JPH10113198A - 光学活性２−アリールプロピオン酸の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 光学純度の高い光学活性２−アリールプロピ
オン酸を効率的に、かつ工業的規模で製造する。 【解決手段】 一般式（Ｉ）： 【化１３】 （式中、Ｒは置換または未置換のアリール基を表わす）
で示される２−アリール−１−プロパノールに、不斉的
に酸化する能力を有する微生物またはその処理物を作用
させること、および反応液より生成する一般式（II）： 【化１４】 （式中、Ｒは前記と同じであり、＊は不斉炭素を表わ
す）で示される光学活性な２−アリールプロピオン酸を
採取することからなる光学活性２−アリールプロピオン
酸の製造方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は一般式（Ｉ）：

【０００２】

【化３】

【０００３】（式中、Ｒは置換または未置換のアリール
基を表わす）で示される２−アリール−１−プロパノー
ルに微生物を作用させて、一般式（II）：

【０００４】

【化４】

【０００５】（式中、Ｒは前記と同じであり、＊は不斉
炭素を表わす）で示される光学活性な２−アリールプロ
ピオン酸を製造する方法に関するものである。

【０００６】

【従来の技術】光学活性な２−アリールプロピオン酸
は、種々の医薬品や生理活性物質およびその原料として
有用である。とくに（Ｓ）体の２−（６´−メトキシ−
２´−ナフチル）プロピオン酸（商品名ナプロキセン）
は、全世界で大量に使用されている代表的な非ステロイ
ド系抗炎症剤の一つである。また、２−（４´−イソブ
チルフェニル）プロピオン酸（商品名イブプロフェン）
は、現在はラセミ体を医薬品として投与している非ステ
ロイド系抗炎症剤であるが、副作用や効用の面から光学
活性体の使用も所望されている。

【０００７】このように非常に重要な化合物である、光
学活性な２−アリールプロピオン酸の製造方法について
は、現在までに数多くの研究がなされてきた。

【０００８】たとえば、前述の２−（６´−メトキシ−
２´−ナフチル）プロピオン酸については、２−ブロモ
−６−メトキシナフタレンと２−ブロモプロピオン酸金
属塩をグリニャール反応により縮合させて目的物のラセ
ミ体をうる方法（仏国特許第7818143号明細書、米国特
許第3959364号明細書）、２−アセチル−６−メトキシ
ナフタレンとクロロ酢酸アルキルエステルを縮合させ、
えられたエポキシドをアルデヒド経由で目的物のラセミ
体に導く方法（特開昭50-018448号公報、特開昭53-1499
62号公報、独国特許第3212170号明細書）、２−メトキ
シナフタレンを１−（６−メトキシ−２−ナフチル）プ
ロパン−１−オンとし、カルボニル基をアセタールとし
たのちブロモ化し、１，２−転位反応を経て目的物のラ
セミ体をうる方法（チミカ・エ・イ・インダストラ(Chi
m.Ind.)、64、340(1982)、アンゲバンテ・ヘミー・イン
ターナショナル・エディション・イン・イングリッシュ
(Angew. Chem. Int. Ed. Engl.)、23、413(1984)、テト
ラヘドロン(Tetrahedron)、15、4095(1986))が代表的で
ある。

【０００９】このようにしてえられた化合物はラセミ体
であるため、光学活性体をうるためには、さらなる操作
が必要となる。すなわち、ラセミ体をシンコニジン、α
−フェニルエチルアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン
などの光学活性アミンを用いて光学分割する方法（独国
特許第2007177号明細書、英国特許第1296493号明細書、
特開昭55-055135号公報、英国特許第2025968号明細
書）、カルボン酸をエステルとしたのち、加水分解酵素
を用いて所望する（Ｓ）体のみを加水分解する方法など
がある。しかしながらこれらの方法では、収率は理論的
には５０％が最高値であり、それ以上の収量を求めるた
めには、不要な立体エナンチオマーをラセミ化して再使
用するといった繁雑な操作が要求される。

【００１０】また、今までに述べたラセミ体の合成と光
学分割を組み合わせた製造方法以外にも、直接光学活性
体を調製する方法が既にいくつか報告されている。たと
えば、２−エテニル−６−メトキシナフタレンや２−
（６´−メトキシ−２´−ナフチル）アクリル酸を不斉
触媒を用いて目的の（Ｓ）体エナンチオマーに導く方法
（ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエ
ティ(J. Am. Chem. Soc.)、109、7122(1978)、ジャーナ
ル・オブ・オーガニック・ケミストリー(J. Org.Che
m.)、52、3174(1987)）が報告されているが、高価な触
媒を用いることや、原料の合成が困難といった欠点があ
る。さらに、１−（６´−メトキシ−２´−ナフチル）
プロパン−１−オンを光学活性な酒石酸メチルエステル
とアセタールを形成させたのちブロモ化し、１，２−転
位反応を経て、目的の（Ｓ）体化合物をうる方法（米国
特許第4810819号明細書、同第4855464号明細書および同
第4888433号明細書）も開示されているが、工程が長く
実用的とはいえない。

【００１１】一方、微生物の機能を利用して光学活性な
２−アリールプロピオン酸を製造する方法も既にいくつ
か報告されている。たとえば、前述のようにラセミ体の
カルボン酸エステルの一方の光学異性体を加水分解する
方法、ニトリルの加水分解反応を利用した方法、（Ｒ）
体から（Ｓ）体への不斉転換反応を利用した方法、脱炭
酸反応を利用した方法などが知られている。

【００１２】しかしながら、微生物の酸化反応を利用し
た例はきわめて少ない。たとえば、米国特許第5273895
号明細書には一般式（III）：

【００１３】

【化５】

【００１４】（式中、Ｒ¹は置換または未置換のアリー
ル基を表わす）で示されるラセミ体の２−アリールプロ
パナールまたは一般式（IV）：

【００１５】

【化６】

【００１６】（式中、Ｒ²は置換または未置換のアリー
ル基を表わし、Ｍ⁺はアルカリ金属またはアンモニウム
イオンを表わす）で示されるラセミ体の２−アリール−
１−オールプロパン亜硫酸塩を基質として、これに微生
物を作用させて所望する（Ｓ）体のエナンチオマーをう
る方法が開示されている。しかしながら、一般にアルデ
ヒドは微生物に悪影響を与えることが知られており、か
つ、開示されている反応の基質の濃度が４００ｍｇ／Ｌ
と非常に低いため、一度に大量に生産することができ
ず、とても工業的生産に応用できるレベルにあるとはい
いがたい。

【００１７】

【発明が解決しようとする課題】以上述べた種々の光学
活性な２−アリールプロピオン酸の製造方法では、所望
する化合物のラセミ体をえたのちに光学分割の操作を必
要としたり、用いる触媒が高価で、原料の合成が困難で
あったり、目的化合物をうるまでに複数の工程を必要と
したりしていた。したがってこれらの方法は工業的規模
の生産に用いることができるものではなかった。そこ
で、光学活性な２−アリールプロピオン酸を高価な触媒
を用いずに高い光学純度で効率的に、かつ工業的規模で
製造できる方法の開発が望まれていた。

【００１８】

【課題を解決するための手段】そこで本発明者らは、微
生物の酸化反応を利用した光学活性な２−アリールプロ
ピオン酸の製造方法について鋭意検討した結果、２−ア
リール−１−プロパノールが微生物による酸化反応の基
質となり、アルデヒド体を経て、２−アリールプロピオ
ン酸となりうることを見出した。さらに、反応の中間体
であるアルデヒド体が効率よくラセミ化し、その後立体
選択的な酸化により、光学活性な２−アリールプロピオ
ン酸を生成する微生物が存在することを見出し、本発明
を完成させるに至った。本発明の反応ではアルデヒド体
から２−アリールプロピオン酸が生成する際に、立体選
択的に一方の光学異性体が酸化され、同時にアルデヒド
体がラセミ化する。したがって、収率が５０％以上とな
るような、光学活性２−アリールプロピオン酸の生成が
可能となったのである。

【００１９】すなわち本発明は一般式（Ｉ）：

【００２０】

【化７】

【００２１】（式中、Ｒは置換または未置換のアリール
基を表わす）で示される２−アリール−１−プロパノー
ルに、不斉的に酸化する能力を有する微生物またはその
処理物を作用させること、および反応液より生成する一
般式（II）：

【００２２】

【化８】

【００２３】（式中、Ｒは前記と同じであり、＊は不斉
炭素を表わす）で示される光学活性な２−アリールプロ
ピオン酸を採取することからなる光学活性２−アリール
プロピオン酸の製造方法に関するもの（請求項１）であ
る。

【００２４】さらには、用いる微生物が以下の発明の実
施の形態に示す属に属する微生物よりなる群から選ばれ
たものである方法（請求項２）、用いる微生物が以下の
発明の実施の形態に示す微生物よりなる群から選ばれた
ものである方法（請求項３）、微生物の処理物が熱処理
を施した微生物の菌体である方法（請求項４）、微生物
の処理物が微生物の菌体よりえた酵素液である方法（請
求項５）および一般式（Ｉ）におけるＲがフェニル基、
４−イソブチルフェニル基、６−メトキシ−２−ナフチ
ル基よりなる群から選ばれたものである方法（請求項
６）および使用する微生物がクリプトコッカス・フミコ
ーラス、ゲオトリカム・エリエンス、ギリエルモンデラ
・セレノスポラおよびアースロバクター・クリスタロポ
イエテスよりなる群から選ばれたものであって、２−ア
リール−１−プロパノールの一方の光学活性体を立体反
転させた光学活性な２−アリールプロピオン酸をうるこ
とを特徴とする方法（請求項７）に関する。

【００２５】本発明で出発化合物として用いる２−アリ
ール−１−プロパノールは通常はラセミ体であってもよ
く、（Ｒ）体と（Ｓ）体の任意の混合比の混合体であっ
てもよい。

【００２６】

【発明の実施の形態】本発明の基質として用いられる一
般式（Ｉ）：

【００２７】

【化９】

【００２８】（式中、Ｒは置換または未置換のアリール
基を表わす）で示される２−アリール−１−プロパノー
ルにおいて、Ｒで表わされる未置換のアリール基として
は、フェニル基およびナフチル基などがあげられる。Ｒ
で表わされる置換アリール基としては、アルキル基また
はアルコキシ基などで置換されたフェニル基およびナフ
チル基などがあげられる。２−アリール−１−プロパノ
ールの具体例としては、たとえば２−（４´−イソブチ
ルフェニル）−１−プロパノール、２−（６´−メトキ
シ−２´−ナフチル）−１−プロパノール、２−フェニ
ル−１−プロパノールなどがあげられる。

【００２９】２−アリール−１−プロパノールは公知の
方法によって合成することができる。たとえば、式
（Ｖ）：

【００３０】

【化１０】

【００３１】で示される２−（６´−メトキシ−２´−
ナフチル）−１−プロパノールはフリードらの方法（独
国特許第2039639号明細書）、またはネルソンらの方法
（米国特許第3651148号明細書）などにしたがって合成
することができる。

【００３２】一方、式（VI）：

【００３３】

【化１１】

【００３４】で示される２−（４´−イソブチルフェニ
ル）−１−プロパノールは西山の方法（特開昭49-13335
1号公報）にしたがって合成することができる。また、
市販のラセミ体２−（４´−イソブチルフェニル）プロ
ピオン酸をリチウムアルミニウムハイドライドなどの還
元剤を用いて還元することにより合成することもでき
る。

【００３５】また式（VII）：

【００３６】

【化１２】

【００３７】で示される２−フェニル−１−プロパノー
ルは市販のものが使用できる。

【００３８】本発明に使用される微生物は、以下に説明
する方法によってスクリーニングすることができる。ス
クリーニングに用いる培地は微生物の種類に応じて適宜
選択して用いる。たとえば、微生物が酵母または糸状菌
であるばあいは、グルコース４０ｇ、酵母エキス ３
ｇ、(NH₄)₂HPO₄ １３ｇ、KH₂PO₄ ７ｇ、MgSO₄・7H₂O
０．８ｇ、ZnSO₄・7H₂O ７０ｍｇ、FeSO₄・7H₂O ９０ｍ
ｇ、CuSO₄・5H₂O ５ｍｇ、MnSO₄・4H₂O １０ｍｇ、NaCl
０．１ｇ（水道水1リットル当たり）の組成からなる、
ｐＨを６．８に調節したＢ培地５ｍｌを試験管に入れ殺
菌後、微生物を１白金耳植菌して３０℃で２日間振盪培
養する。また、微生物が細菌であるばあいは、肉エキス
１０ｇ、ペプトン １０ｇ、酵母エキス ５ｇ、NaCl ３
ｇ（水道水1リットル当たり）を含み、ｐＨを７．０に
調節したＣＭ培地５ｍｌを試験管に入れ殺菌後、微生物
を１白金耳植菌して３０℃で２日間振盪培養する。植菌
した微生物が、培養終了時に生育していれば、その微生
物は本発明の方法に用いることができる。

【００３９】本発明で使用される微生物としては、２−
アリール−１−プロパノールを不斉的に酸化して２−ア
リールプロピオン酸を生成させる能力を有する微生物で
あればいずれも使用しうるが、ボトリオアスカス(Botry
oascus)属、ブレタノマイセス(Brettanomyces)属、キャ
ンディダ(Candida)属、シテロマイセス(Citeromyces)
属、クラビスポラ(Clavispora)属、クリプトコッカス(C
ryptococcus)属、デバリオマイセス(Debaryomyces)属、
ディポダスカス(Dipodascus)属、ゲオトリカム(Geotric
hum)属、ギリエルモンデラ(Guilliermondella)属、ホル
モアスカス(Hormoascus)属、ヒポピキア(Hyphopichia)
属、クロエケラ(Kloeckera)属、クリベロマイセス(Kluy
veromyces)属、ロッデロマイセス(Lodderomyces)属、メ
ッチニコビア(Metschnikowia)属、ピキア(Pichia)属、
ロードトルラ(Rhodotorula)属、ロードスポリディウム
(Rhodosporidium)属、サッカロマイセス(Saccharomyce
s)属、サッカロマイコプシス(Saccharomycopsis)属、シ
ゾブラストスポリオン(Schizoblastosporion)属、シゾ
サッカロマイセス(Schizosaccharomyces)属、スバニオ
マイセス(Schwanniomyces)属、スポリディオボラス(Spo
ridiobolus)属、ステファノアスカス(Stephanoascus)
属、トルラスポラ(Torulaspora)属、トリコスポロン(Tr
ichosporon)属、トリゴノプシス(Trigonopsis)属、ヤロ
ビア(Yarrowia)属、チゴサッカロマイセス(Zygosacchar
omyces)属、アシディフィリウム(Acidiphilium)属、ア
ースロバクター(Arthrobacter)属、バシラス(Bacillus)
属、ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属、シトロバ
クター(Citrobacter)属、コリネバクテリウム(Coryneba
cterium)属、エンテロバクター(Enterobacter)属、エル
ビニア(Erwinia)属、クレブシエラ(Klebsiella)属、ミ
クロコッカス(Micrococcus)属、モルガネラ(Morganell
a)属、ノカルディア(Nocardia)属、プロテウス(Proteu
s)属、プロビデンシア(Providencia)属、セラチア(Serr
atia)属、スフィンゴバクテリウム(Sphingobacterium)
属、スタフィロコッカス(Staphylococcus)属およびツカ
ムレラ(Tsukamurella)属に属する微生物よりなる群から
選ばれた微生物が好ましい。

【００４０】具体的な微生物の例としては、ボトリオア
スカス・シナエデンドラス（Botryoascus synnaedendru
s）、ブレタノマイセス・カステルシアヌス（Brettanom
ycescustersianus）、キャンディダ・メリニ（Candida
melinii）、キャンディダ・パラルゴサ（Candida parar
ugosa）、キャンディダ・ルゴサ（Candida rugosa）、
シテロマイセス・マトリテンシス（Citeromyces matrit
ensis）、クラビスポラ・ルシタニアエ（Clavispora lu
sitaniae）、クリプトコッカス・フミコーラス（Crypto
coccus humicolus）、デバリオマイセス・ハンセニ・バ
ー・ハンセニ（Debaryomyces hansenii var. hanseni
i）、ディポダスカス・オベテンシス（Dipodascus ovet
ensis）、ゲオトリカム・エリエンス（Geotrichum erie
nse）、ギリエルモンデラ・セレノスポラ（Guilliermon
della selenospora）、ホルモアスカス・プラチポディ
ス（Hormoascus platypodis）、ヒポピキア・ブルトニ
（Hyphopichia burtonii）、クロエケラ・コルチシス
（Kloeckera corticis）、クリベロマイセス・マルクシ
アヌス（Kluyveromyces marxianus）、ロッデロマイセ
ス・エロンギスポラス（Lodderomyces elongisporu
s）、メッチニコビア・ビカスピダタ（Metschnikowia b
icusupidata）、ピキア・アノマラ（Pichia anomal
a）、ピキア・メンブランアエファシエンス（Pichia me
mbranaefaciens）、ロードトルラ・グラミニス（Rhodot
orula graminis）、ロードスポリディウム・ディオボバ
タム（Rhodosporidium diobovatum）、サッカロマイセ
ス・セルビッシェ（Saccharomyces cerevisiae）、サッ
カロマイコプシス・マランガ（Saccharomycopsis malan
ga）、シゾブラストスポリオン・コバヤシ（Schizoblas
tosporion kobayasii）、シゾサッカロマイセス・ポン
ベ（Schizosaccharomyces pombe）、スバニオマイセス
・オシデンタリス・バー・オシデンタリス（Schwanniom
ycesoccidentalis var. occidentalis）、スポリディオ
ボラス・ジョンソニ（Sporidiobolus johnsonii）、ス
テファノアスカス・シフェリ（Stephanoascus ciferri
i）、トルラスポラ・デルブルエッキ（Torulaspora del
brueckii）、トリコスポロン・ベイゲリ（Trichosporon
beigelii）、トリゴノプシス・バリアビリス（Trigono
psis variabilis）、ヤロビア・リポリティカ（Yarrowi
a lipolytica）、チゴサッカロマイセス・バイリ（Zygo
saccharomyces bailii）、アシディフィリウム・クリプ
タム（Acidiphilium cryptum）、アースロバクター・ク
リスタロポイエテス（Arthrobacter crystallopoiete
s）、バシラス・セレウス（Bacillus cereus）、バシラ
ス・サブチルス（Bacillus subtilis）、ブレビバクテ
リウム・インセルタム（Brevibacterium incertum）、
ブレビバクテリウム・スタティオニス（Brevibacterium
stationis）、シトロバクター・フレウンディ（Citrob
acter freundii）、コリネバクテリウム・フラベセンス
（Corynebacteriumflavescens）、エンテロバクター・
アエロジェネス（Enterobacter aerogenes）、エルビニ
ア・カロトボーラ・サブスピーシーズ・カロトボーラ
（Erwinia carotovora subsp. carotovora）、クレブシ
エラ・ネウモニアエ（Klebsiella pneumoniae）、ミク
ロコッカス・ルテウス（Micrococcus luteus）、モルガ
ネラ・モルガニ・サブスピーシーズ・モルガニ（Morgan
ella morganii subsp. morganii）、ノカルディア・メ
キシカナ（Nocardia mexicana）、プロテウス・インコ
ンスタンス（Proteus inconstans）、プロテウス・レッ
トゲリ（Proteus rettgeri）、プロビデンシア・スチュ
アリティー（Providencia stuartii）、セラチア・マル
セッシェンス（Serratia marcescens）、スフィンゴバ
クテリウム・スピリチボラム（Sphingobacterium spiri
tivorum）、スタフィロコッカス・アウレアス（Staphyl
ococcus aureus）、ツカムレラ・パウロメタボラム（Ts
ukamurellapaurometabolum）があげられる。

【００４１】より具体的な例は、ボトリオアスカス・シ
ナエデンドラスIFO 1604、ブレタノマイセス・カステル
シアヌスIFO 1585、キャンディダ・メリニIFO 0747、キ
ャンディダ・パラルゴサIFO 0966、キャンディダ・ルゴ
サIFO 1364、シテロマイセス・マトリテンシスIFO 065
1、クラビスポラ・ルシタニアエIFO 1019、クリプトコ
ッカス・フミコーラスIFO 0760、クリプトコッカス・フ
ミコーラスJCM 1460、クリプトコッカス・フミコーラス
JCM 1461、デバリオマイセス・ハンセニ・バー・ハンセ
ニIFO 0060、ディポダスカス・オベテンシスIFO 1201、
ゲオトリカム・エリエンスATCC 22311、ギリエルモンデ
ラ・セレノスポラIFO 1850、ホルモアスカス・プラチポ
ディスIFO 1471、ヒポピキア・ブルトニIFO 0844、クロ
エケラ・コルチシスIFO 0633、クリベロマイセス・マル
クシアヌスIFO 0288、ロッデロマイセス・エロンギスポ
ラスIFO 1676、メッチニコビア・ビカスピダタIFO 140
8、ピキア・アノマラIFO 0139、ピキア・メンブランア
エファシエンスIFO 0180、ロードトルラ・グラミニスIF
O 0190、ロードスポリディウム・ディオボバタムIFO 06
88、サッカロマイセス・セルビッシェIFO 0971、サッカ
ロマイコプシス・マランガIFO 1710、シゾブラストスポ
リオン・コバヤシIFO 1644、シゾサッカロマイセス・ポ
ンベIFO 0347、スバニオマイセス・オシデンタリス・バ
ー・オシデンタリスIFO 1840、スポリディオボラス・ジ
ョンソニIFO 6903、ステファノアスカス・シフェリIFO
1854、トルラスポラ・デルブルエッキIFO 0381、トリコ
スポロン・ベイゲリATCC 4151、トリゴノプシス・バリ
アビリスIFO 0671、ヤロビア・リポリティカIFO 1742、
チゴサッカロマイセス・バイリIFO 0488、アシディフィ
リウム・クリプタムIFO 14242、アースロバクター・ク
リスタロポイエテスIFO 14235、バシラス・セレウスIFO
3466、バシラス・サブチルスIFO 3013、ブレビバクテ
リウム・インセルタムIFO 12145、ブレビバクテリウム
・スタティオニスIFO 12144、シトロバクター・フレウ
ンディIFO 12681、コリネバクテリウム・フラベセンスI
FO 14136、エンテロバクター・アエロジェネスIFO 1353
4、エルビニア・カロトボーラ・サブスピーシーズ・カ
ロトボーラIFO 12380、クレブシエラ・ネウモニアエIFO
3319、ミクロコッカス・ルテウスIFO 12708、モルガネ
ラ・モルガニ・サブスピーシーズ・モルガニIFO 3168、
ノカルディア・メキシカナIFO 3927、プロテウス・イン
コンスタンスIFO 12931、プロテウス・レットゲリIFO 1
3501、プロビデンシア・スチュアリティーIFO 12930、
セラチア・マルセッシェンスIFO 3735、スフィンゴバク
テリウム・スピリチボラムJCM 1277、スタフィロコッカ
ス・アウレアスIFO 12732、ツカムレラ・パウロメタボ
ラムIFO 12160である。

【００４２】前記した不斉的に酸化する能力を有する微
生物は、用いる２−アリール−１−プロパノール、目的
とする光学活性２−アリールプロピオン酸の立体配置に
応じて前記微生物から適宜選択すればよい。

【００４３】とりわけクリプトコッカス・フミコーラ
ス、ゲオトリカム・エリエンス、ギリエルモンデラ・セ
レノスポラまたはアースロバクター・クリスタロポイエ
テスを用いることによって、２−アリール−１−プロパ
ノールの一方の光学活性体を立体反転させて光学活性な
２−アリールプロピオン酸をうることができる。

【００４４】（Ｓ）−２−（６´−メトキシ−２´−ナ
フチル）プロピオン酸をうるためには、クリプトコッカ
ス属、デバリオマイセス属、ゲオトリカム属、ギリエル
モンデラ属、クロエケラ属、クリベロマイセス属、メッ
チニコビア属、ロードトルラ属、ロードスポリディウム
属、サッカロマイコプシス属、スポリディオボラス属、
ステファノアスカス属、トリコスポロン属、アシディフ
ィリウム属、アースロバクター属、バシラス属、ブレビ
バクテリウム属、シトロバクター属、コリネバクテリウ
ム属、エンテロバクター属、エルビニア属、クレブシエ
ラ属、モルガネラ属、ノカルディア属、プロテウス属、
プロビデンシア属、セラチア属、スフィンゴバクテリウ
ム属またはスタフィロコッカス属に属する微生物、より
具体的には、クリプトコッカス・フミコーラス、デバリ
オマイセス・ハンセニ・バー・ハンセニ、ゲオトリカム
・エリエンス、ギリエルモンデラ・セレノスポラ、クロ
エケラ・コルチシス、クリベロマイセス・マルクシアヌ
ス、メッチニコビア・ビカスピダタ、ロードトルラ・グ
ラミニス、ロードスポリディウム・ディオボバタム、サ
ッカロマイコプシス・マランガ、スポリディオボラス・
ジョンソニ、ステファノアスカス・シフェリ、トリコス
ポロン・ベイゲリ、アシディフィリウム・クリプタム、
アースロバクター・クリスタロポイエテス、バシラス・
セレウス、バシラス・サブチルス、ブレビバクテリウム
・インセルタム、ブレビバクテリウム・スタティオニ
ス、シトロバクター・フレウンディ、コリネバクテリウ
ム・フラベセンス、エンテロバクター・アエロジェネ
ス、エルビニア・カロトボーラ・サブスピーシーズ・カ
ロトボーラ、クレブシエラ・ネウモニアエ、モルガネラ
・モルガニ・サブスピーシーズ・モルガニ、ノカルディ
ア・メキシカナ、プロテウス・インコンスタンス、プロ
テウス・レットゲリ、プロビデンシア・スチュアリティ
ー、セラチア・マルセッシェンス、スフィンゴバクテリ
ウム・スピリチボラムまたはスタフィロコッカス・アウ
レアスを用いればよく、とりわけ収率および光学純度の
点から、クリプトコッカス・フミコーラスIFO 0760、ク
リプトコッカス・フミコーラスJCM 1460、クリプトコッ
カス・フミコーラスJCM 1461、ゲオトリカム・エリエン
スATCC 22311、ギリエルモンデラ・セレノスポラIFO 18
50、アースロバクター・クリスタロポイエテスIFO 1423
5、ブレビバクテリウム・インセルタムIFO 12145、ノカ
ルディア・メキシカナIFO 3927またはプロテウス・レッ
ドゲリIFO 13501を用いるのが好ましい。

【００４５】（Ｒ）−２−（４´−イソブチルフェニ
ル）プロピオン酸をうるためには、キャンディダ属、ク
リプトコッカス属、ゲオトリカム属、ギリエルモンデラ
属、ブレビバクテリア属、ノカルディア属またはプロテ
ウス属に属する微生物、より具体的には、キャンディダ
・ルゴサ、クリプトコッカス・フミコーラス、ゲオトリ
カム・エリエンス、ギリエルモンデラ・セレノスポラ、
ブレビバクテリウム・インセルタム、ノカルディア・メ
キシカナまたはプロテウス・レットゲリを用いればよ
い。

【００４６】（Ｓ）−２−フェニルプロピオン酸をうる
ためには、キャンディダ属、クリプトコッカス属、ゲオ
トリカム属、ギリエルモンデラ属、ヒポピキア属、ブレ
ビバクテリウム属、ノカルディア属またはプロテウス属
に属する微生物、より具体的には、キャンディダ・ルゴ
サ、クリプトコッカス・フミコーラス、ゲオトリカム・
エリエンス、ギリエルモンデラ・セレノスポラ、ヒポピ
キア・ブルトニ、ブレビバクテリウム・インセルタム、
ノカルディア・メキシカナまたはプロテウス・レットゲ
リを用いればよい。

【００４７】（Ｒ）−２−フェニルプロピオン酸をうる
ためには、ピキア属またはシゾブラストスポリオン属に
属する微生物、より具体的にはピキア・メンブランアエ
ファシエンスまたはシゾブラストスポリオン・コバヤシ
を用いればよい。

【００４８】これらの微生物の培養には、通常これらの
微生物が資化しうる栄養源を含む培地であれば、いかな
る液体培地をも使用しうる。たとえば、グルコース、シ
ュークロースなどの糖類、エタノール、グリセロールな
どのアルコール、パラフィンなどの炭水化物、酢酸、プ
ロピオン酸などの有機酸および大豆油などの炭素源また
はこれらの混合物；酵母エキス、ペプトン、肉エキス、
コーンスチープリカー、リン酸アンモニウム、硫酸アン
モニウムおよびアンモニアなどの含窒素無機有機栄養
源；リン酸塩、マグネシウム、鉄、マンガン、亜鉛、
銅、ナトリウムおよびカリウムなどの無機栄養源；なら
びにビオチンおよびチアミンなどのビタミン類を適宜配
合した通常の培地が用いられる。培地は用いる微生物に
よって適宜選択すればよい。

【００４９】微生物の培養方法としては、ｐＨ４．０〜
ｐＨ９．５の範囲で、２０℃〜４０℃の温度範囲で１〜
５日間好気的に培養するのが好ましい。また、微生物の
酸化能力を高めるために、培地に２−フェニルエチルア
ルコールなどの誘導物質を０．１〜１％（ｗ／ｖ）添加
してもよい。

【００５０】本発明の方法において微生物は、生菌体の
まま作用させてもよいし、微生物の処理物、たとえば熱
処理、アセトン処理、凍結乾燥などの処理を施した菌
体、菌体よりえた酵素液および菌体を固定化した担体の
形態で作用させてもよい。微生物を熱処理することによ
り菌の細胞内外への透過性を向上させたり、好ましくな
い立体選択性を持つ酸化酵素を除くことが可能である。
これらの中でも、目的生成物の光学純度および収率がよ
いことから、熱処理を施した微生物の菌体および微生物
の菌体よりえた酵素液を用いることが好ましい。

【００５１】熱処理を施した微生物の菌体は以下の方法
で調製できる。微生物の培養液から遠心分離などにより
菌体を分離し、水またはリン酸カリウムなどの緩衝液な
どに再懸濁する。えられた菌体懸濁液を３０℃〜７０℃
で５〜１８０分間、好ましくは４０℃〜６０℃で２０〜
１２０分間、さらに好ましくは４５℃〜５０℃で３０〜
６０分間熱処理する。

【００５２】微生物の菌体よりえた酵素液は以下の方法
で調製できる。微生物の培養液から遠心分離などにより
菌体を分離し、水またはリン酸カリウムなどの緩衝液な
どに再懸濁する。えられた菌体懸濁液にリゾチーム、セ
ルラーゼなどの細胞壁溶解酵素を加え、２０〜４０℃で
３０〜１２０分保温した後に超音波によって菌体を破砕
する。えられた菌体破砕液を遠心分離すると、上清が酵
素液としてえられる。

【００５３】２−アリール−１−プロパノールと前記微
生物とを作用させる方法としては、微生物の培養液その
ものに２−アリール−１−プロパノールを添加する方
法、遠心分離などにより培養液から分離した菌体をリン
酸カリウム緩衝液などのリン酸緩衝液または水などに再
懸濁してえられる菌体懸濁液に、２−アリール−１−プ
ロパノールを添加する方法、前述の熱処理した菌体懸濁
液に２−アリール−１−プロパノールを添加する方法お
よび前述の微生物の菌体よりえた酵素液に２−アリール
−１−プロパノールを添加する方法などがある。２−ア
リール−１−プロパノールは、そのまま、または反応に
影響を与えないように酢酸−ｎ−ブチル、酢酸エチル、
ｎ−オクタノール、イソプロピルエーテル、四塩化炭素
などの有機溶剤に溶解してから、反応初期に一括して添
加してもよいし、あるいは分割して添加してもよい。反
応は反応液のｐＨがｐＨ４〜ｐＨ９の範囲で、好ましく
はｐＨ６〜ｐＨ８の範囲で、１０℃〜６０℃、好ましく
は２０℃〜４０℃の温度で１〜１２０時間、好ましくは
１〜２４時間撹拌しながら行なうのが好ましい。基質で
ある２−アリール−１−プロパノールの濃度は０．１〜
１０％（ｗ／ｖ）、好ましくは１〜５％（ｗ／ｖ）であ
る。反応液中の菌体の量は各菌体の不斉的に酸化する能
力に応じて適宜決定することができる。

【００５４】反応終了後、必要であれば濾過、遠心分離
などにより菌体を除去したのち、塩酸などの酸性水溶液
にて反応液のｐＨを１．０まで下げた後、酢酸エチルま
たは塩化メチレンなどの有機溶剤にて抽出することによ
り、生成した光学活性な２−アリールプロピオン酸を採
取できる。えられた抽出物を無水硫酸ナトリウムなどで
脱水後、有機溶剤を留去したのち、シリカゲルクロマト
グラフィーなどで精製すれば、高純度の光学活性な２−
アリールプロピオン酸が容易にえられる。

【００５５】

【実施例】以下、実施例に基づいて本発明を具体的に説
明するが、本発明は実施例のみに限定されるものではな
い。

【００５６】以下の実施例で用いるＢ培地およびＣＭ培
地の水道水１リットルあたりの組成はつぎのとおりであ
る。

【００５７】Ｂ培地： グルコース ４０ｇ 酵母エキス ３ｇ （ＮＨ₄）₂ＨＰＯ₄ １３ｇ ＫＨ₂ＰＯ₄ ７ｇ ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．８ｇ ＺｎＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ７０ｍｇ ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ９０ｍｇ ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ ５ｍｇ ＭｎＳＯ₄・４Ｈ₂Ｏ １０ｍｇ ＮａＣｌ ０．１ｇ ｐＨ６．８ ＣＭ培地： 肉エキス １０ｇ ペプトン １０ｇ 酵母エキス ５ｇ ＮａＣｌ ３ｇ ｐＨ７．０ ２−アリールプロピオン酸および２−アリールプロパノ
ールの収率および光学純度は、高速液体クロマトグラフ
ィー（ＨＰＬＣ）を用いて以下に示す条件で決定した。

【００５８】

【表１】

【００５９】実施例１ Ｂ培地またはＣＭ培地５ｍｌを試験管に入れて殺菌後、
表２および表３に示す微生物を１白金耳植菌し、３０℃
で２日間好気的に振盪培養した。生育した菌体を遠心分
離により集め、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ
７．０）２．５ｍｌに再懸濁し、ラセミ体の２−（６´
−メトキシ−２´−ナフチル）−１−プロパノール５ｍ
ｇを添加して、試験管内にて３０℃にて２日間振盪反応
させた。反応終了後、反応液に２Ｎ ＨＣｌ水溶液０．
５ｍｌを加え、酢酸エチル５ｍｌを用いて生成した光学
活性２−（６´−メトキシ−２´−ナフチル）プロピオ
ン酸を抽出した。この抽出液より酢酸エチルを減圧下で
留去したのち、ＨＰＬＣにて分析を行なったところ、表
２および表３に示す結果をえた。

【００６０】

【表２】

【００６１】

【表３】

【００６２】実施例２ Ｂ培地またはＣＭ培地５ｍｌを試験管に入れて殺菌後、
表４に示す微生物を１白金耳植菌し、３０℃で２日間好
気的に振盪培養した。生育した菌体を遠心分離により集
め、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．０）２．
５ｍｌに再懸濁し、基質としてラセミ体の２−フェニル
−１−プロパノール５ｍｇを添加して、試験管内にて３
０℃にて３日間振盪反応させた。反応終了後、反応液に
２Ｎ ＨＣｌ水溶液０．５ｍｌを加え、酢酸エチル５ｍ
ｌで生成した光学活性２−フェニルプロピオン酸を抽出
した。この抽出液より酢酸エチルを減圧下で留去したの
ち、ＨＰＬＣにて分析を行なったところ、表４に示す結
果をえた。

【００６３】

【表４】

【００６４】実施例３ Ｂ培地またはＣＭ培地５ｍｌを試験管に入れて殺菌後、
表５に示す微生物を１白金耳植菌し、３０℃で２日間好
気的に振盪培養を行なった。生育した菌体を遠心分離に
より集め、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．
０）２．５ｍｌに再懸濁し、基質としてラセミ体の２−
（４´−イソブチルフェニル）−１−プロパノール５ｍ
ｇを添加して、試験管内にて３０℃にて３日間振盪反応
させた。反応終了後、反応液に２Ｎ ＨＣｌ水溶液０．
５ｍｌを加え、酢酸エチル５ｍｌで生成した光学活性２
−（４´−イソブチルフェニル）プロピオン酸を抽出し
た。この抽出液より酢酸エチルを減圧下で留去したの
ち、ＨＰＬＣにて分析を行なったところ、表５に示す結
果をえた。

【００６５】

【表５】

【００６６】実施例４ Ｂ培地またはＣＭ培地５ｍｌを試験管に入れて殺菌後、
表６に示す微生物を１白金耳植菌し、３０℃で２日間好
気的に振盪培養を行なった。生育した菌体を遠心分離に
より集め、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．
０）２．５ｍｌに再懸濁し、ラセミ体、（Ｒ）体または
（Ｓ）体の２−（６´−メトキシ−２´−ナフチル）−
１−プロパノール５ｍｇを添加して、試験管内にて３０
℃にて２日間振盪反応させた。反応終了後、反応液に２
Ｎ ＨＣｌ水溶液０．５ｍｌを加え、酢酸エチル５ｍｌ
を用いて残存した２−（６´−メトキシ−２´−ナフチ
ル）−１−プロパノールおよび生成した光学活性２−
（６´−メトキシ−２´−ナフチル）プロピオン酸を抽
出した。この抽出液より酢酸エチルを減圧下で留去した
のち、ＨＰＬＣにて分析を行なったところ、表６に示す
結果をえた。

【００６７】

【表６】

【００６８】実施例５ （熱処理を施した微生物の菌体を用いた反応）ＣＭ培地
５０ｍｌに２−フェニルエチルアルコール２００ｍｇを
添加して５００ｍｌ坂口フラスコに入れ滅菌後、アース
ロバクター・クリスタロポイエテスIFO 14235株を１白
金耳植菌し、３０℃で１日間好気的に振盪培養を行なっ
た。生育した菌体を遠心分離により集め、０．１ｍＭ
ＥＤＴＡ、５ｍＭ ２−メルカプトエタノールを含む
０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ８．０）２５ｍｌ
に再懸濁した。菌体懸濁液のうち１０ｍｌをとり、５０
℃、２０分間の熱処理にかけた。熱処理を行なった菌体
懸濁液および熱処理を行なわなかった菌体懸濁液をそれ
ぞれ２．５ｍｌずつ試験管に入れ、ラセミ体の２−（６
´−メトキシ−２´−ナフチル）−１−プロパノール１
０ｍｇを添加し、３０℃で１７時間振盪反応させた。反
応終了後、反応液に２Ｎ ＨＣｌ水溶液２ｍｌを添加
し、酢酸エチル１０ｍｌにて生成した（Ｓ）−２−（６
´−メトキシ−２´−ナフチル）プロピオン酸を抽出し
た。この抽出液より酢酸エチルを減圧下で留去したの
ち、えられた（Ｓ）−２−（６´−メトキシ−２´−ナ
フチル）プロピオン酸をＨＰＬＣにて分析したところ、
熱処理を行なわなかった菌体を使用したばあいは、収率
９７．０％、光学純度１．３％e.e.であったのに対し
て、熱処理を行なった菌体のばあいは、収率９９．１
％、光学純度６０．３％e.e.であった。

【００６９】実施例６ （微生物からえた酵素液を用いた反応）ＣＭ培地５０ｍ
ｌに２−フェニルエチルアルコール２００ｍｇを添加し
て５００ｍｌ坂口フラスコに入れ滅菌後、アースロバク
ター・クリスタロポイエテスIFO 14235株を１白金耳植
菌し、３０℃で１日間好気的に振盪培養を行なった。生
育した菌体を遠心分離により集め、０．１ｍＭ ＥＤＴ
Ａ、５ｍＭ ２−メルカプトエタノールを含む０．１Ｍ
リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ８．０）２５ｍｌに再懸濁
した。この菌体懸濁液にリゾチーム６ｍｇを加え、室温
で３時間撹拌後、０℃まで冷却し超音波にて菌体を破砕
した。この菌体破砕液を遠心分離にかけ、上清を無細胞
抽出液として回収した。この無細胞抽出液２ｍｌにラセ
ミ体の２−（６´−メトキシ−２´−ナフチル）−１−
プロパノール１０ｍｇを添加し、試験管内で３０℃で１
７時間振盪反応させた。反応終了後、反応液に２Ｎ Ｈ
Ｃｌ水溶液２ｍｌを添加し、酢酸エチル１０ｍｌにて生
成した（Ｓ）−２−（６´−メトキシ−２´−ナフチ
ル）プロピオン酸を抽出した。この抽出液より酢酸エチ
ルを減圧下で留去したのち、えられた（Ｓ）−２−（６
´−メトキシ−２´−ナフチル）プロピオン酸をＨＰＬ
Ｃにて分析したところ、収率３０．２％、光学純度７
８．３％e.e.であった。

【００７０】実施例７ （微生物からえた酵素液を用いた反応）ＣＭ培地５０ｍ
ｌに２−フェニルエチルアルコール２００ｍｇを添加し
て５００ｍｌ坂口フラスコに入れ滅菌後、アースロバク
ター・クリスタロポイエテスIFO 14235株を１白金耳植
菌し、３０℃で１日間好気的に振盪培養を行なった。生
育した菌体を遠心分離により集め、０．１ｍＭ ＥＤＴ
Ａ、５ｍＭ ２−メルカプトエタノールを含む０．１Ｍ
リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ８．０）２５ｍｌに再懸濁
した。この菌体懸濁液にリゾチーム６ｍｇを加え、室温
で３時間撹拌後、０℃まで冷却し超音波にて菌体を破砕
した。この菌体破砕液を遠心分離にかけ、上清を無細胞
抽出液として回収した。この無細胞抽出液２ｍｌにラセ
ミ体、（Ｒ）体または（Ｓ）体の２−（６´−メトキシ
−２´−ナフチル）−１−プロパノール５ｍｇを添加
し、試験管内で３０℃で６４時間振盪反応させた。反応
終了後、反応液に２Ｎ ＨＣｌ水溶液２ｍｌを添加し、
酢酸エチル５ｍｌにて残存した２−（６´−メトキシ−
２´−ナフチル）−１−プロパノールおよび生成した２
−（６´−メトキシ−２´−ナフチル）プロピオン酸を
抽出した。この抽出液より酢酸エチルを減圧下で留去し
たのち、えられた２−（６´−メトキシ−２´−ナフチ
ル）−１−プロパノールおよび２−（６´−メトキシ−
２´−ナフチル）プロピオン酸をＨＰＬＣにて分析した
ところ、表７に示す結果をえた。

【００７１】

【表７】

【００７２】実施例８ （熱処理を施した微生物の菌体を用いた反応）ＣＭ培地
５０ｍｌに２−フェニルエチルアルコール２００ｍｇを
添加して５００ｍｌ坂口フラスコに入れたものを８本用
意し、滅菌後、アースロバクター・クリスタロポイエテ
スIFO 14235株をそれぞれ１白金耳ずつ植菌し、３０℃
で１日間好気的に振盪培養を行なった。生育した菌体を
遠心分離により集め、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、５ｍＭ
２−メルカプトエタノールを含む０．１Ｍリン酸カリウ
ム緩衝液（ｐＨ８．０）２００ｍｌに再懸濁した。この
菌体懸濁液を５０℃２０分間の熱処理にかけた後、ラセ
ミ体の２−（６´−メトキシ−２´−ナフチル）−１−
プロパノール４００ｍｇを添加し、３０℃で２日間撹拌
反応させた。反応終了後、反応液に２Ｎ ＨＣｌ水溶液
１００ｍｌを添加し、酢酸エチル５００ｍｌにて抽出を
行なった。この抽出液より酢酸エチルを減圧下で除去
し、白色の固体物質をえた。この固体物質を分取用薄層
クロマトグラフィー（移動相：ヘキサン／アセトン／酢
酸＝６０／４０／１（ｖ／ｖ）によって精製し、ＨＰＬ
Ｃにて分析したところ光学純度３５．７％e.e.の（Ｓ）
−２−（６´−メトキシ−２´−ナフチル）プロピオン
酸３５９ｍｇ（収率８９．８％）をえた。

【００７３】実施例９ ＣＭ培地５ｍｌまたは、２−フェニルエチルアルコール
０．２％（ｗ／ｖ）を含むＣＭ培地５ｍｌを試験管に入
れて殺菌後、表８に示す微生物を１白金耳植菌し、３０
℃で２日間好気的に振盪培養した。生育した菌体を、遠
心分離により集め、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐ
Ｈ７．０）２．５ｍｌに再懸濁し、ラセミ体の２−（６
´−メトキシ−２´−ナフチル）−１−プロパノール５
ｍｇを添加して、試験管内にて３０℃にて２日間振盪反
応させた。反応終了後、反応液に２Ｎ ＨＣｌ水溶液
０．５ｍｌを加え、酢酸エチル５ｍｌを用いて生成した
光学活性２−（６´−メトキシ−２´−ナフチル）プロ
ピオン酸を抽出し、酢酸エチルを減圧下で留去したの
ち、ＨＰＬＣにて分析を行ったところ、表８に示す結果
をえた。

【００７４】

【表８】

【００７５】

【発明の効果】本発明によれば、２−アリール−１−プ
ロパノールに不斉的に酸化する能力を有する微生物を作
用させることにより、光学活性な２−アリールプロピオ
ン酸を工業的に有利に生産することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:84） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:865） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:06） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:085） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:125） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:13） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:15） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:18） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:22） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:265） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:365） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:37） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:43） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:445） (72)発明者 八十原 良彦 兵庫県姫路市日出町３−７−２−605 (72)発明者 長谷川 淳三 兵庫県明石市大久保町高丘２丁目13−４

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（Ｉ）： 【化１】 （式中、Ｒは置換または未置換のアリール基を表わす）
   で示される２−アリール−１−プロパノールに、不斉的
   に酸化する能力を有する微生物またはその処理物を作用
   させること、および反応液より生成する一般式（II）： 【化２】 （式中、Ｒは前記と同じであり、＊は不斉炭素を表わ
   す）で示される光学活性な２−アリールプロピオン酸を
   採取することからなる光学活性２−アリールプロピオン
   酸の製造方法。
2. 【請求項２】 使用する微生物がボトリオアスカス属、
   ブレタノマイセス属、キャンディダ属、シテロマイセス
   属、クラビスポラ属、クリプトコッカス属、デバリオマ
   イセス属、ディポダスカス属、ゲオトリカム属、ギリエ
   ルモンデラ属、ホルモアスカス属、ヒポピキア属、クロ
   エケラ属、クリベロマイセス属、ロッデロマイセス属、
   メッチニコビア属、ピキア属、ロードトルラ属、ロード
   スポリディウム属、サッカロマイセス属、サッカロマイ
   コプシス属、シゾブラストスポリオン属、シゾサッカロ
   マイセス属、スバニオマイセス属、スポリディオボラス
   属、ステファノアスカス属、トルラスポラ属、トリコス
   ポロン属、トリゴノプシス属、ヤロビア属、チゴサッカ
   ロマイセス属、アシディフィリウム属、アースロバクタ
   ー属、バシラス属、ブレビバクテリウム属、シトロバク
   ター属、コリネバクテリウム属、エンテロバクター属、
   エルビニア属、クレブシエラ属、ミクロコッカス属、モ
   ルガネラ属、ノカルディア属、プロテウス属、プロビデ
   ンシア属、セラチア属、スフィンゴバクテリウム属、ス
   タフィロコッカス属およびツカムレラ属に属する微生物
   よりなる群から選ばれたものである、請求項１記載の製
   造方法。
3. 【請求項３】 使用する微生物がボトリオアスカス・シ
   ナエデンドラス、ブレタノマイセス・カステルシアヌ
   ス、キャンディダ・メリニ、キャンディダ・パラルゴ
   サ、キャンディダ・ルゴサ、シテロマイセス・マトリテ
   ンシス、クラビスポラ・ルシタニアエ、クリプトコッカ
   ス・フミコーラス、デバリオマイセス・ハンセニ・バー
   ・ハンセニ、ディポダスカス・オベテンシス、ゲオトリ
   カム・エリエンス、ギリエルモンデラ・セレノスポラ、
   ホルモアスカス・プラチポディス、ヒポピキア・ブルト
   ニ、クロエケラ・コルチシス、クリベロマイセス・マル
   クシアヌス、ロッデロマイセス・エロンギスポラス、メ
   ッチニコビア・ビカスピダタ、ピキア・アノマラ、ピキ
   ア・メンブランアエファシエンス、ロードトルラ・グラ
   ミニス、ロードスポリディウム・ディオボバタム、サッ
   カロマイセス・セルビッシェ、サッカロマイコプシス・
   マランガ、シゾブラストスポリオン・コバヤシ、シゾサ
   ッカロマイセス・ポンベ、スバニオマイセス・オシデン
   タリス・バー・オシデンタリス、スポリディオボラス・
   ジョンソニ、ステファノアスカス・シフェリ、トルラス
   ポラ・デルブルエッキ、トリコスポロン・ベイゲリ、ト
   リゴノプシス・バリアビリス、ヤロビア・リポリティ
   カ、チゴサッカロマイセス・バイリ、アシディフィリウ
   ム・クリプタム、アースロバクター・クリスタロポイエ
   テス、バシラス・セレウス、バシラス・サブチルス、ブ
   レビバクテリウム・インセルタム、ブレビバクテリウム
   ・スタティオニス、シトロバクター・フレウンディ、コ
   リネバクテリウム・フラベセンス、エンテロバクター・
   アエロジェネス、エルビニア・カロトボーラ・サブスピ
   ーシーズ・カロトボーラ、クレブシエラ・ネウモニア
   エ、ミクロコッカス・ルテウス、モルガネラ・モルガニ
   ・サブスピーシーズ・モルガニ、ノカルディア・メキシ
   カナ、プロテウス・インコンスタンス、プロテウス・レ
   ットゲリ、プロビデンシア・スチュアリティー、セラチ
   ア・マルセッシェンス、スフィンゴバクテリウム・スピ
   リチボラム、スタフィロコッカス・アウレアスおよびツ
   カムレラ・パウロメタボラムよりなる群から選ばれたも
   のである請求項１記載の製造方法。
4. 【請求項４】 微生物の処理物が熱処理を施した微生物
   の菌体である請求項１、２または３記載の製造方法。
5. 【請求項５】 微生物の処理物が微生物の菌体よりえた
   酵素液である請求項１、２または３記載の製造方法。
6. 【請求項６】 一般式（Ｉ）におけるＲがフェニル基、
   ４−イソブチルフェニル基および６−メトキシ−２−ナ
   フチル基よりなる群から選ばれたものである請求項１記
   載の製造方法。
7. 【請求項７】 使用する微生物がクリプトコッカス・フ
   ミコーラス、ゲオトリカム・エリエンス、ギリエルモン
   デラ・セレノスポラおよびアースロバクター・クリスタ
   ロポイエテスよりなる群から選ばれたものであって、２
   −アリール−１−プロパノールの一方の光学活性体を立
   体反転させた光学活性な２−アリールプロピオン酸をう
   ることを特徴とする請求項１記載の製造方法。