JPH09501425A

JPH09501425A - 酸素欠乏性組織に局在する放射性金属錯体

Info

Publication number: JPH09501425A
Application number: JP7506288A
Authority: JP
Inventors: アーチャー，コリン・ミル; バーク，ジェームズ・フレデリック; カニング，ルイス・リューベン; エドワーズ，バーバラ; キング，アダム・チャールズ
Original assignee: アマーシャム・インターナショナル・ピーエルシー
Priority date: 1993-08-04
Filing date: 1994-08-03
Publication date: 1997-02-10
Anticipated expiration: 2015-09-04
Also published as: HUT73672A; CA2168652A1; EP0712315A1; US5997843A; IL110571A0; WO1995004552A2; JPH10338649A; HU9600228D0; JP3083157B2; JP3190615B2; WO1995004552A3

Abstract

(57)【要約】本発明はリガンド、例えばアルキレンアミンオキシム、特にブチレンアミンオキシム環構造に基づくリガンド、及びその放射性金属錯体に関する。本放射性金属錯体は腫瘍及び酸素欠乏性組織中に局在することができ、そしてイメージング及び放射線治療に使用できる。

Description

【発明の詳細な説明】酸素欠乏性組織に局在する放射性金属錯体Ａ従来技術の検討１リガンド系ＵＳ４６１５８７６はブリッジング基中に２〜４個の炭素を有するジアミンジオキシム（またはビスアミノオキシム）の中性テクネチウム錯体を開示する。安定な比較的親油性のテクネチウム錯体を形成するＰｎＡＯが強調される。ＰｎＡＯアナログ及び誘導体が、（ＰｎＡＯ−脂肪酸複合体（複合体）を使用した）脳のイメージング及び心筋の代謝の研究を含む種々の放射性医薬用途のために開示される。製造された、ブチレンでブリッジされたリガンド錯体のみが、中性で安定でありそしてＴｃ−ＰｎＡＯよりも親油性の少ないことを示した、ペアレントＴｃ−ＢｎＡＯであった。Ｖｏｌｋｅｒｔら⁽¹⁾（１９８４）は、ＥｎＡＯ、ＰｎＡＯ及びＢｎＡＯの^99m Ｔｃ錯体の放射性標識及びラットの生体分布（biodistribution）を研究した。⁹ ^9m Ｔｃ−ＢｎＡＯはわずかな脳取込みを示すことが見出された（３０秒ｐｉでの０．１２％注入用量）が、Ｔｃ−ＥｎＡＯ及びＴｃ−ＰｎＡＯでは数値はそれぞれ０．７４％及び１．３％であった。結果として、続く放射性医薬の開発はＰｎＡＯリガンドに焦点を合わせ、そしてデスメチル化（desmethylated）ＰｎＡＯアナログがテクネチウム脳イージング剤として特許された（ＵＳ４７８９７３６及びＵＳ４８１８８１３）。Ｂｕｄｓｋｙら⁽²⁾（１９９０）は、示されたＢｎＡＯアナログ（ｎ＝４）の合成を概説する。従って、Ｔｃ−ＢｎＡＯが最初に１９８４年に開示されたにも関わらず、このリガンド系についての放射性医薬用途が記述されたことがない。Ｊｕｒｉｓｓｏｎら⁽³⁾ は、ｎ＝２〜５の一連のジアミンジオキシムのテクネチウム錯体の特徴を述べた。⁹⁹Ｔｃ錯体のＸ線結晶構造は、ＥｎＡＯ及びＰｎＡＯ⁽⁴⁾の両方がＴｃ（Ｖ）モノクソ核をもつテクネチウム錯体を与えるが、ＰｅｎｔＡＯはＴｃ（Ｖ）ジオクソ核を有することを確認した。⁹⁹ Ｔｃ−ＢｎＡＯは結晶図的に特徴づけられていないが、赤外データはジオクソ核を示唆する。Ｔｒｏｕｔｎｅｒら⁽⁵⁾（１９８６）はＥｎＡＯアナログと膨張キレート環（Ｈ₂ ｄｄｄｏ）とのテクネチウム錯体を開示する。この錯体はＴｃ−ＰｎＡＯよりも親油性が低いことが見出された。２ヒポキシアのイメージング酸素欠乏性(hypoxic) 細胞に選択的に集中する放射性医薬は、それらによって、梗塞の危険にある、潜在的に救助可能な組織の診断ができるので望ましい。イメージングに重要な臓器は心臓及び脳を含む。ある種の腫瘍も酸素欠乏性であることが既知であり、ヒポキシア−特異な放射性医薬が腫瘍の診断及び放射線治療にも使用できる。ヒポキシア−選択性の放射性医薬が抹消血管の病気にも有用である得ることもまた考えられる。ミソニダゾールのような放射線増感剤を含む種々のニトロ−へテロ芳香族化合物が酸素欠乏性細胞中に捕らえられることが知られている。好ましい例は２−ニトロイミダゾールである。¹⁸Ｆ−放射性標識及び放射性ヨウ素化されたミソニダゾールアナログ類がヒポキシアイメージング剤として記述され、そしてそれは¹² ³ Ｉ−ヨードアゾミシンアラビノサイド（ＩＡＺＡ）^(6.7)及び¹⁸Ｆ−ミソニダゾール⁽⁸⁾を含む。放射性医薬用イメージングとして好ましい同位体は、その入手可能性とイメージング特性によって^99mＴｃである。放射性金属（例えば^99mＴｃ、¹⁸⁶Ｒｅまたは¹⁸⁸Ｒｅ）ヒポキシア剤をデザインする従来の技術は、放射性金属リガンドとニトロイミダゾールのようなヒポキシア−局在部分との複合体に基づく。従って、ＥＰ４１７８７０はジアミンジフェノールとＰｎＡＯリガンドとのニトロイミダゾール複合体を請求する。インビトロの細胞モデル内で２：８の酸素欠乏性／オキシック（ｏｘｉｃ）比を有するジアミンジフェノール−ニトロイミダゾール複合体と^99mＴｃ錯体との錯体が開示される。ＥＰ４４１４９１Ａ１は、ホウ素酸(boronic acid)部分がニトロヘテロ芳香族ヒポキシア−局在部分で官能化(functionalize) されている、ホウ素封止トリス（ジオキシム）”ＢＡＴＯ”テクネチウム錯体を開示する。ＥＰ５４４４１２Ａ２は、少なくとも１つのヒポキシア−局在化部分で官能化された、一連のジアミンジオキシム（ｎ＝２〜５）及びＮ₂Ｓ₂ジアミンジチオールリガンドを請求する。このようなヒポキシア局在基はこの出願の７〜１０頁及び請求項１８〜２２に詳細に記述されている。記述されている局在基は広い範囲のニトロヘテロ環を含む。これを支持する実施例は２つの特別なリガンド系 −ＰｎＡＯ及びＢＡＴに限定されるが、これらのリガンドのいくつかの２−及び４−ニトロイミダゾール複合体が製造される。ＰｎＡＯ以外のジアミンジオキシムの実施例は開示されていない。実際、ＥＰ５４４４１２の第６〜７頁は、このようなリガンドのテクネチウム錯体がモノクソ核（Ｔｃ＝０）を有するだけであろう予測し、そのときはＴｃ −ＰｅｎｔＡＯ（ｎ＝５）がジオクソ核⁽³⁾ を有することがこの分野では周知であり、そしてＴｃ−ＢｎＡＯは同様であると考えられる⁽³⁾ 。記載されたＰｎＡＯ−ニトロイミダゾールのテクネチウム錯体は、種々のインビトロの選別(scree n)において、中程度のヒポキシア選択性を示す。ＵＳ５０２６６９４は放射線増感剤として少なくとも１つのニトロヘテロ環式リガンド（例えばニトロイミダゾール）を含む正方形平面プラチナ錯体を請求する。酸素欠乏性腫瘍をイメージングするための⁹⁹Ｔｃ（ｓｉｃ）、¹³¹Ｉまたは¹¹¹Ｉｎとの錯体のような放射性標識のアイデアが開示される。しかし、テクネチウムまたはインジウムについて、このことは二核錯体を必要とし、従って他のキレートー放射線増感剤複合体に対して概念において違わない。ＵＳ５１００８８５は、銅（ＩＩ）錯体が放射線増感剤及び放射線保護医薬として既知であり、そしてどちらのモードの活動が優勢であるかを予測することが不可能であることを示す。ＵＳ５１００８８５は、放射性増感剤として二酸またはジフェノールのような二座酸素リガンドとジピリジルまたはフェナントロリンとの混合リガンドＣｕ（ＩＩ）錯体を開示する。イメージングのための放射性金属の使用は開示される、そして記載された錯体は本出願で請求されるものと完全に異なる。Ｂ本発明本発明は、酸素欠乏性細胞中に選択的に局在できる放射性金属錯体を形成する、一定範囲のリガンドを開示する。放射性金属（例えば^99mＴｃ）ヒポキシア− ターゲティング剤を設計するためのアプローチは単に、ニトロヘテロ環、特にニトロイミダゾールのような既知のヒポキシア−局在またはターゲティング部分のキレート複合体を製造することである。ある種のリガンド系が酸素欠乏性細胞、すなわち複合されたターゲティング分子（例えばニトロイミダゾール）中に局在する固有特性をもつ放射性金属錯体を形成することが、本発明の驚くべき発見である。さらに、これらの放射性金属錯体（特に^99mＴｃの錯体）は、従来の技術の錯体よりもかなり高い酸素欠乏性細胞に対する選択性を示すことが明らかにされた。一面において、本発明は酸素欠乏性組織のイメージング及び放射線治療のための放射性金属錯体を提供する。放射性金属錯体は置換または非置換のもので、これによってこのような錯体は腫瘍または酸素欠乏組織中に局在する固有特性を有し、そしてここでリガンドはヒポキシア−局在部分によって置換されていない。このリガンドは好ましくは次の構造式を有するジアミンジオキシムである：（式中、ｎ＝２〜５、ｍ＝０、１、２、Ｙは独立してＨまたはＲ、Ｒ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式;ヘテロアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂ 若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ−アミド基を形成でき、Ａ及びＢは独立して選択され、そして： − Ａ及びＢの各々のいずれかは−ＣＲ₂−であるか、 − またはＡＡ及び／若しくはＢＢが−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｎ＝Ｎ−、 −ＮＲ−ＮＲ−若しくは−Ｎ＝ＣＲ−であるか、 − またはＡＡＡが-ＣＲ₂−Ｏ−ＣＲ₂−、−ＣＲ₂−Ｓ−ＣＲ₂− 若しくは−ＣＲ₂−ＮＲ−ＣＲ₂−である）。これらの錯体は通常中性である。放射性金属は好ましくはテクネチウム、レニウム、ロジウムまたはコバルトである。イメージングの目的のために、放射性金属は好ましくはテクネチウム−９９ｍであり、そして錯体は好ましくは式［ＴｃＯＬ］（Ｌはリガンド）を有する。他の面において、本発明は腫瘍または酸素欠乏性組織内に局在する固有特性を有する、次の構造を有する錯体を提供する：［式中、少なくとも１つのＲは−Ａ−Ｒ²（Ａは結合基であり、Ｒ²はヒポキシア局在化部分である）、Ｙは独立してＨまたはＲ、そして他のＲ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式；ヘテリアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂ 若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ− アミド基を形成し得る］。記述したリガンドは腫瘍または酸素欠乏性組織内に局在する固有特性を有するが、それにもかかわらずリガンドをヒポキシア局在部分へ結合することが可能である。本発明の他の面において、記述したある種のリガンド（これは所望によってヒポキシア局在部分へ結合し得る）自体が新規化合物として、それらの放射性金属錯体とともに請求される。ヒポキシア−局在部分、及びそれらを金属−キレート化部分へ結合するための技術は、参照によって本明細書中に組み込まれるＷＯ９４／０８９４９に記述されている。他の面において、本発明は好ましくは凍結乾燥状態にある第１スズ還元剤と共に、記述したリガンドを含む放射性イメージングキットであって、^99mＴｃパーテクネテートの添加の際に放射性イメージングのための錯体を形成するのに適合したものを提供する。さない他の面において、本発明は定義された錯体の有効量を患者に投与することを含む、患者の酸素欠乏性組織のイメージングまたは放射線治療のための方法を提供する。単離灌流心臓モデル（実施例２１）における酸素欠乏性細胞取込み試験は、化合物５の従来技術の^99mＴｃ錯体のヒポキシア選択性の多くは、事実Ｔｃ−ＰｎＡＯそれ自身によることを示す。この影響は化合物Ｉ（ＢｎＡＯ）の^99mＴｃ錯体についてさらに顕著に認められ、これは相当するニトロイミダゾール複合体、すなわち^99mＴｃ−化合物ＩＩよりも有意に大きな酸素欠乏性細胞選択性を示す。第２のニトロイミダゾール（化合物ＸＩ）の導入はヒポキシア選択性をさらに減じただけである。 ^99mＴｃ化合物ＶＩＩと化合物ＸＩＩとの比較は、エチル基とニトロイミダゾール環との交換は酸素欠乏性／オキシック比及び標準化された酸素欠乏性保持に対してほとんどまたは全く影響を有しないことを示す。従って、放射性金属錯体の固有特性が主としてヒポキシア選択性の原因であるので、ニトロイミダゾール「ヒポキシア−局在部分」は放射性金属錯体のターゲティングに最小の効果を有する。ニトロイミダゾール複合体で観察された相違はおそらく錯体の親油性／親水性バランスの単純な変化に大きく起因し得る。本発明は、ある種の放射性金属錯体が固有のバイオ還元特性を有することを示す。すなわちそれらは哺乳類の体のヒポキシア領域内で、次に補足される（未知の）種へ還元されて、ヒポキシア選択性の放射性医薬を与える。ある種のテクネチウムジアミンジオキシム錯体の還元可能性の他の指標は、還元できる部分についての非特異化学スポット試験−亜鉛／アンモニア試験の使用である。実施例１９ａは、このような条件下で、検討したテクネチウム錯体の多くが、それらがニトロイミダゾールを含むか含まないかに関わらず、新しい種へと還元を受けることを示す（ＨＰＬＣにより証明された）。ＰｅｎｔＡＯリガンド及びゆえにＴｃ（Ｖ）ジオクソ核を有する^99mＴｃ−化合物ＩＶはＺｎ／ＮＨ₃に対して不活性のようであり、そしてまたＩＰＨ選別において非常に小さいヒポキシア選択性を示すことに注意することは重要である。^99mＴｃ−化合物のラジカル的に異なった挙動は、文献の結論⁽³⁾に反して、Ｔｃ−ＢｎＡＯがジオクソ核を有さず、そしてこれは錯体のバイオ還元特性にきわめて重大なことであることを示す。ＥＰ５４４４１２Ａ２（実施例８ａ）は、⁹⁹Ｔｃ−ＰｎＡＯ（化合物Ｘ）がレダクターゼ酵素キサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）によって還元されないことを報告している。しかしこの発明は、ＰｎＡＯを含む多くの^99mＴｃ−リガンド錯体がキサンチンオキシダーゼによって還元されることを示す（実施例１９ｂを参照）。⁹⁹Ｔｃ錯体に対して^99mＴｃ−ＰｎＡＯについて観察された異なる挙動は、おそらく分析に使用した放射性金属の濃度による。本発明のリガンドは図１〜５及び実施例１〜１７に従って合成されることができる。Ｄ試験２−（４−アミノブチル）アミノ−２−メチル−３−ペンタノンオキシムの合成がここに記述される。３−（４−アミノブチル）アミノ−３−メチル−２− ブタノンオキシム、３−（５−アミノペンチル）アミノ−３−メチル−２−ブタノンオキシム及び２−（４−アミノブチル）アミノ−２−メチル−１−プロパナルオキシムが類似の方法を使用して製造された。Ｈ₂ｄｄｄＯがＳｃｈｌｅｍｐｅｒら⁽¹⁰⁾の方法によって製造された。ｉ）２−（４−アミノブチル）アミノ−２−メチル−３−ペンタノンオキシムの合成１，４−ジアミノブタン（０．２６ｇ；２．９ミリモル）及びトリメチルアミン（０．３３ｇ；３．２ミリモル）のアセトニトリル（５ｍＬ）中の撹拌された溶液に、２−クロロ−２−メチル−３−ニトロソペンタン（０．４８５ｇ；３．２４ミルモル）のアセトニトリル（５ｍＬ）中の溶液を加えた。約１０分撹拌した後、生成物が沈殿し始めた。反応混合物を一晩撹拌し、そして生成物をろ別して真空下で乾燥して白色粉末（０．５ｇ；８６％）を得た．分析：融点：１２５〜１２８℃ ii）３−（４−アミノブチル）アミノ−３−メチル−２−ブタノンオキシム分析：融点：６２〜６４℃ iii）３−（５−アミノペンチル）アミノ−３−メチル−２−ブタノンオキシム分析：融点：１７４〜１７６℃ iv）２−（４−アミノブチル）アミノ−２−メチル−１−プロパナルオキシム分析：融点：１３６〜１３７℃ ２−クロロ−２−メチル−３−ニトロソペンタンの合成乾燥塩化水素ガスを、−２０℃に冷却した２−メチル−２−ペンテン（２０ｇ、２３７ミリモル）と亜硝酸イソ−アミル（５５．６７ｇ、４７５ミリモル）との混合物内に通した。反応混合物を０℃で一晩撹拌し、そして沈殿した物質を次にろ別しそして冷（−２０℃）エタノール（３×５ｍＬ）で洗った。生成物を空気流の中で乾燥し、そしてさらに精製することなく使用した（１３ｇ、３６％）。分析融点：８３〜８５℃ Ｎ−［３−クロロ−２−（ヒドロキシイミノ）−３−メチルブチル］−２−ニトロイミダゾールの合成２−ニトロイミダゾール（２ｇ、１７．７ミリモル）を水酸化ナトリウム（０．７６ｇ、１９ミリモル）の水（２０ｍＬ）中の溶液に加えた。溶液を室温で約１時間撹拌し、減圧下で水を除去し、そして残留物を真空下に少なくとも約３時間乾燥した。上で製造した２−ニトロイミダゾールのナトリウム塩に、アセトニトリル（５０ｍＬ）、１５−クラウン−５−エーテル（３．５ｍＬ，１４．３ミリモル）及び４−ブロモ−２−メチル−ブテン（２ｍＬ、１７．４ミリモル）を加えた。混合物を室温で約１６時間撹拌し、そして次に溶媒を除去して粗半固体を得、これをシリカ上のカラムクロマトグラフィーによって精製した。中間生成物、１−（３−メチル−２−ブテニル）−２−ニトロイミダゾール（８０％収率）を、石油エーテル（４０〜６０）／酢酸エチル（比がそれぞれ４：１）の混合物を使用して溶離した。第１工程のＮ−アルキル化生成物（１．０ｇ、５．５ミリモル）を亜硝酸イソ −アミル（１．０ｍＬ、７．４ミルモル）中に室温で溶解し、そして次に氷浴（外側温度−８℃）中で冷却した。濃塩酸（０．９ｍＬ、３６％ＨＣｌ）を撹拌しながら滴加した。−２０℃で一晩貯蔵する前に、反応物を約１５分撹拌した。氷酢酸（１０ｍＬ）を加え、そして混合物を−２０℃に約３０〜３５分維持した。メタノール（１０ｍＬ、冷）を加え、そして反応混合物を−１５℃で約３時間貯蔵した。これから白色沈殿が形成された。生成物を非常に迅速にろ過し、氷冷メタノール（５ｍＬ）で洗浄し、そして次に真空下に乾燥して白色粉末の化合物を得た。分析：融点：９４〜９６℃ｄｅｃ．実施例１４，９−ジアザ−３，３，１０，１０−テトラメチルドデカン−２，１１−ジオンジオキシム（化合物Ｉ、ＢｎＡＯ）の合成アルゴン入口、還流冷却器、オーバーヘッド撹拌機及び均圧滴加ロートを備えた３リットル３つ首フラスコ内にアセトニトリル（１０００ｍＬ）、１，４−ジアミノブタン（１９．５ｇ、０．２３モル）及び重炭酸ナトリウム（３７．２ｇ、０．４６モル）を加えた。この混合物をアルゴン雰囲気下に周囲温度で激しく撹拌し、不溶性の重炭酸塩のサスペンジョンを維持した。２−クロロ−２−メチル−３−ニトロソブタン（６０ｇ、０．４６モル）をアセトニトリル（６００ｍＬ）中に溶解し、そして撹拌しながら反応容器へ約１５〜２０分間にわたり滴加した。添加につづいて、反応混合物をさらに１時間撹拌し、そして次に約６０℃ へ３０分間加熱した。反応混合物を室温まで放冷し、そして生じた白色固体（ＮａＨＣＯ₃／ＮａＣｌ及び生成物）をろ別した。望まれる生成物が熱メタノール内に抽出され、熱ろ過され、溶液が約５０％体積に濃縮され、冷却され、そして再ろ過された。固体物質を最小限の体積の塩酸（０．１Ｍ）中に溶解し、そして、水酸化ナトリウム（０．１Ｍ）を使用して溶液のｐＨをｐＨ＝１１に調節することによって沈殿として純粋な生成物を単離した。生成物のろ過及び乾燥の後、熱メタノールから再結晶して４，９−ジアザ−３，３，１０，１０−テトラメチルドデカン−２，１１−ジオンジオキシムを白色針（２０ｇ、３０．４％）として得た。分析：融点：１８３〜１８６℃ 実施例２３，３，１０，１０，−テトラメチル−１−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾ− １−イル−４，９−ジアザドデカン−２，１１−ジオンジオキシム（化合物ＩＩ）の合成１−（２−ニトロ−１−イミダゾラ）−３−クロロ−３−メチルブタン−２− オン−２−モノオキシム（６５６ｍｇ、２．６６ミリモル）の無水エタノール（７０ｍＬ）中の溶液を、３−（４−アミノブチル）−アミノ−３−メチル−２− ブタノンオキシム（５００ｍｇ、２．６６ミリモル）と重炭酸ナトリウム（１ｇ、１１．９７ミリモル）との、乾燥アセトニトリル（３５ｍＬ）と無水エタノール（３５ｍＬ）との混合物中のスラリーへ、約１０’の間にわたり加えた。反応混合物を約７２時間撹拌し、次に溶媒を減圧下に除去した。水（３０ｍＬ）を残油に加え、そしてスラリーをＨＣｌ（２Ｍ）を使用してｐＨ＝４に酸性化し、透明な溶液を得た。水層へのＮａＯＨ（２Ｍ）の滴加の前に、全ての有機不純物をジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）中に抽出した。ｐＨ＝１０〜１１で、生成物を溶液から沈殿させ、そして空気中でろ過によって単離し、水で洗浄し、そして真空下に乾燥してクリーム色の粉末として化合物ＩＩを得た。分析：融点：１５１〜１５２℃ 実施例３４，１０−ジアザ−３，３，１１，１１−テトラメチルトリデカン−２，１２ −ジオンジオキシム（化合物ＩＩＩ，ＰｅｎｔＡＯ）の合成この化合物は文献の方法⁽³⁾に従って製造した。分析：融点：１３０〜１３２℃ 実施例４３，３，１１，１１−テトラメチル−１−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾ−１ −イル）−４，１０−ジアザトリデカン−２，１２−ジオンジオキシム（化合物ＩＶ）の合成この化合物は、３−（４−アミノブチル）アミノ−３−メチル−２−ブタノンオキシムを３−（５−アミノペンチル）アミノ−３−メチル−２−ブタノンオキシムに代えて、化合物ＩＩのために使用した方法によって製造した。分析：融点：１３５〜１３７℃ 実施例５３，３，９，９−テトラメチル−１−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾ−１−イル）−４，８−ジアザウンデカ−２，１０−ジオンジオキシム（化合物Ｖ、従来技術）の合成この化合物をＳｑｉｂｂの特許：ＥＰ５４４４１２Ａ２（２０〜２１頁の実施例１を参照）に記述される方法によって製造した。分析：融点：１４６〜１４８℃ 実施例６３，８−ジアザ−２，２，９，９−テトラメチルデカン−１，１０−ジアルジオキシム（化合物ＶＩ）の合成この化合物を２−クロロ−２−メチル−１−ニトロソプロパンを使用して公開されたＰｎＡＯの合成⁹に類似した方法で製造した。分析：融点：１６５〜１６８℃ 実施例７３，８−ジアザ−１０−（ヒドロキシイミノ）−２，２，９，９−テトラメチルドデカナルオキシム（化合物ＶＩＩ）の合成２−（４−アミノブチル）アミノ−２−メチルプロパナルオキシム（０．５ｇ、２．９ミリモル）のメタノール（５ｍＬ）中の撹拌された溶液に、２−クロロ−２−メチル−３−ニトロソペンタン（０．４４ｇ、２．９ミリモル）のアセトニトリル（５ｍＬ）中の溶液を加えた。反応混合物を一晩撹拌し、そして固体をろ別し、そしてメタノールから再結晶した。真空中で乾燥した後、生成物は無色の針を与えた（０．４６ｇ、５８％）。分析：融点：１８５〜１８８℃ 実施例８５，１０−ジアザ−４，４，１１，１１−テトラメチルテトラデカン−３，１２ −ジオンジオキシム（化合物ＶＩＩＩ）の合成２−（４−アミノブチル）アミノ−２−メチル−３−ペンタノンオキシム（０．２ｇ、１ミリモル）とトリエチルアミン（０．１１ｇ、１ミリモル）とのメタノール（５ｍＬ）中の撹拌した溶液に、２−クロロ−２−メチル−３−ニトロソペンタン（０．１１６ｇ、１．０８ミリモル）のアセトニトリル（５ｍＬ）中の溶液に加えた。反応混合物を一晩撹拌し、そして真空中で溶媒を除去して粗生成物を得た。この物質をメタノールに溶解し、そしてジエチルエーテルの添加によって生成物を沈殿させた。ろ過後、生成物を真空中で乾燥し、白色粉末を得た（０．１８ｇ、５８％）。分析：融点：１９４〜１９７℃ 実施例９４，９−ジアザ−３，３，１０，１０−テトラメチルトリデカン−２，１１−ジオンジオキシム（化合物ＩＸ）の合成３−（４−アミノブチル）アミノ−３−メチル−２−ブタノンオキシム（０．５ｇ、２．６７ミリモル）とトリエチルアミン（０．３ｇ、２．９ミリモル）とのメタノール（５ｍＬ）中の撹拌した溶液に、２−クロロ−２−メチル-３− ニトロソペンタン（０．４３ｇ、２．９ミリモル）のアセトニトリル（５ｍＬ）中の溶液に加えた。反応混合物を一晩撹拌し、そして真空中で溶媒を除去して粗生成物を得た。この物質をメタノールに溶解し、そしてジエチルエーテルの添加によって生成物を沈殿させた。ろ過後、生成物を真空中で乾燥し、白色粉末を得た（０．４６ｇ、５７％）。分析：融点：１９０〜１９３℃ 実施例１０１，１２−ビス（２−ニトロ−１−イミダゾリル）−４，９−ジアザ−３，３，１０，１０−テトラメチルドデカン−２，１１−ジオンジオキシム（化合物ＸＩ）の合成１，４−ジアミノブタン（９０ｍｇ、１ミリモル）とトリエチルアミン（２００ｍｇ、２ミリモル）とのメタノール（１０ｃｍ³）中の溶液に、１−（３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソ）ブチル−２−ニトロイミダゾール（５００ｍｇ、２ミリモル）のアセトニトリル（１０ｃｍ³）中の溶液を滴加した。反応混合物を４８時間撹拌し、その後反応混合物をろ過した。固体物質は１，１２−ビス（２−ニトロ−１−イミダゾリル）−４，９−ジアザ−３，３，１０，１０−テトラメチルドデカン−２，１１−ジオンジオキシム（１６５ｍｇ、３５％）であることが分かった。分析：融点：１６８〜１７０℃ 実施例１１３，８−ジアザ−１０−ヒドロキシイミノ−１１−（２−ニトロ−１−イミダゾリル）−２，２，９，９−テトラメチルウンデカナルオキシム（化合物ＸＩＩ）の合成２−（４−アミノブチル）アミノ−２−メチルプロパナルオキシム（１９１ｍｇ、１．１ミリモル）とトリエチルアミン（１２１ｍｇ、１．２１ミリモル）のメタノール（１０ｃｍ³）中の撹拌溶液に、１−（３−クロロ−３−メチル− ２−ニトロソ）ブチル−２−ニトロイミダゾール（３００ｍｇ、１．２１ミリモル）のアセトニトリル（１０ｃｍ³）中の溶液を加えた。反応混合物を一晩撹拌し、そして次に揮発成分を真空中で除去して黄色の半固体の物質を残した。この生成物を次に水（１０ｃｍ³）中に取り、そして不溶性の物質をろ過して除いた。ろ液を、５０：５０メタノール／水での逆相ＨＰＬＣ溶離を使用して精製し、化合物ＸＩＩを黄色の粘稠な油（４０ｍｇ、１０％）として得た。分析：実施例１２４，９−ジアザ−３，１０−ジメチルドデカン−２，１１−ジオンジオキシム（化合物ＸＩＩＩ）の合成Ａ４，９−ジアザ−３，９−ジエン−３，１０−ジメチルドデカン−２，１１ −ジオンジオキシムブタン−２，３−ジオンモノオキシム（１０．１１ｇ、０．１モル）をベンゼン（１２５ｃｍ³）中に溶解し、還流下に加熱した。１，４−ジアミノブタン（３．９７ｇ、４５ミリモル）のベンゼン（１００ｃｍ³）中の溶液を５時間にわたって滴加し、加熱を一晩続けた。冷却するとクリーム色の固体が沈殿し、真空ろ過で単離し、そしてそれ以上の精製なしに使用した（１０．８ｇ、９４％）。分析：４，９−ジアザ-３，１０−ジメチルドデカン−２，１１−ジオンジオキシムナトリウムボロハイドライド(borohydride)（０．３ｇ、７．８５ｍｍモル）を、撹拌された、上で製造したジイミン（２ｇ、７．８５ミリモル）の無水エタノール（２０ｃｍ³）中の前以て冷却された（氷塩）溶液に３０分間にわたって滴加した。反応混合物をさらに２時間撹拌し、次に水（１０ｃｍ³）を加え、そして水層のｐＨを希ＨＣｌの添加によって中性にした。溶媒を真空中で除去して白色粉末を得た。この物質の試料を溶離剤として水／メタノール（５０：５０）を使用した逆相ＨＰＬＣを使用して精製し、無色の固体を得た。分析：融点：２１０℃（分解）元素分析：Ｃ₁₂Ｈ₂₆Ｎ₄Ｏ₂ 予測：Ｃ５５．７９、Ｈ１０．１４、Ｎ２１．６９実測：Ｃ５５．７２、Ｈ１０．４４、Ｎ２１．１８実施例１３Ｎ，Ｎ’−ビス（４−アセチル−テトラヒドロピラン−４−イル）−１，４−ジアミノブタンジオキシム（化合物ＸＩＶ）の合成４−クロロ−４−（１−ニトロソエチル）テトラヒドロピラン（５００ｍｇ、２．９１ミリモル）のアセトニトリル（１５ｃｍ³）中の溶液に、１，４−ジアミノブタン（１２０ｍｇ、１．３６ミリモル）とトリエチルアミン（３００ｍｇ、２．９８ミリモル）との撹拌溶液に加えた。添加すると、白色固体が反応混合物から沈澱した。反応をさらに１５分間撹拌したままにし、その後固体物質を真空下にろ別した。メタノールから再結晶して白色粉末として生成物（１５０ｍｇ、３０％）を得た。分析：融点：１８３℃ 実施例１４３，１０−ビス（メトキシメチル）−４，９−ジアザ−１，１２−ジメトキシ− ３，１０−ジメチルドデカン−２，１１−ジオンジオキシム（化合物ＸＶ）の合成２−クロロ−２−メトキシメチル−４−メトキシ−３−ニトロソブタン（０．１９ｇ、１．２ミリモル）のアセトニトリル（２．５ｍＬ）中の溶液を、１，４ −ジアミノブタン（４４ｍｇ、０．６ミリモル）と重炭酸ナトリウム（０．２５ｇ）とのアセトニトリル（２．５ｍＬ）中の撹拌サスペンジョンに加えた。添加に続いて、反応混合物を還流下に約５時間加熱し、そして室温でさらに約７２時間撹拌した。真空中で溶媒を除去した後、水（３０ｍＬ）を残油に加え、スラリーをＨＣｌ（２Ｍ）を使用してｐＨ＝４に酸性化して澄明な溶液を得た。ＮａＯＨ（２Ｍ）の水層への滴加の前に有機不純物をジエチルエーテル内に抽出した。ｐＨ＝１０〜１１において、生成物をジクロロメタン（３×５０ｍＬ）中へ抽出した。ジクロロメタン画分を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、そして乾燥状態にして無色の半固体を得た。この物質の試料を次の条件を使用した逆相クロマトグラフィーによって精製した。カラム：ＰＲＰ１溶媒Ａ：Ｈ₂Ｏ溶媒Ｂ：ＭｅＣＮフロー：２．５ｍＬ／分グラディエント：１５分間にわたり、０〜１００％溶媒Ｂ検出器：Ｕ．Ｖ、波長２１０ｎｍに設定保持時間：１３．５分分析実施例１５４，９−ジアザ−３，３，１０，１０−テトラメチルドデカン−２，１１−ジオンジオキシム−８−カルボン酸メチルエステル（化合物ＸＶＩ）窒素雰囲気下に撹拌した、ナトリウムエトキシド（乾燥エタノール２０ｍＬ中にＮａ２９４ｍｇ）の新たに調製した溶液に、Ｌ−オルニチン．ＨＣｌ（１ｇ、６ミリモル）を加えた。反応混合物を約１時間室温で撹拌し、次に溶媒を真空中で除去した。この反応から生じた遊離塩基をただちに乾燥アセトニトリル（１０ｍＬ）と乾燥エタノール（１５ｍＬ）との混合物に再溶解して、撹拌した。２− クロロ−２−メチル−３−ニトロソブタン（１．５８ｇ、１２ミリモル）と重炭酸ナトリウム（４．５Ｍｅｑ）とのアセトニトリル中のスラリーを、遊離塩基Ｌ −オルニチン溶液に１０分間にわたって滴加し、そして反応混合物を室温で約１８時間撹拌した。溶媒を真空中で除去した後、水（４０ｍＬ）を残留物に加えた。生じたスラリーをＨＣｌ（２Ｍ）を使用してｐＨ＝４に酸性化して、澄明な溶液を得た。有機不純物をジエチルエーテル中（３×５０ｍＬ）に抽出した。水相をｐＨ＝１１に調節し、次に乾燥状態にした。残留物を乾燥メタノール（２０ｍＬ）に再溶解し、そして４滴のＨ₂ＳＯ₄（濃）を加えた。溶液を還流下に約４時間加熱し、室温でさらに１８時間撹拌を続けた。溶媒の真空中での除去によって、ゴム状の残留物を得、これを逆相ＨＰＬＣ（下を参照）によって精製して４，９−ジアザ−３，３，１０，１０−テトラメチルドデカン−２，１１−ジオンジオキシム−８−カルボン酸メチルエステル（１５０ｍｇ）の澄明の油を得た。ＨＰＬＣ系カラム：ＰＲＰ１溶媒Ａ：Ｈ₂Ｏ溶媒Ｂ：ＭｅＣＮフロー速度：２．５ｍＬ／分検出器：Ｕ．Ｖ、波長２１０ｎｍに設定グラディエント：２０’にわたり、０〜１００％溶媒Ｂ生成物の保持時間：４．５分分析：実施例１６５，９−ジアザ−４，４，１０，１０−テトラメチルトリデカン−２，１２−ジオンジオキシム（化合物ＸＶＩＩ）の合成Ａ５，９−ジアザ−４，４，１０，１０−テトラメチルトリデカン−２，１２ −ジオンジ（Ｏ−ベンジルオキシム）．２ＨＣｌ４−メチルペント−３−エン−２−オン（２ｇ、２０．４ミルモル）を撹拌しながら１．３−ジアミノプロパン（０．７４ｇ、１０ミリモル）に加えた。反応の進行を¹³ＣＮＭＲによってモニターし、そして２０分後、反応を停止すべきと判断した。メタノール（１０ｍＬ）及びＯ−ベンジルヒドロキシアミン塩化水素塩（３．２５ｇ、２０．４ミリモル）を、反応混合物に加えた。反応を約１時間撹拌し、その後溶媒を真空中で除去して黄色の粘稠な物質を得た。水（２０ｍＬ）を加え、生成物をジクロロメタン中に抽出した。ジクロロメタンを真空中で除去してハネカム状の固体として粗生成物を得た。水／メタノール（９５：５％）からの再結晶によって無色のプレートとして生成物を得た（３．２ｇ、６５％）。分析融点：１６３〜１６５℃ 元素分析Ｃ₂₉Ｈ₄₄Ｎ₄Ｏ₂．２ＨＣｌ．２Ｈ₂Ｏ予想：Ｃ５９．０７、Ｈ８．５５Ｎ９．５０実測：Ｃ５９．３６、Ｈ８．５５、Ｎ９．９８％Ｂ５．９−ジアザ−４，４，１０，１０−テトラメチルトリデカン−２，１２ −ジオンジオキシム上で調製したＯ−ベンジル保護物質（２００ｍｇ）のメタノール（１５ｍＬ）とギ酸（５ｍＬ）中の撹拌溶液に、乾燥窒素雰囲気下に炭素上の１０％パラジウム触媒（２０ｍｇ）を加えた。この混合物を大気圧で反応が完了するまで水素化した（約１時間）。反応混合物をガラスフリット（多孔度４）及びセライトを通してろ過し、そして次に溶媒及び他の揮発性成分を真空中で除去し、ガラス状半固体として生成物を本質的に定量的な収率で得た。完全に純粋な生成物であることを確認するために、この物質の少量を水に溶かし、そして炭酸水素ナトリウムで処理した後に溶離剤として水／メタノール（５０：５０％）を使用した逆相ＨＰＬＣを行った。生成物は粘稠な液体として単離された。分析実施例１７５，１０−ジアザ−４，４，１１，１１−テトラメチルテトラデカン−２，１３ −ジオンジオキシム（化合物ＸＶＩＩＩ）の合成Ａ５，１０−ジアザ−４，４，１１，１１−テトラメチルテトラデカン−２，１３−ジオンジ（Ｏ−ベンジルオキシム）．２ＨＣｌこの物質は、メタノール（２５ｍＬ）中の４−メチルペント−３−エン−２− オン（２ｇ、２０ミリモル）、１，４−ジアミノブタン（０．９ｇ，１０ミリモル）及びＯ−ベンジルヒドロキシルアミン塩化水素塩（３．１８ｇ、２０ミリモル）から、化合物ＸＶＩＩについて前に記載したように製造した。Ｏ−ベンジルヒドロキシルアミン塩化水素塩の添加の後、反応を一晩撹拌した。メタノールを真空中で除去して黄色の粘稠な油を得た。水（２０ｍＬ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を残留物に加え、混合物を激しく振盪した。静止させると、生成物が液体の界面から無色の針として結晶した（２．６ｇ、４７％）。分析融点：１５７〜１６０℃ 元素分析，Ｃ₃₀Ｈ₄₆Ｎ₄Ｏ₂．２ＨＣｌ．２Ｈ₂ＯＢ５，１０−ジアザ−４，４，１１，１１−テトラメチルテトラデカン−２，１３−ジオンジオキシムメタノール（１５ｍＬ）とギ酸（５ｍＬ）中の上で調製したＯ−ベンジル保護物質（２００ｍｇ）の撹拌した溶液に、乾燥窒素雰囲気下に炭素上の１０％パラジウム触媒（２０ｍｇ）を加えた。この混合物を大気圧で反応が完了するまで水素化した（約１時間）。反応混合物をガラスフリット（多孔度４）及びセライトを通してろ過し、そして次に溶媒及び他の揮発性成分を真空中で除去し、無色の半固体として生成物を本質的に定量的な収率で得た。分析実施例１８ ^99mＴｃ錯体の製造次の一般的な方法を実施例Ｉ、ＩＩ、ＶＩ〜ＩＸ、及びＸＩＩ〜ＸＶで得られたリガンドの^99mＴｃ錯体を製造するために使用した。リガンド（１ｍｇ）を０．１ＭＨＣｌ（０．１ｍＬ）及び蒸留水（０．９ｍＬ）の混合物に密封バイアル中で溶解させた。リガンド溶液のｐＨを０．１ＭのＮａＯＨを使用してｐＨ＝８に調節し、そして０．２５ＧＢｑの^99mＴｃＯ₄ ^-（１ｍＬジェネレーター溶出液）、酒石酸第１スズ（０．１ｍｇ／ｍＬ水溶液の０．３ｍＬ）及び０．９％ＮａＣｌ水溶液（３ｍＬ）を加えた。室温で約３０’放置した後、^99mＴｃ錯体のＲＣＰをＴＬＣ及びＨＰＬＣで分析した。化合物ＩＩＩ、ＩＶ、ＸＩ、Ｈ₂ｄｄｄｏ、ＸＶＩＩ及びＸＶＩＩＩの^99mＴｃ錯体の製造リガンド（０．２５ｍｇ）を０．１ＭのＨＣｌ（０．１ｍＬ）と蒸留水（０．９ｍＬ）との混合物に密封バイアル内で溶解した。リガンド溶液のｐＨを０．１ＭのＮａＯＨを使用してｐＨ＝８に調節し、そして０．２５ＧＢｑの^99mＴｃＯ₄ ^- （１ｍＬジェネレーター溶出液）、酒石酸第１スズ（０．１ｍｇ／ｍＬ水溶液の０．３ｍＬ）及び０．９％ＮａＣｌ水溶液（３ｍＬ）を加えた。室温で約３０ ’静置した後、^99mＴｃ錯体のＲＣＰをＴＬＣ及びＨＰＬＣで分析した。化合物Ｖの^99mＴｃ錯体の製造密封したバイアル中でリガンド（０．２ｍｇ）をメタノール（５０マイクロリットル）中に溶解し、そして０．２５ＧＢｑの^99mＴｃＯ₄ ^-（１ｍＬジェネレーター溶出液）、酒石酸第１スズ（０．１ｍｇ／ｍＬ水溶液の０．１ｍＬ）及び０．９％ＮａＣｌ水溶液（４ｍＬ）を混合物に加えた。室温で約３０’放置した後、＞９５％の^99mＴｃ錯体が形成されたと、ＴＬＣ及びＨＰＬＣ（ｔ_R＝９．３’ ）によって判断された。分析方法：薄層クロマトグラフィー：５０％アセトニトリル水溶液で溶離された Whatman No.1ペーパー還元加水分解Ｔｃ＝Ｒ_f ０．００．９％ＮａＣｌ水溶液で溶離されたＩＴＬＣＳＧ溶離のパーテクネート＝Ｒ_f １．０％^99mＴｃ錯体＝１００−遊離パーテクネテート−還元加水分解ＴｃＨＰＬＣ： Hamilton PRP-1カラム、２ｍＬ／分で溶離グラデュエント系１００％ｐＨ＝５．６５０ｍＭ酢酸ナトリウム〜１００％テトラヒドロフラン（１７分間にわたり）実施例１９ａ）塩化アンモニウム溶液中の亜鉛還元の試験亜鉛粉末（２０ｍｇ）をガラスバイアル中に量った。バイアルに蓋をし、オーバーシールしそして窒素ガスでパージした。窒素パージした（２ｍｇ／ｍＬ）塩化アンモニウム溶液（１ｍＬ）を亜鉛粉末を含むバイアルへ加えた。次に、１ｍＬの^99mＴｃ−錯体調製物を還元性混合物に加え、振盪し、そして１５分間静止させた。次に混合物を０．２２μｍのアクロディスク（Acrodisc）フィルター通してＮ₂を充したバイアル内にろ過した。ろ液を次にＨＰＬＣで分析した。この方法を使用して、陽性の結果が錯体のＨＰＬＣ挙動の変化によって示された。実際、このことは通常、ＨＰＬＣにおいてオリジナルの^99mＴｃ−錯体のＨＰＬＣピークの損失及び他の新しいピーク（単数または複数）の出現を含む。⁹⁹ ^m Ｔｃ−錯体のＨＰＬＣ分布における無変化は陰性の結果であると認められた。次のリガンドの^99mＴｃ−錯体は陽性の試験結果を与える：化合物Ｉ、ＩＩ、及びＩＶ−Ｘ。次のリガンドの^99mＴｃ−錯体は陰性の試験結果を与える：化合物ＩＩＩ、及びＰｅｎｔＡＯ。リン酸塩緩衝食塩液（ＰＢＳ）中のキサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）及びヒポキサンチンキサンチンオキシダーゼ（１６ｍｇ）をＰ６バイアル内に量った。バイアルの蓋を締め、オーバーシールし、そして窒素ガスでパージした。窒素でパージしたリン酸塩緩衝食塩水（１ｍＬ）をキサンチンオキシダーゼを含むバイアルに加えた。ヒポキサンチン（４．１ｍｇ）をＰ６バイアル内に量った。バイアルの蓋を締め、オーバーシールし、そして窒素ガスでパージした。ヒポキサンチンにＰＢＳ中のキサンチンオキシダーゼ（１ｍＬ）を加えた。次に、１ｍＬのリガンド溶液または１ｍＬの^99mＴｃ−錯体調製物を還元混合物に加え、振盪し、そしてアリコートを２０分間隔で取った。これらを実施例１１ａ（上記）中に与えられたＨＰＬＣによって分析した。次のリガンドの^99mＴｃ−錯体はプラスの試験結果を与えた：化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＶ、Ｖ及びＸ。実施例２０ラット内の生体内分布−方法注射後２分、１時間、及び４時間における雄ラット内の定量的な生体内分布を検討した。光感覚喪失下のラットに０．１ｍＬの試験剤を静脈注射した。注射後の２、６０及び２４０分において３匹のラットを犠牲にした（麻酔の後放血）。排出物及び臓器及び組織中の、注入用量の百分率を解剖及び自動ガンマカウンター内の放射活性についての分析によって決定した。表２は百分率注入用量として示される数字で検討された錯体についてのデータを示す。実施例２１単離され灌流された心臓試験モデルにおいて、初期均衡化期間に続いて、単離された（Langendorff）ラットの心臓をオキシックガス（９５％Ｏ₂、５％ＣＯ₂）または酸素欠乏性ガス（９５％Ｎ₂ 、５％ＣＯ₂）で処理された変性クレブズ−ヘンセレイト緩衝液と共に一定のフローで灌流した。両方の試験のために、試験剤（^99mＴｃ錯体または¹²³Ｉ−ＩＡＺＡ）の混合物、³Ｈ−ミソニダゾール及び¹⁴Ｃ−ＤＰＴＡの混合物を、２０分の間灌流液にゆっくりと注入した。１５分の冷緩衝液ウオッシュアウト期間を続けた。心臓内のｙ活性を、心臓の上に位置するコリメートされたＮａＩプローブ検出器を使用してモニターした。活性灌流液及び心臓の試料を、ｙカウント及び、標準の技術を使用した次の適切なプロセッシング、β−カウントによって分析した。灌流液の活性に対する心臓内の活性は、式Ｉを使用した³Ｈ−ミソニダゾール活性（標準化された保持）に対するものと共に、それぞれの核種並びに酸素欠乏性及びオキシックの心臓（酸素欠乏性：オキシック比）における活性についてそれぞれの化合物について評価されたデータについて計算された。結果表１に結果を示す。化合物Ｉ、化合物ＩＶ及びＰｎＡＯの^99mＴｃ−錯体についての典型的なプローブ出力データ図を添付する。実施例２２０．２０ｍｇの化合物Ｉ、０．０４ｍｇのメチレンジホスホン酸、０．０２ｍｇの塩化第１スズ・２水和物、２．８ｍｇの炭酸水素ナトリウム及び４．９ｍｇの塩化ナトリウムの凍結乾燥混合物を含む、フォームレートされた凍結乾燥キットを製造した。この組成物のキットを、無菌生理食塩液（０．９％ｗ／ｖ）中の^99m Ｔｃ−パーテクネテートジェネレーターの溶出液で再構成させたとき、室温での１５分の反応時間の後で化合物Ｉの^99mＴｃ−錯体が≧９８％の放射化学的純度で形成された。結論記述した、単離された、緩衝液灌流ラット心臓モデルにおいて、化合物Ｉ及びＩＩの^99mＴｃ−錯体のＨ／Ｏ比は他の^99mＴｃ試験剤及び¹²³Ｉ−ＩＡＺＡについてみとめられるものよりも有意に大きい。さらに、両方の化合物についての標準化酸素欠乏性保持は中間の値であり、^99mＴｃ−ＰｎＡＯについてのものよりも大きく、そしてモデル中の³Ｈミソニダゾール自身よりも少なくとも２倍大きく、そして¹²³Ｉ−ＩＡＺＡ（ヒポキシアをイメージングするものとして既知の放射性ヨウ素化合物）と少なくとも等しい。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年１０月１８日【補正内容】原翻訳文の請求の範囲と差し替える。請求の範囲１．酸素欠乏性組織のイメージングまたは放射線治療のための放射性医薬の製造における、置換または非置換のリガンドの放射性金属錯体の使用であって、ここで該リガンドはいかなるヒポキシア局在部分によっても置換されていない、前記の使用。２．錯体が中性である、請求項１に記載の錯体の使用。３．放射性金属がテクネチウム、レニウム、ロジウムまたはコバルトである、請求項１または２に記載の錯体の使用。４．式［ＴｃＯＬ］（式中、Ｌはリガンド）を有する、請求項１〜３のいずれかに記載の錯体の使用。５．リガンドがジアミンジオキシムである、請求項１〜４のいずれかに記載の錯体の使用。６．ジアミンジオキシムリガンドが次のものである、請求項５に記載の錯体の使用。（式中、ｎ＝２〜５、ｍ＝０、１、２、Ｙは独立してＨまたはＲ、Ｒ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式；ヘテロアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂ 若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ−アミド基を形成でき、Ａ及びＢは独立して選択され、そして： − Ａ及びＢの各々のいずれかは−ＣＲ₂−であるか、 − またはＡＡ及び／若しくはＢＢが−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｎ＝Ｎ−、 −ＮＲ−ＮＲ−若しくは−Ｎ＝ＣＲ−であるか、 − またはＡＡＡが−ＣＲ₂−Ｏ−ＣＲ₂−、−ＣＲ₂−Ｓ−ＣＲ₂− 若しくは−ＣＲ₂−ＮＲ−ＣＲ₂−である）。７．リガンドがであり、そしてＹ、Ｒ及びＲ’がＨまたはＣ_1-3アルキルであり、そして放射性金属が^99mＴｃである、請求項１〜６のいずれかに記載の錯体の使用。８．リガンドがであり、放射性金属が^99mＴｃである、請求項１〜７のいずれかに記載の錯体の使用。９．リガンドがであり、そしてＹ、Ｒ及びＲ’がＨまたはＣ_1-3 アルキルであり、そして放射性金属が^99mＴｃである、請求項１〜８のいずれかに記載の錯体の使用。１０．リガンドがＰｎＡＯであり、放射性金属が^99mＴｃである、請求項１〜６及び９のいずれかに記載の錯体。１１．構造式［式中、少なくとも１つのＲは−Ｌ−Ｒ²（Ｌは結合基であり、Ｒ²はヒポキシア局在部分である）、Ｙは独立してＨまたはＲ、そして他のＲ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式；ヘテリアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂ 若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ− アミド基を形成し得る］を有するリガンドと放射性金属との、腫瘍または酸素欠乏性組織内に局在する固有特性を有する放射性金属錯体。１２．次の構造式を有するリガンド：〔式中、ｎ＝２〜５、ｍ＝０、１、２、Ｙは独立してＨまたはＲ、Ｒ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル;第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式；ヘテロアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂ 若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ−アミド基を形成し得るＡ及びＢは独立して選択され、そして： − Ａ及びＢの各々のいずれかは−ＣＲ₂−であるか、 − またはＡＡ及び／若しくはＢＢが−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｎ＝Ｎ−、 −ＮＲ−ＮＲ−若しくは−Ｎ＝ＣＲ−であるか、 − またはＡＡＡが−ＣＲ₂−Ｏ−ＣＲ₂−、−ＣＲ₂−Ｓ−ＣＲ₂− 若しくは−ＣＲ₂−ＮＲ−ＣＲ₂−であるただし、少なくとも１つのＲは−Ａ−Ｒ²（Ａは結合基であり、そしてＲ² はヒポキシア局在部分である）であることができるが、次のことを条件とする：全てのＹ＝Ｈであり、かつｉ）ｎ＝３のときはｍ＝１または２ ii）ｎ＝４、ｍ＝０、（Ａ）＝（ＣＨ₂）または（ＣＨＣ₆Ｈ₅Ｘ）（式中Ｘ＝Ｈ、ＣｌまたはＯＣＨ₃ ）、そして全てのＲ＝ＣＨ₃ のときはＲ’はＨまたはＣＨ₃ ではなく、 iii）ｎ＝５及びｍ＝０のときは全てのＲ及びＲ’はＣＨ₃ ではなく、 iv）（Ａ）ｎ＝（ＣＨ₂）₂ 及びＲ＝Ｒ’＝ＣＨ₃ のときｍは０ではなくそして（Ｂ）_mはＣＨ₂ ではなく、ｖ）ｎ＝２のときはリガンドは１個より多くの−ＣＯＮＲ−アミド基を含まない］。１３．ｎ＝４である、請求項１２に記載のリガンド。１４．Ｙ＝Ｈ、ｍ＝０そしてＲ及びＲ’はＣ_1-3 アルキルである、請求項１２または請求項１３に記載のリガンド。１５．次の構造式を有する、請求項１２〜１４のいずれかに記載のリガンド：〔式中、全てのＹ＝Ｈ、かつ全てのＲ＝ＣＨ₃ のときはＲ’はＨまたはＣＨ₃ ではないことを条件として、Ｙ、Ｒ及びＲ’はＨまたはＣ_1-3 アルキルである〕。１６．請求項１２〜１５のいずれかに記載のリガンドの放射性金属錯体。１７．放射性金属が^99mＴｃである、請求項１６に記載の錯体。１８．請求項１２〜１５のいずれかに記載のリガンドを含む放射性イメージングキットであって、^99mＴｃパーテクネテート溶液を添加して請求項１７に記載の錯体を形成するのに適合している前記のキット。１９．リガンド及び第１スズ還元剤が凍結乾燥状態で存在する、請求項１８に記載のキット。２０．患者に有効量の、請求項１〜１１及び１６〜１７のいずれかに記載の錯体を投与することを含む、患者の酸素欠乏性組織のイメージングまたは放射線治療のための方法。【手続補正書】【提出日】１９９６年４月３０日【補正内容】請求の範囲１．酸素欠乏性組織のイメージングまたは放射線治療のための放射性医薬の製造における、置換または非置換のリガンドの放射性金属錯体の使用であって、ここで該リガンドはいかなるヒポキシア局在部分によっても置換されていない、前記の錯体の使用。２．リガンドがジアミンジオキシムである、請求項１に記載の錯体の使用。３．ジアミンジオキシムが次のものである、請求項２に記載の錯体の使用：（式中、ｎ＝２〜５、ｍ＝０、１、２、Ｙは独立してＨまたはＲ、Ｒ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式：ヘテロアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂ 若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ−アミド基を形成でき、Ａ及びＢは独立して選択され、そして： − Ａ及びＢの各々のいずれかは−ＣＲ₂−であるか、 − またはＡＡ及び／若しくはＢＢが−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｎ＝Ｎ−、 −ＮＲ−ＮＲ−若しくは−Ｎ＝ＣＲ−であるか、 − またはＡＡＡが-ＣＲ₂−Ｏ−ＣＲ₂−、−ＣＲ₂−Ｓ−ＣＲ₂− 若しくは−ＣＲ₂−ＮＲ−ＣＲ₂−である）。４．リガンドがであり、放射性金属が^99mＴｃである、請求項１〜３のいずれかに記載の錯体の使用。５．構造式［式中、少なくとも１つのＲは−Ｌ−Ｒ²（Ｌは結合基であり、Ｒ²はヒポキシア局在部分である）、Ｙは独立してＨまたはＲ、そして他のＲ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式；ヘテリアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂ 若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ− アミド基を形成し得る］を有するリガンドと放射性金属との、腫瘍または酸素欠乏性組織内に局在する固有特性を有する放射性金属錯体。６．次の構造式を有するリガンド：〔式中、ｎ＝２〜５、ｍ＝０、１、２、Ｙは独立してＨまたはＲ、Ｒ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール;ヘテロ環式；ヘテロアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂ 若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ−アミド基を形成でき、Ａ及びＢは独立して選択され、そして： − Ａ及びＢの各々のいずれかは−ＣＲ₂−であるか、 − またはＡＡ及び／若しくはＢＢが−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｎ＝Ｎ−、 −ＮＲ−ＮＲ−若しくは−Ｎ＝ＣＲ−であるか、 − またはＡＡＡが−ＣＲ₂−Ｏ−ＣＲ₂−、−ＣＲ₂−Ｓ−ＣＲ₂− 若しくは−ＣＲ₂−ＮＲ−ＣＲ₂−であるただし、少なくとも１つのＲは−Ｌ−Ｒ²（Ｌは結合基であり、そしてＲ² はヒポキシア局在部分である）であることができるが、次のことを条件とする：全てのＹ＝Ｈであり、かつｉ）ｎ＝３のときはｍ＝１または２ ii）ｎ＝４、ｍ＝０、（Ａ）＝（ＣＨ₂）または（ＣＨＣ₆Ｈ₅Ｘ）（式中Ｘ＝Ｈ、ＣｌまたはＯＣＨ₃ ）、そして全てのＲ＝ＣＨ₃ のときはＲ’はＨまたはＣＨ₃ ではなく、 iii）ｎ＝５及びｍ＝０のときは全てのＲ及びＲ’がＣＨ₃ であることはなく、 iv）（Ａ）ｎ＝（ＣＨ₂）₂ 及びＲ＝Ｒ’＝ＣＨ₃のときｍは０ではなくそして（Ｂ）_mはＣＨ₂ ではなく、ｖ）ｎ＝２のときは該リガンドは１個より多い−ＣＯＮＲ−アミド基を含まない〕。７．次の構造式を有する、請求項６に記載のリガンド：〔式中、全てのＹ＝Ｈ、かつ全てのＲ＝ＣＨ₃ のときはＲ’はＨまたはＣＨ₃ ではないことを条件として、Ｙ、Ｒ及びＲ’はＨまたはＣ_1-3 アルキルである〕。８．請求項６または７に記載のリガンドを含む放射性イメージングキットであって、^99mＴｃパーテクネテート溶液を添加することによって、^99mＴｃと請求項６または７記載のリガンドとの放射性錯体を形成するのに適合している前記のキット。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ 7431−4ＣＡ６１Ｋ 49/02 Ｃ (72)発明者バーク，ジェームズ・フレデリックイギリス国バッキンガムシャーエイチピー６・６ビーエイチ，アマーシャム，チェシャム・ボイス，ミルトン・ローンズ 39 (72)発明者カニング，ルイス・リューベンイギリス国バッキンガムシャーエイチピー５・１キューエイ，チェシャム，インカーマン・テラス 21 (72)発明者エドワーズ，バーバライギリス国バッキンガムシャーエイチピー22・４イーエイ，ニアー・アイルスバリー，ハードウィック，ローワー・ロード, アナーシャル（番地なし) (72)発明者キング，アダム・チャールズイギリス国バッキンガムシャーエイチピー20・１ビーエル，アイルスバリー，ノーフォーク・テラス１

Claims

【特許請求の範囲】１．酸素欠乏性組織のイメージングまたは放射線治療のための、置換または非置換のリガンドの放射性金属錯体であって、これによって該錯体は腫瘍または酸素欠乏性組織中に局在する固有特性を有し、そして該リガンドはいかなるヒポキシア局在部分によっても置換されていない、前記の錯体。２．錯体が中性である、請求項１に記載の錯体。３．放射性金属がテクネチウム、レニウム、ロジウムまたはコバルトである、請求項１または２に記載の錯体。４．式［ＴｃＯＬ］（式中、Ｌはリガンド）を有する、請求項１〜３のいずれかに記載の錯体。５．リガンドがジアミンジオキシムである、請求項１〜４のいずれかに記載の錯体。６．ジアミンジオキシムリガンドが次のものである、請求項５に記載の錯体（式中、ｎ＝２〜５、ｍ＝０、１、２、Ｙは独立してＨまたはＲ、Ｒ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式；ヘテロアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ−アミド基を形成でき、Ａ及びＢは独立して選択され、そして： − Ａ及びＢの各々のいずれかは−ＣＲ₂−であるか、 − またはＡＡ及び／若しくはＢＢが−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｎ＝Ｎ−、 −ＮＲ−ＮＲ−若しくは−Ｎ＝ＣＲ−であるか、 − またはＡＡＡが−ＣＲ₂−Ｏ−ＣＲ₂−、−ＣＲ₂−Ｓ−ＣＲ₂− 若しくは−ＣＲ₂−ＮＲ−ＣＲ₂−である）。７．リガンドがであり、そしてＹ、Ｒ及びＲ’がＨまたはＣ_1-3アルキルであり、そして放射性金属が^99mＴｃである、請求項１〜６のいずれかに記載の錯体。８．リガンドがであり、放射性金属が^99mＴｃである、請求項１〜７のいずれかに記載の錯体。９．リガンドがであり、そしてＹ，Ｒ及びＲ’がＨまたはＣ_1-3 アルキルであり、そして放射性金属が^99mＴｃである、請求項１〜８のいずれかに記載の錯体。１０．リガンドがＰｎＡＯであり、放射性金属が^99mＴｃである、請求項１〜６及び９のいずれかに記載の錯体。１１．構造式［式中、少なくとも１つのＲは−Ａ−Ｒ²（Ａは結合基であり、Ｒ²はヒポキシア局在部分である）、Ｙは独立してＨまたはＲ、そして他のＲ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式；ヘテリアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ− アミド基を形成し得る］を有するリガンドと放射性金属との、腫瘍または酸素欠乏性組織内に局在する固有特性を有する放射性金属錯体。１２．次の構造式を有するリガンド：〔式中、ｎ＝２〜５、ｍ＝０、１、２、Ｙは独立してＨまたはＲ、Ｒ及びＲ’は独立して：Ｈ、アルキルまたは１種以上のアルケニルであることができるＣ_1-10線状または分岐炭化水素；アルコキシ；アルコキシアルキル；第１、第２または第３アミド；第１、第２または第３アミン；カルボン酸；ヒドロキシアルキル；アリール；ヘテロ環式；ヘテロアリールであるか、または２つのＲ基が、それらが結合している原子と一緒になって炭素環式、ヘテロ環式、飽和若しくは不飽和のスピロ若しくは縮合環を形成するか；またはＮＲ基に隣接するＣＲ₂ 若しくはＣＲＲ’基の２つのＲ基が結合して１つ以上の−ＣＯＮＲ−アミド基を形成し得るＡ及びＢは独立して選択され、そして： − Ａ及びＢの各々のいずれかは−ＣＲ₂−であるか、 − またはＡＡ及び／若しくはＢＢが−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｎ＝Ｎ−、 −ＮＲ−ＮＲ−若しくは−Ｎ＝ＣＲ−であるか、 − またはＡＡＡが−ＣＲ₂−Ｏ−ＣＲ₂−、−ＣＲ₂−Ｓ−ＣＲ₂− 若しくは−ＣＲ₂−ＮＲ−ＣＲ₂−であるただし、少なくとも１つのＲは−Ａ−Ｒ²（Ａは結合基であり、そしてＲ² はヒポキシア局在部分である）であることができるが、次のことを条件とする：全てのＹ＝Ｈであり、かつｉ）ｎ＝３のときはｍ＝１または２ ii）ｎ＝４、ｍ＝０、（Ａ）＝（ＣＨ₂）または（ＣＨＣ₆Ｈ₅Ｘ）（式中Ｘ＝Ｈ、ＣｌまたはＯＣＨ₃ ）、そして全てのＲ＝ＣＨ₃ のときはＲ’はＨまたはＣＨ₃ ではなく、 iii)ｎ＝５及びｍ＝０のときは全てのＲ及びＲ’はＣＨ₃ ではなく、 iv）（Ａ）ｎ＝（ＣＨ₂）₂ 及びＲ＝Ｒ’＝ＣＨ₃ のときｍは０ではなくそして（Ｂ）_mはＣＨ₂ ではなく、ｖ）ｎ＝２のときはリガンドは１個より多くの−ＣＯＮＲ−アミド基を含まない］。１３．ｎ＝４である、請求項１２に記載のリガンド。１４．Ｙ＝Ｈ、ｍ＝０そしてＲ及びＲ’はＣ_1-3 アルキルである、請求項１２または請求項１３に記載のリガンド。１５．次の構造式を有する、請求項１２〜１４のいずれかに記載のリガンド：〔式中、全てのＹ＝Ｈ、（Ａ）＝（ＣＨ₂）₄ 、かつ全てのＲ＝ＣＨ₃ のときはＲ’はＨまたはＣＨ₃ ではないことを条件として、Ｙ、Ｒ及びＲ’はＨまたはＣ_1-3 アルキルである〕。１６．請求項１２〜１５のいずれかに記載のリガンドの放射性金属錯体。１７．放射性金属が^99mＴｃである、請求項１６に記載の錯体。１８．請求項１２〜１５のいずれかに記載のリガンドを含む放射性イメージングキットであって、^99mＴｃパーテクネテート溶液を添加して請求項１７に記載の錯体を形成するのに適合している前記のキット。１９．リガンド及びスズ還元剤が凍結乾燥状態で存在する、請求項１８に記載のキット。２０．患者に有効量の、請求項１〜１１及び１６〜１７のいずれかに記載の錯体を投与することを含む、酸素欠乏性組織のイメージングまたは放射線治療のための方法。