片をアイソトープ標
識、及び各種非アイソトープ標識し、ライブラリーをハ
イブリダイゼーションなどの方法にてスクリーニングす
ることによって得ることができる。アイソトープの標識
法としては、たとえば［α³²Ｐ］ｄＣＴＰとクレノーＤ
ＮＡポリメラーゼを用いてラベルする方法や、他のニッ
クトランスレーション法またはプライマー伸長法などに
よる標識法が利用できる。

【００２４】本発明者らは実施例２に示したごとく、Ｄ
ＮＡ断片をラジオアイソトープでラベルし、ハイブリダ
イゼーションプローブとし、スクリーニングライブラリ
ーとしてヒト胎児肺由来ｃＤＮＡを用いてスクリーニン
グを行い、得られた複数のクローンのＤＮＡ配列を決定
したところ、これらは最終的に配列表の配列番号２に示
す塩基配列を有するｃＤＮＡであることがわかった。ま
た該配列の９７８番から９７９番の間に配列表の配列番
号１１に記載の１２塩基対からなる塩基配列が挿入され
ている以外は配列表の配列番号２と同一配列を有するク
ローン、該配列の１６４２番から１６６５番の２４塩基
対が欠失したクローンが見いだされた。さらに該配列の
２１１０番ＴがＣに変異し、あるいは該配列の４０３４
番ＣがＴに変異し、アミノ酸変異を引き起こすポイント
ミューテーションを有するクローンも見出された。配列
表の配列番号２に示したＤＮＡ配列には２０５番に始ま
る開始コドン（ＡＴＧ）から４７９４番で終わる終止コ
ドン（ＴＡＡ）まで、１５２９個のアミノ酸をコードし
うるオープンリーディングフレームが存在した。該オー
プンリーディングフレームから翻訳したアミノ酸配列を
配列番号３に示した。尚、該オープンリーディングフレ
ームを含むプラスミドｐＨＳＬ２は大腸菌株ＪＭ１０９
（東洋紡社製）に遺伝子導入した。

【００２５】このＤＮＡの塩基配列（配列表の配列番号
２）を遺伝子データベース（Ｇｅｎｂａｎｋ、リリース
１００）で既知遺伝子の塩基配列と比較したところ、オ
ープンリーディングフレームを有する遺伝子に一致する
配列は見られず、したがって全体の配列に関しては全く
新規な配列である。また同様に該アミノ酸配列（配列表
の配列番号３）をＰＩＲ（リリース５０）およびＳｗｉ
ｓｓ−Ｐｒｏｔ（リリース３４）にて既知のアミノ酸配
列と比較したが、同一の配列は認められず、この配列は
全く新規な配列である。しかしながら、比較的高いホモ
ロジーを有する配列として、ショウジョウバエ（Ｄｒｏ
ｓｏｐｈｉｌａｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）の神経発
生において重要な働きをするスリット（Ｓｌｉｔ）分子
が見出され、アミノ酸配列で約４３％の相同性を有する
ことが明らかになった。スリット分子の脊椎動物のホモ
ログの存在は本発明者らによる先願のヒトスリット１で
初めて明らかとし、配列表の配列番号８に示したヒトス
リット１のアミノ酸配列と配列番号１に示した本発明の
ヒトスリット２との相同性は約６６％である。すなわち
本発明のヒトスリット２のアミノ酸配列およびＤＮＡ配
列は先願のヒトスリット１とは明らかに異なっていた。
なお、ショウジョウバエスリットのＰＣＴ特許（ＷＯ
９２／１０５１８）には脊椎動物のホモログの存在を示
唆する記載はない。

【００２６】配列表の配列番号３記載のアミノ酸配列を
Ｋｙｔｅ−Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの方法（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂ
ｉｏｌ．，１５７：１０５，１９８２）に従って、アミ
ノ酸配列から疎水性部分、親水性部分を解析した。その
結果、本発明のヒトスリット２はシグナルペプチドを有
し、細胞膜通過部分を有さない遊離型の分泌蛋白質であ
ることが推定された。つまりこの解析結果によれば、該
ヒトスリット２の分泌前駆体のアミノ酸配列は配列表の
配列番号３に示す１５２９アミノ酸残基からなるポリペ
プチドであり、シグナルペプチド領域は同配列表のアミ
ノ酸配列の−２６番のメチオニンから−１番のグルタミ
ンにあたる２６アミノ酸残基、分泌成熟体領域は同配列
表の１番のアラニンから１５０３番セリンにあたる１５
０３アミノ酸残基が該当することが推定された。ただ
し、このシグナルペプチド切断部位は、あくまでもアミ
ノ酸配列から推定されたものであり、実際に生体中での
切断部位は、前後１０アミノ酸以内の範囲で異なること
も十分考えられる。

【００２７】またアミノ酸配列から予想されることとし
て、糖鎖が付加される部分はＮ−アセチル−Ｄ−グルコ
サミンがＮ−グリコシド結合可能な部分として、配列表
の配列番号１のアミノ酸配列の４０番、１６０番、５３
８番、５９７番、７６８番、７７３番、９８３番、９８
４番、９９３番、１１５７番、１２４０番および１２７
４番の１２個のアスパラギン残基が挙げられる。またグ
ルコサミノグリカンが結合可能な部分として、１４０３
番セリンが挙げられる。一般に、糖鎖が付加された蛋白
質の方がポリペプチドそのものよりも生体内での分解に
対して安定であり、また強い生理活性を有していると考
えられている。

【００２８】配列表の配列番号１に記載したアミノ酸配
列のドメイン構造の解析により、ヒトスリット２はポリ
ペプチドのほぼ全体が緻密なドメイン構造で構成されて
いることが明らかになった。すなわち、タンデムに並ん
だＬＲＲ配列とそれを挟むＬＲＲのＮ末保存領域（ＬＲ
Ｒ−ＮＲ）とＬＲＲのＣ末保存領域（ＬＲＲ−ＣＲ）を
１つのユニットとし、このユニットがＮ末から４つ連続
して並び、その直後にＥＧＦモチーフが６個タンデムに
並び、直後にＡＬＰＳドメイン（Ｒｏｔｈｂｅｒｇら，
Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７，１９９２に詳細）が
続き、その後再びＥＧＦモチーフが３個並び、システイ
ン豊富領域（Ｒｏｔｈｂｅｒｇら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ
ｌ．，２２７，１９９２に詳細）が続き、Ｃ末になる。

【００２９】さらに詳しく説明すれば、第１ユニットの
ＬＲＲ−ＮＲ（ＬＲＲ−ＮＲ１）は配列表の配列番号１
に記載のアミノ酸配列の２番のシステインから３３番の
アルギニン、第１ユニットのＬＲＲ配列（ＬＲＲ１）は
７回のリピート構造を有し、同配列表の３４番のロイシ
ンから１８３番のアスパラギン、第１ユニットのＬＲＲ
−ＣＲ（ＬＲＲ−ＣＲ１）は同配列表の１８４番のアス
パラギンから２４６番のヒスチジン、第２ユニットのＬ
ＲＲ−ＮＲ（ＬＲＲ−ＮＲ２）は同配列表の２４７番シ
ステインから２７８番グルタミン酸、第２ユニットのＬ
ＲＲ配列（ＬＲＲ２）は６回のリピート構造を有し、同
配列表の２７９番イソロイシンから４０４番アスパラギ
ン、第２ユニットのＬＲＲ−ＣＲ（ＬＲＲ−ＣＲ２）は
同配列表の４０５番プロリンから４７９番アラニン、第
３ユニットのＬＲＲ−ＮＲ（ＬＲＲ−ＮＲ３）は同配列
表の４８０番システインから５１１番グルタミン酸、第
３ユニットのＬＲＲ配列（ＬＲＲ３）は６回のリピート
構造を有し、同配列表の５１２番ロイシンから６３８番
のアスパラギン、第３ユニットのＬＲＲ−ＣＲ（ＬＲＲ
−ＣＲ３）は同配列表の６３９番プロリンから７００番
アルギニン、第４ユニットのＬＲＲ−ＮＲ（ＬＲＲ−Ｎ
Ｒ４）は同配列表の７０１番システインから７３２番グ
ルタミン酸、第４ユニットのＬＲＲ（ＬＲＲ４）は５回
のリピート構造を有し、同配列表の７３３番ロイシンか
ら８３３番アスパラギン、第４ユニットのＬＲＲ−ＣＲ
（ＬＲＲ−ＣＲ４）は同配列表の８３４番プロリンから
８９５番プロリン、第１ＥＧＦモチーフは同配列表の８
９６番システインから９２８番システイン、第２ＥＧＦ
モチーフは同配列表の９３５番システインから９６９番
システイン、第３ＥＧＦモチーフは同配列表の９７６番
システインから１００７番システイン、第４ＥＧＦモチ
ーフは同配列表の１０１４番システインから１０４７番
システイン、第５ＥＧＦモチーフは同配列表の１０５４
番システインから１０８５番システイン、第６ＥＧＦモ
チーフは同配列表の１０９９番システインから１１３０
番システイン、ＡＬＰＳドメインは１１３１番グルタミ
ン酸から１３０７番システイン、第７ＥＧＦモチーフは
同配列表の１３１０番システインから１３４１番システ
イン、第８ＥＧＦモチーフは同配列表の１３４９番シス
テインから１３８０番システイン、第９ＥＧＦモチーフ
は同配列表の１３９０番システインから１４２１番シス
テイン、システイン豊富領域は同配列表の１４２７番シ
ステインから１５０１番システインまでである。

【００３０】これらのドメイン構造はヒトスリット１と
ヒトスリット２との間でＬＲＲのリピート数を含めて保
存されている。またドメイン構造内でのシステインの
数、位置ともに保存されており、極めて類似の立体構造
をとることが推定できる。一方、ショウジョウバエスリ
ットの構造（Ｒｏｔｈｂｅｒｇら，ＧｅｎｅＤｅｖ，
４，２１６９−２１８７，１９９０およびＰＣＴ特許，
ＷＯ９２／１０５１８）は、ＬＲＲ−ＮＲ，ＬＲＲ，
ＬＲＲ−ＣＲからなるユニットが４つあることが示され
ている。ＬＲＲの詳細な構造に関して、ＬＲＲ１はヒト
型が７回のＬＲＲの繰り返しに対してショウジョウバエ
は６回、ＬＲＲ３はヒト型が６回に対してショウジョウ
バエが５回の違いが認められた。ＥＧＦモチーフに関し
て、ヒト型が９つに対してショウジョウバエは７つであ
り、ヒト型の第７、第８、第９ＥＧＦモチーフが３連の
リピート構造をとるのに対して、ショウジョウバエは１
つのみである。なお、ショウジョウバエスリットに関し
て、第７ＥＧＦモチーフの後にオルタナティブ・スプラ
イシングにより２種類の転写物が存在することが報告さ
れている。

【００３１】本発明者らが核酸配列及びアミノ酸配列を
明らかにしたヒトスリット２に関してもオルタナティブ
・スプライシングが見いだされ、配列表の配列番号１記
載のアミノ酸配列の２３２番セリンと２３３番グリシン
の間に配列表の配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有
する４アミノ酸残基が挿入されたアミノ酸配列をコード
する核酸配列を有するクローンが見出された。また別の
クローンでは配列表の配列番号１記載のアミノ酸配列の
４５４番アラニンから４６１番プロリンまでの８アミノ
酸が欠失したアミノ酸配列をコードする塩基配列を有し
ていた。さらに配列表の配列番号１記載のアミノ酸配列
の６１０番セリンがプロリンに変異しているクローン、
また同配列表の１２５１番セリンがフェニルアラニンに
変異しているクローンが見いだされた。

【００３２】すなわち、本発明の新規ヒトスリット２
は、配列表の配列番号１に記載のアミノ酸配列を含有す
るポリペプチドであるが、上記を例とするオルタナティ
ブ・スプライシングによって生じる一部のアミノ酸配列
の挿入、欠失やポイントミューテーションによって生じ
るアミノ酸置換による該ポリペプチドの変異体も本発明
のポリペプチドに含まれる。これら自然界で生じ得る変
異体の他に、人為的な操作によって作製しうる該ポリペ
プチドの変異体も本発明に含まれる。また、そのアミノ
酸配列のＮ末もしくはＣ末に多少のアミノ酸残基、ペプ
チド残基が付加されることもあり得る。しかるに本発明
の配列表の配列番号１記載のポリペプチドの性質を失わ
ない該ポリペプチドの変異体は本発明に含まれる。配列
表の配列番号１記載のポリペプチドと該ポリペプチドの
変異体のアミノ酸配列の相同性は７０％以上であること
が好ましく、更に９０％以上が好ましい。また該ポリペ
プチドやその変異体にＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン
やＮ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンなどの糖鎖が、Ｎ
−グリコシドあるいはｏ−グリコシド結合してなるポリ
ペプチドも本発明に含まれる。

【００３３】ショウジョウバエでの研究（Ｒｏｔｈｂｅ
ｒｇら，ＧｅｎｅＤｅｖ，４，２１６９−２１８７，
１９９０およびＰＣＴ特許，ＷＯ９２／１０５１８）
では、スリットは神経発生期に中外胚葉から分化した正
中線グリア細胞に特異的に発現される蛋白質で、交連軸
索に沿って分泌運搬され、はしご状神経の形態形成に作
用する。また成長円錐が筋および心筋に接続する部位に
も局在する。これらのことからスリットは神経細胞間お
よび神経細胞と筋系の細胞との相互作用を媒介すると考
えられている。またスリットの欠損変異株のショウジョ
ウバエ胚は、中枢神経の形成が崩壊し、発生途上で死滅
することが報告されている。なお成体についてのスリッ
トの発現は不明である。

【００３４】本発明者らが明らかにした塩基配列を用い
れば、ヒトスリット２の発現・機能に関して、近年の遺
伝子操作技術、発生工学技術を応用した詳細な解析が可
能である。すなわち、配列表の配列番号２の一部もしく
は全部の塩基配列を有する１２ｍｅｒから１６ｍｅｒ以
上、好ましくは１８ｍｅｒ以上の相補し得る核酸、つま
りアンチセンスＤＮＡ、ＲＮＡ、及びそれらがメチル
化、メチルフォスフェート化、脱アミノ化、またはチオ
フォスフェート化された誘導体によって、ハイブリダイ
ゼーション、ＰＣＲなどの手法を用いて行うことが出来
る。実施例４に示したように、同様な方法でマウス等、
他の脊椎動物の本ヒトスリット２のホモログの検出や遺
伝子クローニングができる。さらに、ヒトを含めたゲノ
ム上の遺伝子のクローニングも同様に可能である。

【００３５】本発明者らは、ヒトスリット２のｍＲＮＡ
の臓器発現分布を調べるために実施例３に示すごとく、
配列表の配列番号２記載の核酸配列の一部の配列を有す
る二本鎖ＤＮＡ断片を作製し、これをアイソトープラベ
ルしてヒト臓器由来のｍＲＮＡを固定したフィルターを
用いてノザンブロッティングを行った。その結果、胎児
では肺と腎臓に発現することが観察された。成体では脊
髄に最も強く、甲状腺、食道、副腎にも発現が観察され
た。参考例３に示したヒトスリット１が発現する脳には
ヒトスリット２の発現は観察されなかった。これらの知
見はヒトスリット２がヒトスリット１と異なる発現分布
を示し、異なった作用を有することが示される。

【００３６】また、ｉｎｓｉｔｕハイブリダイゼーシ
ョンやｉｎｓｉｔｕＰＣＲなどの方法により、上記
のノザンブロッティングで発現が観察された臓器におい
て、病理組織標本のヒトスリット２の発現を調べること
により、病気との関連をさらに詳細に調べることが可能
である。また実験動物のスリット２ホモログ遺伝子を使
用してハイブリダイズすることにより全長配列をクロー
ニングし、アンチセンスオリゴマーやドミナントネガテ
ィブによる発現制御、トランスジェニックマウス、ジー
ンターゲッティングマウス、本遺伝子と関連する遺伝子
を共に不活化したダブルノックアウトなどのあらゆる方
法を用いることにより、詳細に脊椎動物のスリット２ホ
モログの発現・機能を解析することが可能である。脊椎
動物のスリット２ホモログ遺伝子を用いることにより、
神経発生過程が大きく異なるショウジョウバエのスリッ
ト遺伝子では得られない、脊椎動物神経系の作用解析が
可能である。これらのデータはヒトへの外挿が可能であ
る。

【００３７】さらにヒトスリット２の核酸配列情報を用
いることでゲノム上の染色体マッピングとゲノム配列決
定、それに引き続いてプロモータおよびエンハンサー領
域の解析、スプライシング構造の解析が可能である。ゲ
ノム上の異常があれば、遺伝子診断、遺伝子治療への応
用が可能である。ＥＧＦモチーフを有する蛋白質のう
ち、４８個のＥＧＦモチーフを有するフィブリリンの欠
損は、先天性疾患のマルファン症候群を引き起こすこと
が知られている（Ｐｅｒｅｉｒａら、Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．
Ｇｅｎｅｔ．、２、９６１ー９６８、１９９３）。ヒト
スリット２に関しても、ショウジョウバエスリットの欠
損が致死的な影響を与えることから、その欠損もしくは
変異は致死的もしくは先天性の障害、後天的な神経疾患
の原因になることが推定される。

【００３８】昆虫類のはしご状神経と脊椎動物の脊髄は
発生学的に共通性が高く、ショウジョウバエでの研究結
果が、ヒトスリット２の機能推定に有用である。すなわ
ち、ヒトスリット２の生理機能は脊髄での神経細胞間お
よび神経細胞と筋肉系の細胞との相互作用を媒介してい
ること、脊髄の形態形成、維持、再生に関与しているこ
とが考えられる。この作用から類推されるヒトスリット
２の医薬への応用として、脊髄損傷や神経切断、各種自
己免疫疾患、骨粗鬆症、脊椎変性症など、脊髄、末梢神
経や筋肉系に関与するあらゆる疾患において、脊髄での
神経細胞間および神経細胞と筋肉系の細胞との相互作用
の障害で引き起こされる機能障害の治療や症状緩和に有
用である。症状として例を挙げれば、痛み、しびれ、麻
痺、震え、ひきつり、筋力の衰えなどが考え得る。

【００３９】ショウジョウバエスリットは正中線グリア
細胞に発現するが、これと同様な表現系を示す分子にｓ
ｉｎｇｌｅ−ｍｉｎｄｅｄ（ｓｉｍ）が知られている
（Ｋｌａｍｂｔら、Ｃｅｌｌ、６４、８０１−８１５、
１９９１）。ｓｉｍは塩基性ヘリックス・ループ・ヘリ
ックス（ｂＨＬＨ）型の転写調節因子であることから、
スリットとｓｉｍはシグナル伝達上の何らかの関連が存
在する可能性がある。ヒトのｓｉｍホモログ遺伝子であ
るｈＳＩＭは第２１番染色体上のダウン症候群領域に位
置することが報告され、ｈＳＩＭとダウン症候群の関連
性が指摘されている（Ｄａｈｍａｎｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、９２、９１９１−
９１９５、１９９５）。これらのことから、ヒトスリッ
ト２は先天性および後天性の脳・神経疾患に関連してい
る可能性がある。

【００４０】近年、脳・神経細胞の遺伝子治療用ベクタ
ーに関して、アデノウィルスベクター、ヘルペス単純ウ
ィルスベクターをはじめ、アデノ関連ウィルスベクタ
ー、免疫不全ウィルスベクター、フォーミーウィルスベ
クター等のウィルスベクターや脂質試薬を使用した神経
細胞系への遺伝子導入が可能になっている。また、遺伝
子治療用ベクターのプロモータ領域の改良によって任意
に遺伝子発現を制御する技術が開発されている。こうし
た周辺技術の進歩により、ゲノム上に異常がなくても、
前記の神経細胞間もしくは神経細胞と筋系細胞間の相互
作用の改善の目的で積極的に遺伝子治療を行うことが可
能となる。

【００４１】クローン化された本発明のヒトスリット２
をコードするＤＮＡは、目的によりそのまま、あるいは
所望により制限酵素で消化して使用することができる。
クローン化されたＤＮＡから発現させたい領域を切り出
し、発現に適したベクター中のプロモータの下流に連結
して組換えＤＮＡ体を得ることができる。また、更にそ
の形態としては単独のポリペプチドでもかまわないが、
複合体の形態を有するポリペプチドでも可能である。本
発明で使用する「複合体」は２種類以上の物質を単に混
ぜ合わせた混合物ではなく、１種類もしくは２種類以上
のポリペプチドが共有結合を含む何らかの結合様式を有
してなる化合物、コンジュゲート、またはコンプレック
スの総称を意味する。そのような例としては、イムノグ
ロブリンとのキメラ蛋白質のジスルフィド結合による共
有結合を介した複合体、または実施例５で作製されたＦ
ＬＡＧ配列を有するポリペプチドと抗ＦＬＡＧ抗体によ
る抗原抗体反応を介した複合体などの形態が挙げられ
る。

【００４２】さらにヒトＩｇＧのＦｃ部分とのキメラ蛋
白質として発現させて、抗体のヒンジ部分によりジスル
フィド結合を介した多量体として発現させる方法、ま
た、抗体認識部位をＣ末もしくはＮ末に発現するキメラ
蛋白質として発現させ、発現させた該ポリペプチドのＣ
末もしくはＮ末の抗体認識部位を特異的に認識する抗体
と反応させることにより、多量体を形成させる方法が挙
げられる。したがって、遺伝子工学的な技術により２量
体もしくはそれ以上の形態を有する配列表の配列番号１
記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドに関しても本
発明に含まれる。該ヒトスリット２の発現ベクターとし
ては、大腸菌由来のプラスミド、枯草菌由来のプラスミ
ド、酵母由来プラスミド、あるいはλファージなどのバ
クテリオファージ、およびレトロウィルス、ワクシニア
ウィルスなどの動物ウィルスなどが挙げられる。プロモ
ータとしては、遺伝子発現に用いる宿主に対応していて
適切なプロモータであればいかなるものでもよい。

【００４３】こうして得られる組換えＤＮＡ体は、動物
細胞、昆虫細胞、酵母、カビなどの真核細胞や、バクテ
リア、放線菌などの原核細胞を宿主として形質転換され
た細胞を得ることができる。形質転換されうる細胞の例
としては、真核細胞としてサル細胞であるＣＯＳ−１、
Ｖｅｒｏ、チャイニーズハムスター細胞ＣＨＯ、カイコ
細胞ＳＦ９等が挙げられ、原核細胞としてエシェリヒア
属菌、バチルス属菌等が挙げられる。これらの形質転換
された細胞を用いて、リコンビナントの当該ヒトスリッ
ト２を生産、精製させることが可能である。これらの操
作に関して、多数の方法が成書によって知られている
（Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，ＧｅｎｅＴｒａｎｓｆｅｒａ
ｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎ − ＡＬａｂｏｒａｔ
ｏｒｙＭａｎｕａｌ，ＳｔｏｃｋｔｏｎＰｒｅｓ，
１９９０および横田ら, バイオマニュアルシリーズ４,
遺伝子導入と発現・解析法, 羊土社, １９９４）。

【００４４】かくして得られた該ヒトスリット２を用い
れば、ヒトスリット２の生理活性探索が可能である。ヒ
トスリット２は脊髄、甲状腺、副腎、食道に発現する。
また、ショウジョウバエでは発生時の正中線に特異的に
発現するが、脊椎動物でこれに相当する部位は底板およ
び蓋板にあたる。実験動物よりこれらの臓器の組織、あ
るいは各種細胞株を培養し、該ヒトスリット２を作用さ
せることにより、インビトロの生理活性探索のアッセイ
系を構築しうる。さらにこのアッセイ系を応用すれば、
該ポリペプチドの作用を阻害する化合物のスクリーニン
グが可能である。

【００４５】本発明のヒトスリット２を医薬品として用
いるならば、上記に示した形態を有する本発明のヒトス
リット２を適当な安定化剤、例えばヒト血清アルブミン
などと共に凍結乾燥品を作製し、用時注射用蒸留水にて
溶解もしくは懸濁して使用し得る形状が望ましい。例え
ば１から１０００μｇ／ｍｌの濃度に調製した注射剤、
点滴剤として提供することができる。本発明者らは本発
明のヒトスリット２を１ｍｇ／ｍｌ、ヒト血清アルブミ
ン１ｍｇ／ｍｌとなるようにバイアルに小分けし、長期
にわたって該ポリペプチドの物理的、化学的性状は保持
された。また、該ヒトスリット２の毒性については、マ
ウスに対して１０ｍｇ／Ｋｇを腹腔内投与したがマウス
の死亡例は確認されなかった。

【００４６】また、本発明のインビボの生理活性は、あ
らゆる疾患モデルマウス、またはそれらに準ずる疾患に
似た症状を呈するラット、サル等の動物をモデルとして
投与を行い、その身体的、生理的な機能の回復、異常を
調べることにより可能となる。勿論、これらの結果が人
にも外挿できるため、本ヒトスリット２の薬効としての
評価として有効なデータを得ることが出来る。

【００４７】本発明のヒトスリット２を医薬品として利
用する場合、その適応分野として、あらゆる神経疾患、
甲状腺疾患、副腎疾患、筋疾患、好ましくは脊髄の機能
不全に起因する疾患が対象となる。その際の投与量とし
てはその形態などにもよるが、具体的には１０μｇ／Ｋ
ｇから１０ｍｇ／Ｋｇ程度投与すればよい。該ヒトスリ
ット２を特異的に認識する抗体は実施例８に示したよう
に作製することができる。また成書（Ａｎｔｉｂｏｄｉ
ｅｓａｌａｂｏｒａｔｏｒｙｍａｎｕａｌ，Ｅ．Ｈ
ａｒｌｏｗｅｔａｌ．，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇ
ＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ）に示された各種
の方法ならびに遺伝子クローニング法などにより分離さ
れたイムノグロブリン遺伝子を用いて、細胞に発現させ
た遺伝子組換え体抗体によっても作製することができ
る。このように作製された抗体は該ヒトスリット２の精
製に利用できる。すなわち、実施例８に示したごとく、
該ヒトスリット２を特異的に認識する抗体を用いれば、
ヒトスリット２の検出、測定が可能であり、上記に示し
た疾患などの診断薬として使用でき得る。

【００４８】尚、本明細書に記載されているｃＤＮＡの
作製、ノーザンブロットによる発現の検討、ハイブリダ
イゼーションによるスクリーニング、組換えＤＮＡの作
製、ＤＮＡの塩基配列の決定、ｃＤＮＡライブラリーの
作製等の操作は、当業者間で通常行われているものであ
り、実験書としては、たとえば、Ｍａｎｉａｔｉｓらの
編集したＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ，Ａｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｙｍａｎｕａｌ，１９８９，Ｅｄ
ｓ．，Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｊ．，Ｆｒｉｔｓｃｈ，Ｅ．
Ｆ．，ａｎｄＭａｎｉａｔｉｓ，Ｔ．，ＣｏｌｄＳ
ｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬｏｂｏｒａｔｏｒｙＰ
ｒｅｓｓに従えば容易に実施できる。使用する酵素、試
薬類も全て市販の製品を用いることができ、特に断らな
い限り、製品で指定されている使用条件に従えば、完全
にそれらの目的を達成することができる。

【００４９】

【発明の実施の形態】以下に発明を実施する形態につい
て例を示すが、必ずしもこれらに限定されるものではな
い。

【００５０】

【参考例１】ヒトスリット１クローニングのためのＰＣＲプライマー
の作製およびＰＣＲＧｅｎｂａｎｋ登録番号Ｔ０８０４９のクローンに対応
するＰＣＲプライマーとして、配列表の配列番号１３記
載の塩基配列のセンスプライマーＴ０８０４９Ｓ、およ
び配列番号１４記載の塩基配列のアンチセンスプライマ
ーＴ０８０４９Ａの合成オリゴＤＮＡを作製した。

【００５１】合成オリゴヌクレオチドは固相法を原理と
する全自動ＤＮＡ合成機を使用して作製した。全自動Ｄ
ＮＡ合成機としてはアプライドバイオシステム社３９１
ＰＣＲ−ＭＡＴＥを使用した。ヌクレオチド、３'-ヌク
レオチドを固定した担体、溶液、および試薬は同社の指
示に従って使用した。所定のカップリング反応を終了
し、トリクロロ酢酸で５’末端の保護基を除去したオリ
ゴヌクレオチド担体を濃アンモニア中にて室温で１時間
放置することにより担体からオリゴヌクレオチドを遊離
させた。次に、核酸及びりん酸の保護基を遊離させるた
めに、核酸を含む反応液を、封をしたバイアル内におい
て濃アンモニア溶液中で５５℃にて１４時間以上放置し
た。担体及び保護基を遊離した各々のオリゴヌクレオチ
ドの精製をアプライドバイオシステム社のＯＰＣカート
リッジを使用して行い、２％トリフルオロ酢酸で脱トリ
チル化した。精製後のプライマーは最終濃度が１００ｐ
ｍｏｌ／μｌとなるように脱イオン水に溶解してＰＣＲ
に使用した。

【００５２】ＰＣＲによる増幅は以下のように行った。
ヒト胎児脳由来ｃＤＮＡ混合溶液（ＱＵＩＣＫ−Ｃｌｏ
ｎｅｃＤＮＡ、ＣＬＯＮＴＥＣＨ社）１μｌを使用
し、１０×緩衝液（５００ｍＭＫＣｌ、１００ｍＭ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．３）、１５ｍＭＭｇＣｌ
₂、０．０１％ゼラチン）５μｌ、ｄＮＴＰＭｉｘｔ
ｕｒｅ（宝酒造社製）４μｌ、前述のセンスプライマー
Ｔ０８０４９Ｓ（１００ｐｍｏｌ／μｌ）およびアンチ
センスプライマーＴ０８０４９Ａ（１００ｐｍｏｌ／μ
ｌ）を各０．２５μｌ、及びＴａｑＤＮＡポリメラーゼ
（ＡｍｐｌｉＴａｑ：宝酒造社製、５Ｕ／μｌ）０．２
μｌを加え、最後に蒸留水を加えて全量を５０μｌとし
て、９５℃で４５秒間、５５℃で４５秒間、７２℃を２
分間からなる行程を１サイクルとして、この行程を３５
サイクル行い最後に７２℃にて７分間放置してＰＣＲを
行った。このＰＣＲ産物の一部を２％アガロースゲル電
気泳動を行い、エチジウムブロマイド（日本ジーン社
製）にて染色後、紫外線下で観察し、約２５０ｂｐのｃ
ＤＮＡが増幅されていることを確認した。

【００５３】こうして得られたＴ０８０４９に対応する
ＰＣＲプライマーによるＰＣＲ産物の全量は、低融点ア
ガロース（ＧＩＢＣＯＢＲＬ社製）にて作製した２％
アガロースゲルにて電気泳動し、エチジウムブロマイド
にて染色後、紫外線照射下にて約２５０ｂｐのバンドを
切り出し、ゲルと同体積の蒸留水を加え、６５℃にて１
０分間加熱し、ゲルを完全に溶かしたのち、等量のＴＥ
飽和フェノール（日本ジーン社製）を加えて、１５００
０ｒｐｍ５分間遠心分離後上清を分離し、さらに同様な
分離作業をＴＥ飽和フェノール：クロロフォルム（１：
１）溶液、さらにクロロフォルムにて行った。最終的に
得られた溶液からＤＮＡをエタノール沈澱して回収し
た。

【００５４】プラスミドベクターとしてｐＣＲＩＩＶ
ｅｃｔｏｒ（Ｉｎｖｉｔｏｒｏｇｅｎ社製、以下ｐＣＲ
ＩＩと示す）を用い、このプラスミドベクターと先のＤ
ＮＡのモル比が１：３となるように混ぜ合わせて、Ｔ４
ＤＮＡリガーゼ（Ｉｎｖｉｔｏｒｏｇｅｎ社製）にて
プラスミドベクターにＤＮＡを組み込んだ。ＤＮＡが組
み込まれたｐＣＲＩＩを大腸菌ＯｎｅＳｈｏｔＣｏ
ｍｐｅｔｅｎｔＣｅｌｌｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ
社）に遺伝子導入し、アンピシリン（Ｓｉｇｍａ社製）
を５０μｇ／ｍｌ含むＬ−Ｂｒｏｔｈ（宝酒造社製）半
固型培地のプレートに蒔き、１２時間程度３７℃に放置
し、現れてきたコロニーを無作為選択し、同濃度のアン
ピシリンを含むＬ−Ｂｒｏｔｈ液体培地２ｍｌに植え付
け、１８時間程度３７℃で振盪培養し、菌体を回収し、
ウィザードミニプレップ（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）を用い
て添付の説明書に従ってプラスミドベクターを分離し、
このプラスミドベクターを制限酵素ＥｃｏＲＩにて消化
して、約２５０ｂｐのＤＮＡが切り出されてくることで
該ＰＣＲ産物が組み込まれていることを確認し、確認さ
れたプラスミドベクタークローンについて、組み込まれ
ているＤＮＡの塩基配列を螢光ＤＮＡシークエンサー
（アプライドバイオシステム社、モデル３７３Ｓ）にて
調べ、上記プライマーによって挟まれるＴ０８０４９の
塩基配列と相同であることを確認した。このクローンを
￥９／ｐＣＲＩＩと名付けた。

【００５５】

【参考例２】新規ヒトスリット１遺伝子の全長クローニングおよび塩
基配列の決定ヒト胎児脳由来のｃＤＮＡライブラリー（ラムダファー
ジベクターλｇｔ−１０にｃＤＮＡが挿入されたもの、
ＣＬＯＮＴＥＣＨ社製）からプラークハイブリダイゼ−
ションにて全長ｃＤＮＡを持ったクローンの検索を１×
１０⁶相当のプラークから行った。出現したプラークを
ナイロンフィルター（ＨｙｂｏｎｄＮ＋：Ａｍｅｒｓ
ｈａｍ社製）に転写し、転写したナイロンフィルターを
アルカリ処理（１．５ＭＮａＣｌ、０．５ＭＮａＯ
Ｈを染み込ませたろ紙上に７分間放置）し、次いで中和
処理（１．５ＭＮａＣｌ、０．５ＭＴｒｉｓ−ＨＣ
ｌ（ｐＨ７．２）、１ｍＭＥＤＴＡを染み込ませたろ
紙上に３分間放置）を２回行い、次にＳＳＰＥ溶液
（０．３６ＭＮａＣｌ、０．０２Ｍりん酸ナトリウ
ム（ｐＨ７．７）、２ｍＭＥＤＴＡ）の２倍溶液中で
５分間振とう後洗浄し、風乾した。その後、０．４Ｍ
ＮａＯＨを染み込ませたろ紙上に２０分間放置し、５倍
濃度のＳＳＰＥ溶液で５分間振とう後洗浄し、再度風乾
した。このフィルターを用いて放射性同位元素³²Ｐにて
標識された参考例１記載の約２５０ｂｐのＤＮＡ断片を
プローブとしてスクリーニングを行った。

【００５６】放射性同位元素³²Ｐにて標識された先のＤ
ＮＡプローブは以下のように作成した。すなわち、参考
例１記載の￥９／ｐＣＲＩＩは制限酵素ＥｃｏＲＩにて
消化し、低融点アガロースゲルにて電気泳動し、約２５
０ｂｐのＤＮＡ断片を精製回収した。得られたＤＮＡ断
片をＤＮＡラベリングキット（ＭｅｇａｐｒｉｍｅＤＮ
Ａｌａｂｅｌｉｎｇｓｙｓｔｅｍ：Ａｍｅｒｓｈａ
ｍ社製）を用いて標識した。すなわち、ＤＮＡ２５ｎｇ
にプライマー液５μｌ及び脱イオン水を加えて全量を３
３μｌとして沸騰水浴を５分間行い、その後、ｄＮＴＰ
を含む反応緩衝液１０μｌ、α−³²Ｐ−ｄＣＴＰ５μ
ｌ、及びＴ４ＤＮＡポリヌクレオチドキナーゼ溶液２μ
ｌを加えて、３７℃で１０分間水浴し、更にその後、セ
ファデックスカラム（ＱｕｉｃｋＳｐｉｎＣｏｌｕ
ｍｎＳｅｐｈａｄｅｘＧ−５０：ベーリンガーマン
ハイム社製）で精製し、５分間沸騰水浴をしたのち、２
分間氷冷後使用した。

【００５７】前述の方法にて作成したフィルターを、各
々の成分の最終濃度が５倍濃度のＳＳＰＥ溶液、５倍濃
度のデンハルト液（和光純薬社製）、０．５％ＳＤＳ
（ドデシル硫酸ナトリウム）、及び１０μｇ／ｍｌの沸
騰水浴により変性したサケ精子ＤＮＡ（Ｓｉｇｍａ社
製）であるプレハイブリダイゼーション液中に浸し、６
５℃にて２時間振とうしたのち、前述の方法で³²Ｐ標識
されたプローブを含むプレハイブリダイゼーション液と
同一組成のハイブリダイゼーション液に浸し、５５℃に
て１６時間振盪し、ハイブリダイゼーションを行った。

【００５８】次に、フィルターを０．１％ＳＤＳを含む
ＳＳＰＥ溶液に浸し、５５℃にて振盪し２回洗浄後、さ
らに０．１％ＳＤＳを含む１０倍希釈したＳＳＰＥ溶液
に浸し、５５℃にて４回洗浄した。洗浄を終了したフィ
ルターを増感スクリーンを使用して、オートラジオグラ
フィーを行った。その結果、強く露光された部分のクロ
ーンを拾い、再度プラークを蒔き直し前述の方法にてス
クリーニングを行い、完全に単独のクローンを分離し
た。

【００５９】単離されたファージクローンは２７クロー
ンであった。成書の方法に従い、これらのすべてのクロ
ーンのファージを約１×１０⁹ｐｆｕ調製し、ファージ
ＤＮＡを精製し、制限酵素ＥｃｏＲＩにて消化し、同様
にＥｃｏＲＩで消化したｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＩＩ
ＫＳ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社製、以下ｐＢｌｕｅｓ
ｃｒｉｐｔと示す）ファージミドベクターに組み込ん
だ。これらのクローンの両端の塩基配列をＭ１３リバー
サルプライマーおよびＭ１３ユニバーサルプライマーを
用いてＤＮＡシークエンサーにより解析したところ、＃
５１クローンは配列表の配列番号９のＤＮＡ配列の３１
０７番から５０９４番、＃９クローンは同配列表の１６
８４番から３８５３番、＃４３クローンは同配列表の２
０９２番から４６６３番に相当する配列を含むクローン
であった。このほか、塩基配列の一部を解析した＃１０
および＃１７のクローンを含め、これらのクローンをキ
ロシークエンス用デリションキット（宝酒造社製）を用
いて添付の説明書に従ってデリションミュータントを作
製し、ＤＮＡシークエンサーを用いて５’方向、３’方
向の両方向から、ｃＤＮＡ塩基配列を解析した。その結
果、同配列表の１６８４番から５０９４番に相当する塩
基配列を確定した。

【００６０】しかし、同配列表の４８３５番に相当する
部分に終止コドンを見いだしたが、５’側には開始コド
ンと判断しうる配列を見いだせなかったため、５’ＲＡ
ＣＥシステム（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ社製）を用いて添付
の説明書に従い５’ＲＡＣＥ（ｒａｐｉｄａｍｐｌｉ
ｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃＤＮＡｅｎｄｓ）を試
み、得られたＤＮＡ断片をｐＣＲＩＩベクターに組み込
み、ＤＮＡシークエンサーでこのＤＮＡ断片の塩基配列
を調べたところ、配列表の配列番号９記載の核酸配列の
１２５１番から１７０２番に相当するクローンＲＡＣＥ
１を見いだし、このクローンの塩基配列を決定した。

【００６１】さらに同様の方法で５’ＲＡＣＥを繰り返
し、同配列表の２５７番から１３０８番に相当するクロ
ーンＲＡＣＥ２を見いだし、塩基配列を決定した。そこ
でなお開始コドンと判断しうる配列を見いだせなかった
ため、同配列表の２８０番から６６１番に相当するＤＮ
Ａ断片ｓｌｉ６をクローンＲＡＣＥ２をテンプレートと
してＰＣＲにて作製し、上記のプラークハイブリダイゼ
ーションと同様の方法で、ヒト胎児脳由来ｃＤＮＡライ
ブラリーのスクリーニングを行った。その結果、４６個
の陽性のファージクローンを得、これらのいくつかのフ
ァージクローンからファージＤＮＡを精製し、制限酵素
ＥｃｏＲＩにて消化し、同様にＥｃｏＲＩで消化したｐ
ＵＣ１８プラスミドベクター（東洋紡社販売）に組み込
んだ後、両端をＤＮＡシークエンサーによって塩基配列
の解析をしたところ、＃２．１クローンは同配列表の１
番から１２７０番、＃２．８クローンは同配列表の１番
から７８６番、＃２．２０クローンは同配列表の３５５
番から２６７９番、＃２．２２クローンは同配列表の２
９３番から２１８７番に相当する塩基配列を含むクロー
ンであり、＃２．１および＃２．８クローンの同配列表
の１番から２５７番に相当する塩基配列を確定し、同配
列表の２３３番から２３５番に相当するアミノ酸フレー
ムに合致する開始コドンを見いだし、この周辺の塩基配
列をＫｏｚａｋらの報告（Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，
１１５，８８７−９０３，１９９１）と照らし合わせ、
開始コドンに相違ないことを確認した。

【００６２】次に該ヒトスリット１のオープンリーディ
ングフレーム全長を含むプラスミドベクターを作製し
た。すなわち、クローン＃９を制限酵素ＡｆｌＩＩとＳ
ｐｈＩで消化し、これを電気泳動することによって得ら
れる約０．８ｋｂのＤＮＡ断片を、同様に処理したクロ
ーン＃２．２０の約５ｋｂのＤＮＡ断片につなぎ、これ
をクローン（３５５−３４４４）／ｐＵＣ１８とし、さ
らにクローン（３５５−３４４４）／ｐＵＣ１８を制限
酵素ＨｉｎｄＩＩＩとＳｐｈＩで消化して得られる約
２．８ｋｂのＤＮＡ断片を、同様に処理したクローン＃
５１の約４．７ｋｂのＤＮＡ断片につなぎ、これをクロ
ーン（６８６−５０９４）／ｐＢＳとし、クローン＃
２．１を制限酵素ＳａｌＩとＨｉｎｄＩＩＩで消化して
得られる約０．７ｋｂのＤＮＡ断片を、同様に処理した
クローン（６８６−５０９４）／ｐＢＳの７．４ｋｂの
ＤＮＡ断片につなぎ、配列表の配列番号９に記載の全て
のＤＮＡ配列を有するＤＮＡ断片を含むプラスミドｐＨ
ＳＬを作製した。プラスミドｐＨＳＬは大腸菌株ＪＭ１
０９に遺伝子導入した。さらにプラスミドｐＨＳＬに含
まれるヒトスリット１のＤＮＡ配列より３’非転写領域
を除いた塩基配列を有するプラスミドｐＢＳＳｌｉｔを
作製し、大腸菌株ＤＨ５（東洋紡社製）に遺伝子導入し
た。この菌株、Ｅ．ｃｏｌｉ：ＤＨ５−ｐＢＳＳｌｉｔ
は日本国通産省工業技術院生命工学工業技術研究所に受
託番号ＦＥＲＭＰ−１５９２０として平成８年１０月
２８日に寄託されている。

【００６３】

【参考例３】ノザンブロッティングによる新規ヒトスリット１のｍＲ
ＮＡ発現部位の特定新規ヒトスリット１のｍＲＮＡの発現を調べるため、あ
らかじめｍＲＮＡが転写されているフィルターである、
ＨｕｍａｎＭｕｌｔｉｐｌｅＴｉｓｓｕｅＮｏｒｔ
ｈｅｒｎＢｌｏｔ、ＨｕｍａｎＭｕｌｔｉｐｌｅ
ＴｉｓｓｕｅＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔＩＩ、
ＨｕｍａｎＭｕｌｔｉｐｌｅＴｉｓｓｕｅＮｏｒ
ｔｈｅｒｎＢｌｏｔＩＩＩ、ＨｕｍａｎＦｅｔａ
ｌＭｕｌｔｉｐｌｅＴｉｓｓｕｅＮｏｒｔｈｅｒ
ｎＢｌｏｔ、ＨｕｍａｎＣａｎｃｅｒＣｅｌｌ
ＬｉｎｅＭｕｌｔｉｐｌｅＴｉｓｓｕｅＮｏｒｔ
ｈｅｒｎＢｌｏｔ、ＨｕｍａｎＢｒａｉｎＭｕｌ
ｔｉｐｌｅＴｉｓｓｕｅＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏ
ｔ、ＨｕｍａｎＢｒａｉｎＭｕｌｔｉｐｌｅＴｉｓ
ｓｕｅＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔＩＩ、Ｈｕｍａ
ｎＢｒａｉｎＭｕｌｔｉｐｌｅＴｉｓｓｕｅＮｏ
ｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔＩＩＩ（すべてＣｌｏｎｔｅ
ｃｈ社）を用い、参考例２に記載の配列表の配列番号９
の２８０番から６６１番に相当するＤＮＡ断片ｓｌｉ６
を前掲のＤＮＡラベリングキット（ＭｅｇａＰｒｉｍｅ
ＤＮＡｌａｂｅｌｉｎｇｓｙｓｔｅｍ：Ａｍｅｒ
ｓｈａｍ社製）にて前述の方法で³²Ｐ標識し発現を調べ
た。

【００６４】その結果、ヒト成人組織のうち脳のみに発
現が認められた。しかしながら、心臓、胎盤、肺、肝
臓、骨格筋、腎臓、すい臓、脾臓、前立腺、卵巣、胸
腺、精巣、小腸、大腸、末梢血リンパ球、胃、甲状腺、
脊髄、リンパ節、気管、副腎、骨髄においては発現が認
められなかった。またヒト胎児組織では脳に強く、肺、
腎臓に弱い発現が認められたが、肝臓においては発現が
認められなかった。癌細胞ではリンパ芽球白血病株ＭＯ
ＬＴ−４と結腸直腸上皮癌株ＳＷ４８０に発現が認めら
れたが、前骨髄球白血病株ＨＬ−６０、ＨｅＬａ細胞Ｓ
３株、慢性骨髄腫白血病株Ｋ５６２、バーキットリンパ
腫Ｒａｊｉ株、肺癌株Ａ５４９、黒色腫Ｇ３６１には発
現が認められなかった。脳組織では、大脳皮質のうち特
に前頭葉で強い発現が認められ、視床下部扁桃体、ｃａ
ｕｄａｔｅｎｕｃｌｅｕｓ、海馬、視床下部、ｓｕｂ
ｔｈａｌａｍｉｃｎｕｃｌｅｕｓ、ｐｕｔａｍｅｎに
発現が認められ、ｃｏｒｐｕｓｃａｌｌｏｓｕｍ、ｓ
ｕｂｔｈａｌａｍｉｃｎｉｇｒａに弱い発現が認めら
れ、視床、小脳、延髄、脊髄には発現が認められなかっ
た。発現の認められた臓器では、約８．４ｋｂのメイン
バンドのほか、約５．９ｋｂの発現の弱いバンドが観察
された。

【００６５】

【実施例１】ヒトスリット１の核酸配列にホモロジーを有するＥＳＴ
のｃＤＮＡクローンの塩基配列決定Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｈ５３５７１のｃＤＮＡクロー
ン２０２７３８およびＧｅｎｂａｎｋ登録番号Ｈ１０９
５２のｃＤＮＡクローン４７３４４（これらｃＤＮＡク
ローンはゲノムシステムズ社が販売、日本国内ではクラ
ボウより入手可能）は、蛍光ＤＮＡシークエンサー（ア
プライドバイオシステム社、モデル３７３Ｓ）にて塩基
配列を調べた。ｃＤＮＡクローン２０２７３８は１２９
７塩基の挿入ＤＮＡ断片の大きさを有し、配列表の配列
番号４記載の塩基配列を有していた。同塩基配列から翻
訳されうるアミノ酸配列と先願のヒトスリット１のアミ
ノ酸配列とホモロジーを有する領域は、同配列表の塩基
配列の２４２番から１１３８番に該当する部分であり、
推定上の終止コドンを同塩基配列の１１３９番に有して
いた。同領域の塩基配列に対応するアミノ酸配列を同配
列表に併記した。同配列表のアミノ酸の番号は配列表の
配列番号１記載の新規ヒトスリット２のアミノ酸配列の
番号と対応させた。配列表の配列番号４記載の塩基配列
の１番から２４１番の領域は先願のヒトスリット１との
ホモロジーを有するアミノ酸配列を生成させることはで
きなかった。

【００６６】ｃＤＮＡクローン４７３４４はその一部の
塩基配列を決定し、配列表の配列番号５記載の塩基配列
を有していた。同クローンに含まれる塩基配列は同配列
表の５’側に伸びており、３’側は同配列表の４０５番
までであった。同塩基配列から翻訳されうるアミノ酸配
列と先願のヒトスリット１のアミノ酸配列とホモロジー
を有する領域は、同配列表の塩基配列の２０９番から４
０３番に該当する部分であり、同塩基配列の１３１番に
は推定上の開始コドンが含まれていた。

【００６７】

【実施例２】新規ヒトスリット２をコードするＤＮＡの全長クローニ
ングおよび塩基配列の決定（１）ｃＤＮＡライブラリーのスクリーニングヒト胎児肺由来のｃＤＮＡライブラリー（ラムダファー
ジベクターλｇｔ−１０にｃＤＮＡが挿入されたもの、
ＣＬＯＮＴＥＣＨ社製）からプラークハイブリダイゼ−
ションにて全長ｃＤＮＡを持ったクローンの検索を１×
１０⁶相当のプラークから行った。出現したプラークを
ナイロンフィルター（ＨｙｂｏｎｄＮ＋：Ａｍｅｒｓ
ｈａｍ社製）に転写し、転写したナイロンフィルターを
アルカリ処理（１．５ＭＮａＣｌ、０．５ＭＮａＯ
Ｈを染み込ませたろ紙上に７分間放置）し、次いで中和
処理（１．５ＭＮａＣｌ、０．５ＭＴｒｉｓ−ＨＣ
ｌ（ｐＨ７．２）、１ｍＭＥＤＴＡを染み込ませたろ
紙上に３分間放置）を２回行い、次にＳＳＰＥ溶液
（０．３６ＭＮａＣｌ、０．０２Ｍりん酸ナトリウ
ム（ｐＨ７．７）、２ｍＭＥＤＴＡ）の２倍溶液中で
５分間振とう後洗浄し、風乾した。その後、０．４Ｍ
ＮａＯＨを染み込ませたろ紙上に２０分間放置し、５倍
濃度のＳＳＰＥ溶液で５分間振とう後洗浄し、再度風乾
した。このフィルターを用いて放射性同位元素³²Ｐにて
標識された実施例１記載のＤＮＡ断片の一部をプローブ
としてスクリーニングを行った。

【００６８】放射性同位元素³²Ｐにて標識された先のＤ
ＮＡプローブは以下のように作製した。すなわち、実施
例１記載のｃＤＮＡクローン２０２７３８をテンプレー
トにＰＣＲ（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅ
ａｃｔｉｏｎ）を行い、配列表の配列番号４の核酸配列
の２９８番から７９７番に該当する５００ｂｐの遺伝子
断片を、またｃＤＮＡクローン４７３４４をテンプレー
トにＰＣＲを行い、配列表の配列番号５の核酸配列の１
４０番から４０２番に該当する２６３ｂｐの遺伝子断片
を得た。得られた２つのＤＮＡ断片をＤＮＡラベリング
キット（ＭｅｇａｐｒｉｍｅＤＮＡｌａｂｅｌｉｎ
ｇｓｙｓｔｅｍＲＰＮ１６０７：Ａｍｅｒｓｈａｍ
社製）を用いて標識した。すなわち、ＤＮＡ１００ｎｇ
にプライマー液５μｌ及び脱イオン水を加えて全量を３
３μｌとして沸騰水浴を５分間行い、ｄＮＴＰを含む反
応緩衝液１０μｌ、Ｒｅｄｉｖｕｅ［α−³²Ｐ］ｄＣＴ
Ｐ（アマシャム社）５μｌ、及びクレノーＤＮＡポリメ
ラーゼ溶液２μｌを加えて、３７℃で１０分間水浴し、
ゲルろ過カラム（ＭｉｃｒｏＳｐｉｎＨＲ−２００
Ｃｏｌｕｍｎｓ：ファルマシア社製）で精製し、５分
間沸騰水浴をしたのち、２分間氷冷後使用した。

【００６９】前述の方法にて作製したフィルターを、各
々の成分の最終濃度が５倍濃度のＳＳＰＥ溶液、５倍濃
度のデンハルト液（和光純薬社製）、０．５％ＳＤＳ
（ドデシル硫酸ナトリウム）、及び１０μｇ／ｍｌの沸
騰水浴により変性したサケ精子ＤＮＡ（Ｓｉｇｍａ社
製）であるプレハイブリダイゼーション液中に浸し、６
５℃にて２時間振とうしたのち、前述の方法で³²Ｐ標識
されたプローブを含むプレハイブリダイゼーション液と
同一組成のハイブリダイゼーション液に浸し、６５℃に
て１６時間振盪し、ハイブリダイゼーションを行った。

【００７０】次に、フィルターを０．１％ＳＤＳを含む
２倍濃度のＳＳＣ溶液に浸し、６５℃にて１０分間洗浄
し、さらに０．１％ＳＤＳを含む２倍希釈したＳＳＣ溶
液に浸し、６５℃にて１５分間洗浄し、さらに０．１％
ＳＤＳを含む１０倍希釈したＳＳＣ溶液に浸し、６５℃
にて１０分間洗浄した。洗浄を終了したフィルターをオ
ートラジオグラフィーを行った。その結果、露光された
部分のクローンを拾い、再度プラークを蒔き直し前述の
方法にてスクリーニングを行い、完全に単独のクローン
を分離した。

【００７１】単離されたファージクローンは２１クロー
ンであった。成書の方法に従い、これらのすべてのクロ
ーンのファージを約１×１０⁹ｐｆｕ調製し、ファージ
ＤＮＡを精製し、制限酵素ＥｃｏＲＩにて消化した。そ
のうちファージクローン＃７１は約３．７ｋｂと約１．
４ｋｂのＤＮＡ断片を含み、その他８クローンも大きさ
の異なる２種のＤＮＡ断片を含んでいた。残りの１２ク
ローンについて１種のＤＮＡ断片が含まれていた。これ
らのＤＮＡ断片は、ＥｃｏＲＩで消化した後に大腸菌ア
ルカリホスファターゼ処理したｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ
ＩＩＫＳ＋（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社製、以下ｐＢ
ｌｕｅｓｃｒｉｐｔと示す）プラスミドベクターに組み
込んだ。

【００７２】（２）塩基配列解析これらのクローンの塩基配列を蛍光シークエンサーによ
り調べたところ、ファージクローン＃７１の約３．７ｋ
ｂのＤＮＡ断片は実施例１で塩基配列決定したｃＤＮＡ
クローン２０２７３８の一部と相同な塩基配列を含み、
同クローンの１．４ｋｂのＤＮＡ断片はｃＤＮＡクロー
ン４７３４４の一部に相同な配列を含むことが明らかと
なり、クローン＃７１は新規ヒトスリット２の推定上の
コーディング領域全長を含むと考えられたため、このク
ローン全長の塩基配列を解析した。本スクリーニングに
使用したラムダファージベクターλｇｔ１０のＥｃｏＲ
Ｉアームは挿入配列との間にＧＧの２塩基対が付加され
るが、＃７１の３．７ｋｂおよび１．４ｋｂのＤＮＡ断
片のそれぞれの片側にはこのＧＧ配列が含まれていなか
ったため、この２断片は本来１本のＤＮＡ断片がＥｃｏ
ＲＩによって２断片化したものであることがわかった。
クローン＃７１の塩基配列の解析の結果、配列表の配列
番号２記載の塩基配列を決定し、同配列表の２０５番か
ら始まるアミノ酸フレームに合致する開始コドンを見い
だし、この周辺の塩基配列をＫｏｚａｋらの報告（Ｊ．
Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１１５，８８７−９０３，１９
９１）と照らし合わせ、開始コドンに相違ないことを確
認した。また同配列表の４７９２番に終止コドンを見い
だし、該ＤＮＡ配列は配列表の配列番号３記載の１５２
９残基からなるアミノ酸配列をコードすることを見いだ
した。さらに該アミノ酸配列をＫｙｔｅ−Ｄｏｏｌｉｔ
ｔｌｅの方法（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１５７：１０
５，１９８２）に従ってアミノ酸配列の疎水性部分を解
析し、またＨｅｉｊｎｅの報告（ＮｕｃｌｅｉｃＡｃ
ｉｄＲｅｓｅａｒｃｈ，１４，４６８３−４６９０，
１９８６）を参考にして、同配列表の−２６番メチオニ
ンから−１番グルタミンにあたる２６残基のシグナルペ
プチドの存在を推定した。シグナルペプチドを除いた成
熟体型ポリペプチドのアミノ酸配列を配列表の配列番号
１に示した。但し、配列表の配列番号２記載の塩基配列
にはクローン＃７１に含まれていた５’非翻訳領域の上
流１６６塩基分と３’非翻訳領域のｐｏｌｙＡ部分は本
発明に不要との理由で削除してある。

【００７３】クローン＃７１と共に、複数クローンの塩
基配列の決定も行ったが、一部クローンでクローン＃７
１と一部異なる配列を有するクローンが見いだされた。
すなわち、クローン＃７５では配列表の配列番号２記載
の塩基配列の９７８番と９７９番の間に配列表の配列番
号１１記載の１２塩基対が挿入されており、クローン＃
５７は配列表の配列番号２記載の塩基配列の１６４２番
から１６６５番の２４塩基対が欠失していた。さらに同
クローンでは２１１０番ＴがＣに変異していた。またプ
ローブとして利用したｃＤＮＡクローン２０２７３８は
配列表の配列番号２の塩基配列の４０３４番ＣがＴに変
異していた。これらはアミノ酸変異を引き起こすポイン
トミューテーションであった。（３）新規ヒトスリット２全長配列をコードするＤＮＡ
を含むベクター作製次に該ヒトスリット２のオープンリーディングフレーム
全長のＤＮＡを含むプラスミドベクターを作製した。す
なわち、クローン＃７１の３．７ｋｂのＤＮＡ断片がｐ
ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔのＥｃｏＲＩサイトに挿入された
プラスミドｐ＃７１Ａをテンプレートに、配列表の配列
１５記載の塩基配列のＰＣＲプライマーＳＬ２ＰＲＯＳ
および配列１６記載の塩基配列のＳＬ２ＥＮＤＸを用い
てＰＣＲを行い、得られたＰＣＲ産物がアガロース電気
泳動により約８５０ｂｐのバンドを形成することを確認
し、このバンドを切り出して、プラスミドベクターｐＣ
Ｒ２．１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）にサブクローニン
グし、ＤＮＡシークエンサーにより配列を解析し、配列
表の配列番号２の塩基配列の３９５１番から４７９４番
の８４４ｂｐのＤＮＡ断片の後にＣＴＣＧＡＧの制限酵
素ＸｈｏＩサイトが付加された塩基配列を有することを
確認し、このベクターをｐＳＬ２ＥＮＤＸと命名した。
ｐＳＬ２ＥＮＤＸを制限酵素ＳｐｈＩおよびＸｈｏＩに
よって消化して得られた約７５０ｂｐのＤＮＡ断片と、
ｐ＃７１Ａを同様に消化して得られた約５．７ｋｂのＤ
ＮＡ断片をつなぎ、これをｐ＃７１ＡＥＮＤＸと命名し
た。

【００７４】次にクローン＃７１の１．４ｋｂのＤＮＡ
断片がｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔのＥｃｏＲＩサイトに挿
入されたプラスミドｐ＃７１Ｂをテンプレートに、配列
表の配列番号１７記載の塩基配列のＰＣＲプライマーＳ
ＬＣ１０および配列番号１８記載の塩基配列のＳＬ２Ｂ
ＡＭを用いてＰＣＲを行い、得られたＰＣＲ産物がアガ
ロース電気泳動により約６６０ｂｐのバンドを形成する
ことを確認し、このバンドを切り出してプラスミドベク
ターｐＣＲ２．１にサブクローニングし、ＤＮＡシーク
エンサーにより配列を解析し、配列表の配列番号２の塩
基配列の１９８番から８５３番の前にＧＧＡＴＣＣの制
限酵素ＢａｍＨＩサイトが付加された塩基配列を有する
ことを確認し、このベクターをｐＳＬ２ＡＴＧＢと命名
した。ｐＳＬ２ＡＴＧＢを制限酵素ＢａｍＨＩおよびＰ
ｍｅＩによって消化して得られた約３４０ｂｐのＤＮＡ
断片とｐ＃７１Ｂを同様に消化して得られた約３．７ｋ
ｂのＤＮＡ断片をつなぎ、これをｐ＃７１ＢＡＴＧＢと
命名した。

【００７５】ｐ＃７１ＢＡＴＧＢを制限酵素ＢａｍＨＩ
およびＥｃｏＲＩで消化して得られた約１．１ｋｂのＤ
ＮＡ断片、ｐ＃７１ＡＥＮＤＸを制限酵素ＥｃｏＲＩお
よびＸｈｏＩで消化して得られた約３．５ｋｂのＤＮＡ
断片、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔを制限酵素ＢａｍＨＩお
よびＸｈｏＩで消化して得られた約２．９ｋｂのＤＮＡ
断片の３断片をつないで、該ヒトスリット２のオープン
リーディングフレーム全長のＤＮＡを含むプラスミドベ
クターｐＨＳＬ２が完成した。ｐＨＳＬ２はｐＢｌｕｅ
ｓｃｒｉｐｔのＢａｍＨＩサイトとＸｈｏＩサイトの間
に、配列表の配列番号２記載の塩基配列の１９８番から
４７９４番が挿入された塩基配列を有する。ｐＨＳＬ２
は大腸菌株ＪＭ１０９（東洋紡社製）に遺伝子導入し
た。

【００７６】

【実施例３】ノザンブロッティングによる新規ヒトスリット２のｍＲ
ＮＡ発現部位の特定本新規ヒトスリット２のｍＲＮＡの発現を調べるため、
あらかじめｍＲＮＡが転写されているフィルターであ
る、ＨｕｍａｎＭｕｌｔｉｐｌｅＴｉｓｓｕｅＮ
ｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ、ＨｕｍａｎＭｕｌｔｉ
ｐｌｅＴｉｓｓｕｅＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ
ＩＩ、ＨｕｍａｎＭｕｌｔｉｐｌｅＴｉｓｓｕｅ
ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔＩＩＩ、ＨｕｍａｎＦ
ｅｔａｌＭｕｌｔｉｐｌｅＴｉｓｓｕｅＮｏｒｔｈ
ｅｒｎＢｌｏｔ（すべてＣｌｏｎｔｅｃｈ社）を用
い、配列表の配列番号２記載の塩基配列の３９５１番か
ら４４５０番に相当するＤＮＡ断片をＰＣＲにより得、
ＤＮＡラベリングキット（ＭｅｇａＰｒｉｍｅＤＮＡ
ｌａｂｅｌｉｎｇｓｙｓｔｅｍ：Ａｍｅｒｓｈａｍ
社製）にて³²Ｐ標識し実施例２（１）記載の方法と同様
なハイブリダイゼーションを行い、発現を調べた。

【００７７】その結果、ヒト成人組織のうち脊髄に強い
発現が認められた。甲状腺、食道、副腎にも弱いながら
発現が観察された。しかしながら、心臓、脳、胎盤、
肺、肝臓、骨格筋、腎臓、すい臓、脾臓、前立腺、卵
巣、胸腺、精巣、小腸、大腸、末梢血リンパ球、胃、リ
ンパ節、気管、骨髄においては発現が認められなかっ
た。またヒト胎児組織では肺、腎臓に発現が認められた
が、脳、肝臓においては発現が認められなかった。発現
の認められた臓器での転写物のサイズは約８．５ｋｂで
あることが観察された。

【００７８】

【実施例４】新規マウススリット２遺伝子断片のクローニング配列表の配列番号２に記載の塩基配列情報より作製した
ＰＣＲプライマーを用いて、マウス１５日胎生由来のｃ
ＤＮＡ混合溶液（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ社製）をＰＣＲテン
プレートとして使用し、ＰＣＲ反応を行うことにより、
マウス由来のスリット２ホモログのＤＮＡ断片のクロー
ニングを行った。２０種類以上のプライマーの組み合わ
せと、ＰＣＲ反応の温度条件を検討することにより、よ
うやくマウススリット由来のＤＮＡ断片１種類のクロー
ニングに成功した。

【００７９】すなわち、配列表の配列番号２記載の塩基
配列より作製したＰＣＲプライマーとして、配列表の配
列番号１９記載の塩基配列のＳＬＭ１および配列番号２
０記載の塩基配列のＳＬＭ２、それぞれ１００ｐｍｏｌ
／μｌ濃度を各０．２５μｌ、マウス１５日胎生由来の
ｃＤＮＡ混合溶液を５μｌ、エクスパンドハイフィディ
リティー（ベーリンガー・マンハイム社製）のポリメラ
ーゼ０．７５μｌと同１０倍濃縮バッファー５μｌ、お
よびｄＮＴＰＭｉｘｔｕｒｅ（宝酒造社製）４μｌを
混合し、さらに全量を５０μｌとなるように蒸留水を加
えた。この混合液を９４℃で４５秒間、５３℃で４５秒
間、７２℃を２分間からなる行程を１サイクルとして、
この行程を３５サイクル行い最後に７２℃にて７分間放
置した。このＰＣＲ産物を２％アガロースゲル電気泳動
を行い、エチジウムブロマイド（日本ジーン社製）にて
染色後、紫外線下で約３００ｂｐのバンドが観察され、
このバンドを切り出し、精製した後、ｐＣＲ２．１ベク
ターにサブクローニングした。このクローンをＤＮＡシ
ーケンサーで塩基配列を調べたところ、配列表の配列番
号６に示す新規な塩基配列を含むことが明らかとなっ
た。この塩基配列から推定されるアミノ酸配列を配列表
の配列番号７に示した。

【００８０】

【実施例５】新規ヒトスリット２発現ベクターの作製実施例２で作製したプラスミドベクターｐＨＳＬ２を用
いて、ヒトスリット２のタグ付き蛋白質の発現ベクター
を作製した。配列表の配列番号３記載のアミノ酸配列の
ポリペプチドの−１番と１番の間に配列表の配列番号２
１記載のアミノ酸配列を有する９アミノ酸残基からなる
ペプチド（以下ＦＬＡＧ配列と表記）を挿入してなるポ
リペプチドをコードするＤＮＡを、サイトメガロウィル
スプロモーターとネオマイシン耐性遺伝子を有する発現
ベクターｐｃＤＮＡ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）につ
なぎ、発現ベクターを作製した。

【００８１】上記発現ベクター作製にあたって、実施例
２で作製した新規ヒトスリット２のアミノ酸配列全長を
コードするＤＮＡを含むベクターｐＨＳＬ２をＥｘＳｉ
ｔｅＰＣＲ−ＢａｓｅｄＳｉｔｅ−Ｄｉｒｅｃｔｅｄ
ＭｕｔａｇｅｎｅｓｉｓＫｉｔ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎ
ｅ社）を用いた。すなわち上記Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ
Ｋｉｔに添付のマニュアルに従い、ｐＨＳＬ２をテン
プレートとして、５’末端を燐酸化した配列表の配列番
号２２記載の塩基配列のプライマーＦＬＡＧ１および配
列番号２３記載の塩基配列のＦＬＡＧ２にてＰＣＲを行
い、このＰＣＲ混液に制限酵素ＤｐｎＩおよびＰｆｕＤ
ＮＡポリメラーゼを加えて３７℃で反応させて、テンプ
レートを消化しかつＰＣＲ産物の３’末端を平滑化し、
さらにこの反応液に蒸留水、キットに添付の１０×ｍｕ
ｔａｇｅｎｅｓｉｓバッファーおよびｒＡＴＰを加えて
よく混合し、この混合液の１０μｌを別のチューブに移
して、Ｔ４ＤＮＡリガーゼを加えて３７℃で反応させ
た。さらにこの反応液を用いて大腸菌株ＪＭ１０９をト
ランスフォームした。得られたトランスフォーマントか
らプラスミドＤＮＡを抽出し、ＤＮＡシークエンサーに
よってこのプラスミドの挿入配列が、配列表の配列番号
２記載の塩基配列の１９８番から４７９４番の塩基配列
の２８２番と２８３番の間に配列表の配列番号２４記載
の２７ｂｐの塩基配列が挿入された塩基配列を有するこ
とを確認した。このプラスミドベクターをｐＨＳＬ２Ｆ
／ｐＢＳと命名した。

【００８２】ｐＨＳＬ２Ｆ／ｐＢＳは制限酵素ＢａｍＨ
ＩおよびＸｈｏＩで消化して得られた約４．６ｋｂのＤ
ＮＡ断片をｐｃＤＮＡ３を同様に消化して得られた約
５．４ｋｂのＤＮＡ断片につなぎ、これをｐＨＳＬ２Ｆ
／ｐｃＤＮＡ３と命名し、ヒトスリット２のタグ付き蛋
白質の発現ベクターが完成した。またタグのないヒトス
リット２の発現ベクターとして、ｐＨＳＬ２を制限酵素
ＢａｍＨＩおよびＸｈｏＩで消化することによって得ら
れた約４．６ｋｂのＤＮＡ断片をｐｃＤＮＡ３を同様に
消化して得られた約５．４ｋｂのＤＮＡ断片につなぎ、
これをｐＨＳＬ２／ｐｃＤＮＡ３と命名し、タグのない
ヒトスリット２の発現ベクターが完成した。

【００８３】

【実施例６】ヒトスリット２発現ベクターの細胞への遺伝子導入と発
現実施例５で作製した発現ベクターはＣＯＳ−７細胞（理
化学研究所、細胞開発銀行から入手可能、ＲＣＢ０５３
９）に遺伝子導入した。遺伝子導入前の細胞の培養はＤ
−ＭＥＭ（ダルベッコ改変ＭＥＭ培地、ＧＩＢＣＯ−Ｂ
ＲＬ社製）１０％ＦＣＳにて培養した。遺伝子導入の前
日に細胞の培地を交換し、細胞数を５×１０⁵ｃｅｌｌ
ｓ／ｍｌにして一晩培養した。遺伝子導入の当日、遠心
分離にて細胞を沈澱させ、ＰＢＳ（−）にて２回遠心洗
浄後、１ｍＭＭｇＣｌ₂、ＰＢＳ（−）に１×１０⁷
ｃｅｌｌｓ／ｍｌとなるようにして細胞を調製した。遺
伝子導入はＢｉｏ−Ｒａｄ社製遺伝子導入装置ジーンパ
ルサーを用いたエレクトロポレーション法で行った。上
記の細胞懸濁液を５００μｌエレクトロポレーション専
用セル（０．４ｍｍ）に取り、発現ベクターｐＨＳＬ２
Ｆ／ｐｃＤＮＡ３を２０μｇ加え、氷中で５分間放置し
た。その後、１回目は２５μＦ，６００Ｖの条件で電圧
をかけ、１分間室温で放置後、更に２回目は９６０μ
Ｆ、２５０Ｖの条件で電圧をかけた。その後、氷中で５
分間放置後、上記の培地１０ｍｌをあらかじめ分注した
直径１０ｃｍ細胞培養用ディシュに細胞を播種し、３７
℃、５％炭酸ガスインキュベーターで培養した。

【００８４】その翌日、培養上清を除去し、ディッシュ
に付着した細胞をＰＢＳ（−）１０ｍｌで２回洗浄し、
無血清のＤ−ＭＥＭ１０ｍｌを加えてさらに７日間培養
し、培養上清を回収し、セントリコン３０（アミコン社
製）にてバッファーをＰＢＳ（−）に置換すると同時に
１０倍濃縮を行った。こうして得られたサンプルを用い
てウェスタンブロッティング法にてヒトスリット２ＦＬ
ＡＧタグ付き蛋白質の発現を確認した。すなわち、濃縮
した培養上清をＡＣＩジャパン社製のＳＤＳ−ＰＡＧＥ
用電気泳動槽及びＳＤＳ−ＰＡＧＥ用ポリアクリルアミ
ドゲル（グラジエントゲル５−１５％）を用い、添付の
取扱い説明書に従ってＳＤＳ−ＰＡＧＥをおこなった。
サンプルは２−メルカプトエタノール（２−ＭＥ）を加
えて５分間の沸騰水浴加熱処理により還元処理を行な
い、マーカーとしてはアマシャム社製レインボーマーカ
ーを用い、サンプルバッファー、泳動バッファーについ
ては添付の取扱い説明書に従って作製した。ＳＤＳ−Ｐ
ＡＧＥ終了後、アクリルアミドゲルをＰＶＤＦメンブラ
ンフィルター（ＢｉｏＲａｄ社製）にＢｉｏＲａｄ社製
ミニトランスブロットセルにより転写した。

【００８５】このように作製されたフィルターをブロッ
クエース、ＴＢＳ−Ｔ（２０ｍＭＴｒｉｓ、１３７ｍＭ
ＮａＣｌ（ｐＨ７．６）、０．１％Ｔｗｅｅｎ２
０）に４℃一晩振盪してブロッキングした。ＥＣＬウェ
スタンブロッティング検出システム（Ａｍｅｒｓｈａｍ
社）に添付の説明書に従い、一次抗体としてマウスモノ
クローナル抗体Ａｎｔｉ−ＦＬＡＧＭ２（コダック社
製）、二次抗体としてペルオキシダーゼ標識抗マウスＩ
ｇ羊抗体（Ａｍｅｒｓｈａｍ社製）を反応させた。抗体
の反応時間は各々室温で一時間反応させ、各反応間はＴ
ＢＳ−Ｔにて１０分間室温で振盪洗浄する操作を３回ず
つ繰り返した。最後の洗浄後、フィルターをＥＣＬウエ
スタンブロッティング検出システム（Ａｍｅｒｓｈａｍ
社製）の反応液に５分間浸し、ポリ塩化ビニリデンラッ
プに包んでＸ線フィルムに感光させた。

【００８６】その結果、当該サンプルは約２００ｋダル
トンの抗ＦＬＡＧ抗体に反応するバンドを呈することが
観察され、ヒトスリット２ＦＬＡＧタグ付き蛋白質、す
なわち本願の配列表の配列番号１に記載のアミノ酸配列
を有するポリペプチドが作製することができた。対照と
してｐｃＤＮＡ３を導入したＣＯＳ−７細胞の培養上清
を同様に試験したが、抗ＦＬＡＧ抗体に反応するバンド
は検出されなかった。

【００８７】

【実施例７】遺伝子導入細胞によるヒトスリット２ＦＬＡＧタグ付き
蛋白質の精製実施例６の方法で発現が検出されたヒトスリット２ＦＬ
ＡＧタグ付き蛋白質を含むＣＯＳ−７細胞培養上清を大
量調製し、アフィニティーカラムによって該蛋白質を精
製した。すなわち、実施例６に記載した方法によって取
得した２リットルの培養上清をＡｎｔｉ−ＦＬＡＧＭ
２ＡｆｆｉｎｉｔｙＧｅｌ（コダック社製）を充填
したカラムに通して、ヒトスリット２ＦＬＡＧタグ付き
蛋白質が有するＦＬＡＧ配列とゲルのＡｎｔｉ−ＦＬＡ
Ｇ抗体のアフィニティーにより該蛋白質をカラムに吸着
させた。カラムは内径１０ｍｍのディスポカラム（バイ
オラッド社製）を用い、上記ゲルを５ｍｌ充填した。次
に、培養上清タンク→カラム→ペリスターポンプ→培養
上清タンクの環流式回路を組み立て、流速１ｍｌ／分で
７２時間循環させ、該蛋白質をカラムに吸着させた。そ
の後、カラムをＰＢＳ（−）３５ｍｌで洗浄し、０．５
ＭＴｒｉｓ−グリシン（ｐＨ３．０）５０ｍｌで溶出し
た。あらかじめ小チューブ（ファルコン社製２０６３）
に０．５ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ９．５）を２００μ
ｌ分注しておき、溶出液は２ｍｌずつ２５画分をそのチ
ューブに分取し、各々の画分を中和した。

【００８８】上記の方法で精製された該蛋白質の溶出画
分の各１０μｌは実施例６に記載の還元処理を行い、５
−１５％濃度勾配ポリアクリルアミドゲルによるＳＤＳ
−ＰＡＧＥ電気泳動を行い、電気泳動終了後、和光純薬
社製ワコー銀染キットＩＩを用いて、添付の説明書に従
って銀染色を行った。第４番から第８番の溶出画分に約
２００ｋダルトンのバンドが検出され、この分子量は実
施例６で得られた抗ＦＬＡＧ抗体によるウェスタンブロ
ッティングの結果と一致した。つまりヒトスリット２Ｆ
ＬＡＧタグ付き蛋白質の純品の分離が確認された。

【００８９】

【実施例８】新規ヒトスリット２を認識する抗体作製およびリコンビ
ナント・ヒトスリット２蛋白質の精製実施例７に記載の方法で精製されたヒトスリット２ＦＬ
ＡＧタグ付き蛋白質を免疫原としてウサギに免疫して、
抗体価の測定後、全血の採血を行い、血清を採取して、
ＢｉｏＲａｄ社製のエコノパック血清ＩｇＧ精製キット
を用いて、添付の取扱い説明書に従って、抗ヒトスリッ
ト２ウサギポリクローナル抗体を精製して作製した。

【００９０】また、実施例７に記載した方法で精製され
たヒトスリット２ＦＬＡＧタグ付き蛋白質を免疫原とし
て、成書の方法に従いマウスモノクローナル抗体を作製
した。すなわち、実施例７記載のヒトスリット２ＦＬＡ
Ｇタグ付き蛋白質をＢａｌｂ／ｃマウス（日本エスエル
シー社製）に１匹あたり１０μｇを皮下・皮内に免疫し
た。２回の免疫後、眼底採血を行い血清中の抗体価の上
昇を認めた後、３回目の免疫を行ってからマウスの脾臓
細胞を取り出し、マウスミエローマ細胞株Ｐ３Ｘ６３Ａ
ｇ８（ＡＴＣＣＴＩＢ９）とポリエチレングリコール
法にて細胞融合を行った。ＨＡＴ培地（日本免疫生物研
究所製）にてハイブリドーマを選択し、酵素抗体法にて
ヒトスリット２を認識する抗体を培地中に産生している
ハイブリドーマ株を分離し、ヒトスリット２を特異的に
認識するマウスモノクローナル抗体を産生するハイブリ
ドーマ産生株が樹立された。

【００９１】このようにして樹立されたハイブリドーマ
の培養上清をファルマシア社製ＭａｂＴｒａｐＧＩ
Ｉを用いて、添付の取扱い説明書に従って、抗ヒトスリ
ット２モノクローナル抗体を精製し作製した。このモノ
クローナル抗体を用いてアフィニティーカラムを作製し
た。アフィニティーカラムの作製はファルマシア社製Ｃ
ＮＢｒ活性化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂにて添付の取扱い
説明書に従い行った。カップリング効率は９９％であっ
た。このゲルの２ｍｌを２ｃｍ²×１ｃｍのサイズのカ
ラムを作製した。

【００９２】実施例６と同様の方法でプラスミドｐＨＳ
Ｌ２／ｐｃＤＮＡ３を遺伝子導入したＣＯＳ−７細胞を
培養して得られるリコンビナント・ヒトスリット２蛋白
質を含む培養上清を、このカラムに対し、２０ｍｌ／ｈ
ｒの速度で流し、その後同一速度でＰＢＳ（−）を１５
ｍｌ流して洗浄し、最終的に０．１Ｍ酢酸ナトリウム、
０．５ＭＮａＣｌ（ＰＨ４．０）にて溶出した。この溶
離液を１ｍｌづつ分取し、各画分に１ＭＴｒｉｓ−ＨＣ
ｌ（ｐＨ９．５）を２００μｌづつ加えて、中和した。

【００９３】さらに実施例７に記載の方法に従って、こ
の精製蛋白質を還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥを行い、
銀染色、及びウエスタンブロッティングを行ない、分子
量の推定を行った。この結果、約２００ｋダルトンのバ
ンドが検出され、このアフィニティーカラムでリコンビ
ナント・ヒトスリット２蛋白質が精製可能であることが
明らかとなった。

【００９４】

【発明の効果】本発明により、脊髄に主に発現する新規
スリット様ポリペプチド、およびその遺伝子、およびそ
の製造方法、および該ポリペプチドを特異的に認識する
抗体が提供され、あらゆる神経疾患、甲状腺疾患、副腎
疾患、筋疾患の診断、治療への使用が可能である。

【００９５】

【配列表】

配列番号１配列の長さ：１５０３配列の型：アミノ酸トポロジー：不明配列の種類：タンパク質起源：生物名：ヒト配列 Ala Cys Pro Ala Gln Cys Ser Cys Ser Gly Ser Thr Val Asp Cys 1 5 10 15 His Gly Leu Ala Leu Arg Ser Val Pro Arg Asn Ile Pro Arg Asn Thr 20 25 30 Glu Arg Leu Asp Leu Asn Gly Asn Asn Ile Thr Arg Ile Thr Lys Thr 35 40 45 Asp Phe Ala Gly Leu Arg His Leu Arg Val Leu Gln Leu Met Glu Asn 50 55 60 Lys Ile Ser Thr Ile Glu Arg Gly Ala Phe Gln Asp Leu Lys Glu Leu 65 70 75 Glu Arg Leu Arg Leu Asn Arg Asn His Leu Gln Leu Phe Pro Glu Leu 80 85 90 95 Leu Phe Leu Gly Thr Ala Lys Leu Tyr Arg Leu Asp Leu Ser Glu Asn 100 105 110 Gln Ile Gln Ala Ile Pro Arg Lys Ala Phe Arg Gly Ala Val Asp Ile 115 120 125 Lys Asn Leu Gln Leu Asp Tyr Asn Gln Ile Ser Cys Ile Glu Asp Gly 130 135 140 Ala Phe Arg Ala Leu Arg Asp Leu Glu Val Leu Thr Leu Asn Asn Asn 145 150 155 Asn Ile Thr Arg Leu Ser Val Ala Ser Phe Asn His Met Pro Lys Leu 160 165 170 175 Arg Thr Phe Arg Leu His Ser Asn Asn Leu Tyr Cys Asp Cys His Leu 180 185 190 Ala Trp Leu Ser Asp Trp Leu Arg Gln Arg Pro Arg Val Gly Leu Tyr 195 200 205 Thr Gln Cys Met Gly Pro Ser His Leu Arg Gly His Asn Val Ala Glu 210 215 220 Val Gln Lys Arg Glu Phe Val Cys Ser Gly His Gln Ser Phe Met Ala 225 230 235 Pro Ser Cys Ser Val Leu His Cys Pro Ala Ala Cys Thr Cys Ser Asn 240 245 250 255 Asn Ile Val Asp Cys Arg Gly Lys Gly Leu Thr Glu Ile Pro Thr Asn 260 265 270 Leu Pro Glu Thr Ile Thr Glu Ile Arg Leu Glu Gln Asn Thr Ile Lys 275 280 285 Val Ile Pro Pro Gly Ala Phe Ser Pro Tyr Lys Lys Leu Arg Arg Ile 290 295 300 Asp Leu Ser Asn Asn Gln Ile Ser Glu Leu Ala Pro Asp Ala Phe Gln 305 310 315 Gly Leu Arg Ser Leu Asn Ser Leu Val Leu Tyr Gly Asn Lys Ile Thr 320 325 330 335 Glu Leu Pro Lys Ser Leu Phe Glu Gly Leu Phe Ser Leu Gln Leu Leu 340 345 350 Leu Leu Asn Ala Asn Lys Ile Asn Cys Leu Arg Val Asp Ala Phe Gln 355 360 365 Asp Leu His Asn Leu Asn Leu Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Lys Leu Gln 370 375 380 Thr Ile Ala Lys Gly Thr Phe Ser Pro Leu Arg Ala Ile Gln Thr Met 385 390 395 His Leu Ala Gln Asn Pro Phe Ile Cys Asp Cys His Leu Lys Trp Leu 400 405 410 415 Ala Asp Tyr Leu His Thr Asn Pro Ile Glu Thr Ser Gly Ala Arg Cys 420 425 430 Thr Ser Pro Arg Arg Leu Ala Asn Lys Arg Ile Gly Gln Ile Lys Ser 435 440 445 Lys Lys Phe Arg Cys Ser Ala Lys Glu Gln Tyr Phe Ile Pro Gly Thr 450 455 460 Glu Asp Tyr Arg Ser Lys Leu Ser Gly Asp Cys Phe Ala Asp Leu Ala 465 470 475 Cys Pro Glu Lys Cys Arg Cys Glu Gly Thr Thr Val Asp Cys Ser Asn 480 485 490 495 Gln Lys Leu Asn Lys Ile Pro Glu His Ile Pro Gln Tyr Thr Ala Glu 500 505 510 Leu Arg Leu Asn Asn Asn Glu Phe Thr Val Leu Glu Ala Thr Gly Ile 515 520 525 Phe Lys Lys Leu Pro Gln Leu Arg Lys Ile Asn Phe Ser Asn Asn Lys 530 535 540 Ile Thr Asp Ile Glu Glu Gly Ala Phe Glu Gly Ala Ser Gly Val Asn 545 550 555 Glu Ile Leu Leu Thr Ser Asn Arg Leu Glu Asn Val Gln His Lys Met 560 565 570 575 Phe Lys Gly Leu Glu Ser Leu Lys Thr Leu Met Leu Arg Ser Asn Arg 580 585 590 Ile Thr Cys Val Gly Asn Asp Ser Phe Ile Gly Leu Ser Ser Val Arg 595 600 605 Leu Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Gln Ile Thr Thr Val Ala Pro Gly Ala 610 615 620 Phe Asp Thr Leu His Ser Leu Ser Thr Leu Asn Leu Leu Ala Asn Pro 625 630 635 Phe Asn Cys Asn Cys Tyr Leu Ala Trp Leu Gly Glu Trp Leu Arg Lys 640 645 650 655 Lys Arg Ile Val Thr Gly Asn Pro Arg Cys Gln Lys Pro Tyr Phe Leu 660 665 670 Lys Glu Ile Pro Ile Gln Asp Val Ala Ile Gln Asp Phe Thr Cys Asp 675 680 685 Asp Gly Asn Asp Asp Asn Ser Cys Ser Pro Leu Ser Arg Cys Pro Thr 690 695 700 Glu Cys Thr Cys Leu Asp Thr Val Val Arg Cys Ser Asn Lys Gly Leu 705 710 715 Lys Val Leu Pro Lys Gly Ile Pro Arg Asp Val Thr Glu Leu Tyr Leu 720 725 730 735 Asp Gly Asn Gln Phe Thr Leu Val Pro Lys Glu Leu Ser Asn Tyr Lys 740 745 750 His Leu Thr Leu Ile Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile Ser Thr Leu Ser 755 760 765 Asn Gln Ser Phe Ser Asn Met Thr Gln Leu Leu Thr Leu Ile Leu Ser 770 775 780 Tyr Asn Arg Leu Arg Cys Ile Pro Pro Arg Thr Phe Asp Gly Leu Lys 785 790 795 Ser Leu Arg Leu Leu Ser Leu His Gly Asn Asp Ile Ser Val Val Pro 800 805 810 815 Glu Gly Ala Phe Asn Asp Leu Ser Ala Leu Ser His Leu Ala Ile Gly 820 825 830 Ala Asn Pro Leu Tyr Cys Asp Cys Asn Met Gln Trp Leu Ser Asp Trp 835 840 845 Val Lys Ser Glu Tyr Lys Glu Pro Gly Ile Ala Arg Cys Ala Gly Pro 850 855 860 Gly Glu Met Ala Asp Lys Leu Leu Leu Thr Thr Pro Ser Lys Lys Phe 865 870 875 Thr Cys Gln Gly Pro Val Asp Val Asn Ile Leu Ala Lys Cys Asn Pro 880 885 890 895 Cys Leu Ser Asn Pro Cys Lys Asn Asp Gly Thr Cys Asn Ser Asp Pro 900 905 910 Val Asp Phe Tyr Arg Cys Thr Cys Pro Tyr Gly Phe Lys Gly Gln Asp 915 920 925 Cys Asp Val Pro Ile His Ala Cys Ile Ser Asn Pro Cys Lys His Gly 930 935 940 Gly Thr Cys His Leu Lys Glu Gly Glu Glu Asp Gly Phe Trp Cys Ile 945 950 955 Cys Ala Asp Gly Phe Glu Gly Glu Asn Cys Glu Val Asn Val Asp Asp 960 965 970 975 Cys Glu Asp Asn Asp Cys Glu Asn Asn Ser Thr Cys Val Asp Gly Ile 980 985 990 Asn Asn Tyr Thr Cys Leu Cys Pro Pro Glu Tyr Thr Gly Glu Leu Cys 995 1000 1005 Glu Glu Lys Leu Asp Phe Cys Ala Gln Asp Leu Asn Pro Cys Gln His 1010 1015 1020 Asp Ser Lys Cys Ile Leu Thr Pro Lys Gly Phe Lys Cys Asp Cys Thr 1025 1030 1035 Pro Gly Tyr Val Gly Glu His Cys Asp Ile Asp Phe Asp Asp Cys Gln 1040 1045 1050 1055 Asp Asn Lys Cys Lys Asn Gly Ala His Cys Thr Asp Ala Val Asn Gly 1060 1065 1070 Tyr Thr Cys Ile Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Leu Phe Cys Glu Phe 1075 1080 1085 Ser Pro Pro Met Val Leu Pro Arg Thr Ser Pro Cys Asp Asn Phe Asp 1090 1095 1100 Cys Gln Asn Gly Ala Gln Cys Ile Val Arg Ile Asn Glu Pro Ile Cys 1105 1110 1115 Gln Cys Leu Pro Gly Tyr Gln Gly Glu Lys Cys Glu Lys Leu Val Ser 1120 1125 1130 1135 Val Asn Phe Ile Asn Lys Glu Ser Tyr Leu Gln Ile Pro Ser Ala Lys 1140 1145 1150 Val Arg Pro Gln Thr Asn Ile Thr Leu Gln Ile Ala Thr Asp Glu Asp 1155 1160 1165 Ser Gly Ile Leu Leu Tyr Lys Gly Asp Lys Asp His Ile Ala Val Glu 1170 1175 1180 Leu Tyr Arg Gly Arg Val Arg Ala Ser Tyr Asp Thr Gly Ser His Pro 1185 1190 1195 Ala Ser Ala Ile Tyr Ser Val Glu Thr Ile Asn Asp Gly Asn Phe His 1200 1205 1210 1215 Ile Val Glu Leu Leu Ala Leu Asp Gln Ser Leu Ser Leu Ser Val Asp 1220 1225 1230 Gly Gly Asn Pro Lys Ile Ile Thr Asn Leu Ser Lys Gln Ser Thr Leu 1235 1240 1245 Asn Phe Asp Ser Pro Leu Tyr Val Gly Gly Met Pro Gly Lys Ser Asn 1250 1255 1260 Val Ala Ser Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Asn Gly Thr Ser Phe His 1265 1270 1275 Gly Cys Ile Arg Asn Leu Tyr Ile Asn Ser Glu Leu Gln Asp Phe Gln 1280 1285 1290 1295 Lys Val Pro Met Gln Thr Gly Ile Leu Pro Gly Cys Glu Pro Cys His 1300 1305 1310 Lys Lys Val Cys Ala His Gly Thr Cys Gln Pro Ser Ser Gln Ala Gly 1315 1320 1325 Phe Thr Cys Glu Cys Gln Glu Gly Trp Met Gly Pro Leu Cys Asp Gln 1330 1335 1340 Arg Thr Asn Asp Pro Cys Leu Gly Asn Lys Cys Val His Gly Thr Cys 1345 1350 1355 Leu Pro Ile Asn Ala Phe Ser Tyr Ser Cys Lys Cys Leu Glu Gly His 1360 1365 1370 1375 Gly Gly Val Leu Cys Asp Glu Glu Glu Asp Leu Phe Asn Pro Cys Gln 1380 1385 1390 Ala Ile Lys Cys Lys His Gly Lys Cys Arg Leu Ser Gly Leu Gly Gln 1395 1400 1405 Pro Tyr Cys Glu Cys Ser Ser Gly Tyr Thr Gly Asp Ser Cys Asp Arg 1410 1415 1420 Glu Ile Ser Cys Arg Gly Glu Arg Ile Arg Asp Tyr Tyr Gln Lys Gln 1425 1430 1435 Gln Gly Tyr Ala Ala Cys Gln Thr Thr Lys Lys Val Ser Arg Leu Glu 1440 1445 1450 1455 Cys Arg Gly Gly Cys Ala Gly Gly Gln Cys Cys Gly Pro Leu Arg Ser 1460 1465 1470 Lys Arg Arg Lys Tyr Ser Phe Glu Cys Thr Asp Gly Ser Ser Phe Val 1475 1480 1485 Asp Glu Val Glu Lys Val Val Lys Cys Gly Cys Thr Arg Cys Val Ser 1490 1495 1500 1503

【００９６】配列番号２配列の長さ：４９５０配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡ to ｍＲＮＡ起源：生物名：ヒト組織の種類：胎児肺配列の特徴特徴を表す記号：ＣＤＳ存在位置：２０５．．４７９１特徴を決定した方法：Ｓ特徴を表す記号：ｓｉｇｐｅｐｔｉｄｅ存在位置：２０５．．２８２特徴を決定した方法：Ｓ特徴を表す記号：ｍａｔｐｅｐｔｉｄｅ存在位置：２８３．．４７９１配列を決定した方法：Ｓ配列 CAGAGGAGGG TGGAGAGGGC GGTGGGAGGC GTGTGCCTGA GTGGGCTCTA CTGCCTTGTT 60 CCATATTATT TTGTGCACAT TTTCCCTGGC ACTCTGGGTT GCTAGCCCCG CCGGGCACTG 120 GGCCTCAGAC ACTGCGCGGT TCCCTCGGAG CAGCAAGCTA AAGAAAGCCC CCAGTGCCGG 180 CGAGGAAGGA GGCGGCGGGG AAAG ATG CGC GGC GTT GGC TGG CAG ATG CTG 231 Met Arg Gly Val Gly Trp Gln Met Leu -26 -25 -20 TCC CTG TCG CTG GGG TTA GTG CTG GCG ATC CTG AAC AAG GTG GCA CCG 279 Ser Leu Ser Leu Gly Leu Val Leu Ala Ile Leu Asn Lys Val Ala Pro -15 -10 -5 CAG GCG TGC CCG GCG CAG TGC TCT TGC TCG GGC AGC ACA GTG GAC TGT 327 Gln Ala Cys Pro Ala Gln Cys Ser Cys Ser Gly Ser Thr Val Asp Cys -1 1 5 10 15 CAC GGG CTG GCG CTG CGC AGC GTG CCC AGG AAT ATC CCC CGC AAC ACC 375 His Gly Leu Ala Leu Arg Ser Val Pro Arg Asn Ile Pro Arg Asn Thr 20 25 30 GAG AGA CTG GAT TTA AAT GGA AAT AAC ATC ACA AGA ATT ACG AAG ACA 423 Glu Arg Leu Asp Leu Asn Gly Asn Asn Ile Thr Arg Ile Thr Lys Thr 35 40 45 GAT TTT GCT GGT CTT AGA CAT CTA AGA GTT CTT CAG CTT ATG GAG AAT 471 Asp Phe Ala Gly Leu Arg His Leu Arg Val Leu Gln Leu Met Glu Asn 50 55 60 AAG ATT AGC ACC ATT GAA AGA GGA GCA TTC CAG GAT CTT AAA GAA CTA 519 Lys Ile Ser Thr Ile Glu Arg Gly Ala Phe Gln Asp Leu Lys Glu Leu 65 70 75 GAG AGA CTG CGT TTA AAC AGA AAT CAC CTT CAG CTG TTT CCT GAG TTG 567 Glu Arg Leu Arg Leu Asn Arg Asn His Leu Gln Leu Phe Pro Glu Leu 80 85 90 95 CTG TTT CTT GGG ACT GCG AAG CTA TAC AGG CTT GAT CTC AGT GAA AAC 615 Leu Phe Leu Gly Thr Ala Lys Leu Tyr Arg Leu Asp Leu Ser Glu Asn 100 105 110 CAA ATT CAG GCA ATC CCA AGG AAA GCT TTC CGT GGG GCA GTT GAC ATA 663 Gln Ile Gln Ala Ile Pro Arg Lys Ala Phe Arg Gly Ala Val Asp Ile 115 120 125 AAA AAT TTG CAA CTG GAT TAC AAC CAG ATC AGC TGT ATT GAA GAT GGG 711 Lys Asn Leu Gln Leu Asp Tyr Asn Gln Ile Ser Cys Ile Glu Asp Gly 130 135 140 GCA TTC AGG GCT CTC CGG GAC CTG GAA GTG CTC ACT CTC AAC AAT AAC 759 Ala Phe Arg Ala Leu Arg Asp Leu Glu Val Leu Thr Leu Asn Asn Asn 145 150 155 AAC ATT ACT AGA CTT TCT GTG GCA AGT TTC AAC CAT ATG CCT AAA CTT 807 Asn Ile Thr Arg Leu Ser Val Ala Ser Phe Asn His Met Pro Lys Leu 160 165 170 175 AGG ACT TTT CGA CTG CAT TCA AAC AAC CTG TAT TGT GAC TGC CAC CTG 855 Arg Thr Phe Arg Leu His Ser Asn Asn Leu Tyr Cys Asp Cys His Leu 180 185 190 GCC TGG CTC TCC GAC TGG CTT CGC CAA AGG CCT CGG GTT GGT CTG TAC 903 Ala Trp Leu Ser Asp Trp Leu Arg Gln Arg Pro Arg Val Gly Leu Tyr 195 200 205 ACT CAG TGT ATG GGC CCC TCC CAC CTG AGA GGC CAT AAT GTA GCC GAG 951 Thr Gln Cys Met Gly Pro Ser His Leu Arg Gly His Asn Val Ala Glu 210 215 220 GTT CAA AAA CGA GAA TTT GTC TGC AGT GGT CAC CAG TCA TTT ATG GCT 999 Val Gln Lys Arg Glu Phe Val Cys Ser Gly His Gln Ser Phe Met Ala 225 230 235 CCT TCT TGT AGT GTT TTG CAC TGC CCT GCC GCC TGT ACC TGT AGC AAC 1047 Pro Ser Cys Ser Val Leu His Cys Pro Ala Ala Cys Thr Cys Ser Asn 240 245 250 255 AAT ATC GTA GAC TGT CGT GGG AAA GGT CTC ACT GAG ATC CCC ACA AAT 1095 Asn Ile Val Asp Cys Arg Gly Lys Gly Leu Thr Glu Ile Pro Thr Asn 260 265 270 CTT CCA GAG ACC ATC ACA GAA ATA CGT TTG GAA CAG AAC ACA ATC AAA 1143 Leu Pro Glu Thr Ile Thr Glu Ile Arg Leu Glu Gln Asn Thr Ile Lys 275 280 285 GTC ATC CCT CCT GGA GCT TTC TCA CCA TAT AAA AAG CTT AGA CGA ATT 1191 Val Ile Pro Pro Gly Ala Phe Ser Pro Tyr Lys Lys Leu Arg Arg Ile 290 295 300 GAC CTG AGC AAT AAT CAG ATC TCT GAA CTT GCA CCA GAT GCT TTC CAA 1239 Asp Leu Ser Asn Asn Gln Ile Ser Glu Leu Ala Pro Asp Ala Phe Gln 305 310 315 GGA CTA CGC TCT CTG AAT TCA CTT GTC CTC TAT GGA AAT AAA ATC ACA 1287 Gly Leu Arg Ser Leu Asn Ser Leu Val Leu Tyr Gly Asn Lys Ile Thr 320 325 330 335 GAA CTC CCC AAA AGT TTA TTT GAA GGA CTG TTT TCC TTA CAG CTC CTA 1335 Glu Leu Pro Lys Ser Leu Phe Glu Gly Leu Phe Ser Leu Gln Leu Leu 340 345 350 TTA TTG AAT GCC AAC AAG ATA AAC TGC CTT CGG GTA GAT GCT TTT CAG 1383 Leu Leu Asn Ala Asn Lys Ile Asn Cys Leu Arg Val Asp Ala Phe Gln 355 360 365 GAT CTC CAC AAC TTG AAC CTT CTC TCC CTA TAT GAC AAC AAG CTT CAG 1431 Asp Leu His Asn Leu Asn Leu Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Lys Leu Gln 370 375 380 ACC ATC GCC AAG GGG ACC TTT TCA CCT CTT CGG GCC ATT CAA ACT ATG 1479 Thr Ile Ala Lys Gly Thr Phe Ser Pro Leu Arg Ala Ile Gln Thr Met 385 390 395 CAT TTG GCC CAG AAC CCC TTT ATT TGT GAC TGC CAT CTC AAG TGG CTA 1527 His Leu Ala Gln Asn Pro Phe Ile Cys Asp Cys His Leu Lys Trp Leu 400 405 410 415 GCG GAT TAT CTC CAT ACC AAC CCG ATT GAG ACC AGT GGT GCC CGT TGC 1575 Ala Asp Tyr Leu His Thr Asn Pro Ile Glu Thr Ser Gly Ala Arg Cys 420 425 430 ACC AGC CCC CGC CGC CTG GCA AAC AAA AGA ATT GGA CAG ATC AAA AGC 1623 Thr Ser Pro Arg Arg Leu Ala Asn Lys Arg Ile Gly Gln Ile Lys Ser 435 440 445 AAG AAA TTC CGT TGT TCA GCT AAA GAA CAG TAT TTC ATT CCA GGT ACA 1671 Lys Lys Phe Arg Cys Ser Ala Lys Glu Gln Tyr Phe Ile Pro Gly Thr 450 455 460 GAA GAT TAT CGA TCA AAA TTA AGT GGA GAC TGC TTT GCG GAT CTG GCT 1719 Glu Asp Tyr Arg Ser Lys Leu Ser Gly Asp Cys Phe Ala Asp Leu Ala 465 470 475 TGC CCT GAA AAG TGT CGC TGT GAA GGA ACC ACA GTA GAT TGC TCT AAT 1767 Cys Pro Glu Lys Cys Arg Cys Glu Gly Thr Thr Val Asp Cys Ser Asn 480 485 490 495 CAA AAG CTC AAC AAA ATC CCG GAG CAC ATT CCC CAG TAC ACT GCA GAG 1815 Gln Lys Leu Asn Lys Ile Pro Glu His Ile Pro Gln Tyr Thr Ala Glu 500 505 510 TTG CGT CTC AAT AAT AAT GAA TTT ACC GTG TTG GAA GCC ACA GGA ATC 1863 Leu Arg Leu Asn Asn Asn Glu Phe Thr Val Leu Glu Ala Thr Gly Ile 515 520 525 TTT AAG AAA CTT CCT CAA TTA CGT AAA ATA AAC TTT AGC AAC AAT AAG 1911 Phe Lys Lys Leu Pro Gln Leu Arg Lys Ile Asn Phe Ser Asn Asn Lys 530 535 540 ATC ACA GAT ATT GAG GAG GGA GCA TTT GAA GGA GCA TCT GGT GTA AAT 1959 Ile Thr Asp Ile Glu Glu Gly Ala Phe Glu Gly Ala Ser Gly Val Asn 545 550 555 GAA ATA CTT CTT ACG AGT AAT CGT TTG GAA AAT GTG CAG CAT AAG ATG 2007 Glu Ile Leu Leu Thr Ser Asn Arg Leu Glu Asn Val Gln His Lys Met 560 565 570 575 TTC AAG GGA TTG GAA AGC CTC AAA ACT TTG ATG TTG AGA AGC AAT CGA 2055 Phe Lys Gly Leu Glu Ser Leu Lys Thr Leu Met Leu Arg Ser Asn Arg 580 585 590 ATA ACC TGT GTG GGG AAT GAC AGT TTC ATA GGA CTC AGT TCT GTG CGT 2103 Ile Thr Cys Val Gly Asn Asp Ser Phe Ile Gly Leu Ser Ser Val Arg 595 600 605 TTG CTT TCT TTG TAT GAT AAT CAA ATT ACT ACA GTT GCA CCA GGG GCA 2151 Leu Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Gln Ile Thr Thr Val Ala Pro Gly Ala 610 615 620 TTT GAT ACT CTC CAT TCT TTA TCT ACT CTA AAC CTC TTG GCC AAT CCT 2199 Phe Asp Thr Leu His Ser Leu Ser Thr Leu Asn Leu Leu Ala Asn Pro 625 630 635 TTT AAC TGT AAC TGC TAC CTG GCT TGG TTG GGA GAG TGG CTG AGA AAG 2247 Phe Asn Cys Asn Cys Tyr Leu Ala Trp Leu Gly Glu Trp Leu Arg Lys 640 645 650 655 AAG AGA ATT GTC ACG GGA AAT CCT AGA TGT CAA AAA CCA TAC TTC CTG 2295 Lys Arg Ile Val Thr Gly Asn Pro Arg Cys Gln Lys Pro Tyr Phe Leu 660 665 670 AAA GAA ATA CCC ATC CAG GAT GTG GCC ATT CAG GAC TTC ACT TGT GAT 2343 Lys Glu Ile Pro Ile Gln Asp Val Ala Ile Gln Asp Phe Thr Cys Asp 675 680 685 GAC GGA AAT GAT GAC AAT AGT TGC TCC CCA CTT TCT CGC TGT CCT ACT 2391 Asp Gly Asn Asp Asp Asn Ser Cys Ser Pro Leu Ser Arg Cys Pro Thr 690 695 700 GAA TGT ACT TGC TTG GAT ACA GTC GTC CGA TGT AGC AAC AAG GGT TTG 2439 Glu Cys Thr Cys Leu Asp Thr Val Val Arg Cys Ser Asn Lys Gly Leu 705 710 715 AAG GTC TTG CCG AAA GGT ATT CCA AGA GAT GTC ACA GAG TTG TAT CTG 2487 Lys Val Leu Pro Lys Gly Ile Pro Arg Asp Val Thr Glu Leu Tyr Leu 720 725 730 735 GAT GGA AAC CAA TTT ACA CTG GTT CCC AAG GAA CTC TCC AAC TAC AAA 2535 Asp Gly Asn Gln Phe Thr Leu Val Pro Lys Glu Leu Ser Asn Tyr Lys 740 745 750 CAT TTA ACA CTT ATA GAC TTA AGT AAC AAC AGA ATA AGC ACG CTT TCT 2583 His Leu Thr Leu Ile Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile Ser Thr Leu Ser 755 760 765 AAT CAG AGC TTC AGC AAC ATG ACC CAG CTC CTC ACC TTA ATT CTT AGT 2631 Asn Gln Ser Phe Ser Asn Met Thr Gln Leu Leu Thr Leu Ile Leu Ser 770 775 780 TAC AAC CGT CTG AGA TGT ATT CCT CCT CGC ACC TTT GAT GGA TTA AAG 2679 Tyr Asn Arg Leu Arg Cys Ile Pro Pro Arg Thr Phe Asp Gly Leu Lys 785 790 795 TCT CTT CGA TTA CTT TCT CTA CAT GGA AAT GAC ATT TCT GTT GTG CCT 2727 Ser Leu Arg Leu Leu Ser Leu His Gly Asn Asp Ile Ser Val Val Pro 800 805 810 815 GAA GGT GCT TTC AAT GAT CTT TCT GCA TTA TCA CAT CTA GCA ATT GGA 2775 Glu Gly Ala Phe Asn Asp Leu Ser Ala Leu Ser His Leu Ala Ile Gly 820 825 830 GCC AAC CCT CTT TAC TGT GAT TGT AAC ATG CAG TGG TTA TCC GAC TGG 2823 Ala Asn Pro Leu Tyr Cys Asp Cys Asn Met Gln Trp Leu Ser Asp Trp 835 840 845 GTG AAG TCG GAA TAT AAG GAG CCT GGA ATT GCT CGT TGT GCT GGT CCT 2871 Val Lys Ser Glu Tyr Lys Glu Pro Gly Ile Ala Arg Cys Ala Gly Pro 850 855 860 GGA GAA ATG GCA GAT AAA CTT TTA CTC ACA ACT CCC TCC AAA AAA TTT 2919 Gly Glu Met Ala Asp Lys Leu Leu Leu Thr Thr Pro Ser Lys Lys Phe 865 870 875 ACC TGT CAA GGT CCT GTG GAT GTC AAT ATT CTA GCT AAG TGT AAC CCC 2967 Thr Cys Gln Gly Pro Val Asp Val Asn Ile Leu Ala Lys Cys Asn Pro 880 885 890 895 TGC CTA TCA AAT CCG TGT AAA AAT GAT GGC ACA TGT AAT AGT GAT CCA 3015 Cys Leu Ser Asn Pro Cys Lys Asn Asp Gly Thr Cys Asn Ser Asp Pro 900 905 910 GTT GAC TTT TAC CGA TGC ACC TGT CCA TAT GGT TTC AAG GGG CAG GAC 3063 Val Asp Phe Tyr Arg Cys Thr Cys Pro Tyr Gly Phe Lys Gly Gln Asp 915 920 925 TGT GAT GTC CCA ATT CAT GCC TGC ATC AGT AAC CCA TGT AAA CAT GGA 3111 Cys Asp Val Pro Ile His Ala Cys Ile Ser Asn Pro Cys Lys His Gly 930 935 940 GGA ACT TGC CAC TTA AAG GAA GGA GAA GAA GAT GGA TTC TGG TGT ATT 3159 Gly Thr Cys His Leu Lys Glu Gly Glu Glu Asp Gly Phe Trp Cys Ile 945 950 955 TGT GCT GAT GGA TTT GAA GGA GAA AAT TGT GAA GTC AAC GTT GAT GAT 3207 Cys Ala Asp Gly Phe Glu Gly Glu Asn Cys Glu Val Asn Val Asp Asp 960 965 970 975 TGT GAA GAT AAT GAC TGT GAA AAT AAT TCT ACA TGT GTC GAT GGC ATT 3255 Cys Glu Asp Asn Asp Cys Glu Asn Asn Ser Thr Cys Val Asp Gly Ile 980 985 990 AAT AAC TAC ACA TGC CTT TGC CCA CCT GAG TAT ACA GGT GAG TTG TGT 3303 Asn Asn Tyr Thr Cys Leu Cys Pro Pro Glu Tyr Thr Gly Glu Leu Cys 995 1000 1005 GAG GAG AAG CTG GAC TTC TGT GCC CAG GAC CTG AAC CCC TGC CAG CAC 3351 Glu Glu Lys Leu Asp Phe Cys Ala Gln Asp Leu Asn Pro Cys Gln His 1010 1015 1020 GAT TCA AAG TGC ATC CTA ACT CCA AAG GGA TTC AAA TGT GAC TGC ACA 3399 Asp Ser Lys Cys Ile Leu Thr Pro Lys Gly Phe Lys Cys Asp Cys Thr 1025 1030 1035 CCA GGG TAC GTA GGT GAA CAC TGC GAC ATC GAT TTT GAC GAC TGC CAA 3447 Pro Gly Tyr Val Gly Glu His Cys Asp Ile Asp Phe Asp Asp Cys Gln 1040 1045 1050 1055 GAC AAC AAG TGT AAA AAC GGA GCC CAC TGC ACA GAT GCA GTG AAC GGC 3495 Asp Asn Lys Cys Lys Asn Gly Ala His Cys Thr Asp Ala Val Asn Gly 1060 1065 1070 TAT ACG TGC ATA TGC CCC GAA GGT TAC AGT GGC TTG TTC TGT GAG TTT 3543 Tyr Thr Cys Ile Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Leu Phe Cys Glu Phe 1075 1080 1085 TCT CCA CCC ATG GTC CTC CCT CGT ACC AGC CCC TGT GAT AAT TTT GAT 3591 Ser Pro Pro Met Val Leu Pro Arg Thr Ser Pro Cys Asp Asn Phe Asp 1090 1095 1100 TGT CAG AAT GGA GCT CAG TGT ATC GTC AGA ATA AAT GAG CCA ATA TGT 3639 Cys Gln Asn Gly Ala Gln Cys Ile Val Arg Ile Asn Glu Pro Ile Cys 1105 1110 1115 CAG TGT TTG CCT GGC TAT CAG GGA GAA AAG TGT GAA AAA TTG GTT AGT 3687 Gln Cys Leu Pro Gly Tyr Gln Gly Glu Lys Cys Glu Lys Leu Val Ser 1120 1125 1130 1135 GTG AAT TTT ATA AAC AAA GAG TCT TAT CTT CAG ATT CCT TCA GCC AAG 3735 Val Asn Phe Ile Asn Lys Glu Ser Tyr Leu Gln Ile Pro Ser Ala Lys 1140 1145 1150 GTT CGG CCT CAG ACG AAC ATA ACA CTT CAG ATT GCC ACA GAT GAA GAC 3783 Val Arg Pro Gln Thr Asn Ile Thr Leu Gln Ile Ala Thr Asp Glu Asp 1155 1160 1165 AGC GGA ATC CTC CTG TAT AAG GGT GAC AAA GAC CAT ATC GCG GTA GAA 3831 Ser Gly Ile Leu Leu Tyr Lys Gly Asp Lys Asp His Ile Ala Val Glu 1170 1175 1180 CTC TAT CGG GGG CGT GTT CGT GCC AGC TAT GAC ACC GGC TCT CAT CCA 3879 Leu Tyr Arg Gly Arg Val Arg Ala Ser Tyr Asp Thr Gly Ser His Pro 1185 1190 1195 GCT TCT GCC ATT TAC AGT GTG GAG ACA ATC AAT GAT GGA AAC TTC CAC 3927 Ala Ser Ala Ile Tyr Ser Val Glu Thr Ile Asn Asp Gly Asn Phe His 1200 1205 1210 1215 ATT GTG GAA CTA CTT GCC TTG GAT CAG AGT CTC TCT TTG TCC GTG GAT 3975 Ile Val Glu Leu Leu Ala Leu Asp Gln Ser Leu Ser Leu Ser Val Asp 1220 1225 1230 GGT GGG AAC CCC AAA ATC ATC ACT AAC TTG TCA AAG CAG TCC ACT CTG 4023 Gly Gly Asn Pro Lys Ile Ile Thr Asn Leu Ser Lys Gln Ser Thr Leu 1235 1240 1245 AAT TTT GAC TCT CCA CTC TAT GTA GGA GGC ATG CCA GGG AAG AGT AAC 4071 Asn Phe Asp Ser Pro Leu Tyr Val Gly Gly Met Pro Gly Lys Ser Asn 1250 1255 1260 GTG GCA TCT CTG CGC CAG GCC CCT GGG CAG AAC GGA ACC AGC TTC CAC 4119 Val Ala Ser Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Asn Gly Thr Ser Phe His 1265 1270 1275 GGC TGC ATC CGG AAC CTT TAC ATC AAC AGT GAG CTG CAG GAC TTC CAG 4167 Gly Cys Ile Arg Asn Leu Tyr Ile Asn Ser Glu Leu Gln Asp Phe Gln 1280 1285 1290 1295 AAG GTG CCG ATG CAA ACA GGC ATT TTG CCT GGC TGT GAG CCA TGC CAC 4215 Lys Val Pro Met Gln Thr Gly Ile Leu Pro Gly Cys Glu Pro Cys His 1300 1305 1310 AAG AAG GTG TGT GCC CAT GGC ACA TGC CAG CCC AGC AGC CAG GCA GGC 4263 Lys Lys Val Cys Ala His Gly Thr Cys Gln Pro Ser Ser Gln Ala Gly 1315 1320 1325 TTC ACC TGC GAG TGC CAG GAA GGA TGG ATG GGG CCC CTC TGT GAC CAA 4311 Phe Thr Cys Glu Cys Gln Glu Gly Trp Met Gly Pro Leu Cys Asp Gln 1330 1335 1340 CGG ACC AAT GAC CCT TGC CTT GGA AAT AAA TGC GTA CAT GGC ACC TGC 4359 Arg Thr Asn Asp Pro Cys Leu Gly Asn Lys Cys Val His Gly Thr Cys 1345 1350 1355 TTG CCC ATC AAT GCG TTC TCC TAC AGC TGT AAG TGC TTG GAG GGC CAT 4407 Leu Pro Ile Asn Ala Phe Ser Tyr Ser Cys Lys Cys Leu Glu Gly His 1360 1365 1370 1375 GGA GGT GTC CTC TGT GAT GAA GAG GAG GAT CTG TTT AAC CCA TGC CAG 4455 Gly Gly Val Leu Cys Asp Glu Glu Glu Asp Leu Phe Asn Pro Cys Gln 1380 1385 1390 GCG ATC AAG TGC AAG CAT GGG AAG TGC AGG CTT TCA GGT CTG GGG CAG 4503 Ala Ile Lys Cys Lys His Gly Lys Cys Arg Leu Ser Gly Leu Gly Gln 1395 1400 1405 CCC TAC TGT GAA TGC AGC AGT GGA TAC ACG GGG GAC AGC TGT GAT CGA 4551 Pro Tyr Cys Glu Cys Ser Ser Gly Tyr Thr Gly Asp Ser Cys Asp Arg 1410 1415 1420 GAA ATC TCT TGT CGA GGG GAA AGG ATA AGA GAT TAT TAC CAA AAG CAG 4599 Glu Ile Ser Cys Arg Gly Glu Arg Ile Arg Asp Tyr Tyr Gln Lys Gln 1425 1430 1435 CAG GGC TAT GCT GCT TGC CAA ACA ACC AAG AAG GTG TCC CGA TTA GAG 4647 Gln Gly Tyr Ala Ala Cys Gln Thr Thr Lys Lys Val Ser Arg Leu Glu 1440 1445 1450 1455 TGC AGA GGT GGG TGT GCA GGA GGG CAG TGC TGT GGA CCG CTG AGG AGC 4695 Cys Arg Gly Gly Cys Ala Gly Gly Gln Cys Cys Gly Pro Leu Arg Ser 1460 1465 1470 AAG CGG CGG AAA TAC TCT TTC GAA TGC ACT GAC GGC TCC TCC TTT GTG 4743 Lys Arg Arg Lys Tyr Ser Phe Glu Cys Thr Asp Gly Ser Ser Phe Val 1475 1480 1485 GAC GAG GTT GAG AAA GTG GTG AAG TGC GGC TGT ACG AGG TGT GTG TCC 4791 Asp Glu Val Glu Lys Val Val Lys Cys Gly Cys Thr Arg Cys Val Ser 1490 1495 1500 TAAACACACT CCCGGCAGCT CTGTCTTTGG AAAAGGTTGT ATACTTCTTG ACCATGTGGG 4851 ACTAATGAAT GCTTCATAGT GGAAATATTT GAAATATATT GTAAAATACA GAACAGACTT 4911 ATTTTTATTA TGAGAATAAA GACTTTTTTT CTGCATTTG 4950

【００９７】配列番号３配列の長さ：１５３３配列の型：アミノ酸トポロジー：不明配列の種類：タンパク質起源：生物名：ヒト配列 Met Arg Gly Val Gly Trp Gln Met Leu -26 -25 -20 Ser Leu Ser Leu Gly Leu Val Leu Ala Ile Leu Asn Lys Val Ala Pro -15 -10 -5 Gln Ala Cys Pro Ala Gln Cys Ser Cys Ser Gly Ser Thr Val Asp Cys -1 1 5 10 15 His Gly Leu Ala Leu Arg Ser Val Pro Arg Asn Ile Pro Arg Asn Thr 20 25 30 Glu Arg Leu Asp Leu Asn Gly Asn Asn Ile Thr Arg Ile Thr Lys Thr 35 40 45 Asp Phe Ala Gly Leu Arg His Leu Arg Val Leu Gln Leu Met Glu Asn 50 55 60 Lys Ile Ser Thr Ile Glu Arg Gly Ala Phe Gln Asp Leu Lys Glu Leu 65 70 75 Glu Arg Leu Arg Leu Asn Arg Asn His Leu Gln Leu Phe Pro Glu Leu 80 85 90 95 Leu Phe Leu Gly Thr Ala Lys Leu Tyr Arg Leu Asp Leu Ser Glu Asn 100 105 110 Gln Ile Gln Ala Ile Pro Arg Lys Ala Phe Arg Gly Ala Val Asp Ile 115 120 125 Lys Asn Leu Gln Leu Asp Tyr Asn Gln Ile Ser Cys Ile Glu Asp Gly 130 135 140 Ala Phe Arg Ala Leu Arg Asp Leu Glu Val Leu Thr Leu Asn Asn Asn 145 150 155 Asn Ile Thr Arg Leu Ser Val Ala Ser Phe Asn His Met Pro Lys Leu 160 165 170 175 Arg Thr Phe Arg Leu His Ser Asn Asn Leu Tyr Cys Asp Cys His Leu 180 185 190 Ala Trp Leu Ser Asp Trp Leu Arg Gln Arg Pro Arg Val Gly Leu Tyr 195 200 205 Thr Gln Cys Met Gly Pro Ser His Leu Arg Gly His Asn Val Ala Glu 210 215 220 Val Gln Lys Arg Glu Phe Val Cys Ser Gly His Gln Ser Phe Met Ala 225 230 235 Pro Ser Cys Ser Val Leu His Cys Pro Ala Ala Cys Thr Cys Ser Asn 240 245 250 255 Asn Ile Val Asp Cys Arg Gly Lys Gly Leu Thr Glu Ile Pro Thr Asn 260 265 270 Leu Pro Glu Thr Ile Thr Glu Ile Arg Leu Glu Gln Asn Thr Ile Lys 275 280 285 Val Ile Pro Pro Gly Ala Phe Ser Pro Tyr Lys Lys Leu Arg Arg Ile 290 295 300 Asp Leu Ser Asn Asn Gln Ile Ser Glu Leu Ala Pro Asp Ala Phe Gln 305 310 315 Gly Leu Arg Ser Leu Asn Ser Leu Val Leu Tyr Gly Asn Lys Ile Thr 320 325 330 335 Glu Leu Pro Lys Ser Leu Phe Glu Gly Leu Phe Ser Leu Gln Leu Leu 340 345 350 Leu Leu Asn Ala Asn Lys Ile Asn Cys Leu Arg Val Asp Ala Phe Gln 355 360 365 Asp Leu His Asn Leu Asn Leu Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Lys Leu Gln 370 375 380 Thr Ile Ala Lys Gly Thr Phe Ser Pro Leu Arg Ala Ile Gln Thr Met 385 390 395 His Leu Ala Gln Asn Pro Phe Ile Cys Asp Cys His Leu Lys Trp Leu 400 405 410 415 Ala Asp Tyr Leu His Thr Asn Pro Ile Glu Thr Ser Gly Ala Arg Cys 420 425 430 Thr Ser Pro Arg Arg Leu Ala Asn Lys Arg Ile Gly Gln Ile Lys Ser 435 440 445 Lys Lys Phe Arg Cys Ser Ala Lys Glu Gln Tyr Phe Ile Pro Gly Thr 450 455 460 Glu Asp Tyr Arg Ser Lys Leu Ser Gly Asp Cys Phe Ala Asp Leu Ala 465 470 475 Cys Pro Glu Lys Cys Arg Cys Glu Gly Thr Thr Val Asp Cys Ser Asn 480 485 490 495 Gln Lys Leu Asn Lys Ile Pro Glu His Ile Pro Gln Tyr Thr Ala Glu 500 505 510 Leu Arg Leu Asn Asn Asn Glu Phe Thr Val Leu Glu Ala Thr Gly Ile 515 520 525 Phe Lys Lys Leu Pro Gln Leu Arg Lys Ile Asn Phe Ser Asn Asn Lys 530 535 540 Ile Thr Asp Ile Glu Glu Gly Ala Phe Glu Gly Ala Ser Gly Val Asn 545 550 555 Glu Ile Leu Leu Thr Ser Asn Arg Leu Glu Asn Val Gln His Lys Met 560 565 570 575 Phe Lys Gly Leu Glu Ser Leu Lys Thr Leu Met Leu Arg Ser Asn Arg 580 585 590 Ile Thr Cys Val Gly Asn Asp Ser Phe Ile Gly Leu Ser Ser Val Arg 595 600 605 Leu Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Gln Ile Thr Thr Val Ala Pro Gly Ala 610 615 620 Phe Asp Thr Leu His Ser Leu Ser Thr Leu Asn Leu Leu Ala Asn Pro 625 630 635 Phe Asn Cys Asn Cys Tyr Leu Ala Trp Leu Gly Glu Trp Leu Arg Lys 640 645 650 655 Lys Arg Ile Val Thr Gly Asn Pro Arg Cys Gln Lys Pro Tyr Phe Leu 660 665 670 Lys Glu Ile Pro Ile Gln Asp Val Ala Ile Gln Asp Phe Thr Cys Asp 675 680 685 Asp Gly Asn Asp Asp Asn Ser Cys Ser Pro Leu Ser Arg Cys Pro Thr 690 695 700 Glu Cys Thr Cys Leu Asp Thr Val Val Arg Cys Ser Asn Lys Gly Leu 705 710 715 Lys Val Leu Pro Lys Gly Ile Pro Arg Asp Val Thr Glu Leu Tyr Leu 720 725 730 735 Asp Gly Asn Gln Phe Thr Leu Val Pro Lys Glu Leu Ser Asn Tyr Lys 740 745 750 His Leu Thr Leu Ile Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile Ser Thr Leu Ser 755 760 765 Asn Gln Ser Phe Ser Asn Met Thr Gln Leu Leu Thr Leu Ile Leu Ser 770 775 780 Tyr Asn Arg Leu Arg Cys Ile Pro Pro Arg Thr Phe Asp Gly Leu Lys 785 790 795 Ser Leu Arg Leu Leu Ser Leu His Gly Asn Asp Ile Ser Val Val Pro 800 805 810 815 Glu Gly Ala Phe Asn Asp Leu Ser Ala Leu Ser His Leu Ala Ile Gly 820 825 830 Ala Asn Pro Leu Tyr Cys Asp Cys Asn Met Gln Trp Leu Ser Asp Trp 835 840 845 Val Lys Ser Glu Tyr Lys Glu Pro Gly Ile Ala Arg Cys Ala Gly Pro 850 855 860 Gly Glu Met Ala Asp Lys Leu Leu Leu Thr Thr Pro Ser Lys Lys Phe 865 870 875 Thr Cys Gln Gly Pro Val Asp Val Asn Ile Leu Ala Lys Cys Asn Pro 880 885 890 895 Cys Leu Ser Asn Pro Cys Lys Asn Asp Gly Thr Cys Asn Ser Asp Pro 900 905 910 Val Asp Phe Tyr Arg Cys Thr Cys Pro Tyr Gly Phe Lys Gly Gln Asp 915 920 925 Cys Asp Val Pro Ile His Ala Cys Ile Ser Asn Pro Cys Lys His Gly 930 935 940 Gly Thr Cys His Leu Lys Glu Gly Glu Glu Asp Gly Phe Trp Cys Ile 945 950 955 Cys Ala Asp Gly Phe Glu Gly Glu Asn Cys Glu Val Asn Val Asp Asp 960 965 970 975 Cys Glu Asp Asn Asp Cys Glu Asn Asn Ser Thr Cys Val Asp Gly Ile 980 985 990 Asn Asn Tyr Thr Cys Leu Cys Pro Pro Glu Tyr Thr Gly Glu Leu Cys 995 1000 1005 Glu Glu Lys Leu Asp Phe Cys Ala Gln Asp Leu Asn Pro Cys Gln His 1010 1015 1020 Asp Ser Lys Cys Ile Leu Thr Pro Lys Gly Phe Lys Cys Asp Cys Thr 1025 1030 1035 Pro Gly Tyr Val Gly Glu His Cys Asp Ile Asp Phe Asp Asp Cys Gln 1040 1045 1050 1055 Asp Asn Lys Cys Lys Asn Gly Ala His Cys Thr Asp Ala Val Asn Gly 1060 1065 1070 Tyr Thr Cys Ile Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Leu Phe Cys Glu Phe 1075 1080 1085 Ser Pro Pro Met Val Leu Pro Arg Thr Ser Pro Cys Asp Asn Phe Asp 1090 1095 1100 Cys Gln Asn Gly Ala Gln Cys Ile Val Arg Ile Asn Glu Pro Ile Cys 1105 1110 1115 Gln Cys Leu Pro Gly Tyr Gln Gly Glu Lys Cys Glu Lys Leu Val Ser 1120 1125 1130 1135 Val Asn Phe Ile Asn Lys Glu Ser Tyr Leu Gln Ile Pro Ser Ala Lys 1140 1145 1150 Val Arg Pro Gln Thr Asn Ile Thr Leu Gln Ile Ala Thr Asp Glu Asp 1155 1160 1165 Ser Gly Ile Leu Leu Tyr Lys Gly Asp Lys Asp His Ile Ala Val Glu 1170 1175 1180 Leu Tyr Arg Gly Arg Val Arg Ala Ser Tyr Asp Thr Gly Ser His Pro 1185 1190 1195 Ala Ser Ala Ile Tyr Ser Val Glu Thr Ile Asn Asp Gly Asn Phe His 1200 1205 1210 1215 Ile Val Glu Leu Leu Ala Leu Asp Gln Ser Leu Ser Leu Ser Val Asp 1220 1225 1230 Gly Gly Asn Pro Lys Ile Ile Thr Asn Leu Ser Lys Gln Ser Thr Leu 1235 1240 1245 Asn Phe Asp Ser Pro Leu Tyr Val Gly Gly Met Pro Gly Lys Ser Asn 1250 1255 1260 Val Ala Ser Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Asn Gly Thr Ser Phe His 1265 1270 1275 Gly Cys Ile Arg Asn Leu Tyr Ile Asn Ser Glu Leu Gln Asp Phe Gln 1280 1285 1290 1295 Lys Val Pro Met Gln Thr Gly Ile Leu Pro Gly Cys Glu Pro Cys His 1300 1305 1310 Lys Lys Val Cys Ala His Gly Thr Cys Gln Pro Ser Ser Gln Ala Gly 1315 1320 1325 Phe Thr Cys Glu Cys Gln Glu Gly Trp Met Gly Pro Leu Cys Asp Gln 1330 1335 1340 Arg Thr Asn Asp Pro Cys Leu Gly Asn Lys Cys Val His Gly Thr Cys 1345 1350 1355 Leu Pro Ile Asn Ala Phe Ser Tyr Ser Cys Lys Cys Leu Glu Gly His 1360 1365 1370 1375 Gly Gly Val Leu Cys Asp Glu Glu Glu Asp Leu Phe Asn Pro Cys Gln 1380 1385 1390 Ala Ile Lys Cys Lys His Gly Lys Cys Arg Leu Ser Gly Leu Gly Gln 1395 1400 1405 Pro Tyr Cys Glu Cys Ser Ser Gly Tyr Thr Gly Asp Ser Cys Asp Arg 1410 1415 1420 Glu Ile Ser Cys Arg Gly Glu Arg Ile Arg Asp Tyr Tyr Gln Lys Gln 1425 1430 1435 Gln Gly Tyr Ala Ala Cys Gln Thr Thr Lys Lys Val Ser Arg Leu Glu 1440 1445 1450 1455 Cys Arg Gly Gly Cys Ala Gly Gly Gln Cys Cys Gly Pro Leu Arg Ser 1460 1465 1470 Lys Arg Arg Lys Tyr Ser Phe Glu Cys Thr Asp Gly Ser Ser Phe Val 1475 1480 1485 Asp Glu Val Glu Lys Val Val Lys Cys Gly Cys Thr Arg Cys Val Ser 1490 1495 1500

【００９８】配列番号４配列の長さ：１２９７配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡ to ｍＲＮＡ起源：生物名：ヒト直接の起源：クローン名：２０２７３８配列の特徴特徴を表す記号：ＣＤＳ存在位置：２４２．．１１３８特徴を決定した方法：Ｓ配列 ATTTCTACTT CTTGTCATAA AAGAACAAAC TTATTTTGTA TTCAGTTCCT GAGAAACTGA 60 AATCAATCAC ATCTCCTTGA AAATGCCTAT TTTTGAAAAA AAATTCAACT ACTCGTCTTT 120 ATCTTCATTA GTGTTAGATT GCCATCTCTT TTCCCAAGGA GCACTTATCA AAGTTTGTAA 180 TTTAACTACC TTGCTTTAAT GAAAAGAAAA TGGAAGAATC AGCCATTTTT TTTTCCGTTG 240 T AGT GTG GAG ACA ATC AAT GAT GGA AAC TTC CAC ATT GTG GAA CTA 286 Ser Val Glu Thr Ile Asn Asp Gly Asn Phe His Ile Val Glu Leu 1205 1210 1215 CTT GCC TTG GAT CAG AGT CTC TCT TTG TCC GTG GAT GGT GGG AAC CCC 334 Leu Ala Leu Asp Gln Ser Leu Ser Leu Ser Val Asp Gly Gly Asn Pro 1220 1225 1230 1235 AAA ATC ATC ACT AAC TTG TCA AAG CAG TCC ACT CTG AAT TTT GAC TTT 382 Lys Ile Ile Thr Asn Leu Ser Lys Gln Ser Thr Leu Asn Phe Asp Phe 1240 1245 1250 CCA CTC TAT GTA GGA GGC ATG CCA GGG AAG AGT AAC GTG GCA TCT CTG 430 Pro Leu Tyr Val Gly Gly Met Pro Gly Lys Ser Asn Val Ala Ser Leu 1255 1260 1265 CGC CAG GCC CCT GGG CAG AAC GGA ACC AGC TTC CAC GGC TGC ATC CGG 478 Arg Gln Ala Pro Gly Gln Asn Gly Thr Ser Phe His Gly Cys Ile Arg 1270 1275 1280 AAC CTT TAC ATC AAC AGT GAG CTG CAG GAC TTC CAG AAG GTG CCG ATG 526 Asn Leu Tyr Ile Asn Ser Glu Leu Gln Asp Phe Gln Lys Val Pro Met 1285 1290 1295 CAA ACA GGC ATT TTG CCT GGC TGT GAG CCA TGC CAC AAG AAG GTG TGT 574 Gln Thr Gly Ile Leu Pro Gly Cys Glu Pro Cys His Lys Lys Val Cys 1300 1305 1310 1315 GCC CAT GGC ACA TGC CAG CCC AGC AGC CAG GCA GGC TTC ACC TGC GAG 622 Ala His Gly Thr Cys Gln Pro Ser Ser Gln Ala Gly Phe Thr Cys Glu 1320 1325 1330 TGC CAG GAA GGA TGG ATG GGG CCC CTC TGT GAC CAA CGG ACC AAT GAC 670 Cys Gln Glu Gly Trp Met Gly Pro Leu Cys Asp Gln Arg Thr Asn Asp 1335 1340 1345 CCT TGC CTT GGA AAT AAA TGC GTA CAT GGC ACC TGC TTG CCC ATC AAT 718 Pro Cys Leu Gly Asn Lys Cys Val His Gly Thr Cys Leu Pro Ile Asn 1350 1355 1360 GCG TTC TCC TAC AGC TGT AAG TGC TTG GAG GGC CAT GGA GGT GTC CTC 766 Ala Phe Ser Tyr Ser Cys Lys Cys Leu Glu Gly His Gly Gly Val Leu 1365 1370 1375 TGT GAT GAA GAG GAG GAT CTG TTT AAC CCA TGC CAG GCG ATC AAG TGC 814 Cys Asp Glu Glu Glu Asp Leu Phe Asn Pro Cys Gln Ala Ile Lys Cys 1380 1385 1390 1395 AAG CAC GGG AAG TGC AGG CTT TCA GGT CTG GGG CAG CCC TAC TGT GAA 862 Lys His Gly Lys Cys Arg Leu Ser Gly Leu Gly Gln Pro Tyr Cys Glu 1400 1405 1410 TGC AGC AGT GGA TAC ACG GGG GAC AGC TGT GAT CGA GAA ATC TCT TGT 910 Cys Ser Ser Gly Tyr Thr Gly Asp Ser Cys Asp Arg Glu Ile Ser Cys 1415 1420 1425 CGA GGG GAA AGG ATA AGA GAT TAT TAC CAA AAG CAG CAG GGC TAT GCT 958 Arg Gly Glu Arg Ile Arg Asp Tyr Tyr Gln Lys Gln Gln Gly Tyr Ala 1430 1435 1440 GCT TGC CAA ACA ACC AAG AAG GTG TCC CGA TTA GAG TGC AGA GGT GGG 1006 Ala Cys Gln Thr Thr Lys Lys Val Ser Arg Leu Glu Cys Arg Gly Gly 1445 1450 1455 TGT GCA GGA GGG CAG TGC TGT GGA CCG CTG AGG AGC AAG CGG CGG AAA 1054 Cys Ala Gly Gly Gln Cys Cys Gly Pro Leu Arg Ser Lys Arg Arg Lys 1460 1465 1470 1475 TAC TCT TTC GAA TGC ACT GAC GGC TCC TCC TTT GTG GAC GAG GTT GAG 1102 Tyr Ser Phe Glu Cys Thr Asp Gly Ser Ser Phe Val Asp Glu Val Glu 1480 1485 1490 AAA GTG GTG AAG TGC GGC TGT ACG AGG TGT GTG TCCTAAACAC ACTCCCGGCA 1155 Lys Val Val Lys Cys Gly Cys Thr Arg Cys Val Ser 1495 1500 1503 GCTCTGTCTT TGGAAAAGGT TGTATACTTC TTGACCATGT GGGACTAATG AATGCTTCAT 1215 AGTGGAAATA TTTGAAATAT ATTGTAAAAT ACAGAACAGA CTTATTTTTA TTATGAGAAT 1275 AAAGACTTTT TTTCTGCATT TG 1297

【００９９】配列番号５配列の長さ：４０５配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡ to ｍＲＮＡ起源：生物名：ヒト直接の起源：クローン名：４７３４４配列の特徴特徴を表す記号：ＣＤＳ存在位置：１３１．．４０３特徴を決定した方法：Ｓ配列 ACATTTTCCT GGCACTCTGG GTTGCTAGCC CCGCCGGGCA CTGGGCCTCA GACACTGCGC 60 GGGTTCCCTC GGAGCAGCAA GCTAAAGGAA AGCCCCCAGT GCCGGCGGAG GAAGGAGGCG 120 GCGGGGAAAG ATG CGC GGC GTT GGC TGG CAG ATG CTG TCC CTG TCG CTG 169 Met Arg Gly Val Gly Trp Gln Met Leu Ser Leu Ser Leu -26 -25 -20 -15 GGG TTA GTG CTG GCG ATC CTG AAC AAG GTG GCA CCG CAG GCG TGC CCG 217 Gly Leu Val Leu Ala Ile Leu Asn Lys Val Ala Pro Gln Ala Cys Pro -10 -5 1 GCG CAG TGC TCT TGC TCG GGC AGC ACA GTG GAC TGT CAC GGG CTG GCG 265 Ala Gln Cys Ser Cys Ser Gly Ser Thr Val Asp Cys His Gly Leu Ala 5 10 15 CTG CGC AGC GTG CCC AGG AAT ATC CCC CGC AAC ACC GAG AGA CTG GAT 313 Leu Arg Ser Val Pro Arg Asn Ile Pro Arg Asn Thr Glu Arg Leu Asp 20 25 30 35 TTA AAT GGA AAT AAC ATC ACA AGA ATT ACG AAG ACA GAT TTT GCT GGT 361 Leu Asn Gly Asn Asn Ile Thr Arg Ile Thr Lys Thr Asp Phe Ala Gly 40 45 50 CTT AGA CAT CTA AGA GTT CTT CAG CTT ATG GAG AAT AAG ATT AG 405 Leu Arg His Leu Arg Val Leu Gln Leu Met Glu Asn Lys Ile 55 60 65

【０１００】配列番号６配列の長さ：２７７配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡ to ｍＲＮＡ起源：生物名：マウス組織の種類：胎生配列の特徴特徴を表す記号：ＣＤＳ存在位置：２．．２７７特徴を決定した方法：Ｓ配列 G AAG TGC AGG CTT TCT GGA GTG GGC CAG CCC TAT TGT GAA TGC AAC 46 Lys Cys Arg Leu Ser Gly Val Gly Gln Pro Tyr Cys Glu Cys Asn 1 5 10 15 AGT GGA TTC ACC GGG GAC AGC TGT GAT AGA GAA ATT TCT TGT CGA GGG 94 Ser Gly Phe Thr Gly Asp Ser Cys Asp Arg Glu Ile Ser Cys Arg Gly 20 25 30 GAA CGG ATA AGG GAC TAT TAC CAG AAG CAG CAG GGT TAC GCT GCC TGT 142 Glu Arg Ile Arg Asp Tyr Tyr Gln Lys Gln Gln Gly Tyr Ala Ala Cys 35 40 45 CAA ACA ACT AAG AAA GTA TCT CGC TTG GAA TGC AGA GGC GGG TGC GCT 190 Gln Thr Thr Lys Lys Val Ser Arg Leu Glu Cys Arg Gly Gly Cys Ala 50 55 60 GGA GGC CAG TGC TGT GGA CCT CTG AGA AGC AAG AGG CGG AAA TAC TCT 238 Gly Gly Gln Cys Cys Gly Pro Leu Arg Ser Lys Arg Arg Lys Tyr Ser 65 70 75 TTC GAA TGC ACA GAT GGC TCC TCA TTT GTG GAC GAG GTT 277 Phe Glu Cys Thr Asp Gly Ser Ser Phe Val Asp Glu Val 80 85 90 配列番号７配列の長さ：９２配列の型：アミノ酸トポロジー：不明配列の種類：ポリペプチド起源：生物名：マウス配列 Lys Cys Arg Leu Ser Gly Val Gly Gln Pro Tyr Cys Glu Cys Asn 1 5 10 15 Ser Gly Phe Thr Gly Asp Ser Cys Asp Arg Glu Ile Ser Cys Arg Gly 20 25 30 Glu Arg Ile Arg Asp Tyr Tyr Gln Lys Gln Gln Gly Tyr Ala Ala Cys 35 40 45 Gln Thr Thr Lys Lys Val Ser Arg Leu Glu Cys Arg Gly Gly Cys Ala 50 55 60 Gly Gly Gln Cys Cys Gly Pro Leu Arg Ser Lys Arg Arg Lys Tyr Ser 65 70 75 Phe Glu Cys Thr Asp Gly Ser Ser Phe Val Asp Glu Val 80 85 90 92

【０１０１】配列番号８配列の長さ：１５０８配列の型：アミノ酸トポロジー：不明配列の種類：タンパク質起源生物名：ヒト配列 Trp Arg Leu Gly Ala Ser Ala Cys Pro Ala Leu Cys Thr Cys Thr 1 5 10 15 Gly Thr Thr Val Asp Cys His Gly Thr Gly Leu Gln Ala Ile Pro 20 25 30 Lys Asn Ile Pro Arg Asn Thr Glu Arg Leu Glu Leu Asn Gly Asn 35 40 45 Asn Ile Thr Arg Ile His Lys Asn Asp Phe Ala Gly Leu Lys Gln 50 55 60 Leu Arg Val Leu Gln Leu Met Glu Asn Gln Ile Gly Ala Val Glu 65 70 75 Arg Gly Ala Phe Asp Asp Met Lys Glu Leu Glu Arg Leu Arg Leu 80 85 90 Asn Arg Asn Gln Leu His Met Leu Pro Glu Leu Leu Phe Gln Asn 95 100 105 Asn Gln Ala Leu Ser Arg Leu Asp Leu Ser Glu Asn Ala Ile Gln 110 115 120 Ala Ile Pro Arg Lys Ala Phe Arg Gly Ala Thr Asp Leu Lys Asn 125 130 135 Leu Arg Leu Asp Lys Asn Gln Ile Ser Cys Ile Glu Glu Gly Ala 140 145 150 Phe Arg Ala Leu Arg Gly Leu Glu Val Leu Thr Leu Asn Asn Asn 155 160 165 Asn Ile Thr Thr Ile Pro Val Ser Ser Phe Asn His Met Pro Lys 170 175 180 Leu Arg Thr Phe Arg Leu His Ser Asn His Leu Phe Cys Asp Cys 185 190 195 His Leu Ala Trp Leu Ser Gln Trp Leu Arg Gln Arg Pro Thr Ile 200 205 210 Glu Leu Phe Thr Gln Cys Ser Gly Pro Ala Ser Leu Arg Gly Leu 215 220 225 Asn Val Ala Glu Val Gln Lys Ser Glu Phe Ser Cys Ser Gly Gln 230 235 240 Gly Glu Ala Gly Arg Val Pro Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gly Ser 245 250 255 Cys Pro Ala Met Cys Thr Cys Ser Asn Gly Ile Val Asp Cys Arg 260 265 270 Gly Lys Gly Leu Thr Ala Ile Pro Ala Asn Leu Pro Glu Thr Met 275 280 285 Thr Glu Ile Arg Leu Glu Leu Asn Gly Ile Lys Ser Ile Pro Pro 290 295 300 Gly Ala Phe Ser Pro Tyr Arg Lys Leu Arg Arg Ile Asp Leu Ser 305 310 315 Asn Asn Gln Ile Ala Glu Ile Ala Pro Asp Ala Phe Gln Gly Leu 320 325 330 Arg Ser Leu Asn Ser Leu Val Leu Tyr Gly Asn Lys Ile Thr Asp 335 340 345 Leu Pro Arg Gly Val Phe Gly Gly Leu Tyr Thr Leu Gln Leu Leu 350 355 360 Leu Leu Asn Ala Asn Lys Ile Asn Cys Ile Arg Pro Asp Ala Phe 365 370 375 Gln Asp Leu Gln Asn Leu Ser Leu Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Lys 380 385 390 Ile Gln Ser Leu Ala Lys Gly Thr Phe Thr Ser Leu Arg Ala Ile 395 400 405 Gln Thr Leu His Leu Ala Gln Asn Pro Phe Ile Cys Asp Cys Asn 410 415 420 Leu Lys Trp Leu Ala Asp Phe Leu Arg Thr Asn Pro Ile Glu Thr 425 430 435 Ser Gly Ala Arg Cys Ala Ser Pro Arg Arg Leu Ala Asn Lys Arg 440 445 450 Ile Gly Gln Ile Lys Ser Lys Lys Phe Arg Cys Ser Ala Lys Glu 455 460 465 Gln Tyr Phe Ile Pro Gly Thr Glu Asp Tyr Gln Leu Asn Ser Glu 470 475 480 Cys Asn Ser Asp Val Val Cys Pro His Lys Cys Arg Cys Glu Ala 485 490 495 Asn Val Val Glu Cys Ser Ser Leu Lys Leu Thr Lys Ile Pro Glu 500 505 510 Arg Ile Pro Gln Ser Thr Ala Glu Leu Arg Leu Asn Asn Asn Glu 515 520 525 Ile Ser Ile Leu Glu Ala Thr Gly Met Phe Lys Lys Leu Thr His 530 535 540 Leu Lys Lys Ile Asn Leu Ser Asn Asn Lys Val Ser Glu Ile Glu 545 550 555 Asp Gly Ala Phe Glu Gly Ala Ala Ser Val Ser Glu Leu His Leu 560 565 570 Thr Ala Asn Gln Leu Glu Ser Ile Arg Ser Gly Met Phe Arg Gly 575 580 585 Leu Asp Gly Leu Arg Thr Leu Met Leu Arg Asn Asn Arg Ile Ser 590 595 600 Cys Ile His Asn Asp Ser Phe Thr Gly Leu Arg Asn Val Arg Leu 605 610 615 Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Gln Ile Thr Thr Val Ser Pro Gly Ala 620 625 630 Phe Asp Thr Leu Gln Ser Leu Ser Thr Leu Asn Leu Leu Ala Asn 635 640 645 Pro Phe Asn Cys Asn Cys Gln Leu Ala Trp Leu Gly Gly Trp Leu 650 655 660 Arg Lys Arg Lys Ile Val Thr Gly Asn Pro Arg Cys Gln Asn Pro 665 670 675 Asp Phe Leu Arg Gln Ile Pro Leu Gln Asp Val Ala Phe Pro Asp 680 685 690 Phe Arg Cys Glu Glu Gly Gln Glu Glu Gly Gly Cys Leu Pro Arg 695 700 705 Pro Gln Cys Pro Gln Glu Cys Ala Cys Leu Asp Thr Val Val Arg 710 715 720 Cys Ser Asn Lys His Leu Arg Ala Leu Pro Lys Gly Ile Pro Lys 725 730 735 Asn Val Thr Glu Leu Tyr Leu Asp Gly Asn Gln Phe Thr Leu Val 740 745 750 Pro Gly Gln Leu Ser Thr Phe Lys Tyr Leu Gln Leu Val Asp Leu 755 760 765 Ser Asn Asn Lys Ile Ser Ser Leu Ser Asn Ser Ser Phe Thr Asn 770 775 780 Met Ser Gln Leu Thr Thr Leu Ile Leu Ser Tyr Asn Ala Leu Gln 785 790 795 Cys Ile Pro Pro Leu Ala Phe Gln Gly Leu Arg Ser Leu Arg Leu 800 805 810 Leu Ser Leu His Gly Asn Asp Ile Ser Thr Leu Gln Glu Gly Ile 815 820 825 Phe Ala Asp Val Thr Ser Leu Ser His Leu Ala Ile Gly Ala Asn 830 835 840 Pro Leu Tyr Cys Asp Cys His Leu Arg Trp Leu Ser Ser Trp Val 845 850 855 Lys Thr Gly Tyr Lys Glu Pro Gly Ile Ala Arg Cys Ala Gly Pro 860 865 870 Gln Asp Met Glu Gly Lys Leu Leu Leu Thr Thr Pro Ala Lys Lys 875 880 885 Phe Glu Cys Gln Gly Pro Pro Thr Leu Ala Val Gln Ala Lys Cys 890 895 900 Asp Leu Cys Leu Ser Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Thr Cys His 905 910 915 Asn Asp Pro Leu Glu Val Tyr Arg Cys Ala Cys Pro Ser Gly Tyr 920 925 930 Lys Gly Arg Asp Cys Glu Val Ser Leu Asn Ser Cys Ser Ser Gly 935 940 945 Pro Cys Glu Asn Gly Gly Thr Cys His Ala Gln Glu Gly Glu Asp 950 955 960 Ala Pro Phe Thr Cys Ser Cys Pro Thr Gly Phe Glu Gly Pro Thr 965 970 975 Cys Gly Val Asn Thr Asp Asp Cys Val Asp His Ala Cys Ala Asn 980 985 990 Gly Gly Val Cys Val Asp Gly Val Gly Asn Tyr Thr Cys Gln Cys 995 1000 1005 Pro Leu Gln Tyr Glu Gly Lys Ala Cys Glu Gln Leu Val Asp Leu 1010 1015 1020 Cys Ser Pro Asp Leu Asn Pro Cys Gln His Glu Ala Gln Cys Val 1025 1030 1035 Gly Thr Pro Asp Gly Pro Arg Cys Glu Cys Met Pro Gly Tyr Ala 1040 1045 1050 Gly Asp Asn Cys Ser Glu Asn Gln Asp Asp Cys Arg Asp His Arg 1055 1060 1065 Cys Gln Asn Gly Ala Gln Cys Met Asp Glu Val Asn Ser Tyr Ser 1070 1075 1080 Cys Leu Cys Ala Glu Gly Tyr Ser Gly Gln Leu Cys Glu Ile Pro 1085 1090 1095 Pro His Leu Pro Ala Pro Lys Ser Pro Cys Glu Gly Thr Glu Cys 1100 1105 1110 Gln Asn Gly Ala Asn Cys Val Asp Gln Gly Asn Arg Pro Val Cys 1115 1120 1125 Gln Cys Leu Pro Gly Phe Gly Gly Pro Glu Cys Glu Lys Leu Leu 1130 1135 1140 Ser Val Asn Phe Val Asp Arg Asp Thr Tyr Leu Gln Phe Thr Asp 1145 1150 1155 Leu Gln Asn Trp Pro Arg Ala Asn Ile Thr Leu Gln Val Ser Thr 1160 1165 1170 Ala Glu Asp Asn Gly Ile Leu Leu Tyr Asn Gly Asp Asn Asp His 1175 1180 1185 Ile Ala Val Glu Leu Tyr Gln Gly His Val Arg Val Ser Tyr Asp 1190 1195 1200 Pro Gly Ser Tyr Pro Ser Ser Ala Ile Tyr Ser Ala Glu Thr Ile 1205 1210 1215 Asn Asp Gly Gln Phe His Thr Val Glu Leu Val Ala Phe Asp Gln 1220 1225 1230 Met Val Asn Leu Ser Ile Asp Gly Gly Ser Pro Met Thr Met Asp 1235 1240 1245 Asn Phe Gly Lys His Tyr Thr Leu Asn Ser Glu Ala Pro Leu Tyr 1250 1255 1260 Val Gly Gly Met Pro Val Asp Val Asn Ser Ala Ala Phe Arg Leu 1265 1270 1275 Trp Gln Ile Leu Asn Gly Thr Gly Phe His Gly Cys Ile Arg Asn 1280 1285 1290 Leu Tyr Ile Asn Asn Glu Leu Gln Asp Phe Thr Lys Thr Gln Met 1295 1300 1305 Lys Pro Gly Val Val Pro Gly Cys Glu Pro Cys Arg Lys Leu Tyr 1310 1315 1320 Cys Leu His Gly Ile Cys Gln Pro Asn Ala Thr Pro Gly Pro Met 1325 1330 1335 Cys His Cys Glu Ala Gly Trp Val Gly Leu His Cys Asp Gln Pro 1340 1345 1350 Ala Asp Gly Pro Cys His Gly His Lys Cys Val His Gly Gln Cys 1355 1360 1365 Val Pro Leu Asp Ala Leu Ser Tyr Ser Cys Gln Cys Gln Asp Gly 1370 1375 1380 Tyr Ser Gly Ala Leu Cys Asn Gln Ala Gly Ala Leu Ala Glu Pro 1385 1390 1395 Cys Arg Gly Leu Gln Cys Leu His Gly His Cys Gln Ala Ser Gly 1400 1405 1410 Thr Lys Gly Ala His Cys Val Cys Asp Pro Gly Phe Ser Gly Glu 1415 1420 1425 Leu Cys Glu Gln Glu Ser Glu Cys Arg Gly Asp Pro Val Arg Asp 1430 1345 1440 Phe His Gln Val Gln Arg Gly Tyr Ala Ile Cys Gln Thr Thr Arg 1445 1450 1455 Pro Leu Ser Trp Val Glu Cys Arg Gly Ser Cys Pro Gly Gln Gly 1460 1465 1470 Cys Cys Gln Gly Leu Arg Leu Lys Arg Arg Lys Phe Thr Phe Glu 1475 1480 1485 Cys Ser Asp Gly Thr Ser Phe Ala Glu Glu Val Glu Lys Pro Thr 1490 1495 1500 Lys Cys Gly Cys Ala Leu Cys Ala 1505 1508

【０１０２】配列番号９配列の長さ：５０９４配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡ to ｍＲＮＡ起源：生物名：ヒト組織の種類：脳配列の特徴特徴を表す記号：ＣＤＳ存在位置：２３３．．４８３４特徴を決定した方法：Ｓ特徴を表す記号：ｓｉｇｐｅｐｔｉｄｅ存在位置：２３３．．３１０特徴を決定した方法：Ｓ特徴を表す記号：ｍａｔｐｅｐｔｉｄｅ存在位置：３１１．．４８３４特徴を決定した方法：Ｓ配列 GCGAAACGGC AGAGGAGCCG AGCCCCCTCC GCCCAAGGCG CCCTCCCTCC GTCCGCGCAC 60 AGGCGCCGTC GCTTGGAGGA GCAAGGTGCC TCCCAGCCCG CAGGGGCGCC GCGCGCAAGC 120 CCGCGGGCTC TTCGGTGGCT CTGCCCCGGG ACTGCACCTG GAGGCGGCCC CGGACGGGGA 180 TGGTCAGCGG CTGCTGCCGT CTGGCTCGCG AGCGGGACGC TGTGAGGGCA CC 232 ATG GCG CTG ACT CCC GGG TGG GGG TCC TCG GCG 265 Met Ala Leu Thr Pro Gly Trp Gly Ser Ser Ala -26 -25 -20 GGG CCG GTC CGG CCG GAG CTC TGG CTG CTG CTG TGG GCA GCC GCG 310 Gly Pro Val Arg Pro Glu Leu Trp Leu Leu Leu Trp Ala Ala Ala -15 -10 -5 TGG CGC CTG GGT GCC TCG GCG TGC CCC GCC CTC TGC ACC TGC ACC 355 Trp Arg Leu Gly Ala Ser Ala Cys Pro Ala Leu Cys Thr Cys Thr 1 5 10 15 GGA ACC ACG GTG GAC TGC CAC GGC ACG GGG CTG CAG GCC ATT CCC 400 Gly Thr Thr Val Asp Cys His Gly Thr Gly Leu Gln Ala Ile Pro 20 25 30 AAG AAT ATA CCT CGG AAC ACC GAG CGC CTG GAA CTC AAT GGC AAC 445 Lys Asn Ile Pro Arg Asn Thr Glu Arg Leu Glu Leu Asn Gly Asn 35 40 45 AAC ATC ACT CGG ATC CAT AAG AAT GAC TTT GCG GGG CTC AAG CAG 490 Asn Ile Thr Arg Ile His Lys Asn Asp Phe Ala Gly Leu Lys Gln 50 55 60 CTG CGG GTG CTG CAG CTG ATG GAG AAC CAG ATT GGA GCA GTG GAA 535 Leu Arg Val Leu Gln Leu Met Glu Asn Gln Ile Gly Ala Val Glu 65 70 75 CGT GGT GCT TTT GAT GAC ATG AAG GAG CTG GAG CGG CTG CGA CTG 580 Arg Gly Ala Phe Asp Asp Met Lys Glu Leu Glu Arg Leu Arg Leu 80 85 90 AAC CGA AAC CAG CTG CAC ATG TTA CCG GAA CTG CTG TTC CAG AAC 625 Asn Arg Asn Gln Leu His Met Leu Pro Glu Leu Leu Phe Gln Asn 95 100 105 AAC CAG GCT TTG TCA AGA CTG GAC TTG AGT GAG AAC GCC ATC CAG 670 Asn Gln Ala Leu Ser Arg Leu Asp Leu Ser Glu Asn Ala Ile Gln 110 115 120 GCC ATC CCC AGG AAA GCT TTT CGG GGA GCT ACG GAC CTT AAA AAT 715 Ala Ile Pro Arg Lys Ala Phe Arg Gly Ala Thr Asp Leu Lys Asn 125 130 135 TTA CGG CTG GAC AAG AAC CAG ATC AGC TGC ATT GAG GAA GGG GCC 760 Leu Arg Leu Asp Lys Asn Gln Ile Ser Cys Ile Glu Glu Gly Ala 140 145 150 TTC CGT GCT CTG CGG GGG CTG GAG GTG CTG ACC CTG AAC AAC AAC 805 Phe Arg Ala Leu Arg Gly Leu Glu Val Leu Thr Leu Asn Asn Asn 155 160 165 AAT ATC ACC ACC ATC CCC GTG TCC AGC TTC AAC CAT ATG CCC AAG 850 Asn Ile Thr Thr Ile Pro Val Ser Ser Phe Asn His Met Pro Lys 170 175 180 CTA CGG ACC TTC CGC CTG CAC TCC AAC CAC CTG TTT TGC GAC TGC 895 Leu Arg Thr Phe Arg Leu His Ser Asn His Leu Phe Cys Asp Cys 185 190 195 CAC CTG GCC TGG CTC TCG CAG TGG CTG AGG CAG CGG CCA ACC ATC 940 His Leu Ala Trp Leu Ser Gln Trp Leu Arg Gln Arg Pro Thr Ile 200 205 210 GGG CTC TTC ACC CAG TGC TCG GGC CCA GCC AGC CTG CGT GGC CTC 985 Gly Leu Phe Thr Gln Cys Ser Gly Pro Ala Ser Leu Arg Gly Leu 215 220 225 AAT GTG GCA GAG GTC CAG AAG AGT GAG TTC AGC TGC TCA GGC CAG 1030 Asn Val Ala Glu Val Gln Lys Ser Glu Phe Ser Cys Ser Gly Gln 230 235 240 GGA GAA GCG GGG CGC GTG CCC ACC TGC ACC CTG TCC TCC GGC TCC 1075 Gly Glu Ala Gly Arg Val Pro Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gly Ser 245 250 255 TGC CCG GCC ATG TGC ACC TGC AGC AAT GGC ATC GTG GAC TGT CGT 1120 Cys Pro Ala Met Cys Thr Cys Ser Asn Gly Ile Val Asp Cys Arg 260 265 270 GGA AAA GGC CTC ACT GCC ATC CCG GCC AAC CTG CCC GAG ACC ATG 1165 Gly Lys Gly Leu Thr Ala Ile Pro Ala Asn Leu Pro Glu Thr Met 275 280 285 ACG GAG ATA CGC CTG GAG CTG AAC GGC ATC AAG TCC ATC CCT CCT 1210 Thr Glu Ile Arg Leu Glu Leu Asn Gly Ile Lys Ser Ile Pro Pro 290 295 300 GGA GCC TTC TCA CCC TAC AGA AAG CTA CGG AGG ATA GAC CTG AGC 1255 Gly Ala Phe Ser Pro Tyr Arg Lys Leu Arg Arg Ile Asp Leu Ser 305 310 315 AAC AAT CAG ATC GCT GAG ATT GCA CCC GAC GCC TTC CAG GGC CTC 1300 Asn Asn Gln Ile Ala Glu Ile Ala Pro Asp Ala Phe Gln Gly Leu 320 325 330 CGC TCC CTG AAC TCG CTG GTC CTC TAT GGA AAC AAG ATC ACA GAC 1345 Arg Ser Leu Asn Ser Leu Val Leu Tyr Gly Asn Lys Ile Thr Asp 335 340 345 CTC CCC CGT GGT GTG TTT GGA GGC CTA TAC ACC CTA CAG CTC CTG 1390 Leu Pro Arg Gly Val Phe Gly Gly Leu Tyr Thr Leu Gln Leu Leu 350 355 360 CTC CTG AAT GCC AAC AAG ATC AAC TGC ATC CGG CCC GAT GCC TTC 1435 Leu Leu Asn Ala Asn Lys Ile Asn Cys Ile Arg Pro Asp Ala Phe 365 370 375 CAG GAC CTG CAG AAC CTC TCA CTG CTC TCC CTG TAT GAC AAC AAG 1480 Gln Asp Leu Gln Asn Leu Ser Leu Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Lys 380 385 390 ATC CAG AGC CTC GCC AAG GGC ACT TTC ACC TCC CtG CGG GCC ATC 1525 Ile Gln Ser Leu Ala Lys Gly Thr Phe Thr Ser Leu Arg Ala Ile 395 400 405 CAG ACT CTG CAC CTG GCC CAG AAC CCT TTC ATT TGC GAC TGT AAC 1570 Gln Thr Leu His Leu Ala Gln Asn Pro Phe Ile Cys Asp Cys Asn 410 415 420 CTC AAG TGG CTG GCA GAC TTC CTG CGC ACC AAT CCC ATC GAG ACG 1615 Leu Lys Trp Leu Ala Asp Phe Leu Arg Thr Asn Pro Ile Glu Thr 425 430 435 AGT GGT GCC CGC TGT GCC AGT CCC CGG CGC CTC GCC AAC AAG CGC 1660 Ser Gly Ala Arg Cys Ala Ser Pro Arg Arg Leu Ala Asn Lys Arg 440 445 450 ATC GGG CAG ATC AAG AGC AAG AAG TTC CGG TGC TCA GCC AAA GAG 1705 Ile Gly Gln Ile Lys Ser Lys Lys Phe Arg Cys Ser Ala Lys Glu 455 460 465 CAG TAC TTC ATT CCA GGC ACG GAG GAT TAC CAG CTG AAC AGC GAG 1750 Gln Tyr Phe Ile Pro Gly Thr Glu Asp Tyr Gln Leu Asn Ser Glu 470 475 480 TGC AAC AGC GAC GTG GTC TGT CCC CAC AAG TGC CGC TGT GAG GCC 1795 Cys Asn Ser Asp Val Val Cys Pro His Lys Cys Arg Cys Glu Ala 485 490 495 AAC GTG GTG GAG TGC TCC AGC CTG AAG CTC ACC AAG ATC CCT GAG 1840 Asn Val Val Glu Cys Ser Ser Leu Lys Leu Thr Lys Ile Pro Glu 500 505 510 CGC ATC CCC CAG TCC ACG GCA GAA CTG CGA TTG AAT AAC AAT GAG 1885 Arg Ile Pro Gln Ser Thr Ala Glu Leu Arg Leu Asn Asn Asn Glu 515 520 525 ATT TCC ATC CTG GAG GCC ACT GGG ATG TTT AAA AAA CTT ACA CAT 1930 Ile Ser Ile Leu Glu Ala Thr Gly Met Phe Lys Lys Leu Thr His 530 535 540 CTG AAG AAA ATC AAT CTG AGC AAC AAC AAG GTG TCA GAA ATT GAA 1975 Leu Lys Lys Ile Asn Leu Ser Asn Asn Lys Val Ser Glu Ile Glu 545 550 555 GAT GGG GCC TTC GAG GGC GCA GCC TCT GTG AGC GAG CTG CAC CTA 2020 Asp Gly Ala Phe Glu Gly Ala Ala Ser Val Ser Glu Leu His Leu 560 565 570 ACT GCC AAC CAG CTG GAG TCC ATC CGG AGC GGC ATG TTC CGG GGT 2065 Thr Ala Asn Gln Leu Glu Ser Ile Arg Ser Gly Met Phe Arg Gly 575 580 585 CTG GAT GGC TTG AGG ACC CTA ATG CTG CGG AAC AAC CGC ATC AGC 2110 Leu Asp Gly Leu Arg Thr Leu Met Leu Arg Asn Asn Arg Ile Ser 590 595 600 TGC ATC CAC AAC GAC AGC TTC ACG GGC CTG CGC AAC GTC CGG CTC 2155 Cys Ile His Asn Asp Ser Phe Thr Gly Leu Arg Asn Val Arg Leu 605 610 615 CTC TCG CTC TAC GAC AAC CAG ATC ACC ACC GTA TCC CCA GGA GCC 2200 Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Gln Ile Thr Thr Val Ser Pro Gly Ala 620 625 630 TTC GAC ACC CTC CAG TCC CTC TCC ACA CTG AAT CTC CTG GCC AAC 2245 Phe Asp Thr Leu Gln Ser Leu Ser Thr Leu Asn Leu Leu Ala Asn 635 640 645 CCT TTC AAC TGC AAC TGC CAG CTG GCC TGG CTA GGA GGC TGG CTA 2290 Pro Phe Asn Cys Asn Cys Gln Leu Ala Trp Leu Gly Gly Trp Leu 650 655 660 CGG AAG CGC AAG ATC GTG ACG GGG AAC CCG CGA TGC CAG AAC CCT 2335 Arg Lys Arg Lys Ile Val Thr Gly Asn Pro Arg Cys Gln Asn Pro 665 670 675 GAC TTT TTG CGG CAG ATT CCC CTG CAG GAC GTG GCC TTC CCT GAC 2380 Asp Phe Leu Arg Gln Ile Pro Leu Gln Asp Val Ala Phe Pro Asp 680 685 690 TTC AGG TGT GAG GAA GGC CAG GAG GAG GGG GGC TGC CTG CCC CGC 2425 Phe Arg Cys Glu Glu Gly Gln Glu Glu Gly Gly Cys Leu Pro Arg 695 700 705 CCA CAG TGC CCA CAG GAG TGC GCC TGC CTG GAC ACC GTG GTC CGA 2470 Pro Gln Cys Pro Gln Glu Cys Ala Cys Leu Asp Thr Val Val Arg 710 715 720 TGC AGC AAC AAG CAC CTG CGG GCC CTG CCC AAG GGC ATT CCC AAG 2515 Cys Ser Asn Lys His Leu Arg Ala Leu Pro Lys Gly Ile Pro Lys 725 730 735 AAT GTC ACA GAA CTC TAT TTG GAC GGG AAC CAG TTC ACG CTG GTT 2560 Asn Val Thr Glu Leu Tyr Leu Asp Gly Asn Gln Phe Thr Leu Val 740 745 750 CCG GGA CAG CTG TCT ACC TTC AAG TAC CTG CAG CTC GTG GAC CTG 2605 Pro Gly Gln Leu Ser Thr Phe Lys Tyr Leu Gln Leu Val Asp Leu 755 760 765 AGC AAC AAC AAG ATC AGT TCC TTA AGC AAT TCC TCC TTC ACC AAC 2650 Ser Asn Asn Lys Ile Ser Ser Leu Ser Asn Ser Ser Phe Thr Asn 770 775 780 ATG AGC CAG CTG ACC ACT CTG ATC CTC AGC TAC AAT GCC CTG CAG 2695 Met Ser Gln Leu Thr Thr Leu Ile Leu Ser Tyr Asn Ala Leu Gln 785 790 795 TGC ATC CCG CCT TTG GCC TTC CAG GGA CTC CGC TCC CTG CGC CTG 2740 Cys Ile Pro Pro Leu Ala Phe Gln Gly Leu Arg Ser Leu Arg Leu 800 805 810 CTG TCT CTC CAC GGC AAT GAC ATC TCC ACC CTC CAA GAG GGC ATC 2785 Leu Ser Leu His Gly Asn Asp Ile Ser Thr Leu Gln Glu Gly Ile 815 820 825 TTT GCA GAC GTG ACC TCC CTG TCT CAC CTG GCC ATT GGT GCC AAC 2830 Phe Ala Asp Val Thr Ser Leu Ser His Leu Ala Ile Gly Ala Asn 830 835 840 CCC CTA TAC TGT GAC TGC CAC CTC CGC TGG CTG TCC AGC TGG GTG 2875 Pro Leu Tyr Cys Asp Cys His Leu Arg Trp Leu Ser Ser Trp Val 845 850 855 AAG ACT GGC TAC AAG GAA CCG GGC ATT GCT CGT TGT GCT GGG CCC 2920 Lys Thr Gly Tyr Lys Glu Pro Gly Ile Ala Arg Cys Ala Gly Pro 860 865 870 CAG GAC ATG GAG GGC AAG CTG CTC CTC ACC ACG CCT GCC AAG AAG 2965 Gln Asp Met Glu Gly Lys Leu Leu Leu Thr Thr Pro Ala Lys Lys 875 880 885 TTT GAA TGC CAA GGT CCT CCA ACG CTG GCT GTC CAG GCC AAG TGT 3010 Phe Glu Cys Gln Gly Pro Pro Thr Leu Ala Val Gln Ala Lys Cys 890 895 900 GAT CTC TGC TTG TCC AGT CCG TGC CAG AAC CAG GGC ACC TGC CAC 3055 Asp Leu Cys Leu Ser Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Thr Cys His 905 910 915 AAC GAC CCC CTT GAG GTG TAC AGG TGC GCC TGC CCC AGC GGC TAT 3100 Asn Asp Pro Leu Glu Val Tyr Arg Cys Ala Cys Pro Ser Gly Tyr 920 925 930 AAG GGT CGA GAC TGT GAG GTG TCC CTG AAC AGC TGT TCC AGT GGC 3145 Lys Gly Arg Asp Cys Glu Val Ser Leu Asn Ser Cys Ser Ser Gly 935 940 945 CCC TGT GAA AAT GGG GGC ACC TGC CAT GCA CAG GAG GGC GAG GAT 3190 Pro Cys Glu Asn Gly Gly Thr Cys His Ala Gln Glu Gly Glu Asp 950 955 960 GCC CCG TTC ACG TGC TCC TGT CCC ACC GGC TTT GAA GGA CCA ACC 3235 Ala Pro Phe Thr Cys Ser Cys Pro Thr Gly Phe Glu Gly Pro Thr 965 970 975 TGT GGG GTG AAC ACA GAT GAC TGT GTG GAT CAT GCC TGT GCC AAT 3280 Cys Gly Val Asn Thr Asp Asp Cys Val Asp His Ala Cys Ala Asn 980 985 990 GGG GGC GTC TGT GTG GAT GGT GTG GGC AAC TAC ACC TGC CAG TGC 3325 Gly Gly Val Cys Val Asp Gly Val Gly Asn Tyr Thr Cys Gln Cys 995 1000 1005 CCC CTG CAG TAT GAG GGA AAG GCC TGT GAG CAG CTG GTG GAC TTG 3370 Pro Leu Gln Tyr Glu Gly Lys Ala Cys Glu Gln Leu Val Asp Leu 1010 1015 1020 TGC TCT CCG GAT CTG AAC CCA TGT CAA CAC GAG GCC CAG TGT GTG 3415 Cys Ser Pro Asp Leu Asn Pro Cys Gln His Glu Ala Gln Cys Val 1025 1030 1035 GGC ACC CCG GAT GGG CCC AGG TGT GAG TGC ATG CCA GGT TAT GCA 3460 Gly Thr Pro Asp Gly Pro Arg Cys Glu Cys Met Pro Gly Tyr Ala 1040 1045 1050 GGT GAC AAC TGC AGT GAG AAC CAG GAT GAC TGC AGG GAC CAC CGC 3505 Gly Asp Asn Cys Ser Glu Asn Gln Asp Asp Cys Arg Asp His Arg 1055 1060 1065 TGC CAG AAT GGG GCC CAG TGT ATG GAT GAA GTC AAC AGC TAC TCC 3550 Cys Gln Asn Gly Ala Gln Cys Met Asp Glu Val Asn Ser Tyr Ser 1070 1075 1080 TGC CTC TGT GCT GAG GGC TAC AGT GGA CAG CTC TGT GAG ATC CCT 3595 Cys Leu Cys Ala Glu Gly Tyr Ser Gly Gln Leu Cys Glu Ile Pro 1085 1090 1095 CCC CAT CTG CCT GCC CCC AAG AGC CCC TGT GAG GGG ACT GAG TGC 3640 Pro His Leu Pro Ala Pro Lys Ser Pro Cys Glu Gly Thr Glu Cys 1100 1105 1110 CAG AAT GGG GCC AAC TGT GTG GAC CAG GGC AAC AGG CCT GTG TGC 3685 Gln Asn Gly Ala Asn Cys Val Asp Gln Gly Asn Arg Pro Val Cys 1115 1120 1125 CAG TGC CTC CCA GGC TTC GGT GGC CCT GAG TGT GAG AAG TTG CTC 3730 Gln Cys Leu Pro Gly Phe Gly Gly Pro Glu Cys Glu Lys Leu Leu 1130 1135 1140 AGT GTC AAC TTT GTG GAT CGG GAC ACT TAC CTG CAG TTC ACT GAC 3775 Ser Val Asn Phe Val Asp Arg Asp Thr Tyr Leu Gln Phe Thr Asp 1145 1150 1155 CTG CAA AAC TGG CCA CGG GCC AAC ATC ACG TTG CAG GTC TCC ACG 3820 Leu Gln Asn Trp Pro Arg Ala Asn Ile Thr Leu Gln Val Ser Thr 1160 1165 1170 GCA GAG GAC AAT GGG ATC CTT CTG TAC AAC GGG GAC AAC GAC CAC 3865 Ala Glu Asp Asn Gly Ile Leu Leu Tyr Asn Gly Asp Asn Asp His 1175 1180 1185 ATT GCA GTT GAG CTG TAC CAG GGC CAT GTG CGT GTC AGC TAC GAC 3910 Ile Ala Val Glu Leu Tyr Gln Gly His Val Arg Val Ser Tyr Asp 1190 1195 1200 CCA GGC AGC TAC CCC AGC TCT GCC ATC TAC AGT GCT GAG ACG ATC 3955 Pro Gly Ser Tyr Pro Ser Ser Ala Ile Tyr Ser Ala Glu Thr Ile 1205 1210 1215 AAC GAT GGG CAA TTC CAC ACC GTT GAG CTG GTT GCC TTT GAC CAG 4000 Asn Asp Gly Gln Phe His Thr Val Glu Leu Val Ala Phe Asp Gln 1220 1225 1230 ATG GTG AAT CTC TCC ATT GAT GGC GGG AGC CCC ATG ACC ATG GAC 4045 Met Val Asn Leu Ser Ile Asp Gly Gly Ser Pro Met Thr Met Asp 1235 1240 1245 AAC TTT GGC AAA CAT TAC ACG CTC AAC AGC GAG GCG CCA CTC TAT 4090 Asn Phe Gly Lys His Tyr Thr Leu Asn Ser Glu Ala Pro Leu Tyr 1250 1255 1260 GTG GGA GGG ATG CCC GTG GAT GTC AAC TCA GCT GCC TTC CGC CTG 4135 Val Gly Gly Met Pro Val Asp Val Asn Ser Ala Ala Phe Arg Leu 1265 1270 1275 TGG CAG ATC CTC AAC GGC ACC GGC TTC CAC GGT TGC ATC CGA AAC 4180 Trp Gln Ile Leu Asn Gly Thr Gly Phe His Gly Cys Ile Arg Asn 1280 1285 1290 CTG TAC ATC AAC AAC GAG CTG CAG GAC TTC ACC AAG ACG CAG ATG 4225 Leu Tyr Ile Asn Asn Glu Leu Gln Asp Phe Thr Lys Thr Gln Met 1295 1300 1305 AAG CCA GGC GTG GTG CCA GGC TGC GAA CCC TGC CGC AAG CTC TAC 4270 Lys Pro Gly Val Val Pro Gly Cys Glu Pro Cys Arg Lys Leu Tyr 1310 1315 1320 TGC CTG CAT GGC ATC TGC CAG CCC AAT GCC ACC CCA GGG CCC ATG 4315 Cys Leu His Gly Ile Cys Gln Pro Asn Ala Thr Pro Gly Pro Met 1325 1330 1335 TGC CAC TGC GAG GCT GGC TGG GTG GGC CTG CAC TGT GAC CAG CCC 4360 Cys His Cys Glu Ala Gly Trp Val Gly Leu His Cys Asp Gln Pro 1340 1345 1350 GCT GAC GGC CCC TGC CAT GGC CAC AAG TGT GTC CAT GGG CAA TGC 4405 Ala Asp Gly Pro Cys His Gly His Lys Cys Val His Gly Gln Cys 1355 1360 1365 GTG CCC CTC GAC GCT CTT TCC TAC AGC TGC CAG TGC CAG GAT GGG 4450 Val Pro Leu Asp Ala Leu Ser Tyr Ser Cys Gln Cys Gln Asp Gly 1370 1375 1380 TAC TCG GGG GCA CTG TGC AAC CAG GCC GGG GCC CTG GCA GAG CCC 4495 Tyr Ser Gly Ala Leu Cys Asn Gln Ala Gly Ala Leu Ala Glu Pro 1385 1390 1395 TGC AGA GGC CTG CAG TGC CTG CAT GGC CAC TGC CAG GCC TCA GGC 4540 Cys Arg Gly Leu Gln Cys Leu His Gly His Cys Gln Ala Ser Gly 1400 1405 1410 ACC AAG GGG GCA CAC TGT GTG TGT GAC CCC GGC TTT TCG GGC GAG 4585 Thr Lys Gly Ala His Cys Val Cys Asp Pro Gly Phe Ser Gly Glu 1415 1420 1425 CTG TGT GAG CAA GAG TCC GAG TGC CGG GGG GAC CCT GTC CGG GAC 4630 Leu Cys Glu Gln Glu Ser Glu Cys Arg Gly Asp Pro Val Arg Asp 1430 1345 1440 TTT CAC CAG GTC CAG AGG GGC TAT GCC ATC TGC CAG ACC ACG CGC 4675 Phe His Gln Val Gln Arg Gly Tyr Ala Ile Cys Gln Thr Thr Arg 1445 1450 1455 CCC CTG TCA TGG GTG GAG TGC CGG GGC TCG TGC CCA GGC CAG GGC 4720 Pro Leu Ser Trp Val Glu Cys Arg Gly Ser Cys Pro Gly Gln Gly 1460 1465 1470 TGC TGC CAG GGC CTT CGG CTG AAG CGG AGG AAG TTC ACC TTT GAG 4765 Cys Cys Gln Gly Leu Arg Leu Lys Arg Arg Lys Phe Thr Phe Glu 1475 1480 1485 TGC AGC GAT GGG ACC TCT TTT GCC GAG GAG GTG GAA AAG CCC ACC 4810 Cys Ser Asp Gly Thr Ser Phe Ala Glu Glu Val Glu Lys Pro Thr 1490 1495 1500 AAG TGT GGC TGT GCC CTC TGC GCA TAGCGC TGGGCGTGGA CAGGCCGGTG 4860 Lys Cys Gly Cys Ala Leu Cys Ala 1505 1508 AGGGCGGGCA AGGGGCCCCA GCCGCTGCAG CAGCGGAGAC AGTCGCCAGC AGCTGGGCTG 4920 GGGTGCAGGT CATCACAGGA CGGCTCCTGG GCAGCTGGGC CCTCCTGGGT GGGGTGGTGC 4980 CAGAGCAGCC TTTTAAAAGC AAATTGCGCC ATAGCTGGGG GCAGCGGGGG TGGGCGAGGC 5040 CTGAGCTGCG GGCTGCCCTC TCCGGAAGTC CTTGCACAAA TAGGCGCTTA ATAA 5094

【０１０３】配列番号１０配列の長さ：１５３４配列の型：アミノ酸トポロジー：不明配列の種類：タンパク質起源生物名：ヒト配列 Met Ala Leu Thr Pro Gly Trp Gly Ser Ser Ala -26 -25 -20 Gly Pro Val Arg Pro Glu Leu Trp Leu Leu Leu Trp Ala Ala Ala -15 -10 -5 Trp Arg Leu Gly Ala Ser Ala Cys Pro Ala Leu Cys Thr Cys Thr 1 5 10 15 Gly Thr Thr Val Asp Cys His Gly Thr Gly Leu Gln Ala Ile Pro 20 25 30 Lys Asn Ile Pro Arg Asn Thr Glu Arg Leu Glu Leu Asn Gly Asn 35 40 45 Asn Ile Thr Arg Ile His Lys Asn Asp Phe Ala Gly Leu Lys Gln 50 55 60 Leu Arg Val Leu Gln Leu Met Glu Asn Gln Ile Gly Ala Val Glu 65 70 75 Arg Gly Ala Phe Asp Asp Met Lys Glu Leu Glu Arg Leu Arg Leu 80 85 90 Asn Arg Asn Gln Leu His Met Leu Pro Glu Leu Leu Phe Gln Asn 95 100 105 Asn Gln Ala Leu Ser Arg Leu Asp Leu Ser Glu Asn Ala Ile Gln 110 115 120 Ala Ile Pro Arg Lys Ala Phe Arg Gly Ala Thr Asp Leu Lys Asn 125 130 135 Leu Arg Leu Asp Lys Asn Gln Ile Ser Cys Ile Glu Glu Gly Ala 140 145 150 Phe Arg Ala Leu Arg Gly Leu Glu Val Leu Thr Leu Asn Asn Asn 155 160 165 Asn Ile Thr Thr Ile Pro Val Ser Ser Phe Asn His Met Pro Lys 170 175 180 Leu Arg Thr Phe Arg Leu His Ser Asn His Leu Phe Cys Asp Cys 185 190 195 His Leu Ala Trp Leu Ser Gln Trp Leu Arg Gln Arg Pro Thr Ile 200 205 210 Glu Leu Phe Thr Gln Cys Ser Gly Pro Ala Ser Leu Arg Gly Leu 215 220 225 Asn Val Ala Glu Val Gln Lys Ser Glu Phe Ser Cys Ser Gly Gln 230 235 240 Gly Glu Ala Gly Arg Val Pro Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gly Ser 245 250 255 Cys Pro Ala Met Cys Thr Cys Ser Asn Gly Ile Val Asp Cys Arg 260 265 270 Gly Lys Gly Leu Thr Ala Ile Pro Ala Asn Leu Pro Glu Thr Met 275 280 285 Thr Glu Ile Arg Leu Glu Leu Asn Gly Ile Lys Ser Ile Pro Pro 290 295 300 Gly Ala Phe Ser Pro Tyr Arg Lys Leu Arg Arg Ile Asp Leu Ser 305 310 315 Asn Asn Gln Ile Ala Glu Ile Ala Pro Asp Ala Phe Gln Gly Leu 320 325 330 Arg Ser Leu Asn Ser Leu Val Leu Tyr Gly Asn Lys Ile Thr Asp 335 340 345 Leu Pro Arg Gly Val Phe Gly Gly Leu Tyr Thr Leu Gln Leu Leu 350 355 360 Leu Leu Asn Ala Asn Lys Ile Asn Cys Ile Arg Pro Asp Ala Phe 365 370 375 Gln Asp Leu Gln Asn Leu Ser Leu Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Lys 380 385 390 Ile Gln Ser Leu Ala Lys Gly Thr Phe Thr Ser Leu Arg Ala Ile 395 400 405 Gln Thr Leu His Leu Ala Gln Asn Pro Phe Ile Cys Asp Cys Asn 410 415 420 Leu Lys Trp Leu Ala Asp Phe Leu Arg Thr Asn Pro Ile Glu Thr 425 430 435 Ser Gly Ala Arg Cys Ala Ser Pro Arg Arg Leu Ala Asn Lys Arg 440 445 450 Ile Gly Gln Ile Lys Ser Lys Lys Phe Arg Cys Ser Ala Lys Glu 455 460 465 Gln Tyr Phe Ile Pro Gly Thr Glu Asp Tyr Gln Leu Asn Ser Glu 470 475 480 Cys Asn Ser Asp Val Val Cys Pro His Lys Cys Arg Cys Glu Ala 485 490 495 Asn Val Val Glu Cys Ser Ser Leu Lys Leu Thr Lys Ile Pro Glu 500 505 510 Arg Ile Pro Gln Ser Thr Ala Glu Leu Arg Leu Asn Asn Asn Glu 515 520 525 Ile Ser Ile Leu Glu Ala Thr Gly Met Phe Lys Lys Leu Thr His 530 535 540 Leu Lys Lys Ile Asn Leu Ser Asn Asn Lys Val Ser Glu Ile Glu 545 550 555 Asp Gly Ala Phe Glu Gly Ala Ala Ser Val Ser Glu Leu His Leu 560 565 570 Thr Ala Asn Gln Leu Glu Ser Ile Arg Ser Gly Met Phe Arg Gly 575 580 585 Leu Asp Gly Leu Arg Thr Leu Met Leu Arg Asn Asn Arg Ile Ser 590 595 600 Cys Ile His Asn Asp Ser Phe Thr Gly Leu Arg Asn Val Arg Leu 605 610 615 Leu Ser Leu Tyr Asp Asn Gln Ile Thr Thr Val Ser Pro Gly Ala 620 625 630 Phe Asp Thr Leu Gln Ser Leu Ser Thr Leu Asn Leu Leu Ala Asn 635 640 645 Pro Phe Asn Cys Asn Cys Gln Leu Ala Trp Leu Gly Gly Trp Leu 650 655 660 Arg Lys Arg Lys Ile Val Thr Gly Asn Pro Arg Cys Gln Asn Pro 665 670 675 Asp Phe Leu Arg Gln Ile Pro Leu Gln Asp Val Ala Phe Pro Asp 680 685 690 Phe Arg Cys Glu Glu Gly Gln Glu Glu Gly Gly Cys Leu Pro Arg 695 700 705 Pro Gln Cys Pro Gln Glu Cys Ala Cys Leu Asp Thr Val Val Arg 710 715 720 Cys Ser Asn Lys His Leu Arg Ala Leu Pro Lys Gly Ile Pro Lys 725 730 735 Asn Val Thr Glu Leu Tyr Leu Asp Gly Asn Gln Phe Thr Leu Val 740 745 750 Pro Gly Gln Leu Ser Thr Phe Lys Tyr Leu Gln Leu Val Asp Leu 755 760 765 Ser Asn Asn Lys Ile Ser Ser Leu Ser Asn Ser Ser Phe Thr Asn 770 775 780 Met Ser Gln Leu Thr Thr Leu Ile Leu Ser Tyr Asn Ala Leu Gln 785 790 795 Cys Ile Pro Pro Leu Ala Phe Gln Gly Leu Arg Ser Leu Arg Leu 800 805 810 Leu Ser Leu His Gly Asn Asp Ile Ser Thr Leu Gln Glu Gly Ile 815 820 825 Phe Ala Asp Val Thr Ser Leu Ser His Leu Ala Ile Gly Ala Asn 830 835 840 Pro Leu Tyr Cys Asp Cys His Leu Arg Trp Leu Ser Ser Trp Val 845 850 855 Lys Thr Gly Tyr Lys Glu Pro Gly Ile Ala Arg Cys Ala Gly Pro 860 865 870 Gln Asp Met Glu Gly Lys Leu Leu Leu Thr Thr Pro Ala Lys Lys 875 880 885 Phe Glu Cys Gln Gly Pro Pro Thr Leu Ala Val Gln Ala Lys Cys 890 895 900 Asp Leu Cys Leu Ser Ser Pro Cys Gln Asn Gln Gly Thr Cys His 905 910 915 Asn Asp Pro Leu Glu Val Tyr Arg Cys Ala Cys Pro Ser Gly Tyr 920 925 930 Lys Gly Arg Asp Cys Glu Val Ser Leu Asn Ser Cys Ser Ser Gly 935 940 945 Pro Cys Glu Asn Gly Gly Thr Cys His Ala Gln Glu Gly Glu Asp 950 955 960 Ala Pro Phe Thr Cys Ser Cys Pro Thr Gly Phe Glu Gly Pro Thr 965 970 975 Cys Gly Val Asn Thr Asp Asp Cys Val Asp His Ala Cys Ala Asn 980 985 990 Gly Gly Val Cys Val Asp Gly Val Gly Asn Tyr Thr Cys Gln Cys 995 1000 1005 Pro Leu Gln Tyr Glu Gly Lys Ala Cys Glu Gln Leu Val Asp Leu 1010 1015 1020 Cys Ser Pro Asp Leu Asn Pro Cys Gln His Glu Ala Gln Cys Val 1025 1030 1035 Gly Thr Pro Asp Gly Pro Arg Cys Glu Cys Met Pro Gly Tyr Ala 1040 1045 1050 Gly Asp Asn Cys Ser Glu Asn Gln Asp Asp Cys Arg Asp His Arg 1055 1060 1065 Cys Gln Asn Gly Ala Gln Cys Met Asp Glu Val Asn Ser Tyr Ser 1070 1075 1080 Cys Leu Cys Ala Glu Gly Tyr Ser Gly Gln Leu Cys Glu Ile Pro 1085 1090 1095 Pro His Leu Pro Ala Pro Lys Ser Pro Cys Glu Gly Thr Glu Cys 1100 1105 1110 Gln Asn Gly Ala Asn Cys Val Asp Gln Gly Asn Arg Pro Val Cys 1115 1120 1125 Gln Cys Leu Pro Gly Phe Gly Gly Pro Glu Cys Glu Lys Leu Leu 1130 1135 1140 Ser Val Asn Phe Val Asp Arg Asp Thr Tyr Leu Gln Phe Thr Asp 1145 1150 1155 Leu Gln Asn Trp Pro Arg Ala Asn Ile Thr Leu Gln Val Ser Thr 1160 1165 1170 Ala Glu Asp Asn Gly Ile Leu Leu Tyr Asn Gly Asp Asn Asp His 1175 1180 1185 Ile Ala Val Glu Leu Tyr Gln Gly His Val Arg Val Ser Tyr Asp 1190 1195 1200 Pro Gly Ser Tyr Pro Ser Ser Ala Ile Tyr Ser Ala Glu Thr Ile 1205 1210 1215 Asn Asp Gly Gln Phe His Thr Val Glu Leu Val Ala Phe Asp Gln 1220 1225 1230 Met Val Asn Leu Ser Ile Asp Gly Gly Ser Pro Met Thr Met Asp 1235 1240 1245 Asn Phe Gly Lys His Tyr Thr Leu Asn Ser Glu Ala Pro Leu Tyr 1250 1255 1260 Val Gly Gly Met Pro Val Asp Val Asn Ser Ala Ala Phe Arg Leu 1265 1270 1275 Trp Gln Ile Leu Asn Gly Thr Gly Phe His Gly Cys Ile Arg Asn 1280 1285 1290 Leu Tyr Ile Asn Asn Glu Leu Gln Asp Phe Thr Lys Thr Gln Met 1295 1300 1305 Lys Pro Gly Val Val Pro Gly Cys Glu Pro Cys Arg Lys Leu Tyr 1310 1315 1320 Cys Leu His Gly Ile Cys Gln Pro Asn Ala Thr Pro Gly Pro Met 1325 1330 1335 Cys His Cys Glu Ala Gly Trp Val Gly Leu His Cys Asp Gln Pro 1340 1345 1350 Ala Asp Gly Pro Cys His Gly His Lys Cys Val His Gly Gln Cys 1355 1360 1365 Val Pro Leu Asp Ala Leu Ser Tyr Ser Cys Gln Cys Gln Asp Gly 1370 1375 1380 Tyr Ser Gly Ala Leu Cys Asn Gln Ala Gly Ala Leu Ala Glu Pro 1385 1390 1395 Cys Arg Gly Leu Gln Cys Leu His Gly His Cys Gln Ala Ser Gly 1400 1405 1410 Thr Lys Gly Ala His Cys Val Cys Asp Pro Gly Phe Ser Gly Glu 1415 1420 1425 Leu Cys Glu Gln Glu Ser Glu Cys Arg Gly Asp Pro Val Arg Asp 1430 1345 1440 Phe His Gln Val Gln Arg Gly Tyr Ala Ile Cys Gln Thr Thr Arg 1445 1450 1455 Pro Leu Ser Trp Val Glu Cys Arg Gly Ser Cys Pro Gly Gln Gly 1460 1465 1470 Cys Cys Gln Gly Leu Arg Leu Lys Arg Arg Lys Phe Thr Phe Glu 1475 1480 1485 Cys Ser Asp Gly Thr Ser Phe Ala Glu Glu Val Glu Lys Pro Thr 1490 1495 1500 Lys Cys Gly Cys Ala Leu Cys Ala 1505 1508

【０１０４】配列番号１１配列の長さ：１２配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA to mRNA 起源生物名：ヒト組織の種類：胎児肺配列 GATGAGGAAG AA 12 配列番号１２配列の長さ：４配列の型：アミノ酸トポロジー：不明配列の種類：ペプチドフラグメント型：中間部フラグメント起源生物名：ヒト組織の種類：胎児肺配列番号１３配列の長さ：２０配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 AAGTCAACAG CTACTCCTGC 20 配列番号１４配列の長さ：２０配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 TGAACTGCAG GTAAGTGTCC 20

【０１０５】配列番号１５配列の長さ：２０配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 CAGAGTCTCT CTTTGTCCGT 20 配列番号１６配列の長さ：２６配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 CTCGAGTTAG GACACACACC TCGTAC 26 配列番号１７配列の長さ：２０配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 GGTGGCAGTC ACAATACAGG 20 配列番号１８配列の長さ：２６配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 GGATCCGGGA AAGATGCGCG GCGTTG 26 配列番号１９配列の長さ：２０配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 GCGATCAAGT GCAAGCATGG 20

【０１０６】配列番号２０配列の長さ：２０配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 CCGCACTTCA CCACTTTCTC 20 配列番号２１配列の長さ：９配列の型：アミノ酸トポロジー：不明配列の種類：ペプチド配列番号２２配列の長さ：３３配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 ATCTTTATAA TCCGCCTGCG GTGCCACCTT GTT 33 配列番号２３配列の長さ：３６配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：他の核酸、合成ＤＮＡ配列 GATGATGATA AAGCGTGCCC GGCGCAGTGC TCTTGC 36 配列番号２４配列の長さ：２７配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA to mRNA 配列 GCGGATTATA AAGATGATGA TGATAAA 27

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ０７Ｋ 14/47 Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＡＡ 16/18 ＡＢＪＣ１２Ｎ 5/10 ＡＥＤＣ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｎ 5/00 Ｂ //(Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡＣ１２Ｒ 1:91） (Ｃ１２Ｎ 5/10 Ｃ１２Ｒ 1:91） (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:91）

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】配列表の配列番号１に記載のアミノ酸配
列を含有するポリペプチドまたはその変異体であるポリ
ペプチド。
【請求項２】請求項１に記載のポリペプチドをコード
するＤＮＡ。
【請求項３】請求項２に記載のＤＮＡが配列番号２に
記載の塩基配列の２８３番から４７９１番を含有するＤ
ＮＡ。
【請求項４】請求項２に記載のＤＮＡと、宿主細胞中
で発現可能なベクターＤＮＡとを連結してなる組換えＤ
ＮＡ体。
【請求項５】請求項４に記載の組換えＤＮＡ体により
形質転換された細胞。
【請求項６】請求項４に記載の組み換えＤＮＡ体を用
いて作製された当該アミノ酸配列を含有するポリペプチ
ドの生産方法。
【請求項７】請求項１に記載のポリペプチドを特異的
に認識する抗体。