JPH08504788A

JPH08504788A - Ｐｋｃ阻害剤としての複素環のアミノ酸誘導体

Info

Publication number: JPH08504788A
Application number: JP6514794A
Authority: JP
Inventors: トロストマン，ウーヴェ; ハルテンシュテイン，ヨハネス; バールト，フーベルト; シェーヒテル，クリストフ; ルドルフ，クラウス; ケルヒ，ワルター; レク，ラインハルト
Original assignee: ゲデッケ・アクチェンゲゼルシャフト
Priority date: 1992-12-21
Filing date: 1993-12-20
Publication date: 1996-05-21
Also published as: MX9307983A; US5750555A; AU5813794A; WO1994014798A1; EP0674632A1; DE4243321A1

Abstract

(57)【要約】記載されているのは、一般式（Ｉ）：Ａ−Ｘ−Ｙ−Ｅ_n−Ｒ⁵｛式中、Ａは、一般式（III）の基（ここで、Ｒ¹は、水素、又は炭素数１〜４の低級アルキル基であり、そして（−−−）は、開環しているか、又は結合である）である｝で示されるアミノ酸誘導体である。更には、ガン、ウイルス性感染症、心及び循環器系障害、血栓症、心臓拍動障害、アテローム性動脈硬化症、気管支肺疾患、中枢神経系の変性状態、炎症性疾患、免疫系疾患、及び乾癬の治療及び／又は予防におけるプロテインキナーゼＣ阻害剤としてのこのような誘導体の用途、並びに免疫抑制剤としてのこのような誘導体の用途が記載されている。

Description

【発明の詳細な説明】ＰＫＣ阻害剤としての複素環のアミノ酸誘導体本発明は、一般式（Ｉ）：Ａ−Ｘ−Ｙ−Ｅ_n−Ｒ⁵ （Ｉ）｛式中、Ａは、一般式（III）（式中、Ｒ¹は、水素原子、又は炭素数１〜４のアルキル基であり、そして（− −−）は、開環しているか又は原子価結合であることができる）で示される基であり、Ｘは、単結合、又は炭素数１〜１６のアルキレン基であり、Ｙは、単結合、又はＮ−Ｒ²、ＣＯ、ＣＳ、ＣＨ＝ＣＨ、ＰＯ（ＯＨ）Ｏ若しくはＳＯ₂などの基であり、ここで、Ｒ₂は、水素原子、又は炭素数１〜４のアルキル基であり、ｎは、１〜２０の整数であり、Ｅは、同一であるか又は異なって、一般式（IV）：又は一般式（Ｖ）：（上記式中、Ｒ²は、水素原子、又は炭素数１〜４のアルキル基であり、ここで、ｍが１である場合、基Ｒ³は、水素原子であるか、又は天然α−アミノ酸の一つの側鎖のいずれかであり、ｍが２〜６である場合、Ｒ³は水素原子である）で示される基であり、そしてＲ⁵は、Ｅが一般式（IV）の基である場合、アミノ基又は基−ＯＲ⁴（ここで、Ｒ⁴ は、炭素数１〜４のアルキル基であるか、又は水素原子である）であり、そしてＥが一般式（Ｖ）の基である場合、Ｒ⁵は、水素原子である｝で示される、新規アミノ酸誘導体に関する。一般式（Ｉ）の化合物は、Ａが、一般式（III）のビス−インドリルマレインイミド又はインドロピロロカルバゾールであり（ここで、Ｒ¹は、水素原子、又は炭素数１〜４のアルキル基であることができる）、Ｘが、炭素数１〜１０のアルキレン基であり、Ｙが、ＮＨ又はＣＯであり、Ｅが、一般式（IV）又は一般式（Ｖ）のアミノカルボン酸であり（ここで、Ｒ² は、水素原子であり、ｍが１である場合、Ｒ³は、水素原子、又は天然α−アミノ酸の一つの側鎖であり、ｍが１〜６である場合、Ｒ³は、水素原子である）、そして、ｎが、好ましくは１〜６である場合が好ましい。式（IV）の場合に存在する末端カルボン酸は、アンモニアによりアミド化されるか、又は低級アルコール、例えばメタノール、エタノール若しくはプロパノールによりエステル化されていてもよい。更に又、一般式（Ｉ）｛ここで、Ａは、式（III）のビスインドリルマレインイミド又はインドロピロロカルバゾールであり（ここで、Ｒ¹は、メチルである）、Ｘが、メチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、オクチレン又はノニレンであり、Ｙが、ＮＨ又はＣＯのいずれかであり、そして−Ｅ_n−Ｒ⁵が、アラニン、アラニンメチルエステル、β−アラニン、アルギニン、セリン、グリシルアラニン、グリシルグリシルアラニン、グリシルグリシルグリシルアラニン、グリシルグリシルセリン、リシルグリシルアラニン、セリルグリシルアラニン、アラニルグリシルリシン、リシルアスパラギニルアルギニルフェニルアラニルアラニン、β−アラニルアラニン、４−アミノバレリアノイルセリン又はアラニルアルギニンである｝の化合物、薬理学的に許容しうる、一般式（Ｉ）の酸性化合物の塩基との塩、及び薬理学的に許容しうる、一般式（Ｉ）の塩基性化合物の酸との塩、並びに一般式（Ｉ）の化合物を製造する方法、並びに一般式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物が好ましい。一般式（Ｉ）の化合物（ここで、Ａ、Ｘ、Ｙ及びＥは、上述した意味を有し、ｎは１である）は、一般式（VI）：Ａ−Ｘ−Ｙ−Ｇ（VI）（式中、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、そして−Ｙ−Ｇは、アミノ基である）で示される化合物を、一般式（VII）：（式中、Ｒ³は、上述した意味を有し、存在する可能性のある官能基は、保護基として提供されており、そしてＱは、アミノ保護基、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル又はフルオレニルメトキシカルボニル基である）で示されるアミノカルボン酸と反応させ、そして公知の方法により保護基を切断する（反応の目的のためには、一般式（VII）の化合物のカルボン酸基を、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ペンタフルオロフェノール又はヒドロキシスクシンイミドの作用により活性カルボン酸エステルに変換することを勧める）か、或いは一般式（VI）の化合物（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、ＣＯ、ＣＳ、ＣＨ＝ＣＨ、ＰＯ（ＯＨ）Ｏ又はＳＯ₂であり、そしてＧは、ヒドロキシル基又はハロゲン原子である）を、一般式（VIII）：（式中、Ｒ²及びＲ³は、上述した意味を有し、そしてＲ⁴は、メチル、エチル又はプロピル基である）で示されるアミノカルボン酸と反応させて、一般式（IX）：（式中、Ｒ²、Ｒ³及びＲ⁴は、上述した意味を有する）で示される化合物を得ることによって、調製される。一般式（VI）の化合物が、カルボン酸として存在するのであれば、一般式（VIII）の化合物との反応の目的のためには、このカルボン酸を、通常の条件下で、活性エステル、例えば、ペンタフルオロフェニルエステル又はヒドロキシスクシンイミジルエステルに変換する。一般式（IX）の化合物を、後に、エステル基のアルカリによるけん化により、一般式（Ｉ）の化合物に変換する。一般式（Ｉ）の化合物（ここで、Ａ、Ｘ及びＹは、上述した意味を有し、ｎ＞１の場合のＥ_nは、ペプチド基の意味を有する）は、一般式（Ｉ）の化合物を，公知の方法により、更なるアミノカルボン酸と反応させるか、又は一般式（Ｉ）の化合物を、メリフィールド（Merrifie1d）法により固相上で合成することによって、調製される。この目的のためには、一般式（XI）：（式中、Ｒ²及びＲ³は、上述した意味を有する）の最初のアミノ酸を、メリフィールド樹脂上に縮合し、その後フルオロフェニルメトキシカルボニル保護基を、一般に公知の方法により切断し、次に所望により、一般式（XI）のさらなるアミノカルボン酸を更に縮合させる。最後の縮合の段階において、一般式（VI）の化合物（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、ＣＯ又はＣＳであり、そしてＧは、ヒドロキシル基である）を、カルボン酸活性化化合物、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下で、メリフィールド樹脂に結合したペプチドと反応させる。一般式（Ｉ）の化合物の樹脂からの分離は、公知の方法、例えば、フェノールの存在下、トリフルオロ酢酸中で行う。合成を、通常の方法により行ったのであれば、一般式（Ｉ）で示される最終生成物は、一般式（Ia）：Ａ−Ｘ−Ｙ−Ｅ_n−ＮＨ₂ （Ia）で示されるカルボン酸アミドとして存在する。合成を、ワング（Wang）樹脂上で行うのであれば、一般式（Ｉ）の化合物は、カルボン酸として分離される。一般式（IV）の化合物（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、そしてＹは、ＮＨ₂又はＣＯＯＨである）は、公知である。その製造法に関しては、EP 03 28026、EP 0384349、EP 0397060、DE4217964.5、Tetrahedron Lett.，31，2353/ 1990、Tetrahedron Lett.，31，5201/1990、及びそれらに引用された文献中に記載されている。一般式（VI）の化合物（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、Ｎ −Ｒ²であり、そしてＧは水素原子である）と、一般式（VII）のアミノカルボン酸との反応は、一般式（VII）のアミノカルボン酸を、非プロトン性溶媒、例えば、酢酸エチル、ジクロロメタン又はジメチルスルホキシド中、しかし好ましくはジメチルホルムアミド中に配置し、それをペンタフルオロフェノール又はＮ− ヒドロキシスクシンイミドで、又は好ましくはジシクロヘキシルカルボジイミドでそしてヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下で、活性カルボン酸エステルに変換し、その後同じ溶媒中で、一般式（VI）の化合物と、０〜６０℃の温度、しかし好ましくは周囲温度で反応させることによって行う。反応生成物は、一般に公知の方法、しかし好ましくはクロマトグラフィーにより精製及び単離する。保護基の切断は、一般に公知の方法により行う。好ましく使用されるｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基の切断は、強酸、例えば、塩酸、しかし好ましくはトリフルオロ酢酸により、溶媒としてのジクロロメタン中、０〜３５℃の温度、しかし好ましくは、周囲温度において行う。反応溶液の中和後、生成物を、適切な溶媒から沈殿させることによって、純粋な形で単離する。更に又、一般式（Ｉ）の化合物（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、そしてＥは、末端カルボン酸基を有する）は、一般式（VI）の化合物（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、ＣＯ又はＣＳのいずれかであり、そしてＧは、ヒドロキシル基である）を、適切な溶媒、好ましくはジメチルホルムアミド中で、ペンタフルオロフェノール又はＮ−ヒドロキシスクシンイミドで、及び好ましくはジシクロヘキシルカルボジイミドでそしてヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下で、活性カルボン酸エステルに変換し、その後同一溶媒中で、一般式（VIII）の化合物と、０〜６０℃の温度、しかし好ましくは周囲温度において、反応させることによって調製する。一般式（IX）の生成物の単離は、従来の方法、しかし好ましくはクロマトグラフィーの使用により行う。一般式（Ｉ）の所望の化合物を得るための、一般式（IX）のカルボン酸エステルのけん化は、酸性又は塩基性のいずれかの条件下、好ましくはアルカリ金属水酸化物の存在下、水性有機溶媒混合物、しかし好ましくは、水／ジオキサン中、水酸化リチウムにより、０〜４０℃の温度、しかし好ましくは周囲温度において、行う。一般式（Ｉ）の生成物は、クロマトグラフィー及び／又は結晶化により単離する。一般式（Ｉ）の化合物（この場合、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、カルボニル基であり、そしてｎ＞１の場合のＥ_nは、ペプチド基である）は、式（XI）のアミノカルボン酸（ここで、Ｒ²及びＲ³は、上述した意味を有する）を、非プロトン性溶媒、例えばジメチルホルムアミド、しかし好ましくはＤＭＡ中、ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下、メリフィールド樹脂に縮合させ、過剰の試薬を当の溶媒により洗い落とし、塩基性条件下でフルオレニルメトキシカルボニル保護基を切断し、再び残留試薬を洗い落とし、公知の方法により、更にアミノ酸に縮合させることにより、調製され、そして最終部分化合物として、一般式（VI）の化合物（ここで、Ａ及びＸは、上述の意味を有し、ＹはＣＯであり、そしてＧは、ヒドロキシル基である）を、同じ方法により縮合する。メリフィールド樹脂を、強い酸によって、好ましくはトリフルオロ酢酸及びフェノールの存在下、そしておそらくはチオフェノール及びチオアニソールの存在下、数時間、及び好ましくは２０時間以上をかけて、周囲温度において処理することによって、本化合物を分離し、得られる暗赤色溶液を分離し、溶媒の除去後、生成物をジエチルエーテルから固体の形で単離する。生成物は、ＲＰ相によるクロマトグラフィー及び／又は結晶化により、純粋な形で得られる。キラル中心を有する一般式（Ｉ）の化合物は、立体異性体混合物又は鏡像異性体の形で使用することができる。精製の目的のため及び製剤学的理由のため、一般式（Ｉ）の塩基性化合物は、好ましくは、結晶性の、薬理学的に許容される塩に変換される。塩は通常の方法により、適切な無機又は有機酸による塩基の中和により得られる。酸としては、例えば塩酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸、酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、リンゴ酸、サリチル酸、アスコルビン酸、マロン酸、フマル酸、シュウ酸、又はコハク酸を使用することができる。原則として、酸付加塩は、遊離塩基又はその溶液を、有機溶媒、例えばメタノール、エタノール若しくはプロパン−２−オールなどの低級アルコール、又はアセトン若しくはブタン− ２−オンなどの低級ケトン、又はジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン若しくはジオキサンなどのエーテル中、適当な酸又はその溶液と混合することによって、公知の方法により得られる。一般式（Ｉ）の化合物は、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）の強力な阻害剤である。プロテインキナーゼＣは、細胞内のシグナル変換に重要な役割を果たし、収縮、分泌及び増殖の過程の調節と緊密に関連している。これらの特性に基づき、本発明による化合物は、ガン、ウイルス性疾患（例えば、ＨＩＶ感染症）、心及び血管疾患、例えば血圧、血栓症、心拍動障害、アテローム性動脈硬化症、気管支肺疾患、中枢神経系の変性疾患、例えば、アルツハイマー病、リウマチ及び関節炎などの炎症性疾患、アレルギーなどの免疫系疾患、並びに乾癬の治療及び／又は予防に使用することができる。本化合物は更に又、免疫抑制剤として使用することもできる。文献からは、スタウロスポリンのアグリコンの下部構造から誘導される合成誘導体及び化合物は、プロテインキナーゼＣの強力な阻害剤として知られている（J．Med．Chem.，35，177/1992; J．Med．Chem.，35， 994/1992を参照）。その活性の作用機序は、プロテインキナーゼＣの触媒性サブユニットからのＡＴＰの排除に依存する。本発明による一般式（Ｉ）の化合物と共に、ＰＫＣ阻害剤の新たなグループが発見されている。これらは、アミノ酸のセリンに代表される、高度の親和性を有するＰＫＣの基質から誘導されるアミノ酸部分を含む一方、アミノ酸のアラニンに代表される、阻害剤から誘導されるアミノ酸部分をも付加的に含む（Science ，238，1726/1987；Cell．Signalling，2，187/1990を参照）。驚くべきことに、これらの一般式（Ｉ）の新規化合物は、プロテインキナーゼＣに対して非常に強力な阻害剤であるばかりでなく、実施例の幾つかに示されたように、選択的な阻害剤であることが明らかになっている。ミオシンのＬ鎖キナーゼに対するその作用は、かなり弱いものであることが判明している。本化合物は、特定の適切な処方により、経口的又は非経口的に、１〜５００mg /kg、好ましくは１〜５０mg/kgの投与量で、投与することができる。一般式（Ｉ）の本発明による化合物は、液体又は固体の形で、経口的又は非経口的に投与することができる。注射用の媒質としては、安定剤、可溶化剤又は緩衝剤などの、注射溶液において通常使用される添加物を含む水を特に使用することができる。このような添加物としては、例えば酒石酸及びクエン酸緩衝剤、エタノール、錯体形成剤（エチレンジアミン四酢酸及び毒性を有さないその塩など）、及び粘度調節用高分子量ポリマー（液体のポリエチレンオキシドなど）が挙げられる。固体の担体材料としては、例えば、澱粉、乳糖、マンニトール、メチルセルロース、タルク、高度に分散されたケイ酸、高分子量脂肪酸（ステアリン酸など）、ゼラチン、寒天、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、動物及び植物脂肪、並びに固体の高分子量ポリマー（ポリエチレングリコールなど）が挙げられる。経口投与に適した組成物は、所望であれば、付加的に香料及び／又は甘味剤を含むことができる。以下の比較実験により、本発明による一般式（Ｉ）の化合物のプロテインキナーゼＣに対する阻害作用が証明された。酵素であるプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）は、ラットの脳から精製した。その活性は、ＰＫＣ「偽基質」配列（２５位のアラニンがセリンにより置換されたＰＫＣ配列の１９〜３１位のアミノ酸）から誘導される合成ペプチドへの、³²Ｐにより標識されたリン酸塩の取り込みにより決定した。２００μｌの反応バッチは、以下の成分を含む：５０mM ＴｒｉｓＨＣｌ、pH７．５、５mMＭｇＣｌ₂ 、１mMＤＴＴ、４μM遊離Ｃａ²⁺、１０μMＡＴＰ、ホスファチジルセリン１μｇ、１，２−ジオレイン０．２μｇ、及びペプチド基質０．３μｇ。バッチを４分間３０℃で予備保温し、ＰＫＣ５nMを添加して、反応を開始させた。３０℃で５分間保温した後、０．７３％Ｈ₃ＰＯ₄により反応を終了させ、試料をニトロセルロースろ紙（孔径０．１μm）によりろ過した。リン酸塩の取り込みは、シンチレーションカウンターによるチェレンコフ計数により求めた。以下の表１には、実施例選択のためのこの試験により得られた結果を示す。ミオシンＬ鎖キナーゼなどのその他のキナーゼに関するこれらの化合物の選択性は、幾つかの実施例に基づき、試験した。これらの値は、以下の表２に示す。表１ペプチド基質［Ｓｅｒ²⁵］ＰＫＣ（１９−３１）によるＰＫＣの酵素試験実施例阻害ＩＣ₅₀（nM） 1 14 1a 6.3 1b 23 2 28 2a 25 2b 220 2c ＞100 2d ＞1000 2e ＞1000 2f 330 3 61 4 36 4a 18 5 580 7 230 7a ＞100 7b ＞100 7c 200 7d ＞1000 7e 340 7f 570 8 38 9 190 10 9.6 10a 53 表２ペプチド基質［Ｓｅｒ²⁵］ＰＫＣ（１９−３１）及びミオシンＬ鎖キナーゼによるＰＫＣの酵素試験プロテインキナーゼの阻害実施例ＩＣ₅₀（nM）ＩＣ₅₀ＭＬＣキナーゼ／ＰＫＣＭＬＣキナーゼＩＣ₅₀Ｃキナーゼ比 1 14 4600 328 1a 6.3 1900 302 1b 23 2400 104 A 130 1300 10 Ａ：３−［１−（３−アミノプロピル）−３−インドリル］−４−（１−メチル −３−インドリル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（EP 0328026）以下の実施例は、本発明を説明する目的で示す。実施例１２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−Ｌ− セリルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド。２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（Ｎ−ＦＭＯＣ−セリル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］− マレインイミド１００mg（０．２mmol）を、ジクロロメタン５mlに溶解し、ピペジリン１mlと混合し、周囲温度で１時間攪拌した。溶媒を真空中で留去し、残渣をジイソプロピルエーテル１０mlに取り、激しく攪拌した。固体残渣を分離し、再びジエチルエーテルと攪拌し、所望の生成物１５mg（理論値の２１％）を固体の赤色物質の形で分離した；融点１３６〜１４０℃；ＲＦ＝０．１１（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。前駆体として用いた２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］− ３−［１−［３−（Ｎ−ＦＭＯＣ−Ｌ−セリル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミドは、以下の方法により調製した。ジクロロメタン１ml中、２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（Ｎ−ＦＭＯＣ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリル）− アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド２００mg（０．２mmol）をトリフルオロ酢酸５mlと周囲温度で混合し、３時間攪拌した。反応混合物を、ジクロロメタン５０mlで希釈し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液で中和し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を真空中で留去した後、残渣をジエチルエーテルにより沈殿させた。所望の生成物２１０mg（理論値の１００％）を単離した；融点１３３−１３５℃。ＲＦ＝０．３９（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％)。出発物質として使用した２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（Ｎ−ＦＭＯＣ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリル）− アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミドは、以下の方法により調製した。２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−アミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド１００mg（０．３mmol）を酢酸エチル５mlに溶解し、Ｎ−ＦＭＯＣ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルセリンペンタフルオロフェニルエステル１３８mg（０．３mmol）及び１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール２０mgと混合し、周囲温度で３時間攪拌した。反応混合物を、酢酸エチル５０mlにより希釈し、有機相を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、真空中で溶媒を留去した。残渣を酢酸エチル１０mlに取り、それにより生成物の一部（１２０mg）を純品の形で沈殿させた。母液をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル＝５０：５０％）により分離し、更に生成物６０mgを単離した（収量：１８０mg＝理論値の９４．２％）；ＲＦ＝０．７１（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。以下の化合物を、実施例１に記載した方法と同様の方法で得た。１ａ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−Ｌ−アラニルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；融点９５−１０３℃；ＲＦ＝０．１２（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）；１ｂ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−β−アラニルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；融点１１８−１２７℃；ＲＦ＝０．１９（クロロホルム／メタノール／アンモニア濃縮溶液＝２５０：５０：８）。実施例２２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−Ｄ− アラニルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−Ｎ −ＢＯＣ−Ｄ−アラニルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド１１５mg（０．２mmol）を、ジクロロメタン５mlに溶解し、トリフルオロ酢酸３mlと混合し、周囲温度で６時間攪拌した。反応溶液をジクロロメタン５０mlにより希釈し、炭酸水素ナトリウム溶液により中和し、無水硫酸ナトリウムにより乾燥した。真空中で溶媒を留去した後、分取用薄層プレート（シリカゲル、ジクロロメタン／アンモニア飽和メタノール＝９０：１０％）により分離した。前駆体として使用した２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］ −３−［１−（３−Ｎ−ＢＯＣ−Ｄ−アラニルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミドは、以下のように調製した。２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−アミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド８０mg（０．２mmol）を、酢酸エチル２ml及びジメチルホルムアミド１mlに溶解し、Ｎ−ＢＯＣ−Ｄ−アラニン−Ｏ−スクシンイミジルエステル５８mg（０．２mmol）と混合した。反応混合物を、周囲温度で１８時間攪拌し、酢酸エチル５０mlにより希釈した。有機層を水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、溶媒を真空中で留去した。残渣（１１５mg）は、更に精製せずに、次の段階で使用した。以下の化合物を、実施例２に記載した方法と同様の方法で得た。２ａ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（４−Ｌ−アラニルアミノブチリル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；融点９０−１０２℃；ＲＦ＝０．１５（ジクロロメタン／アンモニア飽和メタノール＝９０：１０％）。２ｂ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（４−Ｌ−アルギニルアミノブチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；融点１５８−１７２℃；ＲＦ＝０．４２（クロロホルム／メタノール／濃縮アンモニア溶液＝２５０：５０：８）。２ｃ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（５−Ｌ−アラニルアミノペンチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；融点９６−１０６℃；ＲＦ＝０．１２（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。２ｄ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（９−Ｌ−アラニルアミノノニル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；融点９０−９５℃；ＲＦ＝０．１２（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。２ｅ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（９−Ｌ−セリルアミノノニル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；融点９５−９７℃；ＲＦ＝０．２４（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。２ｆ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（９−Ｌ−アラニルアミノオクチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；融点８０−９１℃；ＲＦ＝０．１６（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。２ｇ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（９−Ｌ−セリルアミノオクチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；融点８６−９４℃；ＲＦ＝０．７２（クロロホルム／メタノール／濃縮アンモニア溶液＝２５０：５０：８）。実施例３２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（５ −Ｌ−セリルアミノペンタノイル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３ −イル］−マレインイミド２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−［５−（Ｎ−ＦＭＯＣ−Ｌ−セリル）−アミノペンタノイル］−アミノプロピル］ −１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド４０mg（０．０５mmol）を無水テトラヒドロフラン４mlに溶解し、ジエチルアミン４０mg（０．５mmol）と混合し、周囲温度で１８時間攪拌した。その後、溶媒を真空中で留去し、残渣を分取用薄層（thick layer chromatography）クロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン／アンモニア飽和メタノール＝９０：１０％）により分離した。ＲＦ値が０．５２の分画を分離し、生成物を抽出した。真空中で溶媒を留去した後、所望の生成物１５mg（理論値の５１％）を単離した；融点１４５−１７５ ℃。前駆体として使用した２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］ −３−［１−［３−［５−（Ｎ−ＦＭＯＣ−Ｌ−セリル）−アミノペンタノイル］−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミドは、以下の方法により調製した。２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−［５−（Ｎ−ＦＭＯＣ−Ｏ−ｔｅｒｔブチル−Ｌ−セリル）−アミノペンタノイル］−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド１３mg （０．０１５mmol）を、ジクロロメタン１mlに溶解し、トリフルオロ酢酸４mlの存在下で２日間反応させた。反応混合物をジクロロメタン５０mlにより希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液により中和し、有機層を無水硫酸ナトリウムにより乾燥した。溶媒を真空中で留去した後、残渣をジエチルエーテル／ｎ−ペンタンと攪拌し、吸引ろ過し、乾燥した。所望の生成物１０mg（理論値の８３％）を得た。前駆体として使用した２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］ −３−［１−［３−［５−（Ｎ−ＦＭＯＣ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリル）−アミノペンタノイル］−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］ −マレインイミドは、２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（４ −アミノペンタノイル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］− マレインイミドから、実施例１と同様に調製した；収量は、理論値の２９％。前駆体として使用した２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］ −３−［１−［３−（４−アミノペンタノイル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミドは、２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（４Ｎ−ＦＭＯＣ−アミノペンタノイル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミドから、実施例１と同様にＦＭＯＣ基を切断することによって、得た；収量は、理論値の６９％。前駆体として使用した２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］ −３−［１−［３−（４Ｎ−ＦＭＯＣ−アミノペンタノイル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］マレインイミドを、２−［（１−メチル）− １Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−アミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミドと５Ｎ−ＦＭＯＣ−アミノ吉草酸ペンタフルオロフェニルエステルとの反応により、実施例１と同様にして得た；ＲＦ＝０．５４（ジクロロメタン／アンモニア飽和メタノール＝９０：１０％）。実施例４２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（Ｌ −アラニルグリシル）−アミノプロピル］− １Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−アラニルセリル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３ −イル］−マレインイミド９５mg（０．１５mmo1）を、ジクロロメタン４mlに溶解し、トリフルオロ酢酸１７５mgの添加後、周囲温度で２４時間攪拌した。反応混合物をジクロロメタン５０m1により希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液により中和した。有機層を、無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、溶媒を真空中で留去した。残渣を薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン／アンモニア飽和メタノール＝９０：１０％）により分離した。ＲＦ値が０．３７の分画を分離し、粗生成物をそれから抽出し、真空中で溶媒を留去した後、所望の生成物１６mg（理論値の２０％）を得た；融点１２６−１３８℃。前駆体として使用した２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−アラニルセリル）−アミノプロピル］ −１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミドを、以下の方法により得た。２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−アミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド２００mg（０．５mmol）、Ｎ−ＢＯＣ−アラニルグリシン１８５mg（０．５mmol）及びジシクロヘキシルカルボジイミド１５５mg（０．７５mmo1）を、無水テトラヒドロフラン３ml及びジメチルホルムアミド２mlからなる溶媒に連続して溶解し、周囲温度で６時間、互いに反応させた。反応混合物を水３００m1に注ぎ、有機成分をジクロロメタンにより抽出し、有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムにより乾燥した。真空中で溶媒を留去した後、残渣を、分取用薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）により分離した。ＲＦ値が０．４１である分画を分離し、生成物を抽出し、真空中で溶媒を留去した後、赤色の樹脂の形で単離した。実施例４に記載した方法と同様の方法で、以下の化合物を得た：４ａ）２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３ −（Ｌ−アラニル−β−アラニル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３ −イル］−マレインイミド；融点１０３−１１２℃；ＲＦ＝０．３６（クロロホルム／メタノール／濃縮アンモニア溶液＝２５０：５０：８）。実施例５３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ−アラニン３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル）−プロピオニル−Ｌ−アラニンメチルエステルを、ジオキサン４m1及び水１mlの混合物中に溶解し、水酸化リチウム３６mg（１．５mmo1）と混合し、周囲温度で１８時間攪拌した。溶媒をその後、真空中で留去し、残渣を酢酸エチル３０m1に取り、１Ｎ塩酸で洗浄し、無水硫酸ナトリウムにより乾燥した。溶媒を真空中で留去し、残渣を分取用薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン／アンモニア飽和メタノール＝９０：１０％）により分離した。生成物を、最初の極性分画と共に分離し、抽出し、溶媒を除去し、ジクロロメタン及びジイソプロピルエーテル（１：１）の混合物と共に攪拌した。所望の生成物６５mg（理論値の６７％）を得た；融点２４０−２５５℃；ＲＦ：０．０６（クロロホルム／メタノール／濃縮アンモニア溶液＝２５０：５０：８）。実施例６３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ−アラニンメチルエステル３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオン酸２７２mg（０．６５mmo1）を無水テトラヒドロフラン３mlに溶解し、ジシクロヘキシルカルボジイミド１４５mg（０．７Ommo1）、並びに無水テトラヒドロフラン５mlに溶解した塩酸アラニンエチルエステル９Omg（０．８mmol）及びトリエチルアミン８５mgの混合物と混合した。反応混合物を周囲温度で２４時間攪拌し、次に溶媒を真空中で留去し、残渣を酢酸エチル１００m1に取り、有機層を水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、真空中で溶媒を留去した後、得られた粗生成物を、分取用薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）により分離した。ＲＦ値が０．３１の分画を分離し、生成物を抽出し、真空中で溶媒を除去した後、所望の生成物１３０mg（理論値の４０％）を単離した；融点１４２−１４９℃。前駆体として使用した３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル） −１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオン酸は、以下の方法により調製した。３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−フラン−２，５−ジオン−３−イル］−プロピオン酸２１０mg（０．５mmo1）を、ジメチルホルムアミド２mlに溶解し、水酸化アンモニウムの濃縮溶液４mlと混合し、沸騰するまで加熱して６時間維持した。反応混合物を放置して冷却させ、水２００m1中に注ぎ、酢酸エチルにより抽出を行って、生成物を得た。有機層を水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、真空中で溶媒を除去した。生成物を、理論値の８２％の収量で単離した；融点２４４−２５３℃。前駆体として使用した３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル） −フラン−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオン酸は、以下の方法により調製した。２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（２−シアノエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド０．５ｇ（１．２mmol）を１０％水酸化カリウム水溶液中、還流しながら３時間加熱した。冷却した反応溶液を酢酸により酸性化し、得られた赤色沈殿物を吸引ろ過し、中性で洗浄し、メタノール及び水の混合物中で攪拌した。乾燥後、所望の生成物０．４ｇ（理論値の８０％）を、黄褐色の粉末の形で単離した。固相材料としてdu Pont社のRAPIDAMIDE樹脂を用いたRAMPS（商品名）合成装置により、固相上で以下の合成を行った。実施例７３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ−アラニルグリシル−Ｌ−リジンアミド樹脂０．１mmolを、指示通りに活性化し、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾールの存在下、酢酸ジメチルアミド２．５m1中ＦＭＯＣ−Ｌ−アルギニン（Ｐｍｃ）−ＯＰｆｐ０．４mmolと１時間かけて反応させた。過剰の試薬は洗い落とし、ＦＭＯＣ保護基をピペジリンにより除去し、樹脂を再び酢酸ジメチルアミドで洗浄した。その後、同じ方法により連続して、グリシン、Ｌ−アラニン及び２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（２−ヒドロキシカルボニルエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミドを縮合した。その後、樹脂を、フェノール３００mgとトリフルオロ酢酸２mlとの混合物により１８時間処理することによって、生成物を分離した。暗赤色の反応溶液を固体物質とろ別し、真空中で溶媒を除去し、ジエチルエーテルによる処理により粗生成物を沈殿させた。固体の沈殿物を吸引ろ過し、酢酸エチルと共に攪拌し、再び吸引ろ過し、その後ジエチルエーテルにより洗浄した。所望の生成物１５mgを分離した；融点１５８−１６０℃；ＲＦ＝０．５５（ブタノール／ピリジン／酢酸／水＝３０：２０：６：２４）。実施例７と同様に、以下の化合物を得た。７ａ）３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール −２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ− リシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−アルギニル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−アラニンアミド；融点１９３−１９５℃；ＲＦ＝０．４８（ブタノール／ピリジン／酢酸／水＝３０：２０：６：２４）。７ｂ）３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール −２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニルグリシルグリシル−Ｌ−アラニンアミド；融点１２５−１３０℃；ＲＦ＝０．７４（プロパン−２−オール／酢酸／水＝４：１：１）。７ｃ）３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール −３，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニルグリシルグリシル−Ｌ−セリルアミド；融点１４２−１４６℃；ＲＦ＝０．７１（プロパン−２−オール／酢酸／水＝４：１：１）。７ｄ）３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール −２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ− セリルグリシル−Ｌ−アラニンアミド；融点１６５−１６７℃；ＲＦ＝０．７３（プロパン−２−オール／酢酸／水＝４：１：１）。７ｅ）３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール −２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１− イル］−プロピオニルグリシルグリシルグリシル−Ｌ−アラニルアミド；融点１５７−１５９℃；ＲＦ＝０．６５（プロパン−２−オール／酢酸／水＝４：１：１）。７ｆ）３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール −２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ− リシルグリシル−Ｌ−アラニルアミド；融点１４６−１４８℃；ＲＦ＝０．４７（プロパン−２−オール／酢酸／水＝４：１：１）。実施例８１２−［２−（３−Ｌ−アラニル）−アミノプロピル］−６，７，１２，１３− テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール１２−［２−（Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−アラニル）−アミノプロピル］−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール５０mg(０．１mmol）を、周囲温度においてジクロロメタン５mlに溶解し、トリフルオロ酢酸３mlと混合した。反応混合物をこの温度で３時間攪拌し、ジクロロメタン５０m1により希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液により中和し、有機層を無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、溶媒を真空中で留去し、残渣をエタノールから再結晶させた。−２０℃で放置した後、所望の生成物１５mg（理論値の３７％）を得た；融点１４１−１４４ ℃；ＲＦ＝０．２９（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。前駆体として使用した１２−［２−（Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−アラニル）−アミノプロピル］−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ−［３，４−ｃ］カルバゾールは、以下の方法により合成した。１２−［２−（３−アミノプロピル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ− １３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ−［３，４−ｃ］カルバゾール３４mg（０．１mmol）を周囲温度において攪拌しながら、酢酸エチル３ml及びジメチルホルムアミド１ml中のＮ−ＢＯＣ−Ｌ−アラニン −Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル２５mg（０．１mmol）と結合させ、３時間攪拌した。次に反応溶液を酢酸エチル５０m1により希釈し、水で２回洗浄した。無水硫酸ナトリウムにより有機相を乾燥した後、真空中で溶媒を留去し、粗生成物を更に精製せずに、次の段階に使用した；ＲＦ＝０．６２（ジクロロメタン／メタノール=９０：１０％)。前駆体として使用した１２−［２−（３−アミノプロピル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］−カルバゾールは、以下の方法により調製した。１２−（２−シアノエチル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ−［３，４−ｃ］カルバゾール２００mg(０．５mmol)を、アンモニア飽和メタノール／テトラヒドロフランの溶媒混合物（２：２）２５m1中、ラネーニッケル（ＢＫ１１１Ｗ（Ｍｏによりドーピングされている））２５０mgの存在下、５０〜６０バールの圧力、６０℃の温度で４８時間、水素添加した。その後、反応混合物をろ過し、残渣を、それぞれメタノール１０m1により３回洗浄し、ろ液から真空中で溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルから沈殿させた。所望の生成物１００mg（理論値の４９％）を単離した；ＲＦ＝０．１６（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。前駆体として使用した１２−（２−シアノエチル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾールは、以下の方法により調製した。２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（シアノエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド４．６ｇ（１１．７ mmol）、ｐ−トルエンスルホン酸水和物４．４ｇ（２３．３mmol）、及びＤＤＱ３．８ｇ（１６．７mmol）の反応混合物を、トルエン６００ml中、還流しながら２．５時間加熱した。溶媒を真空中で留去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（塩基性酸化アルミニウム、アセトン／エタノール＝９５：５％）により分離した。第二の分画により、所望の生成物５００mg（理論値の１１％）を、黄色粉末の形で単離した；ＲＦ＝０．６９（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。実施例９１２−［２−（Ｌ−アラニル−Ｌ−アルギニル）−アミノプロピル］−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−Ｃ］カルバゾール実施例４と同様に合成を行った。しかし、前駆体として１２−［２−（３−アミノープロピル）］−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−Ｃ］カルバゾール及びＢＯＣ−Ｌ−アルギニル−（Ｚ２）−ＢＯＣ−Ｌ−アラニンを使用した；融点１６４−１６６℃；ＲＦ＝０．０４（クロロホルム／メタノール／アンモニア濃縮溶液＝２５０：５０：８）。実施例１０１２−［２−（４−Ｌ−アラニル）−アミノブチル］−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール実施例９と同様に合成を行った；融点１２２−１２６℃；ＲＦ＝０．１７（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。前駆体として用いた１２−［２−（４−アミノブチル）］−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３ −ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾールは、以下の方法により調製した。１２−［２−（４−アジドブチル）］−６，７，１２，１３−テトラヒドロ− １３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール３００mg（０．７mmo1）を、テトラヒドロフラン／エタノールの溶媒混合物（１：１）４Om1中、パラジウム担持木炭（５％、無水）３００mgの存在下、５０バールの圧力、２５℃の温度において、２４時間かけて水素添加した。反応混合物をろ過し、真空中で溶媒を留去し、残渣をエタノール中で攪拌した。所望の生成物２５０mg（理論値の８９％）を単離した；ＲＦ＝０．１８（クロロホルム／メタノール／濃縮アンモニア溶液＝２５０：５０：８）。前駆体として用いた１２［２−（４−アジドブチル）］−６，７，１２，１３ −テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３− ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾールを、以下の方法により調製した。２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（４−アジドブチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド１．６ｇ（３．７mmol）、ｐ−トルエンスルホン酸水和物１．４ｇ（７．４mmol）、及びＤＤＱ１．２５ｇ（５．５mmol）の反応混合物を、トルエン５００ml中、還流しながら、３０分間加熱した。溶媒を真空中で留去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（塩基性酸化アルミニウム、アセトン／エタノール＝９５：５％）により分離した。第二の分画により、所望の生成物３５６mg（理論値の２２％）を鮮黄色の粉末の形で単離した；ＲＦ＝０．８８（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。実施例１０に記載の方法と同様の方法により、以下の化合物を得た。１０ａ）１２−［２−（５−Ｌ−アラニル）−アミノペンチル］−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５， −６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ −インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール；融点１６０−１６３℃；ＲＦ＝０．２７（ジクロロメタン／メタノール＝９０：１０％）。本発明による化合物を、以下の表３に示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/40 ＡＢＮＡＢＱＡＢＸＡＣＢＡＣＤＡＤＢＡＤＵ 9454−4ＣＡＤＹＣ０７Ｄ 487/14 7019−4ＣＣ０７Ｋ 5/062 8318−4Ｈ 5/083 5/09 5/103 7/06 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＺ，ＦＩ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＫ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，ＶＮ (72)発明者バールト，フーベルトドイツ連邦共和国、デー―79312 エンメンディンゲン、ベルトルド―ブレヒト―ヴェーク６ (72)発明者シェーヒテル，クリストフドイツ連邦共和国、デー―79108 フライブルク、ダルリヴァルト 15 (72)発明者ルドルフ，クラウスドイツ連邦共和国、デー―79279 フェルシュテッテン、リートマッテンシュトラーセ 11 (72)発明者ケルヒ，ワルタードイツ連邦共和国、デー―80333 ミュンヘン、カルルシュトラーセ 43―43／１／101 (72)発明者レク，ラインハルトドイツ連邦共和国、デー―79350 ゼクサウ、フォーゲゼンシュトラーセ 15

Claims

【特許請求の範囲】１．一般式（Ｉ）：Ａ−Ｘ−Ｙ−Ｅ_n−Ｒ⁵ （Ｉ）｛式中、Ａは、一般式（III）：（式中、Ｒ¹は、水素原子、又は炭素数１〜４のアルキル基であり、そして（− −−）は、開環しているか又は原子価結合であることができる）で示される基であり、Ｘは、単結合、又は炭素数１６までのアルキレン基であり、Ｙは、単結合、又はＮ−Ｒ²、ＣＯ、ＣＳ、ＣＨ＝ＣＨ、ＰＯ（ＯＨ）Ｏ若しくはＳＯ₂の基であり、ここで、Ｒ²は、水素原子、又は炭素数１〜４のアルキル基であり、ｎは、１〜２０であり、Ｅは、同一であるか又は異なって、一般式（IV）：又は一般式（Ｖ）：（上記式中、Ｒ²は、水素原子、又は炭素数１〜４のアルキル基であり、ここで、ｍが１である場合、Ｒ³は、水素原子であるか、又は天然α−アミノカルボン酸の一つの側鎖のいずれかであり、ｍが２〜６である場合、Ｒ³は、水素原子である）で示される基であり、そしてＲ⁵は、Ｅが一般式（IV）の基である場合、アミノ基又は基−ＯＲ⁴（ここで、Ｒ⁴ は、炭素数１〜４のアルキル基であるか、又は水素原子である）であり、そしてＥが一般式（Ｖ）の基である場合、Ｒ⁵は、水素原子である｝で示されるアミノ酸誘導体、及び薬理学的に許容しうるその塩。２．Ａが、一般式（III）のビス−インドリルマレインイミド又はインドロピロロカルバゾールであり、Ｒ¹が、メチル基であり、Ｘが、メチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、オクチレン又はノニレン基であり、Ｙが、ＮＨ又はＣＯであり、そして基−Ｅ_n−Ｒ⁵が、アラニン、アラニンメチルエステル、β−アラニン、アルギニン、セリン、グリシルアラニン、グリシルグリシルアラニン、グリシルグリシルグリシルアラニン、グリシルグリシルセリン、リシルグリシルアラニン、セリルグリシルアラニン、アラニルグリシルリシン、リシルアスパラギニルアルギニルフェニルアラニルアラニン、β−アラニルアラニン、４−アミノバレリアノイルセリン又はアラニルアルギニンである、請求の範囲第１項記載の一般式（Ｉ）のアミノ酸誘導体、並びに一般式（Ｉ）の酸性化合物と塩基との薬理学的に許容しうる塩、及び一般式（Ｉ）の塩基性化合物と酸との薬理学的に許容しうる塩。３．請求の範囲第１項記載の一般式（Ｉ）の化合物である、以下に示す化合物。２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−Ｌ− セリルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−Ｌ− アラニルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−β− アラニルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（３−Ｄ− アラニルアミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（４−Ｌ− アラニルアミノブチリル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（４−Ｌ− アルギニルアミノブチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（５−Ｌ− アラニルアミノペンチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（９−Ｌ− アラニルアミノノニル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（９−Ｌ− セリルアミノノニル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（９−Ｌ− アラニルアミノオクチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−（９−Ｌ− セリルアミノオクチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（５ −Ｌ−セリルアミノペンタノイル）−アミノプロピル）−１Ｈ−インドール−３ −イル）−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（Ｌ −アラニルグリシル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；２−［（１−メチル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−３−［１−［３−（Ｌ −アラニル−β−アラニル）−アミノプロピル］−１Ｈ−インドール−３−イル］−マレインイミド；３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ−アラニン；３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ−アラニンメチルエステル；３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ−アラニルグリシル−Ｌ−リシンアミド；３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ−リシル −Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−アルギニル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−アラニンアミド；３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニルグリシルグリシル−Ｌ−アラニンアミド；３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニルグリシルグリシル−Ｌ−セリルアミド；３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニル−Ｌ−セリルグリシル−Ｌ−アラニンアミド；３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］−プロピオニルグリシルグリシルグリシル−Ｌ−アラニルアミド；３−［３−［４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン−３−イル］−インドール−１−イル］− プロピオニル−Ｌ−リシルグリシル−Ｌ−アラニルアミド；１２−［２−（３−Ｌ−アラニル）−アミノプロピル］−６，７，１２，１３− テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール；１２−［２−（Ｌ−アラニル−Ｌ−アルギニル）−アミノプロピル］−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール；１２−［２−（４−Ｌ−アラニル）−アミノブチル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール；及び１２−［２−（５−Ｌ−アラニル）−アミノペンチル］−６，７，１２，１３− テトラヒドロ−１３−メチル−５，７−ジオキソ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール４．請求の範囲第１〜３項のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）の化合物を製造する方法であって、ａ）ｎが１である化合物については、一般式（VI）：Ａ−Ｘ−Ｙ−Ｇ（VI）（式中、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、そして−Ｙ−Ｇは、アミノ基である）で示される化合物を、一般式（VII）：（式中、Ｒ³は、上述した意味を有し、存在する可能性のある官能基は、保護基として提供されており、そしてＱは、アミノ保護基である）で示されるアミノカルボン酸と反応させ、続いて公知の方法により保護基を切断するか、又はｂ）一般式（IV）（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、ＣＯ、ＣＳ、ＣＨ＝ＣＨ、ＰＯ（ＯＨ）Ｏ又はＳＯ₂であり、そしてＧは、ヒドロキシル基又はハロゲン原子である）の化合物を、一般式（VIII）：（式中、Ｒ²及びＲ³は、上述した意味を有し、そしてＲ⁴は、メチル、エチル又はプロピル基である）で示されるアミノカルボン酸と反応させて、一般式（IX）：（式中、Ｒ²、Ｒ³及びＲ⁴は、上述した意味を有する）で示される化合物を得るか、又はｃ）一般式（VI）の化合物が、カルボン酸として存在するのであれば、一般式（VIII）の化合物との反応の目的のためには、カルボン酸を通常の条件下で、活性エステルに変換し、後に、一般式（IX）の化合物を、エステル基のアルカリによるけん化により、一般式（Ｉ）の化合物に変換するか、又はｄ）一般式（Ｉ）（ここで、Ａ、Ｘ及びＹは、上述した意味を有し、ｎ＞１の場合のＥ_nは、ペプチド基の意味を有する）の化合物のためには、一般式（Ｉ）の化合物を、公知の方法により、更なるアミノカルボン酸と反応させるか、又は、一般式（Ｉ）の化合物の合成を、メリフィールド法により固相上で実施し、この目的のためには、一般式（XI）：（式中、Ｒ²及びＲ³は、上述した意味を有する）の最初のアミノ酸を、メリフィールド樹脂上に縮合し、その後フルオロフェニルメトキシカルボニル保護基を、公知の方法により切断し、次に所望により、一般式（XI）の更なるアミノカルボン酸を縮合させ、最後の縮合の段階において、一般式（VI）（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、ＣＯ又はＣＳであり、そしてＧは、ヒドロキシル基である）の化合物を、カルボン酸活性化化合物の存在下で、メリフィールド樹脂に結合したペプチドと反応させるか、又はｅ）一般式（VI）（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、Ｎ−Ｒ² であり、そしてＧは、水素原子である）の化合物の場合には、これを、一般式（VII）のアミノカルボン酸と反応させ、その際は、一般式（VII）のアミノカルボン酸を、非プロトン性溶媒中に配置し、ペンタフロオロフェノール又はＮ−ヒドロキシスクシンイミドで、又は好ましくはジシクロヘキシルカルボジイミドでそして、ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下で、活性カルボン酸エステルに変換し、その後同じ溶媒中で、一般式（VI）の化合物と、０〜６０℃の温度で反応させるか、又はｆ）一般式（Ｉ）（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、そしてＥは、末端カルボン酸基である）の化合物は、一般式（VI）（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、ＣＯ又はＣＳのいずれかであり、そしてＧは、ヒドロキシル基である）の化合物を、適切な溶媒中、ペンタフルオロフェノール又はＮ−ヒドロキシスクシンイミドで、又は好ましくはジシクロヘキシルカルボジイミドでそしてヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下で、活性カルボン酸エステルに変換し、その後、同一溶媒中で、一般式（VIII）の化合物と、０〜６０℃の温度において反応させるか、又はｇ）一般式（Ｉ）（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、Ｙは、カルボニル基であり、そしてｎ＞１の場合のＥ_nは、ペプチド基である）の化合物のためには、一般式（XI）のアミノカルボン酸（ここで、Ｒ²及びＲ³は、上述した意味を有する）を、非プロトン性溶媒中、ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下、メリフィールド樹脂に縮合させ、過剰の試薬を当の溶媒により洗い落とし、塩基性条件下でフルオレニルメトキシカルボニル保護基を切断し、再び残留試薬を洗い落とし、この方法により、更なるアミノ酸を縮合させ、そして最終部分化合物として、一般式（VI）の化合物（ここで、Ａ及びＸは、上述した意味を有し、ＹはＣＯであり、そしてＧは、ヒドロキシル基である）を、同じ方法により縮合し、そしてメリフィールド樹脂を数時間、周囲温度において強酸により処理することによって、化合物を分離し、得られる溶液を分離し、溶媒の除去後、生成物をジエチルエーテルから固体の形で単離することからなる方法。５．請求の範囲第１〜３項のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）の化合物を、少なくとも一つ、及び通例の補助剤及び添加剤を含有する医薬組成物。６．ガン、ウイルス性疾患、心及び血管疾患、血栓症、心臓拍動障害、アテローム性動脈硬化症、気管支肺疾患、中枢神経系の変性疾患、炎症性疾患、及び免疫系疾患、並びに乾癬の治療及び／又は予防のため、並びに免疫抑制剤としての使用のための、医薬組成物調製のための請求の範囲第１〜３項及び第６項のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）の化合物の用途。７．ガン、ウイルス性疾患、心及び血管疾患、血栓症、心臓拍動障害、アテローム性動脈硬化症、気管支肺疾患、中枢神経系の変性疾患、炎症性疾患、及び免疫系疾患並びに乾癬の治療及び／又は予防のため、並びに免疫抑制剤として使用するための請求の範囲第１〜３項のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）の化合物の用途。