JPH11158790A - リグニン、リグニン含有材料又は類似材料を変化させ、分解し又は漂白するための多成分系及びリグニン含有材料の脱リグニン化方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 従来技術の欠点を有しない、リグニン含有材
料を変化させ、分解し又は漂白するための多成分系及び
その使用法。 【解決手段】 オキシドレダクターゼ、オキシドレダク
ターゼにとって適当な酸化剤、媒介剤及び少なくとも１
種の酵素活性添加剤を含有する前記多成分系において、
媒介剤がオキシドレダクターゼ及び酵素活性添加剤を不
活性化せずかつ酵素添加剤がＥＣ３．２．１のヒドロラ
ーゼの群から選択されている。このような多成分系を用
いて脱リグニン化を行なう（使用法）。 【効果】 脱リグニン化度が増大する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、リグニン、リグニ
ン含有材料を変化させ、分解し又は漂白するための多成
分系ならびにその使用方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】セルロースを製造するためのすべての方
法の主要目的は、植物性出発材料からリグニンを除去す
ることである。この目的は、代表的には、リグニンがセ
ルロース生成物から容易に抽出させうるように、リグニ
ンを最終的に変性する適当な酸化又は還元的な化学的工
程を適用することによって達成される。化学的工程にお
いては通常塩素又は塩素含有薬品、例えば次亜塩素酸塩
又は塩素二酸化物を使用する。

【０００３】最近は、このような塩素含有化合物の代り
に又は同化合物の補助として塩素不含の薬品を使用す
る。このような薬品には、例えば酸素、過酸化水素、ペ
ルオキシ酸又はオゾンが包含される。加工すべきセルロ
ースは代表的には種々の化学的処理の間に、アルカリ、
例えばＮａＯＨを含有する抽出工程を受ける。

【０００４】リグニンの化学的除去方法における補足的
な塩素不含の方法工程としては、多段階の脱リグニン化
−及び漂白連続工程（Sequenz）においてリグニンの化
学的除去を容易にしようとする酵素的方法が知られてい
る。この方法工程は、化学的方法工程と一段的又は多段
的に連続的に組合せて行うことができる（ＷＯ ９１／
１１５５３）。この方法工程は利点としては、得られる
白色度の改良又は薬品必要量、特に使用される塩素量の
減少が挙げられる。

【０００５】またＥＰ ０４８７５５７からは、酸素を
用いる化学的脱リグニン化法の場合にさらに個々の酵素
又は使用されたクラスからの酵素の混合物を使用するこ
とが公知である。これは例えば、種々のヘミセルラーゼ
を含有する酵素製剤である。

【０００６】ＵＳ ５３７４５５５からは、プロテアー
ゼの群からの酵素を使用する、補助的酵素セルロース処
理による化学的方法が公知である。この場合にも処理
は、化学的方法工程との連続的組合せで有利になる個別
の方法工程として行われる。

【０００７】ＷＯ ９１／１１５５２は、セルロースの
機械的製造方法において酸化・加水分解酵素を使用する
ことを記載している。この場合には、レドックス電位を
２００ｍＶ未満の値に調節するために、例えばアスコル
ビン酸のような添加物を使用すべきである。

【０００８】また、セルロースを処理するための化学的
方法に加えて使用される前記の酵素的方法の他に、セル
ロースを処理するための酵素的方法も記載されている。

【０００９】このような方法は、フェノール酸化酵素を
利用する。このような酵素の例は、ペルオキシダーゼ
（ＥＣ．１．１１．１）及びオキシダーゼ（ＥＣ．１．
１０．３）の群からの酵素である。該酵素は、電子受容
体として過酸化水素又は分子状酸素を使用する。漂白に
おけるこれらの酸化酵素の使用は記載されている（例え
ばPaice、Ｍ．Ｇ．、１９９５）。例えばマンガンペル
オキシダーゼ（ＭｎＰ）、リグニンペルオキシダーゼ
（ＬｉＰ）又はラッカーゼ（ＥＣ．１．１０．３．２）
を使用する。ＬｉＰ及びＭｎＰは補助基質として代表的
には過酸化水素を利用するが、ラッカーゼ（Laccase）
は電子受容体としての酸素によって働く。

【００１０】漂白にけるペルオキシダーゼの効果のある
使用はまだ優位を占めることはできなかった、それとい
うのも従来は、過酸化水素によるペルオキシダーゼの不
活性化の問題あるいは不連続的な工業的方法における過
酸化水素の適当な計量技術を解決することができないか
らである。

【００１１】ラッカーゼの単独使用はリグニンを所望の
抽出可能の形に変えないけれども、ラッカーゼに適当な
媒介剤物質（Mediatorsubstanzen）を加えることによっ
て、あらゆる種類のセルロースを効果的に脱リグニン化
することのできる工業的方法を開発することができた。
ＷＯ ９４／２９５１０には、ラッカーゼ、媒介剤（Me
diator）及び酸素の成分から成る、このような酵素的脱
リグニン化系が記載されている。本願ではさらに、従来
の技術水準を詳述することにする。

【００１２】ラッカーゼを使用して酵素的脱リグニン化
を行うための他の媒介剤は、ＷＯ９７／０６２４４に記
載されている。

【００１３】ＷＯ ９４／０１５３８には、セロビオー
ゼ−オキシダーゼを、エンドグリカナーゼ、例えばキシ
ラナーゼ及び／又はオキシドレダクターゼ、例えばラッ
カーゼと組合せて使用することが記載されている。この
方法ではさらに漂白強化剤も加える。記載されている条
件はなかんずくアルカリ性ｐＨ値を挙げている。このよ
うな系の効果は極めて小さい。それというのも前記のｐ
Ｈ値では記載されたラッカーゼは十分に不活性ではない
からである。その上ラッカーゼは過酸化水素の存在で不
活性化される。さらに、漂白強化剤として挙げられた化
合物が強化剤活性を示さないということもある。これ
は、ＷＯ ９６／１２８４６から明らかになるが、ここ
にはセルロース漂白に類似の用途、つまり着色された織
物繊維の漂白が記載されている：ＷＯ ９６／１２８４
６の例１には異なる媒介剤の効果が記載されている。こ
の例の表２から判るように、ここに挙げられた例による
化合物は媒介剤活性を示さない。

【００１４】ＷＯ ９４／２９５１０には、ラッカーゼ
及び活性媒介剤から成る酵素的脱リグニン化系の有利な
組合せが記載されている。この方法は、リグニンの有効
な分解をもたらす、現在唯一の公知の酵素的方法であ
る。この場合媒介剤としてはＮ−ＯＨ−ベンゾトリアゾ
ール（ＨＢＴ）が使用されている。前記方法ではなかん
ずく他の酵素成分、例えばプロテアーゼの添加も述べら
れている。

【００１５】Oksanen等によって１９９７年に明らかに
されたように、キシラナーゼ／ラッカーゼ／ＨＢＴの組
合せ使用は、キシラナーゼ不含の使用に比べて極めて小
さい改善しか示さない。キシラナーゼ処理がラッカーゼ
／ＨＢＴ処理から分離され、別個に方法工程として実施
された後初めて利点が得られる。

【００１６】従って、リグニン及びリグニン含有材料を
変化させ、分解し又は漂白する多成分系において、公知
の酵素的脱リグニン化系よりも優れた成果を脱リグニン
化において達成しかつ化学的脱リグニン化系の諸欠点を
有していない、前記多成分系を提供するのが望ましい。

【００１７】セルロース脱リグニン化のための個々の酵
素的方法の不良な性能の他に、上記の諸問題に基づいて
不可欠な、酵素的脱リグニン化工程の分離及びそれらの
工程から結果する、セルロースの脱リグニン化の際の順
次の手段が、この方法の著しい欠点である。該方法は、
−種々の酵素処理の間の洗浄−及び抽出工程の不可避性
によって、現存する脱リグニン化及び漂白連続工程に経
済的に一体化することはできない。

【００１８】従って同様に、リグニン及びリグニン含有
材料を処理するための酵素的方法において、いくつかの
酵素的方法工程を単一の方法工程に一体化する前記酵素
的方法を提供することも望ましい。

【００１９】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、前記
従来技術の脱リグニン化における諸欠点を克服するため
の、リグニン含有材料を変化させ、分解し又は漂白する
ための多成分系及び脱リグニン化方法を提供することで
ある。

【００２０】

【課題を解決するための手段】本発明は、オキシドレダ
クターゼ、オキシドレダクターゼにとって適当な酸化
剤、媒介剤及び少なくとも１種の酵素活性添加剤を含有
する、リグニン、リグニン含有材料又は類似材料を変化
させ、分解し又は漂白するための多成分系に関し、その
特徴とするところは、媒介剤がオキシドレダクターゼ及
び酵素活性添加剤を不活性化せずに酵素活性添加剤がＥ
Ｃ（酵素クラス）３．２．１のヒドロラーゼの群から選
択されていることである。

【００２１】酵素クラスの命名は、本願では国際生化学
・分子生物学連合（Ｃommittee ofthe International U
nion of Biochemistry and Moleclular Biolgy）の委員
会による国際酵素命名法（Enzyme Nomenclature, Acade
mic Press, Inc.,１９９２、２４〜１５４頁）により行
われる。

【００２２】本発明によれば、媒介剤は、このものがテ
スト系において３０分のインキュベーション時間内に酵
素の酵素活性の７０％を超える損失をもたらす場合に酵
素を不活性化する。前記テスト系は５０ｍｌの全容積中
に４５℃でオキシドレダクターゼ、例えばラッカーゼ６
０ＩＵ及びＥＣ３．２．１のヒドロラーゼ、例えばキシ
ラナーゼ、セルラーゼ４００ＩＵ又は他の酵素の相応の
量ならびに媒介剤７．５ｍモル／ｌを含有する。

【００２３】本発明の多成分系は、従来の技術水準に対
して次の利点を有する： −リグニンに対する高い選択性を有する。

【００２４】−繊維の品質に不利な影響を与えない。

【００２５】−化学的脱リグニン化法と組合せて全脱リ
グニン化及び漂白における化学薬品の節約を可能にす
る。

【００２６】−該系はキシラナーゼ処理及びラッカーゼ
−媒介剤−系の従来の単一方法の改良を行う。この改良
は単一方法の総計よりも大きい。

【００２７】セルロースの製造方法におけるセルラーゼ
の使用は従来は知られていない。セルラーゼは周知のよ
うにセルロースを分解し、ひいては従来の見解によれば
セルロースを常に損傷するので、セルロースの製造方法
におけるセルラーゼの使用は当業者にとっては全く予期
されておらず、意外である。

【００２８】本発明による多成分系においては、オキシ
ドレダクターゼとして国際生化学・分子化学連合の委員
会による国際酵素命名法（Enzyme Nomenclature, Acade
micPress, Inc.,１９９２、２４〜１５４頁）による酵
素クラス（ＥＣ）１．１．１〜１．９７のオキシドレダ
クターゼを使用することができる。

【００２９】好ましくは、次に挙げたクラスのオキシド
レダクターゼを使用する：第一、第二アルコール及びセ
ミアセタールに作用するすべてのデヒドロゲナーゼを包
含しかつ受容体ＮＡＤ⁺又はＮＡＤＰ⁺（サブクラス１．
１．１）として、シトクロム（１．１．２）、酸素（Ｏ
₂）（１．１．３）、二硫化物（１．１．４）、キノン
（１．１．５）又は他の受容体を有する（１．１．９
９）、クラス１．１の酵素。

【００３０】このクラスから特に、受容体としてのキノ
ンを有するクラス１．１．５の酵素及び受容体として酸
素を有するクラス１．１．３の酵素が好ましい。

【００３１】このクラスで特に好ましいのはセロビオー
ス：キノン−１−オキシドレダクターゼ（１．１．５．
１）である。

【００３２】さらにクラス１．２の酵素も好ましい。こ
の酵素クラスは、アルデヒドを相応の酸又はオキソ基に
酸化するような酵素を含有する。受容体はＮＡＤ⁺、Ｎ
ＡＤＰ⁺（１．２．１）、シトクロム（１．２．２）、
酸素（１．２．３）、硫化物（１．２．４）、鉄−硫黄
−プロテイン（１．２．５）又は他の受容体（１．２．
９９）であってよい。

【００３３】特に、この場合、受容体として酸素を有す
るクラス（１．２．３）の酵素が好ましい。

【００３４】さらにクラス１．３の酵素も好ましい。

【００３５】このクラスには、供与体のＣＨ−ＣＨ−基
に作用する酵素がまとめられている。

【００３６】相応の受容体は、ＮＡＤ⁺、ＮＡＤＰ
⁺（１．３．１）、シトクロム（１．３．２）、酸素
（１．３．３）、キノン又は使用された化合物（１．
３．５）、鉄−硫黄−プロテイン（１．３．７）又は他
の受容体（１．３．９９）である。

【００３７】特にビリルビンオキシターゼ（１．３．
３．５）が好ましい。

【００３８】この場合同様に受容体として酸素を有する
クラス（１．３．３）及び受容体としてキノン等を有す
るクラス（１．３．５）の酵素も特に好ましい。

【００３９】さらに、供与体のＣＨ−ＮＨ₂−基に作用
するクラス１．４の酵素も好ましい。

【００４０】相応の受容体は、ＮＡＤ⁺、ＮＡＤＰ
⁺（１．４．１）、シトクロム（１．４．２）、酸素
（１．４．３）、二硫化物（１．４．４）、鉄−硫黄−
プロテイン（１．４．７）又は他の受容体（１．４．９
９）である。

【００４１】特にこの場合、受容体として酸素を有する
クラス（１．４．３）の酵素が好ましい。

【００４２】さらに、供与体のＣＨ−ＮＨ−基に作用す
るクラス１．５の酵素も好ましい。相応の受容体は、Ｎ
ＡＤ⁺、ＮＡＤＰ⁺（１．５．１）、酸素（１．５．
３）、二硫化物（１．５．４）、キノン（１．５．５）
又は他の受容体（１．５．９９）である。

【００４３】またこの場合にも特に、受容体として酸素
（Ｏ₂）を有する酵素（１．５．３）及びキノンを有す
る酵素（１．５．５）が好ましい。

【００４４】さらに、ＮＡＤＨ又はＮＡＤＰＨに作用す
るクラス１．６の酵素も好ましい。

【００４５】この場合受容体は、ＮＡＤＰ⁺（１．６．
１）、ヘムタンパク質（１．６．２）、二硫化物（１．
６．４）、キノン（１．６．５）、ＮＯ₂−基（１．
６．６）及びフラビン（１．６．８）又は若干の他の受
容体（１．６．９９）である。

【００４６】この場合に、受容体としてキノンを有する
クラス１．６．５の酵素が好ましい。

【００４７】さらに、供与体としての他のＮＯ₂−化合
物に作用しかつ受容体としてシトクロム（１．７．
２）、酸素（Ｏ₂）（１．７．３）、鉄−硫黄−プロテ
イン（１．７．７）又は他のもの（１．７．９９）を有
するクラス１．７の酵素も好ましい。

【００４８】この場合特に、受容体として酸素を有する
クラス１．７．３の酵素が好ましい。

【００４９】さらに、供与体としての硫黄基に作用しか
つ受容体としてＮＡＤ⁺、ＮＡＤＰ⁺（１．８．１）、シ
トクロム（１．８．２）、酸素（Ｏ₂）（１．８．
３）、二硫化物（１．８．４）、キノン（１．８．
５）、鉄−硫黄−プロテイン（１．８．７）又は他の受
容体（１．８．９９）を有するクラス１．８の酵素も好
ましい。

【００５０】特に、受容体として酸素（Ｏ₂）を有する
クラス（１．８．３）及びキノンを有するクラス（１．
８．５）が好ましい。

【００５１】また、供与体としてのヘム基に作用しかつ
受容体として酸素（Ｏ₂）（１．９．３）、ＮＯ₂−化合
物（１．９．６）及び他の受容体（１．９．９９）を有
する酵素も好ましい。

【００５２】特に、受容体として酸素（Ｏ₂）を有する
クラス１．９．３（シトクロムオキシダーゼ）が好まし
い。

【００５３】さらに、供与体としての水素に作用するク
ラス１．１２の酵素も好ましい。

【００５４】受容体はＮＡＤ⁺又はＮＡＤＰ⁺（１．１
２．１）又は他の受容体（１．１２．９９）である。

【００５５】さらに、クラス１．１３及び１．１４の酵
素（オキシゲナーゼ）も好ましい。

【００５６】さらに、受容体としての超酸化物基に作用
するクラス１．１５の酵素も好ましい。

【００５７】この場合特に、超酸化物−ジスムターゼ
（１．１５．１．１）が好ましい。

【００５８】さらに、クラス１．１６の酵素も好まし
い。受容体としてＮＡＤ⁺又はＮＡＤＰ⁺（１．１６．
１）又は酸素（Ｏ₂）（１．１６．３）が作用する。

【００５９】この場合特に、クラス１．１６．３．１の
酵素（フェロオキシダーゼ、例えばセルロプラスミン）
が好ましい。

【００６０】さらに好ましい酵素は、クラス１．１７
（酸化されて−ＣＨＯＨ−を形成するＣＨ₂−基に作用
する）、クラス１．１８（供与体としての還元フェレド
キシンに作用する）、クラス１．１９（供与体としての
還元フラボドキシンに作用）及びクラス１．９７（他の
オキシドレダクターゼ）に属するような酵素である。

【００６１】さらに、受容体としてのペルオキシドに作
用するクラス１．１１の酵素も特に好ましい。この唯一
つのサブクラス（１．１１．１）はペルオキシダーゼを
含有する。

【００６２】この場合特に、シトクロム−Ｃ−ペルオキ
シダーゼ（１．１１．１．５）、カタラーゼ（１．１
１．１．６）、ペルオキシダーゼ（１．１１．１．
６）、沃化物−ペルオキシダーゼ（１．１１．１．
８）、グルタチオン−ペルオキシダーゼ（１．１１．
１．９）、塩化物−ペルオキシダーゼ（１．１１．１．
１０）、Ｌ−アスコルビン酸塩−ペルオキシダーゼ
（１．１１．１．１１）、リン脂質−ヒドロペルオキシ
ド−グルタチオン−ペルオキシダーゼ（１．１１．１．
１２）、マンガン−ペルオキシダーゼ（１．１１．１．
１３）、ジアリールプロパン−ペルオキシダーゼ（リグ
ニナーゼ、リグニン−ペルオキシダーゼ）（１．１１．
１．１４）が好ましい。

【００６３】特に、ビフェノール及び使用された化合物
に対して作用するクラス１．１０の酵素が極めて好まし
い。これらの酵素は、ビフェノール及びアスコルビン酸
塩の酸化を触媒する。受容体としては、ＮＡＤ⁺、ＮＡ
ＤＰ⁺（１．１０．１）、シトクロム（１．１０．
２）、酸素（１．１０．３）又は他のもの（１．１０．
９９）が働く。

【００６４】これらの酵素のうち特に、受容体として酸
素（Ｏ₂）を有するクラス（１．１０．３）の酵素が好
ましい。

【００６５】このクラスの酵素のうち、カテコールオキ
シダーゼ（チロシナーゼ）（１．１０．３．１）、Ｌ−
アスコルビン酸塩オキシダーゼ（１．１０．３．３）、
ｏ−アミノフェノールオキシダーゼ（１．１０．３．
４）及びラッカーゼ（ベンゼンジオール：酸素オキシド
レダクターゼ）（１．１０．３．２）の酵素が好まし
く、特にラッカーゼ（ベンゼンジオール：酸素オキシド
レダクターゼ）（１．１０．３．２）が好ましい。

【００６６】前記のオキシドレダクターゼは、市販され
ているか又は標準方法により製造することができる。酵
素を製造するための生物体としては、例えば植物、動物
細胞、細菌及び真菌類（Pilze）が適当である。原則と
して天然産ならびに遺伝的に変化された生物体が酵素産
生体（Enzymproduzent）であってよい。同様に酵素産生
体としては単細胞又は多細胞生物、なかんずく細胞培養
物も考慮されうる。

【００６７】特に好ましいオキシドレダクターゼ、例え
ばクラス１．１１．１、なかんずく１．１０．３からの
もののためには、特にラッカーゼの製造のためには、例
えば白菌病真菌（Weissfaeulepilze）、すなわちプリュ
ーロツス（Pleurotus）、フレビア（Phlebia）及びトラ
メテス（Trametes）を使用する。

【００６８】本発明の多成分系は少なくとも１種の酸化
剤を包含する。酸化剤としては、例えば空気、酸素、オ
ゾン、Ｈ₂Ｏ₂、有機過酸化物、過酸例えば過酢酸、過ギ
酸、過硫酸、過硝酸、メタクロロペルオキシ安息香酸、
過塩素酸、過ホウ酸塩、過酢酸塩、過硫酸塩、過酸化物
又は酸素化学種及びその基、例えばＯＨ、ＯＯＨ、一重
項酸素（Singulettsauerstoff）、超酸化物（Ｏ₂ ^-）、
オゾニド、二酸素陽イオン（Dioxygenyl-Kation）（Ｏ₂
⁺）、ジオキシラン、ジオキセタン又はフレミー基（Fre
my Radikale）を使用することができる。

【００６９】好ましくは、相応のオキシドレダクターゼ
によって生成されうる（例えばジオキシランはラッカー
ゼ＋カルボニルから生成される）か、又は媒介剤を化学
的に再生させるか又はこのものを直接反応させ得るよう
な酸化剤を使用する。

【００７０】例えばペルオキシダーゼは、補助基質（Co
substrat）として過酸化水素を必要とする。この化合物
は当該系に直接供給できるか又は先駆化合物から遊離さ
せてもよい。最後にまた、過酸化水素を現場で補助反応
によって、例えばグルコースオキシダーゼ（ＥＣ １．
１．３．４）によってグルコースの酵素的変化によって
生成させてもよい。

【００７１】例えばオキシダーゼは電子受容体として酸
素を使用する。通常十分量の酸素を水溶液中に溶かす。
しかしまた酸素は撹拌のような適当な手段、酸素ガスの
使用又は加圧によって反応溶液中に導入することもでき
る。これは特に、方法を高められた温度で行おうとする
場合に必要である。それというのも水溶液中での酸素の
溶解度は温度の上昇とともに減少するからである。

【００７２】本発明の多成分系は、オキシドレダクター
ゼ及び酵素活性添加剤を不活性化しない少なくとも１種
の媒介剤を包含する。

【００７３】媒介剤としては、好ましくは、少なくとも
１個のＮ−ヒドロキシ−、オキシム−、ニトロソ−、Ｎ
−オキシル−又はＮ−オキシ−官能基を有する、脂肪
族、脂環式、複素環式又は芳香族化合物の群から少なく
とも１種の化合物を選択する。この際置換された又は未
置換の１−ヒドロキシ−１−ベンゾトリアゾール、３Ｈ
−ベンゾトリアゾール−１−オキシド及び２Ｈ−ベンゾ
トリアゾール−１−オキシドは除外されている。

【００７４】このような化合物の例は、以下に挙げる式
Ｉ、ＩＩ又はＩＩＩで示される化合物であるが、式ＩＩ
及びＩＩＩの化合物が好ましい。

【００７５】一般式Ｉの化合物は次のとおりである：

【００７６】

【化１】

【００７７】式中Ｘは次の基：（−Ｎ＝ＣＲ⁴−）_p、
（−ＣＲ⁴＝Ｎ−）_p、（−ＣＲ⁵＝ＣＲ⁶−）_p、［ｐは
１又は２である］の１つを表し、基Ｒ¹〜Ｒ⁶は同じか又
は異なっていてもよくかつ相互に独立的に次の基の１
つ：水素、ハロゲン、ヒドロキシ、ホルミル、カルボキ
シならびにそれらの塩及びエステル、アミノ、ニトロ、
Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシ、カ
ルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、フェニル、スルホノ、
それらのエステル及び塩、スルファモイル、カルバモイ
ル、ホスホ、ホスホノ、ホスホノオキシならびにそれら
の塩及びエステルを表わすことができ、さらに基Ｒ¹〜
Ｒ⁶のアミノ−、カルバモイル−及びスルファモイル基
は未置換であるか又はヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₃−アルキ
ル、Ｃ₁〜Ｃ₃−アルコキシで１回又は２回置換されてい
てもよく、基Ｒ²及びＲ³は共通の基−Ａ−を形成しても
よく、この場合−Ａ−は次の基：（−ＣＲ⁷＝ＣＲ⁸−Ｃ
Ｒ⁹＝ＣＲ¹⁰−）又は（−ＣＲ¹⁰＝ＣＲ⁹−ＣＲ⁸＝ＣＲ⁷
−）の１つを表わす。

【００７８】基Ｒ⁷〜Ｒ¹⁰は、同じか又は異なっていて
もよくかつ相互に独立的に次の基の１つ：水素、ハロゲ
ン、ヒドロキシ、ホルミル、カルボキシならびにそれら
の塩及びエステル、アミノ、ニトロ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アル
キル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシ、カルボニル−Ｃ₁〜
Ｃ₆−アルキル、フェニル、スルホノ、それらのエステ
ル及び塩、スルファモイル、カルバモイル、ホスホ、ホ
スホノ、ホスホノオキシならびにそれらの塩及びエステ
ルを表わすことができ、さらに基Ｒ⁷〜Ｒ¹⁰のアミノ
−、カルバモイル−及びスルファモイル基は未置換であ
るか又はヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₃−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₃−
アルコキシによって１回又は２回置換されていてもよ
く、基Ｒ⁷〜Ｒ¹⁰のＣ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₆−
アルキルオキシ−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル
−、フェニル−、アリール基は未置換であるか又はさら
に基Ｒ¹¹によって１回以上置換されていてもよくかつ基
Ｒ¹¹は次の基の１つ：水素、ハロゲン、ヒドロキシ、ホ
ルミル、カルボキシならびにそれらの塩及びエステル、
アミノ、ニトロ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆−ア
ルキルオキシ、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、フェ
ニル、アリール、ならびにそれらのエステル及び塩を表
わすことができ、基Ｒ¹¹のカルバモイル−、スルファモ
イル−、アミノ−基は未置換であるか又はさらに基Ｒ¹²
によって１回又は２回置換されていてもよく、基Ｒ¹²は
次の基の１つ：水素、ヒドロキシ、ホルミル、カルボキ
シならびにそれらの塩及びエステル、アミノ、ニトロ、
Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシ、カ
ルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、フェニル、アリールを
表わすことができる。

【００７９】一般式ＩＩで示される化合物は次のとおり
である：

【００８０】

【化２】

【００８１】式中Ｘは次の基の１つ：（−Ｎ＝ＣＲ
⁴−）_p、（−ＣＲ⁴＝Ｎ−）_p、（−ＣＲ⁵＝ＣＲ
⁶−）_p、［ｐは１または２である］を表わす。

【００８２】基Ｒ¹及びＲ⁴〜Ｒ¹⁰は同じか又は異なって
いてもよくかつ相互に独立的に次に基の１つ：水素、ハ
ロゲン、ヒドロキシ、ホルミル、カルボキシならびにそ
れらの塩及びエステル、アミノ、ニトロ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−
アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシ、カルボニル−Ｃ
₁〜Ｃ₆−アルキル、フェニル、アリール、スルホノ、そ
れらのエステル及び塩、スルファモイル、カルバモイ
ル、ホスホ、ホスホノ、ホスホノオキシならびにそれら
の塩及びエステルを表わすことができ、さらに基Ｒ¹及
びＲ⁴〜Ｒ¹⁰のアミノ−、カルバモイル−及びスルファ
モイル基は未置換であるか又はヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₃−
アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₃−アルコキシによって１回又は２回
置換されていてもよく、基Ｒ¹及びＲ⁴〜Ｒ¹⁰のＣ₁〜Ｃ
₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシ−、カルボ
ニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル−、フェニル−、アリール
−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル基は未置換であるか
又はさらに基Ｒ¹²によって１回以上置換されていてもよ
くこの際基Ｒ¹²は次の基の１つ：水素、ハロゲン、ヒド
ロキシ、ホルミル、カルボキシならびにそれらの塩及び
エステル、アミノ、ニトロ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル、Ｃ₁
〜Ｃ₆−アルキルオキシ、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アル
キル、フェニル、アリール、スルホノ、スルフェノ、ス
ルフィノならびにそれらのエステル及び塩を表わすこと
ができ、基Ｒ¹²のカルバモイル−、スルファモイル−、
アミノ基は未置換であるか又はさらに基Ｒ¹³で１回又は
２回置換されていてもよく、この際基Ｒ¹³は次に基の１
つ：水素、ヒドロキシ、ホルミル、カルボキシならびに
それらの塩及びエステル、アミノ、ニトロ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂
−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシ、カルボニル−
Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、フェニル、アリールを表わすこと
ができる。

【００８３】前記の化合物の例は次のとおり： １−ヒドロキシ−ベンゾイミダゾール １−ヒドロキシベンゾイミダゾール−２−カルボン酸 １−ヒドロキシベンゾイミダゾール ２−メチル−１−ヒドロキシベンゾイミダゾール ２−フェニル−１−ヒドロキシベンゾイミダゾール １−ヒドロキシインドール ２−フェニル−１−ヒドロキシインドール 一般式ＩＩＩの物質は次のとおりである：

【００８４】

【化３】

【００８５】式中Ｘは次の基の１つ：（−Ｎ＝ＣＲ
⁴−）_m、（−ＣＲ⁴＝Ｎ−）_m、（−ＣＲ⁵＝ＣＲ
⁶−）_m、［ｍは１又は２である］を表わす。

【００８６】基Ｒ⁷〜Ｒ¹⁰及びＲ⁴〜Ｒ⁶については上記
のとおりである。

【００８７】Ｒ¹⁴は水素、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−アルキル、Ｃ₁〜
Ｃ₁₀−アルキルカルボニルであってよく、そのＣ₁〜Ｃ
₁₀−アルキル及びＣ₁〜Ｃ₁₀−アルキルカルボニルは未
置換であるか又は基Ｒ¹⁵によって１回以上置換されてい
てもよく、この際基Ｒ¹⁵は次の基の１つ：水素、ハロゲ
ン、ヒドロキシ、ホルミル、カルボキシならびにその塩
及びエステル、アミノ、ニトロ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキ
ル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルオキシ、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆
−アルキル、フェニル、スルホノ、それらのエステル及
び塩、スルファモイル、カルバモイル、ホスホ、ホスホ
ノ、ホスホノオキシならびにそれらの塩及びエステルを
表わすことができ、さらに基Ｒ¹⁵のアミノ−、カルバモ
イル−及びスルファモイル基は、未置換であるか又はヒ
ドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₃−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₃−アルコキシ
で１回又は２回置換されていてもよい。

【００８８】さらに媒介剤は、好ましくは、場合によっ
ては置換された５員又は６員環少なくとも１個を有しか
つ式ＩＶで挙げた構造：

【００８９】

【化４】

【００９０】を含む環状Ｎ−ヒドロキシ化合物ならびに
その塩、エーテル又はエステルから選択されていてもよ
く、前記式中、Ｂ及びＤは同じか又は異なっておりかつ
Ｏ、Ｓ又はＮＲ¹⁶を表わし、この際Ｒ¹⁶は水素、ヒドロ
キシ−、ホルミル−、カルバモイル−、スルホノ基、ス
ルホノ基のエステル又は塩、スルファモイル−、ニトロ
−、アミノ−、フェニル−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アル
キル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキ
シ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ
₆−アルキル−、ホスホ−、ホスホノ−、ホスホノオキ
シ基、ホスホノオキシ基のエステル又は塩を表わし、こ
こでカルバモイル−、スルファモイル−、アミノ−及び
フェニル基は未置換であるか又は基Ｒ¹⁷によって１回以
上置換されていてもよくかつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アル
キル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキ
シ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ
₆−アルキル基は飽和か又は不飽和であり、枝分れ又は
枝なしであってよくかつ基Ｒ¹⁷によって１回以上置換さ
れていてもよく、ここでＲ¹⁷は同じか又は異なっており
かつヒドロキシ−、ホルミル−、カルボキシ基、カルボ
キシ基のエステル又は塩、カルバモイル−、スルホノ
基、スルホノ基のエステル又は塩、スルファモイル−、
ニトロ−、アミノ−、フェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル
−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基を表わす。

【００９１】媒介剤は、好ましくは一般式Ｖ、ＶＩ、Ｖ
ＩＩ又はＶＩＩＩ：

【００９２】

【化５】

【００９３】で示されてる化合物の群から選択されてお
り、前記式中Ｂ、Ｄはすでに挙げたものを表わし、基Ｒ
¹⁸〜Ｒ³³は同じか又は異なっておりかつハロゲン基、カ
ルボキシ基、カルボキシ基の塩及びエステルであるか又
はＲ¹⁶に関して挙げたものを表わし、Ｒ²⁴及びＲ²⁵又は
Ｒ²⁶及びＲ²⁷は同時にヒドロキシ−又はアミノ基を表わ
してはならず、場合により置換基Ｒ¹⁸〜Ｒ²¹、Ｒ²²〜Ｒ
²³、Ｒ²⁴〜Ｒ²⁷、Ｒ²⁸〜Ｒ³³の２つずつは結合されて環
−Ｅ−を形成していてもよく、この際−Ｅ−は次のもの
の１つ：（−ＣＨ＝ＣＨ）_n−［ｎ＝１〜３］、−ＣＨ
＝ＣＨ−ＣＨ＝Ｎ−又は

【００９４】

【化６】

【００９５】を表わし、場合により基Ｒ²⁴〜Ｒ²⁷も相互
に１又は２個の橋状成分−Ｆ−によって結合されていて
もよく、この際−Ｆ−は同じか又は異なっていて、次の
ものの１つ：−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ₂−、−ＣＲ³⁴＝
ＣＲ³⁵−を表わし、ここでＲ³⁴及びＲ³⁵は同じであるか
又は異なっていてかつＲ¹⁸のものを表わす。

【００９６】特に媒介剤としては、一般式Ｖ、ＶＩ、Ｖ
ＩＩ又はＶＩＩＩにおいてＢ又はＤがＯ又はＳを表わす
化合物が好ましい。

【００９７】このような化合物の例は、Ｎ−ヒドロキシ
−フタルイミドならびに場合により置換されたＮ−ヒド
ロキシ−フタルイミド誘導体、Ｎ−ヒドロキシマレイミ
ドならびに場合により置換されたＮ−ヒドロキシマレイ
ミド誘導体、Ｎ−ヒドロキシ−ナフタル酸イミドならび
に場合により置換されたＮ−ヒドロキシ−ナフタル酸イ
ミド誘導体、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド及び場合に
より置換されたＮ−ヒドロキシスクシンイミド誘導体、
好ましくは基Ｒ²⁴〜Ｒ²⁷が多環式に結合されているよう
なものである。

【００９８】媒介剤としては、特にＮ−ヒドロキシフタ
ルイミド、４−アミノ−Ｎ−ヒドロキシフタルイミド及
び３−アミノ−Ｎ−ヒドロキシフタルイミドが好まし
い。

【００９９】媒介剤として適当な、式Ｖで示される化合
物は例えば次のとおりである：Ｎ−ヒドロキシフタルイ
ミド、４−アミノ−Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、３−
アミノ−Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシ
−ベンゼン−１，２，４−トリカルボン酸イミド、Ｎ，
Ｎ′−ジヒドロキシ−ピロメリット酸ジイミド、Ｎ，
Ｎ′−ジヒドロキシ−ベンゾフェノン−３，３′，４，
４′−テトラカルボン酸ジイミド。

【０１００】媒介剤として適当な式ＶＩの化合物は例え
ば次のものである：Ｎ−ヒドロキシマレイミド、ピリジ
ン−２，３−ジカルボン酸−Ｎ−ヒドロキシイミド。

【０１０１】媒介剤として適当な式ＶＩＩの化合物は例
えば次のとおりである：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ド、Ｎ−ヒドロキシ酒石酸イミド、Ｎ−ヒドロキシ−５
−ノルボルネン−２，３ジカルボン酸イミド、エクソ−
Ｎ−ヒドロキシ−７−オキサビシクロ［２．２．１］−
へプト−５−エン−２，３−ジカルボキシイミド、Ｎ−
ヒドロキシ−シス−シクロヘキサン−１，２−ジカルボ
キシイミド、Ｎ−ヒドロキシ−シス−４−シクロヘキセ
ン−１，２−ジカルボン酸イミド。

【０１０２】媒介剤として適当な式ＶＩＩＩの化合物
は、例えばＮ−ヒドロキシナフタル酸イミド−ナトリウ
ム塩である。

【０１０３】式ＩＶで記載した構造を含む６員環を有す
る、媒介剤として適当な化合物は、例えばＮ−ヒドロキ
シグルタルイミドである。

【０１０４】例として挙げた化合物は、それらの塩又は
エステルの形でも媒介剤として適当である。

【０１０５】同様に、Ｎ−アリール−Ｎ−ヒドロキシ−
アミドの群から選択される化合物も媒介剤として適当で
ある。

【０１０６】これらの化合物の中から好ましくは、一般
式ＩＸ、Ｘ又はＸＩ：

【０１０７】

【化７】

【０１０８】で示される化合物ならびにその塩、エーテ
ル又はエステルを媒介剤として使用する。前記式中Ｇは
結合手１個（einbindig）のホモ−又はヘテロ芳香族の
単核−又は二核基を表わし、Ｌは結合手２個のホモ−又
はヘテロ芳香族の単核−又は二核基を表わし、これらの
芳香族基は、ハロゲン、ヒドロキシ−、ホルミル−、シ
アノ−、カルバモイル−、カルボキシ基、カルボキシ基
のエステル又は塩、スルホノ基、スルホノ基のエステル
又は塩、スルファモイル−、ニトロ−、ニトロソ−、ア
ミノ−、フェニル−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル
−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ
−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆
−アルキル−、ホスホ−、ホスホノ−、ホスホノオキシ
基、ホスホノオキシ基のエステル又は塩から選択され
る、同じか又は異なる１個以上の基Ｒ³⁶によって置換さ
れていてもよく、この際カルバモイル−、スルファモイ
ル−、アミノ−及びフェニル基は未置換であるか又は基
Ｒ³⁷によって１回以上置換されていてもよくかつアリー
ル−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル
−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル
−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル基は飽和か又は不
飽和で、枝分れ又は枝なしであってよくかつ基Ｒ³⁷によ
って１回以上置換されていてもよく、ここでＲ³⁷は同じ
か又は異なっていてかつヒドロキシ−、ホルミル−、シ
アノ−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は
塩、カルバモイル−、スルホノ−、スルファモイル−、
ニトロ−、ニトロソ−、アミノ−、フェニル−、Ｃ₁〜
Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₅
−アルキルカルボニル基を表わしかつ基Ｒ³⁶又はＲ³⁷の
２個ずつが対になって橋［−ＣＲ³⁸Ｒ³⁹−］_m（ｍは
０、１、２、３または４である）によって結合されてい
てもよくかつＲ³⁸およびＲ³⁹は同じか又は異なっていて
かつカルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、フ
ェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキ
シ−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキルカルボニル基を表わしかつ隣
接していない１個以上の基［−ＣＲ³⁸Ｒ³⁹−］が酸素、
硫黄又は場合によりＣ₁〜Ｃ₅−アルキル基で置換された
イミノ基によって置換されていてもよく、２個の隣接基
［−ＣＲ³⁸Ｒ³⁹−］が基［−ＣＲ³⁸＝ＣＲ³⁹−］によっ
て置換されていてもよくかつＩは２０個までのＣ原子を
有するカルボン酸、炭酸、炭酸の半エステル又はカルバ
ミン酸、スルホン酸、ホスホン酸、リン酸、リン酸のモ
ノエステル、リン酸のジエステルの群から選択された酸
の、アミドの形で存在する結合手１個を有する酸基を表
わし、Ｋは２０個までの炭素原子を有するモノ−及びジ
カルボン酸、炭酸、スルホン酸、ホスホン酸、リン酸、
リン酸のモノエステルから選択された酸の、アミドの形
で存在する結合手２個を有する酸基を表わす。

【０１０９】特に媒介剤としては、一般式ＸＩＩ、ＸＩ
ＩＩ、ＸＩＶ、ＸＶ又はＸＶＩ：

【０１１０】

【化８】

【０１１１】で示される化合物ならびにその塩、エーテ
ル又はエステルが好ましい。前記式中、Ａ¹ｒは結合手
１個のホモ−又はヘテロ芳香族単核アリール基を表わ
し、Ａ²ｒは結合手２個のホモ−又はヘテロ芳香族単核
アリール基を表わし、これらのアリール基は、ヒドロキ
シ−、シアノ−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステ
ル又は塩、スルホノ基、スルホノ基のエステル又は塩、
ニトロ−、ニトロソ−、アミノ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキ
ル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ ₁₀−カルボニ
ル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル基の群から選択
された、同じか又は異なる１種以上の基Ｒ⁴²によって置
換されていてもよく、ここでアミノ基は未置換であるか
又は基Ｒ⁴³によって１回以上置換されていてもよくかつ
Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁
〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキ
ル基は飽和又は不飽和で、枝分れ又は枝なしであってよ
くかつ基Ｒ⁴³によって１回以上置換されていてもよく、
この際Ｒ⁴³は同じか又は異なっていてかつヒドロキシ
−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、ス
ルホノ−、ニトロ−、アミノ−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル
−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキルカル
ボニル基を表わしかつ基Ｒ⁴²の２個ずつは対をなして橋
［−ＣＲ³⁸Ｒ³⁹−］_m（ｍは０、１、２、３または４で
ある）によって結合されていてもよくかつＲ³⁸及びＲ³⁹
はすでに記載したものを表わし、隣接していない１個以
上の基［−ＣＲ³⁸Ｒ³⁹−］は酸素、硫黄又は場合により
Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル基で置換されたイミノ基によって置
換されており、２個の隣接する基［−ＣＲ³⁸Ｒ³⁹−］は
基［−ＣＲ³⁸＝ＣＲ³⁹−］によって置換されていてもよ
く、Ｒ⁴⁰は、水素、フェニル−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−
アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アル
コキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル基の群から選択され
た、結合手１個の同じか又は異なる基を表わし、この際
フェニル基は未置換であるか又は基Ｒ⁴⁴によって１回以
上置換されていてもよくかつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アル
キル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキ
シ−、Ｃ₁〜Ｃ_{1 0}−カルボニル基は飽和又は不飽和で、
枝分れ又は枝なしであってよくかつ基Ｒ^{4 4}によって１回
以上置換されていてもよく、ここでＲ⁴⁴は同じか又は異
なっておりかつヒドロキシ−、ホルミル−、シアノ−、
カルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、カルバ
モイル−、スルホノ−、スルファモイル−、ニトロ−、
ニトロソ−、アミノ−、フェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキ
ル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基を表わし、Ｒ⁴¹は、オル
ト−、メタ−、パラ−フェニレン−、アリール−Ｃ₁〜
Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキレン−、Ｃ₁〜Ｃ₅
−アルキレンジオキシ基の群から選択された、結合手２
個の基を表わし、この際フェニレン基は未置換であるか
又は基Ｒ⁴⁴によって１回以上置換されていてもよくかつ
アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキ
ル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基は飽和又は不飽和で、枝
分れ又は枝なしであってよくかつ基Ｒ⁴⁴で１回以上置換
されていてもよく、ｐは０又は１を表わし、ｑは１〜３
の整数を表わす。

【０１１２】好ましくはＡ¹ｒはフェニル基を、Ａ²ｒは
オルトフェニレン基を表わし、この際Ａ¹ｒは、Ｃ₁〜Ｃ
₃−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₃−アルキルカルボニル−、カ
ルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、スルホノ
基、スルホノ基のエステル又は塩、ヒドロキシ−、シア
ノ−、ニトロ−、ニトロソ−及びアミノ基の群から選択
された、５個までの同じか又は異なる基によって、Ａ²
ｒは４個までの同様な基によって置換されていてもよ
く、ここでアミノ基はヒドロキシ及びＣ₁〜Ｃ₃−アルキ
ルカルボニルの群から選択された、２個の異なる基によ
って置換されていてもよい。

【０１１３】Ｒ⁴⁰は好ましくは、水素、フェニル−、Ｃ
₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基の群か
ら選択された結合手１個の基を表わし、ここでＣ₁〜Ｃ
₁₂−アルキル基及びＣ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基は飽和又は
不飽和であって、枝分れ又は枝なしであってもよい。

【０１１４】Ｒ⁴¹は好ましくは、オルト−又はパラ−フ
ェニレン−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキレン−、Ｃ₁〜Ｃ₅−ア
ルキレンジオキシ基の群から選択された、結合手２個の
基を表わし、この際アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、
Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基は飽
和又は不飽和、枝分れ又は枝なしであってよくかつ基Ｒ
⁴⁴によって１回以上置換されていてもよい。

【０１１５】Ｒ⁴⁴は好ましくは、カルボキシ基、カルボ
キシ基のエステル又は塩、カルバモイル−、フェニル
−、Ｃ₁〜Ｃ₃−アルコキシ基を表わす。

【０１１６】媒介剤として使用することのできる化合物
の例は、Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド、Ｎ−ヒドロキ
シピバロイルアニリド、Ｎ−ヒドロキシアクリルアニリ
ド、Ｎ−ヒドロキシベンゾイルアニリド、Ｎ−ヒドロキ
シ−メチルスルホニルアニリド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−
フェニル−メチルカルバメート、Ｎ−ヒドロキシ−３−
オキソ−ブチリルアニリド、Ｎ−ヒドロキシ−４−シア
ノアセトアニリド、Ｎ−ヒドロキシ−４−メトキシアセ
トアニリド、Ｎ−ヒドロキシフェナセチン、Ｎ−ヒドロ
キシ−２，３−ジメチルアセトアニリド、Ｎ−ヒドロキ
シ−２−メチルアセトアニリド、Ｎ−ヒドロキシ−４−
メチルアセトアニリド、１−ヒドロキシ−３，４−ジヒ
ドロキノリン−（１Ｈ）−２−オン、Ｎ，Ｎ′−ジヒド
ロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジアセチル−１，３−フェニレンジ
アミン、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−コハク酸ジアニリ
ド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−マレイン酸ジアニリド、
Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−シュウ酸ジアニリド、Ｎ，
Ｎ′−ジヒドロキシ−リン酸ジアニリド、Ｎ−アセトキ
シアセトアニリド、Ｎ−ヒドロキシメチルオキサリルア
ニリド、Ｎ−ヒドロキシマレイン酸モノアニリド。

【０１１７】媒介剤としては、Ｎ−ヒドロキシアセトア
ニリド、Ｎ−ヒドロキシホルムアニリド、Ｎ−ヒドロキ
シ−Ｎ−フェニル−メチルカルバメート、Ｎ−ヒドロキ
シ−２−メチルアセトアニリド、Ｎ−ヒドロキシ−４−
メチルアセトアニリド、１−ヒドロキシ−３，４−ジヒ
ドロキノリン−（１Ｈ）−２−オン及びＮ−アセトキシ
アセトアニリドが好ましい。

【０１１８】媒介剤はさらに、Ｎ−アルキル−Ｎ−ヒド
ロキシ−アミドの群から選択されていてもよい。

【０１１９】この場合媒介剤としては、好ましくは一般
式ＸＶＩＩ又はＸＶＩＩＩ：

【０１２０】

【化９】

【０１２１】で示される化合物及びそれらの塩、エーテ
ル又はエステルを使用する。前記式中、Ｍは同じか又は
異なっておりかつＣ原子１〜２４個を有する結合手１個
の、線状又は枝分れ又は環状又は多環式の、飽和又は不
飽和アルキル基を表わし、このアルキル基は、同じか又
は異なっておりかつヒドロキシ−、メルカプト−、ホル
ミル−、カルバモイル−、カルボキシ基、カルボキシ基
のエステル又は塩、スルホノ基、スルホノ基のエステル
又は塩、スルファモイル−、ニトロ−、ニトロソ−、ア
ミノ−、ヒドロキシルアミノ−、フェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅
−アルコキシ−、Ｃ ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、ホスホ
−、ホスホノ−、ホスホノオキシ基、ホスホノオキシ基
のエステル又は塩の群から選択されている基Ｒ⁴⁵１個以
上によって置換されていてもよく、この際カルバモイル
−、スルファモイル−、アミノ−、ヒドロキシルアミノ
−、メルカプト−及びフェニル基は未置換であるか又は
基Ｒ⁴⁶によって１回以上置換されていてもよくかつＣ₁
〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル基は飽和
又は不飽和で、枝分れ又は枝なしであってよくかつ基Ｒ
⁴⁶によって１回以上置換されていてもよく、ここでＲ⁴⁶
は同じか又は異なっておりかつヒドロキシ−、ホルミル
−、シアノ−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル
又は塩、カルバモイル−、スルホノ−、スルファモイル
−、ニトロ−、ニトロソ−、アミノ−、フェニル−、ベ
ンゾイル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコ
キシ−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキルカルボニル基を表わしかつ
α−位でないメチレン基は酸素、硫黄又は場合により１
回置換されたイミノ基によって置換されていてもよく、
Ｎは、２０個までのＣ原子を有する脂肪族又は単核又は
二核の芳香族又は単核又は二核のヘテロ芳香族カルボン
酸、炭酸、炭酸の半エステル又はカルバミン酸、スルホ
ン酸、ホスホン酸、リン酸、リン酸のモノエステル、リ
ン酸のジエステルの群から選択された酸の、アミドの形
で存在する結合手１個の酸基を表わし、Ｔは、２０個ま
でのＣ原子を有する脂肪族、単核又は二核芳香族もしく
は単核又は二核ヘテロ芳香族ジカルボン酸、炭酸、スル
ホン酸、ホスホン酸、リン酸、リン酸のモノエステルの
群から選択された、アミドの形で存在する結合手２個の
酸基を表わし、この際アミドの形で存在する脂肪族の酸
Ｎ及びＴのアルキル基は、線状又は枝分れでありかつ／
又は環状かつ／又は多環式であり、飽和又は不飽和であ
ってよくかつ０〜２４個の炭素原子を有しておりかつ未
置換であるか又は基Ｒ⁴⁵で１回以上置換されておりかつ
アミドの形で存在する芳香族又はヘテロ芳香族の酸Ｎ及
びＴのアリール−及びヘテロアリール基は、同じか又は
異なっておりかつヒドロキシ−、メルカプト−、ホルミ
ル−、シアノ−、カルバモイル−、カルボキシ基、カル
ボキシ基のエステル又は塩、スルホノ基、スルホノ基の
エステル又は塩、スルファモイル−、ニトロ−、ニトロ
ソ−、アミノ−、フェニル−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−ア
ルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコ
キシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、ホスホ−、ホスホ
ノ−、ホスホノオキシ基、ホスホノオキシ基のエステル
又は塩の群から選択された基Ｒ⁴⁷１個以上によって置換
されていてもよく、ここでカルバモイル−、スルファモ
イル−、アミノ−、メルカプト−及びフェニル基は未置
換であるか又は基Ｒ⁴⁶で１回以上置換されていてもよく
かつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−ア
ルキル−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボ
ニル基は飽和又は不飽和で、枝分れ又は枝なしであって
よく、基Ｒ⁴⁶で１回以上置換されていてもよい。

【０１２２】特に媒介剤としては、一般式ＸＩＸ、Ｘ
Ｘ、ＸＸＩ又はＸＸＩＩ：

【０１２３】

【化１０】

【０１２４】で示される化合物ならびにそれらの塩、エ
ーテル又はエステルが好ましい。前記式中、Ａｌｋ¹は
同じか又は異なっておりかつＣ原子１〜１０個を有する
結合手１個の、線状又は枝分れの又は環状又は多環式
の、飽和又は不飽和アルキル基を表わし、前記アルキル
基は、同じか又は異なっておりかつヒドロキシ−、ホル
ミル−、カルバモイル−、カルボキシ基、カルボキシ基
のエステル又は塩、スルホノ基、スルホノ基のエステル
又は塩、スルファモイル−、ニトロ−、ニトロソ−、ア
ミノ−、ヒドロキシルアミノ−、フェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅
−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₅−カルボニル基の群から選択
されている基Ｒ⁴⁸１個以上によって置換されていてもよ
くかつカルバモイル−、スルファモイル−、アミノ−、
ヒドロキシルアミノ−及びフェニル基は未置換であるか
又は基Ｒ⁴⁹によって１回以上置換されていてもよくかつ
Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル基は
飽和又は不飽和で、枝分れ又は枝なしであってよくかつ
基Ｒ⁴⁹によって１回以上置換されていてもよく、ここで
Ｒ⁴⁹は同じか又は異なっておりかつヒドロキシ−、ホル
ミル−、シアノ−、カルボキシ基、カルボキシ基のエス
テル又は塩、カルバモイル−、スルホノ−、スルファモ
イル−、ニトロ−、アミノ−、フェニル−、ベンゾイル
−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、
Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキルカルボニル基を表しかつα−位でな
いメチレン基は酸素、硫黄又は場合により１回置換され
たイミノ基によって置換されていてもよく、前記式中Ｒ
⁵⁰は、水素、フェニル−、ピリジル−、フリル−、ピロ
リル−、チエニル−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル
−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−アルコキシ
−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル基から選択された、同じか
又は異なる結合手１個の基を表わし、この際フェニル
−、ピリジル−、フリル−、ピロリル−及びチエニル基
は未置換であるか又は基Ｒ⁵¹によって１回以上置換され
ていてもよく、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁
〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−及びＣ₁
〜Ｃ₁₀−カルボニル基は飽和又は不飽和で、枝分れ又は
枝なしであってよくかつ基Ｒ⁵¹によって１回以上置換さ
れていてもよく、前記Ｒ⁵¹は同じか又は異なっておりか
つヒドロキシ−、ホルミル−、カルボキシ基、カルボキ
シ基のエステル又は塩、カルバモイル−、スルホノ−、
スルファモイル−、ニトロ−、アミノ−、フェニル−、
Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基を表わ
し、Ｒ⁵²は、フェニレン−、ピリジレン−、チエニレン
−、フリレン−、ピロリレン−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−
アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキレン−、Ｃ₁〜Ｃ₅−ア
ルキレンジオキシ基の群から選択された結合手２個の基
を表わし、この際フェニレン−、ピリジレン−、チエニ
レン−、フリレン−、ピロリレン基は未置換であるか又
は基Ｒ⁵³で１回以上置換されていてもよくかつアリール
−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁
〜Ｃ₅−アルコキシ基は飽和又は不飽和で、枝分れ又は
枝なしであってよくかつ基Ｒ⁵¹で１回以上置換されてい
てもよく、前記式中ｐは０又は１を表わす。

【０１２５】媒介剤としては殊には、一般式ＸＩＸ〜Ｘ
ＸＩＩにおいて、Ａｌｋ¹は同じか又は異なっておりか
つＣ原子１〜１０個を有する結合手１個の、線状又は枝
分れ又は環状の飽和又は不飽和アルキル基を表わし、前
記アルキル基は、同じか又は異なっておりかつヒドロキ
シ−、カルバモイル−、カルボキシ基、カルボキシ基の
エステル又は塩、スルホノ基、スルホノ基のエステル又
は塩、スルファモイル−、アミノ−、フェニル−、Ｃ₁
〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₅−カルボニル基の群か
ら選択されている基Ｒ⁴⁸１個以上によって置換されてい
てもよく、この際カルバモイル−、スルファモイル−、
アミノ−及びフェニル基は未置換であるか又は基Ｒ⁴⁹に
よって１回以上置換されていてもよくかつＣ₁〜Ｃ₅−ア
ルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル基は飽和又は不飽
和で、枝分れ又は枝なしであってよくかつ基Ｒ⁴⁹によっ
て１回以上置換されていてもよく、前記Ｒ⁴⁹は同じか又
は異なっておりかつヒドロキシ−、カルボキシ基、カル
ボキシ基のエステル又は塩、カルバモイル−、スルホノ
−、スルファモイル−、ニトロ−、アミノ−、フェニル
−、ベンゾイル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−
アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキルカルボニル基を表わ
しかつ前記式においてＲ⁵⁰は、水素、フェニル−、フリ
ル−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−
アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カ
ルボニル基の群から選択された、同じか又は異なる結合
手１個の基を表わし、この際フェニル−及びフリル基は
未置換であるか又は基Ｒ⁵¹で１回以上置換されていても
よくかつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂
−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−及びＣ₁〜Ｃ₁₀
−カルボニル基は、飽和又は不飽和で、枝分れ又は枝な
しであってよくかつ基Ｒ⁵¹によって１回以上置換されて
いてもよく、ここでＲ⁵¹は同じか又は異なっておりかつ
カルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、カルバ
モイル−、フェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜
Ｃ₅−アルコキシ基を表わし、Ｒ⁵²は、フェニレン−、
フリレン−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキレン−、Ｃ₁〜Ｃ₅−ア
ルキレンジオキシ基の群から選択された結合手２個の基
を表わし、この際フェニレン−、フラニレン基は未置換
であるか又は基Ｒ⁵¹によって１回以上置換されていても
よくかつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂
−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基は飽和又は不飽
和で、枝分れ又は枝なしであってよくかつ基Ｒ⁵¹によっ
て１回以上置換されていてもよく、前記式中ｐは０又は
１を表わす、式ＸＩＸ〜ＸＸＩＩで示される化合物が好
ましい。

【０１２６】媒介剤として使用することのできる化合物
の例は次のとおりである：Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル
−安息香酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−ベン
ゼンスルホン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−
ｐ−トルエンスルホン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−
メチル−フラン−２−カルボン酸アミド、Ｎ−ヒドロキ
シ−Ｎ−メチル−チオフェン−２−カルボン酸アミド、
Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジメチル−フタル
酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジメ
チル−イソフタル酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ
−Ｎ，Ｎ′−ジメチル−テレフタル酸ジアミド、Ｎ，
Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジメチル−ベンゼン−
１，３−ジスルホン酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキ
シ−Ｎ，Ｎ′−ジメチル−フラン−３，４−ジカルボン
酸ジアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−安息香
酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−ベンゼン
スルホン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−
ｐ−トルエンスルホン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−
ｔ−ブチル−フラン−２−カルボン酸アミド、Ｎ−ヒド
ロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−チオフェン−２−カルボン酸
アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジ−ｔ−
ブチル−フタル酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−
Ｎ，Ｎ′−ジ−ｔ−ブチル−イソフタル酸ジアミド、
Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジ−ｔ−ブチル−
テレフタル酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，
Ｎ′−ジ−ｔ−ブチル−ベンゼン−１，３−ジスルホン
酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジ−
ｔ−ブチル−フラン−３，４−ジカルボン酸ジアミド、
Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−シクロヘキシル−安息香酸アミ
ド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−シクロヘキシル−ベンゼンス
ルホン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−シクロヘキシル
−ｐ−トルエンスルホン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ
−シクロヘキシル−フラン−２−カルボン酸アミド、Ｎ
−ヒドロキシ−Ｎ−シクロヘキシル−チオフェン−２−
カルボン酸アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′
−ジシクロヘキシル−フタル酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジ
ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシル−イソフタル
酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジシ
クロヘキシル−テレフタル酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒ
ドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシル−ベンゼン−
１，３−ジスルホン酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキ
シ−Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシル−フラン−３，４−ジ
カルボン酸ジアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピ
ル−安息香酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピ
ル−ベンゼン−スルホン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ
−イソプロピル−ｐ−トルエンスルホン酸アミド、Ｎ−
ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−フラン−２−カルボン
酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−チオフ
ェン−２−カルボン酸アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ
−Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピル−フタル酸ジアミド、Ｎ，
Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピル−イソ
フタル酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′
−ジイソプロピル−テレフタル酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−
ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピル−ベンゼン−
１，３−ジスルホン酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキ
シ−Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピル−フラン−３，４−ジカ
ルボン酸ジアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−アセ
トアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−アセトア
ミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−アセトアミ
ド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−シクロヘキシル−アセトアミ
ド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−ピバリン酸アミド、
Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−ピバリン酸アミ
ド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−アクリルアミド、Ｎ
−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−アクリルアミド、Ｎ−
ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−アクリルアミド、Ｎ−
ヒドロキシ−Ｎ−シクロヘキシル−アクリルアミド、Ｎ
−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミド、Ｎ
−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−メタンスルホンアミ
ド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−メチルカルバ
メート、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オキソ−酪
酸アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジベン
ゾイル−エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−
Ｎ，Ｎ′−ジメチル−コハク酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジ
ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジ−ｔ−ブチル−マレイン酸ジ
アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−マレイン酸
モノアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジ−
ｔ−ブチル−シュウ酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキ
シ−Ｎ，Ｎ′−ジ−ｔ−ブチル−リン酸ジアミド。

【０１２７】媒介剤としては、次の群から選択される化
合物が好ましい：Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−安息香
酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−ベンゼンスル
ホン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−ｐ−トル
エンスルホン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−
フラン−２−カルボン酸アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキ
シ−Ｎ，Ｎ′−ジメチル−フタル酸ジアミド、Ｎ，Ｎ′
−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジメチル−テレフタル酸ジ
アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジメチル
−ベンゼン−１，３−ジスルホン酸ジアミド、Ｎ−ヒド
ロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−安息香酸アミド、Ｎ−ヒドロ
キシ−Ｎ−ｔ−ブチル−ベンゼンスルホン酸アミド、Ｎ
−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−ｐ−トルエンスルホン
酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−フラン−
２−カルボン酸アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，
Ｎ′−ジ−ｔ−ブチル−テレフタル酸ジアミド、Ｎ−ヒ
ドロキシ−Ｎ−イソプロピル−安息香酸アミド、Ｎ−ヒ
ドロキシ−Ｎ−イソプロピル−ｐ−トルエンスルホン酸
アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−フラン−
２−カルボン酸アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，
Ｎ′−ジイソプロピル−テレフタル酸ジアミド、Ｎ，
Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピル−ベン
ゼン−１，３−ジスルホン酸ジアミド、Ｎ−ヒドロキシ
−Ｎ−メチル−アセトアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ
−ブチル−アセトアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−イソプ
ロピル−アセトアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−シクロヘ
キシル−アセトアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−
ピバリン酸アミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−
アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−イソプロピル−
アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−３−オ
キソ−酪酸アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′
−ジベンゾイル−エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ′−ジヒド
ロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジ−ｔ−ブチル−マレイン酸ジアミ
ド、Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−ｔ−ブチル−マレイン酸モノ
アミド、Ｎ，Ｎ′−ジヒドロキシ−Ｎ，Ｎ′−ジ−ｔ−
ブチル−シュウ酸ジアミド。

【０１２８】さらに媒介剤は、一般式ＸＸＩＩＩ又はＸ
ＸＩＶ：

【０１２９】

【化１１】

【０１３０】で示されるオキシムならびにそれらの塩、
エーテル又はエステルの群から選択されていてもよく、
前記式中Ｕは同じか又は異なっておりかつＯ、Ｓ又はＮ
Ｒ⁵³を表わし、ここでＲ⁵³は水素、ヒドロキシ−、ホル
ミル−、カルバモイル−、スルホノ基、スルホノ基のエ
ステル又は塩、スルファモイル−、ニトロ−、アミノ
−、フェニル−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ
₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜
Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキ
ル、ホスホ−、ホスホノ−、ホスホノオキシ基、ホスホ
ノオキシ基のエステル又は塩を表わし、この際カルバモ
イル−、スルファモイル−、アミノ−及びフェニル基は
未置換であるか又は基Ｒ⁵⁴によって１回以上置換されて
いてもよくかつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁
〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜
Ｃ_{1 0}−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル
基は飽和又は不飽和で、枝分れ又は枝なしであってよく
かつ基Ｒ⁵⁴によって１回以上置換されていてよく、ここ
でＲ⁵⁴は同じか又は異なっておりかつヒドロキシ−、ホ
ルミル−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は
塩、カルバモイル−、スルホノ基、スルホノ基のエステ
ル及び塩、スルファモイル−、ニトロ−、アミノ−、フ
ェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキ
シ基を表わし、前記式中基Ｒ⁵⁵及びＲ⁵⁶は同じか又は異
なっておりかつハロゲン−、カルボキシ基、カルボキシ
基のエステル又は塩を表わすか、又はＲ⁵³について挙げ
たものを表わすか、又は結合されて環［−ＣＲ⁵⁹Ｒ⁶⁰］
ｎ（ｎ＝２、３又は４）を形成しておりかつＲ⁵⁷及びＲ
⁵⁸はＲ⁵³について挙げたものを表わし、前記Ｒ⁵⁹及びＲ
⁶⁰は同じか又は異なっておりかつハロゲン−、カルボキ
シ基、カルボキシ基のエステル又は塩を表わすか又はＲ
⁵³について挙げたものを表わす。

【０１３１】特に媒介剤としては、一般式ＸＸＩＩＩに
おいてＵがＯ又はＳを表わしかつ残りの基が前記のもの
を表わす化合物が好ましい。このような化合物の例は２
−ヒドロキシイミノマロン酸ジメチルエステルである。

【０１３２】さらに媒介剤としては特に、一般式ＸＸＩ
Ｖの環状ウレイドのイソニトロン誘導体が好ましい。こ
のような化合物の例は１−メチルビオルル酸、１，３−
ジメチルビオルル酸、チオビオルル酸、アロキサン−
４，５−ジオキシムである。

【０１３３】特に媒介剤としては、アロキサン−５−オ
キシム水和物（ビオルル酸）及び／又はそのエステル、
エーテル又は塩が好ましい。

【０１３４】さらに媒介剤は、一般式ＸＸＶ又はＸＸＶ
Ｉ：

【０１３５】

【化１２】

【０１３６】で示されるビシナルニトロン置換芳香族ア
ルコールならびにそれらの塩、エーテル又はエステルの
群から選択されていてよく、前記式中、Ｒ⁶¹、Ｒ⁶²、Ｒ
⁶³及びＲ⁶⁴は同じか又は異なっておりかつ水素、ハロゲ
ン−、ヒドロキシ−、ホルミル−、カルバモイル−、カ
ルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、スルホノ
基、スルホノ基のエステル又は塩、スルファモイル−、
ニトロ−、ニトロソ−、シアノ−、アミノ−、フェニル
−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−ア
ルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カル
ボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、ホスホ
−、ホスホノ−、ホスホノオキシ基、ホスホノオキシ基
のエステル又は塩を表わし、この際カルバモイル−、ス
ルファモイル−、アミノ−及びフェニル基は未置換であ
るか又は基Ｒ⁶⁵によって１回以上置換されていてもよく
かつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−ア
ルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ_{1 0}−カル
ボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル基は飽和又
は不飽和で、枝分れ又は枝なしであってもよく、かつ基
Ｒ⁶⁵によって１回以上置換されていてもよく、ここでＲ
⁶⁵は同じか又は異なっておりかつヒドロキシ−、ホルミ
ル−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、
カルバモイル−、スルホノ−、スルファモイル−、ニト
ロ−、ニトロソ−、アミノ−、フェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−
アルキル−、Ｃ ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基を表わすか又は基
Ｒ⁶¹〜Ｒ⁶⁴は対をなして結合されて環［−ＣＲ⁶⁶Ｒ
⁶⁷−］ｍ（ｍは整数で１〜４の値を表わす）を形成して
いるか又は環［−ＣＲ⁶⁸＝ＣＲ⁶⁹−］ｎ（ｎは整数であ
って、１〜３の値を表わす）を形成しており、ここでＲ
⁶⁶、Ｒ⁶⁷、Ｒ⁶⁸及びＲ⁶⁹は同じか又は異なっておりかつ
Ｒ⁶¹〜Ｒ⁶⁴について記載したものを表わす。

【０１３７】芳香族アルコールとは、好ましくはフェノ
ール又はフェノールの高縮合誘導体を意味する。

【０１３８】媒介剤としては、一般式ＸＸＶ又はＸＸＶ
Ｉの化合物が好ましく、それらの合成は置換フェノール
のニトロソ化に帰することができる。このような化合物
の例は、２−ニトロソフェノール、３−メチル−６−ニ
トロソフェノール、２−メチル−６−ニトロソフェノー
ル、４−メチル−６−ニトロソフェノール、３−エチル
−６−ニトロソフェノール、２−エチル−６−ニトロソ
フェノール、４−エチル−６−ニトロソフェノール、４
−イソプロピル−６−ニトロソフェノール、４−ｔ−ブ
チル−６−ニトロソフェノール、２−フェニル−６−ニ
トロソフェノール、２−ベンジル−６−ニトロソフェノ
ール、４−ベンジル−６−ニトロソフェノール、２−ヒ
ドロキシ−３−ニトロソベンジルアルコール、２−ヒド
ロキシ−３−ニトロソ安息香酸、４−ヒドロキシ−３−
ニトロソ安息香酸、２−メトキシ−６−ニトロソフェノ
ール、３，４−ジメチル−６−ニトロソフェノール、
２，４−ジメチル−６−ニトロソフェノール、３，５−
ジメチル−６−ニトロソフェノール、２，５−ジメチル
−６−ニトロソフェノール、２−ニトロソレソルシン、
４−ニトロソレソルシン、２−ニトロソレソルシン、２
−ニトロソフロログルシン及び４−ニトロソピロガロー
ル、４−ニトロソ−３−ヒドロキシアニリン、４−ニト
ロ−２−ニトロソフェノールである。

【０１３９】さらに媒介剤としては、高縮合芳香族アル
コールのｏ−ニトロソ誘導体が好ましい。このような化
合物の例は、２−ニトロソ−１−ナフトール、１−メチ
ル−３−ニトロソ−２−ナフトール及び９−ヒドロキシ
−１０−ニトロソ−フェナントレンである。

【０１４０】特に媒介剤としては、１−ニトロソ−２−
ナフトール、１−ニトロソ−２−ナフトール−３，６−
ジスルホン酸、２−ニトロソ−１−ナフトール−４−ス
ルホン酸、２，４−ジニトロソ−１，３−ジヒドロキシ
ベンゼンならびに前記化合物のエステル、エーテル又は
塩が好ましい。

【０１４１】さらに媒介剤は、ヒドロキシ−又はアミノ
基に対するオルト位又はパラ位のニトロソ−又はメルカ
プト置換基を有するヒドロキシピリジン、アミノピリジ
ン、ヒドロキシキノリン、アミノキノリン、ヒドロキシ
イソキノリン、アミノイソキノリン、前記化合物の互変
異性体ならびにそれらの塩、エーテル及びエステルの群
から選択されていてもよい。

【０１４２】媒介剤としては好ましくは、一般式ＸＸＶ
ＩＩ、ＸＸＶＩＩＩ又はＸＸＩＸ：

【０１４３】

【化１３】

【０１４４】で示される化合物ならびにこれらの化合物
の互変異性体、塩、エーテル又はエステルが存在してお
り、式ＸＸＶＩＩ、ＸＸＶＩＩＩ及びＸＸＩＸにおいて
相互にオルト位又はパラ位に在る２個の基Ｒ⁷⁰はヒドロ
キシ−及びニトロソ基又はヒドロキシ−及びメルカプト
基又はニトロソ基及びアミノ基を表わし、残りの基Ｒ⁷⁰
は同じか又は異なっておりかつ水素、ハロゲン−、ヒド
ロキシ−、メルカプト−、ホルミル−、シアノ−、カル
バモイル−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル及
び塩、スルホノ基、スルホノ基のエステル及び塩、スル
ファモイル−、ニトロ−、ニトロソ−、アミノ−、フェ
ニル−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂
−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−
カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル−、ホ
スホ−、ホスホノ−、ホスホノオキシ基、ホスホノオキ
シ基のエステル及び塩の群から選択されており、この際
カルバモイル−、スルファモイル−、アミノ−、メルカ
プト−及びフェニル基は未置換であるか又は基Ｒ⁷¹によ
って１回以上置換されていてもよく、アリール−Ｃ₁〜
Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−
アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニル
−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル基は飽和又は不飽和で、枝分れ又
は枝なしであってよくかつ基Ｒ⁷¹によって１回以上置換
されていてもよく、ここでＲ⁷¹は同じか又は異なってい
てかつヒドロキシ−、ホルミル−、シアノ−、カルボキ
シ基、カルボキシ基のエステル又は塩、カルバモイル
−、スルホノ−、スルファモイル−、ニトロ−、ニトロ
ソ−、アミノ−、フェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、
Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基又はＣ₁〜Ｃ₅−アルキルカルボ
ニル基を表わし、基Ｒ⁷⁰又はＲ⁷¹の２個ずつまたはＲ⁷⁰
及びＲ⁷¹は対をなして橋［−ＣＲ⁷²Ｒ⁷³−］ｍ（ｍ＝
１，２，３又は４）により結合されていてもよくかつＲ
⁷²及びＲ⁷³は同じか又は異なっていてかつカルボキシ
基、カルボキシ基のエステル又は塩、フェニル−、Ｃ₁
〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基又はＣ₁〜
Ｃ₅−アルキルカルボニル基を表わしかつ隣接していな
い１個以上の基［−ＣＲ⁷²Ｒ⁷³−］は酸素、硫黄又は場
合によりＣ₁〜Ｃ₅−アルキル基によって置換されたイミ
ノ基によって置換されており、隣接する２個の基［−Ｃ
Ｒ⁷²Ｒ⁷³−］は基［−ＣＲ⁷²＝Ｒ⁷³−］によって置換さ
れていてもよい。

【０１４５】媒介剤としては特に、一般式ＸＸＶＩＩ又
はＸＸＶＩＩＩの化合物ならびにそれらの互変異性体、
塩、エーテル又はエステルが好ましく、この際式ＸＸＶ
ＩＩ及びＸＸＶＩＩＩにおいて特に好ましくは相互にオ
ルト位の２個の基Ｒ⁷⁰はヒドロキシ−及びニトロソ基又
はヒドロキシ−及びメルカプト基又はニトロソ基及びア
ミノ基を表わしかつ残りの基Ｒ⁷⁰は同じか又は異なって
いてかつ水素、ヒドロキシ−、メルカプト−、ホルミル
−、カルバモイル−、カルボキシ基、カルボキシ基のエ
ステル及び塩、スルホノ基、スルホノ基のエステル及び
塩、スルファモイル−、ニトロ−、ニトロソ−、アミノ
−、フェニル−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ
₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜
Ｃ₅−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル
−、ホスホ−、ホスホノ−、ホスホノオキシ基、ホスホ
ノオキシ基のエステル及び塩の群から選択されており、
この際カルバモイル−、スルファモイル−、アミノ−、
メルカプト−及びフェニル基は未置換か又は基Ｒ⁷¹で１
個以上置換されていてもよくかつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−
アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコ
キシ−、Ｃ₁〜Ｃ₅−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜
Ｃ₆−アルキル基は飽和又は不飽和で、枝分れ又は枝な
しであってよくかつ基Ｒ⁷¹によって１回以上置換されて
いてもよく、ここでＲ⁷¹はすでに挙げたものを表わしか
つ基Ｒ⁷¹の２個ずつが対をなして橋［−ＣＲ ⁷²Ｒ⁷³−］
ｍ（ｍ＝２、３又は４）により結合されていてもよくか
つＲ⁷²及びＲ ⁷³はすでに記載したものを表わしかつ隣接
していない１個以上の基［−ＣＲ⁷²Ｒ ⁷³−］は酸素又は
場合によりＣ₁〜Ｃ₅−アルキル基で置換されたイミノ基
によって置換されていてもよい。

【０１４６】媒介剤として使用されうる化合物の例は、
２，６−ジヒドロキシ−３−ニトロソピリジン、２，３
−ジヒドロキシ−４−ニトロソピリジン、２，６−ジヒ
ドロキシ−３−ニトロソピリジン−４−カルボン酸、
２，４−ジヒドロキシ−３−ニトロソピリジン、３−ヒ
ドロキシ−２−メルカプトピリジン、２−ヒドロキシ−
３−メルカプトピリジン、２，６−ジアミノ−３−ニト
ロソピリジン、２，６−ジアミノ−３−ニトロソピリジ
ン−４−カルボン酸、２−ヒドロキシ−３−ニトロソピ
リジン、３−ヒドロキシ−２−ニトロソピリジン、２−
メルカプト−３−ニトロソピリジン、３−メルカプト−
２−ニトロソピリジン、２−アミノ−３−ニトロソピリ
ジン、３−アミノ−２−ニトロソピリジン、２，４−ジ
ヒドロキシ−３−ニトロソキノリン、８−ヒドロキシ−
５−ニトロソキノリン、２，３−ジヒドロキシ−４−ニ
トロソキノリン、２，３−ジヒドロキシ−４−ニトロソ
キノリン、３−ヒドロキシ−４−ニトロソイソキノリ
ン、４−ヒドロキシ−３−ニトロソイソキノリン、８−
ヒドロキシ−５−ニトロソイソキノリン及びこれらの化
合物の互変異性体である。

【０１４７】媒介剤としては、２，６−ジヒドロキシ−
３−ニトロソピリジン、２，６−ジアミノ−３−ニトロ
ソピリジン、２，６−ジヒドロキシ−３−ニトロソピリ
ジン−４−カルボン酸、２，４−ジヒドロキシ−３−ニ
トロソピリジン、２−ヒドロキシ−３−メルカプトピリ
ジン、２−メルカプト−３−ピリジノール、２，４−ジ
ヒドロキシ−３−ニトロソキノリン、８−ヒドロキシ−
５−ニトロソキノリン、２，３−ジヒドロキシ−４−ニ
トロソキノリン及びこれらの化合物の互変異性体が好ま
しい。

【０１４８】さらに媒介剤としては、安定なニトロキル
ラジカル（ニトロキシド）の群から選択されていてもよ
い。すなわちこれらのフリーラジカルは純粋な形で得ら
れ、特性を調べかつ保管することができる。

【０１４９】この場合媒介剤としては、一般式ＸＸＸ、
ＸＸＸＩ又はＸＸＸＩＩ：

【０１５０】

【化１４】

【０１５１】で示される化合物を使用する。式中、Ａｒ
は結合手１個のホモ−又はヘテロ芳香族の単核又は二核
基を表わし、この芳香族基は、ハロゲン、ホルミル−、
シアノ−、カルバモイル−、カルボキシ基、カルボキシ
基のエステル又は塩、スルホノ基、スルホノ基のエステ
ル又は塩、スルファモイル−、ニトロ−、ニトロソ−、
アミノ−、フェニル−、アリール−Ｃ ₁〜Ｃ₅−アルキル
−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ
−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆
−アルキル−、ホスホ−、ホスホノ−、ホスホノオキシ
基、ホスホノオキシ基のエステル又は塩の群から選択さ
れる、同じか又は異なる基Ｒ⁷⁵によって、置換されてい
てもよく、この際フェニル−、カルバモイル−及びスル
ファモイル基は未置換であるか又は基Ｒ⁷⁶によって１回
以上置換されていてもよくかつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−ア
ルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコ
キシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜
Ｃ₆−アルキル基は飽和又は不飽和で、枝分れ又は枝な
しであってよくかつ基Ｒ⁷⁶によって１回以上置換されて
いてもよく、ここでＲ⁷⁶は１個以上存在していてよくか
つ同じか又は異なっていてかつヒドロキシ−、ホルミル
−、シアノ−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル
又は塩、カルバモイル−、スルホノ−、スルファモイル
−、ニトロ−、ニトロソ−、アミノ−、フェニル−、Ｃ
₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜
Ｃ₅−アルキルカルボニル基を表わし、Ｒ⁷⁴は同じか又
は異なっておりかつハロゲン、ヒドロキシ−、メルカプ
ト−、ホルミル−、シアノ−、カルバモイル−、カルボ
キシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、スルホノ基、
スルホノ基のエステル又は塩、スルファモイル−、ニト
ロ−、ニトロソ−、アミノ−、フェニル−、アリール−
Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜
Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボ
ニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル−、ホスホ−、ホスホノ−、
ホスホノオキシ基、ホスホノオキシ基のエステル又は塩
を表わしかつＲ⁷⁴はまた二環式の安定なニトロキシルラ
ジカル（構造ＸＸＸＩＩ）の場合には水素を表わしても
よく、この際カルバモイル−、スルファモイル−、アミ
ノ−、メルカプト−及びフェニル基は未置換であるか又
は基Ｒ⁷⁷によって１回以上置換されていてもよくかつア
リール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル
−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル
−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル基は飽和又は不飽
和で、枝分れ又は枝なしであってよくかつ基Ｒ⁷⁷によっ
て１回以上置換されていてもよく、ここでＲ⁷⁷は同じか
又は異なっていてかつヒドロキシ−、ホルミル−、シア
ノ−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、
カルバモイル−、スルホノ−、スルファモイル−、ニト
ロ−、ニトロソ−、アミノ−、フェニル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−
アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ基、Ｃ₁〜Ｃ₅−アル
キルカルボニル基を表わし、基Ｒ⁷⁶又はＲ⁷⁷の２個ずつ
は対をなして橋［−ＣＲ⁷⁸Ｒ⁷⁹−］ｍ（ｍ＝０、１、
２、３又は４）により結合されていてもよくかつＲ⁷⁸及
びＲ⁷⁹は同じか又は異なっていてかつハロゲン、カルボ
キシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、カルバモイル
−、スルファモイル−、フェニル−、ベンゾイル−、Ｃ
₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜
Ｃ₅−アルキルカルボニル基を表わしかつ隣接していな
い１個以上の基［−ＣＲ⁷⁸Ｒ⁷⁹−］は酸素、硫黄又は場
合によりＣ ₁〜Ｃ₅−アルキル基で置換されたイミノ基に
よって置換されていてもよく、隣接する２個の基［−Ｃ
Ｒ⁷⁸Ｒ⁷⁹］は基［−ＣＲ⁷⁸＝ＣＲ⁷⁹］、［−ＣＲ⁷⁸＝Ｎ
−］又は［−ＣＲ⁷⁸＝Ｎ（Ｏ）−］によって置換されて
いてもよい。

【０１５２】媒介剤としては特に、一般式ＸＸＸＩＩＩ
及びＸＸＸＩＶ：

【０１５３】

【化１５】

【０１５４】で示されるニトロキシルラジカルが好まし
い。式中、Ｒ⁸⁰は同じか又は異なっていてかつフェニル
−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−ア
ルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カル
ボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル基を表わ
し、この際フェニル基は未置換であるか又は基Ｒ⁸²によ
って１回以上置換されていてもよくかつアリール−Ｃ₁
〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ ₅
−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニ
ル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル基は飽和又は不飽和で、枝分れ
又は枝なしであってよくかつ基Ｒ⁸²によって１回以上置
換されていてもよく、ここでＲ⁸²は１個以上存在してい
てよくかつ同じか又は異なっていてかつヒドロキシ−、
ホルミル−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル又
は塩、カルバモイル−、スルホノ−、スルファモイル
−、ニトロ−、ニトロソ−、アミノ−、フェニル−、ベ
ンゾイル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコ
キシ基、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキルカルボニル基を表わしかつ
Ｒ⁸¹は同じか又は異なっていてかつ水素、ヒドロキシ
−、メルカプト−、ホルミル−、シアノ−、カルバモイ
ル−、カルボキシ基、カルボキシ基のエステル又は塩、
スルホノ基、スルホノ基のエステル又は塩、スルファモ
イル−、ニトロ−、ニトロソ−、アミノ−、フェニル
−、アリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−ア
ルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−カル
ボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル−、ホスホ
−、ホスホノ−、ホスホノオキシ基、ホスホノオキシ基
のエステル又は塩を表わし、この際カルバモイル−、ス
ルファモイル−、アミノ−、メルカプト−及びフェニル
基は未置換であるか又は基Ｒ⁷⁶によって１回以上置換さ
れていてもよくかつアリール−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキル−、
Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル−、Ｃ₁〜Ｃ₅−アルコキシ−、Ｃ₁
〜Ｃ₁₀−カルボニル−、カルボニル−Ｃ₁〜Ｃ₅−アルキ
ル基は飽和又は不飽和で、枝分れ又は枝なしであってよ
くかつ基Ｒ⁷⁶によって１回以上置換されていてもよくか
つ［−ＣＲ⁸¹Ｒ⁸¹−］基は酸素、場合によりＣ₁〜Ｃ₅−
アルキル基で置換されたイミノ基、（ヒドロキシ）イミ
ノ基、カルボニル官能基又は場合によりＲ⁷⁶で１回又は
２回置換されたビニリデン官能基によって置換されてい
てもよくかつ隣接する２個の基［−ＣＲ⁸¹Ｒ⁸¹−］は基
［−ＣＲ⁸¹＝ＣＲ⁸¹−］又は［−ＣＲ ⁸¹＝Ｎ−］又は
［−ＣＲ⁸¹＝Ｎ（Ｏ）−］によって置換されていてもよ
い。

【０１５５】媒介剤として使用することのできる化合物
の例は次のとおりである：２，２，６，６−テトラメチ
ル−ピペリジン−１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）、４−ヒ
ドロキシ−２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン
−１−オキシル、４−オキソ−２，２，６，６−テトラ
メチル−ピペリジン−１−オキシル、４−アセトアミド
−２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−１−オ
キシル、４−（エトキシフルオロホスフィニルオキシ）
−２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−１−オ
キシル、４−（イソチオシアネート）−２，２，６，６
−テトラメチル−ピペリジン−１−オキシル、４−マレ
イミド−２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−
１−オキシル、４−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−
２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−１−オキ
シル、４−（ホスホノオキシ）−２，２，６，６−テト
ラメチル−ピペリジン−１−オキシル、４−シアノ−
２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−１−オキ
シル、３−カルバモイル−２，２，５，５−テトラメチ
ル−３−ピロリン−１−オキシル、４−フェニル−２，
２，５，５−テトラメチル−３−イミダゾリン−３−オ
キシド−１−オキシル、４−カルバモイル−２，２，
５，５−テトラメチル−３−イミダゾリン−３−オキシ
ド−１−オキシル、４−フェナシリデン−２，２，５，
５−テトラメチル−イミダゾリジン−１−オキシル、３
−（アミノメチル）−２，２，５，５−テトラメチル−
ピロリジン−Ｎ−オキシル、３−カルバモイル−２，
２，５，５−テトラメチル−ピロリジン−Ｎ−オキシ
ル、３−カルボキシ−２，２，５，５−テトラメチル−
ピロリジン−Ｎ−オキシル、３−シアノ−２，２，５，
５−テトラメチル−ピロリジン−Ｎ−オキシル、３−マ
レイミド−２，２，５，５−テトラメチル−ピロリジン
−Ｎ−オキシル、３−（４−ニトロフェノキシカルボニ
ル）−２，２，５，５−テトラメチル−ピロリジン−Ｎ
−オキシル。

【０１５６】媒介剤としては、次のものも好ましい：
２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−１−オキ
シル（ＴＥＭＰＯ）、４−ヒドロキシ−２，２，６，６
−テトラメチル−ピペリジン−１−オキシル、４−オキ
ソ−２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−１−
オキシル、４−アセトアミド−２，２，６，６−テトラ
メチル−ピペリジン−１−オキシル、４−（イソチオシ
アネート）−２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジ
ン−１−オキシル、４−マレイミド−２，２，６，６−
テトラメチル−ピペリジン−１−オキシル、４−（４−
ニトロベンゾイルオキシ）−２，２，６，６−テトラメ
チル−ピペリジン−１−オキシル、４−（ホスホノオキ
シ）−２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−１
−オキシル、４−シアノ−２，２，６，６−テトラメチ
ル−ピペリジン−１−オキシル、３−カルバモイル−
２，２，５，５−テトラメチル−３−ピロリン−１−オ
キシル、４−フェニル−２，２，５，５−テトラメチル
−３−イミダゾリン−３−オキシド−１−オキシル、４
−カルバモイル−２，２，５，５−テトラメチル−３−
イミダゾリン−３−オキシド−１−オキシル、４−フェ
ナシリデン−２，２，５，５−テトラメチル−イミダゾ
リジン−１−オキシル。

【０１５７】媒介剤としては、特に２，２，６，６−テ
トラメチル−ピペリジン−１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）
及び４−ヒドロキシ−２，２，６，６−テトラメチル−
ピペリジン−１−オキシルが好ましい。

【０１５８】また、有害な媒介剤の作用の全系からの回
避は、ＥＣ３.２.１のヒドロラーゼを使用することによ
って達成されうるが、このヒドロラーゼは活性化媒介剤
による変性に対して前記の使用にとって不利な、酵素特
性の変化を示さない（例えば媒介剤耐性キシラナーゼ又
はセルラーゼ）。

【０１５９】本発明の多成分系は、ＥＣ３.２.１のヒド
ロラーゼの群から選択された、少なくとも１種の酵素活
性添加剤を包含する。

【０１６０】ＥＣ３.２.１のヒドロラーゼは、好ましく
はヘミセルラーゼ、例えばキシラナーゼ、マンナーゼ又
はセルラーゼである。

【０１６１】酵素活性添加剤は、特に好ましくはエンド
１，４−β−キシラナーゼ（ＥＣ３.２.１.８）及び／
又はエンド１，４−β−グルカナーゼ（ＥＣ３.２.１.
４）である。

【０１６２】ＥＣ３.２.１のヒドロラーゼは、市販され
ているか又は標準方法により製造することができる。Ｅ
Ｃ３.２.１のヒドロラーゼは、天然の生物体から製出す
ることができるか又は適当な発現系における公知の組換
えＤＮＡ技術によって産出させかつ公知技術により培地
から単離することができる。同酵素の産生用生物体とし
ては、例えば植物、動物細胞、細菌及び真菌類（Ｐｉｌ
ｚｅ）が適当である。原則としては、天然に存在する生
物体も、遺伝的に変化された生物体も酵素産生体であっ
てよい。同様に単細胞又は多細胞生物の部分、なかんず
く細胞培養も酵素産生体として考えることができる。

【０１６３】またＥＣ３.２.１のヒドロラーゼは、公知
の分子生物学的方法によって、例えば同ヒドロラーゼを
活性化媒介剤又はタンパク質分解活性に対して不感受性
にすることによって、前記使用のために適当なように変
化させることもできる。

【０１６４】さらに本発明は、リグニン含有材料の脱リ
グニン化方法にも関し、該方法の特徴とするところは、
少なくとも１種のオキシドレダクターゼ、少なくとも１
種のオキシドレダクターゼにとって適当な酸化剤、オキ
シドレダクターゼ及びＥＣ３.２.１のヒドロラーゼの群
から選択された酵素を不活性化しない少なくとも１種の
媒介剤及び少なくとも１種のエンドヒドロラーゼを、同
時に又は任意の順序でリグニン含有材料の水性懸濁液と
混合することである。

【０１６５】意外にも本発明方法で、ラッカーゼ及び媒
介剤物質から成る酸化的脱リグニン化系を、加水分解酵
素、例えばキシラナーゼ及び／又はセルラーゼと唯一回
の方法工程で結合することが成功する。

【０１６６】この事実は、媒介剤としてＨＢＴを使用す
る場合にはラッカーゼ自体がその活性に関して侵害され
（Ａｍａｎｎ、１９９７）、同時に存在する酵素が不可
逆的に損なわれ、ひいては活性の減少を示す（Ｏｋｓａ
ｎｅｎ、１９９７）ことが公知であっただけに、それだ
け意外である。

【０１６７】本発明方法は次の利点を有する： −それはセルロースの被漂白性（Ｂｌｅｉｃｈｂａｒｋ
ｅｉｔ）を改善する、 −それは、確立された化学的方法工程と問題なく組合わ
せることができる。

【０１６８】例えばセルロース製造からの通常の方法工
程、例えばアルカリ抽出との組合せの場合にも、リグニ
ンは使用された材料から選択的に除去することができ
る。

【０１６９】本発明方法のためには、例えば植物起源の
リグニン含有材料、好ましくは木材パルプ−又はセルロ
ース製造の場合に常用される方法で離解されたような材
料を使用する。

【０１７０】使用される材料は、未漂白セルロース又は
化学的脱リグニン化−及び漂白方法ですでに処理されて
いる材料であってよい。

【０１７１】本発明方法では、好ましくは、リグニン含
有材料１ｇ（乾燥重量）当たりオキシドレダクターゼ
０．１〜１００ＩＵ、特に好ましくはリグニン含有材料
１ｇ当たり０．５〜２０ＩＵを使用する。

【０１７２】酸化剤の濃度は、好ましくは０．００１〜
５０ｍモル／ｌの範囲にある。酸化剤として過酸化水素
を使用する場合には、この濃度は好ましくは０．００１
〜２５ｍモル／ｌの範囲にある。

【０１７３】媒介剤は、好ましくは１〜５００ｍモル／
ｋｇセルロースの量で、特に好ましくは５〜３００ｍモ
ル／ｋｇセルロースの量で、特に１０〜２００ｍモル／
ｋｇセルロース（ａｔｒｏ−絶対乾燥）の量で使用す
る。

【０１７４】本発明方法においては、好ましくは酵素添
加剤としてセルラーゼ及び／又はヘミセルラーゼを使用
する。例えばセルラーゼ、キシラナーゼ又はマンナーゼ
を純粋な形又は混合物の形で使用することができる。キ
シラナーゼはすでにセルロースの加工時に使用され、い
くつものメーカー、例えばＮｏｖｏ−Ｎｏｒｄｉｓｋ
［プルプツィーメ（Ｐｕｌｐｚｙｍｅ）：登録商標］、
Ｃｌａｒｉａｎｔ［カルタツィーメ（Ｃａｒｔａｚｙｍ
ｅ）：登録商標］によって提供されている。同様にセル
ラーゼも市販されている。

【０１７５】酵素脱リグニン化のための本発明方法にお
いて調整される条件に応じて、これらの酵素の好適な変
種（ｐＨの最適値、温度安定性）を使用することができ
る。

【０１７６】本発明方法では、ＥＣ３.２.１のヒドロラ
ーゼを、酵素０．０１〜１０００ＩＵ／ｇセルロースの
適用量で、好ましくは酵素１〜５００ ＩＵ／ｇの適用
量で、特に好ましくは５〜１００ ＩＵ／ｇセルロース
（ａｔｒｏ−絶対乾燥）の適用量で使用する。

【０１７７】ヘミセルラーゼは、好ましくは酵素０．１
〜１０００ ＩＵ／ｇセルロースの適用量で、好ましく
は酵素１〜５００ ＩＵ／ｇセルロースの適用量で、特
に好ましくは５〜１００ ＩＵ／ｇセルロース（ａｔｒ
ｏ−絶対乾燥）の適用量で使用する。

【０１７８】セルラーゼは好ましくは、酵素０．０１〜
５００ ＩＵ／ｇセルロース、好ましくは酵素０．０５
〜１００ ＩＵ／ｇセルロース、特に好ましくは０．１
〜１０ ＩＵ／ｇセルロースの適用量で使用する。

【０１７９】本発明方法は通常、温度４０〜９０℃、好
ましくは４５〜７０℃、特に好ましくは４５〜６５℃で
行う。

【０１８０】また、使用された酵素の温度安定性に応じ
てそれとは異なる最適反応条件を調整することもでき
る。一般にｐＨ３〜ｐＨ１０の範囲で良好な脱リグニン
化成果が得られ、特にｐＨ４．５〜７のｐＨ範囲が好ま
しい。

【０１８１】ラッカーゼを使用する場合には、溶解酸素
を十分に使用できることが不可欠な条件である。選択さ
れた温度に応じて該系に十分に高い圧力をかけることに
よって十分な酸素濃度を保証することができる。必要な
酸素分圧は、すでに静水圧によって保証されているか、
又は酸素を含む適当な混合ガス、例えば空気又は純粋な
酸素ガスにより適当な圧力をかけることによって達成す
ることができる。

【０１８２】通常の圧力範囲は、０．１〜２０バールの
酸素分圧（ｐＯ₂）の範囲、好ましくは０．３〜１０バ
ールの圧力範囲にある。

【０１８３】該方法は媒介剤、酵素適用量及び反応条件
の選択に応じていろいろな速度で進行しうる。通常の反
応時間は３０分〜２時間である。

【０１８４】本発明方法のセルロース濃度（物質濃度）
は通常１〜２５％の範囲、好ましくは６〜２０％の範
囲、特に好ましくは１０〜１５％範囲にある。

【０１８５】次の実施例により本発明をさらに説明す
る。例中では次の成分を使用する： 媒介剤：媒介剤は、アルドリッヒ（Ａｌｄｒｉｃｈ）
社、メルク（Ｍｅｒｃｋ）社又はヤンセン（Ｊａｎｓｓ
ｅｎ）社から購入するか又は常法及び一般に公知の方法
により製造した。若干の媒介剤は、明細書中では次のよ
うに略語で表わす：１−ＯＨ−ベンゾトリアゾール（Ｈ
ＢＴ）、ビオルル酸（Ｖｉｏ）、Ｎ−ＯＨ−アセトニト
リド（ＮＨＡ）。

【０１８６】酵素： ラッカーゼ：トラメテス・ベルシコロル（Ｔｒａｍｅｔ
ｅｓ ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）から発酵により得られた
ラッカーゼを使用した。

【０１８７】活性の測定：ラッカーゼの活性は、好気性
条件下における２，２′−アジノ−ビス−（３−エチル
ベンゾチアゾリン−６−スルホネート）＝ＡＢＴＳ（Ｂ
ｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ製）の酸化によ
り測定する。酵素反応により生じる緑色を、４２０ｎｍ
で測光により測定する。反応温度は２５℃、ｐＨは４・
５である。ラッカーゼ単位は、所与の条件下におけるＡ
ＢＴＳ １モル／ｍｉｎの変換を触媒する酵素の量であ
る。変換率の計算のためには、３６０００Ｍ^-1ｃｍ^-1の
吸光係数を使用する。

【０１８８】セルラーゼ：フルカ（Ｆｌｕｋａ）社［ト
リコデルマ・ビリド（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｖｉｒｉ
ｄｅ）］、シグマ（Ｓｉｇｍａ）社［アスペルギルス・
ニゲル（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）、トリ
コデルマ・ビリド、ペニシリウム・フニクロスム（Ｐｅ
ｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｆｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍ）］、レ
ーム（Ｒｏｅｈｍ）社［ロハラーゼ（Ｒｏｈａｌａｓｅ
）７０６９］製の市販セルラーゼを使用した。

【０１８９】キシラナーゼ：フルカ社（トリコデルマ・
ビリド）又はクラリアント社製の市販キシラナーゼを使
用した。適用はメーカーの活性データにより行った。

【０１９０】セルロース：硬材（ＨＷ）及び軟材（Ｓ
Ｗ）のクラフトセルロース（Ｋｒａｆｔ Ｚｅｌｌｓｔ
ｏｆｆ）を使用した。

【０１９１】軟材：カッパ数１４．５（抽出後） 硬材：カッパ数１２（抽出後） 脱リグニン化の評価は、アルカリ抽出後の被処理セルロ
ースのカッパ数（Ｋａｐｐａ−Ｗｅｒｔ）の測定（ＴＡ
ＰＰＩ法Ｔ２３６による）によって行った。アルカリ抽
出（Ｅ−段階）は、物質濃度２％、６０℃でＮａＯＨ８
０ｇ／ｋｇセルロースを用いて、６０分間行った。

【０１９２】

【実施例】例１ キシラナーゼの同時的存在／不在におけるラッカーゼ−
媒介剤系（ＬＭＳ：登録商標）によるＳＷセルロースの
脱リグニン化の比較 ５００ｍｌの実験室用オートクレーブ中で、次表に記載
したバッチを４５℃で（水浴）２時間１０バールの酸素
分圧の適用下にインキュベートした（Ｌ−段階）。

【０１９３】Ｌ−段階 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：５ ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニド：９ｍｇ／ｇセルロー
ス ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ 酵素添加物、例えばキシラナーゼのプラス効果を確定す
るために、前記のＬ−段階に別の添加物としてトリコデ
ルマ・ビリド（フルカ社）のキシラナーゼを加える（Ｘ
Ｌ−段階）と、バッチは次のような組成になった：（ＸＬ）−段階 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：５ ＩＵ／ｇセルロース キシラナーゼ：５０ ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：９ｍｇ／ｇセルロ
ース ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ 両バッチに次に６０分間アルカリ抽出を施した（Ｅ−段
階）。

【０１９４】Ｅ−段階 物質濃度：２％ 温度：６０℃ アルカリ：ＮａＯＨ８０ｇ／ｋｇセルロース カッパ数の測定から脱リグニン化の度合いを確定した。
対照値はアルカリ抽出後の出発セルロースのカッパ数を
表わす。

【０１９５】

【表１】

【０１９６】キシラナーゼの添加は脱リグニン化を約３
０％増大させる。

【０１９７】例２ キシラナーゼの同時的存在／不在でのラッカーゼ−媒介
剤系（ＬＭＳ：登録商標）によるＨＷセルロースの脱リ
グニン化の比較 この例は例１と同様であるが、軟材セルロースの代りに
硬材セルロースを使用する点が異なる。５００ｍｌ実験
室用オートクレーブで次表に記載したバッチを４５℃で
（水浴）２時間１０バールの酸素分圧の適用下にインキ
ュベートした（Ｌ−段階）。

【０１９８】Ｌ−段階 硬材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：５ ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：９ｍｇ／ｇセルロ
ース ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ 酵素添加物、例えばキシラナーゼのプラス効果を確定す
るために、前記のＬ−段階に別の添加物としてトリコデ
ルマ・ピリド（フルカ社）のキシラナーゼを加える（Ｘ
Ｌ−段階）と、バッチは次のような組成になった：（ＸＬ）−段階 硬材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：５ ＩＵ／ｇセルロース キシラナーゼ：５０ ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：９ｍｇ／ｇセルロ
ース ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ 次に両バッチに６０分間アルカリ抽出を施した（Ｅ−段
階）。

【０１９９】Ｅ−段階 物質濃度２％ 温度：６０℃ アルカリ：ＮａＯＨ８０ｇ／ｋｇセルロース カッパ数の測定から脱リグニン化の度合いを確定した。
対照値はアルカリ抽出後の出発セルロースのカッパ数を
表わす。

【０２００】

【表２】

【０２０１】キシラナーゼの添加は脱リグニン化を約９
６％増大させる。

【０２０２】例３ ラッカーゼ−媒介剤系（ＬＭＳ：登録商標）によるセル
ロースの脱リグニン化に対する異なるキシラナーゼの影
響 異なるキシラナーゼの添加の影響を調べるために、例１
で記載した（ＸＬ）−段階と同様の脱リグニン化効果を
異なるキシラナーゼを使用して検べた。キシラナーゼと
しては次のものを使用した： クラリアント社：カルタツィーム（Ｃａｒｔａｚｙｍ）
ＨＳ１０、液体 フルカ社：トリコデルマ・ビリド・キシラナーゼ Ｌ及び（ＸＬ）−段階は例１と同様に行ったが、バッチ
はｐＨ６．０であった。キシラナーゼ適用量はそれぞれ
１２ ＩＵ／ｇセルロースであり、ラッカーゼは１５ Ｉ
Ｕ／ｇセルロースで供給した。

【０２０３】次に両バッチに６０分間アルカリ抽出を施
した（Ｅ−段階、例１）。カッパ数の測定から脱リグニ
ン化の度合いを確定した。

【０２０４】

【表３】

【０２０５】最適脱リグニン化を達成するためには、セ
ルロース、ＬＭＳ及びキシラナーゼのそれぞれ最良の組
合せを見出さねばならない。異なるキシラナーゼは、本
例が示すように、良好ではあるが異なる脱リグニン化を
もたらす。しかしすべての結果はキシラナーゼなしより
も優れている。

【０２０６】例４ キシラナーゼの同時的存在におけるラッカーゼ−媒介剤
系（ＬＭＳ：登録商標）による脱リグニン化の媒介剤依
存性 該系に対する媒介剤の影響を確定するために、例１で記
載した（ＸＬ）−段階の脱リグニン化効果を異なる媒介
剤を使用する場合に検べた。

【０２０７】媒介剤としては次のものを使用した（括弧
内は略語）：１−ＯＨ−ベンゾトリアゾール（ＨＢ
Ｔ）、ビオルル酸（Ｖｉｏ）、Ｎ−ＯＨ−アセトアニリ
ド（ＮＨＡ）、Ｎ−ＯＨ−フタルイミド（ＨＰＩ）、１
−ニトロソ−２−ナフトール−３，６−ジスルホン酸二
ナトリウム塩水和物（１−ＮＮＳ）、２−ニトロソ−１
−ナフトール−４−スルホン酸四水和物（２−ＮＮ
Ｓ）。

【０２０８】バッチは例１のように調製した。詳細には
次のとおりである：（ＸＬ）−段階 （媒介剤依存性） 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ ＩＵ／ｇセルロース キシラナーゼ（トリコデルマ）：２５ ＩＵ／ｇセルロ
ース 媒介剤：７５ｍモル／ｋｇセルロース ｐＨ値：６．０ 全液体容積：５０ｍｌ 次にそれぞれのバッチに、例１で記載したように、６０
分間アルカリ抽出を施した（Ｅ−段階）。カッパ数の測
定から脱リグニン化の度合いを確定した。対照値はアル
カリ抽出後の出発セルロースのカッパ数を表わす。

【０２０９】

【表４】

【０２１０】キシラナーゼの効果は、使用した媒介剤に
著しく依存している。１−ＯＨ−ベンゾトリアゾール
（ＨＢＴ）を使用する場合には、脱リグニン化は殆ど増
大され得ない（＋５％）けれども、他の媒介剤に関して
は著しい増大が認められうる（例えばＮＨＡは＋１７．
８％）。

【０２１１】例５ キシラナーゼの同時的存在におけるラッカーゼ−媒介剤
系（ＬＭＳ：登録商標）によるセルロースの脱リグニン
化のｐＨ依存性 該系に対するｐＨ値の影響を確定するために、例１で記
載した（ＸＬ）−段階の脱リグニン化効果を種々のｐＨ
値で検べた。対照としてキシラナーゼを含まない相応の
バッチを使用した（Ｌ−段階）。バッチは例１と同様に
して調整した。バッチは詳細には次のとおりである：（ＸＬ）−段階 （ｐＨ依存性） 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ−カッパ数１４．５ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース キシラナーゼ（トリコデルマ・ビリド）：２５ＩＵ／ｇ
セルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：９ｍｇ／ｇセルロ
ース ｐＨ値：４／５／６／７［マクイルベイン（ＭｃＩｌｌ
ｖａｉｎｅ）緩衝液）を用いる］ 全液体容積：５０ｍｌ 両バッチに次にアルカリ抽出を６０分間施す（Ｅ段
階）。

【０２１２】カッパ数の測定から脱リグニン化の度合い
を確定した。

【０２１３】

【表５】

【０２１４】ラッカーゼ媒介剤系にキシラナーゼを加え
ることによって性能の著しい改善を達成することができ
る。この効果は明らかなｐＨ依存性を示す。しかしすべ
てのｐＨ値でキシラナーゼの添加によって改善を達成す
ることができる。

【０２１５】例６ 種々の量のキシラナーゼの同時的存在におけるラッカー
ゼ−媒介剤系（ＬＭＳ：登録商標）によるセルロースの
脱リグニン化の依存性（適用量依存性） 該系に対するキシラナーゼ適用量の影響を確定するため
に、例１で記載した（ＸＬ）−段階の脱リグニン化効果
を種々のキシラナーゼの適用量で検べた。対照として
は、キシラナーゼを含まない相応のバッチを使用した
（Ｌ−段階）。例１と同様にしてバッチを調製した。詳
細には次のとおりである：Ｌ−段階 （キシラナーゼなしの参照値） 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：５ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：９ｍｇ／ｇセルロ
ース ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ（ＸＬ）−段階 （種々のキシラナーゼ量） 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ−カッパ数１４．５ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：５ＩＵ／ｇセルロース キシラナーゼ（トリコデルマ・ビリド）：１２．５／２
５／３７．５／５０／１００／２００ＩＵ／ｇセルロー
ス 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１１ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ インキュベーション後に該バッチに６０分間アルカリ抽
出を施した（Ｅ−段階）。

【０２１６】カッパ数の測定から脱リグニン化の度合い
を確定した。

【０２１７】

【表６】

【０２１８】ラッカーゼ−媒介剤系の効果の改善はキシ
ラナーゼの適用量に依存している。

【０２１９】例７ 添加物としてセルラーゼを含有するラッカーゼ−媒介剤
系（ＬＭＳ：登録商標）によるＳＷセルロースの脱リグ
ニン化 ５００ｍｌ実験室用オートクレーブで、次表に記載した
参照バッチを、４５℃（水浴）で２時間１０バールの酸
素分圧の適用下でインキュベートした（Ｌ−段階）。

【０２２０】Ｌ−段階（比較実験） 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ 酵素添加剤、例えばセルラーゼのプラス効果を確定する
ために、Ｌ−段階にあたるバッチに別の添加物としてト
リコデルマ・ビリド（シグマ社）のセルラーゼを加える
（ＣＬ−段階）と、バッチは次のような組成になった：（ＣＬ）−段階 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース セルラーゼ：１０Ｕ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ 次に両バッチに６０分間アルカリ抽出を施した（Ｅ−段
階）。

【０２２１】Ｅ−段階 物質濃度：２％ 温度：６０℃ アルカリ：ＮａＯＨ８０ｇ／ｋｇセルロース 両バッチのカッパ数の測定から脱リグニン化の度合いを
確定した。対照値はアルカリ抽出後の出発セルロースの
カッパ数を示す。

【０２２２】

【表７】

【０２２３】セルラーゼの添加は、セルラーゼを含まな
い参照バッチに対して軟材セルロースの脱リグニン化を
４３％増大させる。

【０２２４】例８ 添加剤としてセルラーゼを含有するラッカーゼ−媒介剤
系（ＬＭＳ：登録商標）によるＨＷセルロースの脱リグ
ニン化 ５００ｍｌ実験室用オートクレーブで次表に記載した参
照バッチを４５℃（水浴）で２時間１０バールの酸素分
圧の適用下でインキュベートした（Ｌ−段階）。

【０２２５】Ｌ−段階（比較実験） 硬材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ 酵素添加剤、例えばセルラーゼのプラス効果を確定する
ために、Ｌ−段階にあたるバッチに別の添加物としてト
リコデルマ・ビリド（シグマ社）のセルラーゼを加える
（ＣＬ−段階）と、バッチは次のような組成になった：（ＣＬ）−段階 硬材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース セルラーゼ：１０Ｕ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：４．５ 全液体容積：５０ｍｌ 次に両バッチに６０分間アルカリ抽出を施した（Ｅ−段
階）。

【０２２６】Ｅ−段階 物質濃度：２％ 温度：６０℃ アルカリ：ＮａＯＨ８０ｇ／Ｋｇセルロース 両バッチのカッパ数の測定から脱リグニン化の度合いを
確定した。対照値はアルカリ抽出後の出発セルロースの
カッパ数を示す。

【０２２７】

【表８】

【０２２８】セルラーゼの添加は、セルラーゼを含まな
い参照系に対して硬材セルロースの脱リグニン化を１０
８％増大させる。

【０２２９】例９ 異なる媒介剤を使用する場合のラッカーゼ−媒介剤系
（ＬＭＳ：登録商標）によるセルラーゼ活性の影響 セルロースの脱リグニン化能力に対する効果は、セルラ
ーゼがラッカーゼ−媒介剤系の存在で酵素的に活性であ
る場合のみ、観察されうる。従ってセルラーゼの活性
は、ラッカーゼ及び媒介剤を含有する、セルロースを含
まない系で測定した。アスペルギルス・ニゲル（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）及びトリコデルマ・ビ
リドからのセルラーゼを試験した。媒介剤としては、１
−ＯＨ−ベンゾトリアゾール（ＨＢＴ）、ビオルル酸
（Ｖｉｏ）及びＮ−ＯＨ−アセトニトリド（ＮＨＡ）を
使用した。

【０２３０】セルラーゼ活性の測定は、酸化剤としてジ
ニトロサリチル酸（ＤＮＳＡ）を用いる光学的試験で次
のように行った。

【０２３１】バッチ バッチは１０ｍｌの全容積中にｐＨ値６．２でセルラー
ゼ２０ｍｇ、ラッカーゼ０．８ｍｇ及び媒介剤７５μモ
ルを含有していた。種々の時間後にバッチから５０μｌ
ずつ取出して、セルラーゼ活性を測定した。

【０２３２】セルラーゼ試験 原理：酵素加水分解によってカルボキシメチルセルロー
ス（ＣＭＣ）から遊離される還元糖の量を測定する。次
に続く、添加されたＤＮＳＡと酵素により生成された還
元糖末端とのレドックス反応により溶液の着色がもたら
され、この着色が５９５ｎｍで測定的に定量化されう
る。

【０２３３】酵素試験のために、試験緩衝液（クエン酸
塩／リン酸塩０．１モル／ｌ、ｐＨ６．２、ＮａＣｌ
０．４モル／ｌを含む）３２５μｌ、ＣＭＣ溶液（試験
緩衝中２％；Ｎａ塩）１２５μｌ及び被検セルラーゼ含
有溶液５０μｌをピペットにより一緒にし、４５℃で異
なる時間でインキュベートする。インキュベーションの
経過後に各バッチにＤＮＳＡ溶液（３，５−ジニトロサ
リチル酸１ｇ、フェノール０．２ｇ、Ｎａ_２ＳＯ
_３ ０．０５ｇ及びＮａＫ−酒石酸塩２０ｇを１％Ｎａ
ＯＨ１００ｍｌに溶かす）７５０μｌを加え、この混合
物を次に９５℃で２０分加熱する。この溶液を氷で冷却
し、場合により沈殿する物質を遠心分離し［２分、１４
０００ｒｐｍ、エペンドルフ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）遠
心分離器］、上澄みにおいて５９５ｎｍで吸光度を測定
する。還元糖の生成を較正曲線（グルコース）との比較
によって定量化することができる。この場合、所定の条
件下で１分間にＣＭＣセルロースからグルコース１μモ
ルを遊離するところの酵素活性を１単位（ＩＵ）と称す
る。

【０２３４】第９表：異なる媒介剤（ＨＢＴ、ＮＨＡ、
Ｖｉｏ）を使用する場合のラッカーゼ−媒介剤系の存在
におけるアスペルギルス・ニゲルのセルラーゼ活性の時
間依存性。数字は相対セルラーゼ活性を出発値のパーセ
ントで示す（相対％）。

【０２３５】

【表９】

【０２３６】第１０表：異なる媒介剤（ＨＢＴ、ＮＨ
Ａ、Ｖｉｏ）を使用する場合のラッカーゼ媒介剤系の存
在におけるトリコデルマ・ビリドのセルラーゼ活性の時
間依存性。数字は相対セルラーゼ活性を出発値のパーセ
ントで示す（相対％）。

【０２３７】

【表１０】

【０２３８】Ａ．ニゲル及びＴ．ビリドからのセルラー
ゼの酵素活性は、ラッカーゼ媒介剤系中での同時インキ
ュベーションの場合に減少する。媒介剤としてＮＨＡを
用いると損失は最小になる。使用する酵素の依存性も同
様に認められうる。

【０２３９】例１０ 添加剤として異なる起源のセルラーゼを含有するラッカ
ーゼ−媒介剤系（ＬＭＳ：登録商標）によるＳＷセルロ
ースの脱リグニン化 ５００ｍｌ実験室用オートクレーブで次表に記載した参
照バッチを、４５℃（水浴）で２時間１０バールの酸素
分圧の適用下でインキュベートした（Ｌ−段階）。

【０２４０】Ｌ−段階（比較実験） 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：セルラーゼに応じたｐＨ５〜６（表） 全液体容積：５０ｍｌ 酵素添加剤、例えばセルラーゼのプラス効果を確定する
ために、Ｌ−段階にあたるバッチに別の添加物として異
なるメーカーのセルラーゼを加える（ＣＬ−段階）と、
バッチは次のような組成になった：（ＣＬ）−段階 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース セルラーゼ（異なる起源）：１０Ｕ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：セルラーゼに応じてｐＨ５〜６（第１１表） 全液体容積：５０ｍｌ 次に両バッチに６０分間アルカリ抽出を施した（Ｅ−段
階）。

【０２４１】Ｅ−段階 物質濃度：２％ 温度：６０℃ アルカリ：ＮａＯＨ８０ｇ／ｋｇセルロース 両バッチのカッパ数の測定から、脱リグニン化の度合い
を確定した。対照値はアルカリ抽出後の出発セルロース
のカッパ数を示す。

【０２４２】第１１表：実験評価 異なる起源のセルラーゼの同時的存在におけるラッカー
ゼ媒介剤系による脱リグニン化の改善

【０２４３】

【表１１】

【０２４４】使用したすべてのセルラーゼを用いて、ラ
ッカーゼ媒介剤系の脱リグニン化能力は改善されうる。

【０２４５】例１１ 添加剤としてセルラーゼを含有するラッカーゼ媒介剤系
（ＬＭＳ：登録商標）による脱リグニン化に対するセル
ラーゼ適用量の影響 ５００ｍｌ実験室用オートクレーブで次表に記載した参
照バッチを４５℃（水浴）で２時間１０バールの酸素分
圧の適用下にインキュベートした（Ｌ−段階）。

【０２４６】Ｌ−段階（比較実験） 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：ｐＨ６ 全液体容積：５０ｍｌ 酵素添加剤（セルラーゼ）のプラス効果を確定するため
に、Ｌ−段階にあたるバッチに別の添加物として種々の
量のセルラーゼを加える（ＣＬ−段階）と、バッチは次
のような組成になった：（ＣＬ）−段階 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース セルラーゼ（トリコデルマ・ビリドーシグマ社）：０〜
３０Ｕ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：６ 全液体容積：５０ｍｌ 次に両バッチに６０分間アルカリ抽出を施した（Ｅ−段
階）。

【０２４７】Ｅ−段階 物質濃度：２％ 温度：６０℃ アルカリ：ＮａＯＨ８０ｇ／ｋｇセルロース 両バッチのカッパ数の測定から脱リグニン化の度合いを
確定した。対照値はアルカリ抽出後の出発セルロースの
カッパ数を示す。セルロースに対する結合処理（ｋｏｍ
ｂｉｎｉｅｒｔｅ Ｂｅｈａｎｄｌｕｎｇ）の影響を検
べるために、セルロース試料の粘度を検べた。粘度測定
はＴＡＰＰＩによる規定に従って行う。粘度のデータは
ｍｌ／ｇで記述する。

【０２４８】第１２表：実験評価：セルラーゼ含有連続
系（Ｓｅｑｕｅｎｚ）（ＣＬ）Ｅを使用する場合のセル
ロースの脱リグニン化及び粘度に対するセルラーゼ適用
量の影響

【０２４９】

【表１２】

【０２５０】セルラーゼ適用量の増大によって、９Ｕ／
ｇセルロースの範囲まで脱リグニン化能力の改善が得ら
れる。適用量をさらに増大させてももはや改善は得られ
ない。セルロースの粘度は約３Ｕ／ｇの適用量まで殆ど
変らない。適用量がさらに増大すると粘度の明らかな低
減が起こる。適当な適用量（例えば３Ｕ／ｇ）の場合に
は、セルラーゼのプラス効果を、繊維の損傷（粘度の低
減）をすでに招くことなく脱リグニン化の改善のために
利用することができる。

【０２５１】例１２ 添加剤としてセルラーゼを含有するラッカーゼ−媒介剤
系（ＬＭＳ：登録商標）による脱リグニン化に対するｐ
Ｈ値の影響 ｐＨ値の影響を証明するために、ｐＨ値の異なるバッチ
において脱リグニン化を比較した。５００ｍｌの実験室
用オートクレーブで次表に記載したバッチを４５℃（水
浴）で２時間１０バールの水素分圧の適用下にインキュ
ベートした（ＣＬ−段階）。

【０２５２】（ＣＬ）−段階 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース トリコデルマ・ビリド（シグマ社）からのセルラーゼ：
２．５Ｕ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：４，５，６，７，８ 全液体容積：５０ｍｌ インキュベーション後にバッチに６０分間アルカリ抽出
を施した（Ｅ−段階）Ｅ−段階 物質濃度：２％ 温度：６０℃ アルカリ：ＮａＯＨ８０ｇ／ｋｇセルロース この系で脱リグニン化したセルロースのカッパ数の測定
から脱リグニン化の度合いを確定した。

【０２５３】第１３表：添加剤としてセルラーゼを含有
する（セルロースはＥ−段階後にカッパ数１６．６を有
する）ラッカーゼ−媒介剤系による脱リグニン化のｐＨ
依存性

【０２５４】

【表１３】

【０２５５】第１３表から添加物としてセルラーゼを含
有するラッカーゼ−媒介剤系が脱リグニン化においてｐ
Ｈ６で選択された成分にとって最適な、明瞭なｐＨプロ
フィールを示すことがわかる。

【０２５６】例１３ 添加剤としてセルラーゼを含有するラッカーゼ媒介剤系
（ＬＭＳ：登録商標）による脱リグニン化に対する媒介
剤の影響 ５００ｍｌ実験室用オートクレーブで次表に記載する参
照バッチを４５℃（水浴）で２時間１０バールの酸素分
圧の適用下にインキュベートした（Ｌ−段階）。

【０２５７】Ｌ−段階（比較実験） 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：６．０ 全液体容積：５０ｍｌ 酵素添加剤、例えばセルラーゼのプラス効果を確定する
ために、Ｌ−段階にあたるバッチに別の添加物としてト
リコデルマ・ビリド（シグマ社）のセルラーゼを加える
（ＣＬ−段階）と、バッチは次のような組成になった：（ＣＬ）−段階 軟材セルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース セルラーゼ：２．５Ｕ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：６．０ 全液体容積：５０ｍｌ 次に両バッチに６０分間アルカリ抽出を施した（Ｅ−段
階）。

【０２５８】Ｅ−段階 物質濃度：２％ 温度：６０℃ アルカリ：ＮａＯＨ８０ｇ／ｋｇセルロース カッパ数の測定から、脱リグニン化の度合いを確定し
た。出発セルロースはアルカリ抽出後に１６．６のカッ
パ数を有していた。

【０２５９】第１４表：セルラーゼを含まないラッカー
ゼ媒介剤系と比較した、添加剤としてセルラーゼを含有
する系による脱リグニン化（相対％）

【０２６０】

【表１４】

【０２６１】セルラーゼの添加は、使用したすべての媒
介剤の存在でセルラーゼを含まない参照系に対して軟材
セルロースの脱リグニン化を増大させる。

【０２６２】例１４ 添加剤としてセルラーゼ及びキシラナーゼを含有するラ
ッカーゼ媒介剤系（ＬＭＳ：登録商標）による、種々の
セルロースの脱リグニン化 ５００ｍｌの実験室用オートクレーブで次表に記載する
参照バッチを４５℃（水浴）で２時間１０バールの酸素
分圧の適用下でインキュベートした（Ｌ−段階）。

【０２６３】Ｌ−段階（比較実験） 異なるセルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：６．０ 全液体容積：５０ｍｌ 数種の同時に存在する酵素添加剤、例えばセルラーゼ及
びキシラナーゼのプラス効果を確定するために、Ｌ−段
階にあたるバッチに別の添加としてトリコデルマ・ビリ
ド（シグマ社）のセルラーゼ及びキシラナーゼを加える
（ＬＸＣ−段階）と、バッチは次のような組成になっ
た：（ＬＸＣ）−段階 異なるセルロース（絶対乾燥）５ｇ 物質濃度：１０％ ラッカーゼ：１５ＩＵ／ｇセルロース セルラーゼ：０．１Ｕ／ｇセルロース キシラナーゼ：２．０Ｕ／ｇ 媒介剤：Ｎ−ＯＨ−アセトアニリド：１０ｍｇ／ｇセル
ロース ｐＨ値：６．０ 全液体容積：５０ｍｌ すべてのバッチにインキュベーション後に６０分間アル
カリ抽出を施した（Ｅ−段階）。

【０２６４】Ｅ−段階 物質濃度：２％ 温度：６０℃ アルカリ：ＮａＯＨ８０ｇ／ｋｇセルロース カッパ数の測定から脱リグニン化の度合いを測定した。
ラッカーゼ／媒介剤（ＬＥ）による処理（比較実験）の
達成しうる脱リグニン化度（相対％）を、ラッカーゼ／
媒介剤／セルラーゼ／キシラナーゼ（ＬＸＣ）Ｅによる
処理の場合と比較した。

【０２６５】第１５表：セルラーゼ及びキシラナーゼを
添加物として加えたラッカーゼ媒介剤系−連続系（ＬＣ
Ｘ）Ｅ−の脱リグニン化と、添加物を含まない系−連続
系ＬＥの脱リグニン化との比較。種々のセルロースを実
験した。

【０２６６】

【表１５】

【０２６７】すべてのセルロースにおいて、セルラーゼ
及びキシラナーゼの同時添加によってラッカーゼ媒介剤
系による脱リグニン化が明らかに増大されうる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ミヒャエル ヴォールシュレーガー ドイツ連邦共和国 アイヒェナウ プフェ ファーミンツシュトラーセ 44 (72)発明者 ヨハネス フロイデンライヒ ドイツ連邦共和国 ミュンヘン ハッケン シュトラーセ 10 (72)発明者 ユルゲン シュトーラー ドイツ連邦共和国 プルアッハ ミヒル− ラング−ヴェーク ９ (72)発明者 エルケ フリッツ−ラングハルス ドイツ連邦共和国 オットーブルン アイ ヒェンドルフシュトラーセ 40

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 オキシドレダクターゼ、オキシドレダク
   ターゼにとって適当な酸化剤、媒介剤及び少なくとも１
   種の酵素活性添加剤を含有する、リグニン、リグニン含
   有材料又は類似材料を変化させ、分解し又は漂白するた
   めの多成分系において、媒介剤がオキシドレダクターゼ
   及び酵素活性添加剤を不活性化せずかつ酵素活性添加剤
   がＥＣ３．２．１のヒドロラーゼの群から選択されてい
   ることを特徴とする、前記多成分系。
2. 【請求項２】 媒介剤が、少なくとも１個のＮ−ヒドロ
   キシ−、オキシム−、ニトロソ−、Ｎ−オキシル−又は
   Ｎ−オキシ−官能基を有する、脂肪族、脂環式、複素環
   式又は芳香族化合物の群から選択されており、この際置
   換又は未置換の１−ヒドロキシ−１−ベンゾトリアゾー
   ル、３Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−オキシド及び２Ｈ
   −ベンゾトリアゾール−１−オキシドは除外されてい
   る、請求項１記載の多成分系。
3. 【請求項３】 媒介剤が、本明細書の式Ｉ〜ＸＸＸＩＶ
   による化合物の群から選択されている、請求項１記載の
   多成分系。
4. 【請求項４】 酵素活性添加剤がキシラナーゼ、マンナ
   ーゼ及びセルラーゼの群から選択されている、請求項１
   から３までのいずれか１項記載の多成分系。
5. 【請求項５】 酵素活性添加剤がエンド１，４−β−キ
   シラナーゼ（ＥＣ３．２．１．８）及び／又はエンド
   １，４−β−グルカナーゼ（ＥＣ３．２．１．４）であ
   る、請求項４記載の多成分系。
6. 【請求項６】 オキシドレダクターゼとしてラッカーゼ
   を使用する、請求項１から５までのいずれか１項記載の
   多成分系。
7. 【請求項７】 リグニン含有材料の脱リグニン化法にお
   いて、少なくとも１種のオキシドレダクターゼ、オキシ
   ドレダクターゼにとって適当な少なくとも１種の酸化
   剤、オキシドレダクターゼ及びＥＣ３．２．１のヒドロ
   ラーゼの群から選択された酵素を不活性化しない少なく
   とも１種の媒介剤及び少なくとも１種のエンドヒドロラ
   ーゼを、同時に又は任意の順番でリグニン含有材料の水
   性懸濁液と混合することを特徴とする、リグニン含有材
   料の脱リグニン化方法。
8. 【請求項８】 リグニン含有材料（乾燥重量）１ｇ当り
   ０．１〜１００ＩＵのオキシドレダクターゼを使用す
   る、請求項７記載の方法。
9. 【請求項９】 媒介剤を１〜５００ｍモル／ｋｇセルロ
   ースの量で使用する、請求項８又は９記載の方法。
10. 【請求項１０】 ＥＣ３．２．１のヒドロラーゼを酵素
    ０．０１〜１０００ＩＵ／ｇセルロースの適当量で使用
    する、請求項７記載の方法。