JPH10117789A

JPH10117789A - ヒトセリンプロテアーゼ

Info

Publication number: JPH10117789A
Application number: JP9281032A
Authority: JP
Inventors: Eric H Karran; エリック・ハワード・カラン; Helen E Clinkenbeard; ヘレン・エリザベス・クリンケンベアード; Michael J Browne; マイケル・ジョゼフ・ブラウン; Christopher D Southan; クリストファー・デイビッド・サウザン; Caretha L Creasy; カレサ・エル・クリーシー; George P Livi; ジョージ・ピー・リビ
Original assignee: SmithKline Beecham Ltd; SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Ltd; SmithKline Beecham Corp
Priority date: 1996-09-06
Filing date: 1997-09-05
Publication date: 1998-05-12
Also published as: EP0828003A3; US6004794A; EP0828003A2

Abstract

(57)【要約】【課題】ＰＳＰ１に対応するヌクレオチドおよびアミ
ノ酸配列の提供、ＰＳＰ−１に結合するＰＳＰ−１のモ
ジュレーターおよび／またはＰＳＰ１タンパク質分解活
性のモジュレーター、そのモジュレーターの同定方法、
ならびにかかる方法に有用な物質が必要とされている。【解決手段】ヒトセリンプロテアーゼＰＳＰ１をコー
ドする単離核酸、当該核酸より入手できるタンパク質、
当該核酸で形質転換した組換え宿主細胞、ＰＳＰ１多型
性に特異的なオリゴヌクレオチドおよびプライマー対、
ならびに当該タンパク質および当該核酸配列の使用を開
示する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は単離されたヒトセリ
ンプロテアーゼ（ＰＳＰ１）ポリヌクレオチド、それら
の相同体およびイソ体および多型性変種およびそれらの
検出；本質的に純粋なＰＳＰ１タンパク質；ならびにＰ
ＳＰ１ポリヌクレオチドおよびタンパク質の組成物およ
び製造方法および使用に関する。

【０００２】

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】プレ
セニリンの突然変異（ＰＳ−１およびＰＳ−２）は家族
性アルツハイマー病（ＦＡＤ）の早期発病の全ケースの
〜９５％（各々７５％および２０％）を占める。R.Sher
ringtonら、Nature 375：754-760（1995）；E.I.Rogaev
ら、Nature376:765-778（1995）；およびE.Levy-Lahad
ら、Science 269:973-977（1995）を参照のこと。プレ
セニリンは高度な相同性を有する（同一性６７％）マル
チ膜スパニングタンパク質（multi-membrane spanning
protein）であるが、その機能は知られていない。

【０００３】全長４６ｋＤａのＰＳ−１タンパク質は、
通常２８ｋＤａおよび１８ｋＤａの断片を有することが
示されており；ＰＳ−２は同様に切断することが報告さ
れている。M.Merckenら、ＦＥＢＳLetters 389:297-303
（1996）を参照のこと。この大きさの断片を生じる（複
数の）切断部位は、エクソン８およびエクソン９により
コードされるタンパク質の領域にあると予想される。エ
クソン８はＦＡＤを招く突然変異のホットスポットであ
る。従って、ＰＳ−１のこの領域、およびプレセリナー
ゼプロテアーゼによるこの領域のＰＳ−１切断は、タン
パク質の機能化に重要な事象である。ＰＳ−１スパニン
グエクソン８−１１の領域は、プロテアーゼ、ＰＳＰ１
を特異的に結合し、ＰＳＰ−１の内因性基質に対する活
性および／またはＰＳ−１への結合能力はＡＤ、前頭葉
痴呆症、皮質性レーヴィ小体、パーキンソン病の痴呆
症、急性および慢性の発作後の退化または頭部損傷、運
動ニューロン疾患に見られるニューロン性退化、ＡＩＤ
Ｓ痴呆症ならびに慢性てんかんに関与する神経退化の病
理学において重要であることが、本発明において示され
た。従って、ＰＳＰ１に対応するヌクレオチドおよびア
ミノ酸配列の供給、ＰＳ−１に結合するＰＳＰ１のモジ
ュレーター、および／またはＰＳＰ１タンパク質溶解活
性のモジュレーター、かかるモジュレーターの同定方
法、ならびにかかる方法に有用な物質が必要とされる。

【０００４】

【課題を解決するための手段】従って、本発明の一つの
態様は生物学的に活性なＰＳＰ１ポリペプチドをコード
する単離ポリヌクレオチドである。本発明の別の態様
は、以下の群から選択する単離ポリヌクレオチドであ
る：（ａ）配列番号：２４に示すヌクレオチド６０３から１
９７９のヌクレオチド配列を有するＰＳＰ１−１をコー
ドするポリヌクレオチド；および（ｂ）実質的に配列番号：２４に類似するポリヌクレオ
チド。本発明の別の態様は、以下の群から選択する単離ポリヌ
クレオチドである：（ａ）配列番号：２３に示すヌクレオチド６０３から１
９７９のヌクレオチド配列を有するＰＳＰ１−２をコー
ドするポリヌクレオチド；および（ｂ）実質的に配列番号：２３に類似するポリヌクレオ
チド。本発明の別の態様は、以下の群から選択する単離ポリヌ
クレオチドである：（ａ）配列番号：２６に示すヌクレオチド６０３から１
９７９のヌクレオチド配列を有するＰＳＰ１−３をコー
ドするポリヌクレオチド；および（ｂ）実質的に配列番号：２６に類似するポリヌクレオ
チド。本発明の別の態様は、以下の群から選択する単離ポリヌ
クレオチドである：（ａ）配列番号：２８に示すヌクレオチド６０３から１
９７９のヌクレオチド配列を有するＰＳＰ１−４をコー
ドするポリヌクレオチド；および（ｂ）実質的に配列番号：２８に類似するポリヌクレオ
チド。

【０００５】さらなる態様において、本発明は上記で定
義するポリヌクレオチドにおいて、ヌクレオチド６７２
および１４３５がＣおよびＴから別個に選択される、任
意の単離ポリヌクレオチドを提供し、本明細書において
「多型性変種」と称する。本発明の別の態様は、本発明
のポリヌクレオチドによりコードされる機能性ポリペプ
チドである。本発明の別の態様は、本発明またはＤ８７
２５８のポリヌクレオチドに結合する能力のある配列を
有してなるアンチセンスオリゴヌクレオチドである。本
発明の別の態様は、本発明またはＤ８７２５８のポリヌ
クレオチドのモジュレーターである。

【０００６】本発明の別の態様は、ＰＳＰ１またはＤ８
７２５８の細胞性結合パートナーに対する結合に影響を
及ぼすことにより、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８の活性
を調節する基質の存在に関して培地を評価する方法であ
って、以下の工程からなる：（ａ）ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−２、ＰＳＰ１−３もし
くはＰＳＰ１−４、またはＤ８７２５８のアミノ酸配列
を有するＰＳＰ１もしくはＤ８７２５８タンパク質、ま
たはそれらの機能的誘導体もしくは多型性変種および細
胞性結合パートナーまたはそれらの合成類似体を提供す
ること；（ｂ）ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質／細胞性
結合パートナー複合体を形成できる条件下で、ＰＳＰ１
またはＤ８７２５８活性を調節すると推測される試験物
質とインキュベートすること；（ｃ）複合体、遊離のＰＳＰもしくはＤ８７２５８タン
パク質または遊離の細胞性結合パートナーの存在を評価
すること；および（ｄ）対照と比較して、該物質の効果を決定すること。

【０００７】本発明の別の態様は、細胞性基質に及ぼす
タンパク質溶解活性を阻害することにより、ＰＳＰ１ま
たはＤ８７２５８の活性を調節する基質の存在に関して
培地を評価する方法であって、以下の工程からなる：（ａ）ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−２、ＰＳＰ１−３もし
くはＰＳＰ１−４、またはＤ８７２５８のアミノ酸配列
を有するＰＳＰ１もしくはＤ８７２５８タンパク質、ま
たはそれらの機能的誘導体もしくは多型性変種および細
胞性基質またはそれらの合成類似体を提供すること；（ｂ）ＰＳＰ１酵素／基質複合体を形成し、続いて基質
を切断できる条件下で、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８活
性を阻害すると推測される試験物質とインキュベートす
ること；（ｃ）タンパク質溶解により切断される基質の存在を評
価すること；および（ｄ）対照と比較して、該物質の効果を決定すること。

【０００８】本発明の別の態様は、ＰＳＰ１またはＤ８
７２５８タンパク質に直接的に結合することにより、Ｐ
ＳＰ１またはＤ８７２５８の活性を調節する物質の存在
を評価する方法であって、以下の工程からなる：（ａ）ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−２、ＰＳＰ１−３もし
くはＰＳＰ１−４、またはＤ８７２５８のアミノ酸配列
を有する標識化ＰＳＰ１もしくはＤ８７２５８タンパク
質、またはそれらの機能的誘導体もしくは多型性変種を
提供すること；（ｂ）モジュレーター候補物質と結合する固体支持体を
提供すること；（ｃ）ＰＳＰ１タンパク質／モジュレーター候補物質複
合体を形成できる条件下で、標識化ＰＳＰ１またはＤ８
７２５８タンパク質の混合物を支持体に結合したモジュ
レーター候補物質とインキュベートすること；（ｄ）遊離の可溶性標識化ＰＳＰ１またはＤ８７２５８
タンパク質から固体支持体を分離すること；（ｅ）固体支持体に結合する標識化タンパク質の存在を
評価すること；（ｆ）標識化ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質と
複合した固体支持体を単離すること；および（ｇ）モジュレーター候補物質を同定すること。

【０００９】本発明の別の態様は、本発明の方法により
同定されるＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質調節
化合物である。本発明の別の態様は、本発明のＰＳＰ１
またはＤ８７２５８活性調節化合物の治療的有効量を、
ＰＳＰ１またはＤ８７２５８活性を調節する必要性を有
する患者に投与することからなる、かかる患者の治療方
法である。

【００１０】本発明の別の態様は、以下からなるＰＳＰ
１またはＤ８７２５８タンパク質欠乏に関連する状態の
診断方法である：（ａ）個体からポリヌクレオチドサンプルを単離するこ
と；（ｂ）ＰＳＰ１またはＤ８７２５８をコードするポリヌ
クレオチドサンプルおよび本発明のポリヌクレオチドを
評価すること；および（ｃ）任意の差異がＰＳＰ１またはＤ８７２５８配列に
おける突然変異を示す、ポリヌクレオチドサンプルおよ
びＰＳＰ１またはＤ８７２５８ポリヌクレオチド間の差
異を比較すること。

【００１１】本発明の別の態様は、以下からなるＰＳＰ
１またはＤ８７２５８タンパク質機能不全に関連する状
態の処置方法である：（ａ）ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質機能が欠
損した患者から細胞を単離すること；（ｂ）ＰＳＰ１またはＤ８７２５８を発現する細胞に本
発明またはＤ８７２５８のポリヌクレオチドをトランス
フェクトすることにより、細胞を変化させること；およ
び（ｃ）症状を緩和するために患者に細胞を再導入するこ
と。

【００１２】本発明の別の態様は、本発明のポリヌクレ
オチドをＰＳＰ１タンパク質機能欠損の患者に投与する
ことからなる、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質
機能不全に関与する状態の処置方法であって、ＰＳＰ１
またはＤ８７２５８タンパク質を発現し、症状を緩和す
る方法である。本発明の別の態様は、ＰＳＰ１もしくは
Ｄ８７２５８と免疫反応性のある抗体またはそれらの免
疫原である。本発明の別の態様は、任意の細胞において
本発明のポリヌクレオチドの発現能力のあるトランスジ
ェニック非ヒト動物である。本発明の別の態様は、患者
のサンプル中のＰＳＰ１またはＤ８７２５８多型体を検
出することからなる、患者における神経退化の遺伝的素
因の測定方法である。本発明のさらなる別の態様は、配
列番号：３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、
３９、または４０に示すヌクレオチド配列を有する単離
ポリヌクレオチドである。

【００１３】

【発明の実施の形態】本明細書で用いる「ＰＳＰ１ポリ
ヌクレオチド」または「ＰＳＰ１」なる用語は、ＰＳＰ
１および代替え的にスプライス変種、すなわち相同体お
よびイソ体、ならびに多型性変種をコードするヌクレオ
チド配列を有してなるＤＮＡ分子を意味する。ＰＳＰ１
はヒトＰＳ−１タンパク質のアミノ酸２６９−４１３を
包含する領域に結合し、保存されたセリンプロテアーゼ
モチーフ（Ohno,I.ら、ジーンバンク受託番号Ｄ８７２
５８（1996））を含有し、Lipinskaら、Nucl.Acids Re
s.16:10053-10066（1988）に記載されるイー・コリ（E.
coli）セリンプロテアーゼｈｔｒＡおよび、本明細書で
Ｄ８７２５８と称する、ＩＧＦ−結合モチーフを有する
推定ヒトセリンプロテアーゼに相同性を呈する。ＰＳＰ
１−１配列は配列番号：２４に示す。この配列のコード
化領域は、配列番号：２４のヌクレオチド６０３−１９
７９を有してなる。ＰＳＰ１−１コード化産物の４５８
の誘導アミノ酸配列を配列番号：２５に示す。

【００１４】配列番号：３０に示すＰＳＰ１−１配列
は、ヌクレオチド６７２（Ｃ／Ｔ）および１４３５（Ｃ
／Ｔ）で二つの多型性変種を含有し、２４（ａｒｇ／ｃ
ｙｓ）および２７８（ａｌａ／ｖａｌ）の位置で代替え
アミノ酸基になり、両者共にヌクレオチド１−１５４０
の保存領域にある。ＰＳＰ１−１コード化産物の４５８
の誘導アミノ酸配列を配列番号：３１に示す。ＰＳＰ１
−２配列は配列番号：２３に示す。この配列のコード化
領域は、配列番号：２３のヌクレオチド６０３−１９７
９を有してなる。ＰＳＰ１−２コード化産物の４５８の
誘導アミノ酸配列を配列番号：８に示す。ＰＳＰ１−３
配列は配列番号：２６に示す。この配列のコード化領域
は、配列番号：２６のヌクレオチド６０３−１７３６を
有してなる。ＰＳＰ１−３コード化産物の３７７の誘導
アミノ酸配列を配列番号：２７に示す。ＰＳＰ１−４配
列は配列番号：２８に示す。この配列のコード化領域
は、配列番号：２８のヌクレオチド６０３−１９１３を
有してなる。ＰＳＰ１−４コード化産物の４３６の誘導
アミノ酸配列を配列番号：２９に示す。

【００１５】Ｄ８７２５８配列は配列番号：１７に示
す。この配列のコード化領域は、配列番号：１７のヌク
レオチド４９−１４９１を有してなる。Ｄ８７２５８の
コード化産物の４８０の誘導アミノ酸配列を配列番号：
１８に示す。配列番号：１７に示したＤ８７２５８配列
は１３２５（Ｇ／Ｔ）ヌクレオチドで多型性変種を含有
し、２１３（ｇｌｙ／ｖａｌ）の位置で代替えアミノ酸
基になる。ジーンバンク受託番号Ｄ８７２５８（1996）
の配列は単に１３２５Ｇと記載する。１３２５Ｔを有す
る新規ポリヌクレオチド多型体は、本明細書においてＤ
８７２５８（１３２５Ｔ）と称し、２１３でバリンを有
する新規にコードされた産物はＤ８７２５８（１３２５
Ｔ）タンパク質である。新規ポリヌクレオチドＤ８７２
５８（１３２５Ｔ）およびそれにコードされるタンパク
質は、本明細書に記載される任意の組成物、使用および
方法で、ならびにこれもまた本発明の一部を成す任意の
かかる新規のポリペプチド、コードされるタンパク質、
組成物、使用および方法において、ＰＳＰ−１を置き換
えることができる。

【００１６】本明細書で用いる「機能性断片」なる用語
は、具体的な遺伝子または遺伝子産物を修飾するために
使用する場合、遺伝子の全長またはそれに関連する遺伝
子産物に関わる、実質的に全ての生物学的機能を保持す
る遺伝子の全長以下の長さの部分またはかかる遺伝子産
物を意味する。ＰＳＰ１の機能的断片の例は、最少触媒
領域である。特定の遺伝子または遺伝子産物の断片が機
能的断片であるかどうかを決定するために、周知のヌク
レオチド溶解法もしくはタンパク質溶解法により、また
はポリメラーゼ連鎖反応により断片を生じ、その断片を
記載の生物学的機能について試験する。本明細書で用い
る「抗原」なる用語は、宿主の免疫系を刺激して、体液
性および／または細胞性抗原特異性反応を引き起こす、
１またはそれ以上のエピトープを含有する分子を意味す
る。この用語はまた本明細書で「免疫原」と互換的に用
いられる。

【００１７】本明細書で用いる「エピトープ」なる用語
は、抗原または特異的抗体分子が結合するハプテン上の
部位を意味する。この用語はまた本明細書で「抗原決定
基」または「抗原決定部位」と互換的に用いられる。本
明細書で用いる「モノクローナル抗体」は、一つの種
（例えばネズミ、ウサギ、ヤギ、ラット、ヒト等）に由
来する抗体、および二つ（またはそれ以上）の種（例え
ばキメラおよびヒト化抗体）に由来する抗体を包含する
と理解される。ＲＮＡポリメラーゼが単一のｍＲＮＡに
二つのコード化配列を転写し、次いでこのｍＲＮＡが両
方のコード化配列に由来するアミノ酸を有する単一のポ
リペプチドに翻訳する場合、本明細書で用いるコード化
配列は別のコード化配列に「機能的に連結する」。発現
した配列が最終的にプロセッシングされて望ましいタン
パク質を産生する限り、コード化配列は互いに連続して
いる必要はない。

【００１８】本明細書で用いる「組換え」ポリペプチド
は、組換えＤＮＡ技術により産生した、すなわち望まし
いポリペプチドをコードする外因性ＤＮＡ構築物により
形質転換された細胞から産生したポリペプチドを意味す
る。「合成」ポリペプチドは化学的合成により製造した
ポリペプチドである。本明細書で用いる「レプリコン」
は、インビボでＤＮＡ複製の自立的ユニットとして機能
する；すなわち自身の制御下で複製できる任意の遺伝的
要素（例えばプラスミド、染色体、ウイルス）である。
本明細書で用いる「ベクター」は、別のＤＮＡセグメン
トを付着し、付着したセグメントが複製される様にした
プラスミド、ファージ、またはコスミド等のレプリコン
である。本明細書で用いる「対照体」遺伝子は、本発明
の野生型ＰＳＰ１配列を意味し、遺伝子配列中にヌクレ
オチド置換体が存在するが、遺伝子産物の本質的な機能
には影響しない、種々の配列多型体を包含すると考えら
れる。

【００１９】本明細書で用いる「突然変異」遺伝子は、
ヌクレオチド置換および／または削除および／または挿
入が、遺伝子産物の本質的な機能を混乱させる、対照遺
伝子とは異なるＰＳＰ１配列を意味する。本明細書で用
いる特定のタンパク質のＤＮＡ「コード化配列」、また
は特定のタンパク質を「コードするヌクレオチド配列」
は、適当な調節配列の制御下にある場合、ポリペプチド
に転写および翻訳されるＤＮＡ配列である。本明細書で
用いる「プロモーター配列」は、細胞内でＲＮＡポリメ
ラーゼに結合し、下流（３’方向）のコード化配列の転
写を開始する能力のあるＤＮＡ調節領域である。本発明
を定義する目的で、プロモーター配列は、コード化配列
の翻訳開始コドン（例えばＡＴＧ）により３’末端で結
合し、最小限の塩基またはバックグラウンドを超える検
出可能なレベルで転写を開始するのに必要な要素を包含
するように上流（５’方向）に伸長する。プロモーター
配列内には、転写開始部位（ヌクレアーゼＳ１のマッピ
ングで便宜的に定義される）およびＲＮＡポリメラーゼ
の結合に寄与するタンパク質結合領域（コンセンサス配
列）がある。真核生物プロモーターは、いつもではない
が、しばしば、「ＴＡＴＡ」ボックスおおび「ＣＡＹ」
ボックスを含有する。原核生物プロモーターは−１０お
よび−３５コンセンサス配列に加えてシャイン−ダルガ
ルノ（Shine-Dalgarno）配列を含有する。

【００２０】本明細書で用いるＤＮＡ「制御配列」は総
括的にプロモーター配列、リボソーム結合部位、ポリア
デニル化信号、転写終止配列、上流制御領域、エンハン
サー等を意味し、宿主細胞におけるコード化配列の発現
（すなわち転写および翻訳）を包括的に提供する。本明
細書で用いるように、ＲＮＡポリメラーゼがプロモータ
ー配列に結合し、コード化配列をｍＲＮＡに転写し、か
かるｍＲＮＡをコード化配列によりコードされるポリペ
プチドに翻訳する場合、制御配列は細胞においてコード
化配列の「発現を指示する」。本明細書で用いる「宿主
細胞」は、外因性ＤＮＡ配列により形質転換もしくはト
ランスフェクトされた、または形質転換もしくはトラン
スフェクトされ得る細胞である。

【００２１】本明細書で用いるように、かかる外因性Ｄ
ＮＡが細胞膜内に導入された場合、細胞は外因性ＤＮＡ
により「形質転換されている」。外因性ＤＮＡは、細胞
のゲノムを構成する染色体ＤＮＡに組み込まれて（共有
結合して）もしなくてもよい。原核生物および酵母で
は、例えば、外因性ＤＮＡはプラスミド等のエピソーム
要素上に保持され得る。真核細胞に関しては、安定して
形質転換またはトランスフェクトされた細胞は、外因性
ＤＮＡが染色体内に組み込まれ、娘細胞により染色体複
製を介して遺伝される細胞である。この安定性は真核細
胞がセルラインまたは外因性ＤＮＡを含有する娘細胞の
集団からなるクローンを確立する能力により示す。

【００２２】本明細書で用いる、「トランスフェクショ
ン」または「トランスフェクトされた」とは、細胞が外
来性のＤＮＡを取り込み、外来性のＤＮＡを染色体に組
み込む過程を意味する。トランスフェクションは例えば
細胞がＤＮＡを取り込む種々の技術（例えばリン酸カル
シウム沈殿、電気泳動、リポソームの同化等）またはウ
イルスを用いてＤＮＡを細胞に移すインフェクションに
より達成できる。本明細書で用いる「標的細胞」は、別
の細胞型（またはセルライン）で選択的にトランスフェ
クトされる細胞である。本明細書で用いる「クローン」
は、単一の細胞または有糸分裂による共通の先祖に由来
する細胞の集団である。「セルライン」は、多くの世代
のためのインビトロでの安定した成長が可能な１次細胞
のクローンである。

【００２３】本明細書で用いるＤＮＡ構築物の「異型
性」領域は、天然で他の分子に関連しては見出されな
い、別のＤＮＡ分子内またはその分子に付着した同定可
能なＤＮＡセグメントである。従って、異型性領域が遺
伝子をコードする場合、遺伝子は通常源動物のゲノムで
遺伝子をフランキングしないＤＮＡによりフランキング
される。異型性コード化配列の別の例は、コード化配列
自身が天然には見出されない構築物である（例えば天然
の遺伝子とは異なるコドンを有する合成配列）。対立遺
伝子変種または自然発生突然変異は本明細書で用いるＤ
ＮＡの異型性領域を生じない。本明細書で用いるポリペ
プチドの「モデュレーター」は、ポリペプチド機能に影
響する物質、例えば酵素活性の阻害物資である。

【００２４】本発明の一つの態様は、単離されたＰＳＰ
１タンパク質をコードするポリヌクレオチドおよび実質
的に類似の配列である。単離ポリヌクレオチド配列が適
度に厳密な条件下で、配列番号：２３、２４、２６もし
くは２８にハイブリダイズできるか、またはこれらが配
列番号：２３、２４、２６もしくは２８に同義的である
か、もしくは適度に厳密な条件下で、配列番号：２３、
２４、２６もしくは２８にハイブリダイズできる配列に
同義的であるＤＮＡ配列をコードする場合、単離ヌクレ
オチド配列は実質的に類似している。

【００２５】「適度に厳密な条件」は当業者に理解され
る用語であり、例えばSambrookら、Molecular Cloning:
A Laboratory Manual第2版、１巻101-104頁、コールド
・スプリング・ハーバー・ラボラトリー・プレス（198
9）に記載されている。適度に厳密な条件を用いる実例
的なハイブリダイゼーション・プロトコールは以下のと
おりである。ニトロセルロース・フィルターを６ＸＳ
ＳＰＥ、５Ｘデンハーツ溶液（Denhardt's solution）
（溶液１ｌあたりフィコール（Ficoll）１０ｇ、ＢＳＡ
１０ｇおよびポリビニルピロリドン１０ｇ）、０．０
０５％ＳＤＳおよび１００μｇ／ｍｌｔＲＮＡを含有
する溶液中６５℃でプレハイブリダイズする。ハイブリ
ダイゼーション・プローブは標識化、好ましくは放射性
標識化（例えばBiosＴＡＧ−ＩＴ（登録商標）キット）
する。次いでハイブリダイゼーションを６５℃で約１８
時間実施する。フィルターを次いで２ＸＳＳＣおよび
０．５％ＳＤＳの溶液で室温で１５分間で2回洗浄す
る。続いてフィルターを５８度で洗浄し、空気乾燥し、
増強スクリーンで−７０℃で一晩Ｘ線フィルムに曝露す
る。

【００２６】同義性ＤＮＡ配列は、配列番号：８、２
５、２７もしくは２９、または適度に厳密な条件下で配
列番号：８、２５、２７もしくは２９にハイブリダイズ
できる配列によりコードされるタンパク質と同一のアミ
ノ酸をコードするが、遺伝的コードの同義性のために、
ヌクレオチドコード化配列に変種を有する。例えば、同
義コドンＵＵＣおよびＵＵＵは共にアミノ酸フェニルア
ラニンをコードし、一方ＧＧＸ（Ｘ＝Ｕ、Ｃ、Ａまたは
Ｇ）の四つのコドンは全てグリシンをコードする。また
別に、実質的に類似する配列は、約７０％、好ましくは
約８０％、最も好ましくは約９０％ＰＳＰ１とヌクレオ
チドの同一性を共有する、ＰＳＰ１活性を有するタンパ
ク質をコードするヌクレオチド配列であると定義する、
すなわち全ヌクレオチド配列の少なくとも約７０％が配
列番号：２３、２４、２６または２８に適合する場合、
ＰＳＰ１活性を有するタンパク質をコードする配列は、
任意の配列番号：２３、２４、２６または２８に実質的
に類似する。実質的に類似するヌクレオチド配列は、ハ
イブリダイゼーションにより、または配列比較により同
定できる。

【００２７】本発明の単離ポリヌクレオチドの具体例に
は、ＤＮＡ、ゲノムＤＮＡおよびＲＮＡがあり、好まし
くはヒト由来のものである。ＰＳＰ１タンパク質をコー
ドする核酸分子を単離する方法は、当業界周知の方法を
用いて、天然のまたは人工的に設計されたプローブでゲ
ノムまたはｃＤＮＡライブラリーをプローブする。例え
ば「Current Protocols in Molecular Biology」Ausube
lら（編）、グリーン・パブリッシング・アソシエーシ
ョン・アンド・ジョーン・ウィレイ・インターサイエン
ス、ニューヨーク、1989、1992を参照のこと。通常の当
業者は、少なくとも１５の近接するヌクレオチドを有し
てなる配列番号：２３、２４、２６もしくは２８または
それらの断片が、特に有用なプローブであることを理解
している。かかるプローブを、プローブの同定を容易に
するために、分析的に検出可能な物質で標識化でき、標
識化することが好ましいことも理解している。有用な物
質には放射性アイソトープ、蛍光染料または検出可能な
産物の形成を触媒できる酵素等があるが、これらに限定
するものではない。プローブにより当業者がヒト、哺乳
動物またはその他の動物に由来するＰＳＰ１タンパク質
をコードするゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡまたはＲＮＡポリ
ヌクレオチドの相補的コピーを単離し、またはかかる由
来源を関連配列例えばファミリーのさらなるメンバー、
タイプおよび／またはサブタイプ、例えば転写調節およ
び制御要素ならびにその他の安定性、プロセッシング、
翻訳および本明細書に開示するコード化配列に相関する
５’および／または３’領域からの組織特異性決定領域
に関してスクリーニングすることが可能になるが、全て
必要以上に実験する必要はない。

【００２８】本発明の別の態様は、本発明のポリヌクレ
オチドによりコードされる機能性ポリペプチドおよび実
質的に類似のポリペプチドである。本発明の機能性ポリ
ペプチドの一つの具体例は、配列番号：８、２５、２７
または２９に示すアミノ酸配列を有するＰＳＰ１タンパ
ク質である。実質的に類似のポリペプチド配列は、ＰＳ
Ｐ１活性を有し、約５０％、好ましくは約７０％、最も
好ましくは約９０％ＰＳＰ１と同等なアミノ酸を共有す
るポリペプチド配列、即ちＰＳＰ１活性を有するポリペ
プチドを示す配列が実質的に任意の配列番号：８、２
４、２６または２８に類似し、配列の全アミノ酸の少な
くとも約５０％が配列番号：８、２５、２７または２９
に適合する場合である。実質的に類似するポリペプチド
配列は、タンパク質溶解性消化、ゲル電気泳動、マイク
ロシークエンシングおよび／または配列比較、（例えば
ウィスコンシン大学ジェネティックス・コンピューター
・グループから利用可能なＧＡＰアルゴリズムの使用に
よる）等により同定できる。

【００２９】本発明の別の態様は、本質的に純粋なＰＳ
Ｐ１タンパク質を製造する方法である。さらに別の態様
は、本発明の製造方法により産生されたＰＳＰ１タンパ
ク質である。このタンパク質は配列番号：８、２５、２
７または２９に示すアミノ酸配列を有し、同一の機能を
有する実質的に類似したアミノ酸配列を有する変種を包
含する。本発明のタンパク質は、タンパク質の発現およ
びそれらの回収を促進する条件下で、本発明のポリヌク
レオチドをコードするベクターを含有する組換え宿主細
胞を培養する、組換え遺伝子操作技術により製造するの
が好ましい。

【００３０】単離ポリヌクレオチド、とりわけＤＮＡ
は、ＤＮＡを遺伝子発現に必要な、必須発現制御領域、
例えば調節領域に機能的に連結することにより、発現ベ
クターに導入できる。ベクターは適当な宿主細胞、例え
ば細菌等の原核生物、または酵母もしくは哺乳動物細胞
等の真核生物に、当業界周知の方法で導入できる。Ausu
belら、（上記に引用）を参照のこと。製造し単離した
望ましいタンパク質のコード化配列を、任意の適当なベ
クターまたはレプリコンにクローン化できる。多くのク
ローニングベクターが当業者に周知であり、適当なクロ
ーニングベクターの選別は、選択の問題である。クロー
ニング用の組換えＤＮＡベクターおよび形質転換できる
宿主細胞の例としては、バクテリオファージ（イー・コ
リ：E.coli）、ｐＢＲ３２２（イー・コリ：E.coli）、
ｐＡＣＹＣ１７７（イー・コリ：E.coli）、ｐＫＴ２３
０（グラム陰性細菌）、ｐＧＶ１１０６（グラム陰性細
菌）、ｐＬＡＦＲ１（グラム陰性細菌）、ｐＭＥ２９０
（イー・コリ：E.coli以外のグラム陰性細菌）、ｐＨＶ
１４（イー・コリ：E.coliおよびバチルス・サブチリ
ス：Bacillus subtilis）、ｐＢＤ９（バチルス：Bacil
lus）、ｐＩＪ６１（ストレプトミセス：Streptomyce
s）、ｐＵＣ６（ストレプトミセス：Streptomyces）、
ＹＩｐ５（サッカロミセス：Saccharomyces）、バキュ
ロウイルス（baculovirus）昆虫細胞系、ドロソフィラ
（Drosophila）昆虫系、ＹＣｐ１９（サッカロミセス：
Saccharomyces）ならびにｐＳＶ２ネオ（哺乳動物細
胞）等があるが、これらに限定するものではない。一般
的には「ＤＮＡクローニング」：Ｉ＆ＩＩ巻、Gloverら
編、ＩＲＬプレス・オックスフォード（1985）（198
7）；およびT.Maniatisら、「Molecular Cloning」コー
ルド・スプリング・ハーバー・ラボラトリー（1982）を
参照のこと。

【００３１】遺伝子は制御要素、例えばプロモーター、
リボソーム結合部位（細菌性発現用）および所望により
オペレーター等の制御下に置き、望ましいタンパク質を
コードするＤＮＡ配列を、発現構築物を含有するベクタ
ーにより形質転換された宿主細胞中のＲＮＡに転写する
ようにする。コード化配列は単一のペプチドまたはリー
ダー配列を含有してもしなくともよい。本発明のタンパ
ク質は、例えばイー・コリ（E.coli）ｔａｃプロモータ
ーまたはＡ遺伝子（ｓｐａ）プロモーターおよび信号配
列を用いて発現できる。リーダー配列は翻訳後プロセッ
シング中の細菌宿主により除去され得る。例えば米国特
許第4431739号；第４４２５４３７号および第４３３８
３９７号を参照のこと。

【００３２】制御配列に加え、宿主細胞の成長に相対し
てタンパク質配列の発現を調節できる調節配列を加える
のが望ましい。調節配列は当業者に周知である。遺伝子
の発現を化学的または物理的刺激に反応してスイッチを
入れたり切ったりさせるものを例示すると、調節化合物
の存在、または種々の温度もしくは代謝条件等がある。
他の型の調節要素は、ベクター中にも存在でき、エンハ
ンサー配列等がある。

【００３３】特定のコード化配列を適当な調節配列を有
するベクター中に置き、コード化配列の位置および配向
は、制御配列に関して、コード化配列が制御配列の制御
下で転写される、すなわち制御配列でＤＮＡ分子に結合
するＲＮＡポリメラーゼがコード化配列を転写するよう
にして、発現ベクターを構築する。目的の特定の抗原を
コードする配列の修飾は、この目標を達成するために望
ましい。例えば、適当な配向で制御配列に結合する、す
なわち解読枠を維持するために配列を修飾することが必
要になりうる場合もある。制御配列および他の調節配列
はベクター、例えば上記のクローニングベクター等に挿
入する前にコード化配列にライゲートできる。また別
に、コード化配列はすでに制御配列および適当な制限部
位を含有している発現ベクターに直接的にクローン化で
きる。

【００３４】ＰＳＰ１タンパク質の突然変種または類似
体を産生するのが望ましい場合もある。突然変種または
類似体は、タンパク質をコードする配列の一部の削除、
配列の挿入および／または配列内の１またはそれ以上の
ヌクレオチドの置換により、製造できる。ヌクレオチド
配列を修飾する技術、例えば部位指向性突然変異誘発
は、当業者に周知である。例えばT.Maniatisら、上記で
引用；「ＤＮＡCloning」Ｉ＆ＩＩ巻；および「Nucleic
Acid Hybridization」上記で引用を参照のこと。発現
系および宿主選別に応じて、本発明のタンパク質は、目
的のタンパク質を発現するための条件下で、上記の発現
ベクターにより形質転換した成長宿主細胞により産生さ
れる。好ましい哺乳動物細胞には、ヒト腎胚細胞（２９
３）、サル腎細胞、繊維芽（ＣＯＳ）細胞、チャイニー
ズ・ハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ドロソフィラ（Dr
osophila）またはネズミＬ−細胞等がある。発現系がタ
ンパク質を成長培地中に分泌する場合、タンパク質は培
地から直接的に精製できる。タンパク質が分泌しない場
合、細胞ライゼートから単離するかまたは細胞膜分画か
ら回収する。適当な成長条件および回収方法の選別は、
当業者の範疇である。

【００３５】本発明のタンパク質を同定するための別の
方法は、イー・コリ（E.coli）を形質転換するために得
られたクローンを用いて遺伝子ライブラリーを構築し、
ＰＳＰ１に対するポリクローナル血清またはモノクロー
ナル抗体を用いて個々のコロニーをプールおよびスクリ
ーニングすることによる。本発明のタンパク質はまた、
化学的合成法、例えば自動ペプチド合成器での固相ペプ
チド合成により、既知アミノ酸配列または目的の遺伝子
のＤＮＡ配列に由来するアミノ酸配列を用いて産生でき
る。このような配列は当業者に周知である。本発明のタ
ンパク質、または少なくとも一つのエピトープを有して
なるそれらの免疫原断片は、本明細書に開示するアミノ
酸配列に対応するエピトープに指向するポリクローナル
およびモノクローナルの両方の抗体を産生するために使
用できる。ポリクローナル抗体が望ましい場合、選別し
た哺乳動物、例えばマウス、ウサギ、ヤギまたはウマ
は、本発明のタンパク質、またはその断片または突然変
異タンパク質で免疫化する。免疫化した動物からの血清
を回収し、既知の方法に準じて処理する。血清ポリクロ
ーナル抗体は、イムノアフィニティー・クロマトグラフ
ィーまたはその他の既知の方法により精製できる。

【００３６】本発明のタンパク質およびそれらの免疫原
断片に対するモノクローナル抗体もまた、当業者により
容易に産生できる。ハイブリドーマ技術を用いる一般的
なモノクローナル抗体製造のための方法がよく知られて
いる。普遍的な抗体産生セルラインは、細胞融合によ
り、また腫瘍形成ＤＮＡでのＢリンパ球の直接的な形質
転換またはエプステイン−バール（Epstein-Barr）ウイ
ルスでのトランスフェクション等のその他の技術によっ
ても作ることができる。例えばM.Schreierら、「Hybrid
oma Techniques」（1980）；Hammerlingら、「Monoclon
al Antibodies and T-cell Hybridomas」（1981）；Ken
nettら、「Monoclonal Antibodies」（1980）；および
米国特許第４３４１７６１号；第４３９９１２１号；４
４２７７８３号；第４４４４８８７号；第４４５２５７
０号；第４４６６９１７号；第４４７２５００号；第４
４９１６３２号および第４４９３８９０号を参照のこ
と。目的の抗原に対して産生したモノクローナル抗体の
パネル、またはその断片は種々の特性、すなわちイソ
体、エピトープ、親和性等をスクリーニングできる。モ
ノクローナル抗体は、免疫親和性技術を用いた、それら
を指向する個々の抗原の精製に有用である。また別に、
目的のモノクローナル抗体をコードする遺伝子は当業者
に周知のＰＣＲ技術によりハイブリドーマより単離で
き、適当なベクターにクローン化および発現できる。本
発明の抗体は、ポリクローナルでもモノクローナルで
も、イムノアッセイ、ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ等において試
薬として用いることができるという点でさらなる利用性
がある。本発明の抗体は、分析的に検出可能な試薬、例
えば放射性アイソトープ、蛍光分子または酵素で標識化
できる。

【００３７】ヒト以外の動物の可変領域がヒト定常領域
に結合または融合しているキメラ抗体（例えばLiuら、P
roc.Natl.Acad.Sci.USA、84:3439（1987）を参照のこ
と。）は、分析において、または治療的にも有用であ
る。治療用モノクローナル抗体はJohnsら、Nature 321:
522（1986）；Verhoeyenら、Science 239:1534（198
8）；Kabatら、J.Immunol.147:1709（1991）；Queen
ら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、86:10029（1989）；Gorm
anら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、88:34181（1991）；お
よびHodgsonら、Bio/Technology 9:421（1991）に記載
されるように「ヒト化」されるのが好ましい。本発明の
別の態様は、本発明のポリペプチドまたはＤ８７２５８
のモデュレーターである。物質によるＰＳＰ１またはＤ
８７２５８の機能的調節には、機能の部分的阻害から完
全阻害、例えばタンパク質溶解活性の阻害、同等な機能
および機能の増強等がある。本発明のモデュレーターの
具体例には、ペプチド、オリゴヌクレオチドおよびペプ
チド擬似物質等の小さな有機物質等がある。本発明のモ
デュレーターは、ＡＤ等の神経退化の全ての型に治療的
または予防的に有用である。ＰＳＰ１またはＤ８７２５
８の、その他の外因性物質に相対するタンパク質溶解活
性のモデュレーターは、別の型のヒトの病態の処置にも
有用である。

【００３８】本発明の別の態様は、本発明のポリペプチ
ドに結合できる配列を有してなるアンチセンスオリゴヌ
クレオチドである。合成オリゴヌクレオチドまたは関連
するアンチセンス化学的構造性類似体は、ＰＳＰ１また
はＤ８７２５８タンパク質をコードする標的核酸を認識
し、それに特異的に結合し、転写を阻止する様に設計で
きることは、当業者に理解され得る。一般的には、Cohe
n,J.S.、Trends in Pharm.Sci.10:435（1989）およびWe
intraub,H.M.、Scientific American、1990年1月、40頁
を参照のこと。本発明の別の態様は、ＰＳＰ１またはＤ
８７２５８タンパク質の細胞性結合パートナーへの結合
に影響することにより、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タ
ンパク質機能を調節する物質の存在に関して培地を評価
するための方法である。モデュレーターの例としては、
ペプチド、ペプチド擬似物質等の小さな有機分子等があ
るが、これらに限定するものではない。ＰＳＰ１または
Ｄ８７２５８タンパク質は、細胞性結合パートナーまた
はそれらの合成類似体を伴うＰＳＰ１（配列番号：８、
２５、２７または２９）もしくはＤ８７２５８タンパク
質（配列番号：１８）またはそれらの機能的断片のアミ
ノ酸配列を備えている。混合物を、ＰＳＰ１またはＤ８
７２５８遺伝子産物／細胞性結合パートナー複合体を形
成できる条件下で、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８活性を
調節する可能性のある試験物質とインキュベートする。
複合体、遊離のＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質
または遊離の細胞性結合パートナーの存在に関してアッ
セイを実施し、結果を対照と比較して試験物質の効果を
決定する。

【００３９】本発明の別の態様は、細胞性物質に及ぼす
タンパク質溶解活性を阻害することにより、ＰＳＰ１ま
たはＤ８７２５８タンパク質の機能を調節する物質の存
在に関して培地を評価する方法である。モデュレーター
の例としては、ペプチド、ペプチド擬似物質等の小さな
有機分子等があるが、これらに限定するものではない。
細胞性物質にはＰＳ−１、ＰＳ−２、ＡＰＰまたはその
他の物質等がある。ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパ
ク質は、細胞性基質またはそれらの合成類似体を伴うＰ
ＳＰ１（配列番号：８、２５、２７または２９）もしく
はＤ８７２５８タンパク質（配列番号：１８）またはそ
れらの機能的断片のアミノ酸配列を備えている。混合物
を、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８酵素／基質複合体を形
成し、続いて基質を切断できる条件下で、ＰＳＰ１また
はＤ８７２５８活性を阻害すると推測される試験物質と
インキュベートする。

【００４０】本発明の別の態様は、ＰＳＰ１またはＤ８
７２５８タンパク質に直接的に結合することにより、Ｐ
ＳＰ１またはＤ８７２５８の活性を調節する物質の存在
を評価する方法である。モデュレーターの例としてはペ
プチド、ペプチド擬似物質等の小さな有機分子等がある
が、これらに限定するものではない。モデュレーター候
補物質はLamら、Nature 354:82（1991）またはBurbaum
ら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 92:6027（1995）に開示
される技術等により、固体支持体上で合成し、固体支持
体に結合したモデュレーター候補物質を提供する。標識
化ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質は、ＰＳＰ１
（配列番号：８、２５、２７または２９）もしくはＤ８
７２５８タンパク質（配列番号：１８）またはそれらの
機能的誘導体のアミノ酸配列を備えている。標識を例示
すると、直接的に結合する蛍光または着色染料、ビオチ
ン、放射性アイソトープまたはエピトープタグ等があ
り、適切な抗体により検出可能である。固体支持体に結
合したモデュレーター候補物質、および標識化ＰＳＰ１
またはＤ８７２５８タンパク質の混合物は、ＰＳＰ１ま
たはＤ８７２５８タンパク質／モデュレーター候補物質
複合体を形成できる条件下でインキュベートする。固体
支持体は遊離の可溶性標識化ＰＳＰ１またはＤ８７２５
８タンパク質から分離する。固体支持体に結合した標識
化タンパク質の存在に関してアッセイを実施する。標識
化タンパク質と複合体形成する固体支持体を単離し、モ
デュレーター候補物質は、当業者に周知の技術、例えば
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ法（Brummelら、Science 264:399-402
（1994））により同定する。

【００４１】ＰＳＰ１またはＤ８７２５８機能の調節は
プレセニリン切断、その他のタンパク質の切断またはβ
Ａ４産生に影響を及ぼすことが予期される。このように
同定された任意のモデュレーターは、ＦＡＤおよびＡＤ
等の神経退化の処置および予防に治療用として有用であ
ると予期される。さらに、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８
は、相互作用するタンパク質を単離するために用いるこ
とができ、この相互作用は妨害の標的となり得る。ＰＳ
Ｐ１またはＤ８７２５８およびその他の因子との間のタ
ンパク質−タンパク質相互作用の阻害物質により、ＰＳ
Ｐ１またはＤ８７２５８活性を調節するための医薬的物
質が開発された。タンパク質−タンパク質相互作用、例
えばＰＳＰ１またはＤ８７２５８遺伝子産物／結合パー
トナー複合体の相互作用当を評価する方法、およびＰＳ
Ｐ１またはＤ８７２５８と相互作用するタンパク質を単
離する方法は、当業者に周知である。以下に記載する方
法を用いると、通常の当業者は必要以上の実験を必要と
せずにこれらの目的を達成することが可能となる。

【００４２】酵母２ハイブリッド系（Yeast two-hybrid
system）は，インビボで転写活性化物質の活性を再構
成して、最初の試験タンパク質および２番目の試験タン
パク質間の相互作用を検出する方法を提供する。この方
法は米国特許第５２８３１７３号に開示されており、試
薬はクロンテックおよびストラッタジーンから入手可能
である。簡単に説明すると、ＰＳＰ１ｃＤＮＡをＧａ
ｌ４またはＬｅｘＡ転写因子ＤＮＡ結合領域に融合し、
酵母細胞中に発現する。目的の細胞より入手したｃＤＮ
Ａライブラリー・メンバーは、Ｇａｌ４のトランスアク
チベーション（transactivation）領域または別のトラ
ンスアクチベーション領域に融合する。ＰＳＰ１と相互
作用できるタンパク質を発現するｃＤＮＡクローンによ
り、転写因子活性、例えばＧａｌ４およびリポーター遺
伝子発現例えばＧａｌ１−ｌａｃＺのトランスアクチベ
ーションが再構成される。

【００４３】別の方法は、λｇｔ１１、λＺＡＰ（スト
ラッタジーン）または組換えＰＳＰ１と等価なｃＤＮＡ
発現ライブラリーをスクリーニングする方法である。組
換えＰＳＰ１タンパク質またはそれらの断片は、小さな
ペプチドタグ、例えばＦＬＡＧ、ＨＳＶまたはＧＳＴに
融合する。ペプチドタグは、心筋クレアチンキナーゼ等
のキナーゼのための便宜的なリン酸化部位を有すること
ができるか、またはビオチニル化できる。組換えＰＳＰ
１は³²[Ｐ]でリン酸化できるか、または非標識化したも
のを用いてストレプトアビジンもしくはタグに対する抗
体で検出できる。λｇｔ１１ｃＤＮＡ発現ライブラリー
は目的の細胞から作り、組換えＰＳＰ１とインキュベー
トし、洗浄し、ＰＳＰ１と相互作用するｃＤＮＡクロー
ンを単離する。T.Maniatisら、（上記で引用）を参照の
こと。

【００４４】別の方法は、ｃＤＮＡがベクターに、哺乳
動物プロモーターおよびポリペプチドアデニル化部位の
間でクローン化した、哺乳動物発現ライブラリーをスク
リーニングし、ＣＯＳ細胞または２９３細胞に一時的に
トランスフェクトし、次いで４８時間後に標識化、好ま
しくはヨウ素化ＰＳＰ１を有する細胞を同定し、洗浄
し、インキュベートして、結合タンパク質を検出し、オ
ートラジオグラフィーで結合性ＰＳＰ１を検出する方法
である（Simsら、Science 241:585-589（1988）およびM
cMahanら、EMBO J.10:2821-2832（1991）を参照のこ
と）。この方法で、目的の結合性タンパク質をコードす
るｃＤＮＡを含有するｃＤＮＡプールを選別でき、目的
のｃＤＮＡは、各プールをさらにサブ分割することによ
り単離でき、次いで一時的なトランスフェクション、結
合およびオートラジオグラフィーのサイクルを続ける。
また別に、目的のｃＤＮＡは全ｃＤＮＡライブラリーを
哺乳動物にトランスフェクトし、プレートに結合したＰ
ＳＰ１を含有する皿上で細胞をパニングすることにより
単離できる。洗浄後に付着する細胞を溶解し、プラスミ
ドＤＮＡを単離し、細菌中で増幅し、トランスフェクシ
ョンおよびパニングのサイクルを単一のクローンが得ら
れるまで繰り返す（Seedら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 8
4:3365（1987）およびAruffoら、EMBO J.6:3313（198
7）を参照のこと）。結合タンパク質が分泌される場
合、一度結合または中和アッセイは一時的なトランスフ
ェクト細胞からの上澄を評価するために確立されると、
かかるｃＤＮＡは類似のプーリング法により入手でき
る。上澄の一般的なスクリーニング方法は、Wongら、Sc
ience 228:810-815（1985）に開示されている。

【００４５】また別の方法は、ＰＳＰ１と相互作用する
タンパク質を直接的に細胞から単離する方法である。Ｐ
ＳＰ１とＧＳＴまたは小さなペプチドタグとの融合タン
パク質を作り、ビーズ上に固定化する。生合成的に標識
化した、または非標識化タンパク質は目的の細胞からの
抽出物を調製し、ビーズと共にインキュベートし、緩衝
液で洗浄する。ＰＳＰ１と相互作用するタンパク質は、
ビーズから特異的に溶出し、SDS-PAGEにより分析する。
結合パートナー主要アミノ酸配列データは、マイクロシ
ークエンシングにより入手する。所望により、細胞を細
胞性タンパク質の機能的反応、例えばチロシンリン酸化
等を誘起する物質と処理する。このような物質の例とし
ては、成長因子またはサイトカイン例えばエリスロポイ
エチンまたはインターロイキン−３等がある。また別の
方法は、免疫親和性精製法である。組換えＰＳＰ１は標
識化または非標識化細胞抽出物と共にインキュベート
し、抗ＰＳＰ１抗体で免疫沈殿させる。免疫沈殿物はプ
ロテインＡ−セファロースで回収し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ
で分析する。非標識化タンパク質は、ビオチニル化によ
り標識化し、ストレプトアビディンを含有するＳＤＳゲ
ル上で検出する。結合パートナータンパク質は、マイク
ローシクエンシングにより分析する。さらに、標準的な
生化学的精製工程は、当業者に周知であり、マイクロシ
ークエンシングの前に用いることができる。

【００４６】さらに別の方法は、結合パートナーのため
のペプチドライブラリーのスクリーニング法である。組
換えタグ化または標識化ＰＳＰ１は、ＰＳＰ１と相互作
用するペプチドまたはリン酸ペプチドライブラリーから
ペプチドを選別するために用いる。ペプチドのシークエ
ンシングにより相互作用タンパク質に見出され得るコン
センサスペプチド配列が同定できるようになる。通常の
当業者に周知のこれらのまたはその他の方法の任意の方
法により同定したＰＳＰ１またはＤ８７２５８結合パー
トナー、および上記のこれらの推定結合パートナーは、
本発明のアッセイに用いることができる。ＰＳＰ１また
はＤ８７２５８／結合パートナー複合体の存在の評価
は、例えば酵母２−ハイブリッド系（yeast two-hybrid
system）、ＥＬＩＳＡまたは複合体に特異的な抗体を
用いたイムノアッセイにより達成できる。ＰＳＰ１また
はＤ８７２５８／結合パートナー相互作用の形成を妨害
または阻害する試験物質が存在する場合、複合体の量
は、試験物質を欠いた対照と比較して減少する。

【００４７】遊離ＰＳＰ１もしくはＤ８７２５８または
結合パートナーに関するアッセイは、例えばＥＬＩＳＡ
もしくは特異的抗体を用いるイムノアッセイにより、ま
たは放射性標識化ＰＳＰ１もしくはＤ８７２５８を細胞
もしくは細胞膜と共にインキュベートし、続いて遠心も
しくはろ過分離工程により達成される。ＰＳＰ１または
Ｄ８７２５８／結合パートナー相互作用の形成を妨害ま
たは阻害する試験物質が存在する場合、遊離のＰＳＰ１
もしくはＤ８７２５８または遊離の結合パートナーの量
が、試験物質を欠く対照と比較して増加する。

【００４８】本発明の別の態様は、本発明のＰＳＰ１ま
たはＤ８７２５８モデュレーターの有効量、および医薬
的に許容できる担体を有してなる医薬組成物である。本
発明のモデュレーターの医薬組成物は、非経口投与用す
なわち皮下、筋肉内、もしくは静脈内投与用または経口
投与用に製造できる。非経口用組成物は、通常本発明の
モデュレーターの溶液、または許容できる担体、好まし
くは水性担体に溶解したそれらのカクテルから成る。種
々の水性担体には、例えば水、緩衝液、０.4％生理食塩
水、0.3％グリシン等が用いられる。これらの溶液は無
菌で、一般的には微粒子は含まれない。これらの溶液は
通常の周知の無菌化技術により無菌化できる。組成物は
医薬的に許容できる、生理学的状態に近づけるために必
要な補助物質、例えばｐＨ調節物質および緩衝化物質等
を含有できる。かかる医薬的製剤における本発明のモデ
ュレーターの濃度は、非常に広範に、すなわち重量で約
0.5％以下から、通常または少なくとも約１％で、１５
または２０％ほどまでに変化でき、選択した特定の投与
様式に準じて、主に液体容量、粘度等に基づいて選択す
る。

【００４９】このように、本発明のモデュレーターの筋
肉内注射用の医薬的組成物は、１ｍｌの無菌緩衝液、お
よび本発明のタンパク質５０ｍｇを含有するように製造
できる。同様に、本発明のモデュレーターの静脈内還流
用の医薬的組成物は、２５０ｍｌの無菌リンガー溶液
（Ringer's solution）、および本発明のタンパク質モ
デュレーター１５０ｍｇを含有するように製造できる。
非経口投与可能な組成物の実際的な製造方法は周知であ
るか、または当業者に明白であり、さらに詳細には、例
えばRemington's Pharmceutical Science、第１５編、
マック・パブリッシング・カンパニー、イーストン、ペ
ンシルバニアに記載されている。

【００５０】医者は最も適した本発明の治療用物質の投
与量を決定し、これは投与形態および選択する特定の化
合物により変更され、さらに処置中の特定の患者に応じ
て変更される。一般的に、医者は化合物の至適投与量よ
りも実質的に少ない投与量で処置を開始し、少量ずつ投
与量を増加し、このような状況下で至適効果が得られる
まで増加させることを望む。組成物が経口的に投与され
る場合、非経口投与で少量で得られたのと同一の効果を
出すために、活性物質の量はより多量必要とされる。治
療用投与量は一般的に０.１〜１０００ｍｇ／日であ
り、高用量であるが、幾つかの異なる投与量ユニットで
投与することができる。

【００５１】患者の状態に応じて、本発明の医薬的組成
物は、予防的および／または治療的処置のために投与で
きる。治療的適用の場合、本発明の化合物を含有する組
成物またはそれらのカクテルを、既に疾病に冒された患
者に、疾病または合併症を治癒または少なくとも部分的
に抑止するのに十分な量投与する。予防的に投与する場
合、本発明の化合物を含有する組成物またはそれらのカ
クテルを、未だ疾病状態にはない患者に、患者の疾病に
対する抵抗性を増強するために投与する。医薬的組成物
の単回または多数回投与は、処置する医者が選択する投
与量レベルおよびパターンで実施できる。いかなる場合
も、本発明の医薬的組成物は、本発明のモデュレーター
が、患者を効果的に処置するのに十分な量を提供すべき
である。

【００５２】さらに、欠陥遺伝子の遺伝により引き起こ
される疾病もある。これらの遺伝子は欠陥遺伝子の配列
を正常の遺伝子配列と比較することにより検出できる。
ＰＳＰ１またはＤ８７２５８遺伝子の突然変異を担う個
体は、種々の技術によりＤＮＡレベルで検出できる。診
断用の核酸（ゲノムＤＮＡ、ｍＲＮＡ等）は、患者の細
胞、例えば血液、尿、唾液、または組織生検例えば絨毛
膜絨毛サンプリングまたは羊水細胞の除去、および剖検
素材等から入手できる。ゲノムＤＮＡは直接検出に用い
ることができ、またはＰＣＲ、リガーゼ連鎖反応（ＬＣ
Ｒ）、鎖置換増幅（ＳＤＡ）等を用いて分析前に酵素的
に増幅できる。例えばSaikiら、Nature324:163-166（19
86）、Bejら、Crit.Rev.Biochem.Molec.Biol.26:301-33
4（1991）、Birkenmeyerら、J.Virol.Meth.35:117-126
（1991）、Van Brunt、J.Bio/Technology 8:291-294（1
990）を参照のこと。ＲＮＡまたはｃＤＮＡはまた同じ
目的のために用いることができる。例を挙げると、本発
明の核酸に相補的なＰＣＲプライマーは、ＰＳＰ１また
はＤ８７２５８突然変異体を同定および分析するために
使用できる。例えば、削除および挿入は、正常のＰＳＰ
１またはＤ８７２５８ゲノタイプと比較して、増幅産物
の大きさの変化により検出できる。点突然変異は、増幅
ＤＮＡを本発明の放射性標識化ＰＳＰ１またはＤ８７２
５８ＲＮＡに、また別に本発明の放射性標識化ＰＳＰ１
またはＤ８７２５８アンチセンスＤＮＡ配列にハイブリ
ダイズさせることにより同定できる。完全に対合する配
列は、ＲＮアーゼＡ消化または融解温度（Ｔｍ）の差に
より誤対合二重らせんより区別できる。このような診断
法は特に、出生前試験および新生児試験にも有用であ
る。

【００５３】さらに、点突然変異ならびに対照遺伝子お
よび「突然変異」遺伝子間の他の配列の差異は、他の周
知の技術、例えば直接的なＤＮＡシークエンシング、一
本鎖立体配位多型性により同定できる。Oritaら、Genom
ics 5:874-879（1989）を参照のこと。例えば、シーク
エンシングプライマーは、二本鎖ＰＣＲ産物、または改
変ＰＣＲにより生じた一本鎖鋳型分子と共に用いる。放
射性標識化ヌクレオチドを用いる通常の方法により、ま
たは蛍光タグを用いる自動シークエンシング法により、
配列決定を行う。クローン化したＤＮＡセグメントは、
特異的ＤＮＡセグメントを検出するためのプローブとし
ても使用することができる。この方法の感度は、ＰＣＲ
と組み合わせることにより非常に増強される。さらに、
点突然変異および他の配列変種、例えば多型体は上記の
方法、例えば単一のヌクレオチドにより異なる配列のＰ
ＣＲ増幅のための対立遺伝子特異性オリゴヌクレオチド
の使用により、検出できる。配列番号：３２、３３、３
４、３５、３６、３７、３８、３９および４０に示す配
列を有するオリゴヌクレオチドがこのような方法におい
て有用である。これらの方法は、患者のサンプル中のＰ
ＳＰ１またはＤ８７２５８の多型性を検出することによ
り、患者における神経退化の遺伝的素因の決定するのに
有用である。多型性はＰＳＰ１の６７２ヌクレオチド
で、ＰＳＰ１の１４３５ヌクレオチドで、またはＤ８７
２５８の１３２５ヌクレオチドで検出されるのが好まし
い。多型性はＰＣＲで検出するのが好ましく；多型性は
配列番号：３２、３３、３４、３５、３６、３７、３
８、３９および４０から成る群から選択したヌクレオチ
ド配列を有するオリゴヌクレオチドでのＰＣＲにより検
出するのが最も好ましい。神経退化の素因はアルツハイ
マー病に対して決定されるのが好ましい。

【００５４】ＤＮＡ配列の差異に基づく遺伝的試験は、
変成物質を伴うか、または伴わないゲル中のＤＮＡ断片
の電気泳動の可動性の変化により検出できる。小さな配
列の欠損および削除は、高分解能ゲル電気泳動により可
視化できる。配列が異なるＤＮＡ断片は、変成ホルムア
ミド・グラジエントゲル上で区別でき、ゲル中の異なる
ＤＮＡ断片の可動性は、特異的融解または部分融解温度
に準じて、ゲル中の異なる位置で遅延する。例えばMyer
sら、Science 230:1242（1985）を参照のこと。さら
に、配列の変化、とりわけ小さな欠損は、非変成ゲル電
気泳動例えばヘテロ二重らせん電気泳動での、ＤＮＡヘ
テロ二重らせんの移動パターンの変化により検出でき
る。例えばNagamineら、Am.J.Hum.Genet.45:337-339（1
989）を参照のこと。特異的な位置での配列変化は、ヌ
クレアーゼ保護アッセイ、例えばＲＮアーゼおよびＳ１
保護、またはCottonら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:43
97-4401（1985）に開示される化学的切断法によっても
示すことができる。このように、特異的ＤＮＡ配列の検
出は、例えばハイブリダイゼーション（例えばヘテロ二
重らせん電気泳動、Whiteら、Genomics 12:301-306（19
92）を参照のこと）、ＲＮＡアーゼ保護（例えばMyers
ら、Science 230:1242（1985））、化学的切断（例えば
Cottonら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:4397-4401（198
5））、直接的ＤＮＡシークエンシング、または制限酵
素の使用（例えば、制限断片の数および大きさのバリエ
ーションが、エンドヌクレアーゼ制限配列を創り出すま
たは破壊する挿入、欠失、ヌクレオチドの反復の存在お
よび任意のその他の突然変異を示し得る、制限断片長多
型性（restriction fragment length polymorphisms：
ＲＦＬＰ））により達成できる。ゲノムＤＮＡのサザン
ブロッティングを用いて大きな（すなわち１００塩基対
より大きい）欠損および挿入をも同定できる。

【００５５】通常のゲル電気泳動およびＤＮＡシークエ
ンシングに加えて、突然変異例えば微小欠失、異数性、
転座、逆位もまたインサイトー分析により検出できる。
例えばKellerら、ＤＮＡProbes、第2版、ストックトン
・プレス、ニューヨーク、ニューヨーク州、米国（199
3）を参照のこと。すなわち、細胞におけるＤＮＡまた
はＲＮＡ配列は、単離および／または膜への固定化をす
ることなく突然変異を分析できる。蛍光インサイトーハ
イブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）は、現在最も一般的
に適用される方法であり、ＦＩＳＨに関して、非常に多
くの文献がある。例えばTrachuckら、Science 250:559-
562（1990）、およびTraskら、Trends,Genet.7:149-154
（1991）を参照のこと。従って、ＰＳＰ１またはＤ８７
２５８遺伝子の構造に基づく核酸を用いて、遺伝的突然
変異の診断用試験を開発することができる。

【００５６】さらに、ｍＲＮＡにおける変化により検出
できる遺伝子発現の変化によりもたらされる、またはこ
の変化により特徴づけられる疾患もある。また別に、Ｐ
ＳＰ１またはＤ８７２５８遺伝子を対照として用いて、
ＰＳＰ１またはＤ８７２５８ｍＲＮＡの発現レベルが増
加または低下する個体を、例えばノーザンブロッティン
グまたはインサイトーハイブリダイゼーションにより同
定できる。適当なハイブリダイゼーション条件の規定は
当業者の範疇である。例えば「Current Protocols in M
ol.Biol.」Ｉ＆ＩＩ巻、ウィレイ・インターサイエン
ス、Ausbelら、（編）（1992）を参照のこと。プロービ
ング技術は当業界で周知であり、プローブの大きさは広
範に変化できるが、プローブは少なくとも１５ヌクレオ
チドであるのが好ましいということは理解されよう。こ
のようなプローブはプローブの同定を容易にするため
に、分析的に検出可能な試薬で標識化するのが好ましい
ということも理解されよう。有用な試薬には放射性アイ
ソトープ、蛍光染料または検出可能な産物の形成を触媒
できる酵素等があるが、これらに限定するものではな
い。一般的な法則としては、ハイブリダイゼーション条
件をより厳密な状態にするほど、回収される遺伝子はよ
り正確に相関するようになる。

【００５７】プレセニリン生化学におけるＰＳＰ１また
はＤ８７２５８の推定される役割は遺伝子治療であり、
本発明の別の態様を為す。「遺伝子治療」は遺伝子補充
を意味し、目的の遺伝子の対照体コピーをさらに患者の
細胞に挿入する。その結果、対照遺伝子によりコードさ
れたタンパク質が欠陥を修復し、細胞の機能を正常に
し、従って疾病の症状を緩和する。対照体コピーはＰＳ
Ｐ１またはＤ８７２５８遺伝子の野生型形態、または内
因性ＰＳＰ１またはＤ８７２５８の活性を調節するタン
パク質またはペプチドをコードする遺伝子である。本発
明の遺伝子治療は、インビボまたはエクソビボで可能で
ある。エクソビボ遺伝子治療では、患者の細胞の単離お
よび精製、治療用遺伝子の導入、および遺伝的に変化さ
せた細胞の患者への再導入が必要とされる。複製不能ウ
イルス例えば修飾レトロウイルスを用いて、かかる細胞
に治療用ＰＳＰ１またはＤ８７２５８遺伝子を導入でき
る。例えば、マウスモロニー白血病ウイルス（ＭＭＬ
Ｖ）は臨床の遺伝子治療試行において周知のベクターで
ある。例えばBoris-Lauerieら、Curr.Opin.Genet.Dev.
3:102-109（1993）を参照のこと。

【００５８】これに比して、インビボ遺伝子治療は患者
の細胞の単離および精製を必要としない。治療用遺伝子
は、典型的なものでは、患者に投与するために例えばリ
ポソームに、またはアデノウイルス等の複製不能ウイル
ス（Berkner、K.L.、Curr.Top.Microbiol.Immunol.158:
39-66（1992）に記載）もしくはアデノ関連ウイルス
（ＡＡＶ）ベクター（Muzyczka,N.、Curr.Top.Microbio
l.Immunol.158:97-129（1992）および米国特許第５２５
２４７９号に記載）に「パッケージング」する。別の方
法は治療用の遺伝子を直接的に血流または筋肉組織に注
射する、「裸のＤＮＡ（nakedＤＮＡ）」の投与であ
る。別の方法は、ＤＮＡで被覆した金粒子を用いた微粒
子ボンバードメントにより、標的組織に治療用遺伝子を
導入する、「裸のＤＮＡ」の投与である。

【００５９】本発明の遺伝子治療に有用な細胞型には、
リンパ球、肝細胞、筋芽細胞、繊維芽細胞、眼の任意の
細胞例えば網膜細胞、上皮および内皮細胞等がある。細
胞は処置すべき患者から採取したＴリンパ球、肝細胞、
眼の任意の細胞または呼吸器もしくは肺上皮細胞である
のが好ましい。肺上皮細胞のトランスフェクションは、
リポソーム中のＤＮＡベクターの調製物、ＤＮＡタンパ
ク質複合体または複製不能アデノウイルスを霧状にして
吸入して行うことができる。例えば米国特許第５２４０
８４６号を参照のこと。

【００６０】本発明の別の態様は、任意の細胞に本発明
のポリヌクレオチドまたはＤ８７２５８を発現する能力
のある、トランスジェニック、非ヒト哺乳動物である。
トランスジェニック、非ヒト動物は、適当な受精卵また
は宿主の胚を本発明のポリヌクレオチドで、Ｄ８７２５
８でまたはヒト疾患に見出される突然変種でトランスフ
ェクトすることにより入手できる。例えば米国特許第４
７３６８６６号；第５１７５３８５号；第５１７５３８
４号および第５１７５３８６号を参照のこと。得られた
トランスジェニック動物はＰＳＰ１またはＤ８７２５８
遺伝子機能の研究のためのモデルとして用いることがで
きる。とりわけ有用なトランスジェニック動物は、ＰＳ
Ｐ１またはＤ８７２５８タンパク質の発現に関連する検
出可能な表現型を呈示するものである。医薬品開発の候
補物質は次いで関連する表現型を逆転するまたは悪化さ
せる能力をスクリーニングする。本発明は具体的で非限
定的な実施例を参考に記載する。

【００６１】

【実施例】

実施例１− ＰＳ−１結合パートナーＰＳＰ１の同定ＰＳ−１アミノ酸配列の２６９−４１３の残基（配列番
号：１０）をコードするＰＳ−１ｃＤＮＡ（ジーンバン
ク受託番号Ｌ４２１１０）（配列番号：９）の一部を、
オリゴヌクレオチドプライマー５’−ＣＧＧＡＡＴＴＣ
ＣＧＴＡＴＧＣＴＧＧＴＴＧＡＡＡＣＡ−３’（配列番
号：１１）および５’−ＣＧＧＧＡＴＣＣＴＣＡＧＧＣ
ＴＡＣＧＡＡＡＣＡＧＧＣＴＡＴ−３’（配列番号：１
２）でＰＣＲ増幅した。産生物をＥｃｏＲＩおよびＢａ
ｍＨＩで消化し、ｐＥＧ２０２（Golemisら、Current P
rotocols in Molecular Biology、ジョーン・ウィレイ
＆サンズ、ニューヨーク（1994））にクローン化した。
得られたプラスミド、ｐＣＣ３５２は、ＤＮＡ結合タン
パク質、ＬｅｘＡをＰＳ−１のアミノ酸２６９−４１３
にフレーム内融合した融合タンパク質をコードする。親
ベクター、ｐＥＧ２０２はアルコール脱水素酵素（ＡＤ
ＨＩ）プロモーターを用いて、ＬｅｘＡ融合タンパク質
および選別マーカーとしてＨＩＳ３を発現する酵母発現
ベクターである。自動ＤＮＡシークエンサー（アプライ
ド・バイオシステムズ、インコーポレーティッド）を用
いる配列分析により、増幅領域が正しい配列を有してお
り、ＬｅｘＡにフレーム内融合したことを確認した。

【００６２】２ハイブリッドスクリーニングに用いた全
ての方法、プラスミドおよび株はGolemisら、（上記に
引用）に詳細に記載されている。酵母株ＥＧＹ４８（Ｍ
ＡＴａ、ｔｒｐ１、ｈｉｓ３，ｕｒａ３，６ｏｐｓ−Ｌ
ＥＵ２）は、プラスミドｐＣＣ３５２およびｐＳＨ１８
−３４で同時形質転換した。形質転換体は、ウラシルお
よびヒスチジンを欠く完全最少培地を用いて選別した。
プラスミドｐＳＨ１８−３４は、８個のＬｅｘＡオペレ
ーター部位が、ＬａｃＺ遺伝子および選別マーカーとし
てＵＲＡ３の発現を誘導する最少ＧＡＬ１プロモーター
の上流に位置する、酵母発現ベクターである。ＬｅｘＡ
−ＰＳ−１融合体の全長の合成は、ＬｅｘＡに対して指
向するポリクローナル抗血清を用いて酵母抽出物をウェ
スタンブロット分析により確認した。ＬｅｘＡ−ＰＳ−
１融合体単独ではＬＥＵ２もＬａｃＺリポーター株をも
活性化できなかった。さらに、ＬｅｘＡ−ＰＳ−１融合
体の核への侵入能力およびＤＮＡ結合能力はレプレッシ
ョンアッセイを用いて確認した。

【００６３】ＬｅｘＡ−ＰＳ−１融合体およびｐＳＨ１
８−３４（ＣＣＹ３２１）を含有する株は、ライブラリ
ー・スケール形質転換プロトコールを用いて、プラスミ
ドｐＪＧ４−５中ヒト胎児脳ｃＤＮＡライブラリー（ク
ロンテック）で形質転換した。このライブラリープラス
ミドは、ＴＲＰ１選別マーカーを含有し、ＳＶ４０核局
在化配列、酸ブロッブ（acid blob）Ｂ４２、およびヘ
マググルチニンエピトープタグを含有するカッセット
に、融合体（ＡＤ融合体）としてｃＤＮＡを発現させ
る。Gyurisら、Cell 75:791-803（1993）を参照のこ
と。この融合体の発現は、ガラクトース誘導プロモータ
ーＧＡＬ１の制御下にある。形質転換反応物はウラシ
ル、ヒスチジンおよびトリプトファンを欠く完全最少培
地上にプレートした。約4.5ｘ10⁶の個々の形質転換体が
得られ、プールし、凍結させた。各々の主要コロニーを
選別中に再度プレートされたことを確認するために、2
ｘ10⁷生存細胞（個々の形質転換体の約3倍の数）をウラ
シル、ヒスチジン、トリプトファンおよびロイシンを欠
き、ＡＤ融合の発現を誘起するための炭素源としてガラ
クトース／ラフィノースを含む最少培地にプレートし
た。３０℃で３および４日間成長させ、生じたコロニー
をウラシル、ヒスチジンおよびトリプトファンを欠く完
全最少培地に採った。潜在的相互作用融合タンパク質を
含有するコロニーは次にガラクトース依存性およびＬａ
ｃＺ発現を試験した。ガラクトース依存の形でＬＥＵ２
およびＬａｃＺリポーターの両方を活性化するこれらの
単離体は、陽性と考えられ、さらに試験を実施した。プ
ラスミドを酵母から単離し、イー・コリ（E.coli）ＫＣ
８株を形質転換するのに用い、トリプトファンを欠く最
少イー・コリ（E.coli）培地上で成長させることにより
ＡＤ融合プラスミドを選別した。潜在的相互作用融合体
を含有する各々のＡＤ融合プラスミドは、ＣＣＹ３２１
を形質転換するために使用した。幾つかの形質転換体は
ガラクトース依存性ＬＥＵ２およびＬａｃＺ活性化のス
クリーニングに供した。相互作用が特異的であることを
確認するために、各ＡＤ融合プラスミドの２２の非相関
性ＬｅｘＡ融合タンパク質と相互作用する能力を試験し
た。スクリーニングの第二ラウンドを通過し、ＬｅｘＡ
−ＰＳ−１融合体と特異的に相互作用するＡＤ融合プラ
スミドを同定した。

【００６４】実施例２− ＰＳＰ１ｃＤＮＡクローニ
ングおよび配列分析ＡＤ融合プラスミドを制限消化分析および上記のシーク
エンシングに供した。相互作用融合タンパク質ｃＤＮＡ
の一つの配列分析により、配列番号：１の２の位置でＧ
ＧＡで始まり、５２３の位置でＴＧＡで終わる１７３ア
ミノ酸（配列番号：２）タンパク質をコードする５１９
ヌクレオチドオープンリーディングフレーム（配列番
号：１）が示された。ｃＤＮＡ配列またはイー・コリ
（E.coli）セリンプロテアーゼｈｔｒＡの一部に相同性
を示す誘導アミノ酸配列を有するＢＬＡＳＴＸおよびＢ
ＬＡＳＴＮアルゴリズムを用いたジーンバンク・サーチ
は、上記で引用するLipinskaら、に記載されている（配
列番号：１３および１４）。この新規ｃＤＮＡはＰＳＰ
１と称する。ｃＤＮＡのより大きな部分を得るために、
配列番号：１の８３−１０６塩基対を表すオリゴヌクレ
オチド５’−ＣＴＧＧＡＴＧＧＧＧＡＧＧＴＧＡＴＴＧ
ＧＧＡＧＴＧ−３’（配列番号：１５）を用いて、ジー
ントラッパーｃＤＮＡ陽性選別システム（ギブコＢＲ
Ｌ）を使用して、スーパースクリプト（Superscript）
ヒト脳ｃＤＮＡライブラリー（ギブコＢＲＬ）をスクリ
ーニングした。Innisら、ＰＣＲProtocols：A Guide to
Methods and Applications、アカデミック・プレス、
サンディエゴ、カリフォルニア州（1990）およびSambro
okら、MolecularCloning：A Laboratory Manual、第2
版、コールド・スプリング・ハーバー・プレス、コール
ド・スプリング・ハーバー、ニューヨーク州（1989）に
記載されるように、全形細胞ＰＣＲまたは標準的なハイ
ブリダイゼーション条件を用いてコロニーをスクリーニ
ングした。ＰＳＰ１を含有するこれらの単離体は制限消
化分析およびシークエンシングに供した。最も長いクロ
ーンである配列番号：３および配列番号：５は全体をシ
ークエンシングした。

【００６５】配列番号：３の配列分析により、配列番
号：３の１の位置でＣＣＣで始まり、９７２の位置でＴ
ＧＡで終わる３２３アミノ酸（配列番号：４）タンパク
質をコードする９６９ヌクレオチドオープンリーディン
グフレームが示された。配列番号：５の配列分析によ
り、配列番号：５の１の位置でＣＴＴで始まり、１２７
２の位置でＴＧＡで終わる４２３アミノ酸（配列番号：
６）タンパク質をコードする１５００ヌクレオチドオー
プンリーディングフレームが示された。スクリーニング
の第二ラウンドは、配列番号：５の５−２８塩基対を表
す、オリゴヌクレオチド５’−ＧＴＣＴＣＴＧＧＧＣＣ
ＣＣＧＧＴＴＧＴＣＴＧＴＴＧ−３’（配列番号：１
６）を用いて実施した；ライブラリーおよびスクリーニ
ングプロトコールは変更しない。スクリーニングの第二
ラウンドでは、単離した消化した配列番号：７は最長の
ｃＤＮＡクローンを含有する。配列番号：７の配列分析
により、配列番号：７の２５１の位置でＡＴＧで始ま
り、１６２７の位置でＴＧＡで終わる４５８アミノ酸
（配列番号：８）タンパク質をコードする１３７４ヌク
レオチドオープンリーディングフレームが示された。し
かしながら、配列番号：７は潜在的な開始コドンから上
流には停止コドンを有さない。予想される出発コドンが
本物であることを確認するために、「マラトン・レディ
ー（Marathon Ready）」ヒト脳ｃＤＮＡ（クロンテッ
ク）およびプライマーのネスト・セット（nested set）
を用いて、５’ヌクレオチド配列を５’ＲＡＣＥで伸長
させた。配列番号：７特異的プライマー５’−ＣＣＡＡ
ＣＡＧＡＣＡＡＣＣＧＧＧＣＣＣＡＧＡＧＡＣＴ−３’
（配列番号：２０）および５’アンカープライマー−１
（クロンテック）を、最初のＰＣＲ増幅に使用し、配列
番号：７特異的プライマー５’−ＴＧＣＣＴＣＣＴＣＧ
ＣＣＣＧＣＣＣＴＡＣＴＣＡＧＡ−３’（配列番号：２
１）および５’アンカープライマー−２（クロンテッ
ク）を、2番目ののＰＣＲ増幅に使用した。ＰＣＲ産物
はｐＣＲ２．１（インビトローゲン）にＴ／Ａクローン
化した。不安定な（staggered）５’末端を有する１８
の単離体を分析し、５８７ヌクレオチドの５’コンセン
サス配列を生じた（配列番号：２２）。コンセンサス配
列（配列番号：２３）を生じるために、配列番号：２２
および配列番号：７を整列化すると、ヌクレオチドの２
２５の位置にフレーム内停止コドンがあり、最初のメチ
オニンが配列番号：７の予想される位置に対応すること
が示された。この遺伝子をＰＳＰ１−２と称する。

【００６６】遺伝子のコンセンサス配列の全長はＰＳＰ
１−１（配列番号：２４および２５）、ＰＳＰ１−３
（配列番号：２６および２７）およびＰＳＰ１−４（配
列番号：２８および２９）と称し、５’コンセンサス配
列（配列番号：２２）、他の部分的ＯＳＰ１クローン、
ならびに各々配列番号：７、３および５を伴う整列化に
より生じた。ＰＳＰ１−１（配列番号：２５）の誘導ア
ミノ酸のイー・コリ（Ｅ.coli）ｈｔｒＡ（配列番号：
１４）への整列化は，ＢＥＳＴＦＩＴアルゴリズム（ウ
ィスコンシン大学ジェネティックス・コンピューター・
グループ）を用いて達成した。アミノ酸レベルで約55％
の類似性および33.5％の同一性が観察され、図１（上
部、ＰＳＰ１−１；下部、イー・コリ（Ｅ.coli）ｈｔ
ｒＡ）に示す。全てのセリンタンパク質溶解酵素に保存
される、臨界ヒスチジンおよびセリンモチーフＧＸＳＸ
Ｇは、ＰＳＰ１−１の各々１９８および３０４−３０８
のアミノ酸位置に存在し、太字で示す。アミノ酸数は整
列化した配列の左および右に示す。

【００６７】ギャップ・クリエーション（gap creatio
n）およびエクステンション・ペナルティー（extension
penalties）が各々5.0および0.3である、ＰＩＬＥＵＰ
およびＰＲＥＴＴＹアルゴリズム（ウィスコンシン大学
ジェネティックス・コンピューター・グループ）を用い
たＰＳＰ１−２、ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−３およびＰ
ＳＰ１−４のヌクレオチド配列比較は図２−１０に示
す。整列化の結果、整列のヌクレオチド１５４１の位置
で、ＰＳＰ１−２およびＰＳＰ１−１は２２５塩基対を
欠失し、ＰＳＰ１−４は１９５塩基対を欠失することが
示された。同一の整列内の１９４２のヌクレオチド位置
で、ＰＳＰ１−４はＰＳＰ１−２、ＰＳＰ１−１および
ＰＳＰ１−３に存在する９６塩基対を欠いている。各欠
失部位の接合部には、スプライス部位コンセンサス配列
ＡＧＧまたはＴＧＧ（太字で示す）があり、これらの交
換形態（alternate forms）は代替え的なスプライシン
グに因るものであることを示唆している。Mount,S.、Nu
cl.Acids.Res.10:458-472（1982）を参照のこと。１５
４１の位置での見かけのスプライシングにより、ＰＳＰ
１−３に存在する停止コドン（図２−１０で下線を付
す）が除去される。さらに、ＰＳＰ１−２およびＰＳＰ
１−１は整列の６７２の位置で単一のヌクレオチドが相
違する。ＰＳＰ１−２は、システインをコードするＴＧ
Ｃコドンを作るＴをこの位置で含有し、一方ＰＳＰ１−
１はシステインをコードするＣＧＣコドンを作るＣをこ
の位置で含有する。ＰＳ１−１（配列番号：２４）の上
記で引用したOhnoらの推定ヒトセリンプロテアーゼ（配
列番号：１７）に対するヌクレオチド配列比較により、
ＧＡＰアルゴリズムを用いると４９％の同一性が、ＢＥ
ＳＴＦＩＴアルゴリズムを用いると６５％の同一性が示
された（データは示していない）。ＰＳＰ１−１（配列
番号：２５）の誘導アミノ酸配列の、上記で引用したOh
noらのＤ８７２５８プロテアーゼ（配列番号：１８）に
対する整列化は、ＢＥＳＴＦＩＴアルゴリズムを用いて
達成し、図１１（上部、ＰＳＰ１−１；下部、Ohnoらの
Ｄ８７２５８プロテアーゼ）に示す。アミノ酸レベルで
約４６％の同一性が観察された。

【００６８】実施例３− ＰＳＰ１の組織分布ノーザン分析を実施して、ヒト組織内のＰＳＰ１ｍＲＮ
Ａの分布を測定した。ＰＳＰ１配列に対して指向する３
０塩基オリゴヌクレオチドプローブを使用した（５'−
ＡＴＧＣＴＧＡＡＣＡＴＣＧＧＧＡＡＡＧＣＴＴＧＧＴ
ＴＣＴＣＧ−３'）（配列番号：１９）。複数のヒト組
織（クロンッテック＃７７５０−１、＃７７６０−１、
および＃７７５５−１）からのｍＲＮＡを含有するノー
ザンブロットを、厳密な条件下でこのプローブとハイブ
リダイズした。約1.9キロ塩基の主要なバンドは、試験
した：心臓、脳、肺、胎盤、肝臓、骨格筋、腎臓、膵
臓、扁桃、尾状核、脳梁、海馬、黒質、視床下核、刺
傷、小脳、大脳皮質、髄質、脊髄、後頭極、前頭葉、側
頭極および被殻の全ての領域で検出された。ＰＳＰ１ｍ
ＲＮＡはまたアルツハイマー病の脳でも検出された。

【００６９】実施例４− ＰＳＰ１多型性の検出ＰＳＰ１オリゴヌクレオチド１ＡＦＣ、１ＡＦＴおよび
１ＡＲは、ＡｒｇをＣｙｓにアミノ酸変化させるヌクレ
オチド６７２（シチジンからチミン）での多型性を検出
するために設計した。対立遺伝子特異性オリゴヌクレオ
チド（ＡＳＯ）１ＡＦＣおよび１ＡＦＴは、これらの
３’末端塩基は別にして、同等であり、多型性をスクリ
ーニングするための特異性を提供する。１ＡＦＣ：ＣＡＴＣＣＧＧＣＡＴＴＧＴＴＡ
ＧＣＴＣＴＧＣ２２メル（配列番号：３２）１ＡＦＴ：ＣＡＴＣＣＧＧＣＡＴＴＧＴＴＡ
ＧＣＴＣＴＧＴ２２メル（配列番号：３３）１ＡＲ：ＣＡＡＴＡＧＣＴＧＣＡＴＣＡＧＴ
ＴＴＧＡＡＴＧ２３メル（配列番号：３４）オリゴヌクレオチド対（１ＡＦＣ＋１ＡＲ、または１Ａ
ＦＴ＋１ＡＲ）を以下の条件下でＰＣＲに使用した：９
４℃で４０秒、６０℃で３０秒、１ＵＫｌｅｎＴａｑ１
（ゲンパック・リミテッド）、５０ｍＭＴｒｉｓ−Ｃ
ｌｐＨ９.1、１６ｍＭ硫酸アンモニウム、3.5ｍＭＭ
ｇＣｌ₂、１５０μｇｍｌ^-1ＢＳＡおよび由来は未知の
ヒトゲノム２５ｎｇを含有する一回の反応で３５サイク
ル、。オリゴヌクレオチドの各対はゲノムＤＮＡの１２
のランダムサンプルに対して試験し、産生物を４％寒天
ゲル（ギブコ−ＢＲＬ）で電気泳動した。９５塩基対の
予期される産生物は、これらの個体が、この多型生のた
めに異型接合体であることを示す１２個のＤＮＡのうち
８個における両方のＡＳＯで認められた。１ＡＦＣオリ
ゴヌクレオチドのみで２個のＤＮＡを増幅し、この位置
でシスチジンを有する対立遺伝子に関して同型接合体で
ある。１ＡＦＴオリゴヌクレオチドのみで２個のＤＮＡ
を増幅し、この位置でチミンを有する対立遺伝子に関し
て同型接合体である。ＰＳＰ１オリゴヌクレオチド１Ｂ
ＦＣ、１ＢＦＴおよび１ＢＲは、ＡｌａをＶａｌにアミ
ノ酸変化させるヌクレオチド１４３５（シチジンからチ
ミン）での多型性を検出するために設計した。１ＢＦＣ：ＴＧＧＣＧＧＧＣＴＴＴＧＧＧＧ
ＧＧＣＡＴＴＣ２２メル（配列番号：３５）１ＢＦＴ：ＴＧＧＣＧＧＧＣＴＴＴＧＧＧＧ
ＧＧＣＡＴＴＴ２２メル（配列番号：３６）１ＢＲ：ＧＡＣＧＴＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＣ
ＧＧＡＧＧＴＣ２３メル（配列番号：３７）オリゴヌクレオチド対（１ＢＦＣ＋１ＢＲ、または１Ｂ
ＦＴ＋１ＢＲ）を以下の条件下でＰＣＲに使用した：９
４℃で４０秒、６７℃で３０秒、１ＵＫｌｅｎＴａｑ１
（ゲンパック・リミテッド）、５０ｍＭＴｒｉｓ−Ｃ
ｌｐＨ９.1、１６ｍＭ硫酸アンモニウム、3.5ｍＭＭ
ｇＣｌ₂、１５０μｇｍｌ^-1ＢＳＡおよび由来は未知の
ヒトゲノム２５ｎｇを含有する一回の反応で３５サイク
ル、。オリゴヌクレオチドの各対はゲノムＤＮＡの１２
のランダムサンプルに対して試験し、産生物を４％寒天
ゲル（ギブコ−ＢＲＬ）で電気泳動した。７５塩基対の
予期される産生物は、その他の３個体が、この位置で異
なる対立遺伝子を有することを示す１２個のサンプルの
うち９個で、１ＢＦＴＡＳＯを用いて認められた。

【００７０】実施例５− Ｄ８７２５８多型性の検出オリゴヌクレオチド２ＡＦＣ、２ＡＦＴおよび２ＡＲ
は、ＧｌｙをＶａｌにアミノ酸変化させるヌクレオチド
１３２５（グアニンからチミン）での多型性を検出する
ために設計した。２ＡＦＧ：ＧＡＴＡＣＣＣＣＡＧＣＡＧＡＡ
ＧＣＴＧＧ２０メル（配列番号：３８）２ＡＦＴ：ＧＡＴＡＣＣＣＣＡＧＣＡＧＡＡ
ＧＣＴＧＴ２０メル（配列番号：３９）２ＡＲ：ＧＣＴＧＡＣＡＴＣＡＴＴＧＧＣＧ
ＧＡＧＡＣ２１メル（配列番号：４０）オリゴヌクレオチド対（２ＡＦＣ＋２ＡＲ、または２Ａ
ＦＴ＋２ＡＲ）を以下の条件下でＰＣＲに使用した：９
４℃で４０秒、６２℃で３０秒、１ＵＫｌｅｎＴａｑ１
（ジンパック・リミテッド）、５０ｍＭＴｒｉｓ−Ｃ
ｌｐＨ９.1、１６ｍＭ硫酸アンモニウム、3.5ｍＭＭ
ｇＣｌ₂、１５０μｇｍｌ^-1ＢＳＡおよび由来は未知の
ヒトゲノム２５ｎｇを含有する一回の反応で３５サイク
ル、。オリゴヌクレオチドの各対はゲノムＤＮＡの１２
のランダムサンプルに対して試験し、産生物を４％寒天
ゲル（ギブコ−ＢＲＬ）で電気泳動した。２ＡＦＴＡ
ＳＯは約１０００塩基対の一つのバンドを生じた。予期
されるバンドは９０塩基対である。恐らく、より大きな
バンドの存在はオリゴヌクレオチド２ＡＲおよび２ＡＦ
Ｔによりフランキングされる領域のイントロンの存在に
因るものである。２ＡＦＴで増幅したサンプルの全てに
おいてバンドが観察され、このことはチミンを含有する
対立遺伝子が１２個体全てに存在することを示してい
る。本発明は、本発明の精神または本質的な属性から離
脱することなく、他の具体的な形態に具象化でき、従っ
て、特許請求の範囲のみらなず、明細書も、本発明の範
囲を示す参考とすべきである。

【００７１】

【配列表】配列番号：１ GGGACTCCCC CAAACCAATG TGGAATACAT TCAAACTGAT GCAGCTATTG ATTTTGGAAA 60 CTCTGGAGGT CCCCTGGTTA ACCTGGATGG GGAGGTGATT GGAGTGAACA CCATGAAGGT 120 CACAGCTGGA ATCTCCTTTG CCATCCCTTC TGATCGTCTT CGAGAGTTTC TGCATCGTGG 180 GGAAAAGAAG AATTCCTCCT CCGGAATCAG TGGGTCCCAG CGGCGCTACA TTGGGGTGAT 240 GATGCTGACC CTGAGTCCCA GCATCCTTGC TGAACTACAG CTTCGAGAAC CAAGCTTTCC 300 CGATGTTCAG CATGGTGTAC TCATCCATAA AGTCATCCTG GGCTCCCCTG CACACCGGGC 360 TGGTCTGCGG CCTGGTGATG TGATTTTGGC CATTGGGGAG CAGATGGTAC AAAATGCTGA 420 AGATGTTTAT GAAGCTGTTC GAACCCAATC CCAGTTGGCA GTGCAGATCC GGCGGGGACG 480 AGAAACACTG ACCTTATATG TGACCCCTGA GGTCACAGAA TGAATAGATC ACCAAGAGTA 540 TGAGGCTCCT GCTCTGATTT CCTCCTTGCC TTTCTGGCTG AGGTTCTGAG GGCACCGAGA 600 CAGAGGGTTA AATGAACCAG TGGGGGCAGG TCCCTCCAAC CACCAGCACT GACTCCTGGG 660 CTCTGAAGAA TCACAGAAAC ACTTTTTATA TAAAATAAAA TTATACCTAG CAACAAAAAA 720 AAAAAAAAAA AA 732

【００７２】配列番号：２ Gly Leu Pro Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile 1 5 10 15 Asp Phe Gly Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Asp Gly Glu Val 20 25 30 Ile Gly Val Asn Thr Met Lys Val Thr Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile 35 40 45 Pro Ser Asp Arg Leu Arg Glu Phe Leu His Arg Gly Glu Lys Lys Asn 50 55 60 Ser Ser Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gln Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met 65 70 75 80 Met Leu Thr Leu Ser Pro Ser Ile Leu Ala Glu Leu Gln Leu Arg Glu 85 90 95 Pro Ser Phe Pro Asp Val Gln His Gly Val Leu Ile His Lys Val Ile 100 105 110 Leu Gly Ser Pro Ala His Arg Ala Gly Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile 115 120 125 Leu Ala Ile Gly Glu Gln Met Val Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu 130 135 140 Ala Val Arg Thr Gln Ser Gln Leu Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg 145 150 155 160 Glu Thr Leu Thr Leu Tyr Val Thr Pro Glu Val Thr Glu 165 170

【００７３】配列番号：３ CCCAGTCTCT GGGCCCGGTT GTCTGTTGGG GTCACTGAAC CCCGAGCATG CCTGACGTCT 60 GGGACCCCGG GTCCCCGGGC ACAACTGACT GCGGTGACCC CAGATACCAG GACCCGGGAG 120 GCCTCAGAGA ACTCTGGAAC CCGTTCGCGC GCGTGGCTGG CGGTGGCGCT GGGCGCTGGG 180 GGGGCAGTGC TGTTGTTGTT GTGGGGCGGG GGTCGGGGTC CTCCGGCCGT CCTCGCCGCC 240 GTCCCTAGCC CGCCGCCCGC TTCTCCCCGG AGTCAGTACA ACTTCATCGC AGATGTGGTG 300 GAGAAGACAG CACCTGCCGT GGTCTATATC GAGATCCTGG ACCGGCACCC TTTCTTGGGC 360 CGCGAGGTCC CTATCTCGAA CGGCTCAGGA TTCGTGGTGG CTGCCGATGG GCTCATTGTC 420 ACCAACGCCC ATGTGGTGGC TGATCGGCGC AGAGTCCGTG TGAGACTGCT AAGCGGCGAC 480 ACGTATGAGG CCGTGGTCAC AGCTGTGGAT CCCGTGGCAG ACATCGCAAC GCTGAGGATT 540 CAGACTAAGG AGCCTCTCCC CACGCTGCCT CTGGGACGCT CAGCTGATGT CCGGCAAGGG 600 GAGTTTGTTG TTGCCATGGG AAGTCCCTTT GCACTGCAGA ACACGATCAC ATCCGGCATT 660 GTTAGCTCTG CTCAGCGTCC AGCCAGAGAC CTGGGACTCC CCCAAACCAA TGTGGAATAC 720 ATTCAAACTG ATGCAGCTAT TGATTTTGGA AACTCTGGAG GTCCCCTGGT TAACCTGGTG 780 AGTGAGACAT CCTTCCTTCC AAGAATCCCT GCCCCAGGTC AGTGTGGGAA GGGTAGGTTT 840 CCCCTAATTC AAGGATGTTT GGTCAAGTTT CTGAGCAGTT CTTTGTTGGC TATCTCTCAA 900 TATCCAACCA GATCTCCCCA ACACTTGCTG GTACTTTTGT TCGGGTGCCC CCATCCCCTA 960 CTATTTGTTT AGGCTAGGGA ACTGGGGGCT GTATCCCTGC AGGATGGGGA GGTGATTGGA 1020 GTGAACACCA TGAAGGTCAC AGCTGGAATC TCCTTTGCCA TCCCTTCTGA TCGTCTTCGA 1080 GAGTTTCTGC ATCGTGGGGA AAAGAAGAAT TCCTCCTCCG GAATCAGTGG GTCCCAGCGG 1140 CGCTACATTG GGGTGATGAT GCTGACCCTG AGTCCCAGCA TCCTTGCTGA ACTACAGCTT 1200 CGAGAACCAA GCTTTCCCGA TGTTCAGCAT GGTGTACTCA TCCATAAAGT CATCCTGGGC 1260 TCCCCTGCAC ACCGGGCTGG TCTGCGGCCT GGTGATGTGA TTTTGGCCAT TGGGGAGCAG 1320 ATGGTACAAA ATGCTGAAGA TGTTTATGAA GCTGTTCGAA CCCAATCCCA GTTGGCAGTG 1380 CAGATCCGGC GGGGACGAGA AACACTGACC TTATATGTGA CCCCTGAGGT CACAGAATGA 1440 ATAGATCACC AAGAGTATGA GGCTCCTGCT CTGATTTCCT CCTTGCCTTT CTGGCTGAGG 1500 TTCTGAGGGC ACCGAGACAG AGGGTTAAAT GAACCAGTGG GGGCAGGTCC CTCCAACCAC 1560 CAGCACTGAC TCCTGGGCTC TGAAGAATCA CAGAAACACT TTTTATATAA AATAAAATTA 1620 TACCTAGCAA CATATTATAG TAAAAAATGA GGTGGGAGGG CTGGATCTTT TCCCCCACCA 1680 AAAGGCTAGA GGTAAAGCTG TATCCCCCTA AACTTAGGGG AGATACTGGA GCTGACCATC 1740 CTGACCTCCT ATTAAAGAAA ATGAGCTGCT GAAAAAAAAA AAAAAAA 1787

【００７４】配列番号：４ Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val Gly Val Thr Glu Pro Arg Ala 1 5 10 15 Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro Arg Ala Gln Leu Thr Ala Val 20 25 30 Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala Ser Glu Asn Ser Gly Thr Arg 35 40 45 Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu Gly Ala Gly Gly Ala Val Leu 50 55 60 Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly Pro Pro Ala Val Leu Ala Ala 65 70 75 80 Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro Arg Ser Gln Tyr Asn Phe Ile 85 90 95 Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro Ala Val Val Tyr Ile Glu Ile 100 105 110 Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg Glu Val Pro Ile Ser Asn Gly 115 120 125 Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly Leu Ile Val Thr Asn Ala His 130 135 140 Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg Val Arg Leu Leu Ser Gly Asp 145 150 155 160 Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val Asp Pro Val Ala Asp Ile Ala 165 170 175 Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro Leu Pro Thr Leu Pro Leu Gly 180 185 190 Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu Phe Val Val Ala Met Gly Ser 195 200 205 Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr Ser Gly Ile Val Ser Ser Ala 210 215 220 Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu Pro Gln Thr Asn Val Glu Tyr 225 230 235 240 Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe Gly Asn Ser Gly Gly Pro Leu 245 250 255 Val Asn Leu Val Ser Glu Thr Ser Phe Leu Pro Arg Ile Pro Ala Pro 260 265 270 Gly Gln Cys Gly Lys Gly Arg Phe Pro Leu Ile Gln Gly Cys Leu Val 275 280 285 Lys Phe Leu Ser Ser Ser Leu Leu Ala Ile Ser Gln Tyr Pro Thr Arg 290 295 300 Ser Pro Gln His Leu Leu Val Leu Leu Phe Gly Cys Pro His Pro Leu 305 310 315 320 Leu Phe Val

【００７５】配列番号：５ CTTCGGGCAT GGCGGGCTTT GGGGGGCATT CGCTGGGGGA GGAGACCCCG TTTGACCCCT 60 GACCTCCGGG CCCTGCTGAC GTCAGGAACT TCTGACCCCC GGGCCCGAGT GACTTATGGG 120 ACCCCCAGTC TCTGGGCCCG GTTGTCTGTT GGGGTCACTG AACCCCGAGC ATGCCTGACG 180 TCTGGGACCC CGGGTCCCCG GGCACAACTG ACTGCGGTGA CCCCAGATAC CAGGACCCGG 240 GAGGCCTCAG AGAACTCTGG AACCCGTTCG CGCGCGTGGC TGGCGGTGGC GCTGGGCGCT 300 GGGGGGGCAG TGCTGTTGTT GTTGTGGGGC GGGGGTCGGG GTCCTCCGGC CGTCCTCGCC 360 GCCGTCCCTA GCCCGCCGCC CGCTTCTCCC CGGAGTCAGT ACAACTTCAT CGCAGATGTG 420 GTGGAGAAGA CAGCACCTGC CGTGGTCTAT ATCGAGATCC TGGACCGGCA CCCTTTCTTG 480 GGCCGCGAGG TCCCTATCTC GAACGGCTCA GGATTCGTGG TGGCTGCCGA TGGGCTCATT 540 GTCACCAACG CCCATGTGGT GGCTGATCGG CGCAGAGTCC GTGTGAGACT GCTAAGCGGC 600 GACACGTATG AGGCCGTGGT CACAGCTGTG GATCCCGTGG CAGACATCGC AACGCTGAGG 660 ATTCAGACTA AGGAGCCTCT CCCCACGCTG CCTCTGGGAC GCTCAGCTGA TGTCCGGCAA 720 GGGGAGTTTG TTGTTGCCAT GGGAAGTCCC TTTGCACTGC AGAACACGAT CACATCCGGC 780 ATTGTTAGCT CTGCTCAGCG TCCAGCCAGA GACCTGGGAC TCCCCCAAAC CAATGTGGAA 840 TACATTCAAA CTGATGCAGC TATTGATTTT GGAAACTCTG GAGGTCCCCT GGTTAACCTG 900 GCTAGGGAAC TGGGGGCTGT ATCCCTGCAG GATGGGGAGG TGATTGGAGT GAACACCATG 960 AAGGTCACAG CTGGAATCTC CTTTGCCATC CCTTCTGATC GTCTTCGAGA GTTTCTGCAT 1020 CGTGGGGAAA AGAAGAATTC CTCCTCCGGA ATCAGTGGGT CCCAGCGGCG CTACATTGGG 1080 GTGATGATGC TGACCCTGAG TCCCAGGGCT GGTCTGCGGC CTGGTGATGT GATTTTGGCC 1140 ATTGGGGAGC AGATGGTACA AAATGCTGAA GATGTTTATG AAGCTGTTCG AACCCAATCC 1200 CAGTTGGCAG TGCAGATCCG GCGGGGACGA GAAACACTGA CCTTATATGT GACCCCTGAG 1260 GTCACAGAAT GAATAGATCA CCAAGAGTAT GAGGCTCCTG CTCTGATTTC CTCCTTGCCT 1320 TTCTGGCTGA GGTTCTGAGG GCACCGAGAC AGAGGGTTAA ATGAACCAGT GGGGGCAGGT 1380 CCCTCCAACC ACCAGCACTG ACTCCTGGGC TCTGAAGAAT CACAGAAACA CTTTTTATAT 1440 AAAATAAAAT TATACCTAGC AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA 1500 AAA 1503

【００７６】配列番号：６ Leu Arg Ala Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Arg Trp Gly Arg Arg Pro 1 5 10 15 Arg Leu Thr Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp 20 25 30 Pro Arg Ala Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu 35 40 45 Ser Val Gly Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro 50 55 60 Gly Pro Arg Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg 65 70 75 80 Glu Ala Ser Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val 85 90 95 Ala Leu Gly Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly 100 105 110 Arg Gly Pro Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser P Met Val Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu Ala Val Arg Thr Gln Ser 385 390 395 400 Gln Leu Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg Glu Thr Leu Thr Leu Tyr 405 410 415 Val Thr Pro Glu Val Thr Glu 420

【００７７】配列番号：７ GGCCGGAAGG GCTAGCGGTC CCAGCATACC CCGCGGCCCC TTGGGCCGTC TCACAACTCG 60 CGTCCGGCGG AGACCACAAT TCCCGGCATT CGTGGGGCAT GGAGGAGTCG GCCTCCCGGA 120 ATCCTGGTCC CGGCGTGCAC TTCTGAAGGA CTTCAGGTAC CGGCGTGCCC CGCGTCCTAC 180 TGTCCGCCTG CTCGCGTCCT GGGTGCCGCC TCTGAGTAGG GCGGGCGAGG AGGCAGCCAA 240 GGCGGAGCTG ATG GCT GCG CCG AGG GCG GGG CGG GGT GCA GGC TGG AGC 289 Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser 1 5 10 CTT CGG GCA TGG CGG GCT TTG GGG GGC ATT TGC TGG GGG AGG AGA CCC 337 Leu Arg Ala Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Cys Trp Gly Arg Arg Pro 15 20 25 CGT TTG ACC CCT GAC CTC CGG GCC CTG CTG ACG TCA GGA ACT TCT GAC 385 Arg Leu Thr Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp 30 35 40 45 CCC CGG GCC CGA GTG ACT TAT GGG ACC CCC AGT CTC TGG GCC CGG TTG 433 Pro Arg Ala Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu 50 55 60 TCT GTT GGG GTC ACT GAA CCC CGA GCA TGC CTG ACG TCT GGG ACC CCG 481 Ser Val Gly Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro 65 70 75 GGT CCC CGG GCA CAA CTG ACT GCG GTG ACC CCA GAT ACC AGG ACC CGG 529 Gly Pro Arg Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg 80 85 90 GAG GCC TCA GAG AAC TCT GGA ACC CGT TCG CGC GCG TGG CTG GCG GTG 577 Glu Ala Ser Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val 95 100 105 GCG CTG GGC GCT GGG GGG GCA GTG CTG TTG TTG TTG TGG GGC GGG GGT 625 Ala Leu Gly Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly 110 115 120 125 CGG GGT CCT CCG GCC GTC CTC GCC GCC GTC CCT AGC CCG CCG CCC GCT 673 Arg Gly Pro Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala 130 135 140 TCT CCC CGG AGT CAG TAC AAC TTC ATC GCA GAT GTG GTG GAG AAG ACA 721 Ser Pro Arg Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr 145 150 155 GCA CCT GCC GTG GTC TAT ATC GAG ATC CTG GAC CGG CAC CCT TTC TTG 769 Ala Pro Ala Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu 160 165 170 GGC CGC GAG GTC CCT ATC TCG AAC GGC TCA GGA TTC GTG GTG GCT GCC 817 Gly Arg Glu Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala 175 180 185 GAT GGG CTC ATT GTC ACC AAC GCC CAT GTG GTG GCT GAT CGG CGC AGA 865 Asp Gly Leu Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg 190 195 200 205 GTC CGT GTG AGA CTG CTA AGC GGC GAC ACG TAT GAG GCC GTG GTC ACA 913 Val Arg Val Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr 210 215 220 GCT GTG GAT CCC GTG GCA GAC ATC GCA ACG CTG AGG ATT CAG ACT AAG 961 Ala Val Asp Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys 225 230 235 GAG CCT CTC CCC ACG CTG CCT CTG GGA CGC TCA GCT GAT GTC CGG CAA 1009 Glu Pro Leu Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln 240 245 250 GGG GAG TTT GTT GTT GCC ATG GGA AGT CCC TTT GCA CTG CAG AAC ACG 1057 Gly Glu Phe Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr 255 260 265 ATC ACA TCC GGC ATT GTT AGC TCT GCT CAG CGT CCA GCC AGA GAC CTG 1105 Ile Thr Ser Gly Ile Val Ser Ser Ala Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu 270 275 280 285 GGA CTC CCC CAA ACC AAT GTG GAA TAC ATT CAA ACT GAT GCA GCT ATT 1153 Gly Leu Pro Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile 290 295 300 GAT TTT GGA AAC TCT GGA GGT CCC CTG GTT AAC CTG GAT GGG GAG GTG 1201 Asp Phe Gly Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Asp Gly Glu Val 305 310 315 ATT GGA GTG AAC ACC ATG AAG GTC ACA GCT GGA ATC TCC TTT GCC ATC 1249 Ile Gly Val Asn Thr Met Lys Val Thr Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile 320 325 330 CCT TCT GAT CGT CTT CGA GAG TTT CTG CAT CGT GGG GAA AAG AAG AAT 1297 Pro Ser Asp Arg Leu Arg Glu Phe Leu His Arg Gly Glu Lys Lys Asn 335 340 345 TCC TCC TCC GGA ATC AGT GGG TCC CAG CGG CGC TAC ATT GGG GTG ATG 1345 Ser Ser Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gln Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met 350 355 360 365 ATG CTG ACC CTG AGT CCC AGC ATC CTT GCT GAA CTA CAG CTT CGA GAA 1393 Met Leu Thr Leu Ser Pro Ser Ile Leu Ala Glu Leu Gln Leu Arg Glu 370 375 380 CCA AGC TTT CCC GAT GTT CAG CAT GGT GTA CTC ATC CAT AAA GTC ATC 1441 Pro Ser Phe Pro Asp Val Gln His Gly Val Leu Ile His Lys Val Ile 385 390 395 CTG GGC TCC CCT GCA CAC CGG GCT GGT CTG CGG CCT GGT GAT GTG ATT 1489 Leu Gly Ser Pro Ala His Arg Ala Gly Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile 400 405 410 TTG GCC ATT GGG GAG CAG ATG GTA CAA AAT GCT GAA GAT GTT TAT GAA 1537 Leu Ala Ile Gly Glu Gln Met Val Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu 415 420 425 GCT GTT CGA ACC CAA TCC CAG TTG GCA GTG CAG ATC CGG CGG GGA CGA 1585 Ala Val Arg Thr Gln Ser Gln Leu Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg 430 435 440 445 GAA ACA CTG ACC TTA TAT GTG ACC CCT GAG GTC ACA GAA TGAATAGATC ACC 1637 Glu Thr Leu Thr Leu Tyr Val Thr Pro Glu Val Thr Glu 450 455 AAGAGTATGA GGCTCCTGCT CTGATTTCCT CCTTGCCTTT CTGGCTGAGG TTCTGAGGGC 1697 ACCGAGACAG AGGGTTAAAT GAACCAGTGG GGGCAGGTCC CTCCAACCAC CAGCACTGAC 1757 TCCTGGGCTC TGAAGAATCA CAGAAACACT TTTTATATAA AATAAAATTA TACCTAGCAA 1817 CATAAAAAAA AAAAAAAA 1835

【００７８】配列番号：８ Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg Ala 1 5 10 15 Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Cys Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu Thr 20 25 30 Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg Ala 35 40 45 Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val Gly 50 55 60 Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro Arg 65 70 75 80 Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala Ser 85 90 95 Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu Gly 100 105 110 Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly Pro 115 120 125 Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro Arg 130 135 140 Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro Ala 145 150 155 160 Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg Glu 165 170 175 Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly Leu 180 185 190 Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg Val 195 200 205 Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val Asp 210 215 220 Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro Leu 225 230 235 240 Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu Phe 245 250 255 Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr Ser 260 265 270 Gly Ile Val Ser Ser Ala Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu Pro 275 280 285 Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe Gly 290 295 300 Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Asp Gly Glu Val Ile Gly Val 305 310 315 320 Asn Thr Met Lys Val Thr Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile Pro Ser Asp 325 330 335 Arg Leu Arg Glu Phe Leu His Arg Gly Glu Lys Lys Asn Ser Ser Ser 340 345 350 Gly Ile Ser Gly Ser Gln Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met Met Leu Thr 355 360 365 Leu Ser Pro Ser Ile Leu Ala Glu Leu Gln Leu Arg Glu Pro Ser Phe 370 375 380 Pro Asp Val Gln His Gly Val Leu Ile His Lys Val Ile Leu Gly Ser 385 390 395 400 Pro Ala His Arg Ala Gly Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile Leu Ala Ile 405 410 415 Gly Glu Gln Met Val Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu Ala Val Arg 420 425 430 Thr Gln Ser Gln Leu Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg Glu Thr Leu 435 440 445 Thr Leu Tyr Val Thr Pro Glu Val Thr Glu 450 455

【００７９】配列番号：９ TGGGACAGGC AGCTCCGGGG TCCGCGGTTT CACATCGGAA ACAAAACAGC GGCTGGTCTG 60 GAAGGAACCT GAGCTACGAG CCGCGGCGGC AGCGGGGCGG CGGGGAAGCG TATACCTAAT 120 CTGGGAGCCT GCAAGTGACA ACAGCCTTTG CGGTCCTTAG ACAGCTTGGC CTGGAGGAGA 180 ACACATGAAA GAAAGAACCT CAAGAGGCTT TGTTTTCTGT GAAACAGTAT TTCTATACAG 240 TTGCTCCAAT GACAGAGTTA CCTGCACCGT TGTCCTACTT CCAGAATGCA CAGATGTCTG 300 AGGACAACCA CCTGAGCAAT ACTGTACGTA GCCAGAATGA CAATAGAGAA CGGCAGGAGC 360 ACAACGACAG ACGGAGCCTT GGCCACCCTG AGCCATTATC TAATGGACGA CCCCAGGGTA 420 ACTCCCGGCA GGTGGTGGAG CAAGATGAGG AAGAAGATGA GGAGCTGACA TTGAAATATG 480 GCGCCAAGCA TGTGATCATG CTCTTTGTCC CTGTGACTCT CTGCATGGTG GTGGTCGTGG 540 CTACCATTAA GTCAGTCAGC TTTTATACCC GGAAGGATGG GCAGCTAATC TATACCCCAT 600 TCACAGAAGA TACCGAGACT GTGGGCCAGA GAGCCCTGCA CTCAATTCTG AATGCTGCCA 660 TCATGATCAG TGTCATTGTT GTCATGACTA TCCTCCTGGT GGTTCTGTAT AAATACAGGT 720 GCTATAAGGT CATCCATGCC TGGCTTATTA TATCATCTCT ATTGTTGCTG TTCTTTTTTT 780 CATTCATTTA CTTGGGGGAA GTGTTTAAAA CCTATAACGT TGCTGTGGAC TACATTACTG 840 TTGCACTCCT GATCTGGAAT TTTGGTGTGG TGGGAATGAT TTCCATTCAC TGGAAAGGTC 900 CACTTCGACT CCAGCAGGCA TATCTCATTA TGATTAGTGC CCTCATGGCC CTGGTGTTTA 960 TCAAGTACCT CCCTGAATGG ACTGCGTGGC TCATCTTGGC TGTGATTTCA GTATATGATT 1020 TAGTGGCTGT TTTGTGTCCG AAAGGTCCAC TTCGTATGCT GGTTGAAACA GCTCAGGAGA 1080 GAAATGAAAC GCTTTTTCCA GCTCTCATTT ACTCCTCAAC AATGGTGTGG TTGGTGAATA 1140 TGGCAGAAGG AGACCCGGAA GCTCAAAGGA GAGTATCCAA AAATTCCAAG TATAATGCAG 1200 AAAGCACAGA AAGGGAGTCA CAAGACACTG TTGCAGAGAA TGATGATGGC GGGTTCAGTG 1260 AGGAATGGGA AGCCCAGAGG GACAGTCATC TAGGGCCTCA TCGCTCTACA CCTGAGTCAC 1320 GAGCTGCTGT CCAGGAACTT TCCAGCAGTA TCCTCGCTGG TGAAGACCCA GAGGAAAGGG 1380 GAGTAAAACT TGGATTGGGA GATTTCATTT TCTACAGTGT TCTGGTTGGT AAAGCCTCAG 1440 CAACAGCCAG TGGAGACTGG AACACAACCA TAGCCTGTTT CGTAGCCATA TTAATTGGTT 1500 TGTGCCTTAC ATTATTACTC CTTGCCATTT TCAAGAAAGC ATTGCCAGCT CTTCCAATCT 1560 CCATCACCTT TGGGCTTGTT TTCTACTTTG CCACAGATTA TCTTGTACAG CCTTTTATGG 1620 ACCAATTAGC ATTCCATCAA TTTTATATCT AGCATATTTG CGGTTAGAAT CCCATGGATG 1680 TTTCTTCTTT GACTATAACC AAATCTGGGG AGGACAAAGG TGATTTTCCT GTGTCCACAT 1740 CTAACAAAGT CAAGATTCCC GGCTGGACTT TTGCAGCTTC CTTCCAAGTC TTCCTGACCA 1800 CCTTGCACTA TTGGACTTTG GAAGGAGGTG CCTATAGAAA ACGATTTTGA ACATACTTCA 1860 TCGCAGTGGA CTGTGTCCCT CGGTGCAGAA ACTACCAGAT TTGAGGGACG AGGTCAAGGA 1920 GATATGATAG GCCCGGAAGT TGCTGTGCCC CATCAGCAGC TTGACGCGTG GTCACAGGAC 1980 GATTTCACTG ACACTGCGAA CTCTCAGGAC TACCGGTTAC CAAGAGGTTA GGTGAAGTGG 2040 TTTAAACCAA ACGGAACTCT TCATCTTAAA CTACACGTTG AAAATCAACC CAATAATTCT 2100 GTATTAACTG AATTCTGAAC TTTTCAGGAG GTACTGTGAG GAAGAGCAGG CACCAGCAGC 2160 AGAATGGGGA ATGGAGAGGT GGGCAGGGGT TCCAGCTTCC CTTTGATTTT TTGCTGCAGA 2220 CTCATCCTTT TTAAATGAGA CTTGTTTTCC CCTCTCTTTG AGTCAAGTCA AATATGTAGA 2280 TTGCCTTTGG CAATTCTTCT TCTCAAGCAC TGACACTCAT TACCGTCTGT GATTGCCATT 2340 TCTTCCCAAG GCCAGTCTGA ACCTGAGGTT GCTTTATCCT AAAAGTTTTA ACCTCAGGTT 2400 CCAAATTCAG TAAATTTTGG AAACAGTACA GCTATTTCTC ATCAATTCTC TATCATGTTG 2460 AAGTCAAATT TGGATTTTCC ACCAAATTCT GAATTTGTAG ACATACTTGT ACGCTCACTT 2520 GCCCCCAGAT GCCTCCTCTG TCCTCATTCT TCTCTCCCAC ACAAGCAGTC TTTTTCTACA 2580 GCCAGTAAGG CAGCTCTGTC RTGGTAGCAG ATGGTCCCAT TATTCTAGGG TCTTACTCTT 2640 TGTATGATGA AAAGAATGTG TTATGAATCG GTGCTGTCAG CCCTGCTGTC AGACCTTCTT 2700 CCACAGCAAA TGAGATGTAT GCCCAAAGCG GTAGAATTAA AGAAGAGTAA AATGGCTGTT 2760 GAAG 2764

【００８０】配列番号：１０ Met Thr Glu Leu Pro Ala Pro Leu Ser Tyr Phe Gln Asn Ala Gln Met 1 5 10 15 Ser Glu Asp Asn His Leu Ser Asn Thr Val Arg Ser Gln Asn Asp Asn 20 25 30 Arg Glu Arg Gln Glu His Asn Asp Arg Arg Ser Leu Gly His Pro Glu 35 40 45 Pro Leu Ser Asn Gly Arg Pro Gln Gly Asn Ser Arg Gln Val Val Glu 50 55 60 Gln Asp Glu Glu Glu Asp Glu Glu Leu Thr Leu Lys Tyr Gly Ala Lys 65 70 75 80 His Val Ile Met Leu Phe Val Pro Val Thr Leu Cys Met Val Val Val 85 90 95 Val Ala Thr Ile Lys Ser Val Ser Phe Tyr Thr Arg Lys Asp Gly Gln 100 105 110 Leu Ile Tyr Thr Pro Phe Thr Glu Asp Thr Glu Thr Val Gly Gln Arg 115 120 125 Ala Leu His Ser Ile Leu Asn Ala Ala Ile Met Ile Ser Val Ile Val 130 135 140 Val Met Thr Ile Leu Leu Val Val Leu Tyr Lys Tyr Arg Cys Tyr Lys 145 150 155 160 Val Ile His Ala Trp Leu Ile Ile Ser Ser Leu Leu Leu Leu Phe Phe 165 170 175 Phe Ser Phe Ile Tyr Leu Gly Glu Val Phe Lys Thr Tyr Asn Val Ala 180 185 190 Val Asp Tyr Ile Thr Val Ala Leu Leu Ile Trp Asn Phe Gly Val Val 195 200 205 Gly Met Ile Ser Ile His Trp Lys Gly Pro Leu Arg Leu Gln Gln Ala 210 215 220 Tyr Leu Ile Met Ile Ser Ala Leu Met Ala Leu Val Phe Ile Lys Tyr 225 230 235 240 Leu Pro Glu Trp Thr Ala Trp Leu Ile Leu Ala Val Ile Ser Val Tyr 245 250 255 Asp Leu Val Ala Val Leu Cys Pro Lys Gly Pro Leu Arg Met Leu Val 260 265 270 Glu Thr Ala Gln Glu Arg Asn Glu Thr Leu Phe Pro Ala Leu Ile Tyr 275 280 285 Ser Ser Thr Met Val Trp Leu Val Asn Met Ala Glu Gly Asp Pro Glu 290 295 300 Ala Gln Arg Arg Val Ser Lys Asn Ser Lys Tyr Asn Ala Glu Ser Thr 305 310 315 320 Glu Arg Glu Ser Gln Asp Thr Val Ala Glu Asn Asp Asp Gly Gly Phe 325 330 335 Ser Glu Glu Trp Glu Ala Gln Arg Asp Ser His Leu Gly Pro His Arg 340 345 350 Ser Thr Pro Glu Ser Arg Ala Ala Val Gln Glu Leu Ser Ser Ser Ile 355 360 365 Leu Ala Gly Glu Asp Pro Glu Glu Arg Gly Val Lys Leu Gly Leu Gly 370 375 380 Asp Phe Ile Phe Tyr Ser Val Leu Val Gly Lys Ala Ser Ala Thr Ala 385 390 395 400 Ser Gly Asp Trp Asn Thr Thr Ile Ala Cys Phe Val Ala Ile Leu Ile 405 410 415 Gly Leu Cys Leu Thr Leu Leu Leu Leu Ala Ile Phe Lys Lys Ala Leu 420 425 430 Pro Ala Leu Pro Ile Ser Ile Thr Phe Gly Leu Val Phe Tyr Phe Ala 435 440 445 Thr Asp Tyr Leu Val Gln Pro Phe Met Asp Gln Leu Ala Phe His Gln 450 455 460 Phe Tyr Ile 465

【００８１】配列番号：１１ CGGAATTCCG TATGCTGGTT GAAACA 26

【００８２】配列番号：１２ CGGGATCCTC AGGCTACGAA ACAGGCTAT 29

【００８３】配列番号：１３ TATATCAGCG GTATGACCGA CCTCTATGCG TGGGATGAAT ACCGACGTCT GATGGCCGTA 60 GAACAATAAC CAGGCTTTTG TAAAGACGAA CAATAAATTT TTACCTTTTG CAGAAACTTT 120 AGTTCGGAAC TTCAGGCTAT AAAACGAATC TGAAGAACAC AGCAATTTTG CGTTATCTGT 180 TAATCGAGAC TGAAATACAT GAAAAAAACC ACATTAGCAC TGAGTCGACT GGCTCTGAGT 240 TTAGGTTTGG CGTTATCTCC GCTCTCTGCA ACGGCGGCTG AGACTTCTTC AGCAACGACA 300 GCCCAGCAGA TGCCAAGCCT TGCACCGATG CTCGAAAAGG TGATGCCTTC AGTGGTCAGC 360 ATTAACGTAG AAGGTAGCAC AACCGTTAAT ACGCCGCGTA TGCCGCGTAA TTTCCAGCAG 420 TTCTTCGGTG ATGATTCTCC GTTCTGCCAG GAAGGTTCTC CGTTCCAGAG CTCTCCGTTC 480 TGCCAGGGTG GCCAGGGCGG TAATGGTGGC GGCCAGCAAC AGAAATTCAT GGCGCTGGGT 540 TCCGGCGTCA TCATTGATGC CGATAAAGGC TATGTCGTCA CCAACAACCA CGTTGTTGAT 600 AACGCGACGG TCATTAAAGT TCAACTGAGC GATGGCCGTA AGTTCGACGC GAAGATGGTT 660 GGCAAAGATC CGCGCTCTGA TATCGCGCTG ATCCAAATCC AGAACCCGAA AAACCTGACC 720 GCAATTAAGA TGGCGGATTC TGATGCACTG CGCGTGGGTG ATTACACCGT AGGGATTGGT 780 AACCCGTTTG GTCTGGGCGA GACGGTAACT TCCGGGATTG TCTCTGCGCT GGGGCGTAGC 840 GGCCTGAATG CCGAAAACTA CGAAAACTTC ATCCAGACCG ATGCAGCGAT CAACCGTGGT 900 AACTCCGGTG GTGCGCTGGT TAACCTGAAC GGCGAACTGA TCGGTATCAA CACCGCGATC 960 CTCGCACCGG ACGGCGGCAA CATCGGTATC GGTTTTGCTA TCCCGAGTAA CATGGTGAAA 1020 AACCTGACCT CGCAGATGGT GGAATACGGC CAGGTGAAAC GCGGTGAGCT GGGTATTATG 1080 GGGACTGAGC TGAACTCCGA ACTGGCGAAA GCGATGAAAG TTGACGCCCA GCGCGGTGCT 1140 TTCGTAAGCC AGGTTCTGCC TAATTCCTCC GCTGCAAAAG CGGGCATTAA AGCGGGTGAT 1200 GTGATCACCT CACTGAACGG TAAGCCGATC AGCAGCTTTG CCGCACTGCG TGCTCAGGTG 1260 GGTACTATGC CGGTAGGCAG CAAACTGACC CTGGGCTTAC TGCGCGACGG TAAGCAGGTT 1320 AACGTGAACC TGGAACTGCA GCAGAGCAGC CAGAATCAGG TTGATTCCAG CTCCATCTTC 1380 AACGGCATTG AAGGCGCTGA GATGAGCAAC AAAGGCAAAG ATCAGGGCGT GGTAGTGAAC 1440 AACGTGAAAA CGGGCACTCC GGCTGCGCAG ATCGGCCTGA AGAAAGGTGA TGTGATTATT 1500 GGCGCGAACC AGCAGGCAGT GAAAAACATC GCTGAACTGC GTAAAGTTCT CGACAGCAAA 1560 CCGTCTGTGC TGGCACTCAA CATTCAGCGC GGCGACCGCC ATCTACCTGT TAATGCAGTA 1620 ATCTCCCTCA ACCCCTTCCT GAAAACGGGA AGGGGTTCTC CTTACAATCT GTGAACTTCA 1680 CCACAACTCC ATACATCTTC ATCATCCTTT AGGCATTTGC ACAATGCCGT ACGTTACGTA 1740 CTTCCTTATG CTAAGCCGTG CATAACGGAG GACTTATGGC TGGCTGGCAT CTTGATACCA 1800 AAATGGCGCA GGATATCGTG GCACGTACCA TGCGCATCAT CGATACCAAT ATCA 1854

【００８４】配列番号：１４ Met Lys Lys Thr Thr Leu Ala Leu Ser Arg Leu Ala Leu Ser Leu Gly 1 5 10 15 Leu Ala Leu Ser Pro Leu Ser Ala Thr Ala Ala Glu Thr Ser Ser Ala 20 25 30 Thr Thr Ala Gln Gln Met Pro Ser Leu Ala Pro Met Leu Glu Lys Val 35 40 45 Met Pro Ser Val Val Ser Ile Asn Val Glu Gly Ser Thr Thr Val Asn 50 55 60 Thr Pro Arg Met Pro Arg Asn Phe Gln Gln Phe Phe Gly Asp Asp Ser 65 70 75 80 Pro Phe Cys Gln Glu Gly Ser Pro Phe Gln Ser Ser Pro Phe Cys Gln 85 90 95 Gly Gly Gln Gly Gly Asn Gly Gly Gly Gln Gln Gln Lys Phe Met Ala 100 105 110 Leu Gly Ser Gly Val Ile Ile Asp Ala Asp Lys Gly Tyr Val Val Thr 115 120 125 Asn Asn His Val Val Asp Asn Ala Thr Val Ile Lys Val Gln Leu Ser 130 135 140 Asp Gly Arg Lys Phe Asp Ala Lys Met Val Gly Lys Asp Pro Arg Ser 145 150 155 160 Asp Ile Ala Leu Ile Gln Ile Gln Asn Pro Lys Asn Leu Thr Ala Ile 165 170 175 Lys Met Ala Asp Ser Asp Ala Leu Arg Val Gly Asp Tyr Thr Val Gly 180 185 190 Ile Gly Asn Pro Phe Gly Leu Gly Glu Thr Val Thr Ser Gly Ile Val 195 200 205 Ser Ala Leu Gly Arg Ser Gly Leu Asn Ala Glu Asn Tyr Glu Asn Phe 210 215 220 Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asn Arg Gly Asn Ser Gly Gly Ala Leu 225 230 235 240 Val Asn Leu Asn Gly Glu Leu Ile Gly Ile Asn Thr Ala Ile Leu Ala 245 250 255 Pro Asp Gly Gly Asn Ile Gly Ile Gly Phe Ala Ile Pro Ser Asn Met 260 265 270 Val Lys Asn Leu Thr Ser Gln Met Val Glu Tyr Gly Gln Val Lys Arg 275 280 285 Gly Glu Leu Gly Ile Met Gly Thr Glu Leu Asn Ser Glu Leu Ala Lys 290 295 300 Ala Met Lys Val Asp Ala Gln Arg Gly Ala Phe Val Ser Gln Val Leu 305 310 315 320 Pro Asn Ser Ser Ala Ala Lys Ala Gly Ile Lys Ala Gly Asp Val Ile 325 330 335 Thr Ser Leu Asn Gly Lys Pro Ile Ser Ser Phe Ala Ala Leu Arg Ala 340 345 350 Gln Val Gly Thr Met Pro Val Gly Ser Lys Leu Thr Leu Gly Leu Leu 355 360 365 Arg Asp Gly Lys Gln Val Asn Val Asn Leu Glu Leu Gln Gln Ser Ser 370 375 380 Gln Asn Gln Val Asp Ser Ser Ser Ile Phe Asn Gly Ile Glu Gly Ala 385 390 395 400 Glu Met Ser Asn Lys Gly Lys Asp Gln Gly Val Val Val Asn Asn Val 405 410 415 Lys Thr Gly Thr Pro Ala Ala Gln Ile Gly Leu Lys Lys Gly Asp Val 420 425 430 Ile Ile Gly Ala Asn Gln Gln Ala Val Lys Asn Ile Ala Glu Leu Arg 435 440 445 Lys Val Leu Asp Ser Lys Pro Ser Val Leu Ala Leu Asn Ile Gln Arg 450 455 460 Gly Asp Arg His Leu Pro Val Asn Ala Val Ile Ser Leu Asn Pro Phe 465 470 475 480 Leu Lys Thr Gly Arg Gly Ser Pro Tyr Asn Leu 485 490

【００８５】配列番号：１５ CTGGATGGGG AGGTGATTGG AGTG 24

【００８６】配列番号：１６ GTCTCTGGGC CCCGGTTGTC TGTTG 25

【００８７】配列番号：１７特徴：１３２５で多型性 CCGGCCCTCG CCCTGTCCGC CGCCACCGCC GCCGCCGCCA GAGTCGCCAT GCAGATCCCG 60 CGCGCCGCTC TTCTCCCGCT GCTGCTGCTG CTGCTGGCGG CGCCCGCCTC GGCGCAGCTG 120 TCCCGGGCCG GCCGCTCGGC GCCTTTGGCC GCCGGGTGCC CAGACCGCTG CGAGCCGGCG 180 CGCTGCCCGC CGCAGCCGGA GCACTGCGAG GGCGGCCGGG CCCGGGACGC GTGCGGCTGC 240 TGCGAGGTGT GCGGCGCGCC CGAGGGCGCC GCGTGCGGCC TGCAGGAGGG CCCGTGCGGC 300 GAGGGGCTGC AGTGCGTGGT GCCCTTCGGG GTGCCAGCCT CGGCCACGGT GCGGCGGCGC 360 GCGCAGGCCG GCCTCTGTGT GTGCGCCAGC AGCGAGCCGG TGTGCGGCAG CGACGCCAAC 420 ACCTACGCCA ACCTGTGCCA GCTGCGCGCC GCCAGCCGCC GCTCCGAGAG GCTGCACCGG 480 CCGCCGGTCA TCGTCCTGCA GCGCGGAGCC TGCGGCCAAG GGCAGGAAGA TCCCAACAGT 540 TTGCGCCATA AATATAACTT TATCGCGGAC GTGGTGGAGA AGATCGCCCC TGCCGTGGTT 600 CATATCGAAT TGTTTCGCAA GCTTCCGTTT TCTAAACGAG AGGTGCCGGT GGCTAGTGGG 660 TCTGGGTTTA TTGTGTCGGA AGATGGACTG ATCGTGACAA ATGCCCACGT GGTGACCAAC 720 AAGCACCGGG TCAAAGTTGA GCTGAAGAAC GGTGCCACTT ACGAAGCCAA AATCAAGGAT 780 GTGGATGAGA AAGCAGACAT CGCACTCATC AAAATTGACC ACCAGGGCAA GCTGCCTGTC 840 CTGCTGCTTG GCCGCTCCTC AGAGCTGCGG CCGGGAGAGT TCGTGGTCGC CATCGGAAGC 900 CCGTTTTCCC TTCAAAACAC AGTCACCACC GGGATCGTGA GCACCACCCA GCGAGGCGGC 960 AAAGAGCTGG GGCTCCGCAA CTCAGACATG GACTACATCC AGACCGACGC CATCATCAAC 1020 TATGGAAACT CGGGAGGCCC GTTAGTAAAC CTGGACGGTG AAGTGATTGG AATTAACACT 1080 TTGAAAGTGA CAGCTGGAAT CTCCTTTGCA ATCCCATCTG ATAAGATTAA AAAGTTCCTC 1140 ACGGAGTCCC ATGACCGACA GGCCAAAGGA AAAGCCATCA CCAAGAAGAA GTATATTGGT 1200 ATCCGAATGA TGTCACTCAC GTCCAGCAAA GCCAAAGAGC TGAAGGACCG GCACCGGGAC 1260 TTCCCAGACG TGATCTCAGG AGCGTATATA ATTGAAGTAA TTCCTGATAC CCCAGCAGAA 1320 GCTGKTGGTC TCAAGGAAAA CGACGTCATA ATCAGCATCA ATGGACAGTC CGTGGTCTCC 1380 GCCAATGATG TCAGCGACGT CATTAAAAGG GAAAGCACCC TGAACATGGT GGTCCGCAGG 1440 GGTAATGAAG ATATCATGAT CACAGTGATT CCCGAAGAAA TTGACCCATA GGCAGAGGCA 1500 TGAGCTGGAC TTCATGTTTC CCTCAAAGAC TCTCCCGTGG ATGACGGATG AGGACTCTGG 1560 GCTGCTGGAA TAGGACACTC AAGACTTTTG ACTGCCATTT TGTTTGTTCA GTGGAGACTC 1620 CCTGGCCAAC AGAATCCTTC TTGATAGTTT GCAGGCAAAA CAAATGTAAT GTTGCAGATC 1680 CGCAGGCAGA AGCTCTGCCC TTCTGTATCC TATGTATGCA GTGTGCTTTT TCTTGCCAGC 1740 TTGGGCCATT CTTGCTTAGA CAGTCAGCAT TTGTCTCCTC CTTTAACTGA GTCATCATCT 1800 TAGTCCAACT AATGCAGTCG ATACAATGCG TAGATAGAAG AAGCCCCACG GGAGCCAGGA 1860 TGGGACTGGT CGTGTTTGTG CTTTTCTCCA AGTCAGCACC CAAAGGTCAA TGCACAGAGA 1920 CCCCGGGTGG GTGAGCGCTG GCTTCTCAAA CGGCCGAAGT TGCCTCTTTT AGGAATCTCT 1980 TTGGAATTGG GAGCACGATG ACTCTGAGTT TGAGCTATTA AAGTACTTCT TACAAA 2036

【００８８】配列番号：１８特徴−２１３Ｇｌｙ／Ｖａｌ多型性 Met Gln Ile Pro Arg Ala Ala Leu Leu Pro Leu Leu Leu Leu Leu Leu 1 5 10 15 Ala Ala Pro Ala Ser Ala Gln Leu Ser Arg Ala Gly Arg Ser Ala Pro 20 25 30 Leu Ala Ala Gly Cys Pro Asp Arg Cys Glu Pro Ala Arg Cys Pro Pro 35 40 45 Gln Pro Glu His Cys Glu Gly Gly Arg Ala Arg Asp Ala Cys Gly Cys 50 55 60 Cys Glu Val Cys Gly Ala Pro Glu Gly Ala Ala Cys Gly Leu Gln Glu 65 70 75 80 Gly Pro Cys Gly Glu Gly Leu Gln Cys Val Val Pro Phe Gly Val Pro 85 90 95 Ala Ser Ala Thr Val Arg Arg Arg Ala Gln Ala Gly Leu Cys Val Cys 100 105 110 Ala Ser Ser Glu Pro Val Cys Gly Ser Asp Ala Asn Thr Tyr Ala Asn 115 120 125 Leu Cys Gln Leu Arg Ala Ala Ser Arg Arg Ser Glu Arg Leu His Arg 130 135 140 Pro Pro Val Ile Val Leu Gln Arg Gly Ala Cys Gly Gln Gly Gln Glu 145 150 155 160 Asp Pro Asn Ser Leu Arg His Lys Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val 165 170 175 Glu Lys Ile Ala Pro Ala Val Val His Ile Glu Leu Phe Arg Lys Leu 180 185 190 Pro Phe Ser Lys Arg Glu Val Pro Val Ala Ser Gly Ser Gly Phe Ile 195 200 205 Val Ser Glu Asp Xaa Leu Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Thr Asn 210 215 220 Lys His Arg Val Lys Val Glu Leu Lys Asn Gly Ala Thr Tyr Glu Ala 225 230 235 240 Lys Ile Lys Asp Val Asp Glu Lys Ala Asp Ile Ala Leu Ile Lys Ile 245 250 255 Asp His Gln Gly Lys Leu Pro Val Leu Leu Leu Gly Arg Ser Ser Glu 260 265 270 Leu Arg Pro Gly Glu Phe Val Val Ala Ile Gly Ser Pro Phe Ser Leu 275 280 285 Gln Asn Thr Val Thr Thr Gly Ile Val Ser Thr Thr Gln Arg Gly Gly 290 295 300 Lys Glu Leu Gly Leu Arg Asn Ser Asp Met Asp Tyr Ile Gln Thr Asp 305 310 315 320 Ala Ile Ile Asn Tyr Gly Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Asp 325 330 335 Gly Glu Val Ile Gly Ile Asn Thr Leu Lys Val Thr Ala Gly Ile Ser 340 345 350 Phe Ala Ile Pro Ser Asp Lys Ile Lys Lys Phe Leu Thr Glu Ser His 355 360 365 Asp Arg Gln Ala Lys Gly Lys Ala Ile Thr Lys Lys Lys Tyr Ile Gly 370 375 380 Ile Arg Met Met Ser Leu Thr Ser Ser Lys Ala Lys Glu Leu Lys Asp 385 390 395 400 Arg His Arg Asp Phe Pro Asp Val Ile Ser Gly Ala Tyr Ile Ile Glu 405 410 415 Val Ile Pro Asp Thr Pro Ala Glu Ala Gly Gly Leu Lys Glu Asn Asp 420 425 430 Val Ile Ile Ser Ile Asn Gly Gln Ser Val Val Ser Ala Asn Asp Val 435 440 445 Ser Asp Val Ile Lys Arg Glu Ser Thr Leu Asn Met Val Val Arg Arg 450 455 460 Gly Asn Glu Asp Ile Met Ile Thr Val Ile Pro Glu Glu Ile Asp Pro 465 470 475 480

【００８９】配列番号：１９ ATGCTGAACA TCGGGAAAGC TTGGTTCTCG 30

【００９０】配列番号：２０ CCAACAGACA ACCGGGCCCA GAGACT 26

【００９１】配列番号：２１ TGCCTCCTCG CCCGCCCTAC TCAGA 25

【００９２】配列番号：２２ CGTGGATCCC GAGAAAGAGG CGCAGGACGA GGAGGCAGAA CCCGACTGGC GCGTAGAGCA 60 GCAGCACGAG CAGTAGGAAG CAGTCACCCG GAAGCCTGGG GGCGAGAGGC GAAGTGGTCA 120 GGCGCCGAAG GCCGAGAGCA CGCGGGGATC GGTCTCTTCC CGCCGGGTCT CTTACCGGTG 180 CGAGTCAAAG AGCCGCTCCG GCCCCGGCCC TGAGGGAAGC TCCATAACTG CTGCTTCAGG 240 AGCGCCCGGC CGTCGCCGCC GCCGCCATTT TCGCGCCCGG CCGCAGGGGC TCTTGGGAAG 300 GCGGAGTCTT TGGGCATCCG CCCGGGGTGA GGGGACCCGA AGTCCTGAGG CGCGCCGGAA 360 GGGCTAGCGG TCCCAGCATA CCCCGCGGCC CCTTGGGCCG TCTCACAACT CGCGTCCGGC 420 GGAGACCACA ATTCCCGGCA TTCGTGGGGC AGGGAGGAGT CGGCCTCCCG GAATCCTGGT 480 CCCGGCGTGC ACTTCTGAAG GACTTCAGGT ACCGGCGTGC CCCGCGTCCT ACTGTCCGCC 540 TGCTCGCGTC CTGGGTGCCG CCTCTGAGTA GGGCGGGCGA GGAGGCA 587

【００９３】配列番号：２３ CGTGGATCCC GAGAAAGAGG CGCAGGACGA GGAGGCAGAA CCCGACTGGC GCGTAGAGCA 60 GCAGCACGAG CAGTAGGAAG CAGTCACCCG GAAGCCTGGG GGCGAGAGGC GAAGTGGTCA 120 GGCGCCGAAG GCCGAGAGCA CGCGGGGATC GGTCTCTTCC CGCCGGGTCT CTTACCGGTG 180 CGAGTCAAAG AGCCGCTCCG GCCCCGGCCC TGAGGGAAGC TCCATAACTG CTGCTTCAGG 240 AGCGCCCGGC CGTCGCCGCC GCCGCCATTT TCGCGCCCGG CCGCAGGGGC TCTTGGGAAG 300 GCGGAGTCTT TGGGCATCCG CCCGGGGTGA GGGGACCCGA AGTCCTGAGG CGCGCCGGAA 360 GGGCTAGCGG TCCCAGCATA CCCCGCGGCC CCTTGGGCCG TCTCACAACT CGCGTCCGGC 420 GGAGACCACA ATTCCCGGCA TTCGTGGGGC AGGGAGGAGT CGGCCTCCCG GAATCCTGGT 480 CCCGGCGTGC ACTTCTGAAG GACTTCAGGT ACCGGCGTGC CCCGCGTCCT ACTGTCCGCC 540 TGCTCGCGTC CTGGGTGCCG CCTCTGAGTA GGGCGGGCGA GGAGGCAGCC AAGGCGGAGC 600 TG ATG GCT GCG CCG AGG GCG GGG CGG GGT GCA GGC TGG AGC CTT CGG 647 Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg 1 5 10 15 GCA TGG CGG GCT TTG GGG GGC ATT TGC TGG GGG AGG AGA CCC CGT TTG 695 Ala Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Cys Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu 20 25 30 ACC CCT GAC CTC CGG GCC CTG CTG ACG TCA GGA ACT TCT GAC CCC CGG 743 Thr Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg 35 40 45 GCC CGA GTG ACT TAT GGG ACC CCC AGT CTC TGG GCC CGG TTG TCT GTT 791 Ala Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val 50 55 60 GGG GTC ACT GAA CCC CGA GCA TGC CTG ACG TCT GGG ACC CCG GGT CCC 839 Gly Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro 65 70 75 CGG GCA CAA CTG ACT GCG GTG ACC CCA GAT ACC AGG ACC CGG GAG GCC 887 Arg Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala 80 85 90 95 TCA GAG AAC TCT GGA ACC CGT TCG CGC GCG TGG CTG GCG GTG GCG CTG 935 Ser Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu 100 105 110 GGC GCT GGG GGG GCA GTG CTG TTG TTG TTG TGG GGC GGG GGT CGG GGT 983 Gly Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly 115 120 125 CCT CCG GCC GTC CTC GCC GCC GTC CCT AGC CCG CCG CCC GCT TCT CCC 1031 Pro Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro 130 135 140 CGG AGT CAG TAC AAC TTC ATC GCA GAT GTG GTG GAG AAG ACA GCA CCT 1079 Arg Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro 145 150 155 GCC GTG GTC TAT ATC GAG ATC CTG GAC CGG CAC CCT TTC TTG GGC CGC 1127 Ala Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg 160 165 170 175 GAG GTC CCT ATC TCG AAC GGC TCA GGA TTC GTG GTG GCT GCC GAT GGG 1175 Glu Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly 180 185 190 CTC ATT GTC ACC AAC GCC CAT GTG GTG GCT GAT CGG CGC AGA GTC CGT 1223 Leu Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg 195 200 205 GTG AGA CTG CTA AGC GGC GAC ACG TAT GAG GCC GTG GTC ACA GCT GTG 1271 Val Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val 210 215 220 GAT CCC GTG GCA GAC ATC GCA ACG CTG AGG ATT CAG ACT AAG GAG CCT 1319 Asp Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro 225 230 235 CTC CCC ACG CTG CCT CTG GGA CGC TCA GCT GAT GTC CGG CAA GGG GAG 1367 Leu Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu 240 245 250 255 TTT GTT GTT GCC ATG GGA AGT CCC TTT GCA CTG CAG AAC ACG ATC ACA 1415 Phe Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr 260 265 270 TCC GGC ATT GTT AGC TCT GCT CAG CGT CCA GCC AGA GAC CTG GGA CTC 1463 Ser Gly Ile Val Ser Ser Ala Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu 275 280 285 CCC CAA ACC AAT GTG GAA TAC ATT CAA ACT GAT GCA GCT ATT GAT TTT 1511 Pro Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe 290 295 300 GGA AAC TCT GGA GGT CCC CTG GTT AAC CTG GAT GGG GAG GTG ATT GGA 1559 Gly Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Asp Gly Glu Val Ile Gly 305 310 315 GTG AAC ACC ATG AAG GTC ACA GCT GGA ATC TCC TTT GCC ATC CCT TCT 1607 Val Asn Thr Met Lys Val Thr Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile Pro Ser 320 325 330 335 GAT CGT CTT CGA GAG TTT CTG CAT CGT GGG GAA AAG AAG AAT TCC TCC 1655 Asp Arg Leu Arg Glu Phe Leu His Arg Gly Glu Lys Lys Asn Ser Ser 340 345 350 TCC GGA ATC AGT GGG TCC CAG CGG CGC TAC ATT GGG GTG ATG ATG CTG 1703 Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gln Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met Met Leu 355 360 365 ACC CTG AGT CCC AGC ATC CTT GCT GAA CTA CAG CTT CGA GAA CCA AGC 1751 Thr Leu Ser Pro Ser Ile Leu Ala Glu Leu Gln Leu Arg Glu Pro Ser 370 375 380 TTT CCC GAT GTT CAG CAT GGT GTA CTC ATC CAT AAA GTC ATC CTG GGC 1799 Phe Pro Asp Val Gln His Gly Val Leu Ile His Lys Val Ile Leu Gly 385 390 395 TCC CCT GCA CAC CGG GCT GGT CTG CGG CCT GGT GAT GTG ATT TTG GCC 1847 Ser Pro Ala His Arg Ala Gly Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile Leu Ala 400 405 410 415 ATT GGG GAG CAG ATG GTA CAA AAT GCT GAA GAT GTT TAT GAA GCT GTT 1895 Ile Gly Glu Gln Met Val Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu Ala Val 420 425 430 CGA ACC CAA TCC CAG TTG GCA GTG CAG ATC CGG CGG GGA CGA GAA ACA 1943 Arg Thr Gln Ser Gln Leu Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg Glu Thr 435 440 445 CTG ACC TTA TAT GTG ACC CCT GAG GTC ACA GAA TGAATAGATC ACCAAGAGTA 1996 Leu Thr Leu Tyr Val Thr Pro Glu Val Thr Glu 450 455 TGAGGCTCCT GCTCTGATTT CCTCCTTGCC TTTCTGGCTG AGGTTCTGAG GGCACCGAGA 2056 CAGAGGGTTA AATGAACCAG TGGGGGCAGG TCCCTCCAAC CACCAGCACT GACTCCTGGG 2116 CTCTGAAGAA TCACAGAAAC ACTTTTTATA TAAAATAAAA TTATACCTAG CAACATAAAA 2176 AAAAAAAAAA A 2187

【００９４】配列番号：２４ CGTGGATCCC GAGAAAGAGG CGCAGGACGA GGAGGCAGAA CCCGACTGGC GCGTAGAGCA 60 GCAGCACGAG CAGTAGGAAG CAGTCACCCG GAAGCCTGGG GGCGAGAGGC GAAGTGGTCA 120 GGCGCCGAAG GCCGAGAGCA CGCGGGGATC GGTCTCTTCC CGCCGGGTCT CTTACCGGTG 180 CGAGTCAAAG AGCCGCTCCG GCCCCGGCCC TGAGGGAAGC TCCATAACTG CTGCTTCAGG 240 AGCGCCCGGC CGTCGCCGCC GCCGCCATTT TCGCGCCCGG CCGCAGGGGC TCTTGGGAAG 300 GCGGAGTCTT TGGGCATCCG CCCGGGGTGA GGGGACCCGA AGTCCTGAGG CGCGCCGGAA 360 GGGCTAGCGG TCCCAGCATA CCCCGCGGCC CCTTGGGCCG TCTCACAACT CGCGTCCGGC 420 GGAGACCACA ATTCCCGGCA TTCGTGGGGC AGGGAGGAGT CGGCCTCCCG GAATCCTGGT 480 CCCGGCGTGC ACTTCTGAAG GACTTCAGGT ACCGGCGTGC CCCGCGTCCT ACTGTCCGCC 540 TGCTCGCGTC CTGGGTGCCG CCTCTGAGTA GGGCGGGCGA GGAGGCAGCC AAGGCGGAGC 600 TG ATG GCT GCG CCG AGG GCG GGG CGG GGT GCA GGC TGG AGC CTT CGG 647 Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg 1 5 10 15 GCA TGG CGG GCT TTG GGG GGC ATT CGC TGG GGG AGG AGA CCC CGT TTG 695 Ala Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Arg Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu 20 25 30 ACC CCT GAC CTC CGG GCC CTG CTG ACG TCA GGA ACT TCT GAC CCC CGG 743 Thr Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg 35 40 45 GCC CGA GTG ACT TAT GGG ACC CCC AGT CTC TGG GCC CGG TTG TCT GTT 791 Ala Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val 50 55 60 GGG GTC ACT GAA CCC CGA GCA TGC CTG ACG TCT GGG ACC CCG GGT CCC 839 Gly Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro 65 70 75 CGG GCA CAA CTG ACT GCG GTG ACC CCA GAT ACC AGG ACC CGG GAG GCC 887 Arg Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala 80 85 90 95 TCA GAG AAC TCT GGA ACC CGT TCG CGC GCG TGG CTG GCG GTG GCG CTG 935 Ser Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu 100 105 110 GGC GCT GGG GGG GCA GTG CTG TTG TTG TTG TGG GGC GGG GGT CGG GGT 983 Gly Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly 115 120 125 CCT CCG GCC GTC CTC GCC GCC GTC CCT AGC CCG CCG CCC GCT TCT CCC 1031 Pro Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro 130 135 140 CGG AGT CAG TAC AAC TTC ATC GCA GAT GTG GTG GAG AAG ACA GCA CCT 1079 Arg Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro 145 150 155 GCC GTG GTC TAT ATC GAG ATC CTG GAC CGG CAC CCT TTC TTG GGC CGC 1127 Ala Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg 160 165 170 175 GAG GTC CCT ATC TCG AAC GGC TCA GGA TTC GTG GTG GCT GCC GAT GGG 1175 Glu Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly 180 185 190 CTC ATT GTC ACC AAC GCC CAT GTG GTG GCT GAT CGG CGC AGA GTC CGT 1223 Leu Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg 195 200 205 GTG AGA CTG CTA AGC GGC GAC ACG TAT GAG GCC GTG GTC ACA GCT GTG 1271 Val Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val 210 215 220 GAT CCC GTG GCA GAC ATC GCA ACG CTG AGG ATT CAG ACT AAG GAG CCT 1319 Asp Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro 225 230 235 CTC CCC ACG CTG CCT CTG GGA CGC TCA GCT GAT GTC CGG CAA GGG GAG 1367 Leu Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu 240 245 250 255 TTT GTT GTT GCC ATG GGA AGT CCC TTT GCA CTG CAG AAC ACG ATC ACA 1415 Phe Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr 260 265 270 TCC GGC ATT GTT AGC TCT GCT CAG CGT CCA GCC AGA GAC CTG GGA CTC 1463 Ser Gly Ile Val Ser Ser Ala Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu 275 280 285 CCC CAA ACC AAT GTG GAA TAC ATT CAA ACT GAT GCA GCT ATT GAT TTT 1511 Pro Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe
290 295 300 GGA AAC TCT GGA GGT CCC CTG GTT AAC CTG GAT GGG GAG GTG ATT GGA 1559 Gly Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Asp Gly Glu Val Ile Gly 305 310 315 GTG AAC ACC ATG AAG GTC ACA GCT GGA ATC TCC TTT GCC ATC CCT TCT 1607 Val Asn Thr Met Lys Val Thr Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile Pro Ser 320 325 330 335 GAT CGT CTT CGA GAG TTT CTG CAT CGT GGG GAA AAG AAG AAT TCC TCC 1655 Asp Arg Leu Arg Glu Phe Leu His Arg Gly Glu Lys Lys Asn Ser Ser 340 345 350 TCC GGA ATC AGT GGG TCC CAG CGG CGC TAC ATT GGG GTG ATG ATG CTG 1703 Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gln Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met Met Leu 355 360 365 ACC CTG AGT CCC AGC ATC CTT GCT GAA CTA CAG CTT CGA GAA CCA AGC 1751 Thr Leu Ser Pro Ser Ile Leu Ala Glu Leu Gln Leu Arg Glu Pro Ser 370 375 380 TTT CCC GAT GTT CAG CAT GGT GTA CTC ATC CAT AAA GTC ATC CTG GGC 1799 Phe Pro Asp Val Gln His Gly Val Leu Ile His Lys Val Ile Leu Gly 385 390 395 TCC CCT GCA CAC CGG GCT GGT CTG CGG CCT GGT GAT GTG ATT TTG GCC 1847 Ser Pro Ala His Arg Ala Gly Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile Leu Ala 400 405 410 415 ATT GGG GAG CAG ATG GTA CAA AAT GCT GAA GAT GTT TAT GAA GCT GTT 1895 Ile Gly Glu Gln Met Val Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu Ala Val 420 425 430 CGA ACC CAA TCC CAG TTG GCA GTG CAG ATC CGG CGG GGA CGA GAA ACA 943 Arg Thr Gln Ser Gln Leu Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg Glu Thr 435 440 445 CTG ACC TTA TAT GTG ACC CCT GAG GTC ACA GAA TGAATAGATC ACCAAGAGTA 1996 Leu Thr Leu Tyr Val Thr Pro Glu Val Thr Glu 450 455 TGAGGCTCCT GCTCTGATTT CCTCCTTGCC TTTCTGGCTG AGGTTCTGAG GGCACCGAGA 2056 CAGAGGGTTA AATGAACCAG TGGGGGCAGG TCCCTCCAAC CACCAGCACT GACTCCTGGG 2116 CTCTGAAGAA TCACAGAAAC ACTTTTTATA TAAAATAAAA TTATACCTAG CAACATAAAA 2176 AAAAAAAAAA A 2187

【００９５】配列番号：２５ Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg Ala 1 5 10 15 Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Arg Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu Thr 20 25 30 Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg Ala 35 40 45 Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val Gly 50 55 60 Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro Arg 65 70 75 80 Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala Ser 85 90 95 Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu Gly 100 105 110 Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly Pro 115 120 125 Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro Arg 130 135 140 Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro Ala 145 150 155 160 Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg Glu 165 170 175 Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly Leu 180 185 190 Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg Val 195 200 205 Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val Asp 210 215 220 Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro Leu 225 230 235 240 Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu Phe 245 250 255 Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr Ser 260 265 270 Gly Ile Val Ser Ser Ala Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu Pro 275 280 285 Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe Gly 290 295 300 Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Asp Gly Glu Val Ile Gly Val 305 310 315 320 Asn Thr Met Lys Val Thr Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile Pro Ser Asp 325 330 335 Arg Leu Arg Glu Phe Leu His Arg Gly Glu Lys Lys Asn Ser Ser Ser 340 345 350 Gly Ile Ser Gly Ser Gln Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met Met Leu Thr 355 360 365 Leu Ser Pro Ser Ile Leu Ala Glu Leu Gln Leu Arg Glu Pro Ser Phe 370 375 380 Pro Asp Val Gln His Gly Val Leu Ile His Lys Val Ile Leu Gly Ser 385 390 395 400 Pro Ala His Arg Ala Gly Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile Leu Ala Ile 405 410 415 Gly Glu Gln Met Val Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu Ala Val Arg 420 425 430 Thr Gln Ser Gln Leu Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg Glu Thr Leu 435 440 445 Thr Leu Tyr Val Thr Pro Glu Val Thr Glu 450 455

【００９６】配列番号：２６ CGTGGATCCC GAGAAAGAGG CGCAGGACGA GGAGGCAGAA CCCGACTGGC GCGTAGAGCA 60 GCAGCACGAG CAGTAGGAAG CAGTCACCCG GAAGCCTGGG GGCGAGAGGC GAAGTGGTCA 120 GGCGCCGAAG GCCGAGAGCA CGCGGGGATC GGTCTCTTCC CGCCGGGTCT CTTACCGGTG 180 CGAGTCAAAG AGCCGCTCCG GCCCCGGCCC TGAGGGAAGC TCCATAACTG CTGCTTCAGG 240 AGCGCCCGGC CGTCGCCGCC GCCGCCATTT TCGCGCCCGG CCGCAGGGGC TCTTGGGAAG 300 GCGGAGTCTT TGGGCATCCG CCCGGGGTGA GGGGACCCGA AGTCCTGAGG CGCGCCGGAA 360 GGGCTAGCGG TCCCAGCATA CCCCGCGGCC CCTTGGGCCG TCTCACAACT CGCGTCCGGC 420 GGAGACCACA ATTCCCGGCA TTCGTGGGGC AGGGAGGAGT CGGCCTCCCG GAATCCTGGT 480 CCCGGCGTGC ACTTCTGAAG GACTTCAGGT ACCGGCGTGC CCCGCGTCCT ACTGTCCGCC 540 TGCTCGCGTC CTGGGTGCCG CCTCTGAGTA GGGCGGGCGA GGAGGCAGCC AAGGCGGAGC 600 TG ATG GCT GCG CCG AGG GCG GGG CGG GGT GCA GGC TGG AGC CTT CGG 647 Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg 1 5 10 15 GCA TGG CGG GCT TTG GGG GGC ATT CGC TGG GGG AGG AGA CCC CGT TTG 695 Ala Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Arg Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu 20 25 30 ACC CCT GAC CTC CGG GCC CTG CTG ACG TCA GGA ACT TCT GAC CCC CGG 743 Thr Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg 35 40 45 GCC CGA GTG ACT TAT GGG ACC CCC AGT CTC TGG GCC CGG TTG TCT GTT 791 Ala Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val 50 55 60 GGG GTC ACT GAA CCC CGA GCA TGC CTG ACG TCT GGG ACC CCG GGT CCC 839 Gly Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro 65 70 75 CGG GCA CAA CTG ACT GCG GTG ACC CCA GAT ACC AGG ACC CGG GAG GCC 887 Arg Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala 80 85 90 95 TCA GAG AAC TCT GGA ACC CGT TCG CGC GCG TGG CTG GCG GTG GCG CTG 935 Ser Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu 100 105 110 GGC GCT GGG GGG GCA GTG CTG TTG TTG TTG TGG GGC GGG GGT CGG GGT 983 Gly Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly 115 120 125 CCT CCG GCC GTC CTC GCC GCC GTC CCT AGC CCG CCG CCC GCT TCT CCC 1031 Pro Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro 130 135 140 CGG AGT CAG TAC AAC TTC ATC GCA GAT GTG GTG GAG AAG ACA GCA CCT 1079 Arg Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro 145 150 155 GCC GTG GTC TAT ATC GAG ATC CTG GAC CGG CAC CCT TTC TTG GGC CGC 1127 Ala Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg 160 165 170 175 GAG GTC CCT ATC TCG AAC GGC TCA GGA TTC GTG GTG GCT GCC GAT GGG 1175 Glu Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly 180 185 190 CTC ATT GTC ACC AAC GCC CAT GTG GTG GCT GAT CGG CGC AGA GTC CGT 1223 Leu Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg 195 200 205 GTG AGA CTG CTA AGC GGC GAC ACG TAT GAG GCC GTG GTC ACA GCT GTG 1271 Val Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val 210 215 220 GAT CCC GTG GCA GAC ATC GCA ACG CTG AGG ATT CAG ACT AAG GAG CCT 1319 Asp Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro 225 230 235 CTC CCC ACG CTG CCT CTG GGA CGC TCA GCT GAT GTC CGG CAA GGG GAG 1367 Leu Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu 240 245 250 255 TTT GTT GTT GCC ATG GGA AGT CCC TTT GCA CTG CAG AAC ACG ATC ACA 1415 Phe Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr 260 265 270 TCC GGC ATT GTT AGC TCT GCT CAG CGT CCA GCC AGA GAC CTG GGA CTC 1463 Ser Gly Ile Val Ser Ser Ala Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu 275 280 285 CCC CAA ACC AAT GTG GAA TAC ATT CAA ACT GAT GCA GCT ATT GAT TTT 1511 Pro Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe 290 295 300 GGA AAC TCT GGA GGT CCC CTG GTT AAC CTG GTG AGT GAG ACA TCC TTC 1559 Gly Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Val Ser Glu Thr Ser Phe 305 310 315 CTT CCA AGA ATC CCT GCC CCA GGT CAG TGT GGG AAG GGT AGG TTT CCC 1607 Leu Pro Arg Ile Pro Ala Pro Gly Gln Cys Gly Lys Gly Arg Phe Pro 320 325 330 335 CTA ATT CAA GGA TGT TTG GTC AAG TTT CTG AGC AGT TCT TTG TTG GCT 1655 Leu Ile Gln Gly Cys Leu Val Lys Phe Leu Ser Ser Ser Leu Leu Ala 340 345 350 ATC TCT CAA TAT CCA ACC AGA TCT CCC CAA CAC TTG CTG GTA CTT TTG 1703 Ile Ser Gln Tyr Pro Thr Arg Ser Pro Gln His Leu Leu Val Leu Leu 355 360 365 TTC GGG TGC CCC CAT CCC CTA CTA TTT GTT TAGGCTAGGG AACTGGGGGC TGTA 1757 Phe Gly Cys Pro His Pro Leu Leu Phe Val 370 375 TCCCTGCAGG ATGGGGAGGT GATTGGAGTG AACACCATGA AGGTCACAGC TGGAATCTCC 1817 TTTGCCATCC CTTCTGATCG TCTTCGAGAG TTTCTGCATC GTGGGGAAAA GAAGAATTCC 1877 TCCTCCGGAA TCAGTGGGTC CCAGCGGCGC TACATTGGGG TGATGATGCT GACCCTGAGT 1937 CCCAGCATCC TTGCTGAACT ACAGCTTCGA GAACCAAGCT TTCCCGATGT TCAGCATGGT 1997 GTACTCATCC ATAAAGTCAT CCTGGGCTCC CCTGCACACC GGGCTGGTCT GCGGCCTGGT 2057 GATGTGATTT TGGCCATTGG GGAGCAGATG GTACAAAATG CTGAAGATGT TTATGAAGCT 2117 GTTCGAACCC AATCCCAGTT GGCAGTGCAG ATCCGGCGGG GACGAGAAAC ACTGACCTTA 2177 TATGTGACCC CTGAGGTCAC AGAATGAATA GATCACCAAG AGTATGAGGC TCCTGCTCTG 2237 ATTTCCTCCT TGCCTTTCTG GCTGAGGTTC TGAGGGCACC GAGACAGAGG GTTAAATGAA 2297 CCAGTGGGGG CAGGTCCCTC CAACCACCAG CACTGACTCC TGGGCTCTGA AGAATCACAG 2357 AAACACTTTT TATATAAAAT AAAATTATAC CTAGCAACAT ATTATAGTAA AAAATGAGGT 2417 GGGAGGGCTG GATCTTTTCC CCCACCAAAA GGCTAGAGGT AAAGCTGTAT CCCCCTAAAC 2477 TTAGGGGAGA TACTGGAGCT GACCATCCTG ACCTCCTATT AAAGAAAATG AGCTGCTGAA 2537 AAAAAAAAAA AAAA 2551

【００９７】配列番号：２７ Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg Ala 1 5 10 15 Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Arg Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu Thr 20 25 30 Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg Ala 35 40 45 Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val Gly 50 55 60 Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro Arg 65 70 75 80 Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala Ser 85 90 95 Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu Gly 100 105 110 Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly Pro 115 120 125 Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro Arg 130 135 140 Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro Ala 145 150 155 160 Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg Glu 165 170 175 Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly Leu 180 185 190 Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg Val 195 200 205 Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val Asp 210 215 220 Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro Leu 225 230 235 240 Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu Phe 245 250 255 Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr Ser 260 265 270 Gly Ile Val Ser Ser Ala Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu Pro 275 280 285 Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe Gly 290 295 300 Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Val Ser Glu Thr Ser Phe Leu 305 310 315 320 Pro Arg Ile Pro Ala Pro Gly Gln Cys Gly Lys Gly Arg Phe Pro Leu 325 330 335 Ile Gln Gly Cys Leu Val Lys Phe Leu Ser Ser Ser Leu Leu Ala Ile 340 345 350 Ser Gln Tyr Pro Thr Arg Ser Pro Gln His Leu Leu Val Leu Leu Phe 355 360 365 Gly Cys Pro His Pro Leu Leu Phe Val 370 375

【００９８】配列番号：２８ CGTGGATCCC GAGAAAGAGG CGCAGGACGA GGAGGCAGAA CCCGACTGGC GCGTAGAGCA 60 GCAGCACGAG CAGTAGGAAG CAGTCACCCG GAAGCCTGGG GGCGAGAGGC GAAGTGGTCA 120 GGCGCCGAAG GCCGAGAGCA CGCGGGGATC GGTCTCTTCC CGCCGGGTCT CTTACCGGTG 180 CGAGTCAAAG AGCCGCTCCG GCCCCGGCCC TGAGGGAAGC TCCATAACTG CTGCTTCAGG 240 AGCGCCCGGC CGTCGCCGCC GCCGCCATTT TCGCGCCCGG CCGCAGGGGC TCTTGGGAAG 300 GCGGAGTCTT TGGGCATCCG CCCGGGGTGA GGGGACCCGA AGTCCTGAGG CGCGCCGGAA 360 GGGCTAGCGG TCCCAGCATA CCCCGCGGCC CCTTGGGCCG TCTCACAACT CGCGTCCGGC 420 GGAGACCACA ATTCCCGGCA TTCGTGGGGC AGGGAGGAGT CGGCCTCCCG GAATCCTGGT 480 CCCGGCGTGC ACTTCTGAAG GACTTCAGGT ACCGGCGTGC CCCGCGTCCT ACTGTCCGCC 540 TGCTCGCGTC CTGGGTGCCG CCTCTGAGTA GGGCGGGCGA GGAGGCAGCC AAGGCGGAGC 600 TG ATG GCT GCG CCG AGG GCG GGG CGG GGT GCA GGC TGG AGC CTT CGG 647 Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg 1 5 10 15 GCA TGG CGG GCT TTG GGG GGC ATT CGC TGG GGG AGG AGA CCC CGT TTG 695 Ala Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Arg Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu 20 25 30 ACC CCT GAC CTC CGG GCC CTG CTG ACG TCA GGA ACT TCT GAC CCC CGG 743 Thr Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg 35 40 45 GCC CGA GTG ACT TAT GGG ACC CCC AGT CTC TGG GCC CGG TTG TCT GTT 791 Ala Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val 50 55 60 GGG GTC ACT GAA CCC CGA GCA TGC CTG ACG TCT GGG ACC CCG GGT CCC 839 Gly Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro 65 70 75 CGG GCA CAA CTG ACT GCG GTG ACC CCA GAT ACC AGG ACC CGG GAG GCC 887 Arg Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala 80 85 90 95 TCA GAG AAC TCT GGA ACC CGT TCG CGC GCG TGG CTG GCG GTG GCG CTG 935 Ser Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu 100 105 110 GGC GCT GGG GGG GCA GTG CTG TTG TTG TTG TGG GGC GGG GGT CGG GGT 983 Gly Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly 115 120 125 CCT CCG GCC GTC CTC GCC GCC GTC CCT AGC CCG CCG CCC GCT TCT CCC 1031 Pro Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro 130 135 140 CGG AGT CAG TAC AAC TTC ATC GCA GAT GTG GTG GAG AAG ACA GCA CCT 1079 Arg Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro 145 150 155 GCC GTG GTC TAT ATC GAG ATC CTG GAC CGG CAC CCT TTC TTG GGC CGC 1127 Ala Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg 160 165 170 175 GAG GTC CCT ATC TCG AAC GGC TCA GGA TTC GTG GTG GCT GCC GAT GGG 1175 Glu Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly 180 185 190 CTC ATT GTC ACC AAC GCC CAT GTG GTG GCT GAT CGG CGC AGA GTC CGT 1223 Leu Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg 195 200 205 GTG AGA CTG CTA AGC GGC GAC ACG TAT GAG GCC GTG GTC ACA GCT GTG 1271 Val Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val 210 215 220 GAT CCC GTG GCA GAC ATC GCA ACG CTG AGG ATT CAG ACT AAG GAG CCT 1319 Asp Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro 225 230 235 CTC CCC ACG CTG CCT CTG GGA CGC TCA GCT GAT GTC CGG CAA GGG GAG 1367 Leu Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu 240 245 250 255 TTT GTT GTT GCC ATG GGA AGT CCC TTT GCA CTG CAG AAC ACG ATC ACA 1415 Phe Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr 260 265 270 TCC GGC ATT GTT AGC TCT GCT CAG CGT CCA GCC AGA GAC CTG GGA CTC 1463 Ser Gly Ile Val Ser Ser Ala Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu 275 280 285 CCC CAA ACC AAT GTG GAA TAC ATT CAA ACT GAT GCA GCT ATT GAT TTT 1511 Pro Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe 290 295 300 GGA AAC TCT GGA GGT CCC CTG GTT AAC CTG GCT AGG GAA CTG GGG GCT 1559 Gly Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Ala Arg Glu Leu Gly Ala 305 310 315 GTA TCC CTG CAG GAT GGG GAG GTG ATT GGA GTG AAC ACC ATG AAG GTC 1607 Val Ser Leu Gln Asp Gly Glu Val Ile Gly Val Asn Thr Met Lys Val 320 325 330 335 ACA GCT GGA ATC TCC TTT GCC ATC CCT TCT GAT CGT CTT CGA GAG TTT 1655 Thr Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile Pro Ser Asp Arg Leu Arg Glu Phe 340 345 350 CTG CAT CGT GGG GAA AAG AAG AAT TCC TCC TCC GGA ATC AGT GGG TCC 1703 Leu His Arg Gly Glu Lys Lys Asn Ser Ser Ser Gly Ile Ser Gly Ser 355 360 365 CAG CGG CGC TAC ATT GGG GTG ATG ATG CTG ACC CTG AGT CCC AGG GCT 1751 Gln Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met Met Leu Thr Leu Ser Pro Arg Ala 370 375 380 GGT CTG CGG CCT GGT GAT GTG ATT TTG GCC ATT GGG GAG CAG ATG GTA 1799 Gly Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile Leu Ala Ile Gly Glu Gln Met Val 385 390 395 CAA AAT GCT GAA GAT GTT TAT GAA GCT GTT CGA ACC CAA TCC CAG TTG 1847 Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu Ala Val Arg Thr Gln Ser Gln Leu 400 405 410 415 GCA GTG CAG ATC CGG CGG GGA CGA GAA ACA CTG ACC TTA TAT GTG ACC 1895 Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg Glu Thr Leu Thr Leu Tyr Val Thr 420 425 430 CCT GAG GTC ACA GAA TGAATAGATC ACCAAGAGTA TGAGGCTCCT GCTCTGATTT CC 1952 Pro Glu Val Thr Glu 435 TCCTTGCCTT TCTGGCTGAG GTTCTGAGGG CACCGAGACA GAGGGTTAAA TGAACCAGTG 2012 GGGGCAGGTC CCTCCAACCA CCAGCACTGA CTCCTGGGCT CTGAAGAATC ACAGAAACAC 2072 TTTTTATATA AAATAAAATT ATACCTAGCA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA 2132 AAAAAAAAAA AA 2144

【００９９】配列番号：２９ Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg Ala 1 5 10 15 Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Arg Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu Thr 20 25 30 Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg Ala 35 40 45 Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val Gly 50 55 60 Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro Arg 65 70 75 80 Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala Ser 85 90 95 Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu Gly 100 105 110 Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly Pro 115 120 125 Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro Arg 130 135 140 Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro Ala 145 150 155 160 Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg Glu 165 170 175 Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly Leu 180 185 190 Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg Val 195 200 205 Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val Asp 210 215 220 Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro Leu 225 230 235 240 Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu Phe 245 250 255 Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr Ser 260 265 270 Gly Ile Val Ser Ser Ala Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu Pro 275 280 285 Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe Gly 290 295 300 Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Ala Arg Glu Leu Gly Ala Val 305 310 315 320 Ser Leu Gln Asp Gly Glu Val Ile Gly Val Asn Thr Met Lys Val Thr 325 330 335 Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile Pro Ser Asp Arg Leu Arg Glu Phe Leu 340 345 350 His Arg Gly Glu Lys Lys Asn Ser Ser Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gln 355 360 365 Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met Met Leu Thr Leu Ser Pro Arg Ala Gly 370 375 380 Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile Leu Ala Ile Gly Glu Gln Met Val Gln 385 390 395 400 Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu Ala Val Arg Thr Gln Ser Gln Leu Ala 405 410 415 Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg Glu Thr Leu Thr Leu Tyr Val Thr Pro 420 425 430 Glu Val Thr Glu 435

【０１００】配列番号：３０特徴：６７２および１４３５で多型性変種アミノ酸２４＝Ａｒｇ／Ｃｙｓアミノ酸２７８＝Ａｌ
ａ／Ｖａｌ CGTGGATCCC GAGAAAGAGG CGCAGGACGA GGAGGCAGAA CCCGACTGGC GCGTAGAGCA 60 GCAGCACGAG CAGTAGGAAG CAGTCACCCG GAAGCCTGGG GGCGAGAGGC GAAGTGGTCA 120 GGCGCCGAAG GCCGAGAGCA CGCGGGGATC GGTCTCTTCC CGCCGGGTCT CTTACCGGTG 180 CGAGTCAAAG AGCCGCTCCG GCCCCGGCCC TGAGGGAAGC TCCATAACTG CTGCTTCAGG 240 AGCGCCCGGC CGTCGCCGCC GCCGCCATTT TCGCGCCCGG CCGCAGGGGC TCTTGGGAAG 300 GCGGAGTCTT TGGGCATCCG CCCGGGGTGA GGGGACCCGA AGTCCTGAGG CGCGCCGGAA 360 GGGCTAGCGG TCCCAGCATA CCCCGCGGCC CCTTGGGCCG TCTCACAACT CGCGTCCGGC 420 GGAGACCACA ATTCCCGGCA TTCGTGGGGC AGGGAGGAGT CGGCCTCCCG GAATCCTGGT 480 CCCGGCGTGC ACTTCTGAAG GACTTCAGGT ACCGGCGTGC CCCGCGTCCT ACTGTCCGCC 540 TGCTCGCGTC CTGGGTGCCG CCTCTGAGTA GGGCGGGCGA GGAGGCAGCC AAGGCGGAGC 600 TG ATG GCT GCG CCG AGG GCG GGG CGG GGT GCA GGC TGG AGC CTT CGG 647 Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg 1 5 10 15 GCA TGG CGG GCT TTG GGG GGC ATT YGC TGG GGG AGG AGA CCC CGT TTG 695 Ala Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Xaa Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu 20 25 30 ACC CCT GAC CTC CGG GCC CTG CTG ACG TCA GGA ACT TCT GAC CCC CGG 743 Thr Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg 35 40 45 GCC CGA GTG ACT TAT GGG ACC CCC AGT CTC TGG GCC CGG TTG TCT GTT 791 Ala Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val 50 55 60 GGG GTC ACT GAA CCC CGA GCA TGC CTG ACG TCT GGG ACC CCG GGT CCC 839 Gly Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro 65 70 75 CGG GCA CAA CTG ACT GCG GTG ACC CCA GAT ACC AGG ACC CGG GAG GCC 887 Arg Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala 80 85 90 95 TCA GAG AAC TCT GGA ACC CGT TCG CGC GCG TGG CTG GCG GTG GCG CTG 935 Ser Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu 100 105 110 GGC GCT GGG GGG GCA GTG CTG TTG TTG TTG TGG GGC GGG GGT CGG GGT 983 Gly Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly 115 120 125 CCT CCG GCC GTC CTC GCC GCC GTC CCT AGC CCG CCG CCC GCT TCT CCC 1031 Pro Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro 130 135 140 CGG AGT CAG TAC AAC TTC ATC GCA GAT GTG GTG GAG AAG ACA GCA CCT 1079 Arg Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro 145 150 155 GCC GTG GTC TAT ATC GAG ATC CTG GAC CGG CAC CCT TTC TTG GGC CGC 1127 Ala Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg 160 165 170 175 GAG GTC CCT ATC TCG AAC GGC TCA GGA TTC GTG GTG GCT GCC GAT GGG 1175 Glu Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly 180 185 190 CTC ATT GTC ACC AAC GCC CAT GTG GTG GCT GAT CGG CGC AGA GTC CGT 1223 Leu Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg 195 200 205 GTG AGA CTG CTA AGC GGC GAC ACG TAT GAG GCC GTG GTC ACA GCT GTG 1271 Val Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val 210 215 220 GAT CCC GTG GCA GAC ATC GCA ACG CTG AGG ATT CAG ACT AAG GAG CCT 1319 Asp Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro 225 230 235 CTC CCC ACG CTG CCT CTG GGA CGC TCA GCT GAT GTC CGG CAA GGG GAG 1367 Leu Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu 240 245 250 255 TTT GTT GTT GCC ATG GGA AGT CCC TTT GCA CTG CAG AAC ACG ATC ACA 1415 Phe Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr 260 265 270 TCC GGC ATT GTT AGC TCT YCT CAG CGT CCA GCC AGA GAC CTG GGA CTC 1463 Ser Gly Ile Val Ser Ser Xaa Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu 275 280 285 CCC CAA ACC AAT GTG GAA TAC ATT CAA ACT GAT GCA GCT ATT GAT TTT 1511 Pro Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe 290 295 300 GGA AAC TCT GGA GGT CCC CTG GTT AAC CTG GAT GGG GAG GTG ATT GGA 1559 Gly Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Asp Gly Glu Val Ile Gly 305 310 315 GTG AAC ACC ATG AAG GTC ACA GCT GGA ATC TCC TTT GCC ATC CCT TCT 1607 Val Asn Thr Met Lys Val Thr Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile Pro Ser 320 325 330 335 GAT CGT CTT CGA GAG TTT CTG CAT CGT GGG GAA AAG AAG AAT TCC TCC 1655 Asp Arg Leu Arg Glu Phe Leu His Arg Gly Glu Lys Lys Asn Ser Ser 340 345 350 TCC GGA ATC AGT GGG TCC CAG CGG CGC TAC ATT GGG GTG ATG ATG CTG 1703 Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gln Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met Met Leu 355 360 365 ACC CTG AGT CCC AGC ATC CTT GCT GAA CTA CAG CTT CGA GAA CCA AGC 1751 Thr Leu Ser Pro Ser Ile Leu Ala Glu Leu Gln Leu Arg Glu Pro Ser 370 375 380 TTT CCC GAT GTT CAG CAT GGT GTA CTC ATC CAT AAA GTC ATC CTG GGC 1799 Phe Pro Asp Val Gln His Gly Val Leu Ile His Lys Val Ile Leu Gly 385 390 395 TCC CCT GCA CAC CGG GCT GGT CTG CGG CCT GGT GAT GTG ATT TTG GCC 1847 Ser Pro Ala His Arg Ala Gly Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile Leu Ala 400 405 410 415 ATT GGG GAG CAG ATG GTA CAA AAT GCT GAA GAT GTT TAT GAA GCT GTT 1895 Ile Gly Glu Gln Met Val Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu Ala Val 420 425 430 CGA ACC CAA TCC CAG TTG GCA GTG CAG ATC CGG CGG GGA CGA GAA ACA 1943 Arg Thr Gln Ser Gln Leu Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg Glu Thr 435 440 445 CTG ACC TTA TAT GTG ACC CCT GAG GTC ACA GAA TGAATAGATC ACCAAGAGTA 1996 Leu Thr Leu Tyr Val Thr Pro Glu Val Thr Glu 450 455 TGAGGCTCCT GCTCTGATTT CCTCCTTGCC TTTCTGGCTG AGGTTCTGAG GGCACCGAGA 2056 CAGAGGGTTA AATGAACCAG TGGGGGCAGG TCCCTCCAAC CACCAGCACT GACTCCTGGG 2116 CTCTGAAGAA TCACAGAAAC ACTTTTTATA TAAAATAAAA TTATACCTAG CAACATAAAA 2176 AAAAAAAAAA A 2187

【０１０１】配列番号：３１特徴２４Ｘａａ＝ＡｒｇまたはＣｙｓ２７８Ｘａａ＝ＡｌａまたはＶａｌ Met Ala Ala Pro Arg Ala Gly Arg Gly Ala Gly Trp Ser Leu Arg Ala 1 5 10 15 Trp Arg Ala Leu Gly Gly Ile Xaa Trp Gly Arg Arg Pro Arg Leu Thr 20 25 30 Pro Asp Leu Arg Ala Leu Leu Thr Ser Gly Thr Ser Asp Pro Arg Ala 35 40 45 Arg Val Thr Tyr Gly Thr Pro Ser Leu Trp Ala Arg Leu Ser Val Gly 50 55 60 Val Thr Glu Pro Arg Ala Cys Leu Thr Ser Gly Thr Pro Gly Pro Arg 65 70 75 80 Ala Gln Leu Thr Ala Val Thr Pro Asp Thr Arg Thr Arg Glu Ala Ser 85 90 95 Glu Asn Ser Gly Thr Arg Ser Arg Ala Trp Leu Ala Val Ala Leu Gly 100 105 110 Ala Gly Gly Ala Val Leu Leu Leu Leu Trp Gly Gly Gly Arg Gly Pro 115 120 125 Pro Ala Val Leu Ala Ala Val Pro Ser Pro Pro Pro Ala Ser Pro Arg 130 135 140 Ser Gln Tyr Asn Phe Ile Ala Asp Val Val Glu Lys Thr Ala Pro Ala 145 150 155 160 Val Val Tyr Ile Glu Ile Leu Asp Arg His Pro Phe Leu Gly Arg Glu 165 170 175 Val Pro Ile Ser Asn Gly Ser Gly Phe Val Val Ala Ala Asp Gly Leu 180 185 190 Ile Val Thr Asn Ala His Val Val Ala Asp Arg Arg Arg Val Arg Val 195 200 205 Arg Leu Leu Ser Gly Asp Thr Tyr Glu Ala Val Val Thr Ala Val Asp 210 215 220 Pro Val Ala Asp Ile Ala Thr Leu Arg Ile Gln Thr Lys Glu Pro Leu 225 230 235 240 Pro Thr Leu Pro Leu Gly Arg Ser Ala Asp Val Arg Gln Gly Glu Phe 245 250 255 Val Val Ala Met Gly Ser Pro Phe Ala Leu Gln Asn Thr Ile Thr Ser 260 265 270 Gly Ile Val Ser Ser Xaa Gln Arg Pro Ala Arg Asp Leu Gly Leu Pro 275 280 285 Gln Thr Asn Val Glu Tyr Ile Gln Thr Asp Ala Ala Ile Asp Phe Gly 290 295 300 Asn Ser Gly Gly Pro Leu Val Asn Leu Asp Gly Glu Val Ile Gly Val 305 310 315 320 Asn Thr Met Lys Val Thr Ala Gly Ile Ser Phe Ala Ile Pro Ser Asp 325 330 335 Arg Leu Arg Glu Phe Leu His Arg Gly Glu Lys Lys Asn Ser Ser Ser 340 345 350 Gly Ile Ser Gly Ser Gln Arg Arg Tyr Ile Gly Val Met Met Leu Thr 355 360 365 Leu Ser Pro Ser Ile Leu Ala Glu Leu Gln Leu Arg Glu Pro Ser Phe 370 375 380 Pro Asp Val Gln His Gly Val Leu Ile His Lys Val Ile Leu Gly Ser 385 390 395 400 Pro Ala His Arg Ala Gly Leu Arg Pro Gly Asp Val Ile Leu Ala Ile 405 410 415 Gly Glu Gln Met Val Gln Asn Ala Glu Asp Val Tyr Glu Ala Val Arg 420 425 430 Thr Gln Ser Gln Leu Ala Val Gln Ile Arg Arg Gly Arg Glu Thr Leu 435 440 445 Thr Leu Tyr Val Thr Pro Glu Val Thr Glu 450 455

【０１０２】配列番号：３２ CATCCGGCAT TGTTAGCTCT GC 22

【０１０３】配列番号：３３ CATCCGGCAT TGTTAGCTCT GT 22

【０１０４】配列番号：３４ CAATAGCTGC ATCAGTTTGA ATG 23

【０１０５】配列番号：３５ TGGCGGGCTT TGGGGGGCAT TC 22

【０１０６】配列番号：３６ TGGCGGGCTT TGGGGGGCAT TT 22

【０１０７】配列番号：３７ GACGTCAGCA GGGCCCGGAG GTC 23

【０１０８】配列番号：３８ GATACCCCAG CAGAAGCTGG 20

【０１０９】配列番号：３９ GATACCCCAG CAGAAGCTGT 20

【０１１０】配列番号：４０ GCTGACATCA TTGGCGGAGA C 21

【図面の簡単な説明】

【図１】イー・コリ（E.coli）ｈｔｒＡでＰＳＰ−１
のアミノ酸配列を整列化したものである。

【図２】ＰＳＰ１単離体ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−
２、ＰＳＰ１−３およびＰＳＰ１−４の複数のｃＤＮＡ
配列を整列化したものである。

【図３】ＰＳＰ１単離体ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−
２、ＰＳＰ１−３およびＰＳＰ１−４の複数のｃＤＮＡ
配列を整列化したものである。

【図４】ＰＳＰ１単離体ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−
２、ＰＳＰ１−３およびＰＳＰ１−４の複数のｃＤＮＡ
配列を整列化したものである。

【図５】ＰＳＰ１単離体ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−
２、ＰＳＰ１−３およびＰＳＰ１−４の複数のｃＤＮＡ
配列を整列化したものである。

【図６】ＰＳＰ１単離体ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−
２、ＰＳＰ１−３およびＰＳＰ１−４の複数のｃＤＮＡ
配列を整列化したものである。

【図７】ＰＳＰ１単離体ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−
２、ＰＳＰ１−３およびＰＳＰ１−４の複数のｃＤＮＡ
配列を整列化したものである。

【図８】ＰＳＰ１単離体ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−
２、ＰＳＰ１−３およびＰＳＰ１−４の複数のｃＤＮＡ
配列を整列化したものである。

【図９】ＰＳＰ１単離体ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−
２、ＰＳＰ１−３およびＰＳＰ１−４の複数のｃＤＮＡ
配列を整列化したものである。

【図１０】ＰＳＰ１単離体ＰＳＰ１−１、ＰＳＰ１−
２、ＰＳＰ１−３およびＰＳＰ１−４の複数のｃＤＮＡ
配列を整列化したものである。

【図１１】推定ヒトセリンプロテアーゼでＰＳＰ１−
１のアミノ酸配列を整列化したものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ１２Ｎ 9/64 Ｃ１２Ｐ 21/02 ＣＣ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｑ 1/37 Ｃ１２Ｑ 1/37 1/68 Ｚ 1/68 Ａ６１Ｋ 37/54 ＡＤＳ (71)出願人 591002957 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイションＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥＢＥＥＣＨＡＭＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮアメリカ合衆国ペンシルベニア州19406− 0939、キング・オブ・プルシア、スウェードランド・ロード709番 (72)発明者エリック・ハワード・カランイギリス、シーエム19・５エイダブリュー、エセックス、ハーロウ、ニュー・フロンティアーズ・サイエンス・パーク・サウス、スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ (72)発明者ヘレン・エリザベス・クリンケンベアードイギリス、シーエム19・５エイダブリュー、エセックス、ハーロウ、ニュー・フロンティアーズ・サイエンス・パーク・サウス、スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ (72)発明者マイケル・ジョゼフ・ブラウンイギリス、シーエム19・５エイダブリュー、エセックス、ハーロウ、ニュー・フロンティアーズ・サイエンス・パーク・サウス、スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ (72)発明者クリストファー・デイビッド・サウザンイギリス、シーエム19・５エイダブリュー、エセックス、ハーロウ、ニュー・フロンティアーズ・サイエンス・パーク・サウス、スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ (72)発明者カレサ・エル・クリーシーアメリカ合衆国19406ペンシルベニア州キング・オブ・プルシア、スウェードランド・ロード709番スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューテイカルズ (72)発明者ジョージ・ピー・リビアメリカ合衆国19406ペンシルベニア州キング・オブ・プルシア、スウェードランド・ロード709番スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】生物学的に活性なＰＳＰ１ポリペプチド
をコードする単離ポリヌクレオチド。
【請求項２】（ａ）ヌクレオチド６０３から１９７９の
配列番号：２４に示すヌクレオチド配列を有するＰＳＰ
１−１をコードするポリヌクレオチド；（ｂ）ヌクレオチド６０３から１９７９の配列番号：２
３に示すヌクレオチド配列を有するＰＳＰ１−２をコー
ドするポリヌクレオチド；（ｃ）ヌクレオチド６０３から１７３６の配列番号：２
６に示すヌクレオチド配列を有するＰＳＰ１−３をコー
ドするポリヌクレオチド；（ｄ）ヌクレオチド６０３から１９１３の配列番号：２
８に示すヌクレオチド配列を有するＰＳＰ１−４をコー
ドするポリヌクレオチド；および（ｅ）Ｄ８７２５７（１３２５Ｔ）タンパク質をコード
するポリヌクレオチド；からなる群から選択される単離
ポリヌクレオチド。
【請求項３】配列番号：２４；配列番号：２３；配列
番号：２６；または配列番号：２８に実質的に類似する
単離ポリヌクレオチド。
【請求項４】ヌクレオチド６７２および１４３５が独
立してＣおよびＴから選択される請求項２または３記載
の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５】配列番号：２３、２４、２６、２８もし
くは３０またはヌクレオチド１３２５がＴである配列番
号：１７に示すヌクレオチド配列を有する単離ポリヌク
レオチド。
【請求項６】請求項１から５記載のいずれか１つのポ
リヌクレオチドによりコードされる機能性ポリペプチ
ド。
【請求項７】配列番号：２５または３０に示すアミノ酸
配列を有するＰＳＰ１−１；配列番号：８に示すアミノ
酸配列を有するＰＳＰ１−２；配列番号：２７に示すア
ミノ酸配列を有するＰＳＰ１−３；配列番号：２９に示
すアミノ酸配列を有するＰＳＰ１−４；または配列番
号：１８に示すアミノ酸配列（アミノ酸残基２１３がｖ
ａｌである）を有するＤ８７２５７（１３２５Ｔ）タン
パク質；である請求項６記載の機能性ポリペプチド。
【請求項８】ＤＮＡまたはＲＮＡである請求項１ない
し５記載のいずれか１つのポリヌクレオチド。
【請求項９】請求項８に記載のＤＮＡを有してなるベ
クター。
【請求項１０】請求項９に記載のベクターを有してな
る組換え宿主細胞。
【請求項１１】タンパク質の発現を促進する条件下、
請求項１０に記載の組換え宿主細胞を培養し、発現した
タンパク質を回収することからなる、本質的に純粋なＰ
ＳＰ１タンパク質またはＤ８７２５７（１３２５Ｔ）タ
ンパク質の製造方法。
【請求項１２】請求項１１に記載の方法により製造し
たＰＳＰ１またはＤ８７２５７（１３２５Ｔ）。
【請求項１３】請求項１ないし５に記載のいずれか１
つのポリヌクレオチドまたはＤ８７２５８との結合能を
有する配列を有してなるアンチセンスオリゴヌクレオチ
ド。
【請求項１４】請求項６またはＤ８７２５８のポリペ
プチドのモジュレーター。
【請求項１５】ＰＳＰ１またはＤ８７２５８活性を調
節する物質の存在について培地を分析する方法であっ
て、（ｉ）（ａ）請求項８に記載のＰＳＰ１ポリペプチドも
しくはＤ８７２５８タンパク質、またはその機能性誘導
体および細胞性結合パートナーまたはその合成類似体を
得；（ｂ）ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質／細胞性
結合パートナー複合体を形成しうる条件下で、ＰＳＰ１
またはＤ８７２５８活性を調節すると考えられる試験物
質と一緒にインキュベートし；（ｃ）その複合体、遊離ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タ
ンパク質または遊離細胞性結合パートナーの存在を分析
し；および（ｄ）対照と比較して該物質の効果を決定する；工程か
らなる、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８の細胞性結合パー
トナーへの結合に影響を及ぼすこと；（ｉｉ）（ａ）請求項８に記載のＰＳＰ１ポリペプチド
もしくはＤ８７２５８、またはその機能性誘導体および
細胞性基質またはその合成類似体を得；（ｂ）ＰＳＰ１またはＤ８７２５８酵素／基質複合体を
形成し、その後の基質の切断を可能とする条件下で、Ｐ
ＳＰ１またはＤ８７２５８活性を阻害すると推測される
試験物質と一緒にインキュベートし；（ｃ）タンパク質分解的に切断した基質の存在を分析
し；および（ｄ）対照と比較して該物質の効果を決定する；工程か
らなる、細胞性基質に対するタンパク質分解活性を阻害
すること；（ｉｉｉ）（ａ）請求項８に記載の標識化ＰＳＰ１ポリ
ペプチドもしくはＤ８７２５８、またはその機能性誘導
体を得；（ｂ）固体支持体に結合したモデュレーター候補物質を
得；（ｃ）ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質／モデュ
レーター候補物質複合体を形成しうる条件下で、標識化
ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質と固体支持体に
結合したモデュレーター候補物質の混合物をインキュベ
ートし；（ｄ）固体支持体を遊離可溶性標識化ＰＳＰ１またはＤ
８７２５８タンパク質から分離し；（ｅ）固体支持体に結合した標識化タンパク質の存在を
分析し；（ｆ）標識化ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質と
複合体形成した固体支持体を単離し；および（ｇ）モデュレーター候補物質を同定する；工程からな
る、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質に直接的に
結合させること；を特徴とする分析方法。
【請求項１６】請求項１５に記載の方法により同定さ
れるＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質調節化合
物。
【請求項１７】ＰＳＰ１またはＤ８７２５８活性を調
節する必要性を有する患者の治療薬の製造における、請
求項１６に記載の調節化合物の使用。
【請求項１８】請求項１６に記載の調節化合物および
医薬上許容される担体を有してなる医薬組成物。
【請求項１９】（ａ）個体からポリヌクレオチドサンプ
ルを単離し；（ｂ）ポリヌクレオチドサンプルおよび、配列番号：２
３、２４、２６、２８もしくは３０に示すヌクレオチド
配列を有するＰＳＰ１をコードするポリヌクレオチド、
または配列番号：１８に示すＤ８７２５８をコードする
ポリヌクレオチドを分析し；および（ｃ）任意の差異がＰＳＰ１またはＤ８７２５８配列に
おける突然変異を示す、ポリヌクレオチドサンプルおよ
びＰＳＰ１またはＤ８７２５８ポリヌクレオチド間の差
異を比較する；ことからなる、ＰＳＰ１またはＤ８７２
５８タンパク質欠乏に付随する状態の診断方法。
【請求項２０】ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク
質機能不全に関与する状態の治療方法であって、（ｉ）（ａ）ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質機
能が欠損している患者から細胞を単離し；（ｂ）請求項１ないし７に記載のいずれか１つのポリヌ
クレオチドまたは配列番号１８に示すＤ８７２５８をコ
ードするポリヌクレオチドを、ＰＳＰ１またはＤ８７２
５８タンパク質を発現する細胞にトランスフェクトする
ことにより細胞を改変させ；および（ｃ）細胞を患者に導入して戻し、状態を緩和する；工
程からなり；または（ｉｉ）請求項１ないし５に記載のいずれか１つのポリ
ヌクレオチドまたは配列番号１８に示すＤ８７２５８を
コードするポリヌクレオチドを、ＰＳＰ１またはＤ８７
２５８タンパク質機能が欠損している患者に投与する方
法であって、ＰＳＰ１またはＤ８７２５８タンパク質を
発現させ、状態を緩和することからなる治療方法。
【請求項２１】ＰＳＰ１、Ｄ８７２５８またはその免
疫原と免疫反応する抗体。
【請求項２２】トランスジェニックなヒト以外の動物
の任意の細胞で、請求項５に記載のＤＮＡまたは配列番
号：１８に示すＤ８７２５８をコードするポリヌクレオ
チドの発現能を有するトランスジェニックなヒト以外の
動物。
【請求項２３】患者、好ましくはアルツハイマー病に
対する神経変性素因を有する患者由来のサンプル中のＰ
ＳＰ１またはＤ８７２５８多型性を検出することからな
る、患者における神経変性についての遺伝的素因の決定
方法。
【請求項２４】多型性がＰＳＰ１のヌクレオチド６７
２、ＰＳＰ１のヌクレオチド１４３５、またはＤ８７２
５８のヌクレオチド１３２５で検出される、請求項２３
記載の方法。
【請求項２５】多型性がポリメラーゼ連鎖反応により
検出され、好ましくはポリメラーゼ連鎖反応に使用され
るオリゴヌクレオチドが配列番号：３２、３３、３４、
３５、３６、３７、３８、３９または４０からなる群よ
り選択されるヌクレオチド配列を有する請求項２４記載
の方法。
【請求項２６】配列番号：３２、３３、３４、３５、
３６、３７、３８、３９または４０に示すヌクレオチド
配列を有する単離ポリヌクレオチド。
【請求項２７】（ａ）配列番号：３２および３４；（ｂ）配列番号：３３および３４；（ｃ）配列番号：３５および３７；（ｄ）配列番号：３６および３７；（ｅ）配列番号：３８および４０；または（ｆ）配列番号：３９および４０；に示すヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドを
有してなるオリゴヌクレオチド対。