JPH10507830A

JPH10507830A - ゲル電気泳動装置における方法および配置

Info

Publication number: JPH10507830A
Application number: JP8513826A
Authority: JP
Inventors: アンデショーン，ベングト・ヨーラン; ソーバ，ステファン
Original assignee: ファルマシア・バイオテック・アクチボラグ
Priority date: 1994-10-20
Filing date: 1995-10-19
Publication date: 1998-07-28
Also published as: SE503503C2; EP0787292A1; SE9403597D0; SE9403597L; WO1996012948A1

Abstract

(57)【要約】光源(７)を有するゲル電気泳動装置において、その光線(６)が電気泳動ゲル(１)の１の側端部を通って電気泳動ゲル(１)中に導入されて、電気泳動ゲル(１)中を移動しつつある蛍光物質で標識された少なくとも１の成分を検出でき、手段(８、９)が、電気泳動ゲル(１)の該１の側端部を横切って前後に光線(６)を掃引し、異なる入射点で電気泳動ゲル(１)中に導入されるように光線が適用され、該異なる入射点で導入された光線(６)の強度を、それが少なくとも部分的に電気泳動ゲル(１)を通過した後に測定し、最大光強度が測定された入射点にその光線(６)をロックするようにセンサー(１３、１４)が適用されている。

Description

【発明の詳細な説明】ゲル電気泳動装置における方法および配置技術分野本発明は、光源を有するゲル電気泳動装置における方法および配置に関し、その光源の光線はゲル電気泳動装置の１の側端部を通して電気泳動装置に導入されて、電気泳動ゲル中を移動しつつある蛍光物質で標識された少なくとも１の成分を検出し得る。発明の背景電気泳動装置の１の側端部を通してゲルに光線、例えばレーザー光線が導入されるゲル電気泳動装置に関する問題点は、ゲルのいずれかの側面に設置されるガラス板中に案内され、移動する成分を検出する可能性をかなり低下させることなくゲル中で最大光線分散を供するために光線が常に該ゲルの中間で終了するように、ゲル交換に際して光源、例えばレーザーを新たに精巧に調整しなければならないことである。現在まで、この精巧な調整は手動で行われてきた。ここでは、ゲル中の光の分散を視覚的に認め、それによって、ゲル中の最良の可能な光の分散を供するためにはその光源、すなわちレーザーをどのように指向しなければならないかを決定していた。しかしながら、レーザーのかかる手動調整は行うのが困難で、その結果、レーザーが最適に指向されているのか否かに関してある種の不確実性がある。本発明の簡単な説明本発明の目的は、前記した手動の精巧な調整をなくし、そのかわりに、精巧な調整が自動的に行われるゲル電気泳動装置を成し遂げることにある。該目的は、本発明による配置によって達成され、主としてその中では、電気泳動ゲルの１の側端部を横切って前後に光線を掃引し、光線が異なる入射点で電気泳動ゲル中に導入されるように手段が適用されており、該光線が少なくとも部分的に電気泳動ゲルを通過した後に異なる入射点で導入された光線の強度を測定し、最大強度が測定された入射点に該光線が固定されるようにセンサーが適用されている。図面の簡単な説明本発明を単一の図面である添付図面に参照して以下により詳細に説明する。図１は、電気泳動ゲルにおける本発明による配置の具体例のブロック図を模式的に示し、その上方から見た端面図が示されている。好ましい具体例の説明図１は、ガラス板２および３の間の垂直電気泳動ゲル１の上方から見た端面図を示し、該ガラス板は、示す具体例では両方とも透明(translucent)であるスペーサー４および５によって分離されている。示すゲル１は、成分、例えば、核酸の混合物を分離することを意図し、自体公知の方法により、電気泳動装置の上部緩衝液容器(示していない)および下部緩衝液容器(示していない)に連結されている。例えば、配列決定のための核酸の分離に際しては、蛍光物質で標識したその試料をゲル１の上端に適用する。その後、試料成分は、電界の影響下でゲル１中を下方に向かって移動する。ゲル１に沿った所定の位置において、示した具体例においてはレーザー光線６である光線を透明スペーサー４を通して、その１の側端部を通してゲル１中に導入して、ディテクター(示していない)によってゲル１中を移動する前記試料を検出し得る。示した具体例においては、レーザー光線６はレーザー７によって発生し、ミラー８によってゲル１中に導入される。本発明により、レーザー光線６を自動的に調整してゲル１中で最大光-強度を得るためにモーター９が配されていて、矢印１０によって示すごとく、ゲル１の側端部を横切ってミラー８を前後に運動させて、スペーサー４の側端部を横切ってレーザー光線６を前後に掃引し、それによって、矢印によって示されるごとく異なる入射点でゲル１中にレーザー光線６を導入する。ミラー８を運動させるモーター９はコントロールユニット１２によって作動され、これは、始動ボタン(示していない)と共に配されている。ミラー８から出たレーザー光線６はゲル１を通過して、示した具体例においては、透明スペーサー５を介してゲル１のもう１の側端部を通ってゲル１から排出される。レーザー光線６が最適に、すなわち、ゲル１から排出するレーザー光線６の入射点に指向されて、光-強度最大を表す場合を決定するために、該ゲル１のもう１の側端部にセンサー１３が配されている。レーザー光線６の掃引運動の間の該レーザー光線６の光-強度を測定し、光-強度に比例する信号を生成するようにこのセンサー１３は適用されていて、その信号はコントロールユニット１２に供給され、それがついでモーター９を停止させ、それによって、センサー１３が最大光-強度のレーザー光線６を測定した位置にミラー８を停止する。これによって、ゲル１から排出したレーザー光線が光-強度最大を示す入射点にレーザー光線６が自動的に設定される。いずれのミラーもなしに、スペーサーを介してレーザー光線がレーザーからゲル中に導入されるゲル電気泳動装置も公知である。かかる具体例においては、ゲルの１の側端部を横切って異なる入射点でレーザー光線を導入するために、ミラーのかわりにレーザーを運動させるように図中に示したモーター９に対応するモーターが適用されている。上述のごとく、(示していない)この具体例は、図示する具体例に対応している。レーザー光線６の光-強度の測定またはセンシングは図示するように、すなわち、ゲル１のもう１の側端部に設置されたセンサー１３で、行う必要はない。もう１の具体例により、ブロック１４および１５によって表されたセンサーによって示されるごとく、センサー１４は、例えば、スペーサーが半透明(opaque) であるこの場合においてはスペーサー５によって散乱する光の強度を測定するように適用し得る一方、さらなる具体例によるセンサー１５は、そのレーザー光線が少なくとも部分的にゲル１を通過した後にゲル１中で散乱した光の強度を測定するように適用し得る。かくして、本発明の配置により、ゲル１中へのレーザー光線６の入射点の調整が自動的に行われて、ゲル１中で最大光-強度が得られるゲル電気泳動装置が得られた。

Claims

【特許請求の範囲】１．光源(７)を有し、その光線(６)が電気泳動ゲル(１)の１の側端部を通して電気泳動ゲル中に導入されて電気泳動ゲル(１)中を移動しつつある蛍光物質で標識された少なくとも１の成分を検出し得るゲル電気泳動装置における方法であって、 −該光線(６)が電気泳動ゲル(１)の該１の側端部を横切って前後に掃引されて光線(６)が異なる入射点で電気泳動ゲル中に導入されること、 −該異なる入射点で導入された光線(６)の強度を、少なくとも部分的にそれが電気泳動ゲル(１)を通過した後に測定すること、および −最大強度が測定された入射点に該光線(６)がロックされることを特徴とする該方法。２．ミラー(８)が運動して電気泳動ゲル(１)の該１の側端部を横切って光線( ６)を掃引することを特徴とする、該光線(６)がミラー(８)によって電気泳動ゲル(１)中に導入される請求項１記載の方法。３．光源が運動して、電気泳動ゲル(１)の該１の側端部を横切って光線(６)を掃引することを特徴とする請求項１記載の方法。４．光源(７)を有し、その光線(６)が電気泳動ゲル(１)の１の側端部を通して電気泳動ゲル中に導入されて、電気泳動ゲル(１)中を移動しつつある蛍光物質で標識された少なくとも１の成分を検出し得るゲル電気泳動装置の配置であって、 −電気泳動ゲル(１)の該１の側端部を横切って光線(６)を前後に掃引し、異なる入射点で電気泳動ゲル(１)中に該光線(６)が導入されるように手段(８、９)が適用されていること、および −該異なる入射点で導入された光線(６)の強度を、少なくとも部分的にそれが電気泳動ゲル(１)を通過した後に測定し、最大強度が測定された入射点に該光線 (６)がロックされるようにセンサー(１３、１４、１５)が適用されていることを特徴とする該配置。５．該手段が、ミラー(８)を運動させて電気泳動ゲル(１)の該１の側端部を横切って光線(６)を掃引するように適用されるミラー運動手段(９)であることを特徴とする、光線(６)がミラー(８)によって電気泳動ゲル(１)中に導入される請求項４記載の配置。６．該手段が、光源を運動させて電気泳動ゲル(１)の該１の側端部を横切って光線(６)を掃引するように適用されている光源運動手段であることを特徴とする請求項４記載の配置。７．センサー(１３)が電気泳動ゲル(１)の反対の側端部に配され、光線(６)の強度を、それが電気泳動ゲル(１)を通過した後に測定することを特徴とする請求項４〜６いずれか１項記載の配置。８．反対側のスペーサー(５)が半透明(opaque)であること、および、このスペーサー(５)によって散乱された光の強度を測定するようにセンサー(１４)が適用されていることを特徴とする、電気泳動ゲル(１)の両方の側端部に沿ったスペーサー(４、５)によって分離されたガラス板(２、３)の間に電気泳動ゲル(１)が配され、それを通って光線(６)が電気泳動ゲル(１)中に導入されるスペーサー(４) が透明(translucent)である請求項４〜６いずれか１項記載の配置。９．電気泳動ゲル(１)によって散乱される光の強度を測定するようにセンサー (１５)が適用されていることを特徴とする請求項４〜６いずれか１項記載の配置。１０．光線(６)がレーザー光線であることを特徴とする請求項４〜９いずれか１項記載の配置。