JPH10234359A - ５−ヒドロキシメチルフルフラール酸化微生物およびこれを用いた５−ヒドロキシメチルフルフラールの定量法 - Google Patents
５−ヒドロキシメチルフルフラール酸化微生物およびこれを用いた５−ヒドロキシメチルフルフラールの定量法Info
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- JPH10234359A JPH10234359A JP9043996A JP4399697A JPH10234359A JP H10234359 A JPH10234359 A JP H10234359A JP 9043996 A JP9043996 A JP 9043996A JP 4399697 A JP4399697 A JP 4399697A JP H10234359 A JPH10234359 A JP H10234359A
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Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 ＨＭＦを特異的に酸化する能力を有する
シュードモナス sp. S4-17株、ＨＭＦを特異的に酸化す
る能力を有する上記菌株由来の変異株及び上記菌株を用
いることを特徴とするＨＭＦの定量法である。 【効果】 試料に含有されるＨＭＦ量を簡便に定量でき
る。
シュードモナス sp. S4-17株、ＨＭＦを特異的に酸化す
る能力を有する上記菌株由来の変異株及び上記菌株を用
いることを特徴とするＨＭＦの定量法である。 【効果】 試料に含有されるＨＭＦ量を簡便に定量でき
る。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は５−ヒドロキシメチ
ルフルフラール（以下「ＨＭＦ」という）を特異的に酸
化する能力を有するシュードモナス sp. S4-17株、ＨＭ
Ｆを特異的に酸化する能力を有する該菌株由来の変異
株、及びそれらの菌株を用いたＨＭＦの定量法に関す
る。
ルフルフラール（以下「ＨＭＦ」という）を特異的に酸
化する能力を有するシュードモナス sp. S4-17株、ＨＭ
Ｆを特異的に酸化する能力を有する該菌株由来の変異
株、及びそれらの菌株を用いたＨＭＦの定量法に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】食品の色は、視覚を通して快美感を満足
させ、間接的に食欲を増進させるものであるから、食品
の色は、食品の香り及び味とともに、食品の嗜好的な価
値に関係する重要な要素である。
させ、間接的に食欲を増進させるものであるから、食品
の色は、食品の香り及び味とともに、食品の嗜好的な価
値に関係する重要な要素である。
【０００３】従って、食品の褐変等による食品の品質の
劣化及び商品価値の低下は、大きな問題となる。食品の
褐変の原因の一つは、食品中の糖とアミノ酸との反応
（アミノカルボニル反応）により生成されるＨＭＦの存
在である。ＨＭＦは、食品の加熱、加工、貯蔵等の間に
生成され増加し、特に、貯蔵温度が高いとＨＭＦは増加
し、食品の褐変を生じさせるとともに、食品の品質を劣
化させる。従って、食品中のＨＭＦの含有量を定量する
ことは食品の品質を管理等する上で重要であり、現在、
食品中のＨＭＦの定量は比色法により行なわれている。
劣化及び商品価値の低下は、大きな問題となる。食品の
褐変の原因の一つは、食品中の糖とアミノ酸との反応
（アミノカルボニル反応）により生成されるＨＭＦの存
在である。ＨＭＦは、食品の加熱、加工、貯蔵等の間に
生成され増加し、特に、貯蔵温度が高いとＨＭＦは増加
し、食品の褐変を生じさせるとともに、食品の品質を劣
化させる。従って、食品中のＨＭＦの含有量を定量する
ことは食品の品質を管理等する上で重要であり、現在、
食品中のＨＭＦの定量は比色法により行なわれている。
【０００４】しかし、比色法には以下の欠点がある。す
なわち、比色法で使用する試薬類が着色していた場合、
測定値が不正確となる恐れがあるため、試薬（アニリ
ン、フルフラール）を使用する前に蒸留しなければなら
ないが、アニリンは沸点 184〜186 ℃、フルフラールは
沸点 161〜162 ℃の部分を得る必要があり、操作が困難
である。さらに、アニリンは有毒かつ可燃性物質である
ため危険であり、注意が必要となる。そこで、そのよう
な欠点を有しない新たな定量法の開発が望まれている。
なわち、比色法で使用する試薬類が着色していた場合、
測定値が不正確となる恐れがあるため、試薬（アニリ
ン、フルフラール）を使用する前に蒸留しなければなら
ないが、アニリンは沸点 184〜186 ℃、フルフラールは
沸点 161〜162 ℃の部分を得る必要があり、操作が困難
である。さらに、アニリンは有毒かつ可燃性物質である
ため危険であり、注意が必要となる。そこで、そのよう
な欠点を有しない新たな定量法の開発が望まれている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記の欠点
を有しない新たなＨＭＦの定量法を提供することを目的
とする。
を有しない新たなＨＭＦの定量法を提供することを目的
とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記課題に
基づいて鋭意研究を行なった結果、シュードモナス属に
属する菌株がＨＭＦを特異的に酸化する能力を有するこ
とを見いだし、本発明を完成するに至った。
基づいて鋭意研究を行なった結果、シュードモナス属に
属する菌株がＨＭＦを特異的に酸化する能力を有するこ
とを見いだし、本発明を完成するに至った。
【０００７】すなわち、本発明は、ＨＭＦを特異的に酸
化する能力を有するシュードモナスsp. S4-17株であ
る。また、本発明は、ＨＭＦを特異的に酸化する能力を
有する、上記菌株由来の変異株である。さらに、本発明
は、上記菌株を用いることを特徴とするＨＭＦの定量法
である。以下、本発明を詳細に説明する。
化する能力を有するシュードモナスsp. S4-17株であ
る。また、本発明は、ＨＭＦを特異的に酸化する能力を
有する、上記菌株由来の変異株である。さらに、本発明
は、上記菌株を用いることを特徴とするＨＭＦの定量法
である。以下、本発明を詳細に説明する。
【０００８】
【発明の実施の形態】S4-17株は、本発明者が東京都各
所から採取した土壌を分離源としてスクリーニングによ
って見いだした菌株である。 S4-17株は以下のような菌
学的性質を有する。
所から採取した土壌を分離源としてスクリーニングによ
って見いだした菌株である。 S4-17株は以下のような菌
学的性質を有する。
【０００９】グラム陰性、好気性、桿菌、運動性あり、
Ｏ−Ｆテストで酸化型、菌体の色は白〜淡黄色、紫外線
照射により黄色の蛍光を発する、水溶性色素は生産しな
い、pH4 以下では生育しない。
Ｏ−Ｆテストで酸化型、菌体の色は白〜淡黄色、紫外線
照射により黄色の蛍光を発する、水溶性色素は生産しな
い、pH4 以下では生育しない。
【００１０】上記菌学的性質について、Bergey's Manua
l of Determinative Bacteriology及び「微生物の分類
と同定」( 長谷川武治 編著、学会出版センター) に記
載の菌学的性質に照らして検討した結果、 S4-17株はシ
ュードモナス属に属するものと同定された。しかし、種
の同定は困難であったため、この菌株をシュードモナス
sp. S4-17株と命名した。また、上記の菌学的性質をシ
ュードモナス属に属する既知の菌株の菌学的性質と比較
したが、本菌株の性質と完全に一致するものは存在しな
かったので、本菌株を新規菌株と認定した。
l of Determinative Bacteriology及び「微生物の分類
と同定」( 長谷川武治 編著、学会出版センター) に記
載の菌学的性質に照らして検討した結果、 S4-17株はシ
ュードモナス属に属するものと同定された。しかし、種
の同定は困難であったため、この菌株をシュードモナス
sp. S4-17株と命名した。また、上記の菌学的性質をシ
ュードモナス属に属する既知の菌株の菌学的性質と比較
したが、本菌株の性質と完全に一致するものは存在しな
かったので、本菌株を新規菌株と認定した。
【００１１】なお、この菌株は、工業技術院生命工学工
業技術研究所にFERM P-16099（寄託日：平成 9年 2月25
日）として寄託されている。また、ＨＭＦを特異的に酸
化する、シュードモナス sp. S4-17株由来の変異株と
は、突然変異によりシュードモナス sp. S4-17株の遺伝
子に変異を生じた変異株であって、ＨＭＦを特異的に酸
化する能力を有する変異株をいう。本変異株は、自然突
然変異、人為突然変異、誘導突然変異のいずれによって
生じたものでもよく、これらの変異が複数組み合わされ
ることによって生じたものであってもよい。
業技術研究所にFERM P-16099（寄託日：平成 9年 2月25
日）として寄託されている。また、ＨＭＦを特異的に酸
化する、シュードモナス sp. S4-17株由来の変異株と
は、突然変異によりシュードモナス sp. S4-17株の遺伝
子に変異を生じた変異株であって、ＨＭＦを特異的に酸
化する能力を有する変異株をいう。本変異株は、自然突
然変異、人為突然変異、誘導突然変異のいずれによって
生じたものでもよく、これらの変異が複数組み合わされ
ることによって生じたものであってもよい。
【００１２】シュードモナス sp. S4-17株又はその変異
株の培養は、シュードモナス属に属する公知菌株と同様
の培養法に従って行なわれる。培養の形態は液体培養が
好ましい。培地の栄養源としては通常用いられるものを
広く用いることができる。炭素源としては利用可能ない
かなる炭素化合物をも用いることができ、例えばグルコ
ース、グリセロール、クエン酸ナトリウム等を用いるこ
とができる。窒素源としては、利用可能ないかなる窒素
化合物をも用いることができ、例えばペプトン、肉エキ
ス、酵母エキス等の有機栄養物質を用いることができる
し、硫酸アンモニウム等の無機窒素化合物も用いること
ができる。その他、 K2HPO4 、KH2PO4、MgSO4・7H2O 、
NaCl、CaCO3 等を必要に応じて用いることができる。液
体培養を行なう場合、培養は、pH 6〜8 、好ましくはpH
6.8〜7.2 、温度25〜30℃、好ましくは温度27〜28℃
で、振盪または通気条件下で好気的に 1〜3 日、好まし
くは 1〜2 日間行なう。
株の培養は、シュードモナス属に属する公知菌株と同様
の培養法に従って行なわれる。培養の形態は液体培養が
好ましい。培地の栄養源としては通常用いられるものを
広く用いることができる。炭素源としては利用可能ない
かなる炭素化合物をも用いることができ、例えばグルコ
ース、グリセロール、クエン酸ナトリウム等を用いるこ
とができる。窒素源としては、利用可能ないかなる窒素
化合物をも用いることができ、例えばペプトン、肉エキ
ス、酵母エキス等の有機栄養物質を用いることができる
し、硫酸アンモニウム等の無機窒素化合物も用いること
ができる。その他、 K2HPO4 、KH2PO4、MgSO4・7H2O 、
NaCl、CaCO3 等を必要に応じて用いることができる。液
体培養を行なう場合、培養は、pH 6〜8 、好ましくはpH
6.8〜7.2 、温度25〜30℃、好ましくは温度27〜28℃
で、振盪または通気条件下で好気的に 1〜3 日、好まし
くは 1〜2 日間行なう。
【００１３】次に本発明のＨＭＦの定量法について説明
する。本発明のＨＭＦの定量法は、シュードモナス sp.
S4-17株又はそれに由来する菌株のＨＭＦを特異的に酸
化する能力を用いることを特徴とする。本発明のＨＭＦ
の定量法は、上記菌株を用いる限り、いかなる態様をも
とることができ、好ましい定量法としては以下の方法を
例示できる。
する。本発明のＨＭＦの定量法は、シュードモナス sp.
S4-17株又はそれに由来する菌株のＨＭＦを特異的に酸
化する能力を用いることを特徴とする。本発明のＨＭＦ
の定量法は、上記菌株を用いる限り、いかなる態様をも
とることができ、好ましい定量法としては以下の方法を
例示できる。
【００１４】すなわち、試料を含有する培地中でシュー
ドモナス sp. S4-17株又はその変異株を培養した後、培
地中のＨＭＦの減少量又は酸化されたＨＭＦの増加量か
ら試料中に含有されるＨＭＦ量を定量することを特徴と
する、ＨＭＦの定量法である。試料は、特に限定され
ず、例えば、ＨＭＦ含有量の定量が重要である食品類を
試料として用いることができる。試料は必要に応じて希
釈してもよい。培地は、例えばグルコースを除いたDavi
s 培地、肉エキス培地、Pridham 培地等を用いることが
できる。培地に添加する微生物の量は 1〜2 白金耳、好
ましくは 1白金耳である。培養条件は、25〜30℃、15〜
48時間、好ましくは27〜28℃、15〜24時間、最も好まし
くは27℃、24時間である。培養方法は、例えば、振盪培
養、通気攪拌培養等を用いることができるが、好ましく
は振盪培養である。上記菌株を種培養した後、試料を含
有する培地に植菌してもよい。種培養は一般的な培養方
法に従って行なうことができる。ＨＭＦの減少量又は酸
化されたＨＭＦの増加量の測定方法は、特に限定され
ず、公知のいずれの方法に従っても行い得る。例えば、
HPLC等を用いてＨＭＦの減少量又は酸化されたＨＭＦの
増加量を測定することができる。また、ＨＭＦが280nm
に最大吸収波長をもち、酸化されたＨＭＦが250nm に最
大吸収波長をもつことを利用して、培養前後の280nm 又
は250nm における吸光度を測定し、その結果からＨＭＦ
の減少量又は酸化されたＨＭＦの増加量を測定すること
もできる。ＨＭＦの減少量又は酸化されたＨＭＦの増加
量から試料に含有されるＨＭＦ量を定量する方法として
は、例えば、予め、既知量のＨＭＦを含有する培地にお
いて、同様の培養条件下で対照実験を実施し、シュード
モナス sp. S4-17株又はその変異株によるＨＭＦの酸化
効率を測定しておき、その酸化効率とＨＭＦの減少量又
は酸化されたＨＭＦの増加量から、試料中のＨＭＦ含有
量を定量することができる。
ドモナス sp. S4-17株又はその変異株を培養した後、培
地中のＨＭＦの減少量又は酸化されたＨＭＦの増加量か
ら試料中に含有されるＨＭＦ量を定量することを特徴と
する、ＨＭＦの定量法である。試料は、特に限定され
ず、例えば、ＨＭＦ含有量の定量が重要である食品類を
試料として用いることができる。試料は必要に応じて希
釈してもよい。培地は、例えばグルコースを除いたDavi
s 培地、肉エキス培地、Pridham 培地等を用いることが
できる。培地に添加する微生物の量は 1〜2 白金耳、好
ましくは 1白金耳である。培養条件は、25〜30℃、15〜
48時間、好ましくは27〜28℃、15〜24時間、最も好まし
くは27℃、24時間である。培養方法は、例えば、振盪培
養、通気攪拌培養等を用いることができるが、好ましく
は振盪培養である。上記菌株を種培養した後、試料を含
有する培地に植菌してもよい。種培養は一般的な培養方
法に従って行なうことができる。ＨＭＦの減少量又は酸
化されたＨＭＦの増加量の測定方法は、特に限定され
ず、公知のいずれの方法に従っても行い得る。例えば、
HPLC等を用いてＨＭＦの減少量又は酸化されたＨＭＦの
増加量を測定することができる。また、ＨＭＦが280nm
に最大吸収波長をもち、酸化されたＨＭＦが250nm に最
大吸収波長をもつことを利用して、培養前後の280nm 又
は250nm における吸光度を測定し、その結果からＨＭＦ
の減少量又は酸化されたＨＭＦの増加量を測定すること
もできる。ＨＭＦの減少量又は酸化されたＨＭＦの増加
量から試料に含有されるＨＭＦ量を定量する方法として
は、例えば、予め、既知量のＨＭＦを含有する培地にお
いて、同様の培養条件下で対照実験を実施し、シュード
モナス sp. S4-17株又はその変異株によるＨＭＦの酸化
効率を測定しておき、その酸化効率とＨＭＦの減少量又
は酸化されたＨＭＦの増加量から、試料中のＨＭＦ含有
量を定量することができる。
【００１５】
【実施例】以下、実施例を挙げて本発明を説明する。 〔実施例１〕 ＨＭＦ酸化微生物の分離 （１）微生物の分離 Pridham培地( 可溶性デンプン 1.0%, グリセロール 1.
0%, (NH4)2SO4 0.2%,CaCO3 0.2%, K2HPO4 0.1%, MgSO4
・7H2O 0.1%, NaCl 0.1%, 寒天 1.2%, pH7.0)の炭素源
をＨＭＦに変えた培地の平板を作成した。
0%, (NH4)2SO4 0.2%,CaCO3 0.2%, K2HPO4 0.1%, MgSO4
・7H2O 0.1%, NaCl 0.1%, 寒天 1.2%, pH7.0)の炭素源
をＨＭＦに変えた培地の平板を作成した。
【００１６】東京都内各所から採取した土壌 0.1ｇを滅
菌水10mlに懸濁し、超音波洗浄器中で30秒間発振させた
後しばらく放置し、上澄 0.2mlを上記平板上に塗布し27
℃で２〜７日間静置培養した。これによりバクテリア11
株を分離した。
菌水10mlに懸濁し、超音波洗浄器中で30秒間発振させた
後しばらく放置し、上澄 0.2mlを上記平板上に塗布し27
℃で２〜７日間静置培養した。これによりバクテリア11
株を分離した。
【００１７】（２）スクリーニング 分離微生物は、Davis培地（組成 K2HPO4 0.7%, KH 2PO
4 0.2%, MgSO 4・7H2O 0.01%, (NH4)2SO4 0.1%, Sodiu
m citrate 0.05%, Glucose 0.2%) ３mlで種培養（27
℃、 120往復／分、１〜２日間）し、この 0.2mlを Dav
is培地（グルコースを除く、以下−Glc)３mlに植え継い
だ。この Davis培地中に、ＨＭＦ（水溶液を濾過滅菌）
を最終濃度 0.1％になるように添加した。
4 0.2%, MgSO 4・7H2O 0.01%, (NH4)2SO4 0.1%, Sodiu
m citrate 0.05%, Glucose 0.2%) ３mlで種培養（27
℃、 120往復／分、１〜２日間）し、この 0.2mlを Dav
is培地（グルコースを除く、以下−Glc)３mlに植え継い
だ。この Davis培地中に、ＨＭＦ（水溶液を濾過滅菌）
を最終濃度 0.1％になるように添加した。
【００１８】これを27℃で３日間振盪培養（120往復／
分、５cm幅、以下同様）した後、遠心分離（3500回転、
10分) により得られた上澄の吸光度（280nm)を測定し、
減少率を求めた。（１）で分離した菌株からは280nm を
90％以上減少させるものが１株得られた。これを分離菌
S4-17株とした。
分、５cm幅、以下同様）した後、遠心分離（3500回転、
10分) により得られた上澄の吸光度（280nm)を測定し、
減少率を求めた。（１）で分離した菌株からは280nm を
90％以上減少させるものが１株得られた。これを分離菌
S4-17株とした。
【００１９】本菌の培養液について薄層クロマトグラフ
ィー（シリカゲル、展開溶媒；ｎ−ブタノール：酢酸：
水＝３：１：２、検出；硫酸：エタノール：水＝８：
１：１）により分解生成物または変換物の有無を確認し
た結果、新たなスポットが見られた。
ィー（シリカゲル、展開溶媒；ｎ−ブタノール：酢酸：
水＝３：１：２、検出；硫酸：エタノール：水＝８：
１：１）により分解生成物または変換物の有無を確認し
た結果、新たなスポットが見られた。
【００２０】（３）微生物の分類 顕微鏡（オリンパス、VANOX model AHB-LB) により細胞
形態、運動性を観察した。またグラム染色、空気存在下
での生育、Ｏ−Ｆテストを行った結果、本菌はグラム陰
性の好気性桿菌で、運動性あり、Ｏ−Ｆテストは酸化型
であった。この結果から S4-17株はシュードモナス属と
考えられ、シュードモナス sp. S4-17株とした。
形態、運動性を観察した。またグラム染色、空気存在下
での生育、Ｏ−Ｆテストを行った結果、本菌はグラム陰
性の好気性桿菌で、運動性あり、Ｏ−Ｆテストは酸化型
であった。この結果から S4-17株はシュードモナス属と
考えられ、シュードモナス sp. S4-17株とした。
【００２１】（４）S4-17 株の培養経過 Davis培地３mlで種培養（27℃、１〜２日間）を行い、
この全量を Davis培地（−Glc) 100mlに加えた。濾過滅
菌したＨＭＦを最終濃度 0.1％になるように添加し、坂
口フラスコ (500ml 容）で27℃で振盪培養した。６時間
ごとに培養液３mlを採取し、吸光度 600nm (濁度、菌体
量とした）、遠心分離後の上澄の吸光度280nm (ＨＭＦ
量）、250nm (変換産物量）を測定した。
この全量を Davis培地（−Glc) 100mlに加えた。濾過滅
菌したＨＭＦを最終濃度 0.1％になるように添加し、坂
口フラスコ (500ml 容）で27℃で振盪培養した。６時間
ごとに培養液３mlを採取し、吸光度 600nm (濁度、菌体
量とした）、遠心分離後の上澄の吸光度280nm (ＨＭＦ
量）、250nm (変換産物量）を測定した。
【００２２】その結果、ＨＭＦの変換はほぼ１日で終わ
り、変換物もＨＭＦの減少に伴って増加するが、菌体量
（600nm)はほとんど増えなかった。培地のpHにも大きな
変化はみられなかった。またＨＭＦの変換物質は、５−
ヒドロキシメチル−２−フランカルボン酸と構造決定し
た。
り、変換物もＨＭＦの減少に伴って増加するが、菌体量
（600nm)はほとんど増えなかった。培地のpHにも大きな
変化はみられなかった。またＨＭＦの変換物質は、５−
ヒドロキシメチル−２−フランカルボン酸と構造決定し
た。
【００２３】〔実施例２〕 ＨＭＦ酸化変換率 Davis 培地（−Glc 、３ml）で微生物を種培養した。こ
の 0.2mlを、 Davis培地（−Glc)にＨＭＦを最終濃度0.
01〜5.0％になるように添加した培地にそれぞれ植え継
ぎ、27℃で振盪培養してＨＭＦの変換の濃度依存性を調
べた。その結果、ＨＭＦ最終濃度 0.1％までは１日の培
養で約99％の変換率を示したが、 0.2％では約13％に下
がった。
の 0.2mlを、 Davis培地（−Glc)にＨＭＦを最終濃度0.
01〜5.0％になるように添加した培地にそれぞれ植え継
ぎ、27℃で振盪培養してＨＭＦの変換の濃度依存性を調
べた。その結果、ＨＭＦ最終濃度 0.1％までは１日の培
養で約99％の変換率を示したが、 0.2％では約13％に下
がった。
【００２４】〔実施例３〕 食品中ＨＭＦの定量 Davis培地（−Glc 、３ml）にＨＭＦを最終濃度0.01％
になるように、また各種食品（水に溶解または懸濁）を
最終濃度10％または50％になるように添加した。このと
き対照として、食品の代わりに水を加えた培地を同様に
作成した（ＨＭＦ−Ｂとする）。実施例２と同様に微生
物を種培養し、この 0.2mlを上記培地にそれぞれ植え継
ぎ、１日振盪培養した（ＳＡＭとする）。対照には種培
養液の代わりに水を同量加え、同様に振盪した（ＳＡＭ
−Ｂとする）。培養液を限外濾過フィルター（分画分子
量 5,000) で濾過し、ＨＰＬＣ分析に供した。条件は以
下のとおりである。
になるように、また各種食品（水に溶解または懸濁）を
最終濃度10％または50％になるように添加した。このと
き対照として、食品の代わりに水を加えた培地を同様に
作成した（ＨＭＦ−Ｂとする）。実施例２と同様に微生
物を種培養し、この 0.2mlを上記培地にそれぞれ植え継
ぎ、１日振盪培養した（ＳＡＭとする）。対照には種培
養液の代わりに水を同量加え、同様に振盪した（ＳＡＭ
−Ｂとする）。培養液を限外濾過フィルター（分画分子
量 5,000) で濾過し、ＨＰＬＣ分析に供した。条件は以
下のとおりである。
【００２５】 カラム：島津ＳＴＲ ＯＤＳ−II 4.6mmI.D.×150mm 波長：280nm 流速：2.00ml／min 溶媒：４％アセトニトリル／５％酢酸 カラム温度：40℃
【００２６】ＨＭＦ量の算出は次のように行った。ＨＭ
Ｆ−Ｂのピーク高さを0.01％として、各サンプルのピー
ク高さを計算した。また、微生物の培養により〔食品中
のＨＭＦ量＋添加したＨＭＦ量（0.01％）〕は、99％減
少しているとした。99％減少後の値は0.01×〔食品中の
ＨＭＦ量＋添加したＨＭＦ量（0.01％) 〕で求められ
る。
Ｆ−Ｂのピーク高さを0.01％として、各サンプルのピー
ク高さを計算した。また、微生物の培養により〔食品中
のＨＭＦ量＋添加したＨＭＦ量（0.01％）〕は、99％減
少しているとした。99％減少後の値は0.01×〔食品中の
ＨＭＦ量＋添加したＨＭＦ量（0.01％) 〕で求められ
る。
【００２７】・食品中のＨＭＦ量＋添加したＨＭＦ量
（0.01％）＋ＨＭＦ以外で280nm の吸収をもつもの＝Ｓ
ＡＭ−Ｂの値 ・0.01×〔食品中のＨＭＦ量＋添加したＨＭＦ量（0.01
％) 〕＋ＨＭＦ以外で280nm の吸収をもつもの＝ＳＡＭ
の値 これらを計算することにより食品中ＨＭＦを求めた。本
法による食品中ＨＭＦ量を表１に示した。
（0.01％）＋ＨＭＦ以外で280nm の吸収をもつもの＝Ｓ
ＡＭ−Ｂの値 ・0.01×〔食品中のＨＭＦ量＋添加したＨＭＦ量（0.01
％) 〕＋ＨＭＦ以外で280nm の吸収をもつもの＝ＳＡＭ
の値 これらを計算することにより食品中ＨＭＦを求めた。本
法による食品中ＨＭＦ量を表１に示した。
【００２８】
【表１】
【００２９】
【発明の効果】本発明の菌株はＨＭＦを特異的に酸化
し、さらに酸化効率も極めて高いため、これを用いて試
料に含有されるＨＭＦ量を簡便に定量できる。
し、さらに酸化効率も極めて高いため、これを用いて試
料に含有されるＨＭＦ量を簡便に定量できる。
Claims (3)
- 【請求項１】 ５−ヒドロキシメチルフルフラールを特
異的に酸化する能力を有するシュードモナス sp. S4-17
株。 - 【請求項２】 ５−ヒドロキシメチルフルフラールを特
異的に酸化する能力を有する、請求項１記載の菌株由来
の変異株。 - 【請求項３】 請求項１又は２記載の菌株を用いること
を特徴とする、５−ヒドロキシメチルフルフラールの定
量法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9043996A JPH10234359A (ja) | 1997-02-27 | 1997-02-27 | ５−ヒドロキシメチルフルフラール酸化微生物およびこれを用いた５−ヒドロキシメチルフルフラールの定量法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9043996A JPH10234359A (ja) | 1997-02-27 | 1997-02-27 | ５−ヒドロキシメチルフルフラール酸化微生物およびこれを用いた５−ヒドロキシメチルフルフラールの定量法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10234359A true JPH10234359A (ja) | 1998-09-08 |
Family
ID=12679337
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9043996A Pending JPH10234359A (ja) | 1997-02-27 | 1997-02-27 | ５−ヒドロキシメチルフルフラール酸化微生物およびこれを用いた５−ヒドロキシメチルフルフラールの定量法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10234359A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2023505032A (ja) * | 2019-11-29 | 2023-02-08 | シージェイ チェイルジェダン コーポレイション | アルロース二糖類を含むｈｍｆ生成抑制用組成物 |
-
1997
- 1997-02-27 JP JP9043996A patent/JPH10234359A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2023505032A (ja) * | 2019-11-29 | 2023-02-08 | シージェイ チェイルジェダン コーポレイション | アルロース二糖類を含むｈｍｆ生成抑制用組成物 |
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050621 |
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| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20051018 |