JPH08504769A

JPH08504769A - 因子Ｘａの新規インヒビター

Info

Publication number: JPH08504769A
Application number: JP6514525A
Authority: JP
Inventors: ブランク、テレンス・ケビン; ウェッブ、トマス・ロイ; リプカ、ウィリアム・チャールズ
Original assignee: コルバス・インターナショナル、インコーポレイテッド
Priority date: 1992-12-15
Filing date: 1993-12-15
Publication date: 1996-05-21
Also published as: US5739112A; CA2151044A1; EP0675899B1; EP0675899A1; US5883077A; WO1994013693A1; ATE177752T1; DE69324041D1; EP0675899A4

Abstract

(57)【要約】哺乳類の因子Ｘaに対する活性を有する新規な化合物、該化合物の塩およびこれらから調製される組成物が開示される。これらの新規化合物には、哺乳類の因子Ｘaのインヒビターとしての実質的な効能と特異性を有するペプチドアルデヒド類似体が含まれる。この種の化合物は生体外における因子Ｘaのインヒビターとして有用なだけでなく、哺乳類の異常な血栓症によって特徴づけられる疾患の予防と処置のための治療剤としても有用である。これらの新規化合物の製造に有用な中間体も提供される。

Description

【発明の詳細な説明】因子Xaの新規インヒビター関連出願この出願は、１９８２年１２月１５日付で出願された米国特許出願第０７／９９１，２０４号「因子Xaの新規インヒビター」の部分継続出願であり、該米国特許出願の明細書および図面もこの出願の一部を成すものである。発明の分野一つの観点によれば、本発明は、哺乳類の血液凝固の強力で特異的なインヒビターである化合物、薬学的に許容され得るこれらの塩および薬学的に許容され得るこれらの組成物に関する。クロット形成の阻害は、本発明によって開示されるインヒビターによる血液凝固酵素（因子Xa）の直接的な阻害に起因する。別の観点によれば、本発明は、血液凝固プロセスの障害によって特徴づけられる疾患の治療剤として種々の態様で該インヒビターを使用する方法に関する。さらに別の観点によれば、本発明は該インヒビターの製造に有用な中間体に関する。発明の背景と導入正常な止血は、クロットの形成過程（血液凝固）とクロットの溶解過程（線維素溶解)の間の複雑なバランスの結果からもたらされる。血球、特異的血漿タンパク質および血管表面の間の複雑な相互作用によって、けがや出血がおこらない限り、血液の流動性は保持される。多くの重要な疾患は異常な止血に関連している。冠状動脈の血管系に関しては、確立されたアテローム性動脈硬化性プラクの破裂に起因する異常な血栓形成は急性心筋梗塞および不安定アンギナの主要な原因である。血栓融解治療または経皮的な経内腔的血管形成術による閉塞性の冠状動脈血栓の治療には、緊急の消散を必要とする冒された血管の急性血栓症的再閉鎖を伴う場合が多い。動脈血管系に関しては、四肢の下部または腹部領域において大手術を受ける患者の多くは、冒された四肢への血流の低減と肺塞栓症へ導く疾病素質をもたらす静脈血管系に形成される血栓で患っている。散在性の血管内凝固障害は、いずれの血管系においても、敗血性ショック、特定のウイルス性感染および癌で患っているときにみられ、また、該凝固障害は、凝固因子の急激な消費および広範囲に及ぶ器官不全症へ導く血管系内での生命の危険をもたらす血栓の形成によって特徴づけられる。血液凝固は、血漿中のセリンプロテアーゼの数種の特異的酵素前駆体がタンパク質限定加水分解によって活性化される一連の増幅反応の完結である。この一連の反応は、初期の止血栓の安定化に必要な不溶性フィブリンマトリックスの形成をもたらす。活性化反応の相互作用と伝搬は、凝固の外因性および内因性経路を経ておこなわれる［マッキー（Mackie，Ｉ，Ｊ．）およびビュル（Bul1，Ｈ．Ａ．）、「正常な止血とその調節」、ブラッド・レヴューズ、第３巻、第２３７頁〜第２５０頁（１９８９年）参照］。これらの経路は、酵素原（因子Ｘ）から形成されるセリンプロテアーゼである因子Xaの形成においては、高度に相互依存的で収束的である。因子Xaは、血液凝固多段階の最後から二番目の段階であって、セリンプロテアーゼトロンビンの形成段階に触媒作用をもたらす。トロンビンは血漿中の可溶性フィブリノゲンを切断して不溶性フィブリンを形成させる。因子Ｘの生化学的特性と生理学的特性は下記の文献に概説されている：スタインベルグ（Steinberg，Ｍ）およびネマーソン（Nemerson，Ｙ．）、「因子Ｘの活性化」、止血と血栓症、第１版、第９１頁〜第１１１頁（コルマン（ Colman，Ｒ．）ら編、１９８２年）、およびマン（Mann，Ｋ．Ｇ．）ら、「ビタミンＫ依存性酵素複合体の表面依存性反応」、ブラッド、第７６巻、第１頁〜第１６頁（１９９０年）。ヒトの因子Ｘは１７０nMの濃度で血漿中を循環する。この酵素は、分子サイズが５９,０００（沈降平衡遠心分離法による測定値）または６７,０００（ドデシル硫酸ナトリウム電気泳動法による測定値）の４４２個のアミノ酸残基を有する二鎖糖タンパク質である。これに関しては下記の文献に記載されている：ディスシピオ（DiScipio）ら、「ヒトのプロトロンビン、因子IX（クリスマス因子）、因子Ｘ（スチュアート因子）およびタンパク質Ｓの比較」、バイオケミストリー、第１６巻、第６９８頁〜第７０６頁、およびレイフス（Leyfus）ら、「ヒト因子ＸをコードするcＤＮＡの特性」、Proc．N atl．Acad．Sci．ＵＳＡ、第８２巻、第３６９９頁（１９８４年）。ヒト因子Ｘは、単一のジスルフィド結合によって連結された１３９個のアミノ酸残基（Mr＝１６．２００）を含む軽鎖サブユニットおよび３０３個のアミノ酸残基（Mr=４２,０００）を含む重鎖サブユニットを有する。ヒト因子Ｘの軽鎖は、γ−カルボキシ−グルタミン酸に翻訳後修飾された１１個のグルタミン酸残基およびβ−ヒドロキシアスパラギン酸に修飾された１個のアスパラギン酸残基を有する。因子Ｘの重鎖は、分子の全てのクリコシル化残基（全体の１５％）と触媒領域を有する。酵素前駆体である因子Ｘのその酵素的に活性な形態（因子Xa）へのタンパク分解活性は、内因性または外因性の凝固経路のいずれかによっておこなわれる。内因性経路は本質的なものと呼ばれるが、その理由は、凝固に必要な全ての要因が血中に存在するからである［サイトウ、「正常な止血機構］、止血障害、第２７頁〜第２９頁、グラン・アンド・ストラットン社発行（ラトノフおよびホルベス編、１９８４年）参照］。この経路には、酵素前駆体セリンプロトロテアーゼ（因子IXおよびXI）および非酵素的補因子（因子VIII）が含まれる、内因性経路の開始によって、因子XIからXIaへの活性化がもたらされる。因子XIaは、因子IXから因子XIaへの活性化に触媒作用を及ぼす。因子Xlaは、適当なリン脂質表面上の活性形態の因子VIIIと共にテナーズ（tenase）複合体の形成をもたらす。この複合体は、酵素前駆体である因子Ｘからセリンプロテアーゼ（因子Xa）の形成に触媒作用を及ぼし、該因子Xaは次いでクロットを形成させる。外因性経路は非本質的なものと呼ばれるが、その理由は、因子VIIに結合してその活性化を開始する組織因子が血液外からもたらされるからである（サイトウの前記文献参照）。この経路に含まれる主要な成分は酵素前駆体セリンプロテアーゼ（因子VII）および膜結合タンパク質（組織因子）である。後者は、この酵素に対して不可欠な非酵素的補因子として作用する。この経路の開始は、痕跡量の活性化因子VII（因子VIIa）による酵素前駆体因子VIIの活性化によったもたらされる自触媒現象と考えられている。この場合、両方の因子は、血管の損傷部位の膜表面上に新たに出現する組織因子と結合する。因子VIIa／組織因子複合体は、酵素前駆体（因子Ｘ）からのセリンプロテアーゼ（因子Xa）の形成に対して直接的に触媒作用を及ぼす。損傷組織からの出血は、外因性経路による血液凝固を開始させる。酵素前駆体（因子Ｘ）からその触媒的に活性な形態（因子Xa）へのタンパク分解活性は、重鎖サブユニットのアミノ末端から５２番目のアミノ酸活性ペプチドを遊離させる。内因性の活性化反応は、非酵素的補因子（因子VIIIa）との高分子複合体中の因子IXaによる触媒作用を受ける。外因性経路を経由する因子Xaの形成は、因子VIIaと組織因子との触媒性複合体による触媒作用を受ける。両方の反応は、適当なリン脂質表面上において、カルシウムイオンの存在下で起こらなければならない。因子Ｘの内因性または外因性の活性化によって形成される活性生成物はα−因子Xaである。自触媒現象と考えられている第二のタンパク分解開裂は、重鎖のカルボキシ末端から１４番目のアミノ酸ペプチドの遊離を伴うβ− 因子Xaの形成をもたらす。いずれの形態の活性分子も、血漿中での凝固促進能またはペプチジル色素原基質の加水分解能の点で同等の触媒活性を有する。トロンビンの形成は、触媒性のプロトロンビナーゼ複合体のアセンブリーに従って因子Xaの触媒作用を受ける［マン、「ビタミンＫ依存性酵素複合体の表面依存性反応」、Blood、第７６巻、第１頁〜第１６頁（１９９０年）参照］。この複合体は因子Xa、非酵素的補因子Vaおよび基質プロトロンビンから成り、これらの成分は適当なリン脂質表面上で合体する。高分子複合体が効率的な触媒作用に必要な要件を備えることにより、自然の抗凝固機構、例えば、ヘパリン−アンチトロンビンIIIで媒介される阻害等から因子Xaは保護される［タンテとローゼンベルグ、「ヘパリン−アンチトロンビン複合体による因子Xaの中和からの保護」、Ｊ．Clin．Invest．、第７１巻、第１３８３頁〜第１３９１頁（１９８３年）参照］。さらに、プロトロンビナーゼ複合体中の因子Xaのキレート化合物形成は、抗凝固効果を引き出すためにアンチトロンビンIIIも必要とする外因性ヘパリン治療効果による阻害に対する耐性を該複合体にもたらす。因子Xaの天然に存在するポリペプチドインヒビターとしては、優れた特異性と効力を有するものがいくつか報告されている。ガシック（Gasic）による米国特許第４,５８８,５８７号明細書には、医用ヒルの唾液の抗凝血活性についての記載がある。ヒルの唾液の主成分であるアンチスタシンは、例えば、下記の文献に記載されているように、因子Xaを阻害すると考えられていた：ツスジンスキー（Tuszynski，Ｇ．Ｐ．）ら、「転移と凝固のインヒビターとしてのアンチスタシンの分離と特性」、Ｊ．Bio1．Chem．、第２６２巻、第９７１８頁〜第９７２３頁（１９８７年）、ナット（Nutt）ら、「因子Xaの強力なインヒビターとしてのアンチスタシンの反復内部構造を有するアミノ酸配列」、Ｊ．Biol．Chem．、第６３巻、第１０１６２頁〜第１０１６７頁（１９８８年）、ダンウィデー（Dunwiddie，Ｃ．）ら、「因子Xaに対するヒル由来のインヒビターであるアンチスタシン、酵素阻害の速度論的解析および反応部位の同定」、Ｊ．Biol．Chem．、第２６４頁、第１６６９４頁〜第１６６９９頁（１９８９年）、およびハン（Han，Ｊ．Ｈ．）ら、「抗凝血性と抗転移性を有するヒル由来タンパク質であるアンチスタシンをコードするcＤＮＡのクローニングと発現」、Gene、第７５巻、第４７頁〜第５７頁（１９８９年）。因子Xaに対して選択的で強力なインヒビターとして報告されているポリペプチドは、例えば、下記の文献に記載されているように、最初はヒメダニ（Ornithod oros moubata）の全身抽出物から分離された：ワックスマン（Waxman，Ｌ．）ら、「凝血因子Xaの新規インヒビターであるマダニ抗凝血性ペプチド（ＴＡＰ）」、Scince、第２４８巻、第５９３頁〜第５９６頁（１９９０年）、ネーパー（Neeper，Ｍ．Ｐ．）ら、「凝血因子Xaの高選択性インヒビターであるマダニ抗凝固性組換ペプチドの特性」、Ｊ．Bio1．Chem．、第２６５巻、第１７７４６頁〜第１７７５２頁（１９９０年）、ジョーダン（Jordan，Ｓ．Ｐ．）ら、「マダニ抗凝血性ペプチド；凝血性因子 Xaを用いる組換インヒビターの速度論的解析」、 Biochemistry、第２９巻、第１１０９５頁〜第１１１００頁（１９９０年）、およびブラスク（V1asuk）ら、米国特許第５,２３９,０５８号（１９９３年８月２４日）明細書。血漿には、因子Xaおよびリポタンパク質会合凝固インヒビター（ＬＡＣＩ）と呼ばれている因子VIIa−組織因子複合体に対して共通のインヒビターが含まれていることが報告されている。ＬＡＣＴは２７６個のアミノ酸から成っており、因子Xaのタンパク質分解活性を直接的に阻害し、また、因子VIIa−組織因子複合体に対しては、因子Xaに依存する条件下で阻害するといわれている［ギラード（Gi rard，Ｔ．Ｊ．）ら、Nature、第３３８巻、第５１８頁〜第５２０頁（１９８９年）参照］。因子Xaに対するその他のポリペプチドは、例えば下記の文献に記載されている：ヤコブス（Jacobs，Ｊ．Ｗ．）ら、「黒バエの唾液腺からの凝固因子Xaのインヒビターの分離と特性」、Thromb．Haemostas．、第６４巻、第２３５頁〜第２３８頁（１９９０年）、コンドラ（Condra，Ｃ．）ら、「凝固因子Xaの強力なインヒビターのブラジルヒルからの分離および構造特性」、Thromb．Haemost．、第６１巻、第４３７頁〜第４４１頁（１９８９年）、ブランカンプ（Brankamp，Ｒ．Ｇ．）ら、「ギランテン；南アメリカヒルからの抗凝固剤および抗転移性タンパク質」、Ｊ．Lab．Clin．Med．、第１１５巻、第８９頁〜第９７頁（１９９０年）、ブランケンシップ（Blankenship，Ｄ．Ｔ．）ら、「ギランテンのアミノ酸配列；南アメリカヒルの抗凝固−抗転移性成分」、Biochem．Biophys．Res．Comm un．、第１６６巻、第１３８４頁〜第１３８９頁（１９９０年）、およびリグビ（Rigbi，Ｍ．）ら、「ウシ因子Xa阻害性因子および該阻害性因子を含有する薬剤組成物」、ヨーロッパ特許出願公報第３５２,９０３号（１９９０年）。因子Xaに対する前記のポリペプチドインヒビターのほかに、下記の文献には該酵素の低分子インヒビターが報告されている：カム（kam）ら、「トリプシンに対するイソクマリンインヒビターおよび凝血セリンプロテアーゼに基づく機構；新規な抗凝血剤」、Biockemistry、第２７巻、第２５４７頁〜第２５５７頁（１９８８年）、チドウェル（Tidwell，Ｒ．Ｒ．）ら、「合成プロテアーゼインヒビターを用いる抗凝固法。トロンビンインヒビターに対するXaインヒビター」、Thromb．Re s．、第１９巻、第３３９頁〜第３４９頁（１９８０年）、ヒトミ（Hitomi，Ｙ．）ら、「凝固系に対する新規な合成プロテアーゼインヒビター（ＦＵＴ−１７５）の阻害効果」、Haemostasis、第１５巻、第１６４頁〜第１６８頁（１９８５年）、ターナー（Turner，Ａ．Ｄ．）ら、「因子IXaおよびXa並びにトロンビンに対する不可逆的インヒビターとしてのp−アミジノエステル」、Biochemistry、第２５巻、第４９２９頁〜第４９３５頁（１９８６年）、およびスツルツェベヒャー（Sturzbecher，Ｊ．）ら、「ウシ因子Xaおよびトロンビンに対する合成インヒビター。該インヒビターの抗凝固効率の比較」、Thromb． Res．、第５４巻、第２４５頁〜第２５２頁（１９８９年）。因子Xaに対する上記のポリペプチドインヒビターとは異なり、既知の低分子インヒビターは他のセリンプロテアーゼの阻害に関しては比較的低い選択性を示すものとされている。例えば、６−アミジノ−２−ナフチル−ｐ−グアニジノベンゾエートジメタンスルホネート（ＦＵＴ−１７５）のヒト因子Xaおよびヒトトロンビンを同程度に阻害し、阻害定数はそれぞれ４．１μＭおよび１．３μＭである（ヒトミらの前記文献、第１６６頁参照）。ｐ−アミジノフェニルα−メチルシンナメートは、ヒト因子Xa、ヒト因子XIaおよびヒトトロンビンを不可逆的に不活性化させ、不活性化の２次反応速度定数はそれそれ９．９×１０⁴、１６× １０⁴および１６×１０⁴Ｍ^-1min^-1である（ターナーらの前記文献、第４９３２頁参照）。発明の概要一つの観点によれば、本発明は、因子Xaの触媒活性を選択的に阻害するが、因子XIa、トロンビンまたは組織プラスミノゲン活性化因子（tＰＡ）の活性は評価し得る程度には阻害しない化合物に関する。この種の化合物は、因子XIa、トロンビンおよびtＰＡに対して１０％以下の選択百分率を示すことによって特徴づけられる。選択百分率は、因子Xaに対するＩＣ₅₀を、因子XIa、トロンビンまたはtＰＡに対するＩＣ₅₀で割った値を１００倍することによって定義される。ＩＣ₅₀は、基質の回転速度を５０％阻害するのに必要な試験化合物の濃度である。これらの化合物は比較的低分子量のペプチド類似体、即ち、約１０００よりも小さな分子量を有するペプチドアルデヒドである。これらの化合物は、因子Xaは選択的に阻害するが、因子XIa、トロンビンまたは組織プラスミノゲン活性化因子に対しては、仮に阻害したとしても弱く阻害するに過ぎない生体外診断剤、または特定の血栓症疾患の治療用薬剤として有用である。本発明による新規化合物には次式（Ｉ）および（Ｉ'）で表される化合物が包含される：式中、Ｒ₁は、−（ＣＨ₂）₃−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ₂並びに該基のモノ− およびジ−アルキル置換誘導基（各々のアルキル基は独立して選択され、その炭素原子数は約１〜約７である）から成る群から選択される基を示し、Ｒ₂は、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約６〜約１５のアラルキル基から成る群から選択される基を示し、Ｒ₃は、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約６〜約１４のアリール基、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約７〜約１５のアラルキル基、および炭素原子数約１〜約７のアルキル基から成る群から選択される基を示し、Ｒ₄は、炭素原子数約１〜約１２のアルキル基、炭素原子数約３〜約６のアルケニル基、炭素原子数約６〜約１４のアリール基、炭素原子数約６〜約１５のアラルキル基、炭素原子数約１〜約１２のアルコキシ基、炭素原子数約３〜約８のアルケニルオキシ基、炭素原子数約６〜約１４のアリールオキシ基、炭素原子数約６〜約１５のアラルキルオキシ基および炭素原子数約２〜約７のカルボキシアルキル基から成る群から選択される基を示す。本発明には、前記の式（Ｉ）および（Ｉ'）で表される化合物の薬学的に許容され得る塩も包含される。この種の塩には酸付加塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、およびその他の適当な酸付加塩（緩衝塩を含む）等が包含される。ペプチジルアルギニンアルデヒドは水溶液中では、次式で示すように、４種の平衡構造（Ａ：アルギニンアルデヒド、Ｂ：水和アルデヒド、ＣおよびＤ：アミノシクロール）で存在することが知られている［バジャスツら、Ｊ．Med．Chem ．、第３３巻、第１７２９頁（１９９０年）参照］。Ｒは本発明に含まれる所定の化合物の残余の部分を示す。本発明によるペプチドアルデヒドには、これらの定義内における全ての平衡形態のものも包含される。別の観点によれば、本発明は前記の新規化合物の中間体に関する。これらの中間体には次式（II）および（II'）で表れる化合物が包含される：上式において、Ａrは次式（III）で表される基を示し、Ｒ₁は−（ＣＨ₂）₃− ＮＨ−Ｃ（=ＮＮＯ₂）−ＮＨ₂および該基のモノ−またはジ−アルキル置換誘導基（各々のアルキル基は炭素原子数約１〜約７のアルキル基から独立して選択される）から成る群から選択される基を示し、Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₄は前述の式（Ｉ）および（Ｉ'）の場合と同意義である：（式中、Ｘは水素原子、メチル基、メトキシ基、ハロゲン、エチル基およびエトキシ基から成る群から独立して選択される基を示す)。本発明はまた、哺乳類において、異常な血栓形成によって特徴づけられる症状の予防と治療に係る組成物と方法も提供する。定義本発明によってここで使用する下記の用語は、特に言及しない限り、次の様に定義される。「アルキル」…直鎖、分枝鎖または環状鎖を含む飽和脂肪族基、「アルケニル」…少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する直鎖状、分枝鎖状または環鎖状の不飽和ヒドロカルビル基。「アリール」…共役π電子系を有する少なくとも１個の環を有する芳香族基であって、随意に置換されていてもよい炭素環式アリール基、ヘテロ環式アリール基およびビアリール基が含まれる。「アラルキル」…アリール基によって置換されたアルキル基。適当なアラルキル基には、随意に置換されていてもよいベンジル基およびピコリル基等が含まれる。「メチレン」…−ＣＨ₂−。「アルキレン」…２価の直鎖状または分枝鎖状の飽和脂肪族残基。「アルコキシ」…−ＯＲ（Ｒはアルキル基を示す）。「アルケニルオキシ」…−ＯＲ（Ｒはアルケニル基を示す）。「アリールオキシ」…−ＯＲ（Ｒはアリール基を示す）。「アラルキルオキシ」…−ＯＲ（Ｒはアラルキル基を示す）。「カルボキシアルキル」…−alk−ＣＯＯＨ（alkはアルキレン基を示す）。「ハロゲン」…フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子。「薬学的に許容され得る塩」…本発明による化合物と有機酸または無機酸から調製される塩類。実際は、塩型の化合物の使用は塩基型の化合物の使用となる。本発明による化合物は遊離の塩基型および塩型のいずれの形態の化合物も有用であり、これらはいずれも本発明の範囲内に包含されるものである。さらに、下記の略語は以下の意義を有する。「Ａｃ」…アセチル。「α−ＮｐＡｌａ」…３−（１−ナフチル）アラニンまたは３−（α−ナフチル）アラニン。「β−ＮｐＡｌａ」…３−（２−ナフチル）アラニンまたは３−（β−ナフチル）アラニン。「Ｂｎ」…ベンジル。「Ｂｏｃ」…ｔ−ブトキシカルボニル。「ＢＯＰ」…ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート。「ＢＰＧｌｙ」…α−ビフェニルグリシン。「ブライン(Brine)」…塩化ナトリウムの飽和水溶液。「ＣＤＩ」…カルボニルジイミダゾール。「ＤＣＭ」…ジクロロメタン。「ＤＩＥＡ」…ジイソプロピルエチルアミン。「ＤＭＦ」…Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド。「ＩＰＡ」…イソプロパノール。「ＭｅＯＨ」…メタノール。「４ＭｅＶ」…４−メチルバレロイル。「ＮａＯＡｃ」…酢酸ナトリウム。「ＮＭＭ」…４−メチルモルホリン。「Ｐｈ」…フェニル基。「ＰｈＧｌｙ」…２−フェニルグリシン。「Ｐｐａ」…保護ペプチド類似体。「Ｓｕｃｃ」…スクシニル。「ＴＢＳＡ」…ウシ血清アルブミンを０．１％含有する０．１Ｍトリスと０．１４Ｍ塩化ナトリウム混合液（ｐＨ７．４）。「ＴＥＡ」…トリエチルアミン。「ＴＦＡ」…トリフルオロ酢酸。「ＴＨＦ」…テトラヒドロフラン。「３−trans−PhPro」…３−トランス−フェニル−Ｌ−プロリン。図面の簡単な説明図１は、本発明による１種または２種以上の化合物を調製するのに使用してもよい固相試薬（１）の製造法を示す反応スキームである。図１において、Bnはベンジルを示し、t−Buはt−ブチルを示し、Bocはt−ブトキシカルボニルを示す。図２は、本発明による１種または２種以上の化合物の調製に用いた化合物の合成法を示す反応スキームである。図２において、「ｉ」はp−トルエンスルホン酸とベンジルアルコールを示し、「ii」はBoc−Ｄ−フェニルアラニン、ＢＯＰおよびＮＭＭを含有するＤＭＦ溶液を示し、「iii」はカーボンブラックにパラジウムを１０％担持した触媒と水素ガスを示す（ＴＨＦの液相中）。図３は、本発明による化合物の液相法による合成例を示す反応スキームである。図３において、「ｉ」は窒素雰囲気下でのt−ブチルカルバゼートとカルボニルジイミダゾールのＤＭＦ溶液を示し、「ii」はトリフルオロ酢酸（０℃）を示し、「iii」は還流エタノール／水中の化合物（１）と酢酸ナトリウムを示し、「iv」はトリフルオロ酢酸のジクロロメタン溶液（０℃）を示し、「ｖ」はＢＯＰおよびＮＭＭで保護された化合物［２２］のような保護ペプチド類似体（Ppa ）のＤＭＦ溶液を示し、「vi」は酸性化メタノール／酢酸またはＨＦ／アニソール中におけるパラジウム１０％担持カーボンブラックと水素ガス（１５psig）を示し、「vii」はホルムアルデヒドの酸性化メタノール／酢酸溶液を示す。発明の詳細な説明本発明による化合物は、因子Xaに対しては強力なインヒビターとなるが、因子 XIa、トロンビンおよび組織プラスミノゲン活性化因子（tＰＡ）はわずかに弱く阻害するに過ぎない、という驚くべき特性を有する。従来、有効な抗血栓症剤として報告されていた因子Xaに対する低分子インヒビターの阻害活性は選択性がなく、因子Xaとその他の凝固酵素を区別しないことが判明した。また、ペプチドアルデヒド誘導体は因子Xaの阻害においては有効ではないとされており、このため、該誘導体を血液凝固用のペプチドアルデヒドインヒビターとして使用するには限界があるとされている［バジャスツら、「血液凝固のペプチドインヒビターの設計と合成」、Folia Haematol．、ライプツィヒ、第１０９巻、第１６頁〜第１９頁（１９８２年）参照］。好ましい化合物本発明の１つの観点によれば、特定のペプチドアルデヒドのＮ−アシル誘導体が提供される。これらの化合物は、因子Xaは強く阻害するが、因子XIa、トロンビンおよびtＰＡはわずかに弱く阻害するに過ぎないという性質によって特徴づけられる。次式（Ｉ）と（Ｉ'）で表される化合物はこのような特性を有する化合物である：式中、Ｒ₁は、−（ＣＨ₂）₃−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ₂並びに該基のモノ− およびジ−アルキル置換誘導基（各々のアルキル基は独立して選択され、その炭素原子数は約１〜約７である）から成る群から選択される基を示し、Ｒ₂は、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約６〜約１５のアラルキル基から成る群から選択される基を示し、Ｒ₃は、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約６〜約１４のアリール基、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約７〜約１５のアラルキル基、および炭素原子数約１〜約７のアルキル基から成る群から選択される基を示し、Ｒ₄は、炭素原子数約１〜約１２のアルキル基、炭素原子数約３〜約６のアルケニル基、炭素原子数約６〜約１４のアリール基、炭素原子数約６〜約１５のアラルキル基、炭素原子数約１〜約１２のアルコキシ基、炭素原子数約３〜約８のアルケニルオキシ基、炭素原子数約６〜約１４のアリールオキシ基、炭素原子数約６〜約１５のアラルキルオキシ基および炭素原子数約２〜約７のカルボキシアルキル基から成る群から選択される基を示す。本発明には、前記の式（Ｉ）および（Ｉ'）で表される化合物の薬学的に許容され得る塩も包含される。この種の塩には酸付加塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、およびその他の適当な酸付加塩（緩衝塩を含む）等が包含される。好ましい置換基の説明を簡便にするために、上記の化合物を次式（Ia）と（Ia '）で示すように、Ｐ１〜Ｐ４に分ける：好ましい化合物には、Ｐ１アミノ酸類似体残基がＬ−異性体残基である化合物が含まれる。特に好ましい化合物は、Ｒ₁が−（ＣＨ₂）₃−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ） −ＮＨ₂である化合物である。式（Ｉ）および（Ia）で表される好ましい化合物は、Ｒ₂が好ましくはアラルキル基、例えば、フェニルメチル基、ジフェニルメチル基、ビフェニルメチル基、ナフチルメチル基またはこれらの基のモノ−もしくはジ置換アルキル誘導基（各々のアルキル基の炭素原子数は約１〜約４である）であるＰ２アミノ酸類似体（Ｌ− 異性体）残基を有する化合物である。特に好ましい化合物は、Ｒ₂がフェニルメチル基、１−ナフチルメチル基または２−ナフチルメチル基である化合物である。式（Ｉ）と（Ia）または（Ｉ'）と（Ia'）で表される好ましい化合物は、Ｒ₃ がアリール基もしくはアラルキル基［例えば、フェニル基、フェニルメチル基、ジフェニルメチル基、ビフェニル基、ビフェニルメチル基、ナフチル基、ナフチルメチル基、またはこれらの基のモノ−もしくはジ置換アルキル誘導基（各々のアルキル基の炭素原子数は約１〜約４である）］またはシクロヘキシルメチル基のようなアルキル基であるＰ３アミノ酸類似体（Ｄ−異性体）残基を有する化合物である。特に好ましい化合物は、Ｒ₃がフェニル基、フェニルメチル基、１− ナフチルメチル基または２−ナフチルメチル基である化合物である。式（Ｉ）と（Ia）または（Ｉ'）と（Ia'）で表される好ましい化合物は、第三のアミノ酸類似体残基のＮ−末端にＮ−アシル基（Ｒ₄−Ｃ（Ｏ））を有する化合物である。適当なＲ₄としては次のものが例示される：メチル基、エチル基、１，１−ジメチルエチル基、プロピル基、２−メチルプロピル基、２，２−ジメチルプロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、シクロペンチル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシル基、シクロヘキシルメチル基、アダマンチル基、アダマンチルメチル基、２−プロペニル基、３−ブテニル基、１−ペンテニル基、２−ペンテニル基、５−ヘキセニル基、２−シクロペンテニル基、フェニル基、フェニルメチル基、ジフェニルメチル基、ビフェニル基、ビフェニルメチル基、ナフチル基、ナフチルメチル基、１，１−ジメチルエチルオキシ基、２ −メチルプロピルオキシ基、２，２−ジメチルプロピルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロペンチルメチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、シクロヘキシルメチルオキシ基、アダマンチルオキシ基、アダマンチルメトキシ基、フェノキシ基、ベンジルオキシ基、ビフェニルメチルオキシ基、ナフチルオキシ基、ナフチルメチルオキシ基および２−カルボキシエチル基。特に好ましい化合物は、Ｒ₄がメチル基または１，１−ジメチルエチルオキシ基である化合物である。本発明による好ましいペプチドアルデヒドとしては、次式［１］〜［１０］で表される化合物が例示される：本発明の別の観点によれば、前記の式（Ｉ）と（Ｉ'）で表される新規なＮ− アシルペプチドアルデヒド誘導体の製造に有用な中間体が提供される。これらの中間体は次式（II）と（II'）で表される：式中、Ｒ₁〜Ｒ₄は式（Ｉ）と（Ｉ'）の場合と同意義であり、Arはアリール基を示す。好ましい中間体は、Arが次式（III）で表される基を示す化合物である：式中、各々のＸは水素原子、メチル基、ハロゲンおよびエチル基から成る群から独立して選択される基を示す。特に好ましい中間体はＡrがフェニル基を示す化合物である。式（II）と（II'）で表される好ましい中間体には、Ｒ₁が−（ＣＨ₂）₃−ＮＨ −Ｃ（＝ＮＮＯ₂）−ＮＨ₂を示す化合物が含まれる。Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₄として好ましい基は、前記の式（Ｉ）と（Ｉ'）の場合と同様のものである。特に好ましい中間体には、Ｒ₂がフェニルメチル基、１−ナフチルメチル基または２−ナフチルメチル基を示し、Ｒ₃がフェニル基、フェニルメチル基、１−ナフチルメチル基または２−ナフチルメチル基を示し、Ｒ₄がメチル基または１，１−ジメチルエチルオキシ基を示す化合物が包含される。本発明による特に好ましい中間体としては次式［１１］〜［２０］で表される化合物が例示される：好ましい化合物の調製本発明によるペプチドアルデヒド誘導体は固相法または液相法のいずれによって合成してもよい。特定の条件下、例えば、大規模合成の条件下では、本明細書に記載の液相法が好ましい。いずれの方法において使用する出発原料は化学薬品メーカー、例えば、アルドリッチ（Aldrich）社、バケム・バイオサイエンス社（Bachem BioScience Inc ．）、シグマ（Sigma）社およびノバ・バイオケミカルズ（Nova Biochemica1s ）社等からの市販品として容易に入手し得る。これらの化合物の合成工程において、これらの方法において用いるアミノ酸誘導体の官能基は保護基によって保護し、カップリング反応中における交差反応を防止する。適当な保護基の例とこれらの用法は次の文献に記載されており、該記載内容も本明細書の一部を成すものである：「ザ・ペプタイズ：アナリシス、シンセシス、バイオロジー」、アカデミックプレス、第３巻（グロスおよびマイエンホーファー編、１９８１年）および第９巻（ウデンフリエンドおよびマイエンホーファー編、１９８７年）。本発明によるペプチドアルデヒド誘導体は後述の文献に記載の方法によって合成してもよく、あるいは、ウェッブによる１９９１年１２月１３日付の米国特許出願第０７／８０７,４７４号明細書に記載された固相合成試薬と合成法によるアミノ酸誘導体の逐字的化学結合法によって合成してもよい（該明細書の当該開示内容も本明細書の一部を成すものである）。図１に、固相合成法によってアミノ酸誘導体が結合される固相試薬の合成法を示す。本発明によるペプチドアルデヒドは溶液相法によって合成してもよい。好ましい方法の概要を図２および図３に示す。図２は、本発明による化合物の合成に用いる化合物の合成プロセスを示す。図３は、本発明による化合物を溶液相で合成するための好ましいプロセスを示す。ペプチドアルデヒドを溶液合成する別の方法は、例えば、次の文献に記載されており、該方法を用いて式（Ｉ）と（Ｉ'）で表される化合物を調製してもよい：マッコネルらの文献（Ｊ．Med．Chem．、第３３巻、第８６頁〜第８７頁（１９８９年））および該文献の引用文献、バジャスツら、Ｊ．Med．Chem．、第３３巻、第１７２９頁（１９９０年）、カワムラら、Chem．Pharm．Bu11．、第１７巻、第１９０２頁（１９６９年）、およびソメノら、Chem．Pharm．Bu11．、第３４巻、第１７４８頁（１９８６年）。式（II）と（II'）で表される本発明による中間体は図３に示す溶液相法によって合成してもよく、この方法は該中間体の好ましい製造法である。有用性および製剤前記の発明の背景のセクションで説明したように、因子Xaは、フィブリンクロットの形成を終止させる内因性および外因性の開始経路に共通の凝固カスケードにおける最後から二番目の反応であるトロンビンの形成反応に触媒反応をもたらす。従って、因子Xaのインヒビターはフィブリンの沈積、血栓形成および凝固タンパク質の消費を阻害する。本発明による化合物は、サンプル中の因子XIa、トロンビンまたは組織プラスミノゲン活性化因子（tＰＡ）を阻害することなく因子Xaを選択的に阻害する生体外診断剤、または特定の血栓症疾患の治療用薬剤として有用である。本発明による化合物は因子Xaに対する特異性、即ち、因子Xaの触媒活性は阻害するが、因子Xla、トロンビンおよびtＰＡの触媒活性は評価し得るほどには阻害しないという特性によって特徴づけられる。因子Xaの前記インヒビターのこの特異性は、血栓形成の阻害能を有する点で、本発明による化合物の重要な特徴である。この出願の実施例によって例証されるように、トロンビンに比べて因子Xa を特異的に阻害することの重要性は、因子Xaの１分子によって１分間あたりに２００,０００個のトロンビン分子が生成する凝固カスケードの増幅性を考慮するならば容易に理解される。従って、生体外または生体内で適切な抗血栓症効果を得るのに必要な因子Xaの選択性インヒビターの量は、このような特異性が欠如した同等の効能を有するトロンビンインヒビターまたは他の血栓形成インヒビターに比べて著しく少なくなる。静脈穿剌により採取した血液を吸収する手段として、真空密閉試験管を利用することは医学の分野では周知である［カステン（Kasten，Ｂ．Ｌ．）、「スペシメン・コレクション」、ラボラトリー・テスト・ハンドブック、第２版、Lexi− Comp Inc．（クリーブランド）第１６頁〜第１７頁（ヤコブス（Jacobs，Ｄ．Ｓ．）ら編、１９９０年）］。この種の真空管はクロット阻害性添加剤を含んでいなくてもよい。この場合、該真空管は哺乳類の血液から血清を分離するのに有用である。該真空管はクロット阻害性添加剤（例えば、ヘパリン塩、ＥＤＴＡ塩、クエン酸塩またはシュウ酸塩）を含んでいてもよい。この場合、該真空管は哺乳類の血液から血漿を分離するのに有用である。本発明による化合物は、血液採取管に添加し、該採取管内に吸入される血液の凝固を防止するのに有用である。例えば、本発明による化合物は、生体外の診断剤として有用である。因子Xaのインヒビターは多くの血栓症疾患、例えば、心筋梗塞、不安定アンギナ、多発性血管内凝血症、静脈血栓に関連する合併症等の有効な治療剤となる。さらに、これらのインヒビターは周期的に起こる血栓形成を防止し、酵素による血栓崩壊と経皮的なトランスルミナル（transluminal）血管形成をもたらす補助剤または結合剤（conjunctive agent）として有用である。さらにまた、因子Xa の特異的インヒビターは、下記の文献に記載のように、特定のタイプの腫瘍の転移性移動の抑制にも有用である：ツスジンスキーら、「転移と凝固のインヒビターである抗スタシンの分離と特性」、Ｊ．Bio1．Chem．、第２６２巻、第９７１８頁〜第９７２３頁（１９８７年）、およびブランキャンプら、「ギランテン；南アメリカヒルからの抗転移性タンパク質である抗凝血剤」Ｊ．Lab C1in．Med．、第１１５巻、第８９頁〜第９７頁（１９９０年）。因子Xaの前記インヒビターの特異性は、処置される患者の止血ポテンシャルに最低限の効果をもたらすだけで病原性血栓形成を調節できるという点において、本発明による化合物の重要な特徴である。これによって、治療に付随する出血合併症の発生率を低減させることができる。前記の因子XaインヒビターのtＰＡに対する特異性は、冠状動脈梗塞の再潅流において血栓融解剤と併用するときには絶対に必要である。結局、凝固カスケードにおける個々の酵素に対するインヒビターの特異性が高くなればなるほど、治療中におこる望ましくない副作用の発生する確率は低くなる。従って、本発明による化合物は、特定の生体内血栓症疾患の予防または治療のための薬理剤としても有用である。本発明による化合物の活性を測定するためには、該化合物を緩衝液中に溶解させることによって、アッセイ濃度が０〜約１００μＭの溶液を調製する。特定濃度の被験化合物を含有する溶液に、試験に供される酵素を添加する。インキュベーション後、該酵素に対する合成基質を添加する。基質の回転速度を分光光度法によって測定する。アッセイにおける各々の被験化合物の因子Xa、因子XIa、トロンビンおよびtＰＡに対するＩＣ₅₀を決定する。ＩＣ₅₀は、基質の回転速度の５０％を阻害するのに必要な被験化合物の濃度である。因子XIa、トロンビンまたはtＰＡに対する場合に比べて、被験化合物が因子Xaを阻害する選択性を示すために選択百分率を用いる。因子XIa、トロンビンまたはtＰＡに対する特定の化合物の選択百分率は、因子Xaに対する該化合物のＩＣ₅₀を１００倍した値を、因子XIa、トロンビンまたはtＰＡに対する該化合物のＩＣ₅₀で割った値である。因子XIa、トロンビンおよびtＰＡに対して１０以下の選択百分率を示す式（Ｉ）と（Ｉ'）で表される化合物が好ましい。Xaに対する各々のインヒビターの選択百分率は１００とする。所定の化合物の選択百分率が１００よりも小さいということは、該化合物が、因子Xla、トロンビンまたはtＰＡに対するよりも因子Xa に対してより強いインヒビターとなるということを意味する。本発明は、生体外および生体内において、因子Xaに対する強力で特異的なインヒビターとして有用な化合物、該化合物の薬学的に許容され得る塩および該化合物と塩から調製される薬学的に許容され得る組成物を提供する。哺乳類における生体内での使用態様には治療剤としての投与が含まれる。この投与により、因子 Xaの存在に起因する血管内でのフィブリンクロットの形成の予防、血栓症疾患に起因する異常な血栓形成の予防、および血管閉塞物の除去のための化学的もしくは機械的処理に起因する再発性血栓形成の予防もしくは治療が可能となる。さらに、これらの化合物、該化合物の塩および該化合物等から調製される種々の組成物は阻害特性を有するので、哺乳類における腫瘍の転移性移動を抑制する治療剤として有用である。本発明には、式（Ｉ）および（Ｉ'）で表される化合物の薬学的に許容され得る塩が包含される。これらの塩には酸付加塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、および他の適当な酸付加塩が含まれる。本発明には、薬学的に許容されるキャリアーまたは希釈剤に本発明による化合物を治療上有効な量配合した貯蔵後に投与される組成物が含まれる。治療用の薬学的に許容されるキャリアーまたは希釈剤は薬学の分野において周知であり、例えば、「レミングトンズ・ファーマシューティカル・サイエンシズ」（マック・パブリッシング社発行、；ジェンナロ編、１９８５年）に記載されている。防腐剤、安定剤、染料および香味剤を該薬剤組成物に配合してもよい。例えば、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、およびp−ヒドロキシ安息香酸のエステルを防腐剤として添加してもよく、さらに、抗酸化剤および沈澱防止剤を配合してもよい（上記文献、第１４４９頁参照）。本発明による薬剤組成物は、経口投与用には錠剤、カプセル剤またはエリキシル剤として、直腸内投与用には坐薬として、注射投与用には無菌溶液または懸濁液として製剤化して使用してもよい。注射形態の製剤は常套の形態、例えば、液状溶液または懸濁液、注射前に溶液または懸濁液にするのに適した固体状形態、またはエマルション形態に調製することができる。適当なエキシピエントとしては、水、塩類液、デキストロース、マンニトール、ラクトース、レシチン、アルブミン、グルタミン酸ナトリウムおよびシステインハイドロクロリド等が例示される。さらに、所望により、注射可能な薬剤組成物は少量の非毒性の補助物質、例えば、湿潤剤およびｐＨ緩衝剤等を含有していてもよい。また、所望により、吸収促進剤、例えば、リポソーム等を使用してもよい。本発明には、異常な血栓症によって特徴づけられる哺乳類の疾患の予防法もしくは治療法も包含される。投与に必要な該組成物の治療上有効な量は、投与経路、被処置哺乳類の種類、および問題となる特定の哺乳類の身体的特徴等によって左右される。投与量および投与方法は最適な効能が得られるように適合させてもよいが、体重、ダイエット、同時投薬および医学の分野における当業者が認識している他の因子によって左右される。本発明方法を実施するに際しては、上記の化合物または組成物を単独で使用してもよく、また、併用してもよく、さらに、他の治療剤または診断剤と併用してもよい。これらの化合物は生体内（通常は哺乳類の体内）、好ましくはヒトの体内で使用してもよく、あるいは生体外で使用してもよい。これらの化合物を生体内使用する場合には、該化合物または組成物を種々の方法、例えば、非経口投与法、静脈内投与法、皮下投与法、筋肉内投与法、結腸内投与法、直腸内投与法、鼻腔内投与法または腹腔内投与法等によって、種々の投与形態で投与すればよい。当業者には明らかなように、有効な生体内投与量および特定の投与形式は処置される哺乳類の年令、体重および種、使用する化合物の種類および該化合物を使用する特定の用途等によって左右される。有効投与量、即ち、所望の効能を得るのに必要な投与量の決定法は当業者の技術的範囲内の事項である。典型的には、化合物の投与量は、比較的低い量から始め、所望の効能が得られるまで増量して決定される。本発明による化合物の投与量は、所望の効能や治療的な指示に応じて広範囲に変化させることができる。典型的には、投与量は約０．０１〜１００mg／kg（体重）、好ましくは約０．０１〜１０mg／kg（体重）である。好ましい投与は一日ずつの投与量を非経口投与、例えば静脈内投与する方法である。本発明を理解するのを補助するために、以下の実施例において一連の実験の結果を説明する。本発明に関する以下の実施例は本発明の範囲を特に限定するものではなく、当業者が理解し得る範囲内において、現在知られており、また今後開発される本発明の種々の変形態様も、本明細書に開示されて以下の請求の範囲に記載されている本発明に包含されるものである。本発明を以下の実施例においてさらに説明する。実施例１〜７の反応の概要を図１に示す。実施例１８〜２０の反応の概要を図２に示す。実施例１４〜１７、２１および２２の反応の概要を図３に示す。実施例実施例１ α−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル-Ｎ^g−ニトロアルギニナルの製造 α−Ｎ−ｔ−ブトキシ−カルボニル−Ｎ^g−ニトロ−アルギニナル（１）の以下の製造方法はフェレンツ（Fehrentz），J．A．およびカストロ（Castro）、Ｂ．著、シンセシス（Synthesis）第６７６号（１９８３年）の製造法の変形である。Ｂｏｃ−Ｎ^g−ニトロアルギニンはカルバイオケミ（Calbiochem）社製品を使用した。Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩およびイソブチルクロロホルメートおよび水素化アルミニウムリチウムはアルドリッヒ（A1drich）社製品を使用してもよい。ジクロロメタン、酢酸エチル、メタノールおよびテトラヒドロフランはフィッシャー・サイエンティフィック（Fish er Scientific）社製品を使用してもよい。約０℃に冷却されているジクロロメタン７５ｍＬ中のＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン（８．４２ｇ、９４ミリモル）の懸濁物を攪拌しながら、そこにＮ −メチルピペリジン（１１．４ｍＬ、９０ミリモル）をゆっくりと加えた。溶液を２０分間攪拌し、ついで次の工程に使用のために冷却し続けた。分液漏斗中で、Ｂｏｃ−Ｎ^g−ニトロアルギニン（３０．０ｇ、９４ミリモル）をテトラヒドロフラン約１４００ｍＬ中で加熱することにより溶解し、窒素下で０℃に冷却した。Ｎ−メチルピペリジン（１１．４ｍＬ、９０ミリモル）およびイソブチルクロロホルメート（１２．１４ｍＬ、９４ミリモル）の混合物を加え、混合物を１０分間攪拌した。上記で製造された遊離ヒドロキシルアミンを同時に加え、反応混合物を室温に温め、ついで一夜攪拌した。生じた沈殿物を濾過により除去し、ついでテトラヒドロフラン２００ｍＬで洗浄した。真空下で濾液を約１５０ｍＬに濃縮した後に、酢酸エチル４００ｍＬを加え、ついで、溶液を氷冷した。冷却した溶液を０．２Ｎ塩酸７５ｍＬで２回、０．５Ｎ水酸化ナトリウム７５ｍＬで２回、ブライン７５ｍＬで１回洗浄した後に、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。真空中の濃縮で、固体状Ｂｏｃ−Ｎ^g −ニトロアルギニン−Ｎ−メチル−Ｏ−メチルカルボキサミド２２７ｇ（収率７０％）を回収した。ジクロロメタン／メタノール（シリカゲル）９：１による薄層クロマトグラフ分析は１スポットを示した。テトラヒドロフラン中の１Ｎ水素化アルミニウムリチウム７０ｍＬおよび乾燥テトラヒドロフラン５００ｍＬを充填したフラスコを窒素雰囲気下に置き、−５０℃に冷却した。乾燥テトロヒドロフラン５０ｍＬ中にＢｏｃ−Ｎ^g−ニトロアルギニン−Ｎ−メチル−Ｏ−メチルカルボキサミド（２３ｇ、６６ミリモル）を含む溶液を、反応混合物の温度を−５０℃に維持しながら、ゆっくりと加えた。冷却を中止することにより０℃に温めた後に−３０℃に冷却し、その温度で、２Ｎ硫酸水素カリウム１００ｍＬ（０．２モル）を１５分間かけて攪拌しながら加えた。ついで、反応混合物を３０分間室温で攪拌した。生じた混合物を濾過し、濾液を真空下で１００ｍＬに濃縮した。濃縮物を酢酸エチル８００ｍＬで希釈し、ついで、１Ｎ塩酸５０ｍＬで２回、飽和炭酸水素ナトリウム５０ｍＬで２回およびブライン５０ｍＬで１回洗浄した。合わせた抽出物水溶液を酢酸エチル１００ｍＬで３回抽出した。酢酸エチル洗液の全てを合わせ、ついで、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。混合物を真空下で濃縮し、標題化合物１３.６ｇ（７０％）を得た。実施例２トランス−４−（アミノメチル）−シクロヘキサンカルボン酸ベンジルエステルパラ−トルエンスルホネート塩の製造トランス−４−（アミノメチル）−シクロヘキサンカルボン酸（５０ｇ、０．３１８モル）、ｐ−トルエンスルホン酸１水和物（６１．７ｇ、０．３２４モル）、ベンジルアルコール（２５０ｍＬ、２．４モル）およびトルエン２５０ｍＬを合わせて、攪拌した。混合物を２４時間還流し、遊離した水をディーン−スターク（Dean-Stark）装置により除去した。５時間還流後に透明な溶液を得た。溶液を室温に冷却したため、生成物は結晶化した。混合物を真空濾過し、エーテルで洗浄し、真空炉で乾燥し、１２８．１２ｇ（収率９６％）を得た。グリーンスタイン（Greenstein）、Ｊ．Ｐ．およびウィニッツ（Winitz）、Ｍ．著、「ケミストリー・オブ・ディ・アミノ・アッシズ（Chemistry of the Amino Acids）」、ロバート（Robert）Ｅ．クリーガー（Krieger）出版社（マラーバー、フロリダ州）第２巻、第９４２頁（１９８６年）。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ１．０５（ｍ，２Ｈ），１.４３（ｍ，２Ｈ），１．５９（ｍ，１Ｈ），１．８５（ｍ，２Ｈ），２．０３（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｍ，１Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．７５（ｄ，２Ｈ），５．０９（ｓ，２Ｈ），７．２３（ｄ，２Ｈ），７．３２（ｍ，５Ｈ），７．６９（ｄ，２Ｈ）．融点１５４〜１５６℃。実施例３１−ｔ−ブトキシカルボニルセミカルバジデル−トランス−４−メチルシクロヘキサンカルボン酸ベンジルエステルの製造カルボニルジイミダゾール（３．２４ｇ、０．０２モル）をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）４５ｍＬ中に室温で窒素下溶解した。ＤＭＦ４５ｍＬ中のｔ−ブチルカルバザート（２．４８ｇ、０．０２モル）溶液を滴下して加えた。ついで、固体状のベンジルエステル２（８．３８ｇ、０．０２モル）を加えた後に３０分間にわたってトリエチルアミン３．０６ｍＬを滴下して加えた。反応物を室温で窒素下１時間攪拌した。水１００ｍＬを加え、この混合物を酢酸エチル５０ｍＬで３回抽出した。酢酸エチル層を合わせ、１Ｎ塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム、ブラインの７５ｍＬで各々で２回抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。混合物を濾過し、溶液を濃縮して油を得た。この物質を酢酸エチル／ヘキサンからの再結晶により精製（融点＝１０６〜１０８℃）または次の工程に直接使用できた。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ０．９４（ｍ，２Ｈ），１．４２（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．８１（ｍ，２Ｈ），２．０２（ｍ，２Ｈ），２．２７（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｔ，２Ｈ），５．０９（ｓ，２Ｈ），５．５１（ｔ，１Ｈ），６．４６（ｓ，２Ｈ），７．３４（ｍ，４Ｈ）．実施例４１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−３−セミカルバジディル−トランス−４− メチル−シクロヘキサンカルボン酸の製造メタノール２５０ｍＬ中で上記の粗製Ｂｏｃ−ベンジルエステル３を、１０％活性炭上１０％のパラジウム５００ｍｇを合わせた。５psigで１時間水素化器上で振盪後に、混合物を透明ガラス濾過器中のけい藻土のパッドを通して濾過した。濾液を濃縮して泡状物を得、塩化メチレンを加え、沈殿物を生成した。結晶化した物質を濾過し、エーテルで洗浄した。これにより粗製生成物４．０ｇ（１２．７ミリモル；化合物２から得られた収率６２％）を得た。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ０．９６（ｍ，２Ｈ），１．４２（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．８２（ｍ，２Ｈ），１．９７（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｍ，１Ｈ），３．０（ｔ，２Ｈ）．融点＝１８５〜１８９℃実施例５セミカルバジディル−トランス−４−メチルシクロヘキサンカルボン酸トリフルオロ酢酸塩の製造化合物４（３１５ｍｇ、１ミリモル）を０℃でトリフルオロ酢酸１０ｍＬに加え、生じた溶液を３０分間攪拌した。この後、溶液を乾燥エーテル７５ｍＬに滴下して加えた。沈殿を生成し、この混合物を濾過し、エーテルで洗浄した。粗製生成物をの重量は２５４ｍｇ（収率７７％）であった。¹ＨＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ １．０（ｍ，２Ｈ），１．３８（ｍ，２Ｈ），１．４３（ｍ，１Ｈ），１．８４（ｍ，２Ｈ），２．０１（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｍ，１Ｈ），３．０４（ｄ，２Ｈ）．融点＝１５４〜１５６℃実施例６ α−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^g−ニトロアルギニナル−セミカルバゾニル−トランス−４−メチル−シクロヘキサンカルボン酸の製造水４５ｍＬを含み、エタノール１３５ｍＬ中の５（１３．７ｇ、４１．６ミリモル）および粗製１（１８．０ｇ、５９ミリモル）の溶液を、酢酸ナトリウム三水和物（９．４１ｇ、６９ミリモル）で処理し、１時間還流した。この溶液を冷却し、ついで、０．１Ｎ塩酸中に注ぎ、酢酸エチル１００ｍＬ（１回）で３回抽出した。合わせた有機相を水、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、小容量に濃縮した。この濁った混合物を５℃で一夜放置し、生成物を沈殿し、濾過により分離し、真空下で乾燥した。これにより、９．９ｇを得、５からの収率は４７％であった。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ１．０（ｍ，２Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），１．４５〜２．２０（ｍ，１３Ｈ），３．０９（ｄ，２Ｈ），３．３０（ｍ，２Ｈ），４.１８（ｂｓ，１Ｈ），７．１０（ｄ，１Ｈ）．融点＝１６２〜１６３℃実施例７セミカルバゾン固体支持体の製造反応容器中にメチルベンズヒドラルアミン（methyl-benzhydralamine）（ＭＢＨＡ）（０．８ｇ、０．５ミリモル、０．６２ｇ／モル）樹脂を入れ、ジクロロメタン（ＤＣＭ）で１回（全ての洗浄は１〜２分間攪拌されながら溶媒１０ｍＬが必要である）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で３回、１０％ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）／ＤＭＦで２回、およびＤＭＦで４回で洗浄することにより、固相試薬７を製造した。ＤＭＦ５ｍＬ、４−メチルモルホリン（１０２μＬ、１ミリモル）、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ試薬、４４３ｍｇ、１ミリモル）および化合物６（５００ｍｇ、１ミリモル）を加え、１６時間回転輪上で混合し、ＤＭＦで３回、１０％ＤＩＥＡ／ＤＭＦで２回およびＤＭＦで３回洗浄した。ついで、樹脂をＤＣＭ、メタノールおよびエーテルで逐次洗浄した。生じた樹脂７はニンヒドリンにより９８〜９９％カップリングしたことを示した。ついで、以下の実施例で示されるように標準ｔ−Ｂｏｃ法を使用して常用ペプチド合成器で、アミノ酸またはアミノ酸類似体を用いてＮ−末端で樹脂を延長した。ペプチド類似体の製造をアプライド・バイオシステム社製４３０Ａ型ペプチド合成器で４３０Ａ取り扱い説明書中のｔ−Ｂｏｃ化学条件を使用して行った。生じた保護ペプチドアルデヒドは酸水溶液およびホルムアルデヒドの混合物で支持体から切断でき、ついで、水素／Ｐｄで脱保護できる。窒素基はアルデヒドを還元しないで、グアニジン基から除去できる。実施例８Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ−３−（２−ナフチル）アラニル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−アラギニナルの製造上記のペプチドアルデヒドをアプライド・バイオシステムズ社製４３０Ａ型ペプチド合成器を使用して製造した。使用したＢｏｃ化学条件は装置取り扱い説明書に記載の通りであった。樹脂７（１．００ｇ、０．５００ミリモル）を、５０％トリフルオロ酢酸（ジクロロメタン中）で処理してＢｏｃ保護基を除去することにより、すぐに使用できるようにした。洗浄し、１０％ジイソプロピルエチルアミン（ジクロロメタン中）で処理して酸性を中和した後に、連続法で市販のＢｏｃ−保護アミノ酸類を支持試薬にカップリング（およびアミノ酸支持体鎖を延長）した。従って、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニンをジメチルホルムアミド中のジクロロヘキシルカルボジイミドおよび１−ヒドロキシベンズトリアゾールを使用して樹脂に結合した後に、５０％トリフルオロ酢酸（ジクロロメタン）で処理し、Ｂｏｃ保護基を除去し、洗浄し、および１０％ジイソプロピルエチルアミノ（ジクロロメタン）で洗浄し、酸性を中和した。Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−３−（２−ナフチル）アラニンを同じ方法でカップリングした。最終カップリング後、５０％トリフルオロ酢酸による処理を省略した。テトラヒドロフラン５ｍＬ、酢酸１ｍＬ、ホルムアデヒド１ｍＬおよび１Ｎ塩酸０．１００ｍＬを含む混合物で１時間攪拌しつつ処理することにより固相からペプチドアルデヒドを除去した。この混合物を濾過した後に、樹脂をテトラヒドロフラン１０ｍＬで洗浄した。合わせた濾液を水１００ｍＬで希釈し、酢酸エチルで抽出した。ついで、酢酸エチル相を飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空下で濃縮した。ペプチドアルデヒドのニトロおよびベンジル保護基を除去するために、濃縮したペプチドアルデヒドを１０％水を含有するメタノール１０ｍＬ、１Ｎ塩酸０．３００ｍＬおよび炭素上のパラジウム０．２００ｇの混合物中に取り、４５分間５ｐｓｉｇで水素で処理した。混合物をけい藻土を有する微細フリット製濾過器を通して濾過し、１０％水を含有するメタノールで洗浄し、濃縮し、粗製ペプチドアルデヒドを得た。ついで、生じたペプチドアルデヒドを粒度１０ミクロンの細孔径３００オングストロームのＣ−１８カラムで逆相ＨＰＬＣを使用し、勾配５％〜４０％アセトニトリル範囲の水−アセトニトリル（ともに、０．１％トリフルオロ酢酸を含む）勾配で溶出して精製した。カラム画分をＨＰＬＣ分析により分析し、純品を含む画分を溜めて、凍結乾燥して、上記の生成物を得た。高速原子衝撃質量分析計（fast atom bombardment mass spectrometry）により６０２．５ａ.ｍ.ｕ.の分子量が観察された；分子量の計算値は６０２．３ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例９Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ−２−フェニルグリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−アラギニナルの製造上記のペプチドアルデヒドを実施例８に記載と同様の方法で製造し、精製した。ここでは、まず、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニンを樹脂７に結合し、ついで、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルグリシンを結合した。実施例８と同様に、最終カップリング工程後、５０％トリフルオロ酢酸での処理を省略した。高速原子衝撃質量分析計により、分子量５３８．３ａ.ｍ.ｕ.が観察された；分子量の計算値は５３８．３ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例１０Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−３−（２−ナフチル）アラニル−Ｌ−アルギニナルの製造上記のペプチドアルデヒドを実施例８に記載と同様な方法で製造し、精製した。ここでは、まず、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−３−（２−ナフチル）アラニンを樹脂７に結合し、ついでＮ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンを結合した。実施例８のように、最終カップリング工程後、５０％トリフルオロ酢酸での処理を省略した。高速原子衝撃質量分析計により分子量６０２．３ａ.ｍ.ｕ.が観察された；分子量の計算値は６０２．３ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例１１Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニル− Ｌ−アラギニナルの製造上記のペプチドアルデヒドを実施例８に記載と同様な方法で製造し、精製した。ここでは、まず、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニンを樹脂７に結合し、ついでＮ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンを結合した。実施例８のように、最終カップリング工程後、５０％トリフルオロ酢酸での処理は省略した。高速原子衝撃質量分析計により分子量５５２．５ａ.ｍ.ｕ.が観察された；分子量の計算値は５５２．６ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例１２Ｎ−ブトキシカルボニル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラギニルの製造上記のペプチドアルデヒドを実施例８に記載と同様な方法で製造し、精製した。ここでは、まず、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニンを樹脂７に結合し、ついでＮ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンを結合した。実施例８のように、最終カップリング工程後、５０％トリフルオロ酢酸での処理は省略した。高速原子衝撃質量分析計により分子量６０２．４ａ.ｍ.ｕ.が観察された；分子量の計算値は６０２．７ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例１３Ｎ−アセチル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニル−Ｌ −アラギニナルの製造上記のペプチドアルデヒドを実施例８に記載と同様な方法で製造し、精製した。ここでは、まず、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニンを樹脂７に結合し、ついでＮ−アセチル−Ｄ−フェニルアラニンを結合した。実施例８のように、最終カップリング工程後、５０％トリフルオロ酢酸での処理を省略した。高速原子衝撃質量分析計により分子量５４４．３ａ.ｍ.ｕ.が観察された；分子量の計算値は５４４．３ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例１４１−ｔ−ブトキシカルボニル−セミカルバジディル−４−ジフェニルメタンの製造ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ，２２５ｍＬ）中カルボニルジイミダゾール（１６．２ｇ，０．１０モル）の溶液を室温で製造し、窒素下で攪拌した。ついで、ＤＭＦ（２２５ｍＬ）中ｔ−ブチルカルバザート（１３．２ｇ，０．１０モル）溶液を３０分間にわたって滴下して加えた。つぎに、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のジフェニルメチルアミン（１８．３ｇ、０．１０モル）を３０分間かけて加えた。反応物を室温で窒素下で１時間攪拌した。水（１０ｍＬ）を加え、この混合物を真空下で約１５０ｍＬに濃縮した。この溶液を水（５００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（４００ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル相を１Ｎ塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム、ブライン各々７５ｍＬで２回抽出し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。混合物を濾過し、溶液を濃縮し、白色泡を２９．５ｇ（収率８５％）得た。この物質は酢酸エチル/ヘキサンから再結晶することにより精製できるが、次の工程に使用するのに十分な純度であった：融点＝１４２〜１４３℃。元素分析（Ｃ₁₉Ｈ₂₃Ｎ₃Ｏ₃）：計算値；Ｃ，６６．８４；Ｈ，６．７９；Ｎ，１２．３１.実験値；Ｃ，６６．４６；Ｈ，６．７５；Ｎ；１２．９０。実施例１５セミカルバジディル−４−ジフェニルメタントリフルオロ酢酸塩の製造ジクロロメタン（１２．５ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（１２．５ｍＬ）中の化合物［２４］（３．４３ｇ、１０ミリモル）の溶液を、室温で３０分間攪拌した。この後、溶液をエーテル（７５ｍＬ）に滴下して加えた。沈殿物を生成し、混合物を濾過し、エーテルで洗浄した。粗製生成物の重量は２．７ｇ（収率８０％）であった：融点１８２〜１８４℃。実施例１６ α−Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^g−ニトロ−アルギニナル−セミカルバゾニル−４−Ｎ−ジフェニルメタンの製造水（２０ｍＬ）を含むエタノール（２０ｍＬ）中の化合物［２５］（２．６５ｇ、７．８ミリモル）および１（α−Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^g− ニトロ−アルギニナル、２．３６ｇ、７.８ミリモル）の溶液を酢酸ナトリウム三水和物（１．２ｇ、８．８ミリモル）で処理し、１時間還流した。この溶液を冷却し、ついで、水に注ぎ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を水、０．１Ｎ塩酸、ブライン、で洗浄し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、小容量に濃縮した。白色固状残渣をアセトニトリル／エーテルから再結晶した。これにより３．２ｇ（実施例１の化合物からの収率７８％）を得た：融点＝７８〜７９℃。実施例１７Ｎ^g−ニトロ−アルギニナル−セミカルバゾニル−４−Ｎ−ジフェニルメタントリフルオロ酢酸塩の製造ジクロロメタン（５ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）中の化合物［２６］（１．２ｇ、８．８ミリモル）の溶液を、室温で３０分間攪拌した。この後に、溶液をエーテル（４０ｍＬ）に滴下して加えた。沈殿物を生成し、この混合物を濾過し、エーテルで洗浄した。これにより純白色固体状塩０．５１ｇ（収率９７％）を得た：融点＝１５９〜１６０℃。実施例１８Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニン−Ｏ−ベンジルエステル−ｐ−トルエンスルホン酸塩の製造Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニン（２５．０ｇ、１１５ミリモル）、ｐ−トルエンスルホン酸１水和物（２４．１ｇ、１２７ミリモル）、トルエン（１２５０ｍＬ）およびベンジルアルコール（２９．８ｍＬ、２８８ミリモル）を合わせ、一夜攪拌しながら還流した。水（４．１ｍＬ）をデイーン・スタークトラップにより除去した。室温に冷却後に、生じた懸濁物をエーテル１０００ｍＬに注ぎ、１０分間攪拌した。ついで、固体を濾過し、エーテル１０００ｍＬで洗浄し、真空下で乾燥し、標題化合物５０．５ｇ（収率９２％）を得た。融点＝１６１〜１６３℃。実施例１９ α−Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−３−（１− ナフチル）アラニン−Ｏ−ベンジルエステルの製造化合物［２８］（４８．５ｇ、１０１ミリモル）、Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニン（２６．７ｇ、１０１ミリモル）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ、４４．７ｇ、１０１ミリモル）の溶液を、ＤＭＦ２４０ｍＬ中で製造した。反応混合物を０℃に冷却し、ついで、４−メチルモルホリン（ＮＭＭ）３３．３ｍＬを攪拌しながら加えた。一夜攪拌後、反応混合物を水８００ｍＬに加え、ついで酢酸エチル４００ｍＬで２回抽出した。有機層を１Ｎクエン酸、水、飽和塩化ナトリウムの等容量で洗浄し、ついで、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。有機層を真空下で濃縮し、固体を得た。ついで、固体を酢酸エチル／ヘキサンから再結晶化し、純結晶の標題化合物４２ｇ（収率７６％）を得た。融点＝１５１〜１５３℃。実施例２０ α−Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−３−（１− ナフチル）アラニンの製造テトラヒドロフラン１０００ｍＬ中の化合物［２１］（３８ｇ、６９ミリモル）の溶液をパー装置中に入れた。反応混合物を３０分間窒素ガスにより空気を追い出し、ついで、水１０ｍＬで予め加湿した炭素上１０％パラジウム３８ｇを加えた。パージ後に、混合物を水素ガスの３０ｐｓｉｇ下で室温で２時間攪拌した。この後に、混合物を濾過した。濾液を真空下で濃縮乾固し、標題化合物２８ｇ（収率８８％）を得た。融点＝１１３〜１１５℃。実施例２１ α−Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−３−（１− ナフチル）アラニル−Ｌ−Ｎ^g−ニトロ−アルギニナル−セミカルボゾニル−４ −Ｎ−ジフェニルメタンの製造化合物［２７］（９．０８ｇ、１６．７ミリモル）、化合物［２２］（７．７２ｇ、１６．７ミリモル）、ＢＯＰ（７．３８ｇ、１６．７ミリモル）、ＮＭＭ（５．２７ｍＬ、４８ミリモル）およびＤＭＦ５０ｍＬの溶液を調製し、０℃冷却した。反応混合物をこの温度で２時間攪拌した。この後に、反応混合物を酢酸エチル５００ｍＬに注いだ。水１５０ｍＬを加え、この混合物を室温で２０分間攪拌した。この後、攪拌を中止し、相を分離した。有機層を分離し、ついで、飽和クエン酸、飽和炭酸水素ナトリウム、水および飽和塩化ナトリウムの等容量で洗浄し、ついで、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。有機層を濃縮乾固後に、粗製生成物をジクロロメタンに再溶解し、ついでシリカゲルカラム上でクロマトグラフにかけ、４〜１６％イソプロピルアルコール（ジクロロメタン中）で溶出した。生成物はイソプロピルアルコール（ジクロロメタン中）が１０〜１４％のところで溶出した。純品を含む画分をシリカゲル上で薄層クロマトグラフを使用し、ジクロロメタン中１０％メタノールで展開し、選別し、溜めた。溜まりを真空下で減少し、乾固し、標題化合物７ｇ（収率４６％）を得た。融点＝１４０〜１５０℃（分解）。実施例２２Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラギニナルの製造化合物［１５］（１．９５ｇ、２．１５ミリモル）およびメタノール９８ｍＬの溶液をパー容器中に入れた。１Ｍ塩酸（３．９ｍＬ）、酢酸（９．８ｍＬ）および、数滴の水で予め加湿した炭素上１０％パラジウム（１．９５ｇ）を加え、ついで、反応混合物を３０分間窒素により空気をパージした。パージ後に、混合物を水素ガス雰囲気の１５ｐｓｉg下室温で１８時間攪拌した。この後に、炭素上パラジウムを濾取し、濾液を真空下で濃縮し、油を得た。油をメタノール７８ｍＬ、酢酸１１ｍＬ、１Ｍ塩酸０．６ｍＬおよび３７重量％（水中）ホルムアルデヒド６ｍＬを含む溶液に再溶解し、ついで、室温で４５分間攪拌した。この後、水２００ｍＬを加え、溶液を約２００ｍＬに真空下濃縮した。アセトニトリル８６ｍＬを濁った濃縮液に加え、透明な溶液を得た。標題化合物を粒度１０ミクロンの細孔径３００オングストロームのＣ−１８カラムで逆相分取ＨＰＬＣを使用して溶液から精製し、水−アセトニトリル（ともに０．１％トリフルオロ酢酸を含む）勾配で溶出した。勾配は３０％〜７５％アセトニトリル−水（０．１％トリフルオロ酢酸を含む）の範囲であった。標題化合物を含む画分を５０〜５８％アセトニトリル−水で溶出した。画分を溜め、凍結乾燥し、０．８９ｇ（収率６９％）を得た。高速原子衝撃質量分析計により分子量６０２．３ａ.ｍ.ｕ.が観察された：分子量の計算値は６０２．３であった。実施例２３Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロピル−Ｌ−アラギニナルの製造上記のペプチドアルデヒド［２３］はトロンビンの強力な阻害剤として開示されている。例えば、バジュツ（Bajusz）、Ｓ.等著、ホリア・ヘマトール・レイプチッグ（Folia Haematol．Leipzig）、第１０９巻、第１６頁（１９８２年）、バジュツＳ.著、シンポシア・バイオロジカ・ハンガリカ（Symposia Bio1ogi ca Hungarica）、第２５巻、第２７７頁（１９８４年）；およびバジュツ、Ｓ. 等著、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ．Med．Chem.）、第３３巻、第１７２９頁（１９９０年）を参照のこと。従って、それは実施例Ａに記載のアッセイ中の比較化合物として使用するために製造された。ペプチドアルデヒド［２３］を実施例８と同様の方法で製造し、精製した。まず、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリンを樹脂７に結合し、ついでＮ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンを結合した。最終カップリング後、５０％トリフルオロ酢酸での処理を省略した。標題化合物を次の脱保護および精製後に得られた。高速原子衝撃質量分析計により分子量５０２ａ.ｍ.ｕ.を観察した；分子量の計算値は５０２ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例２４Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−（α−ビフェニル）グリシンの製造４−ビフェニルカルボキサルデヒド１５ｇ（８２ミリモル）、塩化アンモニウム３．４ｇ（６３ミリモル）、炭酸アンモニウム１６．４ｇ（２０５ミリモル）およびシアン化カリウム６．１５ｇ（９４ミリモル）を、５０％エタノール中（脱イオン水中）に溶解し、アルゴン雰囲気下に置き、４０℃で約１２〜１６時間加熱した。その後、混合物中で生成した固体を濾取し、５０％エタノール（脱イオン水中）２５ｍＬ、脱イオン水およびジエチルエーテルで逐次洗浄し、固体状ヒダントイン３０ｇを得た。この固体を熱メタノール中に溶解し、脱イオン水で粉末状にした。固体４ｇを１Ｍ水酸化ナトリウム８０ｍＬに加え、１２〜１６時間還流した。この後、エタノール８０ｍＬおよび固体状水酸化ナトリウム３．２ｇ（８０ミリモル）を加え、混合物を１２〜１６時間更に還流した。混合物を濃ＨＣｌでｐＨ５に調整し、固体を得た。混合物を濾取し、真空下で１２〜１６時間乾燥し、標題化合物２．７ｇ（収率７５％）を得た。実施例２５Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ，Ｌ−（α−ビフェニル）グリシル−Ｌ−３− （１−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラギニナルの製造上記のペプチドアルデヒドをアプライド・バイオシステム４３０型ペプチド合成器を使用して製造した。使用されたＢｏｃ化学条件は装置取り扱い説明書に記載のとおりであった。樹脂７（０．６７〜１．００ｇ、０．５００モルアミノ基）を、５０％トリフルオロ酢酸（ジクロロメタン中）で処理してＢｏｃ保護基を除去することによりすぐに使用できるようにした。洗浄し、１０％ジイソプロピルエチルアミン（ジクロロメタン中）で処理して酸性を中和した後に、連続法で市販のＢｏｃ−保護アミノ酸を支持試薬にカップリング（およびアミノ酸支持体鎖を延長）した。このように、ジクロロヘキシルカルボジイミド（Ｎ−メチルモルホリン２ｍＬ中２．０ミリモル）および１−ヒドロキシベンズトリアゾール（Ｎ−メチルモルホリン３．３ｍＬ中２．０ミリモル）で１時間カップリング反応することにより、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニン（Ｎ−メチルモルホリン２ｍＬ中２．０ミリモル）を樹脂に結合した後に、５０％トリフルオロ酢酸（ジクロロメタン中）で処理し、Ｂｏｃ保護基を除去し、洗浄し、および１０％ジイソプロピルエチルアミノ（ジクロロメタン中）で洗浄し、酸性を中和した。Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ，Ｌ−α−ビフェニルグリシンを同じ方法でカップリングした。最終カップリング後、５０％トリフルオロ酢酸での処理を省略した。保護基のついたペプチドアルデヒドを、テトラヒドロフラン５ｍＬ、酢酸１ｍＬ、ホルムアデヒド１ｍＬおよび１Ｎ塩酸０．１００ｍＬを含む混合物で１時間攪拌しつつ処理することにより固相から除去した。この混合物を濾過した後に、樹脂をテトラヒドロフラン１０ｍＬで洗浄した。合わせた濾液を水１００ｍＬで希釈し、酢酸エチルで抽出した。ついで、酢酸エチル相を飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空下で濃縮した。ペプチドアルデヒドのニトロおよびベンジル保護基を除去するために、濃縮したペプチドアルデヒドをメタノール４．２ｍＬ、１Ｎ塩酸０．４９ｍＬおよび炭素上パラジウム０．２５０ｇの混合物中に取り、４５分間５ｐｓｉｇで水素で処理した。混合物をけい藻土を有する微細フリット濾過器を通して濾過し、１０％の水を含むメタノールで洗浄し、濃縮し、粗製ペプチドアルデヒドを得た。ついで、生じたペプチドアルデヒドを粒度１０ミクロンの細孔径３００オングストロームのＣ−１８カラム（バイダック（Ｖｙｄａｃ）社製）で逆相ＨＰＬＣを使用して精製し、水−アセトニトリル（ともに０．１％トリフルオロ酢酸を含む）勾配で溶出し、勾配はアセトニトリル２０％〜５０％の範囲であった。カラム画分をＨＰＬＣ分析により分析し、純品を含む画分を溜めて、凍結乾燥して、上記の生成物を得た。高速原子衝撃質量分析計（fast atom bombardment mass s pectrometry）により６６４．３ａ.ｍ.ｕ.の分子量が観察された；分子量の計算値は６６４．３ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例２６モノ−Ｏ−ベンジル琥珀酸の製造無水琥珀酸１０ｇ（１０ミリモル）、ベンジルアルコール１０ｍＬ（９７ミリモル）およびトリエチルアミン１０ｍＬを合わせ、混合物を加熱還流し、約５分間還流し、ついで１時間加熱しないで攪拌した。この後に、混合物を１Ｍ塩酸２５０ｍＬに注ぎ、酢酸エチル２〜７５ｍＬで抽出した。有機相を合わせ、脱イオン水で洗浄し、ブラインで洗浄し、ついで、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。有機相を濃縮し、油を得、静置して、結晶状の標題化合物１９．６ｇ（収率９４％）を得た。実施例２７Ｎ−スクシニル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニル− Ｌ−アラギニナルの製造上記のペプチドアルデヒドを実施例２５に記載と同様の方法で樹脂上で製造した。ここでは、まず、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニンを樹脂７に結合した後に、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンを結合し、ついでモノ−Ｏ −ベンジル琥珀酸を結合した。保護セミカルバゾンとして標題化合物を、−２０℃で２０分間アニソール０．８ｍＬおよびフッ化水素酸１２．０ｍＬの混合物で樹脂を処理することによりニトロ保護基の除去と同時に固体相から除去した。室温で蒸発することによりフッ化水素酸の除去後に、残留固体を０．１Ｍ炭酸水素アンモニウム５０ｍＬ、ついで、脱イオン水１００ｍＬで抽出した。抽出物を合わせ、ジエチルエーテルで２回抽出した。ついで水相を凍結および凍結乾燥した。テトラヒドロフラン５ｍＬ、酢酸１ｍＬ、１Ｍ塩酸０．１ｍＬおよび３７重量％ホルムアルデヒド（水中）１ｍＬの溶液に凍結乾燥固体を取ることによりセミカルバゾン保護基を除去し、ついで、室温で１時間攪拌した。この後に、水２０ｍＬを加え、溶液を酢酸エチルで抽出した。ついで、酢酸エチル相を飽和塩化ナトリウムで洗浄し、塩化マグネシウム上で乾燥し、真空下で約２０ｍＬに濃縮した。アセトニトリル８．６ｍＬを濁った濃縮物に加え、透明な溶液を得た。ついで、生じたペプチドアルデヒドを粒度１０ミクロンの細孔径３００オングストロームのＣ−１８カラム（バイダック（Ｖｙｄａｃ）社製）で逆相ＨＰＬＣを使用して精製し、水−アセトニトリル（ともに０．１％トリフルオロ酢酸を含む）勾配で溶出し、勾配はアセトニトリル２０％〜５０％の範囲であった。カラム画分をＨＰＬＣ分析により分析し、純品を含む画分を溜めて、凍結乾燥して、上記の生成物を得た。高速原子衝撃質量分析計（fast atom bombardment mass spectro metry）により６０２．３ａ.ｍ.ｕ.の分子量が観察された；分子量の計算値は６０２．３ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例２８Ｎ−（４−メチルペンタニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラギニナルの製造上記のペプチドアルデヒドを実施例２７に記載と同様に製造および精製した。ここでは、まず、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−３−（１−ナフチル）アラニンを樹脂７に結合した後に、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンを、ついで４−メチルバレリン酸を結合した。高速原子衝撃質量分析計により分子量６００．４ａ.ｍ.ｕ.が観察された；分子量の計算値６００．３ａ.ｍ.ｕ.であった。実施例２９Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−（３−トランス−フェニル）プロリニル−Ｌ−アルギニナル上記のペプチドアルデヒドを実施例２５に記載と同様に製造および精製した。ここでは、まず、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−（３−トランス−フェニル）プロリンを樹脂７に結合した後に、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンを結合した。実施例Ａ特異性−ＩＣ₅₀の決定ペプチドアルデヒド［１］〜［１０］の特異性を、Ｘａ因子、ＸＩa因子、トロンビンおよび組織プラスミノーゲンアクチベーター（ｔＰＡ）に対するそれらのＩＣ₅₀のインビトロでの測定により決定された。当分野で開示されているペプチドアルデヒド［２３］を比較として用いた。阻害剤の濃度を変更することにより酵素およびその基質の特異的濃度を試みた。ＩＣ₅₀はアッセイ条件下で触媒活性の５０％を阻害する阻害剤の濃度である。使用された特異的アッセイ法を以下に示す。表１はそれらのアッセイによる基質特異性の結果を示し、そこでは、「＞２５」というのは、阻害剤濃度２５μＭでは阻害率が５０％以下であることを意味する。この表では、「β−ＮｐＡｌａ」は３−（β−ナフチル）アラニンとしても知られる３−（２−ナフチル）アラニンであり、「ＰｈＧｌｙ」は２−フェニルグリシンであり、および「α−ＮｐＡｌａ」は３−（α−ナフチル）アラニンとしても知られる３−（１−ナフチル）アラニンである。表２は本発明の実施例の化合物の選択性のパーセントを示している。選択性パーセントを（Ｘａ因子のＩＣ₅₀）÷（ＸＩａ因子、トロンビンまたはｔＰＡのいずれかのＩＣ₅₀）×１００と定義する。Ｘａ因子の各々阻害剤の選択性パーセントは、１００として取られる。ＸＩａ因子、トロンビンまたはｔＰＡの阻害剤の選択性パーセントが１００以下であるということは、Ｘａ因子への阻害性は強いものの、これらの酵素を阻害する活性は、活性があるとしても弱いことを意味している。（ａ）Ｘａ因子アッセイ酵素活性をカビ・ダイアノスティカ（Kabi Diagnostica）社から市販のＳ２７６５（Ｎ−ａ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−グリシル−Ｌ −アルギニン−ｐ−ニトロアニリド二塩酸塩）を基質として使用して測定した。基質は使用する前に脱イオン水中に溶かした。ヒトＸａ因子をエンザイム・リサーチ・ラボラトリーズ（Enzyme Research La boratories）から入手した。酵素は使用前にＴＢＳＡに希釈した。ＴＢＳＡ５０μＬ、ＴＢＳＡ中阻害剤またはＴＢＳＡ（負の対照として）５０ μＬおよび２ｎＭヒトＸａ因子またはＴＢＳＡ（バックグランド対照として）５０μＬを適当なウェル中で合わせることによりアッセイを行った。室温で６０分間この混合物をインキュベートした後、１ｍＭのＳ−２７６５５０μＬを各々ウェルに加え、各々ウェルの４０５ｎｍ（ＯＤ_405nm）での初期変化率を測定した。ＯＤ_405nmを５分間１０秒おきに測定した。（ｂ）ＸＩａ因子アッセイ酵素活性をカビ・ダイアノスティカ社から市販のＳ２３６６（Ｌ−ピログルタミル−Ｌ−プロリル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリド塩酸塩）を基質として使用して測定した。基質は使用する前に脱イオン水中に溶かした。ヒトＸＩａ因子をエンザイム・リサーチ・ラボラトリーズ（Enzyme Research Laboratories）から入手した。酵素は使用前にＴＢＳＡに希釈した。ＴＢＳＡ５０μＬ、ＴＢＳＡ中阻害剤またはＴＢＳＡ（負の対照として）５０ μＬおよび２ｎＭヒトＸＩａ因子またはＴＢＳＡ（バックグランド対照として）５０μＬを適当なウェル中で合わせることによりアッセイを行った。室温で６０分間この混合物をインキュベートした後、６ｍＭのＳ−２３６６５０μＬを各々ウェルに加え、各々ウェルの４０５ｎｍ（ＯＤ_405nm）での初期変化率を測定した。ＯＤ_405nmを５分間１０秒おきに測定した。（ｃ）トロンビンアッセイ酵素活性をカビ・ダイアノスティカ社から市販のＳ２２３８（Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−ピペコリル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリド二塩酸塩）を基質として使用して測定した。基質は使用する前に脱イオン水中に溶かした。ヒトα−トロンビンをエンザイム・リサーチ・ラボラトリーズ（Enzyme Resea rch Laboratories）から入手した。酵素は使用前にＴＢＳＡに希釈した。ＴＢＳＡ５０μＬ、ＴＢＳＡ中阻害剤またはＴＢＳＡ（負の対照として）５０ μＬおよび４ｎＭのヒトα−トロンビンまたはＴＢＳＡ（バックグランド対照として）５０μＬを適当なウェル中で合わせることによりアッセイを行った。室温で６０分間この混合物をインキュベートした後、０．２４ｍＭのＳ−２２３８５０μＬを各々ウェルに加え、各々ウェルの４０５ｎｍ（ＯＤ_405nm）での初期変化率を測定した。ＯＤ_405nmを５分間１０秒おきに測定した。（ｄ）ｔＰＡアッセイ酵素活性をセンターケミ（Centerchem）社から市販のペファクローム（Pefach rome）tＰＡ（Ｏ−メチルスルホネート−Ｄ−ヘキサヒドロチロシン−Ｌ−グリシル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリド酢酸塩）を基質として使用して測定した。基質は使用する前に脱イオン水中に溶かした。ヒト組み換え型ｔ−ＰＡ（アクチベース（Activase）（登録商標））をジェネンテック（Genentech）社から入手した。酵素は水で戻し、ついで、使用前にＴＢＳＡに希釈した。ＴＢＳＡ５０μ、ＴＢＳＡ中阻害剤またはＴＢＳＡ（負の対照として）５０μ Ｌおよび４ｎＭのヒト組み換え型ｔＰＡまたはＴＢＳＡ（バックグランド対照として）５０μＬを適当なウェル中で合わせることによりアッセイを行った。室温で６０分間この混合物をインキュベートした後、４ｍＭペファクロームtＰＡ５０μＬを各々ウェルに加え、各々ウェルの４０５ｎｍ（ＯＤ_405nm）での初期変化率を測定した。ＯＤ_405nmを５分間１０秒おきに測定した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者リプカ、ウィリアム・チャールズアメリカ合衆国92024カリフォルニア、サン・ディエゴ、レッド・ロック・ドライブ 10819番

Claims

【特許請求の範囲】１．因子Ｘaの触媒活性を選択的に阻害するが、因子XIa、トロンビンおよび組織プラスミノゲン活性化因子は評価し得る程度には阻害しない分子量約１０００以下のペプチドアルデヒドであって、因子XIa、トロンビンおよび組織プラスミノゲン活性化因子に対して１０％以下の選択百分率を示すことによって特徴づけられる化合物。２．次式で表される化合物または薬学的に許容され得るこれらの塩：式中、Ｒ₁は、−（ＣＨ₂）₃−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ₂並びに該基のモノ− およびジ−アルキル置換誘導基（各々のアルキル基は独立して選択され、その炭素原子数は約１〜約７である)から成る群から選択される基を示し、Ｒ₂は、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約７〜約１５のアラルキル基から成る群から選択される基を示し、Ｒ₃は、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約７〜約１４のアリール基、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約７〜約１５のアラルキル基、および炭素原子数約１〜約７のアルキル基から成る郡から選択される基を示し、Ｒ₄は、炭素原子数約１〜約１２のアルキル基、炭素原子数約３〜約６のアルケニル基、炭素原子数約６〜約１４のアリール基、炭素原子数約７〜約１５のアラルキル基、炭素原子数約１〜約１２のアルコキシ基、炭素原子数約３〜約８のアルケニルオキシ基、炭素原子数約６〜約１４のアリールオキシ基、炭素原子数約７〜約１５のアラルキルオキシ基および炭素原子数約２〜約７のカルボキシアルキル基から成る群から選択される基を示す。３．Ｒ₁が−（ＣＨ₂）₃−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ₂である請求項２記載の化合物。４．Ｒ₂が、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって各環が随意に置換されたフェニルメチル基、ジフェニルメチル基、ビフェニルメチル基およびナフチルメチル基から成る群から選択され、Ｒ₃が、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって各環が随意に置換されたフェニル基、フェニルメチル基、ジフェニルメチル基、ビフェニル基、ビフェニルメチル基、ナフチル基およびナフチルメチル基から成る群から選択される請求項３記載の化合物。５．Ｒ₂がフェニルメチル基、１−ナフチルメチル基および２−ナフチルメチル基から成る群から選択され、Ｒ₃がフェニル基、フェニルメチル基および２− ナフチルメチル基から成る群から選択される請求項４記載の化合物。６．Ｒ₄がメチル基、エチル基、１，１−ジメチルエチル木、プロピル基、２ −メチルプロピル基、２,２−ジメチルプロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、シクロペンチル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシル基、シクロヘキシルメチル基、アダマンチル基、アダマンチルメチル基、２−プロペニル基、３−ブテニル基、１−ペンテニル基、２−ペンテニル基、５−ヘキセニル基、２−シクロペンテニル基、フェニル基、フェニルメチル基、ジフェニルメチル基、ビフェニル基、ビフェニルメチル基、ナフチル基、ナフチルメチル基、１ ,１− ジメチルエチルオキシ基、２−メチルプロピルオキシ基、２,２−ジメチルプロピルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロペンチルメチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、シクロヘキシルメチルオキシ基、アダマンチルオキシ基、アダマンチルメトキシ基、フェノキシ基、ベンジルオキシ基、ビフェニルメチルオキシ基、ナフチルオキシ基、ナフチルメチルオキシ基および２−カルボキシエチル基から成る群から選択される請求項５記載の化合物。７．Ｒ₄が１,１−ジメチルエチルオキシ基である請求項６記載の化合物。８．Ｒ₄がメチル基である請求項６記載の化合物。９．Ｒ₄が２−カルボキシエチル基である請求項６記載の化合物。１０．次式［１］〜［１０］で表される化合物群から選択される請求項２記載の化合物：１１．哺乳類における異常な血栓形成によって特徴づけられる疾患を予防もしくは処置するための薬剤組成物であって、薬学的に許容され得るキャリヤーおよび該血栓形成を防止するか、または該血栓の形成量を低減させるのに治療上有効な量の請求項１から１０いずれかに記載の化合物を含有する薬剤組成物。１２．哺乳類における異常な血栓形成を防止するか、または該血栓の形成量を低減させるのに治療上有効な量の請求項１から１０いずれかに記載の化合物を哺乳類に投与することを含む、血栓形成によって特徴づけられる哺乳類の疾患を予防もしくは処置する方法。１３．哺乳類における異常な血栓形成を防止するか、または該血栓の形成量を低減させるのに治療上有効な量の請求項１１記載の組成物を哺乳類に投与することを含む、血栓形成によって特徴づけられる哺乳類の疾患を予防もしくは処置する方法。１４．次式で表される化合物または薬学的に許容され得るこれらの塩：または式中、Arは次式：（式中、Ｘは水素原子、メチル基、ハロゲン原子およびエチル基から成る群から相互に独立して選択される基を示す）で表される基を示し、Ｒ₁は、−（ＣＨ₂）₃−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＯ₂）−ＮＨ₂並びに該基のモノ−およびジ−アルキル置換誘導基（各々のアルキル基は独立して選択され、その炭素原子数は約１〜約７である)から成る群から選択される基を示し、Ｒ₂は、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約７〜約１５のアラルキル基から成る群から選択される基を示し、Ｒ₃は、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約６〜約１４のアリール基、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって随意に置換されていてもよい炭素原子数約７〜約１５のアラルキル基、および炭素原子数約１〜約７のアルキル基から成る群から選択される基を示し、Ｒ₄は、炭素原子数約１〜約１２のアルキル基、炭素原子数約３〜約６のアルケニル基、炭素原子数約６〜約１４のアリール基、炭素原子数約７〜約１５のアラルキル基、炭素原子数約１〜約１２のアルコキシ基、炭素原子数約３〜約８のアルケニルオキシ基、炭素原子数約６〜約１４のアリールオキシ基、炭素原子数約７〜約１５のアラルキルオキシ基および炭素原子数約２〜約７のカルボキシアルキル基から成る群から選択される基を示す。１５．Ｒ₁が−（ＣＨ₂）₃−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＮＯ₂）−ＮＨ2である請求項１４記載の化合物。１６．Ｒ₂が、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって各環が随意に置換されたフェニルメチル基、ジフェニルメチル基、ビフェニルメチル基およびナフチルメチル基から成る群から選択され、Ｒ₃が、炭素原子数約１〜約４のアルキル基から独立して選択される１個または２個のアルキル基によって各環が随意に置換されたフェニル基、フェニルメチル基、ジフェニルメチル基、ビフェニル基、ビフェニルメチル基、ナフチル基およびナフチルメチル基から成る群から選択される請求項１５記載の化合物。１７．Ｒ₂がフェニルメチル基、１−ナフチルメチル基および２−ナフチルメチル基から成る群から選択され、Ｒ₃がフェニル基、フェニルメチル基および２ −ナフチルメチル基から成る群から選択される請求項１６記載の化合物。１８．Ｒ₄がメチル基、エチル基、１，１−ジメチルエチル木、プロピル基、２−メチルプロピル基、２，２−ジメチルプロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、シクロペンチル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシル基、シクロヘキシルメチル基、アダマンチル基、アダマンチルメチル基、２−プロペニル基、３−ブテニル基、１−ペンテニル基、２−ペンテニル基、５−ヘキセニル基、２−シクロペンテニル基、フェニル基、フェニルメチル基、ジフェニルメチル基、ビフェニル基、ビフェニルメチル基、ナフチル基、ナフチルメチル基、１，１−ジメチルエチルオキシ基、２−メチルプロピルオキシ基、２，２−ジメチルプロピルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロペンチルメチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、シクロヘキシルメチルオキシ基、アダマンチルオキシ基、アダマンチルメトキシ基、フェノキシ基、ベンジルオキシ基、ビフェニルメチルオキシ基、ナフチルオキシ基、ナフチルメチルオキシ基および２−カルボキシエチル基から成る群から選択される請求項１７記載の化合物。１９．Ｒ₄が１，１−ジメチルエチルオキシ基である請求項１８記載の化合物。２０．Ｒ₄がメチル基である請求項１８記載の化合物。２１．Ｒ₄が２−カルボキシエチル基である請求項１８記載の化合物。２２．次式［１１］〜［２０］で表される化合物群から選択される請求項１４記載の化合物：