JPH10195052A - デオキシピリジノリンの合成方法 - Google Patents
デオキシピリジノリンの合成方法Info
- Publication number
- JPH10195052A JPH10195052A JP9350499A JP35049997A JPH10195052A JP H10195052 A JPH10195052 A JP H10195052A JP 9350499 A JP9350499 A JP 9350499A JP 35049997 A JP35049997 A JP 35049997A JP H10195052 A JPH10195052 A JP H10195052A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- formula
- reacting
- tert
- give
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
- C07D213/63—One oxygen atom
- C07D213/65—One oxygen atom attached in position 3 or 5
- C07D213/66—One oxygen atom attached in position 3 or 5 having in position 3 an oxygen atom and in each of the positions 4 and 5 a carbon atom bound to an oxygen, sulphur, or nitrogen atom, e.g. pyridoxal
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 デオキシピリジノリンの新規合成方法の提
供。 【解決手段】 特定構造のリシンとエポキシドからの、
デオキシピリジノリンの合成方法。
供。 【解決手段】 特定構造のリシンとエポキシドからの、
デオキシピリジノリンの合成方法。
Description
【０００１】
【従来の技術】コラーゲンは、すべての組織の中に種々
の形態で存在する。今では、コラーゲンが、ピリジニウ
ム架橋によって架橋されたアミノ酸鎖の形態を有するこ
とは十分に認められている。ピリジニウム架橋は、３個
のヒドロキシリシン残基から形成され、それらの２個
は、コラーゲン分子の末端ペプチド（非らせん形）が反
応の前に酵素的にアルデヒドに転換されたものからであ
り、第三のヒドロキシリシンは、隣接するコラーゲン分
子のらせん部に位置している。２個のピリジニウム架
橋、すなわちピリジノリン（ＰＹＤ）及びデオキシピリ
ジノリン（ＤＰＤ）が同定されている。文献には、酵素
標識した抗ＰＹＤを使用して、ピリジノリン−酵素標識
複合体を形成し、これを酵素結合イムノソーバント検定
によって検出することにより、尿中のピリジノリンを計
測する技術が記載されている。ＰＹＤの分析は、骨粗し
ょう症及び慢性関節リウマチを選別する手段として有用
であるが、連結組織及び骨におけるその存在が、骨粗し
ょう症又は骨の退化の診断に偏った結果を生じさせるお
それがある。したがって、骨の退化の初期の検出に関し
ては、骨中にのみ見いだされるデオキシピリジノリン
（ＤＰＤ）の免疫検定がＰＹＤの免疫検定よりも好まれ
るようになった。
の形態で存在する。今では、コラーゲンが、ピリジニウ
ム架橋によって架橋されたアミノ酸鎖の形態を有するこ
とは十分に認められている。ピリジニウム架橋は、３個
のヒドロキシリシン残基から形成され、それらの２個
は、コラーゲン分子の末端ペプチド（非らせん形）が反
応の前に酵素的にアルデヒドに転換されたものからであ
り、第三のヒドロキシリシンは、隣接するコラーゲン分
子のらせん部に位置している。２個のピリジニウム架
橋、すなわちピリジノリン（ＰＹＤ）及びデオキシピリ
ジノリン（ＤＰＤ）が同定されている。文献には、酵素
標識した抗ＰＹＤを使用して、ピリジノリン−酵素標識
複合体を形成し、これを酵素結合イムノソーバント検定
によって検出することにより、尿中のピリジノリンを計
測する技術が記載されている。ＰＹＤの分析は、骨粗し
ょう症及び慢性関節リウマチを選別する手段として有用
であるが、連結組織及び骨におけるその存在が、骨粗し
ょう症又は骨の退化の診断に偏った結果を生じさせるお
それがある。したがって、骨の退化の初期の検出に関し
ては、骨中にのみ見いだされるデオキシピリジノリン
（ＤＰＤ）の免疫検定がＰＹＤの免疫検定よりも好まれ
るようになった。
【０００２】ＤＰＤの試験は、流体試料、たとえば尿
を、ＤＰＤに特異的な標識された抗体と接触させること
によって実施することができる。特に簡便なＤＰＤ分析
の方法は、図１に示すタイプの試験片の使用を含む。図
１を参照すると、標識された抗ＤＰＤ抗体複合体（通常
は、標識物質として金ゾルを用いて、金ゾル−ＤＰＤ抗
体複合体を形成したもの）を有する試験片１０が、試験
片１０の塗布区域１２に塗布された流体試料中のＤＰＤ
と結合し、第一の捕捉区域１４及び第二の捕捉区域１６
の中を移動する。第一の捕捉区域１４の中では、固定さ
れたＤＰＤが、拘束されていない標識された抗ＤＰＤを
捕捉する。流体試料中のＤＰＤと結合していたために第
一の捕捉区域では捕捉されなかった標識された抗体は、
第二の捕捉区域１６で、この区域で固定されている抗Ｄ
ＰＤ抗体によって捕捉される。試料中のＤＰＤ濃度は、
第一の捕捉区域１４で捕捉された標識されたＤＰＤの量
を分光光度的に計測することによって測定することもで
きるし、区域１４及び１６の両方からの反射率計測のア
ルゴリズム処理によってより正確に測定することもでき
る。
を、ＤＰＤに特異的な標識された抗体と接触させること
によって実施することができる。特に簡便なＤＰＤ分析
の方法は、図１に示すタイプの試験片の使用を含む。図
１を参照すると、標識された抗ＤＰＤ抗体複合体（通常
は、標識物質として金ゾルを用いて、金ゾル−ＤＰＤ抗
体複合体を形成したもの）を有する試験片１０が、試験
片１０の塗布区域１２に塗布された流体試料中のＤＰＤ
と結合し、第一の捕捉区域１４及び第二の捕捉区域１６
の中を移動する。第一の捕捉区域１４の中では、固定さ
れたＤＰＤが、拘束されていない標識された抗ＤＰＤを
捕捉する。流体試料中のＤＰＤと結合していたために第
一の捕捉区域では捕捉されなかった標識された抗体は、
第二の捕捉区域１６で、この区域で固定されている抗Ｄ
ＰＤ抗体によって捕捉される。試料中のＤＰＤ濃度は、
第一の捕捉区域１４で捕捉された標識されたＤＰＤの量
を分光光度的に計測することによって測定することもで
きるし、区域１４及び１６の両方からの反射率計測のア
ルゴリズム処理によってより正確に測定することもでき
る。
【０００３】第一の捕捉区域１２は、固定されたＤＰＤ
を要し、このＤＰＤと、流体試料中のＤＰＤとで反応し
ていない標識された抗ＤＰＤとが合わさって、この捕捉
区域中で固定されることができる。この種の使い捨て試
験系は、動物の骨から採取されるならば非常に高価であ
る相当量のＤＰＤの使用を必要とする。天然のＤＰＤの
調達に伴う費用が、この物質を合成し、それにより、Ｄ
ＰＤ検出系にＤＰＤを用いる診断試験片の費用を減らそ
うとする試みにつながった。
を要し、このＤＰＤと、流体試料中のＤＰＤとで反応し
ていない標識された抗ＤＰＤとが合わさって、この捕捉
区域中で固定されることができる。この種の使い捨て試
験系は、動物の骨から採取されるならば非常に高価であ
る相当量のＤＰＤの使用を必要とする。天然のＤＰＤの
調達に伴う費用が、この物質を合成し、それにより、Ｄ
ＰＤ検出系にＤＰＤを用いる診断試験片の費用を減らそ
うとする試みにつながった。
【０００４】ＤＰＤ及びＰＹＤならびにそれらの誘導体
を合成する一つの方法が、欧州特許公開第０５５６１５
２号公報に開示されている。この手法では、式：
を合成する一つの方法が、欧州特許公開第０５５６１５
２号公報に開示されている。この手法では、式：
【０００５】
【化７】
【０００６】の化合物を、Ｘ5 −ＣＨ2 −ＣＨＸ1 −Ｚ
−Ｒ3 と定義されるＲ群と反応させる。式中、Ｒ、Ｘ、
Ｙ及びＺ基は、ＤＰＤ、ＰＹＤ又はそれらの種々の誘導
体を提供するように選択される。いずれの場合にも、窒
素原子に対する側鎖の付加の前にピリジン環が形成され
る。本発明のＤＰＤ調製方法では、Ｘ5 −ＣＨ2 −ＣＨ
Ｘ1 −Ｚ−Ｒ3 を別個に調製する必要がないため、工程
が少なくなり、それにより、より労働集約的でない方法
が提供される。
−Ｒ3 と定義されるＲ群と反応させる。式中、Ｒ、Ｘ、
Ｙ及びＺ基は、ＤＰＤ、ＰＹＤ又はそれらの種々の誘導
体を提供するように選択される。いずれの場合にも、窒
素原子に対する側鎖の付加の前にピリジン環が形成され
る。本発明のＤＰＤ調製方法では、Ｘ5 −ＣＨ2 −ＣＨ
Ｘ1 −Ｚ−Ｒ3 を別個に調製する必要がないため、工程
が少なくなり、それにより、より労働集約的でない方法
が提供される。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明によって考慮され
るＤＰＤの合成は、以下の工程を含む。
るＤＰＤの合成は、以下の工程を含む。
【０００８】ａ）Ｎα保護−Ｏ保護−リシン（化合物
１、反応式１）を適当な溶媒中で、少なくとも２当量の
５，６−エポキシ−２−Ｎ保護−Ｏ保護−（２Ｓ）−２
−アミノヘキサン酸エステルと（化合物５、反応式１）
反応させて、対応するアミノジオール（化合物６、反応
式１）を製造する。適当な溶媒には、アセトニトリル、
メタノール及び水／アルコールがある。反応式１では、
反応を触媒するために提供される添加物として過塩素酸
リチウムが示されている。ジアルキル化が必要な工程で
あるため、アミノヘキサン酸エステル１当量あたりエポ
キシド２当量が必要である。
１、反応式１）を適当な溶媒中で、少なくとも２当量の
５，６−エポキシ−２−Ｎ保護−Ｏ保護−（２Ｓ）−２
−アミノヘキサン酸エステルと（化合物５、反応式１）
反応させて、対応するアミノジオール（化合物６、反応
式１）を製造する。適当な溶媒には、アセトニトリル、
メタノール及び水／アルコールがある。反応式１では、
反応を触媒するために提供される添加物として過塩素酸
リチウムが示されている。ジアルキル化が必要な工程で
あるため、アミノヘキサン酸エステル１当量あたりエポ
キシド２当量が必要である。
【０００９】ｂ）次に、アミノジオール６を、適当な溶
媒、たとえば塩化メチレン中、適当な酸化剤、たとえば
塩化オキサリル−ＤＭＳＯで酸化させて、対応するアミ
ノジケトン（化合物７、反応式１）を得る。塩化オキサ
リル−ＤＭＳＯ以外の適当な酸化剤には、塩化チオニル
−ＤＭＳＯ、トリフルオロ酢酸無水物−ＤＭＳＯ及び酢
酸無水物−ＤＭＳＯがある。塩化メチレン以外の適当な
溶媒には、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン及び
クロロホルムがある。
媒、たとえば塩化メチレン中、適当な酸化剤、たとえば
塩化オキサリル−ＤＭＳＯで酸化させて、対応するアミ
ノジケトン（化合物７、反応式１）を得る。塩化オキサ
リル−ＤＭＳＯ以外の適当な酸化剤には、塩化チオニル
−ＤＭＳＯ、トリフルオロ酢酸無水物−ＤＭＳＯ及び酢
酸無水物−ＤＭＳＯがある。塩化メチレン以外の適当な
溶媒には、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン及び
クロロホルムがある。
【００１０】ｃ）工程ｂ）のアミノジケトンをさらに、
アルコール又は第三級アミン、たとえばトリエチルアミ
ン中、塩基、たとえば水酸化ナトリウムと反応させて、
３−ヒドロキシジヒドロピリジンを製造し、これを、適
当な溶媒、たとえば塩化メチレン中Ｏ2 の存在下で、酸
化剤、たとえば塩基（ＤＢＮ）と合わせて、反応式１の
ピリジニウム生成物８を得る。他の適当な酸化剤には、
ジシアノジクロロキノン（ＤＤＱ）、臭素又はＭｎＯ2
があるが、反応は、他の溶媒、たとえば塩化メチレン、
酢酸又はメタノールの中で実施することもできる。生成
物８を脱保護してデオキシピリジノリンを得る。
アルコール又は第三級アミン、たとえばトリエチルアミ
ン中、塩基、たとえば水酸化ナトリウムと反応させて、
３−ヒドロキシジヒドロピリジンを製造し、これを、適
当な溶媒、たとえば塩化メチレン中Ｏ2 の存在下で、酸
化剤、たとえば塩基（ＤＢＮ）と合わせて、反応式１の
ピリジニウム生成物８を得る。他の適当な酸化剤には、
ジシアノジクロロキノン（ＤＤＱ）、臭素又はＭｎＯ2
があるが、反応は、他の溶媒、たとえば塩化メチレン、
酢酸又はメタノールの中で実施することもできる。生成
物８を脱保護してデオキシピリジノリンを得る。
【００１１】
【化８】
【００１２】
【実施例】以下の実施例によって本発明をさらに説明す
る。
る。
【００１３】Ａ．Ｎα−ＣＢＺ−Ｏ−tert−ブチル Ｌ
−リシン（１）の調製 Sigma 社のＮα−ＣＢＺ−Ｌ−リシン（ここで、ＣＢＺ
はベンジルオキシカルボニルである）２５ｇと、酢酸te
rt−ブチル２５０mlと、７０％過塩素酸１４mlとの混合
物を、すべての固形物が溶解するまで激しく攪拌した。
一夜攪拌したのち、酢酸エチル３７５mlを加え、続いて
水２５０mlを加えた。２０％ＮａＯＨを用いて水層のpH
を５．５に上げたところで、有機相を分離した。この有
機相を酢酸エチル溶液で抽出し、pHを再び１０．５に上
げたところで、新しい酢酸エチル２００mlによって再び
抽出した。有機抽出物を合わせ、飽和ブラインで洗浄
し、Ｎａ2 ＳＯ4 上で乾燥させ、濃縮した。高減圧下に
残渣を一夜乾燥させると、無色で粘ちょうな物質２３．
２ｇが得られた。
−リシン（１）の調製 Sigma 社のＮα−ＣＢＺ−Ｌ−リシン（ここで、ＣＢＺ
はベンジルオキシカルボニルである）２５ｇと、酢酸te
rt−ブチル２５０mlと、７０％過塩素酸１４mlとの混合
物を、すべての固形物が溶解するまで激しく攪拌した。
一夜攪拌したのち、酢酸エチル３７５mlを加え、続いて
水２５０mlを加えた。２０％ＮａＯＨを用いて水層のpH
を５．５に上げたところで、有機相を分離した。この有
機相を酢酸エチル溶液で抽出し、pHを再び１０．５に上
げたところで、新しい酢酸エチル２００mlによって再び
抽出した。有機抽出物を合わせ、飽和ブラインで洗浄
し、Ｎａ2 ＳＯ4 上で乾燥させ、濃縮した。高減圧下に
残渣を一夜乾燥させると、無色で粘ちょうな物質２３．
２ｇが得られた。
【００１４】
【数１】
【００１５】Ｂ．Ｎε−ジメチルアミノ−Ｎα−ＣＢＺ
−Ｏ−tert−ブチル Ｌリシン（２） ＺｎＣｌ2 ３．７ｇ（２７．２mmol）、ＮａＣＮＢＨ3
３．２ｇ（５３mmol）及びメタノール６０mlからなる混
合物を調製し、この混合物に、メタノール１８０ml中ア
ミン（１）１８ｇ（５１．７mmol）の溶液を加えた。１
０〜１５℃に冷却したのち、３７％ホルムアルデヒド
（１６５mmol）１２．４mlを２〜３分かけて滴下した。
反応を１時間攪拌し、クロロホルム／メタノール／濃縮
アンモニアの６０：１０：１（容量比）混合物（溶媒
Ａ）を使用して溶離させるシリカゲル薄層クロマトグラ
フィーによってモニタした。水１００mlを加え、混合物
を容量２００mlまで濃縮した。酢酸エチル（２００ml）
を加え、１０％ＮａＯＨによってpHを１０．５に上げ
た。酢酸エチルを分離させ、水相のpHを１０．５に再調
節し、新しい酢酸エチル２００mlで抽出した。酢酸エチ
ル抽出物を合わせ、ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 上
で乾燥させ、ろ過し、濃縮すると、高減圧下に一夜乾燥
させたのち、粘ちょうな油１４．８６ｇが得られた。
−Ｏ−tert−ブチル Ｌリシン（２） ＺｎＣｌ2 ３．７ｇ（２７．２mmol）、ＮａＣＮＢＨ3
３．２ｇ（５３mmol）及びメタノール６０mlからなる混
合物を調製し、この混合物に、メタノール１８０ml中ア
ミン（１）１８ｇ（５１．７mmol）の溶液を加えた。１
０〜１５℃に冷却したのち、３７％ホルムアルデヒド
（１６５mmol）１２．４mlを２〜３分かけて滴下した。
反応を１時間攪拌し、クロロホルム／メタノール／濃縮
アンモニアの６０：１０：１（容量比）混合物（溶媒
Ａ）を使用して溶離させるシリカゲル薄層クロマトグラ
フィーによってモニタした。水１００mlを加え、混合物
を容量２００mlまで濃縮した。酢酸エチル（２００ml）
を加え、１０％ＮａＯＨによってpHを１０．５に上げ
た。酢酸エチルを分離させ、水相のpHを１０．５に再調
節し、新しい酢酸エチル２００mlで抽出した。酢酸エチ
ル抽出物を合わせ、ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 上
で乾燥させ、ろ過し、濃縮すると、高減圧下に一夜乾燥
させたのち、粘ちょうな油１４．８６ｇが得られた。
【００１６】
【数２】
【００１７】Ｃ．Ｎε−ジメチルアミノ−Ｎα−ＣＢＺ
−Ｏ−tert−ブチル Ｌ−リシン Ｎ酸化物（３） ジメチルアミン（２）２５．３ｇ、３０％過酸化水素
７．９ml及びメタノール１５０mlの溶液を５時間攪拌し
たのち、３０％過酸化水素７．９ｇをさらに加えた。反
応を４８時間攪拌し、溶媒Ａで溶離させるシリカゲルＴ
ＬＣによってモニタした。白金黒約５mgの水性スラリー
１mlを加えたところで、反応を７時間攪拌し、白金黒５
〜１０mgの別のスラリーを加えた。混合物を一夜攪拌
し、過酸化物試験紙を使用して過酸化物がないかどうか
モニタし、必要ならば６０℃に加熱して過酸化物を除去
した。反応を試験した結果、過酸化物の存在が否定され
たところで、混合物をろ過し、濃縮した。残渣をＥｔＯ
Ａｃ３００mlに溶解し、Ｎａ2ＳＯ4 上で乾燥させ、ろ
過し、濃縮し、シリカゲル４００ｇ上でクロマトグラフ
ィーに付して、溶媒Ａで溶離させると、生成物１３ｇが
無色の油として得られた。
−Ｏ−tert−ブチル Ｌ−リシン Ｎ酸化物（３） ジメチルアミン（２）２５．３ｇ、３０％過酸化水素
７．９ml及びメタノール１５０mlの溶液を５時間攪拌し
たのち、３０％過酸化水素７．９ｇをさらに加えた。反
応を４８時間攪拌し、溶媒Ａで溶離させるシリカゲルＴ
ＬＣによってモニタした。白金黒約５mgの水性スラリー
１mlを加えたところで、反応を７時間攪拌し、白金黒５
〜１０mgの別のスラリーを加えた。混合物を一夜攪拌
し、過酸化物試験紙を使用して過酸化物がないかどうか
モニタし、必要ならば６０℃に加熱して過酸化物を除去
した。反応を試験した結果、過酸化物の存在が否定され
たところで、混合物をろ過し、濃縮した。残渣をＥｔＯ
Ａｃ３００mlに溶解し、Ｎａ2ＳＯ4 上で乾燥させ、ろ
過し、濃縮し、シリカゲル４００ｇ上でクロマトグラフ
ィーに付して、溶媒Ａで溶離させると、生成物１３ｇが
無色の油として得られた。
【００１８】
【数３】
【００１９】このＮα保護−Ｏ保護−リシンの合成は文
献において既知である（Scott et al., Commun., 1981,
11(4) 303-314）。
献において既知である（Scott et al., Commun., 1981,
11(4) 303-314）。
【００２０】Ｄ．Ｎ−ＣＢＺ−２−アミノ−５−ヘキセ
ン酸＝５−tert−ブチルエーテル（４） ＤＭＳＯ２５０ml中Ｎ酸化物（３）１４．８ｇの溶液を
１２５℃で２時間加熱し、その間アルゴンでパージし
た。ＤＭＳＯを高減圧下に７０℃で蒸留した。シリカゲ
ル４５０ml上で残渣をクロマトグラフィーに付し、容量
比２０：８０のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離させると、
生成物が画分７０〜１２０で得られた（１８ml画分）。
これらを合わせ、濃縮すると、生成物３．１５ｇが無色
の油として得られた。
ン酸＝５−tert−ブチルエーテル（４） ＤＭＳＯ２５０ml中Ｎ酸化物（３）１４．８ｇの溶液を
１２５℃で２時間加熱し、その間アルゴンでパージし
た。ＤＭＳＯを高減圧下に７０℃で蒸留した。シリカゲ
ル４５０ml上で残渣をクロマトグラフィーに付し、容量
比２０：８０のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離させると、
生成物が画分７０〜１２０で得られた（１８ml画分）。
これらを合わせ、濃縮すると、生成物３．１５ｇが無色
の油として得られた。
【００２１】
【数４】
【００２２】Ｅ．Ｎ−ＣＢＺ−２−アミノ−５，６−エ
ポキシ−ヘキサン酸＝tert−ブチルエステル（５）（化
合物４（工程Ｄ）を参照） Aldrich Chemical社の８５％ｍ−クロロ過安息香酸（ｍ
ＣｐＢＡ）を、塩化メチレンに溶解し、pH７．５の緩衝
液で洗浄することによって精製した。有機層を分離し、
Ｎａ2 ＳＯ4 上で乾燥させ、ろ過し、濃縮した。固形物
を高減圧下に一夜乾燥させ、３℃で貯蔵した。
ポキシ−ヘキサン酸＝tert−ブチルエステル（５）（化
合物４（工程Ｄ）を参照） Aldrich Chemical社の８５％ｍ−クロロ過安息香酸（ｍ
ＣｐＢＡ）を、塩化メチレンに溶解し、pH７．５の緩衝
液で洗浄することによって精製した。有機層を分離し、
Ｎａ2 ＳＯ4 上で乾燥させ、ろ過し、濃縮した。固形物
を高減圧下に一夜乾燥させ、３℃で貯蔵した。
【００２３】塩化メチレン２５ml中ヘキサン酸エステル
（４）３．１５ｇ（９．７５mmol）及びｍＣｐＢＡ１．
７６ｇ（１０．２mmol）の混合物を室温で４８時間攪拌
した。反応をＥｔＯＡｃ１２５mlで希釈し、５％ＮａＯ
Ｈで２回洗浄し、さらにブラインで洗浄した。Ｎａ2 Ｓ
Ｏ4 上で乾燥させたのち、反応物をろ過し、濃縮する
と、生成物２．９ｇが無色の油として得られた。
（４）３．１５ｇ（９．７５mmol）及びｍＣｐＢＡ１．
７６ｇ（１０．２mmol）の混合物を室温で４８時間攪拌
した。反応をＥｔＯＡｃ１２５mlで希釈し、５％ＮａＯ
Ｈで２回洗浄し、さらにブラインで洗浄した。Ｎａ2 Ｓ
Ｏ4 上で乾燥させたのち、反応物をろ過し、濃縮する
と、生成物２．９ｇが無色の油として得られた。
【００２４】
【数５】
【００２５】Ｆ．２，１２−ベンジルオキシカルボニル
アミノ−７−（５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−
５−tert−ブトキシカルボニル−ペンチル）アザ−１，
１３−ジ−tert−ブチル−５，９−ジヒドロキシ−トリ
デカン二酸エステル（６） エポキシド５（１．６８ｇ、５．０１mmol）を乾燥アセ
トニトリル１．５mlに溶解したのち、無水ＬｉＣｌＯ4
０．５３ｇ（５．０１mmol）を加えた。固形物が溶解す
ると、アセトニトリル１．５ml中アミン（１）０．８ｇ
（２３mmol）を加えた。混合物を５０℃で一夜攪拌した
のち、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル１５０ｇ上
でクロマトグラフィーに付して、容量比７：１のクロロ
ホルム／溶媒Ａで溶離させると、アミノジオール（６）
１ｇ及び回収されたエポキシド０．５ｇが得られた。ジ
オールを既知量の塩化メチレンに溶解し、のちの使用に
備えて３Åモレキュラーシーブ上で貯蔵した。
アミノ−７−（５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−
５−tert−ブトキシカルボニル−ペンチル）アザ−１，
１３−ジ−tert−ブチル−５，９−ジヒドロキシ−トリ
デカン二酸エステル（６） エポキシド５（１．６８ｇ、５．０１mmol）を乾燥アセ
トニトリル１．５mlに溶解したのち、無水ＬｉＣｌＯ4
０．５３ｇ（５．０１mmol）を加えた。固形物が溶解す
ると、アセトニトリル１．５ml中アミン（１）０．８ｇ
（２３mmol）を加えた。混合物を５０℃で一夜攪拌した
のち、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル１５０ｇ上
でクロマトグラフィーに付して、容量比７：１のクロロ
ホルム／溶媒Ａで溶離させると、アミノジオール（６）
１ｇ及び回収されたエポキシド０．５ｇが得られた。ジ
オールを既知量の塩化メチレンに溶解し、のちの使用に
備えて３Åモレキュラーシーブ上で貯蔵した。
【００２６】
【数６】
【００２７】Ｇ．３−ヒドロキシ−１−（５−ベンジル
オキシカルボニルアミノ−５−tert−ブトキシカルボニ
ル−ペンチル）−４−（２−ベンジルオキシカルボニル
アミノ−２−tert−ブトキシカルボニル−エチル）−５
−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−tert−
ブトキシカルボニル−プロピル）ピリジニウム塩（８） 塩化メチレン１mlに対し、塩化メチレン中２Ｍ（１．２
mmol）塩化オキサリル０．６mlを加え、混合物を−５５
℃に冷却した。次に、塩化メチレン０．２５ml中ジメチ
ルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（７８μl 、１．１mmol）
を滴下した。１５分後、塩化メチレン１ml中ジオール
（６）４００mgを滴下した。この混合物を２０分間攪拌
しながら−３０℃に温めたのち、反応物を再び−５５℃
に冷却したところで、トリエチルアミン０．２６ｇ
（２．６mmol）を加えた。反応物を室温まで温めたの
ち、ＥｔＯＡｃ２５mlで希釈し、５％ＮａＯＨで洗浄
し、続いてブラインで洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 上で乾燥さ
せた。ろ過したのち、溶液を濃縮すると、２，１２−ベ
ンジルオキシカルボニルアミノ−７−（５−ベンジルオ
キシカルボニルアミノ−５−tert−ブトキシカルボニル
−ペンチル）アザ−１，１３−ジ−tert−ブチル−５，
９−ジオキソ−トリデカン二酸エステル（７）０．３９
ｇが得られた。これは、その不安定性のため、特性決定
しなかった。残渣を塩化メチレン４mlに溶解し、ジアザ
ビシクロ〔４．３．０〕ノン−５−エン（ＤＢＮ）０．
２５ｇを加えた。乾燥管によって保護して、混合物を一
夜攪拌した。酢酸（１００μl)を加え、溶媒を蒸発させ
た。残渣をシリカゲル１００ｇ上でクロマトグラフィー
に付して、２０：１：０．５のクロロホルム／メタノー
ル／酢酸で溶離させた。画分１１〜１４（１８ml画分）
は、ピリジニウム生成物（８）０．２６ｇを含有してい
た。
オキシカルボニルアミノ−５−tert−ブトキシカルボニ
ル−ペンチル）−４−（２−ベンジルオキシカルボニル
アミノ−２−tert−ブトキシカルボニル−エチル）−５
−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−tert−
ブトキシカルボニル−プロピル）ピリジニウム塩（８） 塩化メチレン１mlに対し、塩化メチレン中２Ｍ（１．２
mmol）塩化オキサリル０．６mlを加え、混合物を−５５
℃に冷却した。次に、塩化メチレン０．２５ml中ジメチ
ルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（７８μl 、１．１mmol）
を滴下した。１５分後、塩化メチレン１ml中ジオール
（６）４００mgを滴下した。この混合物を２０分間攪拌
しながら−３０℃に温めたのち、反応物を再び−５５℃
に冷却したところで、トリエチルアミン０．２６ｇ
（２．６mmol）を加えた。反応物を室温まで温めたの
ち、ＥｔＯＡｃ２５mlで希釈し、５％ＮａＯＨで洗浄
し、続いてブラインで洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 上で乾燥さ
せた。ろ過したのち、溶液を濃縮すると、２，１２−ベ
ンジルオキシカルボニルアミノ−７−（５−ベンジルオ
キシカルボニルアミノ−５−tert−ブトキシカルボニル
−ペンチル）アザ−１，１３−ジ−tert−ブチル−５，
９−ジオキソ−トリデカン二酸エステル（７）０．３９
ｇが得られた。これは、その不安定性のため、特性決定
しなかった。残渣を塩化メチレン４mlに溶解し、ジアザ
ビシクロ〔４．３．０〕ノン−５−エン（ＤＢＮ）０．
２５ｇを加えた。乾燥管によって保護して、混合物を一
夜攪拌した。酢酸（１００μl)を加え、溶媒を蒸発させ
た。残渣をシリカゲル１００ｇ上でクロマトグラフィー
に付して、２０：１：０．５のクロロホルム／メタノー
ル／酢酸で溶離させた。画分１１〜１４（１８ml画分）
は、ピリジニウム生成物（８）０．２６ｇを含有してい
た。
【００２８】Ｈ．デオキシピリジノリン（ＤＰＤ） ＨＯＡｃ中酢酸ピリジニウム（８）１６０mg及びＨＢｒ
１mlの混合物を３０分間攪拌したのち、ＨＢｒ／ＨＯＡ
ｃ１mlをさらに加えた。１時間後、溶媒を除去し、残渣
を、ｎ−ブタノール／水／ＨＯＡｃ４：１：１（容量
比）の混合物（溶媒Ｂ）５０mlに溶解し、その後、繊維
セルロース５ｇを加えた。懸濁液を３０分間放置し、ろ
過したのち、ろ液にセルロース３ｇをさらに加えてろ過
し、２時間後さらにろ過した。二つのセルロース固形物
を合わせ、水５０ml中でスラリー化し、３０分後にろ過
した。pH８の緩衝液中、３２６nmで、５２９０モル吸光
係数及び４１３の分子量を使用して吸光度がＤＰＤ２８
mgを示したアリコートを除去した。溶液を凍結乾燥さ
せ、残渣をＨＣｌ（１０mmol）及び洗浄したBioRad AG-
1X10（Ｃｌ- 形態）８ｇに溶解した。１時間後、得られ
たものをろ過し、ろ液をSavant Speed-Vac（登録商標）
濃縮装置上で乾燥状態まで濃縮すると、非常に吸湿性の
四塩化物塩５６mgが得られた。
１mlの混合物を３０分間攪拌したのち、ＨＢｒ／ＨＯＡ
ｃ１mlをさらに加えた。１時間後、溶媒を除去し、残渣
を、ｎ−ブタノール／水／ＨＯＡｃ４：１：１（容量
比）の混合物（溶媒Ｂ）５０mlに溶解し、その後、繊維
セルロース５ｇを加えた。懸濁液を３０分間放置し、ろ
過したのち、ろ液にセルロース３ｇをさらに加えてろ過
し、２時間後さらにろ過した。二つのセルロース固形物
を合わせ、水５０ml中でスラリー化し、３０分後にろ過
した。pH８の緩衝液中、３２６nmで、５２９０モル吸光
係数及び４１３の分子量を使用して吸光度がＤＰＤ２８
mgを示したアリコートを除去した。溶液を凍結乾燥さ
せ、残渣をＨＣｌ（１０mmol）及び洗浄したBioRad AG-
1X10（Ｃｌ- 形態）８ｇに溶解した。１時間後、得られ
たものをろ過し、ろ液をSavant Speed-Vac（登録商標）
濃縮装置上で乾燥状態まで濃縮すると、非常に吸湿性の
四塩化物塩５６mgが得られた。
【００２９】
【数７】
【００３０】Ｏ−tert−ブチルエステル及びＣＢＺ保護
基は、GreeneらによってProtectiveGroups in Organic
Synthesis; John Wiley & Sons: New York, 1991: Pp 2
46and 335-7 に記載されているように、当業者にはよく
知られる多様な処理によって除去することができる。た
とえば、tert−ブチルエステルは、他の酸、たとえばギ
酸、塩酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロメタ
ンスルホン酸、メタンスルホン酸及びトリフルオロ酢酸
を使用して除去することもできる。ＣＢＺ基は、多様な
方法、たとえば、ルイス酸、たとえば塩化アルミニウ
ム、ヨウ化トリメチルシリル及び三臭化ホウ素を用いる
水素化分解、光分解、電気分解、水酸化バリウム又は他
の酸、例えばトリフルオロスルホン酸及びメタンスルホ
ン酸の使用によって除去することもできる。
基は、GreeneらによってProtectiveGroups in Organic
Synthesis; John Wiley & Sons: New York, 1991: Pp 2
46and 335-7 に記載されているように、当業者にはよく
知られる多様な処理によって除去することができる。た
とえば、tert−ブチルエステルは、他の酸、たとえばギ
酸、塩酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロメタ
ンスルホン酸、メタンスルホン酸及びトリフルオロ酢酸
を使用して除去することもできる。ＣＢＺ基は、多様な
方法、たとえば、ルイス酸、たとえば塩化アルミニウ
ム、ヨウ化トリメチルシリル及び三臭化ホウ素を用いる
水素化分解、光分解、電気分解、水酸化バリウム又は他
の酸、例えばトリフルオロスルホン酸及びメタンスルホ
ン酸の使用によって除去することもできる。
【図１】標識された抗ＤＰＤ抗体複合体を有する試験片
を示す平面図である。
を示す平面図である。
Claims (10)
- 【請求項１】 ａ）式： 【化１】 のＮα保護−Ｏ保護−リシンを、少なくとも２当量の、
式： 【化２】 の５，６−エポキシ−２−Ｎ保護−Ｏ保護−（２Ｓ）−
２−アミノヘキサン酸エステルと反応させて、式： 【化３】 の対応するアミノジオールを製造する工程と、 ｂ）このアミノジオールを酸化剤と反応させて、式： 【化４】 の対応するアミノジケトンを得る工程と、 ｃ）このアミノジケトンを塩基と反応させて、対応する
３−ヒドロキシジヒドロピリジンを製造したのち、この
３−ヒドロキシジヒドロピリジンを酸化剤と反応させ
て、３−ヒドロキシピリジニウム環を形成し、それによ
り、式： 【化５】 の化合物を得る工程と、 ｄ）工程ｃ）の化合物を脱保護して、式： 【化６】 のデオキシピリジニウムを得る工程と、を含むことを特
徴とするデオキシピリジノリンの製造方法。 - 【請求項２】 アミノジケトンを除く中間生成物すべて
を回収し、精製する、請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 ａ）少なくとも２当量のＮ−ＣＢＺ−２
−アミノ−５，６−エポキシ−ヘキサン酸＝tert−ブチ
ルエステルを、適当な溶媒中、Ｎα−ＣＢＺ−Ｏ−tert
−ブチルＬ−リシンと反応させて、２，１２−ベンジル
オキシカルボニルアミノ−７−（５−ベンジルオキシカ
ルボニルアミノ−５−tert−ブトキシカルボニル−ペン
チル）アザ−１，１３−ジ−tert−ブチル−５，９−ジ
ヒドロキシ−トリデカン二酸エステルを得、このジオー
ルを回収する工程と、 ｂ）工程ａ）で調製したジオールを、適当な溶媒中、適
当な酸化剤と反応させて、２，１２−ベンジルオキシカ
ルボニルアミノ−７−（５−ベンジルカルボニルアミノ
−５−tert−ブトキシカルボニル−ペンチル）アザ−
１，１３−ジ−tert−ブチル−５，９−ジオキソ−トリ
デカン二酸エステルを得る工程と、 ｃ）前記トリデカン二酸エステルを、単離せずに、塩基
と反応させて、３−ヒドロキシ−１−（５−ベンゾキシ
カルボニルアミノ−５−tert−ブトキシカルボニル−ペ
ンチル）−４−（２−ベンジルオキシカルボニルアミノ
−２−tert−ブトキシカルボニル−エチル）−５−（３
−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ブトキシカル
ボニル−プロピル）ピリジニウム塩を得る工程と、 ｄ）工程ｃ）で調製したピリジニウム塩を、適当な溶媒
中、ＨＢｒと反応させて、デオキシピリジノリンを得る
工程と、を含むことを特徴とするデオキシピリジノリン
の製造方法。 - 【請求項４】 工程ａ）の反応を、溶媒としてのアセト
ニトリル、メタノール又は水とアルコールとの混合物中
で行う、請求項３記載の方法。 - 【請求項５】 過塩素酸リチウムを触媒として工程ａ）
に含め、アセトニトリルを溶媒として工程ａ）に含め
る、請求項３記載の方法。 - 【請求項６】 工程ｂ）における酸化剤が、塩化オキサ
リル−ＤＭＳＯ、塩化チオニル−ＤＭＳＯ、トリフルオ
ロ酢酸無水物−ＤＭＳＯ又は酢酸無水物−ＤＭＳＯであ
る、請求項３記載の方法。 - 【請求項７】 酸化剤が塩化オキサリル−ＤＭＳＯであ
る、請求項６記載の方法。 - 【請求項８】 工程ｂ）における溶媒が塩化メチレン、
ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン又はクロロホル
ムである、請求項３記載の方法。 - 【請求項９】 工程ｃ）における塩基がトリエチルアミ
ンである、請求項３記載の方法。 - 【請求項１０】 ａ）Ｎα保護−Ｏ保護−リシンを、適
当な溶媒中、少なくとも２当量の５，６−エポキシ−２
−Ｎ保護−Ｏ保護−（２Ｓ）−２−アミノヘキサン酸エ
ステルと反応させて、対応するアミノジオールを得る工
程と、 ｂ）前記アミノジオールを酸化剤と反応させて、対応す
るアミノジケトンを得る工程と、 ｃ）前記アミノジケトンを塩基と反応させて、対応する
３−ヒドロキシジヒドロピリジノリン化合物を中間体と
して製造したのち、この中間体を酸化剤と反応させて、
対応するピリジニウム化合物を形成する工程と、 ｄ）前記ピリジニウム化合物を脱保護してデオキシピリ
ジノリンを得る工程と、を含むことを特徴とするデオキ
シピリジノリンの製造方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/782,214 US5723619A (en) | 1997-01-13 | 1997-01-13 | Method for the synthesis of deoxypyridinoline |
| US08/782214 | 1997-01-13 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10195052A true JPH10195052A (ja) | 1998-07-28 |
Family
ID=25125363
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9350499A Pending JPH10195052A (ja) | 1997-01-13 | 1997-12-19 | デオキシピリジノリンの合成方法 |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5723619A (ja) |
| EP (1) | EP0857720B1 (ja) |
| JP (1) | JPH10195052A (ja) |
| AU (1) | AU725687B2 (ja) |
| CA (1) | CA2225198C (ja) |
| DE (1) | DE69822909T2 (ja) |
| DK (1) | DK0857720T3 (ja) |
| IL (1) | IL122213A (ja) |
| NO (1) | NO309601B1 (ja) |
| NZ (1) | NZ329034A (ja) |
| ZA (1) | ZA9710340B (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5834610A (en) * | 1997-05-06 | 1998-11-10 | Johnson; Gary M. | Conversion of pyridinoline to deoxypyridinoline |
| US6824985B1 (en) * | 1997-09-09 | 2004-11-30 | Bayer Corporation | Formulation for reducing urea effect for immunochromatography assays using urine samples |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US527715A (en) * | 1894-10-16 | Car-fender | ||
| GB9202139D0 (en) * | 1992-01-31 | 1992-03-18 | Sandoz Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
| US5527715A (en) * | 1992-07-31 | 1996-06-18 | Metra Biosystems, Inc. | Method and kit for pyridinoline assay |
| US5350855A (en) * | 1992-09-30 | 1994-09-27 | Metra Biosystems, Inc. | Derivatized D-acyl pyridinium reagent |
-
1997
- 1997-01-13 US US08/782,214 patent/US5723619A/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-10-24 NZ NZ329034A patent/NZ329034A/en unknown
- 1997-11-17 IL IL12221397A patent/IL122213A/xx not_active IP Right Cessation
- 1997-11-17 ZA ZA9710340A patent/ZA9710340B/xx unknown
- 1997-11-24 NO NO975384A patent/NO309601B1/no unknown
- 1997-12-18 CA CA002225198A patent/CA2225198C/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-12-19 JP JP9350499A patent/JPH10195052A/ja active Pending
-
1998
- 1998-01-03 DK DK98100050T patent/DK0857720T3/da active
- 1998-01-03 EP EP98100050A patent/EP0857720B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-01-03 DE DE69822909T patent/DE69822909T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1998-01-08 AU AU50389/98A patent/AU725687B2/en not_active Ceased
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NZ329034A (en) | 1998-07-28 |
| DE69822909D1 (de) | 2004-05-13 |
| NO309601B1 (no) | 2001-02-26 |
| CA2225198A1 (en) | 1998-07-13 |
| AU725687B2 (en) | 2000-10-19 |
| IL122213A0 (en) | 1998-04-05 |
| EP0857720A1 (en) | 1998-08-12 |
| ZA9710340B (en) | 1998-06-10 |
| NO975384L (no) | 1998-07-14 |
| AU5038998A (en) | 1998-07-16 |
| CA2225198C (en) | 2003-10-07 |
| NO975384D0 (no) | 1997-11-24 |
| IL122213A (en) | 2000-07-26 |
| US5723619A (en) | 1998-03-03 |
| DK0857720T3 (da) | 2004-07-26 |
| DE69822909T2 (de) | 2005-04-07 |
| EP0857720B1 (en) | 2004-04-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4680338A (en) | Bifunctional linker | |
| EP0772616A1 (de) | Hydrophile metallkomplexe | |
| JP2002529466A (ja) | ポルフィリン化合物、それらの結合体および前記結合体の使用に基づく検定方法 | |
| WO1996003409A1 (de) | Metallkomplexe mit geladenem linker | |
| WO2011109326A2 (en) | Crosslinking reagents, methods, and compositions for studying protein-protein interactions | |
| EP0697021B1 (de) | Photoaktivierbare biotinderivate und deren einsatz zum entstören von immunoassays | |
| DE3806430A1 (de) | Verfahren zur bestimmung eines proteins nach dem prinzip des fluoreszenz-polarisations-immunoassays | |
| JP4098839B2 (ja) | インドシアニン化合物 | |
| DE4439346A1 (de) | Hydrophile Metallkomplexe | |
| JPS6134440B2 (ja) | ||
| EP1325339A2 (en) | Method of assaying pyrrole-containing biological compounds | |
| EP0747699B1 (de) | Entstörungsreagenz für die Bestimmung eines Analyten mit einem lumineszenzfähigen Metallkomplex | |
| JPH10195052A (ja) | デオキシピリジノリンの合成方法 | |
| DE69225764T2 (de) | Verfahren zur Spaltung von Acylthiohydantoinen und Anwendung davon zur C-terminalen Peptidsequenzierung | |
| JP3879866B2 (ja) | 生物体液中のバンコマイシンの検出および定量化用試薬および方法 | |
| JP3544549B2 (ja) | ピリジン誘導体 | |
| DE4004296A1 (de) | Verbesserte markierte haptene, verfahren zu deren herstellung sowie verwendung dieser markierten haptene in immunoassays | |
| US5386033A (en) | 2-aminopyridine compounds | |
| AU724004B2 (en) | Conversion of pyridinoline to deoxypyridinoline | |
| Adamczyk et al. | Collagen cross-links. Synthesis of immunoreagents for development of assays for deoxypyridinoline, a marker for diagnosis of osteoporosis | |
| EP0199963B1 (en) | Ethosuximide assay tracers, immunogens and antibodies | |
| US5548077A (en) | Method of producing a conjugate utilizing a 2-amino-pyridine compound | |
| Galpin et al. | The triphenylphosphine-sulfur trioxide adduct as a coupling reagent in peptide synthesis | |
| JPH041743B2 (ja) | ||
| JPH11240879A (ja) | ピラゾールスルホニルウレアのポリクローナル抗体及び検出方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20061120 |
|
| A521 | Written amendment |
Effective date: 20070118 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070731 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070926 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Effective date: 20080424 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080516 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20080617 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Effective date: 20080618 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 |
|
| R150 | Certificate of patent (=grant) or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110627 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 4 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120627 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 5 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130627 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |