JPH09252761A - エイコサペンタエン酸を増産させるナンノクロロプシス藻類の培養法 - Google Patents
エイコサペンタエン酸を増産させるナンノクロロプシス藻類の培養法Info
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- JPH09252761A JPH09252761A JP8091767A JP9176796A JPH09252761A JP H09252761 A JPH09252761 A JP H09252761A JP 8091767 A JP8091767 A JP 8091767A JP 9176796 A JP9176796 A JP 9176796A JP H09252761 A JPH09252761 A JP H09252761A
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Landscapes
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 本発明は、エイコサペンタエン酸高含有のマ
リンクロレラとも呼ばれているナンノクロロプシス藻類
の大量培養に関する。 【構成】 ガラスなどの透明体からなる縦型偏平水槽を
使用し、該水槽に入れた無機液体培地に、ナンノクロロ
プシス藻体を接種して、１０〜３５℃下で、炭酸ガス含
有空気を通気しつつ、第１工程として、水槽の前後の幅
広の平面の何れかの片面から光照射して、培養可能まで
培養した後、当該培養液に、第２工程として、水槽の前
後の幅広の両面から光照射して、培養可能まで培養した
後、当該培養液に、第３工程として、水槽の前後の幅広
の両面から光照射して、藻体ＰＣＶ濃度の増加が殆ど認
められないまで培養すること。
リンクロレラとも呼ばれているナンノクロロプシス藻類
の大量培養に関する。 【構成】 ガラスなどの透明体からなる縦型偏平水槽を
使用し、該水槽に入れた無機液体培地に、ナンノクロロ
プシス藻体を接種して、１０〜３５℃下で、炭酸ガス含
有空気を通気しつつ、第１工程として、水槽の前後の幅
広の平面の何れかの片面から光照射して、培養可能まで
培養した後、当該培養液に、第２工程として、水槽の前
後の幅広の両面から光照射して、培養可能まで培養した
後、当該培養液に、第３工程として、水槽の前後の幅広
の両面から光照射して、藻体ＰＣＶ濃度の増加が殆ど認
められないまで培養すること。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、真正眼点藻に属
し、エイコサペンタエン酸（以下ＥＰＡという）を含
み、海水産マリンクロレラとも呼ばれているナンノクロ
ロプシス藻類の培養法に関する。
し、エイコサペンタエン酸（以下ＥＰＡという）を含
み、海水産マリンクロレラとも呼ばれているナンノクロ
ロプシス藻類の培養法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、海洋微細藻類の培養において、１
０リットルの培養瓶中の天然海水培地に、ナンノクロロ
プシス藻体を接種して、３０００〜４０００ｌｘ（連続
照明）の照光下、２５℃で８日間通気培養することは、
日本水産学会誌５６（８）１２９３−１２９８（１９９
０）に開示されて周知に属する。
０リットルの培養瓶中の天然海水培地に、ナンノクロロ
プシス藻体を接種して、３０００〜４０００ｌｘ（連続
照明）の照光下、２５℃で８日間通気培養することは、
日本水産学会誌５６（８）１２９３−１２９８（１９９
０）に開示されて周知に属する。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者は、ＥＰＡを
多く含むナンノクロロプシス藻類を大量に培養する培養
法について研究した結果、本発明を達成したのてある。
多く含むナンノクロロプシス藻類を大量に培養する培養
法について研究した結果、本発明を達成したのてある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明は、アクリル製ま
たはガラス製の縦型偏平水槽中の無機液体培地（ｐＨ
７．５〜９．０）に、ナンノクロロプシス藻体を接種
し、培養温度１０〜３５℃とし、照射時間を１８〜２４
時間／日として、炭酸ガス０．５〜５％を含む空気を、
０．５〜３５ l／ｍｉｎの割合で通気しつつ培養する培
養法において、ナンノクロロプシス藻体を、ＰＣＶ濃度
０．９〜１．７ｍｌ／l の割合で接種して、水槽の前・
後面の何れかの片面から照度６０００〜１６０００ｌｘ
の光を照射して、ＰＣＶ濃度が１．８〜４．９ｍｌ／l
になるまで培養する第１工程と、該ＰＣＶ濃度の培養液
に、水槽の前・後の両面から照度１１０００〜２１００
０ｌｘの光を照射して、ＰＣＶ濃度が５．０〜７．０ｍ
ｌ／l になるまで培養する第２工程と、該ＰＣＶ濃度の
培養液に、水槽の前・後の両面から照度１００００〜３
５０００ｌｘの光を照射して、ＰＣＶ濃度が１０．３〜
１１．０ｍｌ／l になるまで培養する第３工程ととから
成るエイコサペンタエン酸を増産させるナンノクロロプ
シス藻類の培養法である。
たはガラス製の縦型偏平水槽中の無機液体培地（ｐＨ
７．５〜９．０）に、ナンノクロロプシス藻体を接種
し、培養温度１０〜３５℃とし、照射時間を１８〜２４
時間／日として、炭酸ガス０．５〜５％を含む空気を、
０．５〜３５ l／ｍｉｎの割合で通気しつつ培養する培
養法において、ナンノクロロプシス藻体を、ＰＣＶ濃度
０．９〜１．７ｍｌ／l の割合で接種して、水槽の前・
後面の何れかの片面から照度６０００〜１６０００ｌｘ
の光を照射して、ＰＣＶ濃度が１．８〜４．９ｍｌ／l
になるまで培養する第１工程と、該ＰＣＶ濃度の培養液
に、水槽の前・後の両面から照度１１０００〜２１００
０ｌｘの光を照射して、ＰＣＶ濃度が５．０〜７．０ｍ
ｌ／l になるまで培養する第２工程と、該ＰＣＶ濃度の
培養液に、水槽の前・後の両面から照度１００００〜３
５０００ｌｘの光を照射して、ＰＣＶ濃度が１０．３〜
１１．０ｍｌ／l になるまで培養する第３工程ととから
成るエイコサペンタエン酸を増産させるナンノクロロプ
シス藻類の培養法である。
【０００５】本発明での、製縦型偏平水槽とは、厚さ３
ｃｍ程度のガラス製またはアクリル製の水槽で、その前
後の各面の幅が０．５〜２．０ｍ程度で、左右の各側面
の幅が７〜１７ｃｍで、高さが１．５〜２．５ｍ程度
で、上端部に形成された長方形の開口部には、周壁に適
数個の通気孔が設けられ、先端部が閉鎖されている、炭
酸ガス含有空気の通気管が、その先端部から挿入され、
また、下端部に形成された船底形状の底部の下方部に
は、培養液排出管が着脱自在に設けられて成る縦型の偏
平水槽を意味する。当該水槽の側面幅は１７ｃｍを超え
ると光の照射が充分とならず好ましくない。そして、該
縦型偏平水槽は、受光面積が広く、また、挿入された通
気管から炭酸ガス含有空気が送入されると、水槽中の培
地が攪拌されて、炭酸ガスの吸収効率が高く、かつ、上
端開口部が細長く狭いので雑菌の混入が少なくて、微細
藻類の大量培養に好適なのである。また、本発明での光
照射とは、白色蛍光灯、昼色蛍光灯または白熱灯の光の
照射を意味する。
ｃｍ程度のガラス製またはアクリル製の水槽で、その前
後の各面の幅が０．５〜２．０ｍ程度で、左右の各側面
の幅が７〜１７ｃｍで、高さが１．５〜２．５ｍ程度
で、上端部に形成された長方形の開口部には、周壁に適
数個の通気孔が設けられ、先端部が閉鎖されている、炭
酸ガス含有空気の通気管が、その先端部から挿入され、
また、下端部に形成された船底形状の底部の下方部に
は、培養液排出管が着脱自在に設けられて成る縦型の偏
平水槽を意味する。当該水槽の側面幅は１７ｃｍを超え
ると光の照射が充分とならず好ましくない。そして、該
縦型偏平水槽は、受光面積が広く、また、挿入された通
気管から炭酸ガス含有空気が送入されると、水槽中の培
地が攪拌されて、炭酸ガスの吸収効率が高く、かつ、上
端開口部が細長く狭いので雑菌の混入が少なくて、微細
藻類の大量培養に好適なのである。また、本発明での光
照射とは、白色蛍光灯、昼色蛍光灯または白熱灯の光の
照射を意味する。
【０００６】本発明での、無機液体培地とは、培地１０
０リットルに対して、ＮａＣｌが２４００〜３０００
ｇ、ＫＮＯ3 が８０〜２００ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ
が５００〜８００ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが１００〜
３００ｇ、Ｋ2 ＨＰＯ4 が７〜２０ｇ、ＦｅＣｌ3 ・６
Ｈ2 Ｏが１．４〜７．０ｇ、Ｎａ2 ＥＤＴＡが１．９〜
９．０ｇ、ＺｎＣｌ2 が４〜２０ｍｇ、Ｈ3 ＢＯ3 が６
０〜３００ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．０３〜０．１５ｍｇ、
ＣｕＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが４〜２０ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が４
０〜２００ｍｇ、（ＮＨ4 ）6 ＭｏＯ24が３７〜１８５
ｍｇの割合で含まれて成る培地を意味する。
０リットルに対して、ＮａＣｌが２４００〜３０００
ｇ、ＫＮＯ3 が８０〜２００ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ
が５００〜８００ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが１００〜
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Ｈ2 Ｏが１．４〜７．０ｇ、Ｎａ2 ＥＤＴＡが１．９〜
９．０ｇ、ＺｎＣｌ2 が４〜２０ｍｇ、Ｈ3 ＢＯ3 が６
０〜３００ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．０３〜０．１５ｍｇ、
ＣｕＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが４〜２０ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が４
０〜２００ｍｇ、（ＮＨ4 ）6 ＭｏＯ24が３７〜１８５
ｍｇの割合で含まれて成る培地を意味する。
【０００７】本発明で使用するナンノクロロプシス藻類
は、真正眼点藻に属するナンノクロロプシス・オクラタ
(Nannnochloropsis oculata)や、ハドリムシ藻類に属す
るユーグレナ・グラシリス(Euglena gracilis)などを意
味する。
は、真正眼点藻に属するナンノクロロプシス・オクラタ
(Nannnochloropsis oculata)や、ハドリムシ藻類に属す
るユーグレナ・グラシリス(Euglena gracilis)などを意
味する。
【０００８】本発明での、第１工程において、培養開始
濃度を０．９〜１．７ｍｌ／l として接種し、水槽の前
後面の何れかの片面から照度６０００〜１６０００ｌｘ
の光を照射して培養するのは良好に培養することができ
るからであり、また、ＰＣＶ濃度１．８〜４．９ｍｌ／
l 程度まで培養するのは、４．９ｍｌ／l を超えてまで
培養すると、照度が不足となり、培養液中のナンノクロ
ロプシス藻体を凝集、黄変させ、ＥＰＡ生産速度が低下
するからである。よって、上記条件で培養することによ
り、藻体を凝集・黄変させることなく順調に第２工程の
培養に移行でき得るからである。
濃度を０．９〜１．７ｍｌ／l として接種し、水槽の前
後面の何れかの片面から照度６０００〜１６０００ｌｘ
の光を照射して培養するのは良好に培養することができ
るからであり、また、ＰＣＶ濃度１．８〜４．９ｍｌ／
l 程度まで培養するのは、４．９ｍｌ／l を超えてまで
培養すると、照度が不足となり、培養液中のナンノクロ
ロプシス藻体を凝集、黄変させ、ＥＰＡ生産速度が低下
するからである。よって、上記条件で培養することによ
り、藻体を凝集・黄変させることなく順調に第２工程の
培養に移行でき得るからである。
【０００９】第１工程で培養したＰＣＶ濃度１．８〜
４．９ｍｌ／l の培養液に、第２工程ににおいて、水槽
の前後の両面から照度１１０００〜２１０００ｌｘで照
射するのは、さらに、ナンノクロロプシス藻体を順調に
培養して、ＥＰＡを生産させるためであり、また、第２
工程において、ＰＣＶ濃度が５．０〜７．０ｍｌ／l 程
度まで培養するのは、７．０ｍｌ／l を超えてまで培養
を続けると照度不足となり、ＥＰＡの生産速度を低下さ
せ、また培養液中のナンノクロロプシス藻体を凝集や黄
変をさせるからである。よって、上記条件で培養するこ
とにより、藻体を凝集・黄変させることなく順調に第３
工程の培養に移行でき得るからである。
４．９ｍｌ／l の培養液に、第２工程ににおいて、水槽
の前後の両面から照度１１０００〜２１０００ｌｘで照
射するのは、さらに、ナンノクロロプシス藻体を順調に
培養して、ＥＰＡを生産させるためであり、また、第２
工程において、ＰＣＶ濃度が５．０〜７．０ｍｌ／l 程
度まで培養するのは、７．０ｍｌ／l を超えてまで培養
を続けると照度不足となり、ＥＰＡの生産速度を低下さ
せ、また培養液中のナンノクロロプシス藻体を凝集や黄
変をさせるからである。よって、上記条件で培養するこ
とにより、藻体を凝集・黄変させることなく順調に第３
工程の培養に移行でき得るからである。
【００１０】第２工程で培養したＰＣＶ濃度５．０〜
７．０ｍｌ／l の培養液に、第３工程において、水槽の
前後両面から照度１００００〜３５０００ｌｘで照射す
るのは、さらに、ナンノクロロプシス藻体を凝縮や黄変
をさせずに、順調に培養させて、ＥＰＡを生産させるた
めであり、また、第３工程において、ＥＰＡ濃度１０．
３〜１１．０ｍｌ／l まで培養するのは、１１．０ｍｌ
／l を超えて培養するとＰＣＶ濃度の増加は殆どなく、
従って、ＥＰＡ生産も無くなるので、培養を終了するの
である。
７．０ｍｌ／l の培養液に、第３工程において、水槽の
前後両面から照度１００００〜３５０００ｌｘで照射す
るのは、さらに、ナンノクロロプシス藻体を凝縮や黄変
をさせずに、順調に培養させて、ＥＰＡを生産させるた
めであり、また、第３工程において、ＥＰＡ濃度１０．
３〜１１．０ｍｌ／l まで培養するのは、１１．０ｍｌ
／l を超えて培養するとＰＣＶ濃度の増加は殆どなく、
従って、ＥＰＡ生産も無くなるので、培養を終了するの
である。
【００１１】本発明において、第１工程〜第３工程を通
じて、温度１０〜３５℃下で培養するのは、１０℃未満
ではＰＣＶ濃度の増加は殆ど無いからであり、また、３
５℃を超えてはナンノクロロプシス細胞が凝集するから
である。また、光の照射時間１８〜２４時間／日とし、
０．５〜５％の炭酸ガス含有空気を５〜３５ｍｌ／lの
割合で通気、攪拌しつつ培養するのは、ＥＰＡ生産量の
低下をさせないためである。なお、光照射は白色・昼色
蛍光灯、白熱灯の照射を意味する。
じて、温度１０〜３５℃下で培養するのは、１０℃未満
ではＰＣＶ濃度の増加は殆ど無いからであり、また、３
５℃を超えてはナンノクロロプシス細胞が凝集するから
である。また、光の照射時間１８〜２４時間／日とし、
０．５〜５％の炭酸ガス含有空気を５〜３５ｍｌ／lの
割合で通気、攪拌しつつ培養するのは、ＥＰＡ生産量の
低下をさせないためである。なお、光照射は白色・昼色
蛍光灯、白熱灯の照射を意味する。
【００１２】
【実施例１】培地１００リットルに対して、ＮａＣｌが
２７００ｇ、ＫＮＯ3 が１００ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏが６６０ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが１５０ｇ、ＫＨ
2 ＰＯ4 が７ｇ、ＦｅＣｌ3 ・６Ｈ2 Ｏが１．４ｇ、Ｎ
ａＥＤＴＡが１．９ｇ、ＺｎＣｌ2 が４ｍｇ、Ｈ3 ＢＯ
3 が６０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．０３ｍｇ、ＣｕＣｌ2・
２Ｈ2 Ｏが４ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が４０ｍｇ、（ＮＨ4 ）
6 ＭｏＯ24が３７ｍｇのを含む無機液体培地（ｐＨ７．
５）１００リットルを、高さ２ｍ、前・後面の幅１ｍ、
左右の側面の幅１３ｃｍのアクリル（厚さ７ｃｍ）製の
縦型偏平水槽に入れ、培養温度を２５℃、照射時間を１
８時間／日として、炭酸ガス１％含有空気を２０ｍｌ／
l の割合で通気しつつ、第１工程として、水槽中の１０
０リットルの無期液体培地に、ナンノクロロプシス・オ
クラタをＰＣＶ濃度１．０ｍｌ／l の割合で接種し、水
槽の片面に、１２０００ｌｘの白色蛍光灯を照射し、培
養して、ＰＣＶ濃度が２．１ｍｌ／l となったとき、第
２工程として、水槽の前・後面の両面から１５０００ｌ
ｘの白色蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が５．
２ｍｌ／l となったとき、第３工程として、水槽の前・
後面の両面から２００００ｌｘの白色蛍光灯を照射し、
培養して、ＰＣＶ濃度が１０．３ｍｌ／l となったと
き、培養処理を止めて、得た培養液をシヤープレス遠心
分離機（１５０００ｒｐｍ／ｍｉｎ）で分別して得た藻
体を、蒸留水で洗浄し、凍結乾燥して、乾燥藻体１９７
g を得た。
２７００ｇ、ＫＮＯ3 が１００ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏが６６０ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが１５０ｇ、ＫＨ
2 ＰＯ4 が７ｇ、ＦｅＣｌ3 ・６Ｈ2 Ｏが１．４ｇ、Ｎ
ａＥＤＴＡが１．９ｇ、ＺｎＣｌ2 が４ｍｇ、Ｈ3 ＢＯ
3 が６０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．０３ｍｇ、ＣｕＣｌ2・
２Ｈ2 Ｏが４ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が４０ｍｇ、（ＮＨ4 ）
6 ＭｏＯ24が３７ｍｇのを含む無機液体培地（ｐＨ７．
５）１００リットルを、高さ２ｍ、前・後面の幅１ｍ、
左右の側面の幅１３ｃｍのアクリル（厚さ７ｃｍ）製の
縦型偏平水槽に入れ、培養温度を２５℃、照射時間を１
８時間／日として、炭酸ガス１％含有空気を２０ｍｌ／
l の割合で通気しつつ、第１工程として、水槽中の１０
０リットルの無期液体培地に、ナンノクロロプシス・オ
クラタをＰＣＶ濃度１．０ｍｌ／l の割合で接種し、水
槽の片面に、１２０００ｌｘの白色蛍光灯を照射し、培
養して、ＰＣＶ濃度が２．１ｍｌ／l となったとき、第
２工程として、水槽の前・後面の両面から１５０００ｌ
ｘの白色蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が５．
２ｍｌ／l となったとき、第３工程として、水槽の前・
後面の両面から２００００ｌｘの白色蛍光灯を照射し、
培養して、ＰＣＶ濃度が１０．３ｍｌ／l となったと
き、培養処理を止めて、得た培養液をシヤープレス遠心
分離機（１５０００ｒｐｍ／ｍｉｎ）で分別して得た藻
体を、蒸留水で洗浄し、凍結乾燥して、乾燥藻体１９７
g を得た。
【００１３】得られた乾燥藻体中のＥＰＡ量を、塩酸５
％を含むメタノール溶媒中で、９５℃で３時間還流した
後、ヘキサン溶媒で脂肪酸メチルエステルを抽出し、ト
リコサン酸を内部標準によってガスクロマトグラフィー
分析法により定量した結果、１７．５ｇのＥＰＡを得
た。
％を含むメタノール溶媒中で、９５℃で３時間還流した
後、ヘキサン溶媒で脂肪酸メチルエステルを抽出し、ト
リコサン酸を内部標準によってガスクロマトグラフィー
分析法により定量した結果、１７．５ｇのＥＰＡを得
た。
【００１４】
【実施例２】実施例１記載と同様に無機液体培地を、高
さ２ｍ、前・後面幅１ｍ、左右の側面幅１３ｃｍのアク
リル製の縦型偏平水槽に入れ、ナンノクロロプシス・オ
クラタをＰＣＶ濃度１．０ｍｌ／l の割合で接種し、培
養温度温度を２５℃とし、照射を１８時間／日として、
炭酸ガス１％を含む空気を４０ l／ｍｉｎの割合で通気
しつつ、第１工程として、水槽の前面片面に、１３００
０ｌｘの白熱灯を照射し、培養してＰＣＶ濃度が２．１
ｍｌ／l となったとき、第２工程として、水槽の前・後
面の両面に、１６０００ｌｘの白熱灯を照射し、培養し
てＰＣＶ濃度が５．４ｍｌ／l となったとき、第３工程
として、水槽の前後面の両面に、２００００ｌｘの白熱
灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１０．５ｍｌ／l
となったとき、培養を終了した。得られた培養液から分
別した７０リットルの培養液を、実施例１記載のシャー
プレス遠心分離機（１５０００ｒｐｍ／ｍｉｎ）で、分
取した藻体を蒸留水で洗浄後、凍結乾燥して１２８ｇの
乾燥藻体を得た。そして、得られた乾燥藻体中のＥＰＡ
量を、実施例１記載と同様に定量した結果、１１．３ｇ
のＥＰＡを得た。
さ２ｍ、前・後面幅１ｍ、左右の側面幅１３ｃｍのアク
リル製の縦型偏平水槽に入れ、ナンノクロロプシス・オ
クラタをＰＣＶ濃度１．０ｍｌ／l の割合で接種し、培
養温度温度を２５℃とし、照射を１８時間／日として、
炭酸ガス１％を含む空気を４０ l／ｍｉｎの割合で通気
しつつ、第１工程として、水槽の前面片面に、１３００
０ｌｘの白熱灯を照射し、培養してＰＣＶ濃度が２．１
ｍｌ／l となったとき、第２工程として、水槽の前・後
面の両面に、１６０００ｌｘの白熱灯を照射し、培養し
てＰＣＶ濃度が５．４ｍｌ／l となったとき、第３工程
として、水槽の前後面の両面に、２００００ｌｘの白熱
灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１０．５ｍｌ／l
となったとき、培養を終了した。得られた培養液から分
別した７０リットルの培養液を、実施例１記載のシャー
プレス遠心分離機（１５０００ｒｐｍ／ｍｉｎ）で、分
取した藻体を蒸留水で洗浄後、凍結乾燥して１２８ｇの
乾燥藻体を得た。そして、得られた乾燥藻体中のＥＰＡ
量を、実施例１記載と同様に定量した結果、１１．３ｇ
のＥＰＡを得た。
【００１５】また、上記１００リットルの培養液の残余
の３０リットルに、実施例１記載の無機液体培地を７０
リットルを加えて水槽に入れ、実施例２の第３工程と同
様に水槽の前後両面に、２００００ｌｘの白色蛍光灯を
１８時間／日照射しつつ培養すること６回繰り返して培
養した培養液をシャープレス遠心分離機（１５０００回
転／分）で分取した藻体を洗浄し、凍結乾燥した乾燥藻
体中のＥＰＡ量を定量した結果、６８ｇであった。
の３０リットルに、実施例１記載の無機液体培地を７０
リットルを加えて水槽に入れ、実施例２の第３工程と同
様に水槽の前後両面に、２００００ｌｘの白色蛍光灯を
１８時間／日照射しつつ培養すること６回繰り返して培
養した培養液をシャープレス遠心分離機（１５０００回
転／分）で分取した藻体を洗浄し、凍結乾燥した乾燥藻
体中のＥＰＡ量を定量した結果、６８ｇであった。
【００１６】
【実施例３】培地２０リットルに対して、ＮａＣｌが５
４００ｇ、ＫＮＯ3 が２００ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ
が１３２０ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが３００ｇ、Ｋ2
ＨＰＯ4 が１４ｇ、ＦｅＣｌ3 ・６Ｈ2 Ｏが２．８ｇ、
Ｎａ2 ＥＤＴＡが３．８ｇ、ＺｎＣｌ2 が８ｍｇ、Ｈ3
ＢＯ3 が１２０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．０６ｍｇ、ＣｕＣ
ｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが８ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が８０ｍｇ、（Ｎ
Ｈａ4 ）6 ＭｏＯ24が７４ｍｇを含む無期液体培地（ｐ
Ｈ７．５）２００リットルを、高さ２ｍ、前・後面の幅
２ｍ、左・右側面の幅１３ｃｍのアクリル製の縦型偏平
水槽に入れて、ユーグレナ・グラシリス藻体をＰＣＶ濃
度１．２ｍｌ／l の割合で接種し、培養温度を２３℃と
し、照射時間を１８時間／日として、炭酸ガス１％を含
む空気を３５ l／ｍｉｎの割合で通気しつつ、第１工程
として、水槽の前面片面に、１２０００ｌｘの白色蛍光
灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１．９ｍｌ／l と
なった時、第２工程として、水槽の前・後面の両面に、
１５０００ｌｘの白色蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣ
Ｖ濃度が５．１ｍｌ／l となった時、第３工程として、
水槽の前・後面の両面に、２００００ｌｘの白色蛍光灯
を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１０．３ｍｌ／l と
なった時、培養液をシャープレス遠心分離機（１５００
０ｒｐｍ／ｍｉｎ）で分別した藻体を蒸留水で洗浄し、
凍結乾燥して３６５ｇの乾燥藻体を得た。得られた乾燥
藻体中のＥＰＡを、実施例１記載と同様にして定量した
結果、３２．３ｇであった。
４００ｇ、ＫＮＯ3 が２００ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ
が１３２０ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが３００ｇ、Ｋ2
ＨＰＯ4 が１４ｇ、ＦｅＣｌ3 ・６Ｈ2 Ｏが２．８ｇ、
Ｎａ2 ＥＤＴＡが３．８ｇ、ＺｎＣｌ2 が８ｍｇ、Ｈ3
ＢＯ3 が１２０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．０６ｍｇ、ＣｕＣ
ｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが８ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が８０ｍｇ、（Ｎ
Ｈａ4 ）6 ＭｏＯ24が７４ｍｇを含む無期液体培地（ｐ
Ｈ７．５）２００リットルを、高さ２ｍ、前・後面の幅
２ｍ、左・右側面の幅１３ｃｍのアクリル製の縦型偏平
水槽に入れて、ユーグレナ・グラシリス藻体をＰＣＶ濃
度１．２ｍｌ／l の割合で接種し、培養温度を２３℃と
し、照射時間を１８時間／日として、炭酸ガス１％を含
む空気を３５ l／ｍｉｎの割合で通気しつつ、第１工程
として、水槽の前面片面に、１２０００ｌｘの白色蛍光
灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１．９ｍｌ／l と
なった時、第２工程として、水槽の前・後面の両面に、
１５０００ｌｘの白色蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣ
Ｖ濃度が５．１ｍｌ／l となった時、第３工程として、
水槽の前・後面の両面に、２００００ｌｘの白色蛍光灯
を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１０．３ｍｌ／l と
なった時、培養液をシャープレス遠心分離機（１５００
０ｒｐｍ／ｍｉｎ）で分別した藻体を蒸留水で洗浄し、
凍結乾燥して３６５ｇの乾燥藻体を得た。得られた乾燥
藻体中のＥＰＡを、実施例１記載と同様にして定量した
結果、３２．３ｇであった。
【００１７】
【実施例４】培地５０リットルに対して、ＮａＣｌが１
３５０ｇ、ＫＮＯ3 が５０ｇ、ＭｇＳＯ3 ・７Ｈ2 Ｏが
３３０ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが７５ｇ、Ｋ2 ＨＰＯ
4 が３．５ｇ、ＦｅＣｌ3 ・６Ｈ2 Ｏが０．７ｇ、Ｎａ
2 ＥＤＴＡが０．９５ｇ、ＺｎＣｌ2 が２ｍｇ、Ｈ3 Ｂ
Ｏ3 が３０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．００７５ｍｇ、ＣｕＣ
ｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが２ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が２０ｍｇ、（Ｎ
Ｈ4 ）6 ＭｏＯ24が１８．５ｍｇを含む無機液体培地
（ｐＨ７．５）５０リットルを、高さ２ｍ、前・後面幅
０．５ｍ、左右の側面幅１３ｃｍのガラス（厚さ７ｃ
ｍ）製の縦型偏平水槽に入れ、培養温度２３℃とし、照
射時間を１８時間／日として、炭酸ガス１％を含む空気
を２０ l／ｍｉｎの割合で通気しつつ、第１工程とし
て、ナンノクロロプシス・オクラタ藻体を、ＰＣＶ濃度
１．１ｍｌ／l の割合で接種し、水槽の前面片面に、１
２０００ｌｘの昼色蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣＶ
濃度が２．０ｍｌ／l となったので、第２工程として、
水槽の前・後両面に、１５０００ｌｘ昼色蛍光灯を照射
し、培養して、ＰＣＶ濃度が５．３ｍｌ／l となったの
で、第３工程として、水槽の前・後両面に、２００００
ｌｘの昼色蛍光灯を照射してＰＣＶ濃度が１０、５ｍｌ
／l となったので培養を止め、得られた培養液をシャー
プレス遠心分離機（１５０００回／分）で分別した藻体
を蒸留水で洗浄し、凍結乾燥して９７ｇの乾燥藻体を得
た。得られた乾燥藻体中のＥＰＡ量を、実施例１と同様
に定量した結果、８．３ｇのであった。
３５０ｇ、ＫＮＯ3 が５０ｇ、ＭｇＳＯ3 ・７Ｈ2 Ｏが
３３０ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが７５ｇ、Ｋ2 ＨＰＯ
4 が３．５ｇ、ＦｅＣｌ3 ・６Ｈ2 Ｏが０．７ｇ、Ｎａ
2 ＥＤＴＡが０．９５ｇ、ＺｎＣｌ2 が２ｍｇ、Ｈ3 Ｂ
Ｏ3 が３０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．００７５ｍｇ、ＣｕＣ
ｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが２ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が２０ｍｇ、（Ｎ
Ｈ4 ）6 ＭｏＯ24が１８．５ｍｇを含む無機液体培地
（ｐＨ７．５）５０リットルを、高さ２ｍ、前・後面幅
０．５ｍ、左右の側面幅１３ｃｍのガラス（厚さ７ｃ
ｍ）製の縦型偏平水槽に入れ、培養温度２３℃とし、照
射時間を１８時間／日として、炭酸ガス１％を含む空気
を２０ l／ｍｉｎの割合で通気しつつ、第１工程とし
て、ナンノクロロプシス・オクラタ藻体を、ＰＣＶ濃度
１．１ｍｌ／l の割合で接種し、水槽の前面片面に、１
２０００ｌｘの昼色蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣＶ
濃度が２．０ｍｌ／l となったので、第２工程として、
水槽の前・後両面に、１５０００ｌｘ昼色蛍光灯を照射
し、培養して、ＰＣＶ濃度が５．３ｍｌ／l となったの
で、第３工程として、水槽の前・後両面に、２００００
ｌｘの昼色蛍光灯を照射してＰＣＶ濃度が１０、５ｍｌ
／l となったので培養を止め、得られた培養液をシャー
プレス遠心分離機（１５０００回／分）で分別した藻体
を蒸留水で洗浄し、凍結乾燥して９７ｇの乾燥藻体を得
た。得られた乾燥藻体中のＥＰＡ量を、実施例１と同様
に定量した結果、８．３ｇのであった。
【００１８】
【実施例５】培地１００リットルに対して、ＮａＣｌが
１２００ｇ、ＫＮＯ3 が４０ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ
が２５０ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが５０ｇ、Ｋ2 ＨＰ
Ｏ4が３．５ｇ、ＦｅＣｌ3 ・６Ｈ2 Ｏが０．７ｇ、Ｎ
ａ2 ＥＤＴＡが０．９５ｇ、ＺｎＣｌ2 が２ｍｇ、Ｈ3
ＢＯ3 が３０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．００７５ｍｇ、Ｃｕ
Ｃｌ2 、・２Ｈ2 Ｏが２ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が２０ｍｇ、
（ＮＨ4 ）6 ＭｏＯ24が１８．５ｍｇを含有する無機液
体培地（ｐＨ６．５）５０リットルを、高さ２ｍ、前・
後面の幅０．５ｍ、左右の側面７ｃｍのアクリル製の縦
型偏平水槽に入れ、ナンノクロロプシス藻体をＰＣＶ濃
度０．９ｍｌ／l の割合で接種し、培養温度を１０℃と
し、照射を１８時間／日として、炭酸ガス０．５％を含
有する空気を５ l／ｍｉｎ の割合で通気しつつ、第１
工程として、水槽の前面片面に６０００ ｌｘ の白色
蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１．８ｍｌ／
lとなった後、第２工程として、水槽の前後面の両面に
１１０００ｌｘの白色蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣ
Ｖ濃度が５．０ｍｌ／l となった後、第３工程として、
水槽の前後面の両面に、１００００ｌｘ白色蛍光灯を照
射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１０．５ｍｌ／l となっ
たとき培養を終了して、得られた培養液をシャープレス
遠心分離して、分別した藻体を蒸留水で洗浄し、凍結乾
燥して乾燥藻体９３ｇを得た。得られた乾燥藻体中のＥ
ＰＡ量を、実施例１と同様に定量した結果、８．３ｇで
あった。
１２００ｇ、ＫＮＯ3 が４０ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ
が２５０ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが５０ｇ、Ｋ2 ＨＰ
Ｏ4が３．５ｇ、ＦｅＣｌ3 ・６Ｈ2 Ｏが０．７ｇ、Ｎ
ａ2 ＥＤＴＡが０．９５ｇ、ＺｎＣｌ2 が２ｍｇ、Ｈ3
ＢＯ3 が３０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．００７５ｍｇ、Ｃｕ
Ｃｌ2 、・２Ｈ2 Ｏが２ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が２０ｍｇ、
（ＮＨ4 ）6 ＭｏＯ24が１８．５ｍｇを含有する無機液
体培地（ｐＨ６．５）５０リットルを、高さ２ｍ、前・
後面の幅０．５ｍ、左右の側面７ｃｍのアクリル製の縦
型偏平水槽に入れ、ナンノクロロプシス藻体をＰＣＶ濃
度０．９ｍｌ／l の割合で接種し、培養温度を１０℃と
し、照射を１８時間／日として、炭酸ガス０．５％を含
有する空気を５ l／ｍｉｎ の割合で通気しつつ、第１
工程として、水槽の前面片面に６０００ ｌｘ の白色
蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１．８ｍｌ／
lとなった後、第２工程として、水槽の前後面の両面に
１１０００ｌｘの白色蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣ
Ｖ濃度が５．０ｍｌ／l となった後、第３工程として、
水槽の前後面の両面に、１００００ｌｘ白色蛍光灯を照
射し、培養して、ＰＣＶ濃度が１０．５ｍｌ／l となっ
たとき培養を終了して、得られた培養液をシャープレス
遠心分離して、分別した藻体を蒸留水で洗浄し、凍結乾
燥して乾燥藻体９３ｇを得た。得られた乾燥藻体中のＥ
ＰＡ量を、実施例１と同様に定量した結果、８．３ｇで
あった。
【００１９】
【実施例６】培地１００リットルに対して、ＮａＣｌが
１５００ｇ、ＫＮＯ3 の１００ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏの４００ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが１５０ｇ、Ｋ2
ＨＰＯ4 が１０ｇ、ＦｅＣｌ3・６Ｈ2 Ｏが３．５ｇ、
Ｎａ2 ＥＤＴＡが４．５ｇ、ＺｎＣｌ2 が１０ｍｇ、Ｈ
3 ＢＯ3 が１５０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．０７５ｍｇ、Ｃ
ｕＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが１０ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が１００ｍ
ｇ、（ＮＨ4）6 ＭｏＯ24が９２．５ｍｇのを含む無機
液体培地（ｐＨ９．０）５０リットルを、高さ２．５
ｍ、前・後面の幅２ｍ、左・右側面の幅１７ｃｍのアク
リル製の縦型偏平水槽に入れ、培養温度３５℃、照射を
２４時間／日として、炭酸ガス５％を含む空気を３５ｍ
ｌ／ｍｉｎの割合で通気しつつ、第１工程として、無機
液体培地に、ナンノクロロプシス藻体をＰＣＶ濃度１．
７ｍｌ／l の割合で接種し、水槽の前面の片面に、１６
０００ｌｘの白色光の蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣ
Ｖ濃度が４．９ｍｌ／l となった時、第２工程として、
水槽の前・後の両面に、２１０００ｌｘの白色光の蛍光
灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が７．０ｍｌ／lと
なった時、第３工程として、水槽の前・後の両面に、３
５０００ｌｘの白色光の蛍光灯を照射して、ＰＣＶ濃度
が１１．０ｍｌ／ｌとなったので培養を止めて、得られ
た培養液をシャープレス遠心分離機（１５０００回転／
分）で分別した藻体を蒸留水で洗浄し、凍結乾燥して乾
燥藻体を９４ｇを得た。得られた乾燥藻体中のＥＰＡ
を、実施例１記載と同様にして測定した結果、８．２ｇ
であった。
１５００ｇ、ＫＮＯ3 の１００ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏの４００ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが１５０ｇ、Ｋ2
ＨＰＯ4 が１０ｇ、ＦｅＣｌ3・６Ｈ2 Ｏが３．５ｇ、
Ｎａ2 ＥＤＴＡが４．５ｇ、ＺｎＣｌ2 が１０ｍｇ、Ｈ
3 ＢＯ3 が１５０ｍｇ、ＭｏＯ3 が０．０７５ｍｇ、Ｃ
ｕＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏが１０ｍｇ、ＭｎＣｌ2 が１００ｍ
ｇ、（ＮＨ4）6 ＭｏＯ24が９２．５ｍｇのを含む無機
液体培地（ｐＨ９．０）５０リットルを、高さ２．５
ｍ、前・後面の幅２ｍ、左・右側面の幅１７ｃｍのアク
リル製の縦型偏平水槽に入れ、培養温度３５℃、照射を
２４時間／日として、炭酸ガス５％を含む空気を３５ｍ
ｌ／ｍｉｎの割合で通気しつつ、第１工程として、無機
液体培地に、ナンノクロロプシス藻体をＰＣＶ濃度１．
７ｍｌ／l の割合で接種し、水槽の前面の片面に、１６
０００ｌｘの白色光の蛍光灯を照射し、培養して、ＰＣ
Ｖ濃度が４．９ｍｌ／l となった時、第２工程として、
水槽の前・後の両面に、２１０００ｌｘの白色光の蛍光
灯を照射し、培養して、ＰＣＶ濃度が７．０ｍｌ／lと
なった時、第３工程として、水槽の前・後の両面に、３
５０００ｌｘの白色光の蛍光灯を照射して、ＰＣＶ濃度
が１１．０ｍｌ／ｌとなったので培養を止めて、得られ
た培養液をシャープレス遠心分離機（１５０００回転／
分）で分別した藻体を蒸留水で洗浄し、凍結乾燥して乾
燥藻体を９４ｇを得た。得られた乾燥藻体中のＥＰＡ
を、実施例１記載と同様にして測定した結果、８．２ｇ
であった。
【００２０】
【発明の効果】本発明によれば、ＥＰＡを含む含むナン
ノクロロプシスを容易に大量培養することができ、ＥＰ
Ａを能率よく生産できる有用な培養法が得られたのであ
る。
ノクロロプシスを容易に大量培養することができ、ＥＰ
Ａを能率よく生産できる有用な培養法が得られたのであ
る。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｃ１２Ｒ 1:89）
Claims (1)
- 【請求項１】 単細胞藻類を縦型偏平水槽中の無機液体
培地に接種して、光照射しつつ、かつ、炭酸ガス含有空
気を通気しつつ培養する培養法において、ナンノクロロ
プシス藻体を、ＰＣＶ濃度を０．９〜１．７ｍｌ／1 接
種して、水槽の前後面の何れかの片面から照度６０００
〜１６０００ｌｘの光を照射しつつ、ＰＣＶ濃度が１．
８〜４．９ｍｌ／l になるまで培養する第１工程と、当
該ＰＣＶ濃度１．８〜４．９ｍｌ／l の培養液に、水槽
の前後面の両面から照度１１０００〜２１０００ｌｘの
光を照射しつつ、ＰＣＶ濃度が５．０〜７．０ｍｌ／l
になるまで培養する第２工程と、当該ＰＣＶ濃度５．０
〜７．０ｍｌ／l の培養液に、水槽の前後面の両面から
照度１００００〜３５０００ｌｘの光を照射しつつ、Ｐ
ＣＶ濃度が１０．３〜１１．０ｍｌ／l になるまで培養
する第３工程とから成ることを特徴とするエイコサペン
タエン酸を生産させるナンノクロロプシス藻類の培養
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8091767A JPH09252761A (ja) | 1996-03-22 | 1996-03-22 | エイコサペンタエン酸を増産させるナンノクロロプシス藻類の培養法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8091767A JPH09252761A (ja) | 1996-03-22 | 1996-03-22 | エイコサペンタエン酸を増産させるナンノクロロプシス藻類の培養法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09252761A true JPH09252761A (ja) | 1997-09-30 |
Family
ID=14035723
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8091767A Pending JPH09252761A (ja) | 1996-03-22 | 1996-03-22 | エイコサペンタエン酸を増産させるナンノクロロプシス藻類の培養法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09252761A (ja) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008182962A (ja) * | 2007-01-30 | 2008-08-14 | Nikken Sohonsha Corp | イコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸の生産方法 |
| JP2016504999A (ja) * | 2012-12-24 | 2016-02-18 | クオリタス ヘルス リミテッド | エイコサペンタエン酸（ｅｐａ）製剤 |
| WO2016059262A1 (es) * | 2014-10-15 | 2016-04-21 | Universidade De Santiago De Compostela | Procedimiento de enriquecimiento de biomasa de microalgas en acidos grasos poliinsaturados |
| JP2017060478A (ja) * | 2011-01-28 | 2017-03-30 | アルガサイツ リミテッドＡｌｇａｅＣｙｔｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ | 微細藻類、藍藻類及びそれらの代謝産物の産生のためのプロセス |
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