HUT73672A - Radiometal complexes that localise in hypoxic tissue - Google Patents

Radiometal complexes that localise in hypoxic tissue Download PDF

Info

Publication number
HUT73672A
HUT73672A HU9600228A HU9600228A HUT73672A HU T73672 A HUT73672 A HU T73672A HU 9600228 A HU9600228 A HU 9600228A HU 9600228 A HU9600228 A HU 9600228A HU T73672 A HUT73672 A HU T73672A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
ligand
complex
group
hydrogen
compound
Prior art date
Application number
HU9600228A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9600228D0 (en
Inventor
Colin Mill Archer
James Frederick Burke
Lewis Reuben Canning
Barbara Edwards
Adam Charles King
Original Assignee
Amersham Int Plc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Amersham Int Plc filed Critical Amersham Int Plc
Publication of HU9600228D0 publication Critical patent/HU9600228D0/hu
Publication of HUT73672A publication Critical patent/HUT73672A/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/0474—Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group
    • A61K51/0478—Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group complexes from non-cyclic ligands, e.g. EDTA, MAG3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/004—Acyclic, carbocyclic or heterocyclic compounds containing elements other than carbon, hydrogen, halogen, oxygen, nitrogen, sulfur, selenium or tellurium
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • C07C251/32—Oximes
    • C07C251/34—Oximes with oxygen atoms of oxyimino groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C07C251/36—Oximes with oxygen atoms of oxyimino groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with the carbon atoms of the oxyimino groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

243 (1984) - tanulmányozták az EnAO, PnAO és BnAO Te komplexeinek rádiójelölését és patkányokban való bio-eloszlasát. Azt találták, hogy a Tc-BnAO csak inszignifikáns agyi felvételt mutat (az injektált adag 0,12 t%-át 30 másodperc alatt) , míg a Tc-EnAO és Tc-PnAO esetében a megfelelő érték 0,74 t% illetve 1,3 t% volt. Ennek alapján az ezutáni radio-gyógyszerészeti vizsgálatokat a PnAO ligandumokra irányították és demetilezett PnAO analógokat szabadalmaztattak technécium agyleképező szerekként (4 789 736 és 4 818 813 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírások).
F.Budsky és munkatársai - Nukleon, (1), 14 (1990); CA
113 187327d - BnAO analógok (n = 4) szintézisét vázolták. Ezért, annak ellenére, hogy a Tc-BnAO szintézisét 1984-ben írták le először, ennek a ligandum-rendszernek eddig semmilyen radio-gyógyszerészeti alkalmazását nem írták le.
n=2,3,4
S.Jurisson és munkatársai - Inorg. Chem. , 26, 3576 (1987)
- a diamin-dioxim ligandumok (n = 2-től 5-ig) technécium99
-komplexeinek egesz sorát írtak le. A Tc-komplexek röntgen-kristályszerkezetei felvételei megerősítették, hogy az EnAO és a PnAO /D.E. Troutner és munkatársai, Acta Cryst.Sect.C, C40, 1544 (1984)/ egyaránt képeznek technécium-komplexeket egy Tc(V) monoxo-maggal, míg a PentAO komplexének Tc(V) dioxo99 magja van. A Tc-BnAO komplexet kristalyszerkezetileg nem vizsgálták, de az infravörös színkép-adatok dioxo-magra mu tatnak .
D.E. Troutner és munkatársai - Paper INOR 129, ÁCS 192nd Meeting, 7-12 Sept. (1986) egy EnAO analóg nyújtott kelátgyűrűs I^dddo technécium-komplexét ismertették. Úgy találták, hogy a komplex kevésbé lipofil, mint a Tc-PnAO.
H2dddo
A szelektíven a hipoxiás sejtekben koncentrálódó radiogyógyszerészeti szerek nagyon kívánatosak, mert ezek lehetővé tehetik az infarktusveszélyt képező, esetleg megmenthető szövetek diagnózisát. A leképezés szempontjából érdekes szövetek közé a szív- és agyszövetek tartoznak. Bizonyos tumorokról is ismert, hogy hipoxiásak, így a hipoxia-specifikus rádio-gyógyszerészeti szerek felhasználhatók a tumorok diagnózisára és radioterápiájára is. Emellett a hipoxiaszelektiv radio-gyógyszerészeti szerek hasznosak lehetnek a perifériás érrendszeri megbetegedések felismerésére is.
Ismeretes, hogy különféle nitro-heteroaromás szerek, közöttük radio-szenzitizáló szerek is, mint a mizonidazol, megkötődnek a hipoxiás sejtekben. Az ilyen szerek előnyös példái a 2-nitro-imidazolok. F-radiojelzett és radio-jódozott mizonidazol-analógokat is leírták hipoxia-leképezésre, 123 - · · ezek soraba tartozik a I-jod-azomicm-arabinozid /D.
Goshar és munkatársai, J.Nucl.Med. 34, 885 (1993 ) és R.B.Moore és munkatársai, uo. , 34, 405 (1993)/ és a F-mizonidazol /W.J. Koch és munkatársai, uo.,34, Supplement 253 (1989)/.
A radiogyógyszerészeti leképezés céljaira könnyen hozzáférhető volta és jó leképezési tulajdonságai folytán elő9 9m nyös izotóp Te. A hipoxia-szerként alkalmazható radioaktív fémek kikésérletezésére irányuló korábbi kísérleteket egy radioaktív fém-ligandum és egy hipoxia-lokalizáló rész, mint nitro-imidazol összekapcsolására alapozták. így a 417 870 számú európai szabadalmi leírásban diamin-difenol és PnAO ligandumok nitroimidazol konjugátumait igény9 9m lik. Egy Tc-komplex diamin-difenol konjugatumat ismertetik, amelynek egy in vitro sejt-modellben mutatott hipoxiás/ oxiás aránya 2:8. A 441 491 A1 számú európai szabadalmi leírás borozott trisz(dioxim) ΒΑΤΟ technécium komplexeket ismertet, amelyekben a bórsav-molekularészt egy nitro-heteroaromás hipoxia-lokalizáló molekularésszel funkcionalizálják.
Az 544 412 A2 számú európai szabadalomban diamino-dioximok (n = 2-5) és legalább egy hipoxia-lokalizáló molekularésszel funkcionalizált N2S2~diamin-ditiol ligandumok egész sorát igénylik. Ilyen hipoxia-lokalizáló csoportokat a leírás 7-10. oldalain és a 18-22. igénypontban ismertetnek részletesen. Az ismertetett lokalizáló csoportok sorában nitroheterociklusos csoportok széles köre szerepel. A leírtakat támogató példákban csak két konkrét ligandum-rendszer - PnAO és BAT - van említve, de ezeknek a ligandumoknak több 2- és 4-nitro-imidazol konjugátumát állítják elő. Más diamin-dioxim mint PnAO a példákban nem szerepel .
ΒΑΤ
Valóban, az 544 412 számú európai szabadalmi leírás
6-7. oldalain feltételezik, hogy az ilyen ligandumok technécium -komplexeinek csak mono-oxo-magjuk (Tc=O) lesz, holott jól ismert a szakmában, hogy a Tc-PentAO (n = 5) komplexnek dioxo-magja van /S. Jurisson és munkatársai: Inorg. Chem. 26, 3576 (1987)/, és a Tc-BnAO komplexet is hasonlónak tartják (S. Jurisson, uo.). A PnAO-nitro-imidazolok leírt technécium-komplexei különféle in vitro szűrővizsgálatokban mérsékelt hipoxia-szelektivitást mutatnak.
Az 5 026 694 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban legalább egyféle nitro-heterociklikus ligandumot (például nitro-imidazolt) tartalmazó négyzetes planáris platina-komplexek radioszenzitizáló szerként való alkalmazását ismerteti találmányként. Az ilyen komplexek 99 131 111
Tc(sic), I vagy In izotópokkal való rádió-jelzése és a jelzett komplexek hipoxiás tumorok leképezésére történő alkalmazását javasolják. Technézium vagy indium esetében azonban ez nyilván binukleáris komplexeket igényelne, és ezért ez az elképzelés alapjában véve nem különbözik más kelát-radioszenzitizáló konjugátumok alkalmazásától.
Az 5 100 885 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerint a réz(II) komplexek radioszenzitizálóként és radio-protektiv gyógyszerekként való alkalmazása már ismert, és nem látható előre, hogy melyik hatásmód lép előtérbe. Ez a leírás a bipiridil vagy fenantrolin kettős oxigén-ligandumokkal, mint disavakkal vagy difenolokkal képezett vegyes Cu(II) ligandum komplex radioszenzizálóként való alkalmazását javasolja. A leírás nem utal a radiofémek leképezésre történő alkalmazására, és az ott leírt komplexek teljesen különböznek a jelen találmányban alkalmazott komplexektől.
A jelen találmány a hipoxiás sejtekben szelektíven lokalizálódni képes radiofém-komplexeket képező ligandumok előállítására irányul. A radiofém (például 99mTc) tartalmú hipoxia-specifikus szerek tervezésének szokásos útja eddig az volt, hogy egyszerűen valamely ismert hipoxia-lokalizáló vagy hipoxia-szelektiv molekula-rész, mint heterociklusos vegyületek, különösen imidazolok kelát-komplexeit állították elő. A jelen találmány feltalálóinak a meglepő felismerése volt az, hogy bizonyos ligandum-rendszerek olyan radiofém-komplexeket képeznek, amelyek önmagukban képesek hipoxiás sejtekben lokalizálódni, amelyeknél tehát nincs szükség arra, hogy valamely a hipoxiás sejtekhez irányító molekulával (például nitro-imidazollal) konjugálják őket.
Q Q m Emellett ezekről a radiofém-komplexekről, különösen a Te komplexeiről kitűnt, hogy sokkal nagyobb szelektivitásuk van a hipoxiás sejtek irányában, mint az eddig ismert ilyen irányú komplexeknek.
A találmány tehát elsősorban a hipoxiás szövetek lefényképezésére és radioterápiájára alkalmas radiofém komplexek előállítására vonatkozik. A találmány szerinti radiofém komplex egy olyan helyettesített vagy helyettesitetlen lioandumhől származik, amely egymagában képes a tumorokban vagy hipoxiás szövetekben lokalizálődni; a ligandum nem tartalmaz hipoxiás szövetekben lokalizálődő külön szubsztituens molekularésztvagy szubsztituenst. A ligandum előnyösen az alábbi (A) általános képlet szerinti szerkezetű diamin-dioxim
ahol n = 2 - 5 m = 0, 1 vagy 2;
Y jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy egy R szubsztituens;
R és R' jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom,
1-10 szénatomos egyenes vagy elágazóláncu szénhidrogéncsoport, amely alkil-, alkenil-, alkoxi-, alkoxi-alkil, primer, szekunder., vagy tercier amido-, primer, szekunder vagy tercier amino-, karbonsav-, hidroxi-alkil-, aril-z heterociklusos vagy heteroaril-csoport lehet, vagy két R-csoport a hozzájuk kapcsolódó alommal vagy atomokkal együtt egy karbociklusos, heterociklusos telített vagy telítetlen, spiro- vagy kondenzált gyűrűs csoportot képez, vagy pedig egy vagy több -NRosoporttal szomszédos -CR?- vagy -CRR'- csoport két R-szuDsztituense együtt -CONR- amidocsoportot képez;
•· · f · · · · · • ·»««»··
A és B jelentései egymástól függetlenek, mégpedig
- mindegyik A és B jelentése csoport, vagy
- AA és/vagy BB jelentése -CR=CR~, -N=N-, -NR-NR- vagy ,-N=CR- csoport, vagy
- AAA jelentése -CR2-O-CR2-r -CR^-S-CR^-, vagy -CR2~NR-CR2- csoport.
Ezek a komplexek rendszerint semlegesek. A radinfÁm előnyösen technécium, rénium ródium vagy kobalt lehet. Leképezés céljaira radiofémként előnyösen technécium-99m alkalmazható, a komplex pedig a TcOL képletnek megfelelő szerkezetű., ahol L a ligandumot képviseli.
A találmány további célja egy radiofémnek egy (B)
általános képletű ligandummal - ebben a képletben az R szubsztituensek legalább egyikének a jelentése
-A-R csoport, ahol A egy összekötő csoportot,
R pedig egy hipoxias szövetben lokalizalodő molekularészt képvisel;
az Ϊ szubsztituensek jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy R;
a többi R és R' jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom,
1-10 szénaromos, egyenes vagy elágazó láncú szénhidro10 géncsoport, amely alkil-, alkenil-, alkoxi-, alkoxi-alkil, primer, szekunder vagy tercier amido-, primer, szekunder vagy tercier amino-, karbonsav-, hidroxi-alkilaril-, heterociklusos vagy heteroaril-csoport lehet, vagy két R-csoport a hozzájuk kapcsolódó atommal vagy atomokkal együtt egy karbociklusos, heterociklusos telített vagy telítetlen, spiro- vagy kondenzált gyűrűs csoportot képez, vagy pedig egy vagy több -NRcsoporttal szomszédos —CR2— vagy —CRR,_ csoport két R— -szubsztituense együtt -CONR- amidocsoportot képez — képzett olyan komplexének az előállítása, amelynek már belső (inherens) tulajdonsága, hogy lokalizálódni képes a tumorokban vagy hipoxiás szövetekben.
Bár a fentiekben leirt ligandumok már önmagukban is rendelkeznek azzal a tulajdonsággal,hogy képesek lokalizálódni a tumorokban vagy hipoxiás szövetekben, lehetőség van arra is, hogy a ligandumot az ilyen komplexekben is kapcsoljuk egy hipoxiás szövetekben lokalizálódó molekularésszel. A találmány kiterjed új vegyületként olyan, a fentiekben leírt ligandumok önmagukban vagy radiofém-komplexként történő előállítására, amelyek hipoxiás szövetekben lokalizálódni képes molekularészekkel kapcsolódnak. Hipoxiás szövetekben lokalizálódni képes molekularészeket és ezek fém-kelátokat képező molekularészekkel való kapcsolására alkalmas módszereket a közzétett W0 94/08949 számú szabadalmi bejelentés leírása ismertet.
- 11 A találmány .körébe tartozik továbbá a találmány szerinti radiofém-komplexek előállítását és alkalmazását megkönnyítő radioleképezési készlet is, amely fagyasztva-száritott állapotban tartalmazza a fentiekben leirt találmány szerinti ligandumot, előnyösen az on(II)-vegyület redukálószerrel együtt, készen a ^^mTc pertechnetát hozzáadására a radioleképezésre alkalmas komplex kialakítása céljából.
A találmány szerinti komplex közvetlenül felhasználható a kezelendő személy hipoxiás szövetének leképezésére vagy radio-terápiájára. A felhasználás a találmány szerinti komplex hatásos mennyiségének a beadása utján történik.
A hipoxiás sejtekkel az elkülönített, átáramoltatott sziv-modellen (21. példa) végzett felvételi kísérletek eredményei arra mutatnak, hogy az (5) vegyület ismert 9 9m
Te komplexek hipoxia-szelektivitasa jórészt maganak a Tc-PnAO komplexnek köszönhető. Ez a hatás világosabban ki 9 9 m tűnik az (I) vegyület (BnAO) Tc-komplexe esetében, amely szignifikánsan nagyobb hipoxiás sejt szelektivitást mutat, mint a megfelelő nitro-imidazol konjugátum, vagyis 9 9m a Te-(II) vegyület. Egy második nitro-imidazolnak a komplexbe való bevitele Γ(ΧΙ) vagyület | csak még tovább csökkenti a hipoxia-szelektivitást.
Q Qrn
A (VII) vegyület és a (XII) vegyület Tc-komplexének összehasonlítása azt mutatja, hogy egy etilcsoportnak a nitro-imidazol gyűrűre történő kicserélése mind a hipoxiás arányt, mind a normalizált hipoxiás retenciót alig vagy egyáltalán nem befolyásolja.
A nitro-imidazol hipoxia-lokalizáló molekularész tehát minimális hatással van a radiofém-komplex célbairányulására, minthogy a radiofém-komplexek hipoxia-szelektivitása főként az ilyen komplexek önmagukban meglévő tulajdonságaitól függ. A nitro-imidazol konjugátumok esetében megfigyelhető különbségek valószínűleg nagyobbrészt a komplex lipofil/hidrofil egyensúlyának megváltozásától származnak.
A jelen találmány bizonyítja, hogy bizonyos radiofémkomplexek önmagukban bioreduktiv tulajdonságokkal rendelkeznek, vagyis az emlős-rendszerek hipoxiás szöveteiben eddig ismeretlen termékekké redukálódnak és azután ott rögzítődnek, hipoxia-szelektiv radio-hatóanyagokká. Ugyancsak bizonyos technécium-diamin-dioxin komplexek redukálhatóságát mutatja a redukálható molekularészek kimutatására irányuló nem-specifikus kémiai folt-próba - a cink/ammónia teszt. A 19a. példa bizonyítja, hogy a technécium-komplexek tanulmányozására rendszerint alkalmazott körülmények között ezek a komplexek - akár tartalmaznak nitro-imidazolt, akár nem - egy uj termékké redukálódnak (amint ezt a nagynyomású folyadék-kromatográfiai vizsgálatok bizonyitják). Érdekes megjegyezni, hogy a Te-(IV) vegyület amely egy PentAO ligandumot és így egy Tc(V)-dioxo magot tartalmaz, ismertnek látszik a Zn/NH^ próbában, és az IPH szűrővizsgálatokban is csak igen csekély hipoxia-szelek9 9 in tivitast mutat. A Tc-(I) (BnAO) ettől gyökeresen eltérő viselkedése arra mutat, hogy - az irodalmi következtetésekkel JjS· Jurisson és munkatársai, Inorg. Chem 26, 3576 (1987·)^ ellentétben - a Tc-BnAO-nak nincs dioxo-magja és ez döntő fontosságú a komplex bioreduktiv tulajdonságai szempontjából.
Az 544 412 AZ európai szabadalmi leírás (8a. példa) arról számol be, hogy a xantin-oxidáz (XOD) reduktáz enzim 99 a Tc-PnAO komplexet - (X) vegyület - nem redukálja. A
- 9 9m jelen találmány azonban azt bizonyítja, hogy számos Tc-ligandum komplex, közöttük a PnAO is, redukálódik a xantin9 9 m
-oxidáz által (lásd a 19b. példát). A Zc-PnAO esetében a Te komplexétől elterő viselkedése feltehetőleg radiofém-komplexnek a vizsgálatban alkalmazott koncentrációjára vezethető vissza.
A találmány szerint előállított ligandumok szintézise során alkalmazott eljárásokat az 1. - 5. reakcióvázlat és az 1. - 17. példa szemlélteti.
1. reakcióvázlat
(VII) vegyület: R = Η (VIII) vegyület: ,R = Et (IX) vegyület: R = Me (II) vegyület: R = Me (XII) vegyület: R = H
- Γ
2. reakcióvázlat
(IV) vegyület
3. reakciővázlat
(XIV) vegyület
4. reakciővázlat ( )-00>Η
H»N NH,
HO OH (XVI) vegyület
- ./7 *
5. reakcióvázlat
i): NH2OCH3Ph.HCl ii): H^Pd/C (katalizátor)
n = 2: H2dddo n = 3: (XVII) vegyület n = 4: (XVIII) vegyület
Az alábbiakban az 1.- 5. reakcióvázlatban szemléltetett eljárások egyes előtermékeinek az előállítását, majd a szemléltetett előállítási eljárások részletes kiviteli módjait ismertetjük példáinkban.
A 2-(4-amino-butil)-amino-2-metil-3-pentanon-oxim alább leírt előállításához hasonló módon állítjuk elő a 3-(4-amino-butil )-amino-3-metil-2-butanon-oxim, 3-(5-amino-pentil) -amino-3-metil-2-butanon-oxim és 2-(4-amino-butil)-amino-2-metil-l-propanal-oxim vegyületeket is a megfelelő kiindulási anyagokból. A H2dddO vegyületet a Schlemper és munkatársai jjj. Coord. Chem., 16, 347 (1988)^j által leírt módszerrel állítjuk elő.
i) A 2-(4-amino-butil)-amino-2-metil-3-pentanon-oxim szintézise
0,26 g (2,9 mmól) 1,4-diamino-bután és 0,33 g (3,2 mmól) trietil-amin 5 ml acetonitrillel készített oldatához keverés közben 0,485 g (3,24 mmól) 2-klór-2-metil-3-nitrozo-pentán 5 ml acetonitrillel készített oldatát adjuk. Az elegyet 10 percig keverjük, amikoris a termék kezd kiválni. A reakcióelegyet éjjelen át tovább keverjük, majd a kivált terméket szűréssel elkülönítjük és vákuumban megszárítjuk. 0,5 g cím szerinti vegyületet (az elméleti hozam 86%-a) kapunk fehér por alakjában, amely 125 - 128 °C-on olvad. 13C NMR (CDC13):
(ppm): 11,2 (s), 19,3 (s), 24,2 (s), 26,4 (s), 26,8 (s),
40,4 (s), 43,7 (s), 61,5 (s), 161,6 (s).
• ♦·♦♦··· • · · ·· 4· ·· ii ) 3-( 4-amino-butil) -amino-3-nietil-2-butanon-
-oxim
Op. ; 62 - 64°C 1H NMR : (D20) δ (ppm): 1,20 (s; 6H; -CH^, 1,4-1,6 (m; 4H, -CH2),
1,80 (S; 3H; -CH3~C=N-O), 2,40 (t; 2H; CH2. Ca2~N), 2,75 (t; 2H; CH2~CH2-N).
iii) 3-(5-amino-pentil)-amino-3-metil-2-butanon-
-oxim
Op.. : 174 - 176°C.
1H NMR : (D2O) δ (ppm): 1,20 (s; 6H; -CH3), 1,3-1,6 (m; 6H, -CH2),
1,75 (S; 3H; -CH -C=N-O), 2,35 (t; 4H; CH_£H2-N).
iv) 2-(4-amino-butil)-amino-2-metil-l-propanal-
-oxim
Op. : 136 - 137°C
1 H NMR : (D20)
δ (ppm) : 1,05 (S; 6H; -ch3). 1,15 (m; 2H, -CH2),
1,25 (m; 2H; -ch2-). 2,20 (t; 2H; CH2-CH2
2,45 (t; 2H; CH2-£fi2 -N). 7,15 (S; H-C=N).
A 2-klór-2-metil-3-nitrozo-pentán szintézise g (237 mmól); 2-metil-2-pentén és 55,67 g (475 mmól) izoamil-nitrit mínusz 20 °C hőmérsékletre hűtött elegyébe száraz hidrogén-klorid gázt vezetünk. A reakcióelegyet 0 °C hőmérsékleten éjjelen át keverjük, majd a kivált terméket szűréssel elkülönítjük és 5-5 ml mínusz 20 °C hőmérsékletre hűtött etanollal háromszor mossuk. Ezután a terméket légáramban megszárítjuk. 13 g (36 %) 83-85 °C-on olvadó cím szerinti vegyületet kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használhatunk fel a szintézisben.
13C NMR : (CDC13) / (ppm): 11,5 (s), 22,2 (s), 29,5 (s), 30,0 (s),
69,3 (s), 74,5 (s).
Az N- 3-klór-2-(hidroxi-imino)-3-metil-butil -2-nitro-imidazol szintézise g (17,7 mmól) 2-nitro-imidazolt hozzáadunk 0,76 g (19 mmól) nátrium-hidroxid 20 ml vízzel készített oldatához. A kapott oldatot egy óra hosszat keverjük, majd a vizet csökkentett nyomáson elpárologtatjuk és a maradékot vákuumban 3 óra hosszat szárítjuk.
A fenti módon előállított 2-nitro-imidazol-nátriumsóhoz 50 ml acetonitrilt, 3,5 ml (14,3 mmól) 15-korona-5-étert és 2 ml (17,4 mmól) 4-bróm-2-metil-2-butént adunk. Az elegyet 16 óra hosszat keverjük, majd az oldószert eltávolítjuk és a kapott nyers félszilárd maradékot szilikagél-oszlopon kromatografálva tisztítjuk. A köztitermékként 80 %-os hozammal kapott 1-(3-metil-2-butenil)-2-nitro-imidazolt petroléter (40-60) és etil-acetát 4:1 térfogat-arányú
elegyével eluáljuk.
1,0 g (5,5 mmól) fenti módon előállított N-alkilezett terméket 1,0 ml (7,4 mmól) izoamil-nitritben keverés közben oldunk, majd az oldatot mínusz 8 °C hőmérsékletű jégfürdőben lehűtjük és keverés közben cseppenként hozzáadunk 0,9 ml koncentrált (36 t%-os) sósavat. A reakcióelegyet 15 percig keverjük, majd éjjelen át mínusz 20 °C hőmérsékleten tároljuk.
A fenti módon kapott reakcióelegyhez 10 ml jégecetet adunk és az elegyet 30-35 percig mínusz 20 °C hőmérsékleten tartjuk. Ezután 10 ml hideg metanolt adunk hozzá és az elegyet mínusz 15 °C hőmérsékleten 3 óra hosszat állni hagyjuk, amikoris fehér csapadék képződik. Ezt a terméket gyorsan leszűrjük, 5 ml jéghideg metanollal mossuk, majd vákuumban megszárítjuk. Fehér por alakjában kapjuk a cím szerinti vegyületet, amely bomlás közben 94-96 °C-on olvad.
1H NMR : (CD-jCN) δ (ppm): 1,80 (S; 6H; ~CH3), 5,43 (S; 2H; N=C-CH2~N),
7,05 (s; 1H; 4H), 7,20 (s; 1H; 5H), 9,63 (s; 1H; N-OH).
13C NMR : (DMSO-d6) δ (ppm) : 30,02 (s), 42,38 (s), 70,66 (s), 126,41 (s), 127,53 (s), 153,25 (s).
1. példa
4,9-Diaza-3,3,10,10-tetrametil-d'odekan-2,11-dion-dioxim - (I) vegyület, BnAO
Egy argongáz-bevezetővel, visszafolyató hűtővel, felső
- ζζkeverővel és nyomás-kiegyenlítő csepegtető tölcsérrel felszerelt, 3 literes, háromnyakú lombikba 1000 ml acetonitrilt,
19,5 g (0,23 mól) 1,4-diamino-butánt és 37,2 g (0,46 mól) nátrium-hidrogén-karbonátot adagolunk. Ezt az elegyet argon atmoszférában, környezeti hőmérsékleten élénken keverjük, hogy a nem oldódó nátrium-hidrogén-karbonátot szuszpendálva tartsuk. 60-g (0,45 mól) 2-klór-2-metil-3-nitrozo-butánt 600 ml acetonitrilben oldunk és ezt az oldatot keverés közben cseppenként, 15-20 perc alatt a reakció edényben levő elegyhez adjuk. Ezután a reakcióelegyet további 1 óra hosszat keverjük, majd 60 °C-ra melegítjük és 30 percig ezen a hőmérsékleten tartjuk, majd szobahőmérsékletre hagyjuk lehűlni. A levált fehér szilárd anyagot, amely nátrium-hidrogénkarbonát, nátrium-klorid és az előállított termék keveréke, szűréssel elkülönítjük. Ebből a keverékből a kívánt terméket forró metanollal extraháljuk, forrón leszűrjük és a kapott oldatot térfogatának 50 %-ára bepároljuk, majd lehűtjük és újból szűrjük. A kapott szilárd anyagot a szükséges minimális mennyiségű 0,1 mólos sósav-oldatban oldjuk, majd az oldat pH-értékét 0,1 mólos nátrium-hidroxid-oldattal 11-re állítjuk és ezzel a tiszta terméket leválasztjuk. Az így kapott terméket szűréssel elkülönítjük, megszárítjuk, majd forró metanolból átkristályosítjuk. Ily módon 20 g (30,4 %) 4,9-diaza-3,3,10,10-tetrametil-dodekan-2,11-dion-dioximot kapunk, 183-186 °C-on olvadó fehér tűkristályok alakjában.
1H NMR : (DMSO-dg) δ (ppm) : 1,10 (s, 12H, -CH3), 1,30 (m, 4H, -CH2),
1,70 (s, 6H, -CH3-C=N-O)
2,10 (m, 4H; -CH2-N), 10,34 (s, 2H, oxim). .
13C NMR : (CD3OD) δ (ppm) : 10,3 (s), 26,4 (S), 29,7 (s), 45,0 (s) , 59,4 (s),
162,2 (s).
2. példa
A 3,3,10,10-tetrametil-l-(2-nitro-lH-imidazol-l-il) -4,9-diazadodekán-2,11-dion-dioxim - (II) vegyület szintézise
656 mg (2,66 mmól) 1-(2-nitro-l-imidazol)-3-klór-3-(metil-butan)-2-on-2-monoxim 70 ml abszolút etanollal készített oldatát hozzáadjuk 500 mg (2,66 mmól) 3-(4-amino-butil) -amino-3-metil-2-butanon-oxim és 1 g (11,97 mmól) nátrium-hidrogén-karbonát 35 ml száraz acetonitril és 35 ml abszolút etanol elegyével készített szuszpenziójához részletekben, perc alatt. A reakcióelegyet azután 72 óra hsoszat keverjük, majd az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk. A visszamaradó olajszerű anyaghoz 30 ml vizet adunk és az így kapott szuszpenziót 2 mólos sósavoldattal 4 pH-értékre savanyítjuk, amikoris tiszta oldatot kapunk. Az elegyben esetleg jelenlevő szerves szennyezéseket 50-50 ml dietil-éterrel történő háromszori extrahálással eltávolítjuk, majd a vizes fázishoz cseppenként 2 mólos nátrium-hidroxid oldatot adunk 10-11 pH-érték eléréséig. Ezen a pH-értéken a kívánt termék kiválik az oldatból, ezt szabad levegőn történő szűréssel el24 különítjük, vízzel mossuk és vákuumban megszárítjuk. így krémszínű por alakjában kapjuk a cím szerinti (II) vegyületet, amely 151-152 °C-on olvad.
1H NMR : (CD3OD) & (PPm): 1,18 (s; 6H; -CH3), 1,20 (s; 6H; -CH-j),
1,40 (m; 4H, -CH2)
1,75 (s; 3H; -CH3-C=N-O) , 2,16 (t; 2H; CH2-£H2-N),
2,30 (t; 2H; N-£H2-CH2), 5,28 (S; 2H; 0-N=C-CH2~N),
7,05 (S; 1H; 4H) , 7,35 (S; 1H; 5H) .
3. példa
A 4,10-diaza-3.3.11,ll-tetrametil-tridekán-2,12-dion-dioxim (III) vegyület, PentAO - szintézise
Ezt a vegyületet az irodalomban (S.Jurisson és munkatársai, i.m.) leirt módszerjrrel állítjuk elő; op. : 130 - 132°C 1H NMR : (CD3OD) (ppm): 1,20 (S; 12H; -CH3), 1z3-1t5 (m; 6H, -CH2),
1,75 (S; 6H; -CH3 -CaN-O) , 2,35 (t; 4H; CH2-£H2 _N) .
4. példa
A 3,3,11,11-tetrametil-l-(2-nitro-lH-imidazol-l-yl) -4,10-diaza-tridekán-2,12-dion-dioxim - (IV) vegyület szintézise
Ezt a vegyületet a 2. példában a (II) vegyület előállítására leirt módszerrel állítjuk elő, 3-(-5-amino-pentil)-amino-3-metil-2-butanon-oxim alkalmazásával 3-(4-amino-butil)-amino-3-metil-2-butanon-oxim helyett. A (IV) vegyület 135 -137 °C-on olvad.
1H NMR : (CD3OD) b (ppm): 1t20 (S; 6H; -CH^), 1,25 (S; 6H;
1,3-1.5 (m; 6H, -CH2) , 1,75 (S; 2,2-2,35 (m; 4H; CH2-£H2-N),
5,28 (S; 2H; O-N=C-£H2-N), 7,05 ; 7,35 (S; 1H; 5H).
-ch3),
3H; -CH,-C=N-O), (S; 1H; 4H),
5. példa
A 3,3,9,9-tetrametil-l-(2-nitro-lH-imidazol-l-il)-4,8-diaza-undekán-2,10-dioxim - (V) vegyület, referencia-példa - előállítása
Ezt a vegyületet az 544 412 A2 számú európai szabadalmi leírás (Squibb) 1. példájában (20-21. oldal) leirt módszerrel állítjuk elő; op.: 146 - 148°C 1H NMR : (CDC13) δ (ppm): 1,25 (S; 6H; -CH3), 1,30 (S; 6H, -CH3),
1,60 (S; 2H; -CHj) 1,80 (S; 3H; -CH3-C=N-O),
2.35 (q; 4H; CH2-£H2-N),
5,28 (S; 2H; O-N=C-CH2~N) , 7,05 (S; 1H; 4H),
7.35 (S; 1H; 5H). .
6. példa
A 3,8-diaza-2,2,9,9-tetrametil-dekán-l,10-dial-dioxim - (VI) vegyület) - szintézise
Ezt a vegyületet a PnAOE. G. Vassian és munkatársai Inorg· Chem., £, 2043 (1967) - által leirt·-módszerhez hasonló módon állítjuk elő, 2-klór-2-metil-l-nitrozo-propán felhasználásával; op.: 165 - 168°C 1H NMR : (CD3OD) (ppm): 1,10 (s; 12H; -CH3), 1,25 (m; 4H, -CH2), 2,25 (t; 4H; CH2-CH2-N), 7,15 (S; 2H; H-C=N-O).
7. példa
A 3,8-diaza-10-(hidroxi-imino)-2,2,9,9-tetrametil~dodekanal-oxim - (VIl) vegyület - szintézise
0,5 g (2,9 mmól) 2-(4-amino-butil)-amino-2-metil-propanal-oxim 5 ml metanollal készített oldatához keverés közben hozzáadjuk 0,44 g (2,9 mmól) 2-klór-2-metil-3.-nitrozo-pentán 5 ml acetonitrillel készített oldatát. A reakcióelegyet éjjelen át keverjük, majd a kivált szilárd anyagot szűréssel elkülönítjük, metanolból átkristályositjuk és vákuum bán megszáritjuk. 0,46 g cím szerinti vegyületet (58 %) kapunk színtelen tűkristályok alakjában; op. : 185 - 188 °C.
1H NMR : (CD30D)
á (ppm) : 1,15 (t; 3H;
1,46 (s; 6H;
2,36 (q; 2H;
2,84 (t; 2H;
CH2-£H3), 1,31 (s; 6H; -CHg), -CH3) 1,67 (m; 4H; -CH2), zCH2-CH3), 2,63 (t; 2H; CH2-N), CH2-N), 7/31 (S; 1H; H-C=N-O).
13C NMR : (CD30D)
Ó (ppm) : 11,1 (S), 19,4 (s), 23,7 (s), 24,9 (s), 26,7 (s),
27,8 (s), 43,6 (s), 43,7 (s), 56,5 (s), £2,1 (s), 154/5 (s), 160,9 (s).
8. példa
Az 5,10-diaza-4,4,11,ll-tetrametil-tetradekán-3,12-dion-dioxim - (VIII) vegyület - szintézise
0,2 g 1 mmól) 2-(4-amino-butil)-amino-2-metil-3pentanon-oxim és 0,11 g (1 mmól) trietil-amin 5 ml metanolos oldatához keverés közben hozzáadjuk 0,116 g (1,08 mmól) 2-klór-2-metil-3-nitrozo-pentán 5 ml acetonitrillel készített oldatát. A reakció elegyet éjjelen át keverjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A visszamaradó nyers terméket matanolban oldjuk és dietil-éter hozzáadásával leválasztjuk a terméket, ezt leszsürjük és vákuumban megszáritjuk. 0,18 g cím szerinti vegyületet (58 %) kapunk 194 - 197°C-on olvadó fehét por alakjában.
1H NMR : (CD3OD)
Ó (PPm) : 1t14 <t; 6H; CH2_űi3)' 1'39 (S; 12H; _CH3)'
1,65 (m; 4; -CHj) 2;34 (q; 4H; z£Ü2”CH3^'
2,71 (m; 4H; CH^N) .
9. példa
A 4,9-diaza-3,3,10,10-tetrametil-tridekán-2,11-dion-dioxini - (IX) vegyület - szintézise
0,5 g (2,67 mmól) 3-(4-aminobutil)-amino-3-metil-2butanon oxim és 0,3 g (2,9 mmól) trietil-amin 5 ml metanollal készített oldatához keverés közben hozzáadjuk 0,43 g (2,9 mmól) 2-klór-2-metil-3-nitrozo-pentán 5 ml acetonitrillel készített oldatát. A reakcióelegyet éjjelen át keverjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A visszamaradó nyers terméket metanolban oldjuk és a terméket dietil-éter hozzáadásával leválasztjuk, és szűréssel elkülönítjük, majd vákuumban megszáritjuk. 0,46 g cím szerinti vegyületet (57 %) kapunk 190 - 193°C
-on olvadó por alakjában.
1H NMR : (CD3OD)
1,15 (t; 3H; CH2-£fl3), 1, 37 (S; 6H; -CH3),
1,42 (s; 6H; -ch3)
1,67 (m; 4H; -CH2), 1,86 (S; 3H; -CH^,
2,35 (q; 2H; x£H2-CH3),
2;68 (t; 2H; CH2-N), 2,77 (t; 2H; CH^N) .
13C NMR : (CD3OD) $(ppm) : 9,7 (s), 11,2 (s), 19,3 (s), 24,4 (d), 26,9 (d),
43,7 (d), 60,8 (s), 61,6 (s), 158,5 (s), 161,6 (s) .
10. példa
Az 1,12-bis(2-nitro-1-imidazolil)-4,9,diaza-3,3,10,10-tetrametil-dodekán-2,11-dion-dioxim - (XI) vegyület - szintézise mg (1 mmól) 1,4-diamino-bután és 200 mg (2 mmól) trietil.-amin 10 ml metanollal készített oldatához keverés közben hozzácsepegtetjük 500 mg (2 mmól) 1-(3-klór-3-metil-2-nitrozo)-butil-2-nitro-imidazol 10 ml acetonitrillel készített oldatát. A reakcióelegyet 48 óra hosszat keverjük, majd leszűrjük. 160 mg cíim szerinti vegyületet (35 %) kapunk, amely 168 - 170 °C-on olvad.
1H NMR : (dg-DMSO) (ppm) : 1,18 (14H,s, átfedő rezonanciák), 2/08 (4H,S),
2,50 (2H,t,JHH 7,2Hz)., 5;23(4H-,S),
7,11(1H, d,JHH 1,2Hz),
7,29H, d,JHH 1,2Hz).
13C NMR : (CD3OD) (ppm) : 25,48(x4)(CH3), 27,96(CH2), 42,39(x2)(CH2),
56,86(x2)(q),
126,48 (x2)(CH), 127,35 (x2)(CH), 1 45,35 (x2) (q), • 156j53(x2)(q).
11. példa
A 3,8-diaza-10-(hidroxi-imino)-11-(2-nitro-l-imidazolil) -2,2,9,9-tetrametil-undekanal-oxim - (XII) vegyület szintézise
191 mg (1,1 mmól) 2-(4-amino-butil)-amino-2-metil-propanal-oximí és 121 mg (1,21 mmól) trietil-amin 10 ml metanollal készített oldatához keverés közben hozzáadjuk 300 mg (1,21 mmól) 1-(3-klór-3-metil-2-nitrozo)-butil-2-nitro-imidazol 10 ml acetonitrillel készített oldatát. A reakcióelegyet éjjelen át keverjük, majd az illékony részeket vákuumban elpárologtatjuk.
A visszamaradó sárga félszilárd anyagot 10 ml vízzel felvesszük és az oldhatatlan anyagot kiszűrjük. A szürletet fordított fázisú nagynyomású folyadék-kromatográfiával tisztítjuk; metanoljés viz 50:50 térfogatarányu elegyével eluálunk 40 mg (XII) vegyületet (10%) kapunk sárga viszkózus olaj alakjában.
1H NMR : (CD3OD) (ppm) : 1,17-2,4 (4H,m, átfedő rezonanciák),
1.26 (6H,s), 1,27 (6H,s)
2.26 (2H, t,JHH 7,2Hz), 2,50 (2H, t,JHH7,2Hz),
5,35(2H,s,), 7,09(1H,d,JHH 1,2Hz),
7.27 (1H,s), 7,34(1H,d,JHH 1,2Hz).
13C NMR : (CD-OD) d (ppm) : 25,14(x2)(CH3), 25,8 (x2)(CH3), 28,45 (CH2),
28,98 (CH2), 41,99 (CH2), 43,87 (CH2), 43,91 (CH2), 55,82 (q), 58,52 (q) 127,58 (CH),
128,17 (CH), 155,15 (q).
12. példa
A 4,9-diaza-3,10-dimetil-dodekán-2,11-dion-dioxim(XIII) vegyület - szintézise
A) 4,9-Diaza-3,9-dién-3,10-dimetil-dodekán-2,11-dion-dioxim
10,11 g (0,1 mól) bután-2,3-diont 125 ml benzolban oldunk és visszafolyatás közben forraljuk az oldatot. Eközben 5 óra alatt 3,97 g (45 mmól) 1,4-diamino-bután 100 ml benzollal készített oldatát csepegtetjük hozzá és a forralást éjjelen át folytatjuk. Lehűlés közben krémszínű szilárd termék válik le, ezt vákuumszűréssel elkülönítjük és tisztítás nélkül dolgozzuk fel tovább a következő műveletben. A kapott nyers cím szerinti vegyület mennyisége 10,8 g (94 %) .
ΣΗ NMR: (dimetil-szulfoxid)
ó (PPm): 1,5 (4H, széles s, ), 1,72 (6H, s, CH^)
1,80 (6H,s, CH3), 3,20 (4H, széles s, NCH2).
13 C NMR: (dimetil-szulfoxid)
ó (ppm): 9,12 (x2), CH3, 13,1 (x2)CH3, 28,7 (x2)CH2,
51,2 (x2)(NCH2), 156,7 (x2)q, 163,6 (x2)q.
B) 4,9-Diaza-3,10-dimetil-dodekán-2,10-dion-dioxim
Az A) szakaszban leírt módon előállított 2 g (7,85 mmól) diimin 20 ml abszolút alkohollal készített és sózott jéggel hűtött oldatához keverés közben 30 perc alatt 0,3 g (7,85 g) nátrium-bór-hidridet csepegtetünk. A reakcióelegyet további 2 óra hosszat keverjük, majd 10 ml vizet adunk hozzá és a vizes fázis pH-értékét híg sósavoldat hozzáadásával semlegesre állítjuk. Az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, maradékként fehér por alakjában kapjuk a cím szerinti nyers vegyületet.
A kapott termék mintáját fordított fázisú nagynyomású folyadék-kromatográfiával tisztítjuk, víz és metanol : 50 tf-arányú elegyével eluálva színtelen szilárd terméket kapunk, amely bomlás közben 210 °C-on olvad.
Elemzési adatok: a (-:ΐ2Η26Ν4θ2 Képlet alapján számított C 55,79 %, H 10,14 %, N 21,69 talált C 55,72 %, H 10,44 %, N 21,18 1H NMR : D20 δ (ppm) : 1,49 (6H, d, 6,8 Hz, CH3), 1 ,76-1,85 (4H, m, CH2) ,
1,91(6H, s, CH3), 3,0-3,06 (4H, m, NCH2), 3,92 (2H, q, 6,8 Hz,NCH) 13C NMR : CD30D δ (ppm) : 11,6 (x2)(CH3), 16,4 (x2)(CH3), 24,5 (x2)(CH2),
58,4 (x2)(CH), 153,2(x2)(q).
13. példa
A N,N'-bisz(4-acetil-tetrahidropiran-4-il)-1,4-diamino-bután-dioxim - (XIV) vegyület - szintézise
120 mg (1,36 mmól) 1,4-diamino-bután és 300 mg (2,98 mmól) trietil-amin elegyével készített oldathoz keverés közben 500 mg (2,91 mmól) 4-klőr-4-(1-nitrozo-etil)-tetrahidropirán 15 ml acetonitrillel készített oldatát adjuk. A hozzáadás hatására fehér csapadék válik ki a reakció32 elegyből, amelyet még 15 percig tovább keverünk, majd a szilárd terméket vákuum alkalmazásával kiszűrjük és metanolból átkristályosítjuk. 150 mg fehér por alakjában kapjuk a cím szerinti vegyületet; hozam: 30 %, op.: 183 °C. ΣΗ NMR: CDC13/CD3OD ó (ppm): 1,45 (4H, m, CH2)t 1,65 (4H, m triplett jellegű dublettel, CH), 1,79 (3H, s, CHp, 1,80 (3H, s, CH3), 2,03 (4H, m dublett jelleggel, CH), 2,33 (4H, m, CH^), 3,60 (4H, mtriplett jellegű dublettel, CH), 3,20 (4H, m, CH).
13C NMR : CDC13/CD3OD) δ (ppm) : 9,17 (x2)(CH3), 28,69 (x2)(CH2), 34,42 (x2)(CH2), 42,18(x2)(CH2), 57,86(x2)(q), 64,79 (x2)(CH2), 158,65(x2)(q)
14. példa
A 3,10-bisz(metoxi-metil)-4,9-diaza-l,12-dimetoxi-3,10-dimetil-dodekán-2,11-dion-dioxim - (XV) vegyület - szintézise mg (0,6 mmól) 1,4-diamino-bután és 0,25 g nátrium-hidrogén-karbonát 2,5 ml acetonitrillel készített szuszpenziójához keverés közben 0,19 g (1,2 mmól) 2-klór-2-(metoxi-metil)-4-metoxi-3-nitrozo-bután 2,5 ml acetonitrillel készített oldatát adjuk, majd az elegyet visszafolyatás közben 5 óra hosszat forraljuk, majd további 72 óra hosszat keverjük.
A kapott elegyből az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a maradékként kapott olajhoz 30 ml vizet adunk és a keletkezett zagyot 2 mólos sósav-oldattal 4 pH-értékig savanyítjuk, amikoris tiszta oldatot kapunk. Az esetleges szerves szennyezéseket 50-50 ml dietil-éterrel háromszor extrahálva eltávolítjuk, majd a vizes fázishoz cseppenként, 10-11 pH-érték eléréséig 2 mólos nátrium-hidroxid-oldatot adunk. Ezután a keletkezett terméket 50-50 ml diklór-metánnal háromszor extraháljuk és a diklór-metános fázisokat egyesítjük, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és leszűrjük. A szűrletet szárazra párolva színtelen félszilárd termékként kapjuk a nyers cím szerinti vegyületet.
A kapott termék mintáját fordított fázisú nagynyomású folyadék-kromatográfiával tisztítjuk az alábbi körülmények között: oszlop: PRP 1 A oldószer: 1^0
B oldószer: acetonitril áramlás: 2,5 ml/perc gradiens: O - 100 % B oldószer 15 ..perc alatt detektor: UV, 210 nm hullámhosszra állítva retencióidő: 13,5 perc
NMR: CDCl^ (izomerek vannak jelen) ó (ppm): 1,25 (6H, s, CH-j), 1,50 (4H, széles, CH^ 2,40 (4H, széles, CH2~N), 3,30 (12H, m, átfedő 0-CH3 rezonanciák), 3,45 (4H, m (maszkírozva),
-CH^-OMe), 4,3 (4H, m, -N=C-CH2~OMe).
15. példa
A 4,9-diaza-3,3,1O,10-tetrametil-dodekán-2,11-dion-dioxim-8-karbonsav-metilészter - (XVI) vegyület szintézise
294 mg fém-nátriumból 20 ml vízmentes etanollal frissen készített és száraz nitrogén-atmoszférában kevert nátrium-etoxid-oldathoz lg (6 mmól) L-ornitin-hidrokloridot adunk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 1 óra hosszat keverjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk.
Az így kapott szabad bázist azonnal feloldjuk 10 ml vízmentes acetonitril és 15 ml vízmentes etanol elegyében és ehhez az oldathoz cseppenként hozzáadjuk 1,58 g (12 mmól) 2-klór-2-metil-3-nitrozo-bután és 4,5 milliekvivalens nátrium-hidrogén-karbonát vízmentes acetonitrillel készített szuszpenzióját. A 10 perc alatt történő hozzácsepegtetéssel az: L-ornitin bázist felszabadítjuk, majd a reakcióelegyet 18 óra hosszat tovább keverjük.
Az így kapott reakcióelegyből az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, és a maradékhoz 40 ml vizet adunk. A kapott szuszpenziót 2 mólos sósav-oldattal 4 pH-értékre savanyítjuk, amikoris tiszta oldatot kapunk. Az esetleges szerves szennyezéseket 50-50 ml dietil-éterrel történő háromszori extrahálással eltávolítjuk. A vizes fázist 11 pH-értékre állítjuk, majd szárazra pároljuk. A maradékot 20 ml vízmentes metanolban újból feloldjuk,és az oldathoz 4 csepp tömény kénsavat adunk. Az oldatot visszafolyatás közben 4 óra hosszat forraljuk, majd szobahőmérsékleten 18 óra hosszat tovább keverjük. Ezután az oldószert vákuumban elpárologtatjuk és a kapott gyantaszerű maradékot fordított fázisú nagynyomású folyadék-kromatográfiával (az alább megadott körülmények között) tisztítjuk. így 150 mg 4,9-diaza-3,3,10,lO-tetrametil-dodekán-2,ll-dion-dioxim-8-karbonsav-metilésztert kapunk tiszta olaj alakjában.
A nagynyomású folyadék-kromatográfiai rendszer:
oszlop: PRP-1
A oldószer: viz
B-oldószer: acetonitril áramlási sebesség: 2,5 ml/perc detektálás: UV, 210 nm hullámhosszra beállítva gradiens: 0 % - 100 % B oldószer 20 felett a termék retenció-ideje: 4,5 perc 1H NMR : CD3OD δ (ppm) : 1,50 (s, 12H, -CH3), 1,95 (m, 4H, -CH2- és s,
6H, CH3-C=N-O)
3,00 (t, 2H, -CH2-N), 3,60 (t, 1H,)N-CH),
3,70 (s, O-CH3) .
16. példa
Az 5,9-diaza-4,4,10,10-tetrametil-tridekán-2,12-dion-dioxim - (XVII) vegyület - szintézise
A) 5,9-Diaza-4,4,10,10-tetrametil-tridekán-2,12-dión-di(0-benzil-oxim).2HC1
0,74 g (10 mmól) 1,3-diamino-propánhoz keverés közben 2 g (20,4 mmól) 4-metil-pent-3-én-2-ont adunk. A
- „ reakció előrehaladását C NMR vizsgalattal ellenőrizzük, 20 perc után a reakció befejezettnek tekinthető. Ekkor 10 ml metanolt és 3,25 g (20,4 mmól) O-benzil-hidroxil-amint adunk a reakcióelegyhez, amelyet azután 1 óra hosszat keverünk, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A kapott sárga viszkózus anyaghoz 20 ml vizet adunk és a képződött terméket diklőr-metánba extraháljuk. A diklór-metánt vákuumban elpárologtatjuk, maradékként lyukacsos felületű szilárd termék alakjában kapjuk a nyers cím szerinti vegyületet. 95:5 tf%-arányú víz-metanol-elegyből történő átkristályosítással 3,2 g (65%) tiszta terméket kapunk 163-165 °C-on olvadó színtelen lemezkék alakjában.
Elemzési adatok: a C2g H44N4°2-2HC1· 2H2O képlet alapján
számított C 59,07 %, H 8,55 %, N 9,50 %;
talált C 59,36 %, H 8,55 %, N 9,98 %.
1H NMR : cdci3/tms
δ (ppm) : 1,38 (12H, s, CH3), 1,94 ( 6H, S, ch3), 2,15
(2H, m, CH2), 2,57 (4H, s, ch2), 2,91 (4H, m
,NCH2), 5,08 (4H, s, 0CH2) , 7,31 (1 OH széles s).
13C NMR : CD3OD
Ő (ppm) : 17,32 (x2)(CH3), 24,23 (x4)(CH3), 25,02 (CH2), 39,76 (x2)(CH2), 42,84 (x2)(CH2), 60,48 (x2)(q), 76,64 (x2)(CH2), 128,93 (x2)(CH), 128,93 (x2)(CH), 128,98 (x4)(CH), 129,51 (x4)(CH), 139,17 (x2)(q) 156,72 (x2)(q).
- 37 B) 5,9-Diaza-4,4,10,10-tetrametil-tridekán-2,12-dion-dioxim
200 mg fenti módon előállított védett O-benzil-vegyület ml metanol és 5 ml hangyasav elegyével készített oldatához keverés közben, száraz nitrogén-atmoszférában 20 mg 10 %-os aktivszenes palládium-katalizátort adunk. Ezt az elegyet légköri nyomáson hidrogénezzük a reakció befejeződéséig, ami körülbelül egy órát igényel. Ezután a reakcióelegyet pórusos üvegszűrőn és celit szűrőanyagon keresztül szűrjük, majd az oldószert és az egyéb illékony anyagokat vákuumban elpárologtatjuk. Maradékként lényegileg mennyiségi hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet, üveges félszilárd alakban. Teljesen tiszta termék előállítására ennek egy kis mintáját vízben oldjuk és nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadásával fordított fázisú nagynyomású folyadék-kromatográfiával tisztítjuk, eluálőszerként víz és metanol 50:50 tf%-os elegyét alkalmazva. A tiszta terméket viszkózus folyadék alakjában kapjuk.
1H NMR : D2O/DSS δ (ppm) : 1,42 (12H, s, CH3), 1.94 (6H, s, CH3), 2,12 (2H, m, CH2), 2,67 (4H, s, CH2), 3,14 (4H, m, NCH2) .
13C NMR : CD3OD δ (ppm) : 16,16 (x2)(CH3), 24,71 (x4)(CH3), 24,94 (CH2), 39,67 (x2)(CH2), 42,31 (x2)(CH2), 59.96 (x2)(q), 155,75 (x2)(q).
17. példa
Az 5,10-diaza-4,4,ll,ll-tetrametil-tetradekán-2,11-dion-dioxim - (XVIII) vegyület - szintézise
A) 5,10-Diaza-4,4,11,ll-tetrametil-tetradekán-2,13-dion-di(O-benzil-oxim).2HC1
Ezt a vegyületet 2 g (20 mmól) 4-metil-pent-3-én-2-on, 0,9 g (10 mmól) 1,4-diamino-bután és 3,18 g (20 mmól) O-benzil-hidroxil-amin-hidroklorid felhasználásával, 25 ml metanolban állítjuk elő, a (XVII) vegyület fentebb leírt előállításához hasonló módon. Az O-benzil-hidroxil-amin-hidroklorid hozzáadása után a reakcióelegyet éjjelen át keverjük. A metanol vákuumban történő elpárologtatása során sárga színű viszkózus olajat kapunk, ehhez 20 ml vizet és 20 ml diklór-metánt adunk és az elegyet élénken rázzuk. Állás közben a termék a két folyadékfázis határán kikristályosodik 2,6 g (47 %) színtelen tűk alakjában;
op.: 157-160 °C.
Elemzési adatok: a 03θΗ^θΝ^02.2HC1.2H2O képlet alapján
számított C 59,69 %, H 8,68 %, N 9,28 %,
talált C 59,66 %, H 9,09 %, N 9,58 %.
1H NMR : cdci3/tms
δ (ppm) : 1,43 (12H, s. ch3), 1 j 84 (4H, CH2), 1,94 (6H,
s, CH3), 2)67 (4H, s, CH2), 2,89 (4H, m, ,NCH2), 5,08 (4H, s, 0CH2), 7,32 (10H m).
13C NMR : CDC13/TMS *
δ (ppm) : 17,22 (x2)(CH3), 23,56 (x4)(CH3), 23,82 (x2)(CH2), 40,54 (x2)(CH2), 42,96 (x2)(CH2),
59,90 (x2)(q), 75,79 (x2)(CH2), 127,90 (x5)(CH), 128,56 (x4)(CH), 138,12 (x2)(q), 154,48 (x2)(q).
B) 5,1O-Diaza-4,4,11,ll-tetrametil-tetradekán-2,13-dion-dioxim
200 mg fenti módon előállított védett O-benzil-vegyület ml metanol és 5 ml hangyasav elegyével készített oldatához keverés közben, száraz nitrogén-atmoszférában 20 mg %-os aktivszenes palládium-katalizátort adunk. Ezt az elegyet légköri nyomáson hidrogénezzük a reakció befejeződéséig, ami körülbelül egy órát igényel. Ezután a reakcióelegyet pórusos üvegszűrőn és celit szűrőanyagon keresztül szűrjük, majd az oldószert és az egyéb illékony anyagokat vákuumban elpárologtatjuk. Maradékként lényegileg mennyiségi hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet színtelen félszilárd termék alakjában.
1H NMR : D2O/DSS δ (ppm) : 1,41 (12H, s, CH-j), 1,76 (4H, br, CH2), 1,93 (6H, s, CH3), 2,67 (4H, s, CH2), 3,07 (4H, m, nch2).
13C NMR : D2O/DSS (ppm) : 18,20 (x2)(CH3), 25,96 (x2)(CH2), 26,04 (x4)(CH3), 43,02 (x2)(CH2), 43,85 (x2)(CH2), 61,36 (x2)(q), 159,54 (x2)(q).
18. példa 99mTc komplexek előállítása
Az alábbi általános módszert alkalmazzuk az I., II.,VI-IX. és XII-XV..példában leirt ligandumok 99mTc komplexeinek az előállítására.
mg ligandumot lezárható ampullában feloldunk 0,1 ml 0,1 mólos sósavoldat és 0,9 ml desztillált víz elegyében. Ezt a ligandum-oldatot 0,1 mólos nátrium-hidroxid oldattal 8 pH-értékre
99m állítjuk be, majd O,25GBq TcO4 (1 ml generátor eluátum),
0,3 ml 0,1 mg/ml koncentrációjú vizes ón(II)-tartarát és 3 ml
0,9 t%-os vizes nátrium-klorid-oldat hozzáadásával az elegyet szobahőmérsékleten 30 percig állni hagyjuk. A mTc komplex RCP értékét vőkonyréteg-kromatográfiával és nagynyomású folyadék-kromatográfiával ellenőrizzük; az alábbi értékeket kaptuk:
Az alábbi vegyületek technécium kompipxe 99mTc komplex (%) HPLC (tR perc)
(I) vegyület > 95 4,0
(II) vegyület > 95 4,9
(IV) vegyület >95 3,8
(VII) vegyület > 95 3,8
(VIII) vegyület >95 4,8
(IX) vegyület 95 3,9
(XII) vegyület >95 4,4
(XIII) vegyület 7 95 . 4,7
(XIV) vegyület 73 6,8
(XV) vegyület > 95 3,4/3,7 *
(XVI) vegyület > 95 3,6
9m a HPLC?
Tc-jelzett izomert mutat • 4 · « 4 4 ·♦ ··»*··· ··· 4·· ·· »♦ · '
A III., IV., XI., H2dddo, XVII. és XVIII. vegyület 99mTc komplexének előállítása
0,-5 mg ligandumot lezárható ampullában feloldunk 0,1 ml 0,1 mólos sósavoldat és 0,9 ml desztillált víz elegyében. Ezt a ligandum-oldatot 0,1 mólos nátrium-hidroxid oldattal 8 pH értékre állítjuk be, majd O,25GBq “TcO^ (1 ml generátor eluátum), 0,3 ml 0,1 mg/ml koncentrációjú vizes ón(II)-tartarát és 3 ml θ'θ t%-os vizes nátrium-klorid-oldat hozzáadásával az elegyet szobahőmérsékleten 30 percig állni hagyjuk. A ^^mTc komplex RCP értékét vékonyréteg-kromatográfiával és nagynyomású folyadék-kromatográfiával ellenőrizzük; az alábbi értékeket kaptuk:
Az alábbi vegyületek technécium komplexe 99m_ , . Te komplex (%) HPLC (tR perc)
(III) vegyület > 90 4,0
(IV) vegyület > 90 5,3
H2dddo >95 3,8
(IX) vegyület >95 6,4
(XVII) vegyület >95 4,1
(XVIII) vegyület 62 3,4
Az (V) vegyület ^^mTc komplexének előállítása
0,2 mg ligandumot lezárható ampullában 50 mikroliter metanolban oldunk. 0,25 GBq ^^mTcO4 (1 ml generátor eluátum) 1 ml 0,1 mg/ml koncentrációjú vizes ón(II)-tartará.t-oldat és 4 ml 0,9 t%-os vizes nátrium-klorid-oldat hozzáadása után az elegyet szobahőmérsékleten 30 percig állni hagyjuk, vékonyréteg - kromatográfiai és nagynyomású folyadék-kromato - 42 gráfiai (t = 9,3 perc) vizsgálat szerint 95 %-ot méghaR
9 ni — zz ladó mennyiségű Te komplex képződött.
Analitikai módszerek:
Vékonyréteg-kromatográfia:
Whatman 1. sz. papír; eluálás 50 %-os vizes acetonitrillel. Redukálva hidrolizálva Te = 0,0.
ITLC SG eluálás 0,9 t%-os vizes nátrium-klorid-oldattal. Szabad pertechnetát = 1,0.
Q Q % Te komplex = 100 - szabad pertechnetát redukálva hidrolizálva Te.
Nagynyomású folyadék-kromatográfia:
Hamilton PRP-1 oszlop, eluálás: 2 ml/perc.
Gradiens rendszer:
100 % pH = 5,6, 50 millimőlos nátrium-acetát-oldat
1OO % tetrahidrofuránig 17 perc alatt.
19. példa
a) Cink / ammónium-klorid-oldat redukciós próba mg cinkport bemérünk egy üveg edénykébe. Az edényt lezárjuk és nitrogéngázzal átöblítjük. Ezután a cinkport tartalmazó edénybe 1 ml nitrogénnel átöblített 2 mg/nl koncentrációjú ammónium-klorid-oldatot adunk.
A fenti módon előállított redukciós elegyhez 1 ml
9 m
Tc-komplex készítményt adunk, összerázzuk és 15 percig állni hagyjuk az elegyet, majd 0,22 pm Acrodisc szűrőn keresztül egy nitrogéngázzal töltött edénybe szűr43 • ···♦«·«* •·· ··· ·· ·« · jük. A szűrletet azután nagynyomású folyadék-kromatográfiával vizsgáljuk.
Ezzel a módszerrel a pozitív eredményt a komplex kromatográfiai viselkedésének megváltozása jelzi. A gyakor9 9m -latban ez rendszerint az eredeti Tc-komplex áltál mutatott HPLC csúcs eltűnésével és más, új HPLC csúcsnak vagy csúcsoknak a megjelenésével jár. Ha a Tc-komplex HPLC profilja nem változik, akkor ez negatív eredménynek tekintendő .
xx 9 9m
A következő ligandumok Tc-komplexei adtak pozitív vizsgálati eredményeket: (I), (II) és (IV) - (X) vegyületek :
„ 9 9m
A következő ligandumok Tc-komplexei adtak negatív vizsgálati eredményt: (III) vegyület és PentAO.
b) Xantin-oxidáz (XOD) hipoxantinnal, foszfáttal pufferezett sóoldatban (PBS)
Egy P6 edénykébe bemérünk 16 mg xantin-oxidázt, az edényt lezárjuk és nitrogéngázzal átöblítjük, majd a xantin-oxidázhoz 1 ml nitrogéngázzal öblített, foszfáttal pufferezett sóoldatot adunk.
Egy P6 edénykébe bemérünk 4,1 mg hipoxantint. Az edényt lezárjuk és hidrogéngázzal átöblítjük. Ezután az edényben lévő hipoxantinhoz 1 ml fenti módon elkészített PBS xantin-oxidáz oldatot adunk.
A fenti módon elkészített redukciós elegyhez 1 ml li9 9m — gandum-oldatot illetőleg 1 ml Tc-komplex készítményt adunk, az elegyeket rázzuk, majd 20 perces időközökben alikvot-min44 tákat veszünk, és ezeket a fenti 11a. példában leírt módon
HPLC vizsgálatnak vetjük alá.
9 in
A következő ligandumok Tc-komplexei adtak pozitív vizsgálati eredményt: (I), (II), (IV), (V) és (X).
20. példa
Bio-eloszlás patkányban - Módszerek
A beadott szer mennyiségi bio-eloszlását hím patkányokban az injekció beadása után 2 perccel, 1 órával illetőleg 4 órával vizsgáltuk.
A patkányoknak könnyű érzéstelenítés után intravénás injekcióban a vizsgálandó szer oldatának 0,1 ml-jét adtuk be. A beadás után 2, 60 illetőleg 240 perccel a patkányokat érzéstelenítettük, majd kivéreztettük. A beadott adag jelenlévő százalékarányát a patkány szerveiben, szöveteiben és exkrétumában vizsgáltuk a boncolás után, radioaktivitás alapján automatikus gamma-számlálóval. A kapott kísérleti eredményeket az alábbi 1 . táblázatban foglaltuk össze az egyes vizsgált komplexekre vonatkozólag, a beadott adagokra vonatkoztatott százalékarányokban:
4. táblázat: Bio-eloszlás patkányban
vegyület szerkezet RCP idő izom vér vese húgyhólyag /vizedet máj bél
1 Λί N 100
OH 1 OH 2 35.2 ».7 7.5 0.8 10.6 11.2
60 12.5 24 5.8 38 9 91 22.3
240 3.5 1.8 28 539 6.5 24.4
II V ~ H> N 99
ÓH ÓH 0 ¾ 2 26.1 8.4 13.1 1.0 15.5 13.4
60 6.6 1.3 1.4 34.1 11.4 40.0
240 3.1 0.9 1.6 31.4 7.9 49.9
VI x H y K
Óh HÓ 2 24.8 13.5 12.5 0.6 12.2 8.6
60 13.4 5.3 10.4 34.8 13.7 16.3
240 10.0 4.2 11.2 38.2 9.6 21.2
Vili ecí X 99
ÓH HÓ 2 29.7 9.0 7.8 0.6 13.6 139
60 7.4 1.8 25 32.2 13.1 36.2
240 24 1.5 28 31.4 9.6 46.7
III N 100
Óh óh 2 28.9 18.1 11.3 0.2 9.7 8.2
60 10.1 1.1 4.2 51.8 5.4 250
240 3.3 0.4 1.6 523 4.8 35.8
IV N N.
X 90
Óh ÓH NO, 2 24.3 10.8 121 0.4 15.8 13.7
80 8.2 1.0 27 29.5 25 50.9
240 20 0.8 1.0 30.8 1J 60.0
X
99
CH OH 2 34.9 8.0 1.8 0.1 27.» 11.7
60 7.9 8.8 21 9.5 13.1 51.5
240 26 8.4 1.4 19.4 125 53.4
V
JL^n^n 95
CM OH ^Ő 2 29.6 7.2 4.1 0.3 25.1 11.1
60 4.2 4.2 3.2 120 21.5 45.»
240 24 2.9 27 122 14.1 59.3
'1. cabiázat: 3io-eloszlás patkányban (folytatás)
vegyület szerkezet RCP idő izem vér vese húgyhólyag /vizelet máj i bél
vii NH 100
ÓH HÓ 2 25 8 11.8 9.8 0.8 12.9 12.1
K ti 3.0 3.4 40.8 11.8 232
240 7.5 2.6 4.9 36.0 9.3 31.3
IX x 100
ÓH HÓ 2 32.1 10.1 7.7 0.8 ΙΖ9 13.8
so •3 2.0 2.2 37.8 112 31.8
240 3.0 1.4 2.0 41.9 8.2 37.7
-Íhn^^nhÍ- 100
H2dddo ' OH HO 2 239 154 182 2.1 5.2 «0
60 10.7 11 2.8 86.8 3.0 8.8
240 4.3 12 2.8 73.8 2.2 11 0
2 24 1 18.9 13.8 0.3 4.8 1.4
60 112 2.0 3.1 70.2 2.1 II
240 4.3 1.0 3.8 77.8 1.5 8.5
XV o \zW W>Z 0
100
Ή
ÓH HÓ 2 27.4 12.8 14.2 12 102 9.5
80 S.7 1.7 82 54 9 6.3 21.3
240 1.9 0.9 8.7 82.1 4.1 32.1
XII Ö« *> Λ 99 2 23.8 10.8 13.3 12 18 0 13.4
80 82 2.0 5.5 38.0 11.0 31.9
240 52 1.3 3.7 38.8 7.9 35.5
XI Nh”HN^z. r=x T~- r=\ ΝγΝΆ Ník-NfN M
NO, ÓH HÓ NO, 2 18.7 10.8 8.6 02 21.7 18.2
80 58 1.4 2.1 23.7 7.3 567
240 3.1 0.9 2.0 21.0 3.8 66.0
0
/ Y*O*
XVI NH Hy &. h5 100 2 24.4 17.8 13.8 0.3 4.4 8.3
80 3.7 3.1 7.6 85 5 2.5 1.5
240 2.3 2.1 6.3 64.6 2.1 12.4
xm ^.NH HN_, ^N N*'' 100
ÓH HÓ 2 25.7 8.8 8.8 1.1 18.4 11.4
80 10.1 5.0 8.8 20.1 20.4 23.0
240 7.1 4.8 8.7 28.2 13.7 25.6
21. példa
Izolált, átár'amoltatott szív
Ebben a kísérleti modellben Langendorff-patkányok izolált szívét áramoltattuk át - egy kezdeti egyensúlyba hozatali szakasz után - vagy oxigénnel gázosított (95 tf.% 0^, 5 tf.% C02) vagy hipoxiásan gázosított (95 tf.% N2, 5 tf.% C02) módosított Krebs-Henseleith pufferoldattal, állandó áramlási sebességgel. Mindkét vizsgálatban a vizsgálandó szer ( Tc-komplex vagy ^^^I-IAZA), ^H-mizonidazol és ^C-DTPA elegyét lassú infúzióban adtuk hozzá 20 percig az átáramoltatott pufferoldathoz. Ezután hideg pufferoldattal történő 15 perces átmosás következett. A szívben fellépő y aktivitást a szív felett elhelyezett nátrium-jodid detektorral regisztráltuk.
Az aktív perfuzátum és a szív mintáiban az y aktivitást számlálóval viszgáltuk, majd a szokásos módszerekkel a béta-számlálási értékeket határoztuk meg.
A szívben mutatkozó aktivitást a perfuzátum aktivitásához viszonyítva számítottuk ki mindegyik nukleoidra vonatkozólag; a kapott adatokat mindegyik vegyületre vonatkozólag értékeltük mind a hipoxiás, mind az oxiás szívekben mutat- kozo aktivitásra (hipoxiás:oxiás arány), mind a H- mizonidazol aktivitásra (normalizált retenciő) vonatkozólag (az utóbbit az (1) képlet alapján számítottuk).
(1) képlet: normalizált retenciő = aktivitás a szívben (vizsgálat) teljes infúzió-aktivitás (vizsgálat) aktivitás a szívben ( H-mizo) teljes infúzió-aktivitás ( H-mizo)
Eredmények :
A kapott eredményeket az alábbi 2. táblázatban foglaljuk össze. Összehasonlításul megadtuk a megfelelő adatokat az
- 9 9m (I) vegyület, (IV) vegyület és a PnAO vegyület Tc-komplexeire vonatkozólag is. (AQ - 3 B - <2 bo) »
2. táblázat
Az alábbi vegyületek 9 9mm . Tc-komplexei Hipoxiás/oxiás arány (H/0) Normalizált hipoxiás retenció
(I) vegyület, BnAO 54 2.2
(II) vegyület 28 5.1
(IV) vegyület 2.4 0.49
(V) vegyület (ismert) 10 8.4
PnAO 5.1 0.50
(VI) vegyület 3.2 0.67
(VII) vegyület 8.8 1.5
(VIII) vegyület 34 2.2
(IX) vegyület 8.4 2.1
H^dddo 1.8 0.49
(XI) vegyület 3.4 0.98
(XII) vegyület 9.5 1 . 9
(XV) vegyület 1.2 1.4
(XVI) vegyület 4.0 0.22
123 I-IAZA 10 2.7
i
22. példa
Fagyasztva szárított készítményt állítunk elő, amely
0,20 mg (I) vegyület, 0,04 mg metilén-difoszfonsav, 0,02 mg ón(II)-klorid-dihidrát, 2,8 mg nátrium-hidrogén-karbonát és 4,9 mg nátrium-klorid liofilizált keverékét tartalmazza.
— >· — 9 9rn —
Ha ezt a készítményt Tc-pertechnetát generátor steril
0,9 tömeg/térfogat %-os nátrium-klorid oldattal készített
9 in ·— eluatumaval elegyítjük, az (I) vegyület Tc-komplexe képződik legalább 98 %-os radiokémiái tisztaságban, szobahőmérsékleten 15 percig tartó reakcióidő után.
Következtetések:
A fent leírt módon, pufferoldattal átáramoltatott izolált — * 9 9m patkányszív-modellben az (I) és a (II) vegyület Tc-komplexei szignifikánsan nagyobb H/0 arányt mutattak, mint az egyéb vizsgált Te és I-IAZA szerek. Emellett az említett két vegyület normalizált hipoxiás retenciő-értéke nagyobb, mint
9 m a Tc-PnAO megfelelő értéke, és legalább kétszer nagyobb,
- , mint a H mizonizadol értéké ebben a modellben es legalább
123 ekvivalens a I-IAZA (ez a radioaktív jódvegyület a hipoxia ismert leképezője) megfelelő értéke.

Claims (20)

  1. Szabadalmi igénypontok
    1. Helyettesített vagy helyettesítetlen ligandum radioaktív fémkomplexe, amelynek jellemző tulajdonsága a tumorokban vagy hipoxiás szövetekben történő lokalizálódás, és amelyben a ligandum nem tartalmaz hipoxiás szövetekben lokalizálódó szubsztituenst, hipoxiás szövetek leképezésére vagy radio-terápiájára.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti komplex, azzal jellemezve, hogy a komplex semleges.
  3. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti komplex, azzal jellemezve, hogy a radioaktív fém technécium, rénium, ródium vagy kobalt.
  4. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti komplex, azzal jellemezve, hogy képlete (TcOL| f ahol L a ligandumot jelenti.
  5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti komplex, azzal jellemezve, hogy a ligandum valamely diamin-dioxim.
  6. 6. Az 5. igénypont szerinti komplex, amelyben a diamin-dioxim ligandum az (a) általános képletnek felel meg
    R R' (B)m (B)m R fjl
    Y0
  7. 7 OY ahol n értéke egész-szám 2-től 5-ig.
    m értéke 0, 1 vagy 2, az Y szubsztituensek jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy R,
    R és R' jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom,
    1-10 szénatomos egyenes vagy elágazóláncu szénhidrogéncsoport, amely alkil-, alkenil-, alkoxi-, alkoxi-alkil, primer, szekunder, vagy tercier amido-, primer, szekunder vagy tercier amino-, karbonsav-, hidroxi-alkil-, aril-, heterociklusos vagy heteroaril-csoport lehetr vagy két R-csoport a hozzájuk kapcsolódó atommal vagy atomokkal együtt egy karbociklusos, heterociklusos telített vagy telítetlen, spiro- vagy kondenzált gyűrűs csoportot képez, vagy pedig egy vagy több -NRcsoporttal szomszédos -CR^- vagy -CRR'- csoport két R-szubsztituense együtt -CONR- amidocsoportot képez;
    A és B jelentései egymástól függetlenek, mégpedig
    - mindegyik A és B jelentése -CR^- csoport, vagy
    - AA és/vagy BB jelentése -CR=CR-, -N=N-, -NR-NR- vagy -N=CR- csoport, vagy
    - AAA jelentése -CR^-Q-CR^-r -CR^-S-CR^-, vagy -CR^-NR-CR^- csoport.
    7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti komplex, amelyben ligandum a (B) általános képletnek felel meg
    HO
    OH ahol Y, R és R' jelentése hidrogénatom vagy 1-3 szénatomos 9 9 in alkilcsoport, a radioaktív fém pedig Te.
  8. 8. Az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti komplex, amelyben a ligandum a (D) képletnek felel meg a rádioaktiv fém pedig ^^mTc.
  9. 9. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti komplex, amelyben a ligandum a (C) általános képletnek felel meg ahol Y, R és R' jelentése hidrogénatom vagy 1-3 szénatomos
    - - 9 9m alkilcsoport, a radioaktív fém pedig Te.
  10. 10. Az 1-6. és 9. igénypontok bármelyike szerinti komplex, • — 9 9m amelyben a ligandum PnAO es a radioaktív fém Te.
  11. 11. Rádioaktiv fémkomplex, amelynek önmagában való tulajdonsága, hogy lokalizálódik tumorokban vagy hipoxiás szövetekben és amelyet valamely rádioaktiv fém képez egy a (B) általános képletnek megfelelő szerkezetű ligandummal , 2 ahol az R szubsztituensek legalább egyike az -A-R általános
    2 képletnek felel meg és ebben A egy összekötő csoportot, R pedig egy hipoxiás szövetekben lokalizálódő molekula-részt képvisel, az Y szubsztituensek jelentése egymástól függetlenül hidro.génatom vagy R, a többi R és R' szubsztituensek jelentése pedig egymástól függetlenül hidrogénatom,
    1-10 szénatomos egyenes vagy elágazoláncu szenhidrogéncsoport, amely alkil-, alkenil-, alkoxi-, alkoxi-alkil, primer, szekunder..vagy tercier amido-, primer, szekunder vagy tercier amino-, karbonsav-, hidroxi-alkil-, aril-, heterociklusos vagy heteroaril-csoport lehet, vagy két R-csoport a hozzájuk kapcsolódó atommal vagy atomokkal együtt egy karbociklusos, heterociklusos telített vagy telítetlen, spiro- vagy kondenzált gyűrűs csoportot képez, vagy pedig egy vagy több -NRcsoporttal szomszédos -CR,- vagy -CRR'- csoport két R-szubsztituense együtt -CONE- amidocsoportot képez.
  12. 12. Az (A) általános képletnek megfelelő szerkezetű ligandum ahol n értéke egész szám 2-től 5-ig, m értéke 0, 1 vagy 2, az Y szubsztituensek jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy R,
    R és R' jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom,
    1-10 szénatomos egyenes vagy elágazőláncu szénhidrogéncsoport, amely alkil-, alkenil-, alkoxi-, alkoxi-alkil, primer, szekunder..vagy tercier amido-, primer, szekunder vagy tercier amino-, karbonsav-, hidroxi-alkil-, aril-, heterociklusos vagy heteroaril-csoport lehet, vagy két R-csoport a hozzájuk kapcsolódó atommal vagy atomokkal együtt egy karbociklusos, heterociklusos telített vagy telítetlen, spiro- vagy kondenzált gyűrűs csoportot képez, vagy pedig egy vagy több -NRcsoporttal szomszédos -CR^- vagy -CRR'- csoport két R-szubsztituense együtt -CONR- amidocsoportot képez;
    ρ »*·««·· • ·····♦· ··· ·♦· «· ·· ··
    - 55 A és Β jelentései egymástól függetlenek, mégpedig
    - mindegyik A és B jelentése -CR2- csoport, vagy
    - AA és/vagy BB jelentése -CR=CR~, -N=N~, -NR-NR- vagy
    -N=CR- csoport, vagy
    AAA jelentése -CRj-O-CR^-, -CR^-NR-CR^ csoport.
    -CR^-S-CR^, vagy azzal a megszorítással, hogy az R szubsztituensek legalább egyikenek jelentése -A-R általános képletű csoport es ebben „ 2 .
    A egy osszekoto csoportot, R pedig egy hipoxiás szövetekben lokalizálódó molekularészt képvisel, azzal a megszorítással, hogy ha valamennyi Y szubsztituens helyén hidrogénatom áll és (i) n értéke 3, akkor m értéke 1 vagy 2;
    (ii) n értéke 4, m értéke 0, (A) jelentése (CH2) vagy (CHCgH^X) csoport és ebben X jelentése hidrogénatom, klóratom vagy OCH^ csoport, és valamennyi R jelentése metilcsoport, akkor R' jelentése más mint hidrogénatom vagy metilcsoport, (iii) n értéke 5 és m értéke O, akkor nem valamennyi R és R' jelentése metilcsoport;
    (iv) (Α)^ jelentése (CH2)2 és R és R' jelentése egyaránt metilcsoport, akkor m értéke más mint 0 és (B)^ jelentése más mint CH2;
    (v) n értéke 2, akkor a ligandum legfeljebb egy -CONR-
    -amid csoportot tartalmaz.
  13. 13. A 12. igénypont szerinti ligandum, ahol n értéke 4.
  14. 14. A 12. vagy 13. igénypont szerinti ligandum, amelynek (A) általános képletében Y jelentése hidrogénatom; m értéke 0; R és R' jelentése 1-3 szénatomos alkilcsoport.
  15. 15. A 12-14. igénypontok bármelyike szerinti ligandum, amelynek szerkezete a szűkebbkörű (B) általános képletnek felel meg (CR2)
    HO
    OH és ebben Y, R és R' jelentése hidrogénatom vagy 1-3 szénatomos alkilcsoport; azzal a megszorítással, hogy ha az összes Y szubsztituens helyén hidrogénatom és az összes R helyén metilcsoport áll, akkor R' jelentése nem lehet hidrogénatom vagy metilcsoport.
  16. 16. A 12-15. igénypontok bármelyike szerinti ligandum radioaktív fémmel képezett komplexe.
  17. 17. A 16. igénypont szerinti komplex, amelyben a rádioaktív fém Te.
  18. 18. Rádió-leképezési készlet, azzal jellemezve, hogy a
    12-15. igénypontok bármelyike szerinti ligandumot tartalmaz és a készletben ^^mTc-pertechnetát oldatának hozzáadására a 17. igénypont szerinti komplex képződik.
  19. 19. A 18. igénypont szerinti készlet, azzal jellemezve, hogy abban a ligandum és egy ón (II) redukálószer fagyaszt-
    - 57 va szárított állapotban van.
  20. 20. Eljárás hipoxiás testszövetek leképezésére vagy rádió-terápiájára, azzal jellemezve, hogy a kezelendő személynek az 1-11. és 16-17. igénypontok bármelyike szerinti komplex hatásos mennyiségét adjuk be.
HU9600228A 1993-08-04 1994-08-03 Radiometal complexes that localise in hypoxic tissue HUT73672A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP93306220 1993-08-04

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9600228D0 HU9600228D0 (en) 1996-04-29
HUT73672A true HUT73672A (en) 1996-09-30

Family

ID=8214506

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9600228A HUT73672A (en) 1993-08-04 1994-08-03 Radiometal complexes that localise in hypoxic tissue

Country Status (7)

Country Link
US (1) US5997843A (hu)
EP (1) EP0712315A1 (hu)
JP (2) JP3083157B2 (hu)
CA (1) CA2168652A1 (hu)
HU (1) HUT73672A (hu)
IL (1) IL110571A0 (hu)
WO (1) WO1995004552A2 (hu)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL159310A0 (en) 2001-07-10 2004-06-01 Amersham Health As Peptide-based compounds
GB0116815D0 (en) * 2001-07-10 2001-08-29 Nycomed Amersham Plc Improved chelator conjugates
US6997804B2 (en) * 2001-07-16 2006-02-14 King Show Games Llc System and method for providing repeated elimination bonus in gaming activities
US20130195756A1 (en) 2012-01-31 2013-08-01 General Electric Company 99mTc IMAGING AGENTS AND METHODS OF USE
JP6083055B2 (ja) * 2015-04-09 2017-02-22 有限会社成島畳店 畳用芯材及び畳

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RO82684A2 (ro) * 1981-06-12 1983-10-15 Institutul De Fizica Si Inginerie Nucleara,Ro Procedeu de vizualizare prin scintigrafiere a tumorilor solide
US4615876A (en) * 1983-04-25 1986-10-07 Curators Of The University Of Missouri Macrocyclic complexes of technetium-99m for use as diagnostic radionuclides
CA1254831A (en) * 1984-08-03 1989-05-30 Donald H. Picker Combination modality cancer therapy
GB8426845D0 (en) * 1984-10-24 1984-11-28 Amersham Int Plc Complexes of technetium-99m
CA1243329A (en) * 1985-03-11 1988-10-18 Amersham Int Plc TECHNETIUM COMPLEXES WITH PROPYLENE-AMINE-OXIMES
US4895960A (en) * 1989-01-23 1990-01-23 University Of Cincinnati Cyclo substituted propyleneamine oxime and its use as a brain imaging agent
US5457183A (en) * 1989-03-06 1995-10-10 Board Of Regents, The University Of Texas System Hydroxylated texaphyrins
CA1339130C (en) * 1989-08-18 1997-07-29 Leonard Irving Wiebe Markers of tissue hypoxia
US5589576A (en) * 1989-08-29 1996-12-31 Amersham International Plc Cores for technetium radiopharmaceuticals
DE3930674A1 (de) * 1989-09-11 1991-03-21 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle chelatbildner zur komplexierung von tc- und re-isotopen, verfahren zu ihrer herstellung und darstellung von konjugaten daraus sowie deren verwendung in diagnostik und therapie
US5116598A (en) * 1990-10-29 1992-05-26 Mallinckrodt Medical, Inc. N4 technetium-99 m complexes for use as radiopharmaceuticals
GB9113487D0 (en) * 1991-06-21 1991-08-07 Amersham Int Plc Agents for hypoxic cells
IL103353A (en) * 1991-10-29 1999-01-26 Bracco Int Bv His metal bracelet ligand is a diagnostic product and processes for its preparation

Also Published As

Publication number Publication date
JPH10338649A (ja) 1998-12-22
CA2168652A1 (en) 1995-02-16
EP0712315A1 (en) 1996-05-22
IL110571A0 (en) 1994-11-11
HU9600228D0 (en) 1996-04-29
WO1995004552A3 (en) 1995-03-23
JPH09501425A (ja) 1997-02-10
WO1995004552A2 (en) 1995-02-16
JP3083157B2 (ja) 2000-09-04
JP3190615B2 (ja) 2001-07-23
US5997843A (en) 1999-12-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU629880B2 (en) Technetium-99m complex for examining the renal function
US7250525B2 (en) Stilbene derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques
AU2002323417A1 (en) Stilbene derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques
CZ145594A3 (en) Ligands carrying hetero atoms and their metal complexes
Jia et al. 2-Phenylbenzothiazole conjugated with cyclopentadienyl tricarbonyl [CpM (CO) 3](M= Re, 99m Tc) complexes as potential imaging probes for β-amyloid plaques
HU201301B (en) Process for production of izocyanides substituated by ether and diagnostical composition containing them and diagnostical products
Motaleb et al. Synthesis, radiolabeling and biological distribution of a new dioxime derivative as a potential tumor imaging agent
Drews et al. Synthesis and biological evaluation of technetium (III) mixed-ligand complexes with high affinity for the cerebral 5-HT1A receptor and the alpha1-adrenergic receptor
JPH05239046A (ja) 低酸素症局在性残基を含有するレニウムおよびテクネチウム錯体
US5993774A (en) Metal-oxime chelates for use as radiopharmaceutical agents
HUT73672A (en) Radiometal complexes that localise in hypoxic tissue
Nayak et al. Tricarbonyl 99m Tc (i) and Re (i)–thiosemicarbazone complexes: synthesis, characterization and biological evaluation for targeting bacterial infection
WO1996030054A1 (en) 99mTc - LABELLED SEROTONIN RECEPTOR BINDING SUBSTANCES
Mirković et al. Novel tetradentate diamine dioxime ligands: synthesis, characterization and in vivo behavior of their 99mTc‐complexes
Sivapackiam et al. Synthesis, molecular structure, and validation of metalloprobes for assessment of MDR1 P-glycoprotein-mediated functional transport
Pietzsch et al. Synthesis and autoradiographic evaluation of a novel high-affinity Tc-99m ligand for the 5-HT2A receptor
Francesconi et al. Technetium-99m N, N'-bis (2-mercapto-2-methylpropyl)-2-aminobenzylamine: technetium-99m complexes of a novel bis (aminoethanethiol) ligand
Singh et al. Evaluation of methionine and tryptophan derivatised vehicles: Met-ac-TE3A/Trp-ac-TE3A for tumor imaging
Hunter et al. Bisthiosemicarbazones of 2, 4-pentanedione are pyrazolines
Kuntschke et al. New [99mTc]‐cytectrene amine compounds as specific brain imaging agents
AU620704B2 (en) Dopamine receptor ligands and imaging agents
Samnick et al. Technetium-99m labeled 1-(4-fluorobenzyl)-4-(2-mercapto-2-methyl-4-azapentyl)-4-(2-mercapto-2-methylpropylamino)-piperidine and iodine-123 metaiodobenzylguanidine for studying cardiac adrenergic function: a comparison of the uptake characteristics in vascular smooth muscle cells and neonatal cardiac myocytes, and an investigation in rats
Pillai et al. Technetium complexes of tetradentate chiral amine-phenol ligands
GB2128612A (en) Improvements in or relating to imaging agents
JPH03197468A (ja) 二官能性大環状キレート配位子およびその製造法

Legal Events

Date Code Title Description
DFC4 Cancellation of temporary protection due to refusal