JPH11139961A - リポソームの製造方法 - Google Patents
リポソームの製造方法Info
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- JPH11139961A JPH11139961A JP9304132A JP30413297A JPH11139961A JP H11139961 A JPH11139961 A JP H11139961A JP 9304132 A JP9304132 A JP 9304132A JP 30413297 A JP30413297 A JP 30413297A JP H11139961 A JPH11139961 A JP H11139961A
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Landscapes
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- Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】粒子径が微細で粒子径分布が均一な分散安定性
の優れたリポソームを提供する。 【構成】リン脂質粉末を水に溶解または分散させ、リポ
ソームを形成させる工程において、キャビテーションを
抑え、相転移温度以上のリン脂質の溶解または分散させ
た処理液に、高速回転によって処理液内にジェット流を
生じさせ、液と液または液と壁面の剪断力を十分発揮さ
せて、１００ｎｍ以下の平均粒子径をもつリポソームを
製造することを特徴とするリポソームの製造方法
の優れたリポソームを提供する。 【構成】リン脂質粉末を水に溶解または分散させ、リポ
ソームを形成させる工程において、キャビテーションを
抑え、相転移温度以上のリン脂質の溶解または分散させ
た処理液に、高速回転によって処理液内にジェット流を
生じさせ、液と液または液と壁面の剪断力を十分発揮さ
せて、１００ｎｍ以下の平均粒子径をもつリポソームを
製造することを特徴とするリポソームの製造方法
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、リン脂質を用いた
リポソームの製造法に関するものである。
リポソームの製造法に関するものである。
【０００２】
【従来技術】リポソーム製剤は、その使用目的により利
用するリポソームの大きさ等が異なるが、一般的に、保
存安定性、静脈内投与後の安定性（血中半減期、マクロ
ファージの活性化能）、保持効果（単位脂質あたりの保
持容量）を考慮すると、粒子径が１００ｎｍ以下の微細
なユニラメラのリポソームが望まれている。
用するリポソームの大きさ等が異なるが、一般的に、保
存安定性、静脈内投与後の安定性（血中半減期、マクロ
ファージの活性化能）、保持効果（単位脂質あたりの保
持容量）を考慮すると、粒子径が１００ｎｍ以下の微細
なユニラメラのリポソームが望まれている。
【０００３】そのリポソームを調製する方法としては、
実験室レベルでは、ボルテクスィング法、超音波法、プ
レ−ベシクル法、エタノール注入法等（菊池ら、細胞工
学、2〔9〕1136 (1983))があるが、有機溶媒の除去、リ
ポソームの粒度分布のコントロールが不可能等で、工業
生産には不向きである。また、工業的に粒径の小さいリ
ポソームを製造する方法としては、超音波乳化機（Bioc
hemistry, 8, 344(1969)）、高圧乳化機（FEBS Lett.,
99, 210(1979)）を用いた方法が既に報告されている
が、これらの方法では均一な粒径をもつリポソームは得
られない。
実験室レベルでは、ボルテクスィング法、超音波法、プ
レ−ベシクル法、エタノール注入法等（菊池ら、細胞工
学、2〔9〕1136 (1983))があるが、有機溶媒の除去、リ
ポソームの粒度分布のコントロールが不可能等で、工業
生産には不向きである。また、工業的に粒径の小さいリ
ポソームを製造する方法としては、超音波乳化機（Bioc
hemistry, 8, 344(1969)）、高圧乳化機（FEBS Lett.,
99, 210(1979)）を用いた方法が既に報告されている
が、これらの方法では均一な粒径をもつリポソームは得
られない。
【０００４】工業生産で均一な粒子を得る方法として
は、ポリカーボネートメンブランフィルターを用いた大
型高圧整粒器（リポナイザーTM）で、孔径の大きなフィ
ルターから順次小さな孔径のフィルターを用いた逐次濾
過法を用いれば、１００ｎｍ以下の粒子径をもつ微細な
リポソームの調製が可能であるが、最初から１００ｎｍ
以下の孔径のフィルターを用いると目詰まりを起こし、
濾過時間がかかりすぎる。これをさけるためには、４０
０、２００、１００、８０ｎｍと逐次濾過を行う必要が
あり、フィルターをその都度交換しなければならず、作
業が煩雑となる。また、相転移温度の高い水素添加レシ
チンを用いた場合、６５℃から７５℃の高温でしかも数
気圧から３０気圧の加圧で濾過を行わなければならず、
危険性などの面で作業上の不都合があった。この作業上
の不都合（安全性）を改善した方法として、高速回転型
分散機「クレアミックスTM」（特開平９−２４２６９号
公報）を用い、キャビテーションを抑え、相転移温度以
上のリン脂質の溶解及び／または分散させた処理液に、
高速回転によって処理液内にジェット流を生じさせ、液
と液及び／または液と壁面の剪断力を十分発揮を用いた
製造でも均一な粒子を得ることは可能であった。しか
し、この製造方法においては、各製造工程における条件
が粒子径に与える影響が大きいという欠点がある。
は、ポリカーボネートメンブランフィルターを用いた大
型高圧整粒器（リポナイザーTM）で、孔径の大きなフィ
ルターから順次小さな孔径のフィルターを用いた逐次濾
過法を用いれば、１００ｎｍ以下の粒子径をもつ微細な
リポソームの調製が可能であるが、最初から１００ｎｍ
以下の孔径のフィルターを用いると目詰まりを起こし、
濾過時間がかかりすぎる。これをさけるためには、４０
０、２００、１００、８０ｎｍと逐次濾過を行う必要が
あり、フィルターをその都度交換しなければならず、作
業が煩雑となる。また、相転移温度の高い水素添加レシ
チンを用いた場合、６５℃から７５℃の高温でしかも数
気圧から３０気圧の加圧で濾過を行わなければならず、
危険性などの面で作業上の不都合があった。この作業上
の不都合（安全性）を改善した方法として、高速回転型
分散機「クレアミックスTM」（特開平９−２４２６９号
公報）を用い、キャビテーションを抑え、相転移温度以
上のリン脂質の溶解及び／または分散させた処理液に、
高速回転によって処理液内にジェット流を生じさせ、液
と液及び／または液と壁面の剪断力を十分発揮を用いた
製造でも均一な粒子を得ることは可能であった。しか
し、この製造方法においては、各製造工程における条件
が粒子径に与える影響が大きいという欠点がある。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、高速
回転型分散機を用い、短時間で効率的にしかも作業上の
安全性の高い、微細なリポソームを製造することにあ
る。
回転型分散機を用い、短時間で効率的にしかも作業上の
安全性の高い、微細なリポソームを製造することにあ
る。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、リン脂質
を水溶液に分散させると同時に、微細なリポソームを製
造するのに、リン脂質の相転移温度以上の温度で高速回
転によって処理液内にジェット流を生じさせ、液と液及
び／または液と壁面の剪断力を十分発揮させて、微細な
リポソームを作製することができることを見出し、更に
その知見に基づき本発明を完成した。
を水溶液に分散させると同時に、微細なリポソームを製
造するのに、リン脂質の相転移温度以上の温度で高速回
転によって処理液内にジェット流を生じさせ、液と液及
び／または液と壁面の剪断力を十分発揮させて、微細な
リポソームを作製することができることを見出し、更に
その知見に基づき本発明を完成した。
【０００７】すなわち、本発明はリン脂質粉末を水に溶
解または分散させ、リポソームを形成させる工程におい
て、相転移温度以上のリン脂質の溶解または分散させた
処理液にジェット流を生じさせ、剪断することを特徴と
するリポソームの製造方法である。
解または分散させ、リポソームを形成させる工程におい
て、相転移温度以上のリン脂質の溶解または分散させた
処理液にジェット流を生じさせ、剪断することを特徴と
するリポソームの製造方法である。
【０００８】また、リン脂質を水溶液に分散させると同
時に、溶液内の溶存気体によるキャビテーションを防ぐ
目的で、リン脂質を分散させた処理液中の溶存気体をリ
ン脂質の相転移以上の温度で減圧除去するとが微細なリ
ポソームを製造するのに好ましいことを見出した。
時に、溶液内の溶存気体によるキャビテーションを防ぐ
目的で、リン脂質を分散させた処理液中の溶存気体をリ
ン脂質の相転移以上の温度で減圧除去するとが微細なリ
ポソームを製造するのに好ましいことを見出した。
【０００９】更に、溶存気体の除去をより完全にするた
めには相転移以上の温度で行うことが好ましいことを見
出した。次にリン脂質の相転移温度以上の温度で高速回
転によって処理液内にジェット流を生じさせ、液と液及
び／または液と壁面の剪断力を十分発揮させて、微細な
リポソームを作製するに際し、そのリポソームが凝集等
の形状変化を起こさぬように、相転移温度以上の高温か
ら、相転移温度以下の低温まで、９０秒以内に適度な分
散力を与えながら冷却を行うことが微細なリポソームを
製造するのに好ましい。
めには相転移以上の温度で行うことが好ましいことを見
出した。次にリン脂質の相転移温度以上の温度で高速回
転によって処理液内にジェット流を生じさせ、液と液及
び／または液と壁面の剪断力を十分発揮させて、微細な
リポソームを作製するに際し、そのリポソームが凝集等
の形状変化を起こさぬように、相転移温度以上の高温か
ら、相転移温度以下の低温まで、９０秒以内に適度な分
散力を与えながら冷却を行うことが微細なリポソームを
製造するのに好ましい。
【００１０】また、平均粒子径１００ｎｍ以下のリポソ
ームを調製するに際して、リン脂質の相転移温度以上の
温度から相転移温度以下の約３０℃まで９０秒以内に急
冷することが微細なリポソームを製造するのに好まし
い。
ームを調製するに際して、リン脂質の相転移温度以上の
温度から相転移温度以下の約３０℃まで９０秒以内に急
冷することが微細なリポソームを製造するのに好まし
い。
【００１１】急冷を行う理由は、相転移以上の温度で作
製したリポソームの微細な構造が、液の温度が相転移を
移行する際に、凝集等を起こさせないためである。この
方法により、粒子径が１００ｎｍ以下の安定でかつ微細
なリポソームを敏速に調製できることを見いだした。
製したリポソームの微細な構造が、液の温度が相転移を
移行する際に、凝集等を起こさせないためである。この
方法により、粒子径が１００ｎｍ以下の安定でかつ微細
なリポソームを敏速に調製できることを見いだした。
【００１２】また、さらに、この方法で得られたリポソ
ームを孔径の揃った直線的流路を有する５０ｎｍまたは
それ以下のポリカーボネートメンブランで濾過すること
がより好ましい。これによるとさらに粒子径の均一なリ
ポソームが製造できる。
ームを孔径の揃った直線的流路を有する５０ｎｍまたは
それ以下のポリカーボネートメンブランで濾過すること
がより好ましい。これによるとさらに粒子径の均一なリ
ポソームが製造できる。
【００１３】さらにリポソームを孔径が５０ｎｍより小
さいかまたは等しいある一つの孔径を有し、直線的通過
流路を有するフィルターで濾過を行うことが好ましい。
さいかまたは等しいある一つの孔径を有し、直線的通過
流路を有するフィルターで濾過を行うことが好ましい。
【００１４】この孔径の揃った直線的流路を有する５０
ｎｍまたはそれ以下のポリカーボネートメンブランで濾
過することにより作製されたリポソームの形態は主に安
定なユニラメラであることが判明した。
ｎｍまたはそれ以下のポリカーボネートメンブランで濾
過することにより作製されたリポソームの形態は主に安
定なユニラメラであることが判明した。
【００１５】本発明中リン脂質が水素添加大豆レシチン
であることが好ましく、 水溶液中にタウリン、マンニ
トール、ブドウ糖、塩化ベンザルコニウムを含有するこ
とが安定なユニラメラを得るためにさらに好ましい。
であることが好ましく、 水溶液中にタウリン、マンニ
トール、ブドウ糖、塩化ベンザルコニウムを含有するこ
とが安定なユニラメラを得るためにさらに好ましい。
【００１６】
【発明の実施の形態】キャビテーションや剪断力を与え
る装置としては高圧ホモジナイザー（Drug Developmenn
t and Industrial Pharmacy、16(14),2167,(1990)）や
高速回転型分散機「クレアミックスTM」などがあるが、
温度制御やエネルギー効率などの点で後者の方が優れて
いる。
る装置としては高圧ホモジナイザー（Drug Developmenn
t and Industrial Pharmacy、16(14),2167,(1990)）や
高速回転型分散機「クレアミックスTM」などがあるが、
温度制御やエネルギー効率などの点で後者の方が優れて
いる。
【００１７】リン脂質としては大豆レシチンや卵黄レシ
チン及びこれらを水素添加した水素添加レシチンさら
に、ジミリストイルフォスファチジルコリン、ジパルミ
トイルフォスファチジルコリン、ジステアロイルフォス
ファチジルコリン、ジミリストイルフォスファチジルグ
リセロール、ジパルミトイルフォスファチジルグリセロ
ール、ジステアロイルフォスファチジルグリセロールな
どの合成のリン脂質があげられる。特にリン脂質が水素
添加大豆レシチンであることが好ましい。
チン及びこれらを水素添加した水素添加レシチンさら
に、ジミリストイルフォスファチジルコリン、ジパルミ
トイルフォスファチジルコリン、ジステアロイルフォス
ファチジルコリン、ジミリストイルフォスファチジルグ
リセロール、ジパルミトイルフォスファチジルグリセロ
ール、ジステアロイルフォスファチジルグリセロールな
どの合成のリン脂質があげられる。特にリン脂質が水素
添加大豆レシチンであることが好ましい。
【００１８】これらのリン脂質にコレステロールや脂溶
性薬物を配合してもさしつかえない。
性薬物を配合してもさしつかえない。
【００１９】また、使用するリン脂質粉末としては上記
リン脂質をスプレードライで処理した噴霧乾燥品（特公
平４−３７７３１号公報）やクレアミックスTMで瞬間真
空乾燥したプレソームTM（特開平２−１６７２１８号公
報）などがさらに適している。
リン脂質をスプレードライで処理した噴霧乾燥品（特公
平４−３７７３１号公報）やクレアミックスTMで瞬間真
空乾燥したプレソームTM（特開平２−１６７２１８号公
報）などがさらに適している。
【００２０】リン脂質を分散させた水溶液中には、タウ
リンなどの水溶性薬物やｐＨや浸透圧を調整するための
糖類や塩類を配合してもさしつかえない。具体的には、
タウリン、マンニトール、ブドウ糖、塩化ベンザルコニ
ウムを配合させることが好ましい。
リンなどの水溶性薬物やｐＨや浸透圧を調整するための
糖類や塩類を配合してもさしつかえない。具体的には、
タウリン、マンニトール、ブドウ糖、塩化ベンザルコニ
ウムを配合させることが好ましい。
【００２１】なお、リン脂質の相転移温度は、ジミリス
トイルフォスファチジルコリンが２３〜２４℃、ジパル
ミトイルフォスファチジルコリンが４１．０〜４１．５
℃、ジステアロイルフォスファチジルコリンが５４．１
〜５８．０℃、水素添加大豆レシチンが約５３℃であ
る。
トイルフォスファチジルコリンが２３〜２４℃、ジパル
ミトイルフォスファチジルコリンが４１．０〜４１．５
℃、ジステアロイルフォスファチジルコリンが５４．１
〜５８．０℃、水素添加大豆レシチンが約５３℃であ
る。
【００２２】
【発明の効果】本発明により、粒子径が微細で粒子径分
布が均一な分散安定性の優れたリポソームの医薬品、食
品及び化粧品等を提供することができる。
布が均一な分散安定性の優れたリポソームの医薬品、食
品及び化粧品等を提供することができる。
【００２３】
【実施例】表１に示す組成のリポソーム処理液を、実施
例に基づいて作製し、本発明をさらに詳細に説明する。
例に基づいて作製し、本発明をさらに詳細に説明する。
【００２４】
【表１】 処理液（リポソーム）の処方
【００２５】以上を精製水３５０ｍｌに分散したものを
処理液とした。
処理液とした。
【００２６】実施例１ 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。急冷工程は、
処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れたまま、弱い
分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒子が適度に
流動している条件下で、２〜５℃に作製した冷却水を装
置内の蛇管に通すことにより９０秒で行った。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。急冷工程は、
処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れたまま、弱い
分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒子が適度に
流動している条件下で、２〜５℃に作製した冷却水を装
置内の蛇管に通すことにより９０秒で行った。
【００２７】実施例２ 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後分散液は、クレアミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビ
テーションが起こらないように密封系加圧下にて、相転
移以上の温度(75〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処
理を行った。急冷工程は、処理液をクレアミックスTMCL
M-0.8Wに入れたまま、弱い分散力を与えるために10000r
pmで攪拌し、粒子が適度に流動している条件下で、２〜
５℃に作製した冷却水を装置内の蛇管に通すことにより
９０秒で行った。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後分散液は、クレアミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビ
テーションが起こらないように密封系加圧下にて、相転
移以上の温度(75〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処
理を行った。急冷工程は、処理液をクレアミックスTMCL
M-0.8Wに入れたまま、弱い分散力を与えるために10000r
pmで攪拌し、粒子が適度に流動している条件下で、２〜
５℃に作製した冷却水を装置内の蛇管に通すことにより
９０秒で行った。
【００２８】実施例３ 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで相転移温
度以上にて減圧脱気を行った。その後分散液は、クレア
ミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こら
ないように密封系加圧下にて、相転移以上の温度 (75
〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処理を行った。急
冷工程は、処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れた
まま、弱い分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒
子が適度に流動している条件下で、２〜５℃に作製した
冷却水を装置内の蛇管に通すことにより９０秒で行っ
た。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで相転移温
度以上にて減圧脱気を行った。その後分散液は、クレア
ミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こら
ないように密封系加圧下にて、相転移以上の温度 (75
〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処理を行った。急
冷工程は、処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れた
まま、弱い分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒
子が適度に流動している条件下で、２〜５℃に作製した
冷却水を装置内の蛇管に通すことにより９０秒で行っ
た。
【００２９】実施例４ 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。その後放冷で
液温が常温になるまで放置した。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。その後放冷で
液温が常温になるまで放置した。
【００３０】実施例５ 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。急冷工程は、
処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れたまま、弱い
分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒子が適度に
流動している条件下で、２〜５℃に作製した冷却水を装
置内の蛇管に通すことにより１８０秒で行った。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。急冷工程は、
処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れたまま、弱い
分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒子が適度に
流動している条件下で、２〜５℃に作製した冷却水を装
置内の蛇管に通すことにより１８０秒で行った。
【００３１】実施例６ 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。急冷工程は、
処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れたまま、弱い
分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒子が適度に
流動している条件下で、２〜５℃に作製した冷却水を装
置内の蛇管に通すことにより３００秒で行った。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。急冷工程は、
処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れたまま、弱い
分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒子が適度に
流動している条件下で、２〜５℃に作製した冷却水を装
置内の蛇管に通すことにより３００秒で行った。
【００３２】実施例７ 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで相転移温
度以上にて減圧脱気を行った。その後分散液は、クレア
ミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こら
ないように密封系加圧下にて、相転移以上の温度 (75
〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処理を行った。急
冷工程は、処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れた
まま、弱い分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒
子が適度に流動している条件下で、２〜５℃に作製した
冷却水を装置内の蛇管に通すことにより３００秒で行っ
た。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで相転移温
度以上にて減圧脱気を行った。その後分散液は、クレア
ミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こら
ないように密封系加圧下にて、相転移以上の温度 (75
〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処理を行った。急
冷工程は、処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れた
まま、弱い分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒
子が適度に流動している条件下で、２〜５℃に作製した
冷却水を装置内の蛇管に通すことにより３００秒で行っ
た。
【００３３】実施例８ 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで相転移温
度以上にて減圧脱気を行った。その後分散液は、クレア
ミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こら
ないように密封系加圧下にて、相転移以上の温度 (75
〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処理を行った。そ
の後放冷で液温が常温になるまで放置した。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで相転移温
度以上にて減圧脱気を行った。その後分散液は、クレア
ミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こら
ないように密封系加圧下にて、相転移以上の温度 (75
〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処理を行った。そ
の後放冷で液温が常温になるまで放置した。
【００３４】実施例９ 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで相転移温
度以上にて減圧脱気を行った。その後分散液は、クレア
ミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こら
ないように密封系加圧下にて、相転移以上の温度 (75
〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処理を行った。急
冷工程は、処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れた
まま、弱い分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒
子が適度に流動している条件下で、２〜５℃に作製した
冷却水を装置内の蛇管に通す事により１８０秒で行っ
た。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで相転移温
度以上にて減圧脱気を行った。その後分散液は、クレア
ミックスTMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こら
ないように密封系加圧下にて、相転移以上の温度 (75
〜80℃）にて21500rpm にて１０分間処理を行った。急
冷工程は、処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れた
まま、弱い分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒
子が適度に流動している条件下で、２〜５℃に作製した
冷却水を装置内の蛇管に通す事により１８０秒で行っ
た。
【００３５】実施例10 処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Sによりオープンの系
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。急冷工程は、
処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れたまま、弱い
分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒子が適度に
流動している条件下で、２〜５℃に作製した冷却水を装
置内の蛇管に通す事により９０秒で行った（実施例
１）。そのリポソーム液を孔径の揃った５０ｎｍのポリ
カーボネートメンブランフィルターで加圧濾過を一回行
い、更に粒径の揃ったリポソーム液を作製した。
にて4000rpm で約２分処置し、予備分散を行った。その
後、予備分散液から気泡の析出がなくなるまで常温下に
て減圧脱気を行った。その後分散液は、クレアミックス
TMCLM-0.8Wを用い、キャビテーションが起こらないよう
に密封系加圧下にて、相転移以上の温度(75〜80℃）に
て21500rpm にて１０分間処理を行った。急冷工程は、
処理液をクレアミックスTMCLM-0.8Wに入れたまま、弱い
分散力を与えるために10000rpmで攪拌し、粒子が適度に
流動している条件下で、２〜５℃に作製した冷却水を装
置内の蛇管に通す事により９０秒で行った（実施例
１）。そのリポソーム液を孔径の揃った５０ｎｍのポリ
カーボネートメンブランフィルターで加圧濾過を一回行
い、更に粒径の揃ったリポソーム液を作製した。
【００３６】試験例１ 実施例１〜９で作製したリポソーム液の粒子径測定結果
を表２に示す。
を表２に示す。
【００３７】粒子径測定は、NICOMP Model 370 Submicr
on Particle Sizer Version 5.0を用いて行った。
on Particle Sizer Version 5.0を用いて行った。
【００３８】
【表２】
【００３９】１*；減圧脱気せず ２*；常温で減圧脱気 ３*；相転移以上の温度で減圧脱気 上記の結果より、平均粒子径１００ｎｍ以下のリポソー
ムを得るには、脱気が必要であり、その温度は室温以上
好ましくは相転移温度以上で行い、その後相転移温度以
上で剪断力を与えた処理物を、急冷して相転移温度以下
にするのに要する時間は２００秒以内、好ましくは９０
秒以内であることが好ましい。
ムを得るには、脱気が必要であり、その温度は室温以上
好ましくは相転移温度以上で行い、その後相転移温度以
上で剪断力を与えた処理物を、急冷して相転移温度以下
にするのに要する時間は２００秒以内、好ましくは９０
秒以内であることが好ましい。
【００４０】試験例２ 上記実施例３で作製したリポソーム液の、製造直後及び
３０℃１年保存後の平均粒子径及びその標準偏差を以下
の表に示す。
３０℃１年保存後の平均粒子径及びその標準偏差を以下
の表に示す。
【００４１】
【表３】
【００４２】上記結果より、５０ｎｍのポリカーボネー
トメンブランフィルターを通過させることにより、より
均一な粒子径が得られ、かつその粒子の安定性が長期保
存下でさらに変化しにくいことが判った。
トメンブランフィルターを通過させることにより、より
均一な粒子径が得られ、かつその粒子の安定性が長期保
存下でさらに変化しにくいことが判った。
【００４３】試験例３ 上記実施例３で作製したリポソーム液を、透過電顕（×
500000）で観察した結果、観察されたリポソームの９８
％がユニラメラ構造で存在していた。
500000）で観察した結果、観察されたリポソームの９８
％がユニラメラ構造で存在していた。
Claims (6)
- 【請求項１】 リン脂質粉末を水に溶解または分散さ
せ、リポソームを形成させる工程において、相転移温度
以上のリン脂質の溶解または分散させた処理液にジェッ
ト流を生じさせ、剪断することを特徴とするリポソーム
の製造方法。 - 【請求項２】 液を剪断する前にリン脂質を溶解または
分散させた水溶液を相転移温度以上に加温し、減圧下で
溶存気体を除去した後、リポソームを製造することを特
徴とする請求項１のリポソームの製造方法。 - 【請求項３】 リン脂質の相転移温度以上の温度から相
転移温度以下の約３０℃まで９０秒以内に急冷すること
を特徴とする請求項１または請求項２のリポソームの製
造方法。 - 【請求項４】 リポソームを孔径が５０ｎｍより小さい
かまたは等しいある一つの孔径を有し、直線的通過流路
を有するフィルターで濾過を行うことを特徴とする請求
項１記載のリポソームの製造方法。 - 【請求項５】 リン脂質粉末が水素添加大豆レシチン粉
末であることを特徴とする請求項１のリポソームの製造
方法。 - 【請求項６】 水溶液中にタウリン、マンニトール、ブ
ドウ糖、塩化ベンザルコニウムを含有する請求項１の方
法によって得られるリポソーム。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9304132A JPH11139961A (ja) | 1997-11-06 | 1997-11-06 | リポソームの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9304132A JPH11139961A (ja) | 1997-11-06 | 1997-11-06 | リポソームの製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11139961A true JPH11139961A (ja) | 1999-05-25 |
Family
ID=17929433
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9304132A Pending JPH11139961A (ja) | 1997-11-06 | 1997-11-06 | リポソームの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11139961A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007268350A (ja) * | 2006-03-30 | 2007-10-18 | Toshiba Corp | 微粒子の製造装置、乳化剤保持部、微粒子の製造方法および分子膜の製造方法 |
| WO2007117023A1 (ja) | 2006-04-11 | 2007-10-18 | Wingturf Co., Ltd. | リポソーム分散液の製造方法ならびに製造装置 |
| JP2012512260A (ja) * | 2008-12-17 | 2012-05-31 | オンコセリオン インコーポレイテッド | 小さなリポソームの製造方法 |
| JP2013525298A (ja) * | 2010-04-16 | 2013-06-20 | クセダ・アンテルナシオナル | 植物起源の活性成分またはその合成類似体、またはそれを含有する植物起源の抽出物、およびレシチンの新規製剤 |
| US8951450B2 (en) | 2009-09-02 | 2015-02-10 | Biomedcore, Inc. | Apparatus and method for production of liposomes |
| US9173929B2 (en) | 2004-04-01 | 2015-11-03 | Oncothyreon Inc. | Mucinous glycoprotein (MUC-1) vaccine |
-
1997
- 1997-11-06 JP JP9304132A patent/JPH11139961A/ja active Pending
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9173929B2 (en) | 2004-04-01 | 2015-11-03 | Oncothyreon Inc. | Mucinous glycoprotein (MUC-1) vaccine |
| JP2007268350A (ja) * | 2006-03-30 | 2007-10-18 | Toshiba Corp | 微粒子の製造装置、乳化剤保持部、微粒子の製造方法および分子膜の製造方法 |
| US8066918B2 (en) | 2006-03-30 | 2011-11-29 | Kabushiki Kaisha Toshiba | Apparatus for producing particles, emulsifier holding member, method for producing particles, and method for producing molecular membrane |
| WO2007117023A1 (ja) | 2006-04-11 | 2007-10-18 | Wingturf Co., Ltd. | リポソーム分散液の製造方法ならびに製造装置 |
| JP2012512260A (ja) * | 2008-12-17 | 2012-05-31 | オンコセリオン インコーポレイテッド | 小さなリポソームの製造方法 |
| JP2014224127A (ja) * | 2008-12-17 | 2014-12-04 | オンコセリオン インコーポレイテッド | 小さなリポソームの製造方法 |
| US8951450B2 (en) | 2009-09-02 | 2015-02-10 | Biomedcore, Inc. | Apparatus and method for production of liposomes |
| JP2013525298A (ja) * | 2010-04-16 | 2013-06-20 | クセダ・アンテルナシオナル | 植物起源の活性成分またはその合成類似体、またはそれを含有する植物起源の抽出物、およびレシチンの新規製剤 |
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