JPH10323183A - 細胞保護液 - Google Patents
細胞保護液Info
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- JPH10323183A JPH10323183A JP9114548A JP11454897A JPH10323183A JP H10323183 A JPH10323183 A JP H10323183A JP 9114548 A JP9114548 A JP 9114548A JP 11454897 A JP11454897 A JP 11454897A JP H10323183 A JPH10323183 A JP H10323183A
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- Japan
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- acetylcysteine
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- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】細胞との接触により障害、損傷等を惹起させ
ず、長期生存を可能とする細胞保護液、特に複室容器に
収容された形態の細胞保護液を提供。 【解決手段】Ｎ−アセチルシステイン及び／又はＮ，Ｎ
−ジアセチルシスチンを含有する、組織洗浄液、人工髄
液、眼内灌流液等の細胞保護液、特に複室容器に収容さ
れた上記細胞保護液。
ず、長期生存を可能とする細胞保護液、特に複室容器に
収容された形態の細胞保護液を提供。 【解決手段】Ｎ−アセチルシステイン及び／又はＮ，Ｎ
−ジアセチルシスチンを含有する、組織洗浄液、人工髄
液、眼内灌流液等の細胞保護液、特に複室容器に収容さ
れた上記細胞保護液。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は細胞保護液、即ち例
えば組織洗浄液、人工髄液、組織灌流液、眼内灌流液等
の細胞と直接接触させて利用される液であって且つこの
接触によっても、該細胞に障害、損傷等を殆ど惹起させ
ることなく、長期生存を可能とする新しい細胞保護のた
めの細胞保護液に関する。
えば組織洗浄液、人工髄液、組織灌流液、眼内灌流液等
の細胞と直接接触させて利用される液であって且つこの
接触によっても、該細胞に障害、損傷等を殆ど惹起させ
ることなく、長期生存を可能とする新しい細胞保護のた
めの細胞保護液に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、臓器移植等において臓器の保存技
術は著しい進歩を遂げてきた。臓器保存液の分野におい
ても種々の研究、改善がなされてきており、例えば、リ
ンゲル液、コリンズ液、ユーロコリンズ液〔「移植」第
２２巻第３号第１８５頁、１９８７年〕、ＵＷ液〔特開
平１−２４６２０１号公報〕、ＰＦＣ乳液と改変リンゲ
ル液とヒト血清アルブミンとからなる混合液〔特開昭５
５−５１０１６号公報〕等が開発、提案されている。
術は著しい進歩を遂げてきた。臓器保存液の分野におい
ても種々の研究、改善がなされてきており、例えば、リ
ンゲル液、コリンズ液、ユーロコリンズ液〔「移植」第
２２巻第３号第１８５頁、１９８７年〕、ＵＷ液〔特開
平１−２４６２０１号公報〕、ＰＦＣ乳液と改変リンゲ
ル液とヒト血清アルブミンとからなる混合液〔特開昭５
５−５１０１６号公報〕等が開発、提案されている。
【０００３】また、人工髄液や組織灌流液等の分野にお
いても、例えば「注射用人工髄液の製造法」（特開昭５
０−８２２２４号公報）、「眼内灌流液」（特開平７−
９７３３１号公報）、「人工房水の製造法」（特開昭５
６−８６１１５号公報）等の各種の研究、改良が試みら
れている。
いても、例えば「注射用人工髄液の製造法」（特開昭５
０−８２２２４号公報）、「眼内灌流液」（特開平７−
９７３３１号公報）、「人工房水の製造法」（特開昭５
６−８６１１５号公報）等の各種の研究、改良が試みら
れている。
【０００４】しかしながら、細胞外液と同一組成の薬液
を人工的に製造することは、現在不可能であり、上記開
発、提案されている各種の保存液等は、いずれもその利
用時に、これと接触する細胞に細胞障害を惹起させ、そ
の結果、細胞を損傷させて比較的速やかに死滅させると
いう致命的欠点を有している。
を人工的に製造することは、現在不可能であり、上記開
発、提案されている各種の保存液等は、いずれもその利
用時に、これと接触する細胞に細胞障害を惹起させ、そ
の結果、細胞を損傷させて比較的速やかに死滅させると
いう致命的欠点を有している。
【０００５】従って、之等の臓器保存液、人工髄液、組
織灌流液等の分野においては、細胞障害のより少ない細
胞保護液の開発、提供が要望されている。
織灌流液等の分野においては、細胞障害のより少ない細
胞保護液の開発、提供が要望されている。
【０００６】更に、眼内灌流液の分野では、現在、「ビ
ーエスエスプラス」（商品名、輸入販売元：参天製薬株
式会社）が市販されており、これは内容２５ｍｌ程度の
ガラス瓶にオキシグルタチオンとブドウ糖との混合溶液
２０ｍｌを収容したものと、内容６００ｍｌ程度のガラ
ス瓶にＨＣＯ3 -を含む電解質液４８０ｍｌを収容したも
のとを組み合わせた所謂組合せ剤の形態をとっている。
このため、該眼内灌流液は、その使用時に２液を混合溶
解する必要があり、この作業が煩雑であるに加えて、こ
の混合溶解時に薬液汚染の危険がある欠点もある。
ーエスエスプラス」（商品名、輸入販売元：参天製薬株
式会社）が市販されており、これは内容２５ｍｌ程度の
ガラス瓶にオキシグルタチオンとブドウ糖との混合溶液
２０ｍｌを収容したものと、内容６００ｍｌ程度のガラ
ス瓶にＨＣＯ3 -を含む電解質液４８０ｍｌを収容したも
のとを組み合わせた所謂組合せ剤の形態をとっている。
このため、該眼内灌流液は、その使用時に２液を混合溶
解する必要があり、この作業が煩雑であるに加えて、こ
の混合溶解時に薬液汚染の危険がある欠点もある。
【０００７】尚、上記眼内灌流液とは技術分野を異にす
るが、輸液分野においては、上記の如き２種以上の薬液
の混合溶解時の煩雑さや汚染等の問題を解消する手段と
して、柔軟性を有するプラスチック容器本体に適宜連通
可能な仕切手段を設けたもの、例えば弱シールにより複
数室に区画してなる複室容器（所謂ダブルバッグ）が開
発されている。これによれば、使用時にいずれかの室を
手で押す等の簡単な押圧操作を行なうだけで両室を隔て
ている弱シール部が破壊されて両室が連通され、汚染等
の危険を伴うことなく各室に収容された薬液を混合でき
る。
るが、輸液分野においては、上記の如き２種以上の薬液
の混合溶解時の煩雑さや汚染等の問題を解消する手段と
して、柔軟性を有するプラスチック容器本体に適宜連通
可能な仕切手段を設けたもの、例えば弱シールにより複
数室に区画してなる複室容器（所謂ダブルバッグ）が開
発されている。これによれば、使用時にいずれかの室を
手で押す等の簡単な押圧操作を行なうだけで両室を隔て
ている弱シール部が破壊されて両室が連通され、汚染等
の危険を伴うことなく各室に収容された薬液を混合でき
る。
【０００８】しかしながら、上記ビーエスエスプラスの
場合、かかるダブルバッグを利用して、その一室にオキ
シグルタチオンとブドウ糖との混合液を収容し、他室に
電解質液を収容することはできない。なぜなら、このも
のでは加熱滅菌時にオキシグルタチオンとブドウ糖とが
メイラード反応によって結合して薬液を褐色とする褐変
現象が生じるからである。
場合、かかるダブルバッグを利用して、その一室にオキ
シグルタチオンとブドウ糖との混合液を収容し、他室に
電解質液を収容することはできない。なぜなら、このも
のでは加熱滅菌時にオキシグルタチオンとブドウ糖とが
メイラード反応によって結合して薬液を褐色とする褐変
現象が生じるからである。
【０００９】このメイラード反応を防止するために、オ
キシグルタチオン溶液とブドウ糖溶液とを別々の室に収
容する、即ち、オキシグルタチオンかブドウ糖のいずれ
か一方を電解質液と同室に収容することも考えられる
が、前２者はいずれもｐＨが７以下で安定であり、かか
るｐＨを設定する必要があるのに対して、後者の電解質
液はＨＣＯ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含み、ｐＨを７．４
程度として混合使用時に生理的なｐＨとなるようにする
必要があり、この点より上記各液を別々の室に収容する
ことは液のｐＨ面より不可能である。
キシグルタチオン溶液とブドウ糖溶液とを別々の室に収
容する、即ち、オキシグルタチオンかブドウ糖のいずれ
か一方を電解質液と同室に収容することも考えられる
が、前２者はいずれもｐＨが７以下で安定であり、かか
るｐＨを設定する必要があるのに対して、後者の電解質
液はＨＣＯ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含み、ｐＨを７．４
程度として混合使用時に生理的なｐＨとなるようにする
必要があり、この点より上記各液を別々の室に収容する
ことは液のｐＨ面より不可能である。
【００１０】このように、ビーエスエスプラスは、現在
も組合せ剤からその剤形を変更できず、前述した混合操
作の煩雑さ、薬液汚染の問題を解消できない不利があ
り、かかる眼内灌流液の分野において上記組合せ剤の欠
点を改良する技術の開発が望まれている。
も組合せ剤からその剤形を変更できず、前述した混合操
作の煩雑さ、薬液汚染の問題を解消できない不利があ
り、かかる眼内灌流液の分野において上記組合せ剤の欠
点を改良する技術の開発が望まれている。
【００１１】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、上記
従来の細胞保護液に認められる欠点を悉く解消した、改
良された細胞保護液を提供することにある。
従来の細胞保護液に認められる欠点を悉く解消した、改
良された細胞保護液を提供することにある。
【００１２】本発明者らは上記目的より鋭意研究を重ね
た結果、従来のこの種細胞保護液中にＮ−アセチルシス
テイン及び／又はＮ，Ｎ−ジアセチルシスチンを添加配
合する場合には、該液との接触による細胞の障害の程度
が著しく低減されることを見出した。また、本発明者ら
は、眼内灌流液に上記Ｎ−アセチルシステイン及び／又
はＮ，Ｎ−ジアセチルシスチンの添加配合を応用すると
きには、得られる液はダブルバッグに収容しても公知の
眼内灌流液に見られる如き前述した欠点を認められない
ことも見出した。本発明は、之等の知見に基づいて完成
されたものである。
た結果、従来のこの種細胞保護液中にＮ−アセチルシス
テイン及び／又はＮ，Ｎ−ジアセチルシスチンを添加配
合する場合には、該液との接触による細胞の障害の程度
が著しく低減されることを見出した。また、本発明者ら
は、眼内灌流液に上記Ｎ−アセチルシステイン及び／又
はＮ，Ｎ−ジアセチルシスチンの添加配合を応用すると
きには、得られる液はダブルバッグに収容しても公知の
眼内灌流液に見られる如き前述した欠点を認められない
ことも見出した。本発明は、之等の知見に基づいて完成
されたものである。
【００１３】
【課題を解決するための手段】本発明によれば、Ｎ−ア
セチルシステイン（以下「ＮＡＣ」という）及び／又は
Ｎ，Ｎ−ジアセチルシスチン（以下之等を「ＮＡＣ類」
という）を含有することを特徴とする細胞保護液、特に
組織洗浄液、人工髄液、組織灌流液、眼内灌流液、組織
保存液等の細胞保護液が提供される。
セチルシステイン（以下「ＮＡＣ」という）及び／又は
Ｎ，Ｎ−ジアセチルシスチン（以下之等を「ＮＡＣ類」
という）を含有することを特徴とする細胞保護液、特に
組織洗浄液、人工髄液、組織灌流液、眼内灌流液、組織
保存液等の細胞保護液が提供される。
【００１４】また本発明によれば、(1)一室にブドウ糖
が収容され、他室にＨＣＯ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含む
電解質液が収容されてなる複室容器の上記一室及び他室
の少なくとも一室に更にＮＡＣ類が収容されてなること
を特徴とする細胞保護液、(2)複室容器の上記一室及び
他室にそれぞれＮＡＣ類が収容されてなる上記細胞保護
液、(3)複室容器の一室にＮＡＣ類、Ｍｇ2+及びＣａ2+
を含む電解質液又はＮＡＣ類、ブドウ糖、Ｍｇ2+及びＣ
ａ2+を含む電解質液が収容され、他室にＨＣＯ3 -及び／
又はＰＯ4 3-を含む電解質液が収容されてなる細胞保護
液、(4)複室容器の他室に更にＮＡＣ類が収容されてな
る上記(3)の細胞保護液、(5)複室容器の一室にブドウ
糖、Ｍｇ2+及びＣａ2+を含む電解質液が収容され、他室
にＮＡＣ類と共にＨＣＯ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含む電
解質液が収容されてなる細胞保護液、及び(6)複室容器
の一室に更にＮＡＣ類が収容されてなる上記(5)の細胞
保護液が提供される。
が収容され、他室にＨＣＯ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含む
電解質液が収容されてなる複室容器の上記一室及び他室
の少なくとも一室に更にＮＡＣ類が収容されてなること
を特徴とする細胞保護液、(2)複室容器の上記一室及び
他室にそれぞれＮＡＣ類が収容されてなる上記細胞保護
液、(3)複室容器の一室にＮＡＣ類、Ｍｇ2+及びＣａ2+
を含む電解質液又はＮＡＣ類、ブドウ糖、Ｍｇ2+及びＣ
ａ2+を含む電解質液が収容され、他室にＨＣＯ3 -及び／
又はＰＯ4 3-を含む電解質液が収容されてなる細胞保護
液、(4)複室容器の他室に更にＮＡＣ類が収容されてな
る上記(3)の細胞保護液、(5)複室容器の一室にブドウ
糖、Ｍｇ2+及びＣａ2+を含む電解質液が収容され、他室
にＮＡＣ類と共にＨＣＯ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含む電
解質液が収容されてなる細胞保護液、及び(6)複室容器
の一室に更にＮＡＣ類が収容されてなる上記(5)の細胞
保護液が提供される。
【００１５】本発明細胞保護液は、細胞との直接接触に
よっても、該細胞に障害、損傷等を殆ど惹起させず、従
来のこの種の液に見られる重大な欠点である細胞障害作
用を見事に防止乃至抑制したものであり、細胞の長期生
存を可能とする新しい薬液として各種の分野で有効であ
る。殊に、本発明により提供される複室容器に収容され
た形態の細胞保護液は、混合操作の煩雑さや薬液汚染の
問題を解消した新しい薬液として、特に眼内灌流液の分
野で有効である。
よっても、該細胞に障害、損傷等を殆ど惹起させず、従
来のこの種の液に見られる重大な欠点である細胞障害作
用を見事に防止乃至抑制したものであり、細胞の長期生
存を可能とする新しい薬液として各種の分野で有効であ
る。殊に、本発明により提供される複室容器に収容され
た形態の細胞保護液は、混合操作の煩雑さや薬液汚染の
問題を解消した新しい薬液として、特に眼内灌流液の分
野で有効である。
【００１６】
【発明の実施の形態】本発明細胞保護液には、細胞と直
接接触する形態で用いられる各種の液が包含される。そ
の代表例としては、組織洗浄液、人工髄液、組織灌流
液、眼内灌流液、組織保存液等を例示できる。
接接触する形態で用いられる各種の液が包含される。そ
の代表例としては、組織洗浄液、人工髄液、組織灌流
液、眼内灌流液、組織保存液等を例示できる。
【００１７】本発明では、かかる従来から知られている
各種細胞保護液中にＮＡＣ類を添加配合することを必須
とし、これに基づいて本発明所期の効果を奏し得る。上
記本発明細胞保護液中に添加配合されるＮＡＣ類は、細
胞保護液中に０．１〜１０ｍＭの濃度となる範囲で含有
されるのがよく、好ましくは０．２〜５ｍＭ、より好ま
しくは０．３〜３ｍＭの濃度となる範囲で含有されるの
がよい。
各種細胞保護液中にＮＡＣ類を添加配合することを必須
とし、これに基づいて本発明所期の効果を奏し得る。上
記本発明細胞保護液中に添加配合されるＮＡＣ類は、細
胞保護液中に０．１〜１０ｍＭの濃度となる範囲で含有
されるのがよく、好ましくは０．２〜５ｍＭ、より好ま
しくは０．３〜３ｍＭの濃度となる範囲で含有されるの
がよい。
【００１８】本発明細胞保護液は、上記ＮＡＣ類の添加
配合を除いては、従来の各種細胞保護液と同様にして、
種々の成分を用いて通常の方法により調製できる。例え
ば組織洗浄液や組織灌流液の場合は、主に生理食塩水、
リンゲル液等を用い、適当な電解質、例えばＨＣＯ3 -や
ＰＯ4 3-等を含む電解質を加え、之等に上記ＮＡＣ類の
所定量を添加配合して調製される。上記各液組成の代表
例としては、生理食塩水溶液では、Ｎａ+１５４ｍＥｑ
／ｌ及びＣｌ-１５４ｍＥｑ／ｌを、乳酸リンゲル液で
は、Ｎａ+１３０ｍＥｑ／ｌ、Ｋ+４ｍＥｑ／ｌ、Ｃａ+
３ｍＥｑ／ｌ、Ｃｌ-１０９ｍＥｑ／ｌ及びLactate-２
８ｍＥｑ／ｌを例示することができる。
配合を除いては、従来の各種細胞保護液と同様にして、
種々の成分を用いて通常の方法により調製できる。例え
ば組織洗浄液や組織灌流液の場合は、主に生理食塩水、
リンゲル液等を用い、適当な電解質、例えばＨＣＯ3 -や
ＰＯ4 3-等を含む電解質を加え、之等に上記ＮＡＣ類の
所定量を添加配合して調製される。上記各液組成の代表
例としては、生理食塩水溶液では、Ｎａ+１５４ｍＥｑ
／ｌ及びＣｌ-１５４ｍＥｑ／ｌを、乳酸リンゲル液で
は、Ｎａ+１３０ｍＥｑ／ｌ、Ｋ+４ｍＥｑ／ｌ、Ｃａ+
３ｍＥｑ／ｌ、Ｃｌ-１０９ｍＥｑ／ｌ及びLactate-２
８ｍＥｑ／ｌを例示することができる。
【００１９】人工髄液としても、公知の各種のもの、例
えば下記組成のエリオットＢ液（Elliott B）の処方を
利用することができ、本発明人工髄液は、之等の処方に
更に所定量のＮＡＣ類を添加配合し、また必要に応じて
ブドウ糖（グルコース）を添加して、調製される。
えば下記組成のエリオットＢ液（Elliott B）の処方を
利用することができ、本発明人工髄液は、之等の処方に
更に所定量のＮＡＣ類を添加配合し、また必要に応じて
ブドウ糖（グルコース）を添加して、調製される。
【００２０】 Ｎａ+ （ｍＥｑ／ｌ） １４９ Ｋ+ （ｍＥｑ／ｌ） ４．０ Ｍｇ2+（ｍＥｑ／ｌ） ２．４ Ｃａ2+（ｍＥｑ／ｌ） ２．７ Ｃｌ- （ｍＥｑ／ｌ） １３２ ＨＣＯ3-（ｍＥｑ／ｌ） ２２．６ Ｐ （ｍＥｑ／ｌ） １．５ グルコース（ｍｇ／ｄｌ） ８０ ｐＨ ７．０〜７．４ 上記人工髄液や眼内灌流液の場合には、またブドウ糖と
ＨＣＯ3 -やＰＯ4 3-を別々の容器に収容し、そのいずれ
か又は両者にＮＡＣ類を収容して２液型として調製する
こともできる。この場合、更に必要に応じてブドウ糖を
収容した容器中にＭｇ2+やＣａ2+を添加収容させてもよ
い。
ＨＣＯ3 -やＰＯ4 3-を別々の容器に収容し、そのいずれ
か又は両者にＮＡＣ類を収容して２液型として調製する
こともできる。この場合、更に必要に応じてブドウ糖を
収容した容器中にＭｇ2+やＣａ2+を添加収容させてもよ
い。
【００２１】本発明細胞保護液が眼内灌流液の場合は、
特に現在輸液容器として実用されているダブルバッグを
利用して、これに本発明保護液を充填した形態に調製す
ることもできる。この場合、ダブルバッグの一室にブド
ウ糖を収容し、他室にＨＣＯ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含
む電解質液を収容し、ＮＡＣ類をその少なくとも一室に
収容する。
特に現在輸液容器として実用されているダブルバッグを
利用して、これに本発明保護液を充填した形態に調製す
ることもできる。この場合、ダブルバッグの一室にブド
ウ糖を収容し、他室にＨＣＯ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含
む電解質液を収容し、ＮＡＣ類をその少なくとも一室に
収容する。
【００２２】殊に、本発明に利用するＮＡＣ類は、シス
テイン又はシスチンがアセチル化されたものであるた
め、従来用いられているオキシグルタチオンとは異なっ
て、ブドウ糖と同じ室に収容して滅菌してもメイラード
反応を起こす危険はなく、またｐＨが７．４程度の電解
質と同室に収容しても、ｐＨが７以下でしか安定でない
上記オキシグルタチオンとは異なって、ｐＨが８程度ま
では安定であるため、分解等を起こす危険もない利点が
ある。更に、上記眼内灌流液には必要に応じて、常法に
従ってＭｇ2+やＣａ2+を、ブドウ糖を収容した室に添加
配合することができる。
テイン又はシスチンがアセチル化されたものであるた
め、従来用いられているオキシグルタチオンとは異なっ
て、ブドウ糖と同じ室に収容して滅菌してもメイラード
反応を起こす危険はなく、またｐＨが７．４程度の電解
質と同室に収容しても、ｐＨが７以下でしか安定でない
上記オキシグルタチオンとは異なって、ｐＨが８程度ま
では安定であるため、分解等を起こす危険もない利点が
ある。更に、上記眼内灌流液には必要に応じて、常法に
従ってＭｇ2+やＣａ2+を、ブドウ糖を収容した室に添加
配合することができる。
【００２３】このように、本発明細胞保護液は、眼内灌
流液として調製される場合、従来この分野では達成でき
なかった複室容器への収容が可能となり、これによっ
て、２種以上の液の混合溶解の煩雑さや薬液汚染の問題
を全て解消できる利点がある。
流液として調製される場合、従来この分野では達成でき
なかった複室容器への収容が可能となり、これによっ
て、２種以上の液の混合溶解の煩雑さや薬液汚染の問題
を全て解消できる利点がある。
【００２４】かくして調製される本発明細胞保護液は、
従来のこの種液と同様にして、各種の細胞と接触する用
途に利用される。
従来のこの種液と同様にして、各種の細胞と接触する用
途に利用される。
【００２５】
【実施例】以下、本発明の実施例及び試験例を示すが本
発明は之等に限定されるものではない。
発明は之等に限定されるものではない。
【００２６】
【実施例１】眼内灌流液の調製 薬液１リットル中に下記各成分を含む眼内灌流液を、次
の処方（各成分の混合）により調製した。
の処方（各成分の混合）により調製した。
【００２７】 炭酸水素ナトリウム ２．５２ｇ リン酸一水素ナトリウム ０．４２ｇ 塩化ナトリウム ７．０８ｇ 塩化カリウム ０．３８ｇ 塩化マグネシウム・６水塩 ０．２０ｇ 塩化カルシウム・２水塩 ０．１５ｇ グルコース ０．９２ｇ ＮＡＣ ０．０４９ｇ（０．３ｍＭ）
【００２８】
【実施例２】眼内灌流液の調製 ダブルバッグの下室（口部を有する室）に下記各成分を
含む下室液３５０ｍｌを、また上室（口部を有さない
室）に下記各成分からなる上室液１５０ｍｌを充填して
なる眼内灌流液を次の通り調製した。
含む下室液３５０ｍｌを、また上室（口部を有さない
室）に下記各成分からなる上室液１５０ｍｌを充填して
なる眼内灌流液を次の通り調製した。
【００２９】 下室液（３５０ｍｌ） 炭酸水素ナトリウム １．２６ｇ リン酸一水素ナトリウム ０．２１ｇ 塩化ナトリウム ３．５４ｇ 塩化カリウム ０．１９ｇ 上室液（１５０ｍｌ） 塩化マグネシウム・６水塩 ０．１０ｇ 塩化カルシウム・２水塩 ０．０７５ｇ グルコース ０．４６ｇ ＮＡＣ ０．０２５ｇ（０．３ｍＭ） 即ち、炭酸水素ナトリウム３６０ｇ、リン酸一水素ナト
リウム６０ｇ、塩化ナトリウム１０１１ｇ及び塩化カリ
ウム５４．３ｇに注射用水に加えて之等を溶解して下室
液１００リットルを調製した。この液に炭酸ガスを吹き
込みｐＨを７．２に調整し、メンブランフィルター（日
本ポール社、孔径０．２μｍ）で濾過し、ポリエチレン
製ダブルバッグの下室に３５０ｍｌ充填し、閉塞した。
リウム６０ｇ、塩化ナトリウム１０１１ｇ及び塩化カリ
ウム５４．３ｇに注射用水に加えて之等を溶解して下室
液１００リットルを調製した。この液に炭酸ガスを吹き
込みｐＨを７．２に調整し、メンブランフィルター（日
本ポール社、孔径０．２μｍ）で濾過し、ポリエチレン
製ダブルバッグの下室に３５０ｍｌ充填し、閉塞した。
【００３０】別途、注射用水を煮沸後、窒素ガス雰囲気
下で冷却した液８０リットルに、塩化カルシウム・２水
塩５０ｇ、塩化マグネシウム・６水塩６６．７ｇ、グル
コース３０６．７ｇ及びＮＡＣ１６．３ｇを溶解させた
後、更に注射用水を加えて１００リットルとして上室液
を調製した。この液を窒素ガス雰囲気中でメンブランフ
ィルター（日本ポール社、孔径０．２μｍ）で濾過し、
先に下室液を充填済みのダブルバッグの上室に１５０ｍ
ｌ充填し、空間部を窒素ガスで置換した後、閉塞した。
下で冷却した液８０リットルに、塩化カルシウム・２水
塩５０ｇ、塩化マグネシウム・６水塩６６．７ｇ、グル
コース３０６．７ｇ及びＮＡＣ１６．３ｇを溶解させた
後、更に注射用水を加えて１００リットルとして上室液
を調製した。この液を窒素ガス雰囲気中でメンブランフ
ィルター（日本ポール社、孔径０．２μｍ）で濾過し、
先に下室液を充填済みのダブルバッグの上室に１５０ｍ
ｌ充填し、空間部を窒素ガスで置換した後、閉塞した。
【００３１】かくして、薬液充填済みのダブルバッグを
窒素ガス中で、熱水シャワー滅菌した後、延伸ナイロ
ン、ポリビニルアルコール及びポリエチレンのラミネー
トフィルムからなる袋に、炭酸ガスと窒素ガスとの混合
ガスと酸素吸収剤（三菱ガス化学社、「エージレス」）
と共に封入して、眼内灌流液収容ダブルバッグ製品を得
た。
窒素ガス中で、熱水シャワー滅菌した後、延伸ナイロ
ン、ポリビニルアルコール及びポリエチレンのラミネー
トフィルムからなる袋に、炭酸ガスと窒素ガスとの混合
ガスと酸素吸収剤（三菱ガス化学社、「エージレス」）
と共に封入して、眼内灌流液収容ダブルバッグ製品を得
た。
【００３２】
【実施例３】人工髄液の調製 薬液１リットル中に下記各成分を含む人工髄液を、次の
処方（各成分の混合）により調製した。
処方（各成分の混合）により調製した。
【００３３】 炭酸水素ナトリウム １．９４ｇ リン酸二水素カリウム ０．１５ｇ 塩化ナトリウム ７．１５ｇ 塩化カリウム ０．１３ｇ 塩化マグネシウム・６水塩 ０．２２ｇ 塩化カルシウム・２水塩 ０．１７ｇ グルコース ０．６１ｇ ＮＡＣ ０．０４９ｇ（０．３ｍＭ）
【００３４】
【実施例４】人工髄液の調製 ダブルバッグの下室（口部を有する室）に下記各成分を
含む下室液７００ｍｌを、また上室（口部を有さない
室）に下記各成分からなる上室液３００ｍｌを充填して
なる人工髄液製品を、実施例２と同様にして調製した。
含む下室液７００ｍｌを、また上室（口部を有さない
室）に下記各成分からなる上室液３００ｍｌを充填して
なる人工髄液製品を、実施例２と同様にして調製した。
【００３５】 下室液（７００ｍｌ） 炭酸水素ナトリウム １．９４ｇ リン酸二水素カリウム ０．１５ｇ 塩化ナトリウム ７．１５ｇ 塩化カリウム ０．１３ｇ 上室液（３００ｍｌ） 塩化マグネシウム・６水塩 ０．２２ｇ 塩化カルシウム・２水塩 ０．１７ｇ グルコース ０．６１ｇ ＮＡＣ ０．０４９ｇ（０．３ｍＭ）
【００３６】
【試験例１】ＮＡＣの細胞保護効果試験 （１）試験方法 ヒト正常アストロサイト（ＣＣＫ−２５６５、岩城硝子
株式会社、以下単に「アストロサイト」という）は、胎
児を起源とした神経細胞であり、入手時の生細胞比率は
７５〜８２％（人種及び性別不明の２１〜２２週胎児由
来）であった。本試験は、アストロサイト細胞種、専用
培地及び専用継代用試薬のキット（いずれも岩城硝子株
式会社製）を用い、継代培養したアストロサイトを組織
培養用マイクロプレート（岩城硝子株式会社）に移して
試験に供した。
株式会社、以下単に「アストロサイト」という）は、胎
児を起源とした神経細胞であり、入手時の生細胞比率は
７５〜８２％（人種及び性別不明の２１〜２２週胎児由
来）であった。本試験は、アストロサイト細胞種、専用
培地及び専用継代用試薬のキット（いずれも岩城硝子株
式会社製）を用い、継代培養したアストロサイトを組織
培養用マイクロプレート（岩城硝子株式会社）に移して
試験に供した。
【００３７】アストロサイトは、エネルギー源としてブ
ドウ糖を盛んに取り込んでおり、この生理活性が細胞保
護効果の指標となるが、ブドウ糖は代謝分解されて細胞
外に排出されるため、該ブドウ糖と同様に細胞内に取り
込まれるものの、代謝分解を受けずに細胞内に滞留し、
細胞の生理活性を定量的に検出できるデオキシ−Ｄ−グ
ルコースのトリチウム標識体を指標として本試験に利用
し、その放射活性測定を行なった。
ドウ糖を盛んに取り込んでおり、この生理活性が細胞保
護効果の指標となるが、ブドウ糖は代謝分解されて細胞
外に排出されるため、該ブドウ糖と同様に細胞内に取り
込まれるものの、代謝分解を受けずに細胞内に滞留し、
細胞の生理活性を定量的に検出できるデオキシ−Ｄ−グ
ルコースのトリチウム標識体を指標として本試験に利用
し、その放射活性測定を行なった。
【００３８】眼内灌流液が用時に細胞表面に直接適用さ
れることを考慮して、生理食塩液を対照として、０．１
〜１０ｍＭのＮＡＣの生理食塩溶液を、３７℃の恒温培
養条件でアストロサイトに３時間暴露させた。
れることを考慮して、生理食塩液を対照として、０．１
〜１０ｍＭのＮＡＣの生理食塩溶液を、３７℃の恒温培
養条件でアストロサイトに３時間暴露させた。
【００３９】尚、この処置はアストロサイトを培養して
いる専用培地をＮＡＣ試験液と置換する手法を採用して
実施した。この暴露直後に、又はその後に元の培地に戻
して２４時間の培養を行なった後に、終濃度が７４ｋＢ
ｑ／ｍｌになるようにトリチウム標識デオキシ−Ｄ−グ
ルコース（２５９ＧＢｑ／ｍｍｏｌ）を含むアストロサ
イト専用培地を添加して１時間細胞を培養し、培養細胞
を可溶化して放射能を測定した。
いる専用培地をＮＡＣ試験液と置換する手法を採用して
実施した。この暴露直後に、又はその後に元の培地に戻
して２４時間の培養を行なった後に、終濃度が７４ｋＢ
ｑ／ｍｌになるようにトリチウム標識デオキシ−Ｄ−グ
ルコース（２５９ＧＢｑ／ｍｍｏｌ）を含むアストロサ
イト専用培地を添加して１時間細胞を培養し、培養細胞
を可溶化して放射能を測定した。
【００４０】試験結果は、試験期間をアストロサイト専
用培地で培養した対照実験の測定値を１００％とした相
対値を算出し、これを得られるブドウ糖取り込み量変化
として判定した。
用培地で培養した対照実験の測定値を１００％とした相
対値を算出し、これを得られるブドウ糖取り込み量変化
として判定した。
【００４１】（２）結果 得られた結果（％、ｎ＝３、平均±ＳＤ）を下記表１に
示す。
示す。
【００４２】
【表１】
【００４３】表１より、アストロサイトのブドウ糖取り
込み活性は、生理食塩液による暴露直後の測定で、正常
培養の２３％に低下（２４時間後では３３％に低下）
し、細胞死を含む細胞障害が惹起されているものと推定
されたが、０．１ｍＭのＮＡＣの添加によれば、上記活
性が弱いながらも上昇（暴露直後２９％、２４時間後３
７％）し、これはＮＡＣの用量の増加に相関して上昇し
た。このことから、ＮＡＣは、生理食塩水に起因する細
胞障害に対して、細胞保護効果を奏することが確認され
た。また、ＮＡＣの上記細胞保護効果は、２４時間後の
結果の方が良好なことから、一時的なものではなく、永
続的なものであることも確認された。
込み活性は、生理食塩液による暴露直後の測定で、正常
培養の２３％に低下（２４時間後では３３％に低下）
し、細胞死を含む細胞障害が惹起されているものと推定
されたが、０．１ｍＭのＮＡＣの添加によれば、上記活
性が弱いながらも上昇（暴露直後２９％、２４時間後３
７％）し、これはＮＡＣの用量の増加に相関して上昇し
た。このことから、ＮＡＣは、生理食塩水に起因する細
胞障害に対して、細胞保護効果を奏することが確認され
た。また、ＮＡＣの上記細胞保護効果は、２４時間後の
結果の方が良好なことから、一時的なものではなく、永
続的なものであることも確認された。
Claims (15)
- 【請求項１】 Ｎ−アセチルシステイン及び／又はＮ，
Ｎ−ジアセチルシスチンを含有することを特徴とする細
胞保護液。 - 【請求項２】 組織洗浄液である請求項１に記載の細胞
保護液。 - 【請求項３】 人工髄液である請求項１に記載の細胞保
護液。 - 【請求項４】 組織灌流液である請求項１に記載の細胞
保護液。 - 【請求項５】 眼内灌流液である請求項１に記載の細胞
保護液。 - 【請求項６】 組織保存液である請求項１に記載の細胞
保護液。 - 【請求項７】 一室にブドウ糖が収容され、他室にＨＣ
Ｏ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含む電解質液が収容されてな
る複室容器の上記一室及び他室の少なくとも一室に更に
Ｎ−アセチルシステイン及び／又はＮ，Ｎ−ジアセチル
シスチンが収容されてなることを特徴とする請求項１〜
６のいずれかに記載の細胞保護液。 - 【請求項８】 複室容器の一室及び他室にそれぞれＮ−
アセチルシステイン及び／又はＮ，Ｎ−ジアセチルシス
チンが収容されてなる請求項７に記載の細胞保護液。 - 【請求項９】 複室容器の一室にＮ−アセチルシステイ
ン及び／又はＮ，Ｎ−ジアセチルシスチン、Ｍｇ2+及び
Ｃａ2+を含む電解質液又はＮ−アセチルシステイン及び
／又はＮ，Ｎ−ジアセチルシスチン、ブドウ糖、Ｍｇ2+
及びＣａ2+を含む電解質液が収容され、他室にＨＣＯ3 -
及び／又はＰＯ4 3-を含む電解質液が収容されてなる請
求項２〜７のいずれかに記載の細胞保護液。 - 【請求項１０】 複室容器の他室に更にＮ−アセチルシ
ステイン及び／又はＮ，Ｎ−ジアセチルシスチンが収容
されてなる請求項９に記載の細胞保護液。 - 【請求項１１】 複室容器の一室にブドウ糖、Ｍｇ2+及
びＣａ2+を含む電解質液が収容され、他室にＮ−アセチ
ルシステイン及び／又はＮ，Ｎ−ジアセチルシスチンと
共にＨＣＯ3 -及び／又はＰＯ4 3-を含む電解質液が収容
されてなる請求項２〜７のいずれかに記載の細胞保護
液。 - 【請求項１２】 複室容器の一室に更にＮ−アセチルシ
ステイン及び／又はＮ，Ｎ−ジアセチルシスチンが収容
されてなる請求項１１に記載の細胞保護液。 - 【請求項１３】 Ｎ−アセチルシステイン及び／又は
Ｎ，Ｎ−ジアセチルシスチンが細胞保護液中に０．１〜
１０ｍＭの濃度範囲で含有される請求項１〜１２のいず
れかに記載の細胞保護液。 - 【請求項１４】 Ｎ−アセチルシステイン及び／又は
Ｎ，Ｎ−ジアセチルシスチンが細胞保護液中に０．２〜
５ｍＭの濃度範囲で含有される請求項１〜１２のいずれ
かに記載の細胞保護液。 - 【請求項１５】 Ｎ−アセチルシステイン及び／又は
Ｎ，Ｎ−ジアセチルシスチンが細胞保護液中に０．３〜
３ｍＭの濃度範囲で含有される請求項１〜１２のいずれ
かに記載の細胞保護液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9114548A JPH10323183A (ja) | 1997-03-25 | 1997-05-02 | 細胞保護液 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9-71120 | 1997-03-25 | ||
| JP7112097 | 1997-03-25 | ||
| JP9114548A JPH10323183A (ja) | 1997-03-25 | 1997-05-02 | 細胞保護液 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10323183A true JPH10323183A (ja) | 1998-12-08 |
Family
ID=26412248
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9114548A Pending JPH10323183A (ja) | 1997-03-25 | 1997-05-02 | 細胞保護液 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10323183A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005035736A1 (ja) * | 2003-10-07 | 2005-04-21 | Sysmex Corporation | 粘液除去方法並びにこれに用いる細胞処理液及び保存液 |
| WO2006115057A1 (ja) * | 2005-04-19 | 2006-11-02 | Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc. | 人工髄液 |
| JP2010168386A (ja) * | 2002-05-10 | 2010-08-05 | Univ Of Miami | 細胞および組織のｒｎａおよび形態の保存 |
| JP2013527222A (ja) * | 2010-06-03 | 2013-06-27 | ラオフ・レキク | 神経保護性および網膜保護性医薬であるｎ−アセチル−ｄｌ−ロイシン |
-
1997
- 1997-05-02 JP JP9114548A patent/JPH10323183A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010168386A (ja) * | 2002-05-10 | 2010-08-05 | Univ Of Miami | 細胞および組織のｒｎａおよび形態の保存 |
| WO2005035736A1 (ja) * | 2003-10-07 | 2005-04-21 | Sysmex Corporation | 粘液除去方法並びにこれに用いる細胞処理液及び保存液 |
| WO2006115057A1 (ja) * | 2005-04-19 | 2006-11-02 | Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc. | 人工髄液 |
| AU2006240846B2 (en) * | 2005-04-19 | 2011-10-06 | Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc. | Artificial cerebrospinal fluid |
| US8409624B2 (en) | 2005-04-19 | 2013-04-02 | Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc. | Artificial cerebrospinal fluid |
| JP5197003B2 (ja) * | 2005-04-19 | 2013-05-15 | 株式会社大塚製薬工場 | 人工髄液 |
| JP2013527222A (ja) * | 2010-06-03 | 2013-06-27 | ラオフ・レキク | 神経保護性および網膜保護性医薬であるｎ−アセチル−ｄｌ−ロイシン |
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| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060906 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20070110 |