JPH08509260A

JPH08509260A - 電圧感受性染料の安定化

Info

Publication number: JPH08509260A
Application number: JP6523530A
Authority: JP
Inventors: ビーティー、ジュリー・エー; クーパー、スティーブン・アール; マックローリン、マーガレット・エー
Original assignee: マリンクロット・メディカル・インコーポレイテッド
Priority date: 1993-04-20
Filing date: 1994-04-19
Publication date: 1996-10-01
Also published as: WO1994023646A1; EP0695138A1; AU6707694A; EP0695138A4; MXPA94002884A

Abstract

(57)【要約】本発明は電圧感受性染料の安定な水溶液に関する。とくに本発明は、光学的イメージングコントラスト剤として使用される電圧感受性染料の、市販可能な水溶液が得られるような、好適な処分および貯蔵条件に関する。

Description

【発明の詳細な説明】電圧感受性染料の安定化発明の分野本発明は電圧感受性染料に関する。さらに詳しくは、本発明は電圧感受性染料を含んでなる貯蔵安定性組成物に関する。発明の背景電圧感受性染料を用いた実験は、光学的イメージ神経細胞活性を計算に入れたものである〔神経細胞活性の光学的イメージング、グリンバルドA、フロスチングEL、ハイルドシェイムR、Physiological Reviews、1988年、68巻、1285〜1366 頁：サンショウウオ嗅球の局部的回路における惹起活性についてのリアルタイムのイメージング、カウアーJS、Nature、1988年、331頁、166〜168頁：サル線条皮膚の基本単位組織化を示す電圧感受性染料、ブラスデルGG、サラマG、Nature 、1986年、321巻、579〜585頁〕。これらの実験では、染料溶液中に外科手術を施した対象組織をさらし、浸漬している。組織の膜電位の変化は、電圧感受性染料の吸光度または蛍光の変化をもたらす。また、無傷の頭骨内を通過する経頭部吸光度の変化は、インドシアニングリーン塊で誘発することにより測定することができる旨、報告されている〔赤外線の頭部貫通、マックロミックPW、スチュワートM、ルイスG、デュジョビニイM、オースマンJI、J.Neurosurg、1992年、76巻、315〜318頁〕。インドシアニングリーンには、たとえば最大吸吸光度約８０５nm（ヘモグロビン／デオキシヘモグロビン系の等吸収点）を有する電圧感受性染料がある。この吸光度によって、耳の濃度計測法による血中濃度のモニターが可能になる。インドシアニングリーンは拍出量や肝機能や肝血流量を測定するのに使用されてきた。また、インドシアニングリーンは血しょう容量の測定に用いられたり、眼や腎臓や肺を含む器官の局部的血管造影に使用されている〔編者ジェナーロAR、Remi ngton's Pharamaceutical Sciences、イーストンPA、マック・パブリッシング・カンパニイ、1990年、1279頁〕。イン・ビボにおけるインドシアニングリーンは、心臓および肺の１回の循環を介し、血しょう蛋白と容易に結合して、血流中に残存する。次いで、インドシアニングリーンは再吸収されることなくたん汁に輸送され、小腸管に排出される。インドシアニングリーンと結合する蛋白は、血管外の分布および代謝の両方を防止する。インドシアニングリーンは肝機能によってほぼ例外なく血しょうから除去される〔オソールA、プラットR、The United States Dispensatory、フィラデルフィア、トロント、JBリッピンコット・カンパニイ、1973年、615頁〕。電圧感受性染料の多数の使用用途は、有用であって発展しているが、これらの染料の殆どは、貯蔵が困難である。たとえば、インドシアニングリーンの水溶液は白熱光の照射によって急速に分解する（たとえば、脱イオン水中半減期（T1/2 ）19時間）〔インドシアニン・グリーン：ウサギにおける動的薬理学およびその安定性と純度に関する所定の研究、ハインツR、スベンソンCK、ストッケルK、パワーズGJ、ラルカD、J.Pharm.Sci.1986年、75巻、398〜402頁〕。メタノールまたはたん汁中のインドシアニングリーン室温溶液は、安定のままであるが（半減期＞１年）、十二指腸液または蒸留水中のインドシアニングリーンは急速に分解する（たとえば、それぞれ、半減期3.6日および3.6日、および1.4日）〔インドシアニン・グリーン（ICG）の物理化学的研究：種々の溶媒中の吸光度と濃度の関係、耐pＨ性および分析精度、ボーヤンソンOG、マーフィR、チャドウイックVS、 Experientia、1982年、38巻、1441〜1442頁〕。血しょう蛋白（たとえばヒト血しょうアルブミン）は、白熱光による分解を抑制する〔インドシアニン・グリーンの光吸収特性、安定性およびスペクトル安定化、ランドスマンMLJ、クワントG 、モックGA、ジジャルストラWG、J.Appl.Physiol.1976年、40巻、575〜583頁〕とともに、光線からの保護を達成する〔血しょう中のインドシアニン・グリーンの安定性についての研究、ニマタH、ヨシダS、シミズN、ヨネヤM、ニシベM、マツバラR、リンショウケンサ、1974年、18巻、320〜322頁〕。この分子は、不安定性についての明確な原因がわかっておらず、また驚くべきことに、現存する文献は、分解における酸素の役割を言及していない〔インドシアニン・グリーン染料の安定性研究、ガセジェJ、スチユーアRR、ニコレスKRK、J.Appl.Phisiol、19 70年、29巻、181〜185頁〕。したがって、電圧感受性染料の貯蔵安定性組成物の必要性が引き続き存在している。発明の概要本発明は、電圧感受性染料の安定な水溶液に関する。とくに本発明は、光学的対比イメージング剤として使用される電圧感受性染料の市販可能な水溶液が得られるような、好適な処方と貯蔵条件に関する。本発明は、開示組成物が単体で、あるいは注射器に予め充填した状態のいずれかで輸送可能かつ貯蔵可能である利点を有する。本発明よりも以前では、溶液の乏しい安定性のため、現場での調製が必要であった。加えて従来、かかる染料の輸送および貯蔵は、固体形態でのみ行われていた。本明細書および請求の範囲に用いる用語の定義を、以下に示す。「電圧感受性染料」なる語は、電圧変化に応じ、蛍光または吸収の変化を示すような組成物を意味する。「貯蔵安定性」なる語は、空気保護剤を用いることなく電圧感受性染料よりもより遅い速度で分解するような本発明の組成物を意味する。「分解抑制量」なる語は、本発明の水溶液を貯蔵安定性にさせるような量を意味する。「空気保護剤」なる語は、空気を原因とする電圧感受性染料の分解を抑制しうる、任意の組成物を意味する。発明の詳説本発明の組成物は、光および空気のいずれか一方または両者の組合わせから保護することによって、長期間の貯蔵寿命（即ち、低い分解特性）を有することが、判明した。電圧感受性染料水溶液の有利な点のいくつかには、以下のものが包含される：使用できる速度（即ち、固体溶解のための待機時間が存在しない。）；使用上の好便性（即ち、溶液の製造および固体全てが溶解するか否かについて心配しなくてよい。）；使用上の安全性（即ち、微生物および粒子汚染の機会がほとんど存在しない。）；使用上の簡易性（即ち、いずれの粒子も栓から溶液内へ混入する機会がほとんど存在しない。なぜなら、再構築キットでは２回であるのに対し、針を１回押し込むだけで足りるからである。もし、既充填注射器を使用すれば同様の汚染の機会は存在しない。）。本発明に用いる電圧感受性染料には、以下のものが包含される：エバンスブルー（アルドリッチ）（C₃₄H₂₄N₆Na₄O₄S₄）、インドシアニングリーン、メロシアニン、シアニン染料、メロシアニン染料（アルドリッチ）、オキソノール、オキソノール染料、スチリル、ロダニンメロシアニン、インジゴカルミン（C₁₆H₈N₂N a₂O₈S₂）（アルドリッチ）、スルファン（またはパテント）ブルー（アルドリッチ）（C₂₇H₃₁ N₂NaO₆S₂）（アルドリッチ）、コンゴレッド（C₃₂H₂₂N₆Na₂O₆S₂）（アルドリッチ）、およびフルオロレセインナトリウム（C₂₀H₁₀NaO₅）（アルドリッチ）。本発明の組成物に使用するのに適した光保護手段には、例えば不透明包装のような包装、厚紙の箱、およびスチロホーム容器の使用が包含される。本発明の保護組成物にとって、当該組成物によって吸収される光と同種の光からの保護が、とくに有利である。本発明の組成物に使用するのに適した空気保護手段には、空気保護剤の使用が包含される。空気保護剤の例示としては、抗酸化剤、ガス、および界面活性剤が包含される。本発明の使用に適した空気保護剤にはガス、たとえばアルゴンおよび窒素が包含される。ガスの使用には固体染料含有バイアルのアルゴンまたは窒素によるパージングおよびシーリングが包含される。次いで、アルゴンまたは窒素によって、所望の抗酸化剤または界面活性剤を好適な割合で含有する緩衝液を泡立てる。ガス抜きした溶液を固体染料に添加し、溶液をパージしたバイアルまたは注射器へ移す。栓は、空気を確実には遮断できないので、シールしたアンプルが好適である。本発明の実施に使用するのに適した抗酸化剤には亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、ナトリウム・ホルムアルデヒド・スホキシレート、アセトン・ナトリウム・メタビスルファイト、イソアスコルビン酸、チオグリセロール、アルコルベート、チオソルビトール、システイン塩酸塩、二酸化硫黄、アセチルシステイン、チオ乳酸、ジチオトレイトールおよびグルタチオン（これらは全てアルドリッチ、フィシャーおよび／またはフルカから入手可能）が包含される。本発明の使用に適した界面活性剤様特性を示す組成物および界面活性剤にはツイーン、ポリソルベート（ＩＣＩまたはシグマ）、プロニクス（ＩＣＩまたはシグマ）、ポリエチレングリコール（シグマ）、ナトリウム・カルボキシメチル・セルロース（シグマ）が包含される。界面活性剤様機能を有する組成物および界面活性剤は、有機官能基との会合または有機分子のミセル内への組み込みによって空気から保護しているようである。本発明に使用する空気保護剤の用量は、水溶液の約０.０１％〜約１.０％の範囲である。好適には、約０.１〜約０.２５％の範囲を使用する。なお、空気保護剤の用量は、一般に水溶液中の特定の空気保護剤の溶解性に依存する。実際の使用には、本発明の貯蔵安定性水溶液は、少なくとも、たとえば実験室調製時または薬局調合時から投与または使用までの所定の期間の間に安定であることが有利である。代表的には、この期間はほぼ数分からほぼ数時間である。好適には、貯蔵安定性は、ほぼまる一日（２４時間）〜数週間である。最も好適には、貯蔵安定性は１年（１２月）またはそれ以上である。電圧感受性染料の重要な利点は、その時間解析能が、通常使用されている固有の光信号についての秒オーダーの時間解析能に比し、１ミリセコンド（ms）よりも良好である点に存在する。すなわち、本発明は患者、代表的には温血動物のイメージングに適している。本発明の組成物を用いるイメージング方法は、イメージング有効量の本発明の組成物を患者へ投与し次いで患者を所望のイメージング法に付すことを含んでなる。本発明の使用に好適な電圧感受性染料の例示にはエバンスブルー、インドシアニングリーン、コンゴレッド、フルオロレセインナトリウム、スルファンブルーおよびインジゴカルミンが包含される。本発明の使用に好適な空気保護剤の例示にはアスコルビン酸ナトリウム、グルタチオン、ジチオトレイトール、アスコルビン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、ポリソルベート８０およびカルボキシメチルセルロースが包含される。電圧感受性染料を含んでなる本発明の組成物に添加しうる他の薬剤には、診断用組成物を配合するための薬剤が包含される。かかる診断用組成物は経腸投与または非経口投与とすることができ、また医薬上許容される緩衝剤、電界質、界面活性剤、チキソトロピー剤などを含んでもよい。診断用組成物は、イメージング有効量で投与するが、イメージング有効量とは所望のイメージを得るのに必要な量をいう。診断用組成物は有効量の本発明の組成物を含むとともに、意図した投与タイプに適した通常の医薬担体と賦形剤とを含有する。たとえば、非経口製剤は有利には滅菌水溶液または懸濁液を本発明の組成物の約０.０５〜１.０Ｍで含有する。好適な非経口製剤は濃度約０.１Ｍ〜約０.５Ｍである。かかる溶液はまた医薬上許容される緩衝剤を含み、所望により電界質、たとえば塩化ナトリウムを含んでもよい。非経口組成物は直接的に注入してもよく、また多量の全身投与用非経口組成物と混合してもよい。経腸投与用製剤は当該分野でよく知られているように広範に変化させることができる。一般に、かかる製剤は水溶液または懸濁液中に有効量の本発明の組成物を含む液体である。かかる経腸投与用組成物は所望により緩衝剤、界面活性剤、チキソトロピー剤などを含んでもよい。経口投与用組成物は、フレーバー剤や、その器官感覚受容特性を向上させるような他の成分を含んでもよい。診断用組成物は所望のイメージ形成促進を達成するのに有効な用量で投与される。かかる用量は、用いられる特定の組成物、イメージング法の対象となる器官や組織、イメージング法、用いられるイメージング装置などに応じて変化させることができる。一般に、非経口投与の用量は約患者体重１Ｋｇ当たり、本発明の組成物約０.０１〜約１.０mmolである。好適な非経口投与の用量範囲は、患者の体重１Ｋｇ当たり約０.０５〜約０.５mmolである。経腸投与の用量は一般に患者の体重１Ｋｇ当たり約０.５〜約１００mmol、好適には約１.０〜約１０mmolである。本発明の診断用組成物は慣用の手法で使用される。当該組成物は患者、代表的には温血動物に対し、全身的または局所的のいずれかにより、イメージングされる器官または組織へ投与し、次いで患者をイメージング法に付すことができる。以下の実施例は、本明細書に記載の本発明の特定の具体例を説明するものである。当業者には明らかなように種々の変形例や改良例が可能であり、これらは、本発明の開示の範囲内にあるものと考えられる。実施例以下に示す実施例は、光または空気からの保護が電圧感受性染料の分解を抑制することを、示すものである。一連の実施例はインドシアニングリーンの０.００６mＭ水溶液について行った。各実験において、ＵＶ可視スペクトル６００〜９００nmにおける最大吸光度の減少によって分解をモニターした。最初の実験として、１つの空気非含有溶液と１つの空気含有溶液を用い２回行い、分解に対する酸素の影響調査に役立てた。白熱光の照射は両溶液の分解を引き起こしたが、酸素非含有溶液は僅かに遅い速度で分解した。この時点で、温度、光源およびpＨのような多数の変数を調べた。全ての場合、空気非含有溶液はゆっくりとした速度で分解した。蛍光では、分解は両溶液について著しく減少した。溶液を光の不存在下に加熱した場合、分解は殆ど全く観察されなかったが、白熱光の存在下であれば熱は分解を促進するようである。pＨ９.４５から７.３９への低下は、分解に対し影響がなかった。ＥＤＴＡを溶液に添加して遊離金属イオンを排除したが、観察可能な結果は得られなかった。アスコルベートを、白熱光を照射した空気非含有緩衝液（pＨ７.３９）に添加すると、分解が抑制された。材料の調製インドシアニングリーン（ＩＣＧ）、重亜硫酸ナトリウム、Ｌ-アスコルビン酸およびＮａ₂Ｈ₂ＰＯ₄をアルドリッチから購入した。ＮａＨ₂ＰＯ₄・Ｈ₂Ｏおよびエチレンジアミン四酢酸二カルシウム（ＥＤＴＡ）はマリンクロットから入手した。溶液は、２５０ml容量のフラスコで調製し、吸光度測定のために１.０cm のフタ付キュベット中へ移した。実験の間、溶液をキュベット中に放置した。６０Ｗの電球を備える卓上ランプを用い、白熱光を溶液に照射した。白熱光はキュベットから約５cmの距離に置いた。溶液の加熱は、温度５０〜５３℃に維持した熱水浴に通して行った。ＵＶ可視スペクトルは、キャリイ３Ｅ分光光度計に、６００〜９００nmの範囲にわたり記録した。リン酸塩緩衝液は、ＮａＨ₂ＰＯ₄・Ｈ₂ Ｏ（０.２９７５ｇ）およびＮａ₂ＨＰＯ₄（１.０８１３ｇ）を脱イオン水２５０ml中に溶解して調製した。緩衝液のpＨは７.３９である。実施例１ＩＣＧ（１.２５mg）を脱イオン水２５０mlに溶解した。この溶液の第１アリコートをキュベットに入れ、ガス抜きしたが、第２アリコートはガス抜きをしなかった。前記したように両キュベットに照射した。なお、照射によって溶液温度が上昇することに注意すべきである。６０分後、空気非含有溶液の吸光度は約１.０５から０.２へ減少し、空気含有溶液の吸光度は１.０５から０.１５へ減少した。したがって、これらの条件下では、酸素の欠如は分解速度にほどんど影響を与えない。実施例２実施例１と同様な溶液を用いた。ただし、溶液温度が３０℃以上に上昇するのを防止するために必要な氷を添加した水浴中へキュベットを入れた。６０分後、空気非含有溶液は、１.０５から０.７への吸光度の減少を示し、空気含有溶液は１.６から０.８への吸光度の減少を示した。これらの溶液は、前記非冷却溶液に比しよりゆっくりとした分解を示したが、分解が熱によるのか、光によるのか、または両者によるのか、不明である。実施例３実施例１と同様な溶液を用いた。ただし、溶液への照射に代えて、５０〜５３ ℃の熱水浴中で溶液を加熱した。空気非含有溶液では、吸光度が９０分後に約１ .１から１.０５へ減少し、空気含有溶液は同じ時間経過後に１.６から１.３への吸光度の減少を示した。これらの結果を実施例２の結果と比較すると、染料の分解速度に影響を与える主要な要因は光であって、熱ではないことが判明した。実施例４再度、前記と同じ溶液を用いた。この試料を天井の蛍光灯にさらして、かかる照射が白熱光照射と同じ作用を示すか否かを調べた。ガス抜き溶液の吸光度は６０分後に実質的には変化せず、また空気含有溶液の変化もごく僅かであった。一夜放置後、ガス抜き溶液は吸光度が約１.０から約０.４へ減少し、空気状態調節溶液は吸光度が約１.０から０.０５へ減少した。蛍光による分解の遅延は、蛍光がより青色に近いものである一方白熱光がより赤色に近いものであるため蛍光がＩＣＧと同じ範囲で吸収されるという、事実に起因するようである。実施例５ＩＣＧ（１.０mg）を前記したようなリン酸塩緩衝液２５０ml中に溶解した。この溶液の第１アリコートをキュベットに入れ、ガス抜きした。第２アリコートはガス抜きしなかった。両キュベットに白色光を照射した。（注記:以後、「光」なる語は白色光を意味する）。６０分後、両溶液は吸光度が約１.０から０.２へ減少した。緩衝液の存在は溶液を同じ速度で分解させることが明らかになった。実施例６実施例５に用いたものと同様な溶液を用いた。ただし、スパチュラ先端量の固体アスコルビン酸ナトリウムも添加した。６０分後、空気含有溶液の吸光度は１ .０から０.７へ減少した。実施例７実施例５と同じ溶液を製造した。ただし、０.０００２Ｍアスコルビン酸ナトリウム溶液３ml（ＩＣＧ濃度の４％）も添加した。６０分後、ガス抜き溶液は、１.０から０.１５への吸光度の減少を示した。この結果を実施例５の結果と比較すると、０.０００２アスコルビン酸塩の存在はＩＣＧの分解を遅延させない。実施例８ＩＣＧ（２.５０mg）をリン酸塩緩衝液２５０mlに溶解した。この溶液１.５ml を０.１０Ｍアスコルビン酸塩溶液１.５mlと合し、照射した。６０分後、ガス抜きした溶液の吸光度は０.３から０.２へ減少し、実施例２に記載のような冷却溶液は０.４から０.２への吸光度の減少を示した。これらの結果は、充分な濃度のアスコルビン酸塩はＩＣＧの分解を抑制することを示す。実施例９サジ山盛り量の重亜硫酸ナトリウムをリン酸塩緩衝液２５０ml中ＩＣＧ（１. ２５mg）含有溶液３mlに添加した。ガス抜きした溶液において、初期の吸光度は約０.３であるが、わずか１５分後に吸光度は０.０になった。重亜硫酸塩が染料を破壊したことが明らかになった。実施例１０ＩＣＧ（２.５０mg）を緩衝液２５０ml中に溶解した。この溶液１.５mlを０. １０Ｍ重亜硫酸塩溶液１.５mlと合した。ガス抜きした溶液の初期吸光度は１.０であったが、急速に約０.５に降下し、７５分までその値を維持した。この結果は、亜硫酸塩がＩＣＧを分解することを付加的に支持するものであり、これは、またうす緑色に着色したＩＣＧ溶液が重亜硫酸塩の添加によって直ちに無色になったことの証拠である。したがって、重亜硫酸ナトリウムはＩＣＧ分解の抑制に有効ではない。実施例１１ＩＣＧ（１.０mg）をリン酸塩緩衝液２５０mlに溶解した。この溶液に、０.０００１４Ｍ・ＥＤＴＡ５.２９ml（染料濃度の４％）を添加した。６０分後、ガス抜き溶液は１.０から約０.１への吸光度の減少を示した。ＥＤＴＡは分解速度の遅延化に効果がないことが明らかになった。実施例１２ＩＣＧ（１.０mg）をリン酸塩緩衝液２５０ml中に溶解した。この溶液にスパチュラ先端量の固体ＥＤＴＡを添加した。空気含有溶液において、吸光度は６０分後に０.９から０.２５へ減少し、よって、なお分解の遅延化に有効ではない。実施例１３ＩＣＧ（１.２５mg）をリン酸塩緩衝液２５０mlに溶解した。この溶液３.０ml を０.０１３６Ｍ・ＥＤＴＡ溶液１５４mlと合した。空気非含有溶液の吸光度は６０分後に０.２４から０.１２へ減少した。実施例２に記載のような冷却溶液の吸光度は６０分後に約０.４から約０.１へ減少した。著しく過剰のＥＤＴＡを用いた場合でさえ、ＩＣＧの分解速度は遅延化しなかった。実施例１４ＩＣＧ（１.２５mg）を緩衝液２５０ml中に溶解した。初期の吸光度は０.９（ガス抜き溶液）および０.８（空気含有溶液）であった。この溶液にフォイルを被せ、キャビネット中の暗所に入れた。２４時間後、吸光度は変化しなかった。１カ月ののち、吸光度の読取りは、各々約０.３５および０以下であった。したがって、溶液を暗所に保持することは分解を著しく遅延化させるが、完全に停止させることはない。本発明は特定の例示について記載したが、その詳細は限定事項と解すべきではなく、種々の等価物、変形例および改良例も、本発明の精神および範囲を逸脱しない限り、権利行使することができ、またかかる等価の具体例は本発明の範囲内に包含されうるものと、理解すべきである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者マックローリン、マーガレット・エーアメリカ合衆国63132ミズーリ州セント・ルイス、ボン・ヒルズ16番

Claims

【特許請求の範囲】１．電圧感受性染料を含んでなる、貯蔵安定性水溶液。２．前記染料がエバンスブルー、インドシアニングリーン、コンゴレッド、フルオロレセインナトリウム、スルファンブルーおよびインンジゴカルミンからなる群から選ばれる、請求項１記載の組成物。３．前記染料がインドシアニングリーンである、請求項２記載の組成物。４．貯蔵安定性水溶液が分解抑制量の空気保護剤を含んでなる、請求項１記載の組成物。５．空気保護剤が抗酸化剤である、請求項４記載の組成物。６．抗酸化剤がアスコルベート、グルタチオンおよびジチオトレイトールからなる群から選ばれる、請求項５記載の組成物。７．抗酸化剤がアスコルベートである、請求項６記載の組成物。８．空気保護剤が表面活性剤である、請求項４記載の組成物。９．表面活性剤がポリソルベート、カルボキシメチルセルロースおよびプルロニックからなる群から選ばれる、請求項８記載の組成物。１０．表面活性剤がポリソルベートである請求項９記載の組成物。１１．抗酸化剤がアスコルベート、グルタチオンおよびジチオトレイトールからなる群から選ばれる、請求項２記載の組成物。１２．前記染料がエバンスブルー、インドシアニングリーン、コンゴレッド、フルオロレセインナトリウム、スルファンブルーおよびインンジゴカルミンからなる群から選ばれる、請求項９記載の組成物。１３．前記染料がインドシアニングリーンであって、抗酸化剤がアスコルベートである、請求項１１記載の組成物。１４．前記染料がインドシアニングリーンであって、表面活性剤がポリソルベートである、請求項１２記載の組成物。１５．貯蔵安定性電圧感受性染料と、分解抑制量の空気保護剤とを配合してなる、当該染料の水溶液を製造する方法。１６．空気保護剤が抗酸化剤である、請求項１５記載の方法。１７．抗酸化剤がアスコルベート、グルタチオンおよびジチオトレイトールからなる群から選ばれる、請求項１６記載の方法。１８．抗酸化剤がアスコルベートである、請求項１７記載の方法。１９．前記染料がエバンスブルー、インドシアニングリーン、コンゴレッド、フルオロレセインナトリウム、スルファンブルーおよびインンジゴカルミンからなる群から選ばれる、請求項１５記載の組成物。２０．前記染料がインドシアニングリーンである、請求項９記載の方法。２１．前記染料がエバンスブルーである、請求項１９記載の方法。２２．前記染料がエバンスブルー、インドシアニングリーン、コンゴレッド、フルオロレセインナトリウム、スルファンブルーおよびインンジゴカルミンからなる群から選ばれる、請求項１６記載の方法。２３．前記染料がインドシアニングリーンである、請求項２２記載の方法。２４．イメージング促進量の電圧感受性染料を患者へ投与し、次いで当該染料に照射することを特徴とする、当該染料を含んでなる貯蔵安定性水溶液を使用する方法。２５．前記染料がエバンスブルー、インドシアニングリーン、コンゴレッド、フルオロレセインナトリウム、スルファンブルーおよびインンジゴカルミンからなる群から選ばれる、請求項２４記載の方法。２６．前記染料がインドシアニングリーンである、請求項２５記載の方法。２７．前記染料がコンゴレッドである、請求項２５記載の方法。２８．貯蔵安定性水溶液が分解抑制量の抗酸化剤を含んでなる、請求項２４記載の方法。２９．抗酸化剤がアスコルベート、グルタチオンおよびジチオトレイトールからなる群から選ばれる、請求項２８記載の方法。３０．抗酸化剤がアスコルベートである、請求項２９記載の方法。３１．貯蔵安定性水溶液が分解抑制量の表面活性剤を含んでなる、請求項２４記載の方法。３２．表面活性剤がポリソルベート、カルボキシメチルセルロースおよびプルロニックからなる群から選ばれる、請求項３１記載の方法。３３．表面活性剤がポリソルベートである、請求項３２記載の方法。３４．貯蔵安定性水溶液がインドシアニングリーン染料を含んでなる、請求項２９記載の方法。３５．前記水溶液がインドシアニングリーン染料を含んでなる、請求項３２記載の方法。