JPH10502088A

JPH10502088A - ブレフェルジンａの新しい誘導体およびがん治療におけるそれらの有用性

Info

Publication number: JPH10502088A
Application number: JP8503293A
Authority: JP
Inventors: マルスパイス，ルイス; ビシュヌバジャラ，ビー．ラオ; ジー．スプコ，ジェフリー; ティー．，ジュニアケイン，チャールズ
Original assignee: US Department of Health and Human Services
Current assignee: US Department of Health and Human Services
Priority date: 1994-06-29
Filing date: 1995-06-29
Publication date: 1998-02-24
Also published as: AU2905995A; US5696154A; CA2193704A1; US5824674A; AU697856B2; EP0767788A1; WO1996000726A3; WO1996000726A2

Abstract

(57)【要約】下記式II：で表され、式中、Ｒ₁とＲ₂の一方がＨであり、そしてＲ₁とＲ₂の残りが、１〜12個の炭素原子を含有する置換基であり塩基性窒素原子または第四アンモニウム基またはその塩を含有するブレフェルジンＡ誘導体を提供するものである。これらの誘導体は優れた抗腫瘍活性を示し、かつブレフェルジンＡに付随する問題点なしでヒトの患者に投与することができる。

Description

【発明の詳細な説明】ブレフェルジンＡの新しい誘導体およびがん治療におけるそれらの有用性発明の背景発明の技術分野本発明は、ブレフェルジンＡの新しい誘導体、それを含有する医薬組成物、ならびにこれら誘導体を投与することによる、結腸がん、黒色腫、白血病、卵巣腫瘍、前立腺腫瘍、乳房腫瘍および腎腫瘍を含むがんの治療方法に関する。関連技術の説明ブレフェルジンＡは、シグ（Sigg、1964年）が明らかにしたように下記式（Ｉ）で表される構造を有している。この化合物は最初、抗真菌性、細胞毒性およびがん増殖抑制性(cancerostatic )の抗生物質として報告された(Harri他、1963年)。追加の生物学的効果がその後報告され、ベチナ(Betina)がブレフェルジンＡの生物活性をまとめた（V.Betina ，『Folia Microbiol.』37巻、３〜11頁、1992年）。これらの活性としては、抗生物質の特性、抗真菌特性（Betina他、『Naturweis』49巻、241頁、1962年；Be tina他『Ann.Ins.Pasteur』109巻、833〜842頁、1965年）、植物毒特性（例えば、Suzuki他『Agric.Biol.Chem.』34巻、395〜413頁、19 70年）、細胞障害特性(Ishii他『J.Antibiot．』42巻、1877〜1878頁、1989年) 、および抗ウイルス特性（Tamura他『J.Antibiot．』21巻、160〜161頁、1968年）がある。アッカー(Acker)他（米国特許第4,608,078号）は、広範囲に集めたブレフェルジンＡ誘導体の製造および望ましくない植物の成長を防除するのに用いる除草剤としてのそれら誘導体の有用性を報告している。ブレフェルジンＡは、細胞内のゴルジ装置の構造に大きな影響を与えることが報告され、タンパク質が細胞質を通じて運ばれるのを妨害すると考えられている (Lippincott-Schwartz他『Cell』56巻、801〜813頁、1989年および『J.Cell.Bio l.』112巻、567〜577頁、1991年；Domes R.W.他『J.Cell.Biol.』109巻、61〜72 頁、1989年)。 1963年に、ブレフェルジンＡは、可能性がある抗がん剤として開発するため米国国立がんインスティチュートに提供された。初期の開発段階では、マウスの腫瘍モデルで充分とはいえない生体内活性しか実証できなかった。その後の研究でこの活性には、これらの研究に用いる媒体のため、許容しえない毒性を伴なうことが実証されたので、ブレフェルジンＡのその後の開発は中止された(DIS Minut es：NSC89671，NClからの未発表のデータ)。ベチナ他(『Folia Microbiol.』13巻、495〜500頁、1968年)は、テトラヒドロブレフェルジンＡとジ−Ｏ−アセチルブレフェルジンＡの製造を開示し〔ブレフェルジンＡは、この著者が以前に使用した名称のシアネイン(cyanein)として報告された〕、抗真菌特性について試験した。しかし、これらの化合物は溶解性が不充分なためヒトの静脈に用いるのに適していない。アッカー他（米国特許第4, 608,078号）は、両方の第二級ヒドロキシル基を、アルキル基、アルアルキル基、ホスホリル基、アルキルホスホリル基、アルカノイル基、ハロゲン置換アルカノイル基およびシリル誘導体で官能化することによって修飾したブレフェルジンＡ誘導体（類似体）をいくつか開発した。しかし、これらの誘導体は水溶性であるとかまたはヒトの治療に適しているとかは開示されていない。さらに、アッカー他の特許に記載されている誘導体は、有機溶媒および界面活性剤と混合した後、除草剤として有用であると特許請求がなされたが、充分な水溶性に欠け、そして実験動物、ヒトの被検者または患者に投与された場合、媒体に関連する毒性の可能性があることを示している。発明の要約本発明の発明者らは、上記の欠陥を、ブレフェルジンＡの合成修飾によって克服して、ヒトの新生物の治療に有用なブレフェルジンＡの誘導体を提供したのである。そのうえに、本発明の発明者らは新たに、ブレフェルジンＡがヒトの腫瘍細胞系で、細胞増殖抑制活性と細胞毒活性を有していることを発見した。さらに本発明の発明者らは、これらの細胞系におけるブレフェルジンＡの作用は、これら細胞系を、図１に示す棒グラフで示すように、黒色腫、乳房などのような疾患部位でグループ分けを行うと選択的でかつ特異的であることを発見した。開発治療スクリーニングプログラム及びデータの解釈の説明は、「Oncology」19巻（６）号、622〜638頁、1992年のセミナーに提供されている。図１の棒グラフは、結腸、黒色腫、前立腺、乳房および腎臓が示すヒトがん細胞系が、白血病、CNSおよび卵巣細胞系に比べてブレフェルジンＡに対して著しく感受性であることを明確に示している。またこれらの試験結果は、これら感受性細胞系の総増殖量の抑制が10ナノモル／Ｌという低い濃度で達成できることも示した。また選択された細胞系（例えば786-0腎臓細胞およびM -19黒色腫細胞）に対し、ブレフェルジンＡは低濃度で細胞破壊活性を有している。この情報によって、ブレフェルジンＡを臨床用途に開発する関心がNCIで再燃したのである。しかし、以前の実験は、ブレフェルジンＡが、許容し得ない媒体の毒性を伴なわずに動物に投与することができないことを示したので、本発明の発明者らは、親の化合物の細胞増殖抑制作用と細胞毒作用を保持し、しかも実験動物およびがん患者に静脈投与するのに適している類似体を設計する試みを行った。したがって、本発明の目的は、従来技術の上記欠陥を克服することである。具体的に述べると、本発明は、血液および血液製品と相溶性で化学的に安定な窒素含有水溶性化合物を製造するためブレフェルジンＡの構造を修飾することによって製造されるブレフェルジンＡの新しい化学種を提供するものである。したがって、これらの化学種は、毒性である可能性がある有機溶媒または界面活性剤を必要とせずに静脈経路で患者に安全に投与することができる。ブレフェルジンＡは、ラクトン基に加えて、２個の第二級ヒドロキシル基を含有している。本発明では、これらのヒドロキシル基を、別個の合成法によって、選択的に変換させてモノエステル（下記式IIIとIVで表されるモノエステル）を製造する。上記エステル化に用いる化学部分は、カルボキシル基とアミン基の両者を含有するアミノ酸から部分的に選択した。そのカルボキシル基はエステルの形でブレフェルジンＡと結合しているが、これら誘導体のアミン基は、塩酸、乳酸、クエン酸などのような普通の酸のどれとでも自由に塩を生成する。本発明の新しい化合物に高い水溶性を付与するのはこれら塩の形である。このような化学修飾を行うと、親医薬の生物活性が必ずしも保持されるわけではないが、以下に示す証拠は、本明細書に記載の誘導体がブレフェルジンＡと類似の抗腫瘍活性を有していることを示している。したがって、本発明の他の目的は、下記式：（式中、Ｒ₁とＲ₂の一方はＨであり、そしてＲ₁とＲ₂の残りは１〜12個の炭素原子を有する置換基であり塩基性窒素原子または第四級アンモニウム基またはその塩を含有している）で表される化合物を提供することである。本発明の他の目的は、上記化合物の少なくとも１種またはその医薬として許容しうる塩の抗腫瘍有効量、および医薬として許容しうる担体または賦形剤を含んでなる医薬組成物を提供することである。本発明のさらに他の目的は、上記化合物の少なくとも１種の抗腫瘍有効量を患者に投与することを含んでなる、腫瘍の治療方法を提供することである。ヒトの結腸がん、黒色腫、白血病、卵巣腫瘍、前立腺腫瘍、乳房の腫瘍および腎腫瘍はこれらの化合物で治療することができる。また本発明の化合物は、ブレフェルジンＡを製造するのに有用な中間体でもある。本発明のこれら化合物は、乾燥形態で安定性に優れているので長期間にわたって容易に貯蔵することができる。次いで、これらの化合物は、溶解し、次に塩酸または臭化水素酸と反応させることによって、親化合物のブレフェルジンＡに容易に変換することができる。本発明のその他の適用可能な範囲は以下の詳細な説明と図面から明らかになるであろう。しかし、詳細な説明と特定の実施例は、本発明の好ましい実施態様を示すが、本発明の思想と範囲のうちの各種の変更と改変はこの詳細な説明から当該技術分野の当業者にとって明らかになるので、単に例示として提供するに過ぎないと解すべきである。図面の簡単な説明本発明の上記および他の目的、特徴および利点は、添付図面を参照して行う以下の詳細な説明から充分に理解されるであろう。なおこれらの図面はすべて例示として提供するに過ぎず本発明を限定するものではない。図１〜３は各種のヒト腫瘍細胞系による試験の結果を示す棒グラフである。図４〜６は各種のヒト腫瘍細胞系による試験の結果に基づいた用量−反応曲線である。発明の詳細な説明以下の、本発明の詳細な説明は、本発明を実施する際、当該技術分野の当業者を援助するために提供するものである。そうとはいえ、本明細書で考察する実施態様の改変と変化は本発明の思想と範囲を逸脱することなく当該技術分野の当業者が実施できるので、以下の詳細な説明は本発明を本当に限定するものではないとみなすべきである。本発明のブレフェルジンＡ誘導体は、下記式：（式中、Ｒ₁とＲ₂の一方はＨであり、そしてＲ₁とＲ₂の残りは１〜12個の炭素原子を有する置換基であり塩基性窒素子または第四級アンモニウム基またはその塩を含有している）で表される。この置換基は一層好ましくは１〜８個の炭素原子を含有し、最も好ましくは１〜４個の炭素原子を含有している。注射用に適している、ブレフェルジンＡの可溶性誘導体は、その塩基性窒素原子または第四級アンモニウム基を、適切な酸を添加することによって、水溶性の塩に変換することができるエステルでもよい。本発明の化合物としては、前記置換基が式：−COR₃で表される基であり、Ｒ₃ が、１〜12個の炭素原子、一層好ましくは１〜８個の炭素原子、最も好ましくは１〜４個の炭素原子を含有する脂肪族基；１〜12個の炭素原子、一層好ましくは１〜10個の炭素原子、最も好ましくは１〜９個の炭素原子を含有するアリール脂肪族基；および４〜６個の炭素原子を含有する複基環基からなる群から選択され、前記基が各々塩基性窒素原子または第四級アンモニウムを含有している化合物が挙げられる。上記アリール脂肪族基は、そのアリール基がベンゼン環でもよく，そしてそのアルキル基が１〜３個の炭素原子を含有しているアリールアルキル基でもよい。そのアリール脂肪族基は、ブレフェルジンＡ誘導体のエステル基に結合している脂肪族部分にまたはそのアリール脂肪族基のアリール部分の側鎖に塩基性窒素原子または第四級アンモニウム基を有していてもよい。Ｒ₁とＲ₂の一方は下記式：（式中、ｎは１〜３の整数であり、そしてＲ₃とＲ₄は水素および１〜３個の炭素原子を有するアルキルからなる群から独立してもしくは同一に選択されるか、またはＲ₃とＲ₄はそれらが結合している窒素原子とともに、４〜６個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和の複素環を形成し、前記炭素原子のうちの１〜２個はヘテロ原子で任意に置換されていてもよい）で表される基であってもよい。これら追加のヘテロ原子はＮ，ＳおよびＯから選択することができる。上記複素環が窒素原子を１個だけ含有している場合、炭素原子の数は４〜６である。上記複素環が２個のヘテロ原子を含有しそのヘテロ原子の一方が窒素である場合、炭素原子の数は３〜５である。７員複素環は２もしくは３個のヘテロ原子を含有していてもよくそのヘテロ原子のうち一つは窒素であり；そしてヘテロ原子が２個の場合、炭素原子の数は５であり、およびヘテロ原子が３個の場合、炭素原子の数は４である。Ｒ₃は式：−CH₂N(CH₃)₂で表される基またはアミノ酸のカルボキシル基を除くことによって得られる残基でもよい。前記アミノ酸はグリシン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、フェニルアラニン、プロリン、リシン、およびアルギニンからなる群から選択することができる。１〜２個のヘテロ原子を有する前記複素環は、ピペラジン環、メチルピペラジン環、モルホリン環、メチルモルホリン環、ペルヒドロチアジン環、メチルペルヒドロチアジン環、ピラゾリン環、イソオキサゾリン環、オキサゾリン環、１，２−オキサゾリン環、ペルヒドロピリダジン環、ペルヒドロトリアジン環、ペルヒドロオキサチアジン環、ペルヒドロオキサジアジン環、イミダゾリン環、チアゾリン環、イソチアゾリン環、１，２，４−オキサジアゾリン環、１，２，５−オキサジアゾリン環、１，２，３−トリアゾール環、１，２，４−トリアゾール環、アゼピン環、ペルヒドロアゼピン環、１，２，４ −ジアゼピン環、ペルヒドロジアゼピン環、ペルヒドロオキサゼピン環、およびペルヒドロチアゼピン環からなる群から選択することができる。下記の実施例において（これら実施例は本発明を限定するものではない）、Ｒ₁ とＲ₂の一方は式：−COCH₂N(CH₃)₂で表される基であり、その特定の化合物は、４−Ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシル）ブレフェルジンＡもしくはその医薬として許容しうる塩、および７−Ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシル）ブレフェルジンＡもしくはその医薬として許容しうる塩である。式（II）から明らかなように、本発明の化合物はモノエステルであることを特徴とするものであり、すなわちブレフェルジンＡのヒドロキシル基のうちの一方だけがエステル化されている。ブレフェルジンＡ中に存在しているような第二級ヒドロキシル基をエステル化するのに利用可能な、文献中にみられる一般的な方法では、モノエステルが選択的に生成しない。一般に、ビス−エステルを生成させるため、大過剰の反応物を使用することが通例である（例えば、アッカー他の米国特許第4,608,078号参照）。しかし本発明では、簡単な操作、例えば結晶化またはクロマトグラフィーによってモノエステルを分離する目的で混合物の製造を試みた。したがって、ブレフェルジンＡを、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)と４−ジメチルアミノピリジン（DMAP）の存在下、代表的な合成アミノ酸のＮ，Ｎ−ジメチルグリシンで処理すると、生成物の混合物が生成する。この混合物から、４位が官能化された式IIIで表されるモノエステルをクロマトグラフィーで分離して、約15％の収率で得ることができる。ブレフェルジンＡの 7-OH基に対応するモノエステル（式IV）はこの反応混合物から単離することができなかった。式IVで表されるエステルの小スポットを、薄層クロマトグラフィーによって検出できたが、この化合物を高収率で生成する別の方法が発明されたので、式IVの化合物を単離するために上記反応のスケールアップは行わなかった。しかし上記の方法は充分な４−Ｏ−エステルを得るのに有用である。式IVで表されるエステルを製造するには別の方法を使用する。式IVで表される化合物を製造するために、ブレフェルジンＡをまず、１，８−ジアゾビシクロ〔５．４．０〕ウンデセ−７−エン(DBU)のような塩基の存在下クロロアセチルクロリドを用いてクロロ酢酸エステルに変換する。次に、得られたクロロ酢酸エステルを、ジメチルアミンで処理することによってＮ，Ｎ−ジメチル−グリシネートエステルに変転する。これら二つのステップによって式IVで表されるエステルが優れた収率で得られる。上記の合成法を用いると、ブレフェルジンＡのモノエステルおよび一般式(II) (式中Ｒ₁またはＲ₂は、追加の置換基を有しているかもしくは有していないアルキル基、アリール基、アリールアルキルまたは複素環アミン基である)で表されるビス−エステルを製造することができる。また上記の合成法は、Ｒ₁とＲ₂の基の一方(すなわちＲ₁またはＲ₂)が水溶性の塩に変換するのに適したアミンのような塩基性窒素の基をもっているという条件で、Ｒ₁またはＲ₂の基が水素以外の基である分子を製造するのに使用できると考えられる。図１，２および３は、ブレフェルジンＡ（式Ｉ）およびそのエステルIIIとIV の生体外活性を示す。これら化合物の用量−反応曲線を図４，５および６に示す。ブレフェルジンＡと本発明のエステル類は、ヒトのがん細胞系で、類似の細胞増殖抑制活性と細胞破壊活性ともっていることは明らかである。製造方法実施例１ブレフェルジンＡ（1.78mmol）、４−ジメチルアミノピリジン（1.45mmol）およびＮ，Ｎ−ジメチルグリシン(1.78mmol)のジクロロメタン(25ml)による懸濁液に、室温で撹拌しながら、１，３−ジクロロヘキシルカルボジイミド(DCC、5.21 mmol)を添加する。24時間撹拌後、追加のDCC(1.74mmol)を添加し、撹拌をさらに 24時間続ける。沈澱した固体を濾過で除去する。得られた濾液を減圧下で濃縮し、次に残留物をEtOAcに溶解し、濾過によって透明にし、次いでEtOAc中に予めパックしたシリカゲルカラムに注入する。EtOAcによる溶離で未反応のブレフェルジンＡが得られ、そしてEtOAc：CH₃OH(95：５)による溶離によって式IIIで表される所望のモノエステル生成物が得られる。式IVで表されるエステル化合物は、薄層クロマトグラフィーによって弱いスポットとして検出できたが単離できなかった。式IIIで表される生成物を含有する画分を合し、減圧下で濃縮し、EtOAc：ヘキサンから再結晶させて、式IIIで表されるエステルの純品（融点：60〜62℃ ）が得られる。全収率は15％である。NMR，IRおよび質量スペクトルは、式（III ）で表される生成物の構造と一致している。元素分析の結果は次のとおりである。この化合物は希釈酸性溶液に自由に溶解可能である（10〜50mg／ml）。実施例２ブレフェルジンＡ(0.148mol)および１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデセ−７−エン(DBU、0.297mol)のテトラヒドロフラン(THF)(8.2l)による溶液に、室温で撹拌しながら、2.51ＭクロロアセチルクロリドのTHF(118.4ml、0.297 mol)溶液を添加する。その混合物を、65℃で２時間にわたって加熱した後、混合物を室温まで冷却し、次にそのTHF溶液を沈澱固体からデカントする。その固体をTHFで洗浄し、元の溶液と一しょにする。その溶液に無水ジメチルアミンを30 分間バブリングさせ、得られた混合物を室温で48時間撹拌する。溶媒を減圧下で除き、得られた暗色の残留物をCH₂Cl₂でスラリーにし、次に、EtOAcでパックされEtOAcで溶離されるシリカゲルカラム（２kg）のクロマトグラフィーに付した。生成物の画分を一しょにし濃縮して、式IVで表されるエステル34ｇを黄色固体として得た。EtOAc：ヘキサンから再結晶することによって、式IVで表される化合物の純品を白色結晶固体（融点105〜106℃）として得た。そのNMR，IRおよび質量スペクトルは、式IVで表される構造に合致している。その元素分析の結果は次のとおりである。この化合物は希釈酸性溶液に自由に溶解可能である（10〜50mg／ml）。医薬組成物本発明の化合物は、それ自体を医薬製剤に配合するか、またはその医薬として許容しうる塩の形で、特に医薬として許容しうる無毒性の酸付加塩として配合することができる。これらの塩は、通常の化学的方法にしたがって本発明の化合物から製造することができる。通常これらの塩は、本発明の化合物の遊離塩基を、適切な溶媒もしくは各種組合わせの溶媒中で、所望の塩を生成する無機または有機の酸の化学量論的量または過剰量と反応させることによって製造される。一例を挙げると、遊離塩基を適当な酸の水溶液に溶解し、次に標準の方法、例えば溶液を凍結乾燥することによって塩を回収することができる。あるいは遊離塩基を、有機溶媒の低級アルカノール、エーテル、アルキルエステルまたその混合物など、例えばメタノール、エタノール、エーテル、酢酸エチル、酢酸エチル−エーテル溶液などに溶解した後、適当な酸で処理して対応する塩を生成させることができる。その塩は、例えば溶液からの自発分離に基づく所望の塩の濾過により回収するか、または塩が溶解しない溶媒を添加して沈澱させ、溶液から回収することができる。本発明のブレフェルジンＡ誘導体は、その細胞毒性の抗腫瘍活性によって、結腸がん、黒色腫、白血病、卵巣腫瘍、前立腺腫瘍、乳房腫瘍および腎臓腫瘍を含むがんの治療に利用できる。これらの新しい化合物は、静脈投与剤形で投与することができ、この場合、医薬として許容しうる適当な担体または希釈剤と組合わすことによって医薬組成物に配合することができる。これらの新しい化合物は、その医薬として許容しうる塩の形態で使用することができ、そして単独でまたは互いに組合わせておよび他の医薬として活性の化合物と組合わせても使用することができる。これら新規化合物は、水性もしくは非水性の溶媒に、所望により通常の添加剤、例えば溶解補助剤、等張剤、懸濁化剤、乳化剤、安定剤および保存剤とともに、溶解、懸濁または乳化させることによって配合して製剤にすることができる。以下の配合物Ｉは本発明の化合物を含んでなる静脈投与剤形の一例である。配合物Ｉ活性化合物（ブレフェルジンＡ誘導体） 50mg マンニトール、米国薬局方 100mg 塩酸（１当量をわずかに超える量）注射用水、米国薬局方適量５ml 上記溶液を凍結乾燥して、無定形固体を含有する白色〜灰白色のケークを生成させ、使用するまで冷蔵して貯蔵する。使用時に、バイアルびんの内容物を、米国薬局方の注射用滅菌水５mlで再構成する。１ml当り、10mgのブレフェルジンＡ誘導体（塩酸塩として）および20mgのマンニトールを含有している。その溶液のpHは2.5〜4.0の範囲内である。本発明の化合物は、凍結乾燥し、所望により、他の医薬として許容しうる賦形剤と組合わせて、非経口の注射投与を行うのに適切な配合物を製造することができる。このような投与を行うため、その配合物を、水、食塩水または５％デキストロース溶液、または水および有機溶媒例えばプロピレングリコール、エタノールなどの混合物で再構成してもよい。投与される投与量は勿論、単一用量(single dose)、多重用量(multiple dose) または毎日用量(daily dose)であるにかかわらず、使用される本発明の特定の化合物によって変化する。というのは本発明の化合物の効力、選択される投与経路、賦形剤の大きさ、および患者の症状の種類が変化するからである。投与される投与量は、明確な範囲に限定されないが、活性医薬を、その所望の薬理学的および生理学的作用を達成するため、代謝で放出する場合、投与配合物から生成する生理学的に活性な遊離形態の有効量またはモルベースの当量である。投与される投与量は一般に、治療過程の患者の１kg体重当り約0.8〜８mgの範囲内、または治療過程の患者の１ｍ²当り約30〜300mg好ましくは約75〜250mg／ｍ²一層好ましくは約100〜200mg／ｍ²の範囲内である。生物活性上記のように、本発明のブレフェルジンＡ誘導体は、結腸がん、黒色腫、白血病、卵巣腫瘍、前立腺腫瘍、乳房腫瘍および腎臓腫瘍に対する活性を含めて抗腫瘍活性を有しているので有用である。本発明の化合物の活性の証拠を図１，２および３に示してあるが、これらの図には、それぞれ試験化合物としてブレフェルジンＡ、式IIIで表される化合物および式IVで表される化合物を用いて各種細胞系について生体外で試験した結果を示す。上記化合物それぞれの用量−反応曲線を図４，５および６に示す。これらの試験結果から、ブレフェルジンＡと本発明の誘導体が、ヒトのがん細胞系で、類似の細胞増殖抑制活性と細胞破壊活性を示すことが明らかである。本発明を上記のように説明してきたが、本発明は多くの方式で変えることができることは明らかである。このような変化は本発明の思想と範囲から逸脱しているとみなすべきではなく、かような変形はすべて当該技術分野の当業者にとって自明であり、下記の特許請求の範囲の範囲内に含まれる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ビシュヌバジャラ，ビー．ラオアメリカ合衆国，メリーランド 20854, ロックビル，ベッツトレイルウェイ 1130 (72)発明者スプコ，ジェフリージー. アメリカ合衆国，メリーランド 21770, モンブロビア，キャメロンコート 11906 (72)発明者ケイン，チャールズティー．，ジュニアアメリカ合衆国，ニューヨーク 14051, イーストアムハースト，ミスティレーン 123

Claims

【特許請求の範囲】１．下記式：（式中、Ｒ₁とＲ₂の一方はＨであり、そしてＲ₁とＲ₂の残りは１〜12個の炭素原子を含有する置換基であり塩基性窒素原子または第四級アンモニウム基またはその塩を含有している）で表される化合物。２．前記置換基が式：−COR₃で表される基であり、Ｒ₃が１〜12個の炭素原子を含有する脂肪族基；１〜12個の炭素原子を含有するアリール脂肪族基；および４〜６個の炭素原子を含有する飽和もしくは不飽和の複素環基からなる群から選択され、前記基が各々、塩基性窒素原子または第四級アンモニウム基を含有している請求項１記載の化合物。３．前記アリール脂肪族基がアリールアルキル基である請求項２記載の化合物。４．アリール基がベンゼン環である請求項３記載の化合物。５．アルキル基が１〜３個の炭素原子を含有している請求項３記載の化合物。６．Ｒ₁とＲ₂の一方が下記式で表される基であり、式中、ｎは１〜３の整数であり、そしてＲ₃とＲ₄が水素および１〜３個の炭素原子を有するアルキル基からなる群から同一にまたは独立して選択されるか、またはＲ₃とＲ₄がそれらが結合している窒素原子とともに、４〜６個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和の複素環を形成し、前記炭素原子のうちの１〜２個はヘテロ原子で任意に置換されていてもよい請求項１記載の化合物。７．前記追加のヘテロ原子がＮ，ＳおよびＯからなる群から選択される請求項６記載の化合物。８．Ｒ₃が式：−CH₂N(CH₃)₂で表される基であるか、またはアミノ酸のカルボキシル基を除去することによって得られる残基である請求項２記載の化合物。９．アミノ酸が、グリシン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、フェニルアラニン、プロリン、リシンおよびアルギニンからなる群から選択される請求項８記載の化合物。 10．前記飽和または不飽和の複素環が、ピペラジン環、メチルピペラジン環、モルホリン環、メチルモルホリン環、ペルヒドロチアジン環、メチルペルヒドロチアジン環、ピラゾリン環、イソオキサゾリン環、オキサゾリン環、１，２−オキサゾリン環、ペルヒドロピリダジン環、ペルヒドロトリアジン環、ペルヒドロオキサチアジン環、ペルヒドロオキサジアジン環、イミダゾリン環、チアゾリン環、イソチアゾリン環、１，２，４−オキサジアゾリン環、１，２，５−オキサジアゾリン環、１，２，３−トリアゾール環、１，２，４−トリアゾール環、アゼピン環、ペルヒドロアゼピン環、１，２，４−ジアゼピン環、ペルヒドロジアゼピン環、ペルヒドロオキサゼピン環、およびペルヒドロチアゼピン環からなる群から選択される請求項６記載の化合物。 11．Ｒ₁とＲ₂の一方が式：−COCH₂N(CH₃)₂で表される基である請求項１記載の化合物。 12．４−Ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシル）ブレフェルジンＡまたはその医薬として許容しうる塩である請求項１記載の化合物。 13．７−Ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシル）ブレフェルジンＡまたはその医薬として許容しうる塩である請求項１記載の化合物。 14．下記式：（式中、Ｒ₁とＲ₂の一方がＨであり、そしてＲ₁とＲ₂の残りが１〜12個の炭素原子を含有する置換基であり塩基性窒素原子または第四級アンモニウム基を含有している）で表される化合物の少なくとも１種またはその医薬として許容しうる塩の抗腫瘍有効量；および医薬として許容しうる担体、希釈剤または賦形剤を含んでなる医薬組成物。 15．前記置換基が、式：−COR₃で表される基であり、式中、Ｒ₃が１〜12個の炭素原子を含有する脂肪族基、１〜12個の炭素原子を含有するアリール脂肪族基および４〜６個の炭素原子を含有する複素環基からなる群から選択され、前記基が各々、塩基性窒素原子または第四級アンモニウム基を含有している請求項14記載の医薬組成物。 16．前記アリール脂肪族基がアリールアルキル基である請求項15記載の医薬組成物。 17．アリール基がベンゼン環である請求項16記載の医薬組成物。 18．アルキル基が１〜３個の炭素原子を含有している請求項16記載の医薬組成物。 19．Ｒ₁とＲ₂の一方が下記式で表される基であり、式中、ｎは１〜３の整数であり、そしてＲ₃とＲ₄は水素および１〜３個の炭素原子を有するアルキル基からなる群から同一にまたは独立して選択されるか、またはＲ₃とＲ₄はそれらが結合している窒素原子とともに、４〜６個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和の複素環を形成し、前記炭素原子のうち１〜２個はヘテロ原子で任意に置換されていてもよい請求項14記載の医薬組成物。 20．前記追加のヘテロ原子がＮ，ＳおよびＯからなる群から選択される請求項 19記載の医薬組成物。 21．Ｒ₃が式：−CH₂N(CH₃)₂で表される基であるか、またはアミノ酸のカルボキシル基を除くことによって得られる残基である請求項15記載の医薬組成物。 22．アミノ酸が、グリシン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、フェニルアラニン、プロリン、リシンおよびアルギニンからなる群から選択される請求項21記載の医薬組成物。 23．前記飽和複素環が、ピペラジン環、メチルピペラジン環、モルホリン環、メチルモルホリン環、ペルヒドロチアジン環、メチルペルヒドロチアジン環、ピラゾリン環、イソオキサゾリン環、オキサゾリン環、１，２−オキサゾリン環、ペルヒドロピリダジン環、ペルヒドロトリアジン環、ペルヒドロオキサチアジン環、ペルヒドロオキサジアジン環、イミダゾリン環、チアゾリン環、イソチアゾリン環、１，２，４−オキサジアゾリン環、１，２，５−オキサジアゾリン環、１，２，３−トリアゾール環、１，２，４−トリアゾール環、アゼピン環、ペルヒドロアゼピン環、１，２，４−ジアゼピン環、ペルヒドロジアゼピン環、ペルヒドロオキサゼピン環およびペルヒドロチアゼピン環からなる群から選択される請求項19記載の医薬組成物。 24．Ｒ₁とＲ₂の一方が式：−COCH₂N(CH₃)₂で表される基である請求項14記載の医薬組成物。 25．前記少なくとも１種の化合物が、４−Ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシル）ブレフェルジンＡまたはその医薬として許容しうる塩である請求項14記載の医薬組成物。 26．前記少なくとも１種の化合物が、７−Ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシル）ブレフェルジンＡまたはその医薬として許容しうる塩である請求項14記載の医薬組成物。 27．請求項１記載の少なくとも１種の化合物の抗腫瘍有効量を患者に投与することを含んでなる腫瘍の治療方法。 28．前記治療が、ヒトの結腸がん、黒色腫、白血病、卵巣腫瘍、前立腺腫瘍、乳房腫瘍および腎臓腫瘍からなる群から選択される腫瘍の治療を含んでなる請求項27記載の方法。