JPH10332591A - アルカリイオンの定量方法およびジアザ−クリプタンド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 従来のアルカリイオンの定量方法を改良する
こと、および、生理学的ｐＨ値の範囲においてルミネセ
ンス特性がサンプルのｐＨ値に大幅に影響されることの
ない生物学的サンプルの定量に適している化合物（ルミ
ノフォア−イオノフォア）を提供すること。 【解決手段】 サンプル中のアルカリイオンの定量方法
であって、アルカリイオンをルミノフォリック部分及び
イオノフォリック部分を有する化合物と接触させ、前記
イオノフォリック部分がサンプル中に存在するアルカリ
イオンと反応し、そのことによって前記ルミノフォリッ
ク部分のルミネセンス特性が変化し、その後、前記ルミ
ネセンスを測定し、テスト読み取りを利用して前記アル
カリイオンを定量する、サンプル中のアルカリイオンの
定量方法であって、利用されている前記化合物が下記一
般式Ｉのジアザ−クリプタンドであることを特徴とす
る、アルカリイオンの定量方法である。また、一般式Ｉ
のジアザ−クリプタンドである。 【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はサンプル中のアルカ
リイオンを定量する方法に関する。詳細には、サンプル
中のアルカリイオンがルミノフォリック部分(Luminopho
ric moiety) とイオノフォリック部分(Ionophoric moie
ty) を有する化合物（＝ルミノフォア−イオノフォア）
に接触し、イオノフォリック部分がアルカリイオンと反
応し、そのことによってルミノフォリック部分のルミネ
センス特性が変化し、その後ルミネセンスが測定され、
テスト読み取りを利用してアルカリイオンの濃度或いは
活量が推測される、即ちアルカリイオンが定量される方
法に関する。本発明は、又、アルカリイオンを定量する
ためにルミノフォア−イオノフォアとして使用されるこ
とが可能なジアザ−クリプタンドに関する。

【０００２】

【従来の技術】このタイプの定量方法はいわゆる”ＰＥ
Ｔ効果”に基づく。この後者の用語はフォトンによって
誘導されるイオノフォリック部分或いはイオノフォアか
らルミノフォリック部分或いはルミノフォアへの電子の
それぞれの移動（Photoinducedelectron transfer＝Ｐ
ＥＴ）を意味し、この各々の移動はルミノフォアの（相
対的）ルミネセンス強度及びルミネセンス減衰時間の減
少をもたらす。しかし、吸収波長及び発光波長は、その
過程において基本的に影響を受けずに保持される（J.
R. Lakowicz, "Topics in Fluorescence Spectrosco
py",Volume 4:"Probe Design and Chemical Sensing"
；Plenum Press、New York＆London（１９９４））。

【０００３】イオンがイオノフォアと結合することによ
って、ＰＥＴ効果は部分的に或いは完全に抑制されるた
め、ルミノフォリック部分のルミネセンスは強くなる。
よって、サンプル中のイオンの濃度或いは活量は例えば
ルミネセンス強度及び／又はルミネセンス減衰時間など
のルミネセンス特性の変化を測定することにより推測さ
れ得る。

【０００４】米国特許第Ａ５，５１６，９１１には、細
胞内カルシウムを定量するための蛍光指示薬として、光
学的指示薬として機能し得る蛍光置換基を有するものが
公開されている。

【０００５】米国特許第Ａ５，４３９，８２８には、ジ
アザ−クリプタンドをルミノフォア−イオノフォアとし
て利用した前記方法と同種の方法が記載されている。こ
の方法においては、ジアザ−クリプタンドは、蛍光性ク
マリンとともにフルオロフォアとして機能化されてい
て、このジアザ−クリプタンドが、その構造に対応し
て、リチウム、ナトリウム及びカリウムイオンを選択す
るものである。このルミノフォア−イオノフォアは中性
ｐＨのサンプルにおいて使用され得ること、および、そ
のような系において利用されるのがむしろ好ましいこと
が記述されている。

【０００６】しかし、生理学的ｐＨ範囲において、蛍光
シグナルは、サンプルのｐＨに大きく依存し、蛍光シグ
ナルはｐＨの減少に伴って強くなり、特にｐＨ７．４以
下に低下したところから顕著に強くなることが研究報告
されている(Frank Kastenholz, Inaugural Dissertatio
n, University of Cologne, 1993, Fig.32, p.54) 。こ
のことは生物学的サンプルで行われる定量の正確性に影
響を及ぼす。更に、用いられているクマリンが波長約３
３６ｎｍに吸収を示すため、商用ＬＥＤによって励起す
ることができないという欠点もある。

【０００７】又、米国特許Ａ５，１６２，５２５に記述
されるルミノフォア−イオノフォアも同様な欠点を有す
る。

【０００８】Tetrahedron Letters, Volume 31, No.36,
pp.5193-5196(1990) には、芳香族環に結合している２
つの窒素原子を有するジアザ−クリプタンド、即ち、ア
リール窒素及びアニリン型窒素のそれぞれを有するジア
ザ−クリプタンドについて記載されている。しかし、出
願人による研究では、このジアザ−クリプタンドが血液
の生理学的濃度及び生理学的ｐＨ値（７．０−７．６）
においてカリウムイオンを定量するのには適さないこと
が分かった。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、従来のアルカリイオンの定量方法を改良すること、
及び生理学的ｐＨ値の範囲においてルミネセンス特性が
サンプルのｐＨ値に大幅に影響されることがなく、生物
学的サンプルにおける定量に適しているルミノフォア−
イオノフォアを提供することである。特に、生理学的濃
度にあるアルカリイオンを定量するのに適している、即
ち、ルミネセンスシグナルがアルカリイオン濃度に強い
依存性を示すアルカリイオンの定量方法を提供すること
である。

【００１０】

【課題を解決するための手段】この目的は、前記の方法
において、下記一般式Ｉのジアザ−クリプタンドを化合
物 (ルミノフォア−イオノフォア）として用いる場合に
達成される。

【００１１】

【化８】

【００１２】ここで、Ｘはルミノフォリック部分であ
り、ｍは０、１、或いは２、ｏ及びｐはそれぞれ独立し
て０、１、或いは２を意味する。

【００１３】

【発明の実施の形態】前記一般式Ｉで示すジアザ−クリ
プタンドは新規である。これらの新規なルミノフォア−
イオノフォアは、生理学的ｐＨ値及び生理学的濃度にお
いてアルカリイオンを定量するのに、非常に有益であ
る。前記一般式Ｉの本発明のジアザ−クリプタンドは、
０．３０〜２．１ミリモル／リットルの濃度範囲にある
リチウムイオンを定量するのに、及び１．５〜８．０ミ
リモル／リットルの濃度範囲にあるカリウムイオンを定
量するのに特に有益である。

【００１４】特定の理論との結びつきはないが、本発明
のジアザ−クリプタンドが有益な特性を示すのは、イオ
ノフォリック部分の窒素のうち、一つがアリール窒素で
あり、他方が脂肪族窒素であるという事実によるものと
考えられている。

【００１５】ルミノフォリック部分Ｘは、イオノフォリ
ック部分との組み合わせによってＰＥＴ効果を生じ得る
全てのルミノフォリック部分を含むものである。非常に
多数のルミノフォリック部分が、イオノフォアとの組み
合わせによってＰＥＴ効果をもたらすこと、或いは原則
的にこの目的に適していることが文献からわかってい
る。これら周知のルミノフォリック部分を、一般式Ｉの
ベンゼン環と結合させることにより、新規化合物が得ら
れる。新規化合物がＰＥＴ効果を有するか否かについて
は、当業者が実験で確かめることができる。結合は、窒
素に対して、オルト位、２つのメタ位、パラ位、いずれ
でもよいが、中でもパラ位にの位置に結合するのが好ま
しい。

【００１６】ＰＥＴ効果が起こるためには、イオノフォ
リック部分の電子ドナーがルミノフォリック部分の電子
系から共役解除されていることが特に不可欠であること
は、当業者に知られている。当技術分野においてよく知
られているように、このようなイオノフォリック部分と
ルミノフォリック部分との電子の共役解除は、二つの部
分をスぺーサー基（（ＣＨ₂ ）_m 鎖（ｍ＞０））、或い
は、仮想スぺーサー（ｍ＝０）（例えば、ルミノフォリ
ック部分の面をベンゼン環の面に対して回転させること
によって）のいずれかによって分離することで達成され
得る。従って、スペーサーの機能は、イオノフォリック
部分の電子系がルミノフォリック部分の電子系と共役す
るのを妨害するものである。尚、電子の共役解除がなさ
れているかどうかは、例えば吸収波長及び発光波長に関
して際立った変化がないことによって確認できる。

【００１７】リチウムイオンの定量には、一般式Ｉのｏ
及びｐが０であるジアザ−クリプタンドを用いるのが好
ましい。

【００１８】ナトリウムイオンの定量には、一般式Ｉの
ｏとｐがそれぞれ０と１、或いはそれぞれ１と０のジア
ザ−クリプタンドを用いるのが好ましい。

【００１９】カリウムイオンの定量には、一般式Ｉのｏ
及びｐがそれぞれ１であるジアザ−クリプタンドを用い
るのが好ましい。

【００２０】一般式Ｉのルミノフォリック部分Ｘは、一
般式IIのアミノ−ナフタルイミド基、或いは一般式III
のキサンテノン基であることが好ましい。

【００２１】

【化９】

【００２２】ここで、Ｒ₁ 、Ｒ₂ 、Ｒ₃ 、Ｒ₄ 、Ｒ₅ 、
及びＲ₆ のうちの一つは−ＮＨ−基であり、この−ＮＨ
−基によりＸは前記一般式Ｉで表される化合物の−（Ｃ
Ｈ₂ ） _m −基に結合される。残りの置換基とＲ₇ は、そ
れぞれ独立して水素、親油性基或いは親水性基或いはポ
リマーと結合する反応性基である。

【００２３】

【化１０】

【００２４】ここで、Ｒ_8、Ｒ_9、Ｒ_10、 Ｒ₁₁、Ｒ
_12、 Ｒ₁₃、Ｒ₁₄、及びＲ₁₅のうちの一つは化学結合であ
り、その化学結合によりＸが前記一般式Ｉの化合物のイ
オノフォリック部分と直接結合している（ｍ＝０）。残
りの置換基は−ＯＨ、−ＯＲ₁₆（Ｒ₁₆は親水性基或いは
親油性基である）、−Ｏ−Ｒ₁₇−Ｇ（Ｒ₁₇は親水性基或
いは親油性基であり、Ｇはポリマーと結合するための反
応性基である）、或いは−（ＣＨ₂ ）_n −ＣＯＯＨ（ｎ
は０から１７である）である。

【００２５】一般式IIにおいて、Ｒ₃ 或いはＲ₄ が−Ｎ
Ｈ−基であり、Ｒ₃ 或いはＲ₄ を介して、ルミノフォリ
ック部分が上記の一般式Ｉの−（ＣＨ₂ ）_m −基に結合
しているのが好ましい。一般式III において、Ｒ₁₂が化
学結合であり、Ｒ₁₂を介して、ルミノフォリック部分が
上記の一般式Ｉのイオノフォリック部分（ｍ＝０）に直
接結合しているのが好ましい。

【００２６】好ましい親油性基としては、例えば炭素数
２０までの置換又は無置換のアルキル基及びアルコキシ
ル基が挙げられる。好ましい親水性基としては、例え
ば、少なくとも１つの水酸基及び／又は測定溶液のｐＨ
において解離する官能基（例えば、カルボン酸、スルホ
ン酸、及びリン酸など）を一つ以上有する炭素数１〜１
７のアルキル基が挙げられる。

【００２７】アミノ修飾されたポリマー(aminofunction
alized polymer: 例えば、アミノセルロース、及びアミ
ノ修飾されたポリアクリルアミド(aminofunctionalized
polymer) と結合する反応基としては、例えば米国特許
第Ａ４，７７４，３３９号、表４に記載されているもの
が挙げられる。

【００２８】４５０ｎｍ以上の波長の光により励起され
得るルミノフォリック部分が好ましい。

【００２９】アルカリイオンを定量するための本発明の
化合物は、溶解状態でサンプル溶液に加えられてもよ
い。又、これらの化合物は、センサーを構成していても
よく、その場合は、例えば図４に記載されているような
ハイドロゲルから形成されている層に含有させてもよ
い。

【００３０】本発明は、更に一般式ＩＶのジアザ−クリ
プタンドにも関する。

【００３１】

【化１１】

【００３２】ここで、ｏとｐはそれぞれ０、１、或いは
２を意味する。このクリプタンドは一般式Ｉの化合物の
イオノフォリック部分を形成する。

【００３３】

【実施例】以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説
明する。実施例においては、本発明に用いられるのに好
ましいジアザ−クリプタンドの合成例と特性をいくつか
示す。その他の化合物については、当業者はこれと類似
した方法で合成することができる。

【００３４】１． 本発明のジアザ−クリプタンドの合
成．１．１． 本発明のジアザ−クリプタンドのイオノフォ
リック部分の合成 プロセス全般 本発明のジアザ−クリプタンドのイオノフォリック部分
の合成経路の概略を以下に示す。

【００３５】２−ニトロフェノールＡ１をｎ−ブタノー
ル及び水酸化ナトリウム中で２−クロロエタノールと反
応させ、２’−（２’−ヒドロキシエトキシ）ニトロベ
ンゼンＡ２を生成した。この化合物をＳｎ／ＳｎＣｌ₂
／ＨＣｌを用いて還元し、２−（２−ヒドロキシエトキ
シ）アニリンＡ３を得、２−クロロエタノール又は、２
−（２−クロロエトキシ）エタノールを各々用いてトリ
エチルアミンが存在するジメチルホルムアミド中で反応
させ、ｐ＝０又はｐ＝１のＮ−アルキル化アニリン誘導
体Ａ４をそれぞれ合成した。ジメチルホルムアミドと炭
酸カリウム混合液中で４−トルエンスルホンアミドＡ５
を２−クロロエタノールと共に加熱し、Ｎ，Ｎ−ビス
（２−ヒドロキシエチル）−４−トルエンスルホンアミ
ドＡ６を得た。次に、４−トルエンスルホン酸クロライ
ドと反応させることによって相当するジトシルエステル
Ａ７を得た。

【００３６】次に、ジトシルエステルＡ７とｐ＝０及び
ｐ＝１のそれぞれのＮ−アルキル化アニリン誘導体とを
ｔ−ブタノール／テトラヒドロフランに塩基としてカリ
ウム−ｔ−ブトキサイドを加えた混合溶液中で反応さ
せ、ｐ＝０及びｐ＝１のそれぞれに相当するジアザ−ク
ラウンエーテルトルエンスルホンアミドＡ８を生成し
た。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精
製し、純生成物を得た。次に、テトラヒドロフラン中で
リチウムアルミニウム水酸化物と共に還流し、トシル基
を脱離させ、ｐ＝０及びｐ＝１のそれぞれのジアザ−ク
ラウンエーテルＡ９を得た。３−オキサペンタン−ジカ
ルボン酸ジクロライドＡ１０（ｏ＝０）と３，６−ジオ
キサオクタンジカルボン酸ジクロライドＡ１０（ｏ＝
１）は、相当するカルボン酸をベンゼン中で蓚酸ジクロ
ライドと反応させることにより得た。ｏ＝０、ｐ＝０又
はｏ＝０、ｐ＝１のそれぞれのクリプタンド−ビス−ア
ミドＡ１１は、ｐ＝０又はｐ＝１のそれぞれのジアザ−
クラウンエーテルＡ９を、各々テトラヒドロフラン中で
３−オキサペンタンジカルボン酸ジクロライドＡ１０
（ｏ＝０）と反応させることによって高濃度で得られ
た。ｏ＝１、ｐ＝０又は、ｏ＝１、ｐ＝１のそれぞれの
クリプタンド−ビス−アミドＡ１１はｐ＝０及びｐ＝１
のそれぞれのジアザ−クラウンエーテルＡ９と３，６−
ジアザオクタン−ジカルボン酸ジクロライドＡ１０（ｏ
＝１）を用いて類似した方法によって得た。テトラヒド
ロフラン中でボラン−テトラヒドロフラン複合体によっ
てアミド基を還元し、（ｏ＝０，ｐ＝０）と、（ｏ＝
０，ｐ＝１）と、（ｏ＝１，ｐ＝０）と、（ｏ＝１，ｐ
＝１）のジアザ−クリプタンドＡ１２を各々合成した。

【００３７】次に、ジメチルホルムアルデヒド中で、リ
ンオキシトリクロライドを用いて直接ホルミル化するこ
とによりアルデヒド基を導入し、相当するジアザ−クリ
プタンドアルデヒドＡ１３、即ち、（ｏ＝０, ｐ＝０）
と、（ｏ＝０，ｐ＝１）と、（ｏ＝１，ｐ＝０）と、
（ｏ＝１，ｐ＝１）のジアザ−クリプタンド−アルデヒ
ドＡ１３をそれぞれ得た。類似した方法で、ｏ及びｐが
独立してそれぞれ２である化合物Ａ１３を得ることも可
能である。合成スキームを以下に示す。

【００３８】

【化１２】

【００３９】それぞれの反応工程の説明． ２−（２−ヒドロキシエトキシ）ニトロベンゼンＡ２：
１０グラム（７１．８８ミリモル）の２−ニトロフェノ
ールＡ１及び３．５９グラム（８９．８６ミリモル）の
水酸化ナトリウムを５５mlのｎ−ブタノールと５mlの水
の混合液の中で７０℃で溶解し、６．２６ml（７．５２
グラム、９３．４４ミリモル）の２−クロロエタノール
を一滴ずつゆっくりと加えた。続いて、これを１００℃
で３日間強く攪拌した。冷却後、反応混合物を濾過し、
沈殿物をクロロホルムで洗浄して、濾過液を濃縮した。
この残留物をクロロホルムに溶解し、１０％の水酸化ナ
トリウム水溶液で３回洗浄した。続いて、有機相を硫酸
ソーダで乾燥し、減圧下で濃縮し、１０．８グラムの鮮
やかな黄色の結晶を得た。収率は８２％であった。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ），δ（ｐｐｍ）：３．９７
（ｍ，３Ｈ），４．２２（ｔ，２Ｈ），６．９８−７．
１３（ｍ，２Ｈ），７．５２（ｍ，１Ｈ），７．８３
（ｍ，１Ｈ）．

【００４０】２−（２−ヒドロキシエトキシ）アニリン
Ａ３：８．９グラム（４８．５９ミリモル）の２−（２
−ヒドロキシエトキシ）ニトロベンゼンＡ２、１６．４
４グラム（７２．８８ミリモル）のＳｎＣｌ₂ ．２Ｈ ₂
Ｏ、及び１７．３グラム（１４５．７７ミリモル）のス
ズを３０．８４mlのＨＣｌ水溶液（３０％）と２５mlの
水の中で８時間９０℃で攪拌した。冷却後、溶液を５Ｎ
の水酸化ナトリウム水溶液で処理し、９０℃で３時間攪
拌した。その後、冷却すると溶液中には粗生成物が結晶
化したので、溶液をデカントし、吸引によって上澄みを
除去した。この粗生成物をメタノールに溶解し、加熱
し、その懸濁液を濾過した。続いて、その濾過液を減圧
下で濃縮し、６グラムの薄茶色の結晶を得た。収率は８
０％であった。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ），δ（ｐｐｍ）：３．６２
（ｍ，３Ｈ），３．９７（ｔ，２Ｈ），６．５２−６．
７５（ｍ，４Ｈ）．

【００４１】Ｎ−[ ２−（２−ヒドロキシエトキシ）エ
チル] −２−（２−ヒドロキシエトキシ）アニリンＡ４
（ｐ＝１）：６グラム（３９．１７ミリモル）の２−
（２−ヒドロキシエトキシ）アニリンＡ３、５ml（５．
８５グラム、４７ミリモル）の２−（２−クロロエトキ
シ）エタノール、及び８．１９ml（５．９５グラム、５
８．７５ミリモル）のトリエチルアミンを２０mlのジメ
チルホルムアミドに溶解し、９０℃で４日間攪拌した。
冷却後、溶液を濾過し、沈殿物をジクロロメタンで洗浄
し、濾過液を減圧下で濃縮した。残留物をクロロホルム
に溶解し、少量の水で２回洗浄した。続いて、クロロホ
ルム溶液を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。その粘
性のある粗生成物を、移動相としてトルエン／アセトン
（１：２の割合）を用いてシリカゲル６０のカラムカラ
ムクロマトグラフィーにより精製し、５グラムの茶色の
粘性のあるオイルを得た。収率は５３％であった。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ₃ ），δ（ｐｐｍ）：３．２６
（ｍ，２Ｈ），３．５２（ｍ，２Ｈ），３．６７（ｍ，
４Ｈ），３．８３（ｍ，２Ｈ），４．００（ｍ，２
Ｈ），４．５６（ｂｒ ｓ，２Ｈ），６．５５−６．９
５（ｍ，４Ｈ）．

【００４２】Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエトキシ）
−４−トルエンスルホンアミドＡ６：６．８４グラム
（４０ミリモル）の４−トルエンスルホンアミドＡ５、
７ml（８．３７グラム、１０４ミリモル）の２−クロロ
エタノール、及び２７．６４グラム（２００ミリモル）
の炭酸カリウムを１００mlのジメチルホルムアミドに懸
濁し、１１０℃で３日間攪拌した。その後、冷却して、
反応混合液を濾過し、沈殿物をクロロホルムで洗浄し
た。続いて、濾過液を濃縮し、油状の残留物をクロロホ
ルムに溶解し、最後に１０％の水酸化ナトリウム溶液で
洗浄した。有機溶液相を濃縮すると、８．４グラムの純
生成物が薄い黄色の結晶として得られた。収率は８１％
であった。₁ ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ₃ ），δ（ｐｐｍ）：２．３９
（ｓ，３Ｈ），３．２１（ｔ，４Ｈ），３．８２（ｔ，
４Ｈ），４．５０（ｂｒ ｓ，２Ｈ），７．２９（ｄ，
２Ｈ），７．６５（ｄ，２Ｈ）．

【００４３】Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−
４トルエンスルホンアミド−ビス−トルエンスルホン酸
エステルＡ７：４．５４グラム（１７．５ミリモル）の
Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−４−トルエン
スルホンアミドＡ６を２０mlのアセトン中に溶解し、−
５℃まで冷却した。続いて、８グラム（４２ミリモル）
の４−トルエンスルホン酸クロライドを加え、１０分間
攪拌した。２５％の水酸化ナトリウム水溶液を−２℃で
一滴ずつゆっくり加え、０℃で８時間引き続き攪拌し、
反応混合液を一晩冷蔵庫に放置した。その後、混合液
を、氷水に注ぐと粘性オイルとして生成物が沈殿した。
水相を注意深くデカントし、その生成物をクロロホルム
に溶解し、水で洗浄した。溶媒を濃縮すると、薄い黄色
の粘性オイルが低温で徐々に唱化し、９．２グラムの純
生成物が得られた。収率は９２％であった。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ₃ ），δ（ｐｐｍ）：２．４１
（ｓ，３Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ），３．３６（ｔ，
４Ｈ），４．１０（ｔ，４Ｈ），４．５０（ｂｒｓ，２
Ｈ），７．２９（ｄ，２Ｈ），７．３４（ｄ，４Ｈ），
７．６２（ｄ，２Ｈ），７．７６（ｄ，４Ｈ）．

【００４４】ジアザ−クラウンエーテルトルエンスルホ
ンアミドＡ８（ｐ＝１）：５グラム（２０．７２ミリモ
ル）のアニリン誘導体Ａ４（ｐ＝１）及び６．０５グラ
ム（５３．８８ミリモル）のカリウム−ｔ−ブトキサイ
ドを窒素雰囲気下で２８０mlのｔ−ブタノールに溶解
し、６０℃で２時間攪拌した。続いて、１４０mlの乾燥
したテトラヒドロフランに１１．７６グラム（２０．７
２ミリモル）のトルエンスルホン酸エステルＡ７を４０
℃で２時間にわたり一滴ずつ加えた。続いて、この反応
混合液を６０℃で４８時間攪拌した。冷却後、溶液を濾
過し、沈殿物をジクロロメタンで洗浄し、濾過液を減圧
下で濃縮した。残留物をクロロホルムに溶解し、水で２
回洗浄した。最後に、有機溶液相を濃縮すると黒い粘性
のある残留物が生成した。トルエン／アセトン（１０：
９）を移動相として使用し、シリカゲルのカラムクロマ
トグラフィーにより、生成物を得た。得られた生成物は
１グラムで、黄色い粘性のあるオイルであった。収率は
１０％であった。 ¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ₃ ），δ（ｐｐｍ）：２．４０
（ｓ，３Ｈ），３．２０−４．５０（ｍ，２０Ｈ），
６．５５−６．９６（ｍ，４Ｈ），７．２７（ｄ，２
Ｈ），７．６７（ｄ，２Ｈ）．

【００４５】ジアザ−クラウンエーテルＡ９（ｐ＝
１）：０．４１グラム（１０．８ミリモル）のリチウム
アルミニウムハイドライドを窒素雰囲気下において１０
mlの乾燥したテトラヒドロフラン中に懸濁し、０．５グ
ラム（１．０８ミリモル）のジアザークラウンエーテル
トルエンスルホンアミドＡ８（ｐ＝１）の１０mlテトラ
ヒドロフラン溶液を一滴ずつゆっくり加えた。反応混合
液を還流しながら３日間攪拌した。冷却後、余分のリチ
ウムアルミニウムハイドライドを２：１（ｖ／ｖ：体積
比）の割合のテトラヒドロフラン／水を用いて分解し、
濾過し、沈殿物をジクロロメタンによって洗浄した。残
留物を、ジクロロメタンに溶解し、濾過し、減圧下で溶
媒を除去したところ、０．２５グラムの薄茶色のオイル
を得た。収率は７５％であった。

【００４６】クリプタンド−ビス−アミドＡ１１（ｏ＝
１、ｐ＝１）：この反応は、R. Crossley, Z. Goolamal
i, P. G. Sammes, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 19
94, 1615-1622.に従って行った。ジカルボン酸ジクロラ
イドＡ１０（ｏ＝０）は、B. Dietrich, J. M. Lehn,
J. P. Sauvage, J. Blanzat, Tetrahedron 1973, 29, 1
629-1645 の方法によって得た。０．１３グラム（１．
６７ミリモル）のピリジンの２４０mlの乾燥したテトラ
ヒドロフラン溶液を調製し、０℃に冷却した。続いて、
０．２５グラム（０．８０５ミリモル）のジアザ−クラ
ウンエーテルＡ９（ｐ＝１）を含有する４０ｍｌの乾燥
したテトラヒドロフラン及び０．１７グラム（０．６０
５ミリモル）の３，６−ジオキサオクタンジカルボン酸
ジクロライドＡ１０（ｏ＝１）を含有する４０mlの乾燥
したテトラヒドロフランを４時間にわたって同時に一滴
ずつ加えた。続いて、反応混合液を更に０℃で４０時間
攪拌し、混合液を濾過して、テトラヒドロフランを除去
した。油状で茶色の残留物をクロロホルムに溶解し、稀
釈したＨＣｌで洗浄し、その後、水で洗浄した。クロロ
ホルム溶液を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、油状の
薄茶色の残留物を得た。収量は０．１２グラム（３３
％）であった。

【００４７】ジアザークリプタンドＡ１２（ｏ＝１、ｐ
＝１）：０．１２グラム（０．２７ミリモル）のクリプ
タンド−ビス−アミドＡ１１（ｏ＝１、ｐ＝１）を三つ
口フラスコに入れた。三つ口フラスコの 1つの口から窒
素を供給し、１つの口にはセプタム(septum)を取り付
け、その他の口にはカルシウム管を有する還流冷却器を
取り付けた。２．５mlの乾燥したテトラヒドロフランを
セプタムを通してシリンジによって加え、懸濁液を氷浴
で冷却した。続いて、２．２ml（２．２ミリモル）の１
ｍボラン−ＴＨＦ−複合体の溶液をセプタムを通して慎
重に加えた。１０分後、氷浴を除去し、反応混合液を室
温で３０分間攪拌し、続いて還流しながら２時間攪拌し
た。冷却後、混合液を１mlの水及び１０mlの６ＮのＨＣ
ｌと注意深く混合し、室温で１時間攪拌した。溶媒を減
圧下で除去し、その結果得られた白い懸濁液は、水酸化
リチウム水溶液によってｐＨ１０に調製された。水相を
クロロホルムで抽出し、その後、減圧下で溶液を濃縮
し、薄茶色のオイルを得た。収量は０．１グラム（８８
％）であった。

【００４８】ジアザ−クリプタンド−アルデヒドＡ１３
（ｏ＝１、ｐ＝１）：０．５グラム（１．１８ミリモ
ル）のジアザ−クリプタンドＡ１２（ｏ＝１、ｐ＝１）
の１．５mlジメチルホルムアミド溶液を調製し、−１０
℃まで冷却した。０．２２ml（０．３６グラム、２．３
５ミリモル）のリンオキシトリクロライドを温度が０℃
を超えないように注意して一滴ずつ加えた。反応混合液
を−５℃で１５分間、続いて室温で一晩、そして最後に
６０℃で１時間攪拌した。冷却後、混合液を水と混合
し、高濃度の水酸化リチウム水溶液でｐＨ９に調製し、
３０分間攪拌した。一回につき３０mlずつのクロロホル
ムを使用して溶液を３回抽出し、減圧下で有機相を濃縮
し、０．３２グラムの黄色のオイルを得た。収率は６０
％であった。

【００４９】１．２ 本発明のジアザ−クリプタンドの
合成．本発明のジアザ−クリプタンドの合成方法を、二
種のルミノフォリック部分（アミノナフタルイミド及び
キサンテノン）を有するものについて以下に例示した。
それぞれの合成スキームにおいて”Ｙ”はイオノフォリ
ック部分を示す。

【００５０】ルミノフォリック部分がアミノナフタルイ
ミド基である場合の合成プロセス ルミノフォリック部分及びイオノフォリック部分間にス
ペーサーとして一つのＣＨ₂ 基を有する本発明の化合物
を合成するために、まず最初に、化合物Ｃ１（即ち、前
記合成スキームにおいては、化合物Ａ１３であって、”
Ｙ”はＡ１２を示す。）を、オキシムＣ２に変化させ、
次に酢酸中でＺｎによって還元し、アミンＣ３を得た。
以下に概略的に示すように、Ｃ６とＣ７をＫ₂ ＣＯ₃ の
存在下で、ジメチルホルムアミド中で反応させることに
よってアミノナフタルイミドＣ８を得、これとアミンＣ
３を結合させ、本発明の化合物Ｃ９を合成した。

【００５１】ルミノフォリック部分及びイオノフォリッ
ク部分間にスペーサーとして二つのＣＨ₂ 基を有する化
合物を合成するために、まず最初に、化合物Ｃ１を酢酸
アンモニウムの存在下で非常に多量のニトロメタンと反
応させて化合物Ｃ４を得、更に化合物Ｃ４を、ＬｉＡｌ
Ｈ₄ によってＴＨＦ中で還元し、アミンＣ５を得た。ア
ミンＣ５とアミノナフタルイミドＣ８とを結合させ、化
合物Ｃ１０を合成した。この反応の概略についても以下
に示した。

【００５２】

【化１３】

【００５３】各々の反応工程の説明．４−クロロ−Ｎ−（４−カルボキシフェニルメチル）−
１，８−ナフタルイミドＣ８： ４６．４グラム（２００
ミリモル）の４−クロロ−１，８−ナフタル酸無水物Ｃ
７、３０．２グラム（２００ミリモル）４−アミノメチ
ル安息香酸Ｃ６、及び１３．８グラム（１００ミリモ
ル）Ｋ₂ ＣＯ₃ を２リットルのジメチルホルムアミド中
で懸濁し、室温で１６時間、６０℃で６時間攪拌した。
続いて、混合液を４リットルの水に注ぎ、６ＮのＨＣｌ
でｐＨ４に調製した。その結果生成された沈殿物を濾過
し、６０℃で１８分間乾燥し、３６グラムのオフホワイ
トの粉末を得た。収率は５１％であった。

【００５４】ジアザ−クリプタンドアルドキシムＣ２
（ｏ＝１、ｐ＝１）：１グラム（２．２１ミリモル）の
ジアザ−クリプタンドアルデヒドＡ１３（ｏ＝１、ｐ＝
１）を１０mlのエタノールと７mlの水の中で懸濁した。
続いてこれに０．３１グラム（４．４２ミリモル）のヒ
イドロキシルアミン塩酸及び０．２６グラム（２．４３
ミリモル）のＮａ₂ ＣＯ₃ を加え、反応混合液を５時間
６０℃に温めた。冷却後、溶液を氷水と混合させ、オイ
ルとなって沈殿したオキシムをクロロホルムに溶解し、
水で洗浄した。有機溶液を乾燥し、濃縮した結果、薄茶
色のオイル状の０．８３グラムのオキシムを得た。収率
は８０％であった。

【００５５】ジアザ−クリプタンドアミンＣ３（ｏ＝
１、ｐ＝１）：０．８３グラム（１．７７ミリモル）の
ジアザ−クリプタンドアルドキシムＣ２（ｏ＝１、ｐ＝
１）の１２ml酢酸溶液を調製し、１．６２グラム（２
４．７５ミリモル）の亜鉛を加えた。反応混合液を室温
で一晩、続いて６５℃で３時間攪拌した。冷却後、混合
液をジクロロメタンと混合し、余分の亜鉛と亜鉛の塩を
除去するために濾過した。沈殿物を、ジクロロメタンで
洗浄した。濾過液を減圧下で濃縮し、続いて黄色の残留
物を水と混合し、水酸化リチウム水溶液でｐＨ９に調製
した。生成物をジクロロメタンによって水溶液から抽出
し、その溶媒を減圧下で除去した結果、０．５６グラム
の暗い黄色のオイルを得た。収率は７０％であった。

【００５６】４−（２−ニトロエテニル）−ジアザ−ク
リプタンドＣ４（ｏ＝１、ｐ＝１）：１グラム（２．２
１ミリモル）のジアザ−クリプタンドアルデヒドＡ１３
（ｏ＝１、ｐ＝１）の４．５mlの酢酸溶液を調製し、室
温で１０分間攪拌した。続いて、２．６３ml（２．９７
グラム、４８．６２ミリモル）のニトロメタンを加え、
６０℃で５時間攪拌した。冷却後、混合液を氷水に注ぐ
と暗い赤色の沈殿物が形成された。それらを吸引しなが
ら、水で洗浄した。その後、乾燥器で乾燥して０．６グ
ラムの生成物を得た。収率は５５％であった。

【００５７】４−（２−アミノエチル）−ジアザ−クリ
プタンドＣ５（ｏ＝１、ｐ＝１）：三つ口フラスコ中
で、０．４６グラム（１２．１ミリモル）のＬｉＡｌＨ
₄ を２５mlの乾燥テトラヒドロフランに懸濁した。三つ
口フラスコの１つの口から窒素を供給し、１つの口は塩
化カルシウム管を有する冷却器を取り付けた。続いて、
０．６グラム（１．２１ミリモル）の４−（２−ニトロ
エテニル）−ジアザ−クリプタンドＣ４（ｏ＝１、ｐ＝
１）を含有する６mlの乾燥したテトラヒドロフランを一
滴ずつゆっくりと加えた。続いて、混合液を還流しなが
ら４時間攪拌した。反応混合液を氷浴で冷却し、テトラ
ヒドロフランとＮａＯＨ水溶液の混合液を用いて余分の
ＬｉＡｌＨ₄ を慎重に分解した。混合液を濾過し、沈殿
物をクロロホルムで洗浄し、濾過液を濃縮した。残留物
をクロロホルムに溶解し、水で洗浄し、溶液を濃縮した
結果、０．４５グラムの暗い黄色のオイルが得られた。
収率は８０％であった。

【００５８】ジアザ−クリプタンドフルオロイオノフォ
アＣ９（ｏ＝１、ｐ＝１）：０．５６グラム（１．２３
ミリモル）のジアザ−クリプタンドアミンＣ３（ｏ＝
１、ｐ＝１）、０．４２グラム（１．２３ミリモル）の
４−クロロ−ナフタルイミド誘導体Ｃ８、及び０．４グ
ラム（３．０９ミリモル）のジイソプロピルエチルアミ
ンを２．５mlのＮ−メチルピロリジノン中に懸濁した。
反応混合液を窒素雰囲気下において６０℃で２４時間攪
拌した。冷却後、黄色の溶液を水と混合させると、未反
応の４−クロロ−ナフタルイミド誘導体と共に生成物が
沈殿した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥器で一晩
乾燥した。混合液を、温めたクロロホルム／メタノール
（３：１）中に溶解し、濾過し、その溶液を濃縮し、そ
の後、移動相としてクロロホルム／メタノール（３：
１）と１％の酢酸を用いてシリカゲルのカラムクロマト
グラフィーにより残留物を精製した。その結果、０．０
６５グラムの生成物を得た。収率は７％であった。

【００５９】ジアザ−クリプタンドフルオロイオノフォ
アＣ１０（ｏ＝１、ｐ＝１）：０．４５グラム（０．９
６ミリモル）の４−（２−アミノエチル）−ジアザ−ク
リプタンドＣ５（ｏ＝１、ｐ＝１）、０．３３グラム
（０．９６ミリモル）の４−クロロ−ナフタルイミド誘
導体Ｃ８、及び０．３１グラム（２．４ミリモル）のジ
イソプロピルエチルアミンを２．５ｍｌのＮ−メチルピ
ロリジノン中で懸濁した。反応混合液を窒素雰囲気下で
６０℃で２４時間攪拌した。冷却後、黄色の溶液を水と
混合すると、未反応の４−クロロ−ナフタルアミド誘導
体と共に生成物が沈殿した。沈殿物を濾過し、水で洗浄
し、乾燥器中で一晩乾燥した。混合液を温かいクロロホ
ルム／メタノール（３：１）に溶解し、濾過し、その溶
液を濃縮し、移動相としてクロロホルム／メタノール
（３：１）と１％の酢酸を用いてシリカゲルのカラムク
ロマトグラフィーにより残留物を精製した。その結果、
０．０７４グラムの生成物を得た。収率は１０％であっ
た。

【００６０】ルミノフォリック部分がキサンテノン基で
ある場合の合成プロセス 以下に合成プロセスの概略を示す。

【００６１】

【化１４】

【００６２】ジアザ−クリプタンド−２，３，７−トリ
ヒドロキシフルロンＤ３（ｏ＝１、ｐ＝１）：１６mlの
５０％エタノール中に１．６７グラム（６．６３ミリモ
ル）の１，２，４−トリアセトキシベンゼンＤ２を懸濁
し、この液に１．４mlの高濃度硫酸を一滴ずつ加え、１
０分間攪拌した後、１．５グラム（３．３１ミリモル）
のジアザ−クリプタンドアルデヒドＤ１（＝Ａ１３）を
加えた。続いて、懸濁液を８０℃で２４時間攪拌した。
混合液を水と混合し、２５％の水酸化テトラメチルアン
モニウムによってｐＨ５に調製し、一晩放置した。その
後、反応混合液をデカントし、残留物を水で洗浄し、メ
タノールと混合し、攪拌した。減圧下で溶媒を除去して
０．６７グラムの赤い生成物を得た。収率は３０％であ
った。

【００６３】ジアザ−クリプタンド−２，３，７−トリ
−ｔ−ブトキシカルボニルメトキシフルオロンＤ４（ｏ
＝１、ｐ＝１）：０．６７グラム（１ミリモル）のジア
ザ−クリプタンド−２，３，７−トリヒドロキシフルオ
ロンＤ３（ｏ＝１、ｐ＝１）、０．４５グラム（３ミリ
モル）のヨウ化ナトリウム、０．４８グラム（４．５ミ
リモル）の炭酸ナトリウム、及び０．８８グラム（４．
５ミリモル）のｔ−ブチルブロモアセテートを５mlのジ
メチルホルムアミド中で懸濁し、１１０℃で１時間攪拌
した。冷却後、混合液を水で稀釈し、クロロホルムで抽
出した。有機溶液相を水で洗浄し、硫酸ソーダで乾燥
し、濃縮した。シリカゲルのカラムクロマトグラフィー
により、クロロホルム／メタノール（９：１）を用いて
粗生成物を精製した結果、０．５５グラムの赤い粘性の
ある生成物を得た。収率は５５％であった。

【００６４】ジアザ−クリプタンド−２，３，７−トリ
−カルボキシメトキシフルオロンＤ５（ｏ＝１、ｐ＝
１）：０．５５グラム（０．５４ミリモル）のジアザ−
クリプタンド−２，３，７−トリ−ｔ−ブトキシカルボ
ニルメトキシフルオロンＤ４（ｏ＝１、ｐ＝１）の２ml
ジクロロメタン溶液を調製した。０．２５mlのトリフル
オロ酢酸を加え、４０℃で４時間攪拌した。反応混合液
を減圧下で濃縮し、残留物をメタノールに溶解した。溶
媒を部分的に蒸発させ、できるだけ完全にトリフルオロ
酢酸を除去するためにこの操作を２回繰り返した。その
結果、０．３６グラムの赤い粘性のある生成物を得た。
収率は９０％であった。

【００６５】２．本発明のジアザ−クリプタンドのルミ
ネセンス特性．図１〜図３に、所定のアルカリイオン濃
度の関数として、セルロースに固定化された本発明の化
合物の溶液中でのルミネセンス特性を示した。表の縦軸
はそれぞれの相対的ルミネセンス強度を示す。

【００６６】図１はジアザ−クリプタンドＣ９のグラフ
である。ここで、セルロース繊維（アミノ修飾）への固
定化は以下のようにして行った。０．０３ミリモルのジ
アザ−クリプタンドＣ９、０．０６グラム（０．３ミリ
モル）のＮ，Ｎ−ジシクロヘキシル−１，３−カルボジ
イミド、０．４グラム（０．３ミリモル）Ｎ−ヒドロキ
シサクシンイミド、及び５グラムの活性化されたセルロ
ース（ＳＵ−Ａ−１，０２８，６７７、ＣＡ９９：１７
７７２３ｈに記載された方法に基づいて製造されたも
の）を２mlのジメチルホルムアミド中で２０時間懸濁し
た。セルロースを濾過し、５mlのジメチルホルムアミド
で５回、５mlの水で１回、５mlの０．２ＮのＨＣｌで２
回、５mlの水で１回、５mlの０．２ＮのＮａＯＨで２
回、５mlの水で１０回、５mlのアセトンで２回、及び５
mlのエーテルで２回洗浄し、室温で１６時間乾燥した。
次に、セルロースをふるい分けした（２５μｍ）。

【００６７】センサーディスクは以下の方法で製造し
た。ジアザ−クリプタンドＣ９が固定化している０．２
５グラムのアミノセルロース繊維（２５μｍに篩い分け
したもの）を９０％のエタノール水溶液中の４．７５グ
ラムの１０％ハイドロゲルＤ４（Tyndale Plains-Hunte
r LTD. Ringoes, NJ08551) 中に１６時間懸濁した。得
られた均一の分散液をポリエステルホイル(Melinex fo
il, ICI America)上に乾燥密度が１０μｍとなるように
塗布した。このホイルを３％の活性炭で被覆し、１０％
のハイドロゲルを乾燥密度で５μｍとし、直径２．５cm
の小さなディスクを切りとった。このディスクを１６時
間以上緩衝液中に放置し、活性化した。

【００６８】センサーディスクの切り取り方法及び測定
する方法は、M. J. P. Leiner andP. Hartmann, Sensor
s and actuators B, 11(1993), 281-189(" Theory and
Practice in optical pH sensing ”) に記載されてい
る方法に従った。

【００６９】このようにして得られたセンサーディスク
を用いた測定装置の概略を図４に示す。図４において、
Ｓはセンサーディスクの一部を意味する。セルロース繊
維に固定化された化合物は、Ｉで示され、ハイドロゲル
（Ｍ層）中に存在している。このＭ層はイオン透過性で
あり、キャリアＴに支持されている。キャリアＴは、励
起光及び測定放射光を透過する透明なホイルである。本
発明では、化合物Ｉはイオン透過性マトリックスに直接
共有結合で結合していてもよいし、物理的に溶解した状
態でマトリックス中に存在させてもよい。測定に際して
は、センサーディスクを光を通さないサーモスタット付
きの通過セル(through-flow cell) に挿入し、異なった
濃度のナトリウムイオンを有するサンプルＰに接触させ
た。

【００７０】用いた光学的測定システムは、光源Ａとし
て青色のＬＥＤ、検出器としてのフォトダイオードＭ、
波長を選択するための光学的フィルターＡ及びＦ、及び
励起光をポリマーＭまで伝導するため及び放射光を電子
信号処理用素子 (表示せず)のような光検知器Ｍまで伝
導するための繊維光学配置から構成されている。励起光
の端において、干渉フィルター（４８０ｎｍにおいて最
大透過度を示す）を利用し、照射光端において５２０ｎ
ｍの遮断フィルターを利用した。

【００７１】図１に、１４５ミリモル／リットルのナト
リウムイオンが存在する状態で、種々のカリウムイオン
濃度（０．２、０．６、１、３、５、７、９、２０、５
０、及び１００ミリモル／リットル；横座標；対数目
盛）に対する関数として、相対的ルミネセンス強度を示
した。測定媒体は、３０ミリモル／リットルのトリス／
ＨＣｌ緩衝液（ＣＯ₂ フリー；ｐＨ：７．４；３７℃）
であった。

【００７２】ジアザ−クリプタンドＣ９の代わりにジア
ザ−クリプタンドＣ１０を用いた場合を図２に示した。
ルミネセンス強度は、１４５ミリモル／リットルのナト
リウムイオンが存在する状態で、種々のカリウムイオン
濃度（０．２、０．６、１、３、５、７、９、２０、５
０、及び１００ミリモル／リットル；横座標；対数目
盛）に応じて測定した。

【００７３】ジアザ−クリプタンドＣ９の代わりにジア
ザ−クリプタンドＤ５を用いた場合を図３に示した。ル
ミネセンス強度は、１４５ミリモル／リットルのナトリ
ウムイオンが存在する状態で、種々のカリウムイオン濃
度（０．１、０．５、１、３、５、１０、及び５０ミリ
モル／リットル；横座標；対数目盛）に応じて測定し
た。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明のジアザ−クリプタンドを用いたセンサ
ーディスクのルミネセンス特性とアルカリイオン濃度の
相関を示すグラフの一例である。

【図２】本発明のジアザ−クリプタンドを用いたセンサ
ーディスクのルミネセンス特性とアルカリイオン濃度の
相関を示すグラフの一例である。

【図３】本発明のジアザ−クリプタンドを用いたセンサ
ーディスクのルミネセンス特性とアルカリイオン濃度の
相関を示すグラフの一例である。

【図４】本発明のジアザ−クリプタンドを利用したセン
サーディスクの構成の一例である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (71)出願人 598051749 Ｓｔｅｔｔｅｍｅｒｓｔｒａｓｓｅ 28 ＣＨ−8207 Ｓｃｈａｆｆｈａｕｓｅｎ Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ (72)発明者 フアルイ ヒー アメリカ合衆国 30202 ジョージア州 アルファレッタ プレストン オークス ドライブ 290 (72)発明者 アンドレイ ボイラーゲーケル オーストリア国 アー−8010 グラツ フ ェリックス ダーン−プラーツ

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 サンプル中のアルカリイオンをルミノフ
   ォリック部分及びイオノフォリック部分を有する化合物
   と接触させ、前記イオノフォリック部分がサンプル中に
   存在するアルカリイオンと反応し、そのことによって前
   記ルミノフォリック部分のルミネセンス特性が変化し、
   その後、前記ルミネセンスを測定し、テスト読み取りを
   利用して前記アルカリイオンを定量する、アルカリイオ
   ンの定量方法であって、利用されている前記化合物が下
   記一般式Ｉのジアザ−クリプタンドであることを特徴と
   する、アルカリイオンの定量方法。 【化１】 （式Ｉ中、Ｘはルミノフォリック部分であって、ｍは
   ０、１、或いは２であり、ｏとｐは独立してそれぞれ
   ０、１或いは２を意味する。）
2. 【請求項２】 リチウムイオンの定量に、ｏ及びｐがそ
   れぞれ０である前記一般式Ｉのジアザ−クリプタンドを
   使用することを特徴とする請求項１のアルカリイオンの
   定量方法。
3. 【請求項３】 ナトリウムイオンの定量に、ｏが０でｐ
   が１である前記一般式Ｉのジアザ−クリプタンドを使用
   することを特徴とする請求項１のアルカリイオンの定量
   方法。
4. 【請求項４】 カリウムイオンの定量に、ｏ及びｐがそ
   れぞれ１である前記一般式Ｉのジアザ−クリプタンドを
   使用することを特徴とする請求項１のアルカリイオンの
   定量方法。
5. 【請求項５】 前記一般式Ｉの前記ルミノフォリック部
   分Ｘが、下記一般式IIのアミノ−ナフタルイミド基、又
   は、下記一般式III のキサンテノン基であることを特徴
   とする請求項１から請求項４までのいずれか１項のアル
   カリイオンの定量方法。 【化２】 （一般式II中、Ｒ_1、Ｒ_2、Ｒ_3、Ｒ_4、Ｒ_5、及びＲ₆ のうちの
   一つは−ＮＨ−基であり、この基を介してＸは前記一般
   式Ｉの化合物の−（ＣＨ₂ ）_m −基と結合し、残りの置
   換基とＲ₇ はそれぞれ独立して水素、親油性基或いは親
   水性基或いはポリマーと結合する反応性基である。） 【化３】 （一般式III 中、Ｒ_8、Ｒ_9、Ｒ₁₀、Ｒ_11、 Ｒ_12、 Ｒ₁₃、Ｒ
   _14、 及びＲ₁₅のうちの一つが、化学結合であり、これを
   介してＸは前記一般式Ｉの化合物のイオノフォリック部
   分に直接結合し（ｍ＝０）、残りの置換基は、−ＯＨ、
   −ＯＲ₁₆（Ｒ₁₆は親水性基或いは親油性基である）、−
   Ｏ−Ｒ₁₇−Ｇ（Ｒ₁₇は親水性基或いは親油性基であり、
   Ｇはポリマーと結合するための反応性基である）、或い
   は、−（ＣＨ₂ ）_n −ＣＯＯＨ（ｎは０から１７であ
   る）である。）
6. 【請求項６】 下記一般式Ｉのジアザ−クリプタンド。 【化４】 （式Ｉ中、Ｘはルミノフォリック部分であり、特にＸ
   は、下記一般式IIのアミノ−ナフタルイミド基、もしく
   は下記一般式III のキサンテノン基を意味する。また、
   ｍは０、１或いは２で、ｏ及びｐはそれぞれ独立して、
   ０、１或いは２を意味する。） 【化５】 （一般式II中、Ｒ_1、Ｒ_2、Ｒ_3、Ｒ_4、Ｒ_5、及びＲ₆ のうちの
   一つは−ＮＨ−基であり、この基を介してＸは前記一般
   式Ｉの化合物の−（ＣＨ₂ ）_m −基と結合し、残りの置
   換基とＲ₇ はそれぞれ独立して水素、親油性基或いは親
   水性基或いはポリマーと結合する反応性基である。） 【化６】 （一般式III 中、Ｒ_8、Ｒ_9、Ｒ₁₀、Ｒ_11、 Ｒ_12、 Ｒ₁₃、Ｒ
   _14、 及びＲ₁₅のうちの一つが、化学結合であり、これを
   介してＸは前記一般式Ｉの化合物のイオノフォリック部
   分に直接結合し（ｍ＝０）、残りの置換基は、−ＯＨ、
   −ＯＲ₁₆（Ｒ₁₆は親水性基或いは親油性基である）、−
   Ｏ−Ｒ₁₇−Ｇ（Ｒ₁₇は親水性基或いは親油性基であり、
   Ｇはポリマーと結合するための反応性基である）、或い
   は、−（ＣＨ₂ ）_n −ＣＯＯＨ（ｎは０から１７であ
   る）である。）
7. 【請求項７】 下記一般式IVのジアザ−クリプタンド。 【化７】 （一般式IV中、ｏ及びｐはそれぞれ独立して０、１或い
   は２を意味する。）