HU222199B1 - Véralvadásgátló hatású peptid-aldehid-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények - Google Patents
Véralvadásgátló hatású peptid-aldehid-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények Download PDFInfo
- Publication number
- HU222199B1 HU222199B1 HU9601527A HUP9601527A HU222199B1 HU 222199 B1 HU222199 B1 HU 222199B1 HU 9601527 A HU9601527 A HU 9601527A HU P9601527 A HUP9601527 A HU P9601527A HU 222199 B1 HU222199 B1 HU 222199B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- arg
- pro
- hydroxyacetyl
- thrombin
- cycloheptyl
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 title description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 55
- -1 2-cycloheptyl-2-hydroxyacetyl Chemical group 0.000 claims abstract description 25
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 15
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 claims abstract description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229960002429 proline Drugs 0.000 claims abstract description 9
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 claims abstract description 3
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 claims abstract description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 claims description 15
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 claims description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 31
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 abstract description 24
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 18
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 abstract description 16
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 abstract description 16
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 10
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 52
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 51
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 16
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 16
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 16
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 14
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 14
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 13
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 12
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 11
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 11
- LVCPRLFCRFDKSQ-ULQDDVLXSA-N (2s)-5-(diaminomethylideneamino)-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-(methylamino)-3-phenylpropanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoic acid Chemical compound C([C@H](NC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 LVCPRLFCRFDKSQ-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 10
- CWNPOQFCIIFQDM-UHFFFAOYSA-N 3-nitrobenzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 CWNPOQFCIIFQDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 108010019228 N-methylphenylalanyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 10
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 9
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 9
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 9
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 9
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 229910000343 potassium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 8
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 238000004296 chiral HPLC Methods 0.000 description 7
- 238000002143 fast-atom bombardment mass spectrum Methods 0.000 description 7
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- JTNCEQNHURODLX-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanimidamide Chemical compound NC(=N)CC1=CC=CC=C1 JTNCEQNHURODLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 6
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 6
- 230000003024 amidolytic effect Effects 0.000 description 6
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- 230000020764 fibrinolysis Effects 0.000 description 6
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 6
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 6
- WHZPPIIMQBJUHW-ZCFIWIBFSA-N (2r)-2-cyclopentyl-2-hydroxyacetic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)C1CCCC1 WHZPPIIMQBJUHW-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 5
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 5
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 5
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 5
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 5
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 5
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 5
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 5
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 5
- NTUPOKHATNSWCY-PMPSAXMXSA-N (2s)-2-[[(2s)-1-[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 NTUPOKHATNSWCY-PMPSAXMXSA-N 0.000 description 4
- VYLJFJGMPYBPMN-VXKWHMMOSA-N (2s)-n-[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]-1-[2-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]acetyl]pyrrolidine-2-carboxamide Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)NCC(=O)N1[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)CCC1 VYLJFJGMPYBPMN-VXKWHMMOSA-N 0.000 description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 108010003977 aminoacylase I Proteins 0.000 description 4
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 4
- 108010018472 chromozym TH Proteins 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- WEVKQMBWAPJFSP-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;2-pyridin-2-ylacetic acid;hydrate Chemical compound O.CCOC(C)=O.OC(=O)CC1=CC=CC=N1 WEVKQMBWAPJFSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 4
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 108010089198 phenylalanyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 4
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- MWIXENPCUPDSOS-MRVPVSSYSA-N (2r)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanehydrazide Chemical compound NNC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MWIXENPCUPDSOS-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 3
- ZYECEUZMVSGTMR-LBDWYMBGSA-N (4s)-4-[[(2s,3s)-2-benzamido-3-methylpentanoyl]amino]-5-[[2-[[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound N([C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZYECEUZMVSGTMR-LBDWYMBGSA-N 0.000 description 3
- WHZPPIIMQBJUHW-UHFFFAOYSA-N 2-cyclopentyl-2-hydroxyacetic acid Chemical compound OC(=O)C(O)C1CCCC1 WHZPPIIMQBJUHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 3
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 3
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical class C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 3
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010031969 benzoyl-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilide Proteins 0.000 description 3
- 108090001015 cancer procoagulant Proteins 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- UHBYWPGGCSDKFX-VKHMYHEASA-N gamma-carboxy-L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(C(O)=O)C(O)=O UHBYWPGGCSDKFX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960003766 thrombin (human) Drugs 0.000 description 3
- 229940019333 vitamin k antagonists Drugs 0.000 description 3
- UJPXNCODVPXBRK-QMMMGPOBSA-N (2S)-2-cycloheptyl-2-hydroxyacetic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)C1CCCCCC1 UJPXNCODVPXBRK-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 2
- UJPXNCODVPXBRK-MRVPVSSYSA-N (2r)-2-cycloheptyl-2-hydroxyacetic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)C1CCCCCC1 UJPXNCODVPXBRK-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UJPXNCODVPXBRK-UHFFFAOYSA-N 2-cycloheptyl-2-hydroxyacetic acid Chemical compound OC(=O)C(O)C1CCCCCC1 UJPXNCODVPXBRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 description 2
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 206010062506 Heparin-induced thrombocytopenia Diseases 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 125000002059 L-arginyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])C(=N[H])N([H])[H] 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000906446 Theraps Species 0.000 description 2
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 2
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GGISZLOBBISXOZ-UHFFFAOYSA-N acetic acid;chloroform Chemical compound CC(O)=O.ClC(Cl)Cl GGISZLOBBISXOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PCLAKSWBUSIJQV-SNVBAGLBSA-N acetyl (2R)-2-cycloheptyl-2-hydroxyacetate Chemical compound CC(=O)OC(=O)[C@H](O)C1CCCCCC1 PCLAKSWBUSIJQV-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 2
- PCLAKSWBUSIJQV-UHFFFAOYSA-N acetyl 2-cycloheptyl-2-hydroxyacetate Chemical compound CC(=O)OC(=O)C(O)C1CCCCCC1 PCLAKSWBUSIJQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 2
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 description 2
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N benzo-alpha-pyrone Natural products C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 2
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 2
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 description 2
- 150000004775 coumarins Chemical class 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N cyclohexylamine Chemical compound NC1CCCCC1 PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 2
- 229940106780 human fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 239000012280 lithium aluminium hydride Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 2
- CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M potassium bisulfate Chemical compound [K+].OS([O-])(=O)=O CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 108010014806 prothrombinase complex Proteins 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- FBVVGPMIPAZFAW-RZVRUWJTSA-N (2S)-pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1.OC(=O)[C@@H]1CCCN1 FBVVGPMIPAZFAW-RZVRUWJTSA-N 0.000 description 1
- OIXLLKLZKCBCPS-KRSQWWHXSA-N (2r)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid;(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N.OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N OIXLLKLZKCBCPS-KRSQWWHXSA-N 0.000 description 1
- WAMWSIDTKSNDCU-SSDOTTSWSA-N (2r)-2-azaniumyl-2-cyclohexylacetate Chemical compound OC(=O)[C@H](N)C1CCCCC1 WAMWSIDTKSNDCU-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- KUNFMZSTKSLIEY-NWKMIUOTSA-N (2r)-2-azanyl-3-phenyl-propanoic acid Chemical group OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1.OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 KUNFMZSTKSLIEY-NWKMIUOTSA-N 0.000 description 1
- HOZBSSWDEKVXNO-BXRBKJIMSA-N (2s)-2-azanylbutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O HOZBSSWDEKVXNO-BXRBKJIMSA-N 0.000 description 1
- WHZPPIIMQBJUHW-LURJTMIESA-N (2s)-2-cyclopentyl-2-hydroxyacetic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)C1CCCC1 WHZPPIIMQBJUHW-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- LJCBAPRMNYSDOP-LVCYMWGESA-N (2s)-3-(7-carbamimidoylnaphthalen-2-yl)-2-[4-[(3s)-1-ethanimidoylpyrrolidin-3-yl]oxyphenyl]propanoic acid;hydron;chloride;pentahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.Cl.C1N(C(=N)C)CC[C@@H]1OC1=CC=C([C@H](CC=2C=C3C=C(C=CC3=CC=2)C(N)=N)C(O)=O)C=C1 LJCBAPRMNYSDOP-LVCYMWGESA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SUNMBRGCANLOEG-UHFFFAOYSA-N 1,3-dichloroacetone Chemical class ClCC(=O)CCl SUNMBRGCANLOEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole;hydrate Chemical compound O.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 PJUPKRYGDFTMTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010002388 Angina unstable Diseases 0.000 description 1
- 206010003178 Arterial thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010003658 Atrial Fibrillation Diseases 0.000 description 1
- 206010048632 Atrial thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- QVTNGNIJBRFGJQ-BYZBDTJCSA-N C1(CCCC1)[C@H](C(=O)O)O.C1(CCCC1)[C@H](C(=O)O)O Chemical compound C1(CCCC1)[C@H](C(=O)O)O.C1(CCCC1)[C@H](C(=O)O)O QVTNGNIJBRFGJQ-BYZBDTJCSA-N 0.000 description 1
- BAGJQDUVTBWOED-HFEGYEGKSA-N C1(CCCCC1)[C@H](C(=O)O)O.C([C@H](O)C1CCCCC1)(=O)O Chemical compound C1(CCCCC1)[C@H](C(=O)O)O.C([C@H](O)C1CCCCC1)(=O)O BAGJQDUVTBWOED-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- IAHMVJQXUHWUKG-NWKMIUOTSA-N C1(CCCCCC1)[C@H](C(=O)O)O.C1(CCCCCC1)[C@H](C(=O)O)O Chemical compound C1(CCCCCC1)[C@H](C(=O)O)O.C1(CCCCCC1)[C@H](C(=O)O)O IAHMVJQXUHWUKG-NWKMIUOTSA-N 0.000 description 1
- MKNPYTPIYITIGW-UHFFFAOYSA-N CC(OC(C(C1CCCCCC1)O)=O)=O.C(CC1)CCC1NC1CCCCC1 Chemical compound CC(OC(C(C1CCCCCC1)O)=O)=O.C(CC1)CCC1NC1CCCCC1 MKNPYTPIYITIGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150075558 CHGA gene Proteins 0.000 description 1
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 1
- ZGUNAGUHMKGQNY-SSDOTTSWSA-N D-alpha-phenylglycine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000001711 D-phenylalanine group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 108010029144 Factor IIa Proteins 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 108010084967 LY 294291 Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- SCIFESDRCALIIM-VIFPVBQESA-N N-methyl-L-phenylalanine Chemical group C[NH2+][C@H](C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 SCIFESDRCALIIM-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Substances CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710184612 Protein slit Proteins 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 101000712605 Theromyzon tessulatum Theromin Proteins 0.000 description 1
- 229940122388 Thrombin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 208000007814 Unstable Angina Diseases 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- VABCILAOYCMVPS-UHFFFAOYSA-N acenocoumarol Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 VABCILAOYCMVPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYBMDTSKOGXNNC-UHFFFAOYSA-N acetyl 2-cyclopentyl-2-hydroxyacetate Chemical compound CC(=O)OC(=O)C(O)C1CCCC1 LYBMDTSKOGXNNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 150000003855 acyl compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011360 adjunctive therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229940061720 alpha hydroxy acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001280 alpha hydroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 239000003698 antivitamin K Substances 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- SHFDGTCGWUQUFU-CYBMUJFWSA-N benzyl (2R)-2-cyclopentyl-2-hydroxyacetate Chemical compound C1([C@@H](O)C(=O)OCC=2C=CC=CC=2)CCCC1 SHFDGTCGWUQUFU-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- NEDMOHHWRPHBAL-MERQFXBCSA-N benzyl (2s)-pyrrolidin-1-ium-2-carboxylate;chloride Chemical compound Cl.O=C([C@H]1NCCC1)OCC1=CC=CC=C1 NEDMOHHWRPHBAL-MERQFXBCSA-N 0.000 description 1
- VVCLBQFBKZQOAF-NSHDSACASA-N benzyl (2s)-pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound O=C([C@H]1NCCC1)OCC1=CC=CC=C1 VVCLBQFBKZQOAF-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000010523 cascade reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001627 cerebral artery Anatomy 0.000 description 1
- 229940068911 chloride hexahydrate Drugs 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007820 coagulation assay Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000002178 crystalline material Substances 0.000 description 1
- GICLSALZHXCILJ-UHFFFAOYSA-N ctk5a5089 Chemical group NCC(O)=O.NCC(O)=O GICLSALZHXCILJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WACQKHWOTAEEFS-UHFFFAOYSA-N cyclohexane;ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O.C1CCCCC1 WACQKHWOTAEEFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- MVEAAGBEUOMFRX-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hydrochloride Chemical compound Cl.CCOC(C)=O MVEAAGBEUOMFRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 108010073651 fibrinmonomer Proteins 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 1
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 1
- VOAPTKOANCCNFV-UHFFFAOYSA-N hexahydrate;hydrochloride Chemical compound O.O.O.O.O.O.Cl VOAPTKOANCCNFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 201000004332 intermediate coronary syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000013038 irreversible inhibitor Substances 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- UJKDYMOBUGTJLZ-RUCXOUQFSA-N ksc605q1h Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O UJKDYMOBUGTJLZ-RUCXOUQFSA-N 0.000 description 1
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 1
- 208000009928 nephrosis Diseases 0.000 description 1
- 231100001027 nephrosis Toxicity 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000011587 new zealand white rabbit Methods 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000031915 positive regulation of coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 239000013037 reversible inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012622 synthetic inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003868 thrombin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 201000005665 thrombophilia Diseases 0.000 description 1
- 108010065972 tick anticoagulant peptide Proteins 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 1
- PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N warfarin Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005080 warfarin Drugs 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
A találmány tárgyát az (I) általános képletű új peptid-aldehidszármazékok – D-Xaa-Pro-Arg-H (I) ahol Xaajelentése 2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil- vagy 2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-csoport, Pro jelentése L-prolin-gyök és Arg jelentéseL-arginin-gyök – és ezek szerves vagy szervetlen savval képzettsavaddíciós sói, valamint a fenti vegyületeket tartalmazógyógyszerkészítmények képezik. A találmány szerinti (I) általánosképletű vegyületek véralvadást és vérlemezke-funkciót, valaminttrombózisképződést gátló hatással rendelkeznek. ŕ
Description
A találmány tárgyát az (I) általános képletű új peptidaldehidszármazékok D-Xaa-Pro-Arg-H (I) ahol
Xaa jelentése 2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil- vagy 2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-csoport,
Pro jelentése L-prolin-gyök és
Arg jelentése L-arginin-gyök és ezek szerves vagy szervetlen savval képzett savaddíciós sói, valamint a fenti vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények képezik.
A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek értékes gyógyászati, közelebbről véralvadást és vérlemezke-fúnkciót, valamint trombózisképződést gátló hatással rendelkeznek.
A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek különösen értékes képviselői az alábbiak:
D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-L-argininaldehid hidrogén-szulfát
D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-L-argininaldehid hidrogén-szulfát Definíciók
A leírásban szereplő hidroxi- és aminosavak, valamint szubsztituensek és az ezekből felépített peptidek rövidítése megfelel a peptidkémiai irodalomban szokásos jelöléseknek.
Aminosavak: Arg=L-arginin [(2R)-2-amino-5-guanidino-pentánsav], Asp=L-aszparaginsav [(2S)-2-amino-3-karboxi-propionsav], boroArg=L-boro-arginin [(ÍR)-1 -amino-4-guanidino-butil-bórsav], D-Chg=D2- ciklohexil-glicin [(2R)-2-amino-ciklohexil-ecetsav], D-cHga=D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav [(2R)-2cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav], D-cPga=D-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav [(2R)-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav], Gla=gamma-karboxi-L-glutaminsav [(2S)-2-amino-4,4-dikarboxi-vajsav], Glu=L-glutaminsav [(2S)-2amino-4-karboxi-vajsav], Gly=glicin (2-amino-ecetsav), D-Hma=hexahidro-D-mandulasav [(2R)-2-ciklohexil-2-hidroxi-ecetsav], D-MePhe=N-metil-3-fenilD-alanin [(2R)-2-metil-amino-3-fenil-propionsav], DMePhg=D-N-metil-fenil-glicin [(2R)-2-amino-2-fenilecetsav], Nal(l)=3-(naftil-l)-L-alanin [(2S)-2-amino3- (naftil-l)-propionsav, D-Phe=3-fenil-D-alanin [(2R)-2-amino-3-fenil-propionsav], Pro=L-prolin [(2S)-pirrolidin-2-karbonsav],
Szubsztituensek: Ac=acetil, Boc=terc-butoxi-karbonil, Bz=benzoil, Bzl=benzil, Me=metil, 4MeP=4-metil-pentanoil, pNA=p-nitro-fenil-amino, THP=tetrahidropiranil, Tos=p-toluol-szulfonil, Z=benzil-oxi-karbonil.
Peptidek és származékaik: Az aminosavrövidítések önmagukban az L-aminosavat jelölik. A D-aminosavat különjelöljük, például a 3-fenil-D-alanin=D-Phe. Az aminosavrövidítések előtt és után álló kötőjel azt jelzi, hogy az aminocsoportról egy H-atom, illetve a karboxilcsoportról egy OH-csoport hiányzik. Ennek megfelelően a D-cHga-Pro-Arg-H jelentése D-2-cikloheptil-2hidroxi-acetil-L-prolil-L-arginin-aldehid, a Bz-Ile-GluGly-Arg-pNA jelentése pedig benzoil-L-izoleucil-Lglutamil-glicil-L-arginin-p-nitro-anilid.
A véralvadás a szervezet védekező mechanizmusának része. Érfalsérülés hatására indul el a folyamat, véralvadék keletkezik, hogy meggátolja az elvérzést. Emellett az ér betegsége, a vér pangása és az alvadási faktorok kóros aktiválódása is kiválthatja a véralvadást. Ilyenkor az éren belül keletkezik vérrög (trombus), ami azt részben vagy egészen eltömi, trombózis lép fel. A védekező mechanizmus másik része a fibrinolízis. Az ebben működő enzimek végzik a véralvadék feleslegének eltávolítását, és ezek vesznek részt a trombolízisben, a trombus oldásában is.
A véralvadás folyamata egy katalizált enzimreakció-sorozat, kaszkádreakció, amelyben plazmafehérjék, az úgynevezett alvadási faktorok aktiválódnak egymás után. A faktorokat római számokkal jelölik, az aktív formára a betű utal. Néhány esetében a triviális név (is) használatos: például fibrinogén=I faktor (fi), fibrin=Ia faktor (fia), protrombin=II faktor (fii) és trombin=IIa faktor (illa). Az alvadás során keletkeznek szerin-proteázok (fXIIa, fVIIa, fXIa, fIXa, fXa és trombin), néhány gyorsító kofaktor (fVa és fVIIIa), és maga az alvadó anyag (fibrin). A keletkező proteázok sorában a fXa és a trombin a két utolsó. A fXa hatására képződik a trombin, ami a fibrinogén hasításával kialakítja a fibrinalvadékot.
A véralvadás korábbi mechanizmusa [R. G. MacFarlane: Natúré 202, 498 (1964); E. W. Davie és O. D. Ratnoff: Science 145, 1310 (1964)] szerint a fX aktiválása két úton, az úgynevezett belső vagy külső úton történik. Az előbbi esetben a valamilyen felületen aktiválódott fXII (fXIIa) indítja el a folyamatot a fXI->fXIa átalakítással, amit a flX->fIXa átalakulás követ; a fiX aktiválását a fIXa végzi. A külső úton egy sejtfelszíni receptor, a szöveti faktor (TF, tissue factor) megjelenésével és a [fVIIxTF], illetve [fVIIa xTF] komplex kialakulásával indul a folyamat. A fX aktiválását a [fiVIla χ TF] komplex végzi.
Az újabb eredmények szerint az élő szervezetben lejátszódó véralvadás a fentiek kombinációja [E. W. Davie és munkatársai: Biochemistry 43, 10 363 (1991)], és a fontosabb lépései az alábbiak.
1. Az érfal sérülése vagy betegsége esetén a TF a felszínre kerül, és megköt valamennyit a vérben lévő VII faktorból. A képződött [fVIIxTF] komplex egy alkalmas, és legalább nyomnyi mennyiségben jelen lévő proteáz (például fXIIa, fXa, fIXa és trombin) hatására átalakul az aktív [fVIIax TF] enzimkomplexszé, ami aktiválja a plazmában lévő IX és X faktor kis részét (keletkezik kevés fIXa és fXa), majd inaktiválódik a TFPI [Tissue Factor Pathway Inhibitor, korábbi nevén LACI (Lipoprotein-Associated Coagulation Inhibitor)] hatására, ami a plazmában a fXa és a [fVIIa χ TF] komplex közös inhibitora [T. J. Girard és munkatársai: Natúré, 338, 518-520 (1989)].
2. A keletkezett fIXa a X faktorral és a fVIIIa gyorsítómolekulával foszfolipid (PL) felületen, Ca++-ion jelenlétében létrehozza az úgynevezett „tenase” komplexet:
[fIXa x fVIIIa xfXx PL xCa++], amiben a fX aktiválódik, keletkezik a fXa.
HU 222 199 Bl
3. Az eddig keletkezett fXa a protrombinnal (fii) és a fVa gyorsítómolekulával kialakítja a „tenase”-hoz hasonló felépítésű úgynevezett protrombinázkomplexet: [fXaxfVaxflIxPLxCa++]. Ebben megy végbe a protrombin—> trombin átalakulás. A fV-»fVa és fVIII->fVIIIa átalakulást a fXa vagy a trombin tudja elvégezni.
4. A keletkezett kevés trombin átalakítja a fXI egy részét fXIa enzimmé, és aktivál valamennyit a VIII és V faktorból, hogy újabb fVIIIa, illetve fVa keletkezzen. Most már a fXIa végzi el a IX faktor átalakítását flXa enzimmé. Ezzel újból elindulhat a Xáz-komplextől a trombin képződéséig vezető láncreakció. A folyamat ismétlődésével egyre több trombin keletkezik.
5. Kellően nagy trombinkoncentrációnál következik be a plazmában oldott fibrinogén részleges proteolízise, a fibrinmonomer képződése, ami előbb az úgynevezett oldható fibrinpolimerré asszociálódik, majd átalakul az oldhatatlan fibrinpolimerré. Ez utóbbi átalakulásban is szerepet játszik a trombin, mivel ennek hatására keletkezik a polimerizációt végző fXIIIa [L. Lorand és K. Konishi: Arch. Biochem. Biophys. 105, 58 (1964)].
Az oldhatatlan fibrinpolimer a véralvadék és a trombus egyik fő komponense, a másik összetevő a vérlemezke-aggregátum, mely ugyancsak a trombin hatására keletkezik elsősorban. A kialakuló trombus, illetve véralvadék magába zárja a folyamatban keletkezett trombin jelentős részét, ami újabb alvadási folyamatot indít el, amikor a trombus oldódása/oldása során oldatba kerül [A. K. Gash és munkatársai: Am. J. Cardiol. 57, 175 (1986)]; R. Kumar és munkatársai: Thromb. Haemost. 72, 713 (1994)].
A fentiekből kitűnik a trombin kulcsszerepe a trombus képződésében. Emiatt a trombózisos betegségek gyógyításában rendkívüli jelentőséggel bírnak az olyan anyagok, melyek a trombin működését és/vagy keletkezését gátolják.
A trombózis kezelésében és megelőzésében a jelenleg legelterjedtebben és legsikeresebben alkalmazott készítmények a heparinok és a K-vitamin antagonista kumarinok (például Syncumar és Warfarin), melyek közvetve gátolják a trombint.
A heparin katalizálja a trombin és természetes inhibitora, az antitrombin-III (AT-ΠΙ) közötti reakciót. A heparin ezen hatása azonban elmarad, ha az AT-III plazmakoncentrációja a normális 75%-ánál kisebb, [R. Egbring és munkatársai: Thromb. Haemost. 42, 225 (1979)]. Nem kevésbé fontos, hogy e közvetett mechanizmussal nem gátolható az említett trombus által kötött trombin, mert a heparin-AT-III-komplex számára nem hozzáférhető [J. I. Weitz és munkatársai: J. Clin. Invest. 86, 385 (1990)]. Mindemellett a kezelés hatására kialakuló vérzéses szövődmények, és immunkórfolyamat következtében kialakuló trombembóliás esetek előfordulása sem elhanyagolható (lásd például J. M. Walenga és munkatársai: Clin. Appl. Thrombosis/Hemostasis, 2(Suppl. 1), S21-S27 (1996)).
A K-vitamin antagonisták orálisan is adhatók. Hatásuk 16-24 óra után jelentkezik, és abban nyilvánul meg, hogy meggátolják némely alvadási faktor (például a protrombin) reaktív, Gla-tartalmú formáinak kialakulását. A terápiás hatáshoz részleges (60-70%-os) gátlás szükséges [Μ. P. Esnouf és C. V. Prowse: Biochim. Biophys. Acta 490, 471 (1977)], ami a gyógyszer megfelelő adagolásával érhető el. A K-vitamin antagonisták alkalmazását megnehezíti a keskeny terápiás sáv, valamint a táplálék összetételétől (K-vitamin) való nagyfokú függőség, és a változó egyedi érzékenység.
A trombint közvetlenül gátló első nagy hatású szintetikus anyag a D-Phe-Pro-Arg-H tripeptidaldehid volt, amely egy reverzibilis inhibitor, és mind in vitro, mind in vivő jelentős alvadásgátló hatást mutatott [S. Bajusz és munkatársai: In: Peptides: Chemistry, Structure and Biology (R. Walter and J. Meienhofer, Eds.), Ann Arbor Publ., Ann Arbor, Michigan, USA, 1975, pp. 603-608; Int. J. Peptide Protein Rés. 12, 217 (1978)]. A D-Phe-Pro-Arg-H számos rokon vegyületét állították elő. Az elsők között volt a Boc-D-Phe-Pro-Arg-H [S. Bajusz és munkatársai: Int. J. Peptide Protein Rés. 12, 217 (1978)], valamint a klór-metil-keton-analóg (DPhe-Pro-Arg-CH2C1), ami irreverzíbilis inhibitornak bizonyult [C. Kettner és E. Shaw: Thromb. Rés. 14, 969 (1979)]. A továbbiak közül kiemeljük a peptid és acilvegyületei boro-arginin-analógjait (D-Phe- és BocD-Phe-, valamint Ac-D-Phe-Pro-boroArg), melyek a trombin hatékony reverzibilis inhibitorai [C. Kettner és munkatársai: J. Bioi. Chem. 265, 18 289 (1990)] és a Boc-D-Phe-Pro-Arg-H egyéb analógjait, köztük a BocD-Chg-Pro-Arg-H analógot [P. D. Gesellchen és R. T. Shuman: EP 0 479 489 A2 (1992)].
Kitűnt, hogy a D-Phe-Pro-Arg-H vizes oldatban hajlamos spontán átalakulásra, de a terminális aminocsoport metilezésével kapott D-MePhe-Pro-Arg-H (GYKI-14 766) már megfelelően stabil és hasonlóan hatásos vegyület [S. Bajusz és munkatársai: 4,703,036 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (1987); J. Med. Chem. 33, 1729 (1990)]. Kísérleti állatokban jelentősen gátolja a véralvadást és trombusképződést [D. Bagdy és munkatársai: Thromb. Haemost. 67, 357 és 68, 125 (1992); J. V. Jackson és munkatársai: J. Pharm. Ex. Ther. 261, 546 (1992)]; a fibrinolízis enzimjeire gyakorolt gátlóhatása jelentéktelen, trombolitikumokkal együtt adva hatékonyan segíti a trombus oldódását [C. V Jackson és munkatársai: J. Cardiovasc. Pharmacol. 21, 587 (1993)], amire a heparin-AT-III komplex nem képes. A D-MePhe-Pro-Arg-H rokon vegyületeinek a szintézisére is sor került, például a D-MePhg-ProArg-H előállítására [R. T. Shuman és munkatársai: J. Med. Chem. 36, 314 (1993)].
A D-Phe-Pro-Arg-H újabb stabil és nagy hatású analógjait olyan módon kapták, hogy a terminális Pherészt α-hidroxi-acil-csoporttal helyettesítették. Némelyik, például D-2-ciklohexil-2-hidroxi-acetil analóg, a D-Hma-Pro-Arg-H, a Cl -hez hasonlóan nagy antikoaguláns és antitrombotikus hatást mutat [211 088 számú magyar szabadalmi leírás; S. Bajusz és munkatársai: Bioorg. Med. Chem. 8, 1079 (1995)].
A véralvadásgátló hatást (a folyamat proteolitikus reakcióinak gátlását) az alvadási tesztekben mérik, például a trombin idő (TT), aktivált parciális tromboplasz3
HU 222 199 Bl tin idő (APTT) és protrombin idő (PT) tesztben (E. J. W. Bovie és munkatársai: Mayo Clinic Laboratory Manual of Hemostasis; W. B. Sanuders Co., Philadelphia, 1971). A spontán alvadásban gátolt plazmát, például citrátplazmát alvadásra késztetnek, és mérik az alvadási időt. Alvadásgátlók hatására az alvadási idő megnyúlik a rendszerben működő reakció(k) gátlásával arányosan. Az alvadásgátló hatás jellemezhető például azzal az anyagkoncentrációval, aminél az alvadási idő a kontroll kétszeresére nyúlik (IC50). Az alvadásgátlóknak az egyes alvadási proteázokra gyakorolt hatását pedig az úgynevezett amidolitikus módszerrel mérik [R. Lottenberg és munkatársai: Methods Enzymol. 80, 341 (1981); G. Cleason: Blood Coagulation and Fibrinolysis 5, 411 (1994)]. Az izolált aktív faktort (például trombin, fXa) és ennek kromogén vagy fluorogén peptid-amid-szubsztrátját reagáltatják az inhibitor távollétében, illetve jelenlétében. Az enzimgátló hatást például az amidolízisben mért gátlási állandóval (IC50) jellemzik.
A TT-tesztben a citrátplazmához adott trombin váltja ki az alvadást. A rendszerben működő trombin 22 pmol/ml, ennek gátlása mérhető jelen lévő fibrinogénen (a trombin egyik természetes szubsztrátján) plazmakomponensek jelenlétében. Az APTT- és PTtesztben az alvadási folyamat egésze zajlik. Az aktivátortól függően az úgynevezett belső, illetve külső úton aktiválódik a fX. A keletkező fXa a protrombint aktiválja trombinná, ami végül kiváltja a plazma alvadását. Az alvadási idő megnyúlik, ha az inhibitor gátolja a tesztekben működő enzimeket vagy ezek valamelyikét. Amíg a Xa faktorból legfeljebb 40 pmol/ml keletkezhet az APTT- és PT-tesztben (ennyi X faktor van jelen a két rendszerben), a trombinból kb. 150 pmol/ml (APTT), illetve 350 pmol/ml (PT) képződik [vö. B. Kaiser és munkatársai: Thromb. Rés. 65, 157 (1992)].
A D-MePhe-Pro-Arg-H (Cl) esetében a TT-, APTT- és PT-tesztben a kétszeres alvadási időt eredményező koncentráció 87, 622, illetve 2915 nM. Ezek az értékek és a tesztekben működő trombin mennyisége (22, 150, illetve 350 pmol/ml) hasonlóan emelkedik, ami arra utal, hogy Cl az APTT- és PT-tesztben is trombingátlóként viselkedik, és például a fXa működését nem vagy alig befolyásolja. Ezzel összhangban van, hogy Cl IC50=2 nM értékkel gátolja a trombin amidolitikus hatását a Tos-Gly-Pro-Arg-pNA szubsztráton, míg a fXa amidolitikus hatását a megfelelő BzIle-Glu-Gly-Arg-pNA szubsztráton csak kevéssé, IC5O=9,1 mM értékkel gátolja (Bajusz S. és munkatársai : nem közölt eredmények).
A véralvadás mechanizmusából következik, hogy a folyamatot nemcsak a trombin közvetlen inhibitorai, de a trombin képződését akadályozó anyagok is gátolják, például a fXa inhibitorok. Jelentős véralvadást és trombusképződést gátló hatással rendelkező fXa inhibitor például a kullancsból izolált 60 tagú polipeptid, a TÁP (Tick Anticoagulant Peptide) [L. Waxman és munkatársai: Science 248, 593 (1990); A. B. Kelly és munkatársai: Circulation 86, 1411 (1992)] és a DX-9065a (C2), egy szintetikus nempeptid: (+)-(2S)-2-[4-[[(3S)-lacetimidoil-3-pirrolidinil]-oxi]-fenil]-3-[7-amidino-2naftil]-propionsav-hidrogén-klorid-pentahidrát [T. Hara és munkatársai: Thromb. Haemost. 71, 314 (1994); T. Yokoyama és munkatársai: Circulation 92, 485 (1995)]. Ezek az anyagok erősen gátolják a fXa amidolitikus hatását és a plazma alvadását a PT- és APTT-tesztben. Vagyis egyaránt jól gátolják a szabad és a komplexben lévő Xa faktort. Ugyanakkor - mint specifikus fXa inhibitorok - a trombint nem gátolják, a TT-tesztben nem hatnak. A fXa szintetikus peptid inhibitora példáid a 4MeP-Asp-Pro-Arg-H (C3) (WO 93/15756 számú alatt publikált nemzetközi bejelentés) és a Boc-D-PheNal(l)-Arg-H (C4) (WO 95/13693 számú alatt publikált nemzetközi bejelentés). A közlés szerint C3 és C4 IC50=57, illetve 30 nM értékkel gátolja a fXa amidolitikus hatását a Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA szubsztráton; alvadásgátló hatásukra nincs adat. Saját méréseinkben BzIle-Glu-Gly-Arg-pNA szubsztráton is jelentős gátlóhatást mutatott C3 és C4, míg alvadásgátló hatásuk a plazmaalvadási tesztekben rendkívül kicsi. Az 1. táblázat mutatja a fenti szintetikus fXa inhibitorokra közölt (C2)„ illetve kapott (C3-C4) aktivitási értékeket összehasonlításban a Cl trombingátló adataival.
Az 1. táblázat adataiból látszik, hogy a PT- és APTTtesztben észlelt alvadásgátló hatás Cl esetében trombingátlásra, C2-nél pedig fXa gátlására vezethető vissza. C3 és C4 jelentős fXa-gátló hatása azonban nem jár együtt számottevő alvadásgátlással. Valószínű, hogy C3 és C4 számára nem hozzáférhető a protrombinázkomplexben lévő fXa aktív centruma, ezek a peptidek csak a szabad, oldatban lévő Xa faktort képesek gátolni.
1. táblázat
Ismert szintetikus inhibitorok Xa faktort gátló (A) és alvadásgátló (B) hatása
| A: | B: IC50, μΜ“ | |||
| Inhibitor | IC50, nMb | PT | APTT | TT |
| Cl | 9133 | 2,91 | 0,62 | 0,09 |
| C2 | 70 | 0,52 | 0,97 | NAC |
| C3 | 64 | 19,32 | 4,59 | 0,87 |
| C4 | 86 | 53,62 | 9,96 | 17,24 |
a Peptidkoncentráció, melynél az alvadási idő a kontroll kétszeresére nyúlik a protrombin idő (PT), aktivált parciális tromboplasztin idő (APTT) és trombin idő (TT) tesztben.
b Izolált humán Xa faktorral Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA kromogén szubsztráton mért érték. cNA=nem aktív.
Újabb közlés szerint [N. A. Prager és munkatársai: Circulation 92, 962 (1995)] a trombusba/véralvadékba zárt, és az oldódás során onnan kiszabaduló alvadási enzimek közül nemcsak a trombin, de a Xa faktor is hozzájárul az újabb alvadási folyamat elindításához és fenntartásához, például a [fVII χ TF]-komplex, illetve az V és VIII faktor aktiválása révén. Előnyös tehát, ha az alvadásgátlók a trombin mellett a Xa faktor gátlására is
HU 222 199 Β1 képesek, és különösen előnyös, ha e gátlóhatás az alvadókba zárt trombinra és Xa faktorra is kiterjed.
A találmány célja olyan új peptidszármazékok előállítása, melyek a véralvadás folyamatát az ismerteknél előnyösebben gátolják, és gátlóhatásuk orális adás esetén is megnyilvánul.
Megfigyeltük, hogy az ismert a-D-hidroxi-acil-Lprolil-L-arginin-aldehidek [S. Bajusz és munkatársai: Bioorg. Med. Chem. 8, 1079 (1995)] mintegy 30-szor kisebb IC50 értékkel gátolják a Xa faktor amidolitikus hatását, mint Cl, amihez hasonlóan jelentős véralvadásgátló hatást mutatnak. Ilyen például a D-2-ciklohexil2-hidroxi-acetil-analóg, a D-Hma-Pro-Arg-H (C5). Most meglepő módon azt találtuk, hogy a 2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsawal és 2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsavval kapott analógok, a D-cHga- és D-cPga-ProArg-H, még fokozottabban gátolják a Xa faktort, s emellett változatlanul jelentős véralvadást gátló hatást mutatnak.
A fentiek alapján a találmány tárgyát az (I) általános képletű új peptidszármazékok D-Xaa-Pro-Arg-H (I) ahol
Xaa jelentése 2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-, vagy 2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-csoport,
Pro jelentése L-prolin-gyök és
Arg jelentése L-arginin-gyök és ezek szerves vagy szervetlen savval képzett savaddíciós sói, valamint a fenti vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények képezik.
A találmány tárgyát képező (I) általános képletű mely képletben Xaa, Pro és Arg jelentése a fenti - vegyületek előállításánál például úgy járunk el, hogy a OH-csoportján Q védőcsoporttal védett Q-D-Xaa-Pro acil-dipeptidet kondenzálunk guanidinocsoportján benzil-oxi-karbonil-csoporttal védett L-arginin-laktámhoz, majd a kapott védett peptid-laktámot Q-D-Xaa-ProArg(Z)-H képletű védett peptidaldehiddé redukáljuk, végül az arginin guanidonocsoportjáról a Z-csoportot, az α-hidroxicsoportról a Q-csoportot eltávolítjuk, és az (I) általános képletű peptidszármazékot valamilyen szerves vagy szervetlen savaddíciós só formájában elkülönítjük.
A kiindulási vegyületként alkalmazott Q-D-Xaa-Pro acil-dipeptidet például úgy állítjuk elő, hogy a megfelelő D-Xaa α-hidroxisavat benzil-észterré alakítjuk, OH-csoportját Q védőcsoporttal védjük, majd a kapott Q-D-Xaa-OBzl-t hidrogenolízissel szabad savvá alakítjuk és L-prolin-benzil-észterhez kapcsoljuk. A szükséges O-védett acil-dipeptidet a benzil-észter hidrogenolízissel való eltávolítása után kapjuk.
Az L-prolinhoz való kapcsoláshoz szükséges Q-DXaa OH-csoportján Q védőcsoporttal védett a-hidroxisavat előnyösen úgy állíthatjuk elő, hogy a DL-Xaa racém vegyületet O-acetilezzük, majd az enzimes hidrolízissel nyerhető Ac-D-Xaa-ról az acetilcsoportot eltávolítjuk. Előnyösen úgy is eljárhatunk, hogy a DLXaa racém vegyületet D-tirozin-hidraziddal rezolváljuk.
A találmány tárgyát képező (I) általános képletű mely képletben Xaa, Pro és Arg jelentése a fenti - vegyületek erős véralvadásgátló hatást fejtenek ki in vitro és in vivő egyaránt, előnyös biológiai hasznosulás mellett.
Az (I) általános képletű vegyületek in vitro kifejtett véralvadásgátló hatását a protrombin idő (PT), az aktivált parciális tromboplasztin idő (APTT) és a trombin idő (TT) tesztben határoztuk meg [D. Bagdy és munkatársai: Thromb. Haemost. 67, 325 (1992)]. Ugyancsak meghatároztuk a vegyületek Xa faktort gátló hatását a Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA kromogén szubsztráton (lásd M6. módszer).
A kapott eredményeket a 2. táblázatban mutatjuk be; Cl és C5 megfelelő adatai kontrollként szerepelnek. A táblázat a vegyületeket a PT-aktivitás csökkenő sorrendjében tartalmazza. Az adatokból kitűnik a terminális cHga- és cPga-rész előnyös befolyása a Hma- és MePhe-részekkel szemben.
2. táblázat
A találmány szerinti új peptidil-arginin-aldehidek és hasonló szerkezetű kontrollvegyületek alvadásgátló (A) és Xa faktort gátló (B) hatása a PT-aktivitás csökkenő sorrendjében
| A: IC50, μΜ’ | B: IC50 | |||
| Peptidil-arginin-aldehid (Számb) | PT | APTT | TT | nM<* |
| D-cHga-Pro-Arg-H (J) 1 | 1,20 | 0,37 | 0,11 | 63 |
| D-cPga-Pro-Arg-H (2) | 2,03 | 0,71 | 0,10 | 107 |
| Kontrollvegyületek | ||||
| D-Hma-Pro-Arg-H (C5) | 2,14 | 0,79 | 0,22 | 247 |
| D-MePhe-Pro-Arg-H (Cl) | 2,92 | 0,62 | 0,09 | 9133 |
a Peptidkoncentráció, melynél az alvadási idő a kontroll kétszeresére nyúlik.
b Azonos a vegyületet leíró kiviteli példa számával, illetve kontrollvegyület (Cl, C5).
d Izolált humán Xa faktorral Bz-IIe-Glu-Gly-Arg-pNA szubsztráton mért érték (lásd Ml -M5. módszer).
HU 222 199 Bl citrátplazma rekalcinálásával, a fibringélt pedig humán fibrinogén humán trombinnal történő akasztásával nyertük, a Xa faktor és a trombin aktivitásának mérésére a Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA, illetve Tos-Gly-Pro5 Arg-pNA szubsztrátot használtuk (lásd Ml -M5. módszer).
Az (I) általános képletű vegyületeknek a plazmaalvadékba zárt Xa faktort és trombint gátló hatását, valamint a fibringélhez kötött trombingátló hatását a 3. táblázatban mutatjuk be az 7 jelű vegyület példáján; a Cl és C5 esetében talált megfelelő értékeket kontrollként tüntetjük fel. A plazmaalvadékot lemezkedús humán
3. táblázat
A találmány szerinti új peptidil-arginin-aldehid (1) és kontrollvegyületek (Cl, C5) gátló hatása (IC50, μΜ) plazmaalvadékba zárt Xa faktorra és trombinra, valamint fibringélhez kötött trombinra8
| Plazmaalvadék | Fibringél | ||
| Peptidil-arginin-aldehid (számb) | Xa faktor | trombin | trombin |
| D-cHga-Pro-Arg-H (1) | 0,20 | 0,52 | 0,21 |
| Kontrollvegyületek | |||
| D-MePhe-Pro-Arg-H (Cl) | 1,12 | 0,38 | 0,30 |
| D-Hma-Pro-Arg-H (C5) | 0,19 | 0,27 | 0,22 |
a Az IC50 értékek meghatározásánál a Xa faktor és trombin aktivitását Moc-D-Chg-Gly-Arg-pNA, illetve Tos-Gly-Pro-Arg-pNA szubsztráttal mértük az Ml -M5. módszerekben leírt módon.
b Azonos az új vegyületet leíró kiviteli példa számával, illetve kontrollvegyület (Cl és C5).
Az adatokból kitűnik, hogy a találmány szerinti (1) képletű vegyület a lemezkedús humán plazmaalvadékba zárt Xa faktort és trombint, valamint a humán fibringélhez kötött trombint egyaránt mikromól alatti/nanomól nagyságrendű IC50 értékkel képes gátolni, hason- 30 lóan C5-höz.
A találmány szerinti új vegyületeknek plazminra (PL), valamint a szöveti plazminogén aktivátorral (tPA) és urokinázzal (UK) kiváltott plazminképződésre gyakorolt gátlóhatását a fibrinlemezmódszerrel vizsgáltuk [D. 35 Bagdy és munkatársai: Thromb. Haemost. 67, 325 (1992)]. Kontrollként a Cl és C3 vegyületet használtuk. Ezek közül Cl mésékelt fibrinolízist gátló hatása jelentéktelennek bizonyult in vivő, a kísérletes trombus oldásában jól használható volt adjuvánsként, míg C3 fibrinolízist gátló hatása in vivő is kimutatható volt [C. V. Jackson és munkatársai: J. Cardiovasc. Pharmacol. 21, 587 (1993)].
Példaként bemutatjuk az 7 és 2 jelű új vegyülettel, valamint a Cl és C3 kontrollal kapott eredményeket (4. táblázat). Az IC50 értékek mellett (A oszlopok) feltüntettük a vegyületeknek a C7-re vonatkoztatott relatív hatékonyságát is (B oszlopok). Ez utóbbiak jelzik, hogy az új 7 és 2 fibrinolízist gátló hatása a Cl vegyületéhez hasonlóan mérsékelt, a vizsgált három enzimmel szemben 7,5-12-39-szer kisebb aktivitásúak, mint a C3 vegyület.
4. táblázat
A találmány szerinti új peptidil-arginin-aldehidek és hasonló szerkezetű kontrollvegyületek gátlóhatása (IC50) plazminra (PL), valamint a szöveti plazminogén aktivátorral (tPA) és urokinázzal (UK) kiváltott plazminképződésre fibrinlemezen vizsgálva8
| A: IC50 és B: relatív hatékonyság11 | ||||||
| PL | tPA | UK | ||||
| Peptidil-arginin-aldehid (számc) | A | B | A | B | A | B |
| D-cHga-Pro-Arg-H (1) | 83 | 0,6 | 74 | 1,8 | 120 | 0,7 |
| D-cPga-Pro-Arg-H (2) | 3,9 | 0,13 | 112 | 1,2 | 137 | 0,6 |
| D-MePhe-Pro-Arg-H (Cl) | 54 | 1,0 | 132 | 1,0 | 82 | 1,0 |
| Boc-D-Phe-Pro-Arg-H (C3) | 12 | 4,5 | 6 | 22,0 | 3 | 27,3 |
a IC50=peptidkoncentráció (mM), melynél a fibrinlemezen a hidrolizált terület a kontroll 50%-ra csökken. b A Cl hatékonyságára (1/IC5O = 1) vonatkoztatott értékek.
c Azonos az új vegyületet leíró kiviteli példa számával, illetve kontrollvegyület (Cl és C3).
HU 222 199 Β1
Az (I) általános képletű vegyületek véralvadást és lemezkeaggregációt gátló hatását új-zélandi fehér nyulakban vizsgáltuk ex vivő a korábban leírt módon [D. Bagdy és munkatársai: Thromb. Haemost. 67, 357 (1992)]. A vegyületeket pufferolt fiziológiás konyhasóban oldva adtuk intravénás injekcióban (0,04-5,0 mg/kg) vagy infúzióban (0,25-5,0 mg/kg/h), illetve 0,5-6,0 mg/kg dózisban bőr alá vagy 2,5-20 mg/kg dózisban szájon át. A vegyületek hatása a szájon át történő beadás után <30 perccel már kimutatható, a legnagyobb értéket a 60-180. percben éri el, és a terápiás hatás dózisfiiggő módon fennmarad 3->6 órán át.
Részletesen a D-cHga-Pro-Arg-H (1) in vivő hatását mutatjuk be az 5. és 6. táblázatban; a Cl esetében talált megfelelő értékeket kontrollként tüntetjük fel. A vegyületet 5 mg/kg dózisban adtuk szájon át. Az állatok fiilvé5 nájából 30-60 percenként vett vérmintákat analizáltuk. Meghatároztuk a teljes vér alvadási idejét (WBCT), valamint a trombinnal kiváltható vérlemezke-aggregáció gátoltságának mértékét (PAI). Meghatároztuk továbbá a vérmintából nyert citrátplazma aktivált parciális trom10 boplasztin idejét (APTT) és trombin idejét (TT). Az APTT és TT értékeket az 5. táblázat, a WBCT és PAI értékeket a 6. táblázat tartalmazza.
5. táblázat
A D-cHga-Pro-Arg-H és a D-MePhe-Pro-Arg-H véralvadásgátló hatása nyulakban 5 mg/kg orális dózisnál az APTTés TT-tesztben relatív alvadási időkkel jellemezve3
| D-cHga-Pro-Arg-H (1) | D-MePhe-Pro-Arg-H (Cl) | |||
| Idő (p) | APTT | TT | APTT | TT |
| 0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
| 30 | 2,01±0,43 | 10,57±5,98 | 1,27+0,38 | 1,52+0,17 |
| 45 | 2,25±0,43 | 10,89±5,89 | 1,30+0,02 | 2,50+0,44 |
| 60 | 2,32±0,43 | 11,67±5,69 | 1,37+0,03 | 4,75±1,38 |
| 90 | 2,ll±0,31 | 14,00±6,48 | 1,45+0,09 | 10,50±5,49 |
| 120 | l,84±0,ll | 10,60±4,22 | 1,43+0,11 | 5,51 ±3,59 |
| 180 | l,66±0,10 | 2,22+0,71 | 1,39+0,09 | 2,05+0,38 |
| 240 | 1,37+0,08 | 1,23+0,07 | 1,31+0,11 | 1,81+0,39 |
| 300 | 1,31+0,09 | 1,13+0,05 | 1,25+0,22 | - |
3 A kezelt és nem kezelt állatokban mért alvadási idők hányadosa. A terápiás értékeket kiemeltük.
6. táblázat
A D-cHga-Pro-Arg-H és a D-MePhe-Pro-Arg-H véralvadást és vérlemezke-aggregációt (PAI) gátló hatása nyulakban 5 mg/kg orális dózisnál a WBCT-tesztben talált relatív alvadási idővel, illetve a %-os gátlással jellemezve3
| D-cHga-Pro-Arg-H (1) | D-MePhe-Pro-Arg-H (Cl) | |||
| Mő (p) | WBCT | PAI (%) | WBCT | PAI (%) |
| 0 | 1,0 | 0 | 1,0 | 0 |
| 30 | l,80±0,36 | 71,0±19,4 | 1,07+0,13 | 52,8±14,7 |
| 45 | 2,03±0,35 | 74,0±13,9 | 1,26+0,07 | 58,4±15,6 |
| 60 | l,98±0,30 | 91,0±4,5 | l,55±0,17 | 54,2±11,6 |
| 90 | l,78±0,26 | 93,0±3,5 | l,61±0,34 | 83,2±8,9 |
| 120 | l,52±0,13 | 92,4±6,5 | 1,45+0,21 | 75,2±12,3 |
| 180 | 1,29+0,07 | 71,6±19,8 | 1,44+0,08 | 47,5+20,9 |
| 240 | 1,13+0,04 | 49,4+21,5 | 1,22+0,08 | 32,2+16,0 |
a A kezelt és nem kezelt állatokban mért alvadási idők hányadosa. A terápiás értékeket kiemeltük.
HU 222 199 Bl
A táblázatok adataiból kitűnik, hogy az 1 jelű új vegyület az antikoaguláns (véralvadást gátló) és vérlemezke-aggregációt gátló hatás szempontjából egyaránt nagyobb és tartósabb hatású, mint a Cl kontrollvegyület.
A találmány szerinti (I) vegyületeket az alábbi trombózissal és/vagy fokozott véralvadékonysággal járó állapotok kezelésére és megelőzésére alkalmazzuk: mélyvénás trombózis, tüdőembólia, artériás trombózis, instabil angina, szívizomelhalás, pitvarfibrilláció, valamint trombózis alapon létrejött sztrók. Használhatók még érelmeszesedés esetén a koronária artéria és agyi artéria trombotikus megbetegedéseinek megelőzése céljából, magas rizikójú betegek sebészi profilaxisára, illetve egyéb sebészi profilaxisra. Ezenkívül alkalmazhatók trombolízis vagy perkután transzluminális angioplasztika kapcsán az újraelzáródás megelőzésére, továbbá hemodialízis esetén és nefrózisszindróma kiegészítő terápiájára, valamint a vér fokozott alvadékonyságával együtt járó kórképekben: a rosszindulatú daganatos és gyulladásos megbetegedésekben (például ízületi gyulladás), valamint cukorbetegségben. Alkalmazhatók továbbá olyan esetekben, amikor az egyéb antikoagulánsok adása nem elég hatékony vagy kontraindikált: például heparin esetében antitrombin-III hiánya vagy HIT (heparin indukálta trombocitopénia), kumarinok esetében például graviditás.
Gyógyászati célokra a jelen találmány szerinti vegyületeket és ezek gyógyászatilag elfogadható sóit alkalmazhatjuk önmagukban vagy célszerűen gyógyszerkészítmény formájában. Az ilyen készítmények szintén beletartoznak a jelen találmány oltalmi körébe.
E gyógyszerkészítmények hatóanyagként valamely (I) általános képletű vegyületnek vagy gyógyászatilag elfogadható sójának a hatás kifejtéséhez szükséges mennyiségét tartalmazzák a gyógyszerkészítésben szokásosan alkalmazott, önmagában ismert vivő-, töltőanyagok, hígítószerek és/vagy egyéb gyógyszerészeti segédanyagok kíséretében.
A fentieknek megfelelő vivő-, hígító-, illetve töltőanyagok például a víz, alkoholok, zselatin, laktóz, szacharóz, keményítő, pektin, magnézium-sztearát, sztearinsav, talkum, különböző állati vagy növényi olajok, valamint glikolok, például propilénglikol vagy polietilénglikol. A gyógyászati segédanyagok közé tartoznak a tartósítószerek, különböző természetes vagy szintetikus emulgeáló-, diszpergáló- vagy nedvesítőszerek, színezőanyagok, ízjavító szerek, pufferáló anyagok, szétesést elősegítő szerek és más, a hatóanyag biológiai hasznosulását elősegítő anyagok.
A találmány szerinti gyógyszerkészítmények a szokásos formákban lehetnek. Ilyen szokásos gyógyszerformák például az orális (szájon át adagolt) készítmények (tabletta, kapszula, por, pirula, drazsé vagy granulátum), valamint a parenterális (a gyomor- és bélrendszer megkerülésével adagolt) készítmények (injekciós vagy infúziós készítmények, a végbélkúp, tapasz vagy kenőcs).
Habár a jelen találmány szerinti vegyületeknek a gyógyászati hatás kifejtéséhez szükséges dózisa a kezelendő betegek egyéni állapotától és életkorától függ, ettől függően változhat, és végső soron a kezelőorvos határozza meg; az olyan betegségek megelőzésére és/vagy kezelésére, amelyben kívánatos a trombin működésének és/vagy keletkezésének gátlása általában e vegyületeknek a testtömeg 1 kg-jára számítva körülbelül 0,01 mg és körülbelül 1000 mg közötti, és előnyösen 0,25 mg és 20 mg közötti napi orális vagy parenterális, például intravénás dózisait használhatjuk.
A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek trombolitikumokkal (például tPA-val vagy urokinázzal) együtt adagolva hatékonyan segíthetik elő az artériákban vagy vénákban kialakult trombusok oldódását, illetve hatékonyan gátolhatják a trombusok újraképződését. Ilyen esetekben a találmány szerinti vegyületeket trombolitikumokkal egyidejűleg vagy a trombolitikus kezelést követően célszerű adagolni.
A találmány szerinti eljárást az alábbi kiviteli példákon mutatjuk be, anélkül, hogy a találmányt e példákra korlátoznánk.
A példákban megadott Rf értékeket rétegkromatográfiával határoztuk meg szilikagélen (DC-Alufolien Kieselgel 60 F254, Merck, Darmstadt) az alábbi oldószerekben:
1. Etil-acetát
2. Etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (480:20:6:11)
3. Etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (60:20:6:11)
6. Etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (240:20:6:11)
12. Etil-acetát-ciklohexán (1:9)
14. Kloroform-ecetsav (95:5)
A példákban megadott kapacitásfaktor-értékeket (k’) „Pharmacia LKB analytical HPLC System Two” berendezéssel határoztuk meg az alábbiak szerint.
Oszlop: „VYDAC C-18 reversed phase: 10 pm, 300 Á, 4 χ 250 mm”.
A puffer: 0,1% trifluor-ecetsav vízben.
Bpuffer: 0,1% trifluor-ecetsav acetonitrilben.
Az alkalmazott gradiens 1 ml/perc átfolyási sebesség mellett
I: 0-5 min 0-25% B, majd izokratikus 25% B;
II: 0-30 min 0-60% B.
A HPLC-analízisnél az alkalmazott gradienst (I vagy II) a példa egyes lépéseinél a rövidítés után zárójelben adjuk meg.
A példákban megadott optikai tisztaság értékeket a fent említett HPLC-berendezéssel határoztuk meg az alábbiak szerint, és zárójelbe tett „királis HPLC” kifejezéssel jelezzük.
Oszlop: Chiralpack WH (DAICEL) 4x250 mm
Eluens: 0,25 mM CuSO4; átfolyási sebesség 1 ml/perc.
Az analíziseket 50 °C-on végeztük.
Az eluátum peptidtartalmának detektálása UVfénnyel történt 214 nm-en. A minta töménysége 1 mg/ml A puffer (fordított fázis), illetve metanol (királis fázis), az injekciós térfogat 25 pl.
Az acil-arginin-aldehidek egyensúlyi formákban léteznek: aldehid és aldehid-hidrát, valamint két aminociklol formában.
HU 222 199 BI
Ezek közül az aldehid-hidrát és egy vagy mindkét amino-ciklol külön csúcsban jelenik meg a HPLC során. Ennek megfelelően az acil-arginin-aldehideket a talált két vagy három k’ értékkel jellemezzük a példákban.
Tömegspektroszkópia. A FAB pozitív ionizációs mérések Finnigan MÁT 8430 típusú készüléken történtek. A mintákat m-nitro-benzil-alkohol-mátrixban oldottuk fel, közvetlen mintabevezetéssel vittük be az ionfonásba. A peptidil-arginin-aldehidek spektrumában a molekulaion mellett a m-nitro-benzil-alkohol (NBA) oldószerrel képzett addíciós vegyület molekulaionja is megjelenik: [M+H]+, illetve [M+H+NBA]+. Ennek megfelelően adjuk meg a FAB tömegspektrum adatait a példákban. Az ESI pozitív ionizációs méréseket VG Quattro (Fisons) típusú készüléken történtek. A mintákat 1 térfogat% hangyasavat tartalmazó 1:1 arányú acetonitril-víz elegyben oldottuk fel, majd 10 ml-es mintahurok alkalmazásával, a vivő folyadék 15-25 ml/perc áramlási sebessége mellett áramoltattuk az ionforrásba.
A fajlagos forgatási értékeket ([a]D) 20 °C-on mértük.
1. példa
D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-Larginin-aldehid (D-cHga-Pro-Arg-H) hemiszulfát előállítása
1. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-NG-benzil-oxi-karbonil-Larginin-laktám
7,85 g (20,1 mmol) terc-butil-oxi-karbonil-NG-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-laktámot [S. Bajusz és munkatársai: J. Med. Chem. 33, 1729 (1990)] szuszpendálunk 20 ml kloroformban, majd keverés és jeges hűtés mellett hozzáadunk 20 ml sósavas etil-acetátot (töménysége 0,11-0,15 g/ml). A Boc-csoport lehasadását rétegkromatográfiával követjük [Rj(3)=0,5 (szabad vegyület); 1,0 (Boc-vegyület)]. A reakció végén a szuszpenziót 40 ml dietil-éterrel hígítjuk, a kivált kristályos anyagot kiszűijük, mossuk 10 ml acetonnal és 10 ml dietil-éterrel, majd mintegy két órán át szárítjuk vákuumexszikkátorban kálium-hidroxid mellett. A kapott NG-benzil-oxi-karbonil-L-arginin- laktámklór-hidrátot feloldjuk 20 ml dimetil-formamidban, lehűtjük -20 °C-ra és az alábbi vegyes anhidridhez adjuk.
7,1 g (20,1 mmol) tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolint (1. példa, I. lépés) feloldunk 20 ml dimetil-formamidban, lehűtjük -20 °C-ra, és keverés közben hozzáadunk 2,23 ml (20,1 mmol) Nmetil-morfolint, 2,65 ml (20,1 mmol) klór-szénsav-izobutil-észtert, majd 10 perc keverés után az NG-benziloxi-karbonil-L-arginin-laktámot tartalmazó fenti dimetil-formamidos oldatot, és végül annyi trietil-amint, hogy a reakcióelegy pH-ja 8 körül legyen (mintegy 2,8 ml szükséges). A reakcióelegyet 30 percen át keverjük -10 °C-on, majd 1 órán át 0 °C-on. Ezt követően a sókat kiszűijük, és a szűrletet hígítjuk 100 ml etil-acetáttal. A kapott oldatot mossuk 3 χ 25 ml vízzel, 10 ml 1 M kálium-hidrogén-szulfáttal és 3 χ 10 ml vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfáton történő szárítás után 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk. A kapott terméket 200 g Kieselgel 60-nal készített szilikagél oszlopon kromatografáljuk etil-acetátot alkalmazva eluensként. A terméket [Rf(l)=0,60] tisztán tartalmazó frakciókat egyesítjük, és 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot diizopropil-éterrel kristályosítjuk. 8,1 g (64%) cím szerinti terméket kapunk. Rf(l)=0,6. Olvadáspont: 66-68 °C. A FAB tömegspektrum (626 [M+H]+, 779 [M+H+NBA]+) a várt szerkezetet erősíti meg.
2. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-NG-benzil-oxi-karbonil-Larginin-aldehid
8,0 g (12,8 mmol) tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-NG-benzil-oxi-karbonil-L-ar ginin-laktámot (1. példa, 1. lépés) feloldunk 15 ml tetrahidrofiiránban, és keverés közben, -50 °C alatt hozzáadunk 3,6 mmol lítium-alumínium-hidridet tetrahidrofuránban oldva. A redukció előrehaladását rétegkromatográfiával követjük etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (240:20:6:11) rendszerben, és szükség szerint adagolunk további lítium-alumínium-hidridet. A reakcióelegyhez hűtés és keverés mellett annyi hűtött 0,5 M kénsavat csepegtetünk, hogy a pH 3 legyen, majd 35 ml vízzel hígítjuk. A kapott oldatot 2x15 ml n-hexánnal kirázzuk, majd 3x20 ml metilén-kloriddal kivonatoljuk. A metilén-kloridos oldatokat egyesítjük, mossuk 3 x 15 ml vízzel, 15 ml hideg 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal és 15 ml vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfáton történő szárítás után 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk. A maradékot diizopropil-éterrel eldörzsöljük, szüljük és vákuumexszikkátorban szárítjuk. 7,25 g (90%) cím szerinti terméket kapunk. Rf(6)=0,40. Olvadáspont: 107 °C. [a]D=+16,0° (c=l; tetrahidrofuránban). A FAB tömegspektrum (628 [M+H]+, 781 [M+H+NBA]+) a várt szerkezetet erősíti meg.
3. lépés: D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-L-arginin-aldehid-hemiszulfát
7,05 g (11,23 mmol) tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-NG-benzil-oxi-karbonil-L-ar ginin-aldehidet (1. példa, 2. lépés) feloldunk 60 ml etanolban, hozzáadunk 11,23 ml 0,5 M kénsavat és 13,3 ml vizet, majd 25 ml etanolban szuszpendált 0,7 g csontszenes palládiumkatalizátoit, és kb. 10 °C-on hidrogénezzük. A reakció - aminek előrehaladását rétegkromatográfiával követjük - mintegy 15 perc alatt lejátszódik. A katalizátort kiszűijük, és az oldatot 2,0-2,5 kPa nyomáson kb. 7-9 ml térfogatra töményítjük. A maradékot 80 ml vízzel hígítjuk, 4 χ 15 ml metilén-kloriddal kirázzuk, és a vizes oldatot 24 órán át állni hagyjuk 20-22 °C-on. Az oldatot ismét kirázzuk 3 χ 15 ml metilén-kloriddal, a pH-t 3,5-re állítjuk hidroxil-ciklusú Dowex AG 1-X8 ioncserélő gyantával, majd lefagyasztjuk és liofilizáljuk. 4,28 g (83%) cím szerinti terméket kapunk. [a]D=-94,7° (c=l; vízben). HPLC(I): k’=4,93 és 5,25. A FAB tömegspektrum (410 [M+H]+, 563 [M+H+NBA]+) a várt szerkezetet erősíti meg.
A kiindulási anyagot például az alábbi módon állítjuk elő:
HU 222 199 Bl
Tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxiacetil-L-prolin (THP-D-cHga-Pro) előállítása
A. lépés: O-acetil-DL-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav-diciklohexil-ammónium-só
1,72 g (10 mmol) DL-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsavat [H. Takeshita és munkatársai: Bull. Chem. Soc. Japán 47, 1767 (1974)] feloldunk 20 ml vízmentes piridinben, hozzáadunk 9,4 ml (100 mmol) ecetsavanhidridet, és az oldatot állni hagyjuk szobahőmérsékleten 24 órán át, majd 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk, és a maradékot feloldjuk 25 ml dietil-éterben. Az oldatot mossuk vízzel, 1 M kálium-hidrogén-szulfáttal, ismét vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfáton történő szárítás után bepároljuk. A maradékot 5 ml dietil-éterben oldjuk, hozzáadunk 2,1 ml (10,5 mmol) diciklohexilamint és 20 ml n-hexánt. Az oldatot hűtőszekrényben hagyjuk állni 2 napon át. A kivált kristályokat kiszűrjük, 3 χ 10 ml n-hexánnal mossuk, és levegőn szárítjuk. 2,56 g (64,6%) cím szerinti terméket kapunk.
Elemzési eredmény a C23H41NO4 (395,57) képletre vonatkoztatva:
számított: C%=69,83; H%=10,45; N%=3,54; talált: C%=69,9; H%=10,7 N%=3,5.
B. lépés: 0-acetil-DL-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav rezolválása aciláz I enzimmel
1,58 g (4,0 mmol) O-acetil-DL-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav-diciklohexil-ammónium-sót feloldunk 15 ml dietil-éterben és 5 ml 1 M kálium-hidrogén-szulfátban. A fázisokat elválasztjuk, a dietil-éteres fázist vízzel semlegesre mossuk, majd nátrium-szulfáton történő szárítás után bepároljuk. A maradék olaj 0,86 g (4,0 mmol) O-acetil-DL-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav, melyet feloldunk 20 ml 0,2 M nátrium-hidrogén-karbonátban, majd hozzáadunk 0,01 g kobalt(II)-kloridhexahidrátot és 0,005 mg Acylase I enzimet (Sigma, 2000-3000 egység/mg), és állni hagyjuk kb. 25°-on 3 napon át. A vizes oldatot 4,5 ml 1 M kálium-hidrogén-szulfáttal savanyítjuk és 3 χ 10 ml dietil-éterrel kirázzuk. A dietil-éteres fázisokat egyesítjük, vízzel mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáton történő szárítás után bepároljuk. A maradék olaj az enzim hatására keletkező L-2cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav [Rf(14)=0,2] és az enzimmel nem hasadó O-acetil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav [Rf(14)=0,5] keveréke, melyet szilikagél oszlopon kromatografálunk kloroform-ecetsav (95:5) elegyet alkalmazva. A termékeket tisztán tartalmazó frakciókat egyesítjük, 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk.
Az 1. párlási maradék [Rf(14)=0,5] 0,34 g (79%) olaj, az O-acetil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav, amit a következő C. lépésben közvetlenül felhasználunk.
A 2. párlási maradék [Rj(14)=0,2] 0,25 g (80%) szilárd anyag, az L-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav, amit n-hexánnal szűrünk és levegőn szárítunk. Olvadáspont: 78 °C. [a]D= + 18,15° (c=l, metanolban). Optikai tisztaság=kb. 95% (királis HPLC).
C. lépés: D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav (az Oacetil-származék Na-metilátos dezacetilezése)
Az előző B. lépésben kapott O-acetil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsavat (1. párlási maradék) feloldjuk ml metanolban, mely 1,59 mmol nátrium-metilátot tartalmaz. Az oldatot állni hagyjuk 24 órán át, majd bepároljuk. A maradékot 10 ml dietil-éterben és 2,5 ml 0,5 M kálium-hidrogén-szulfátban feloldjuk, a dietil-éteres fázist vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A kristályos maradékot hexánnal eldörzsöljük, szűrjük és levegőn szárítjuk. 0,21 g (61%) cím szerinti terméket kapunk. [a]D=-14,7° (c=l, metanolban). Optikai tisztaság=kb. 86% (királis HPLC).
D. lépés: D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav (a DLvegyület rezolválása D-tirozin-hidraziddal
17,2 g (100 mmol) DL-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsavat és 19,52 g (100 mmol) D-tirozin-hidrazidot szuszpendálunk 600 ml vízmentes etanolban, majd visszafolyós hűtő alatt forraljuk a teljes oldódásig. Miután az oldat szobahőmérsékletre hűlt, hűtőszekrényben tartjuk éjszakán át. A kivált kristályokat kiszűrjük, 2x20 ml hideg vízmentes etanollal mossuk és vákuumexszikkátorban szárítjuk. 19,54 g (53,18 mmol) diasztereomer sót kapunk, amit kétszer átkristályosítunk 15,3 ml/g mennyiségű vízmentes etanolból. 12,45 g (67,7%) diasztereomer sót kapunk, amit feloldunk 50 ml dietil-éterben és 50 ml 1 M kálium-hidrogén-szulfátban. A dietil-éteres fázist vízzel savmentesre mossuk, vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, majd 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk. A kristályos maradékot n-hexánnal eldörzsöljük, szűrjük, és levegőn szárítjuk. 5,61 g (32,57 mmol, 65,2%) D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsavat kapunk. Olvadáspont: 80 °C. [a]D=-20,2° (c=1; metanolban) és -30° (c=l; ecetsavban). Optikai tisztaság=>98% (királis HPLC).
Elemzési eredmény a C9H16O3 (172,22) képletre vonatkoztatva:
számított: C%=62,76; H%=9,36;
talált: C%=62,01; H%=9,31.
E. lépés: D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav-benzil-észter
5,51 g (32 mmol) D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsavat (1. példa, D. lépés) feloldunk 37 ml dimetil-formamidban, hozzáadunk 3,7 ml (31,3 mmol) benzil-bromidot és 6,34 ml (32 mmol) diciklohexil-amint, majd szobahőmérsékleten keveijük 24 órán át. A reakcióelegyet szűqük, és 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk. A maradékot feloldjuk 50 ml dietil-éterben és 50 ml 0,5 M káliumhidrogén-szulfátban. A dietil-éteres fázist vízzel savmentesre mossuk, majd mossuk 2 χ 10 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal és 2 χ 10 ml vízzel. Ezt követően vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk. 7,4 g (88%) cím szerinti terméket kapunk olaj formájában. Rj(12)=0,20. [a]D= + 13,2° (c=l; metanolban).
F. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav-benzil-észter
7,4 g (28 mmol) D-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav-benzil-észtert (1. példa, E. lépés) feloldunk 65 ml metilén-kloridban, hozzáadunk 3,6 ml (39,4 mmol) 2,4-dihidropiránt és 0,3 ml sósavas etil-acetátot (töménysége 0,11-0,15 g/ml), majd állni hagyjuk szobahőmérsékleten 16 órán át. A reakcióelegyet 40 ml metilén-kloriddal hígítjuk, mossuk 3x20 ml vízzel,
HU 222 199 Β1 χ 20 ml hideg 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal, ismét 2 χ 20 ml vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk. A kapott párlási maradékot [Rf(12)=0,30] 28 mmol cím szerinti terméknek tekintjük.
G. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-ecetsav mmol tetrahidropiranil-D-cikloheptil-2-hidroxiecetsav-benzil-észtert (1. példa, F. lépés) 50 ml metanolban feloldunk és 0,1 g csontszenes palládiumkatalizátor mellett hidrogénezzük. A reakció előrehaladását kromatográfiával követjük [Rf(12)=0,30 (észter); 0,00 (sav); R((2)=l,00 (észter); 0,8 (sav)]. A reakció végén a katalizátort kiszűijük, a szűrletet 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk, és a maradék olajat vákuumexszikkátorban szárítjuk. 6,7 g (25 mmol, 89%) cím szerinti terméket kapunk olaj formájában. Rf(2)=0,80.
H. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-benzil-észter mmol tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2hidroxi-ecetsavat (1. példa, G. lépés) feloldunk 25 ml dimetil-formamidban, és hozzáadunk 3,83 g (25 mmol) 1-hidroxi-benztriazol-hidrátot, 2,8 ml (25 mmol) N-metil-morfolint, és 6,04 g (25 mmol) L-prolin-benzil-észter-hidrogén-kloridot, majd jeges hűtés és keverés mellett 5,16 g (25 mmol) diciklohexil-karbodiimidet. A reakcióelegyet 1 órán át 0 °C-on és éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd szűrjük, és 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk. A maradékot feloldjuk 100 ml dietil-éterben, és rendre mossuk 3x20 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal, vízzel, 1 M kálium-hidrogén-szulfáttal és vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A párlási maradékot vákuumexszikkátorban szárítjuk. 9,9 g (90%) cím szerinti terméket kapunk olaj formájában. Rf(l)=0,80.
I. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolin
9,9 g (22,5 mmol) tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolin-benzil-észtert (1. példa, H. lépés) 100 ml metanolban feloldunk és 0,1 g csontszenes palládiumkatalizátor mellett hidrogénezzük. A reakció előrehaladását kromatográfiával követjük [Rf(l)=0,80 (észter); 0,00 (sav); Rj(2)=l,00 (észter); 0,30 (sav)]. A reakció végén a katalizátort kiszűrjük, a szűrletet 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk, és a maradék olajat vákuumexszikkátorban szárítjuk. 7,2 g (90%) cím szerinti terméket kapunk olaj formájában [Rj(2)=0,30], melynek nagyobb részét közvetlenül felhasználjuk a példa 1. lépésében, kisebb részét pedig kristályos sóvá alakítjuk az alábbi módon.
0,35 g (1 mmol) olajos tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolint feloldunk 5 ml dietiléterben és hozzáadunk 0,115 ml (1,05 mmol) ciklohexil-amint, a kivált kristályokat kiszűijük, dietil-éterrel mossuk, és vákuumexszikkátorban szárítjuk. 0,40 g (90%) tetrahidropiranil-D-2-cikloheptil-2-hidroxiacetil-L-prolin-ciklohexil-ammonium-sót kapunk. Olvadáspont: 146-150 °C. [a]D=-12,8° (c = l; etanolban). Elemzési eredmény a C25H44N2O5 (452,62) képletre vonatkoztatva:
számított: C%=66,34; H%=9,80; N%=6,19; talált: C%=66,2; H%=9,90; N%=6,08.
2. példa
D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-L-argininaldehid (D-cPga-Pro-Arg-H) hemiszulfát előállítása
1. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-NG-benzil-oxi-karbonil-Larginin-laktám
0,82 g (2,1 mmol) terc-butoxi-karbonil-NG-benziloxi-karbonil-L-arginin-laktámból [S. Bajusz és munkatársai: J. Med. Chem. 33, 1729 (1990)] és 0,68 g (2,1 mmol) tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxiacetil-L-prolinból (2. példa, G. lépés) kiindulva az 1. példa 1. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagensek és oldószerek felhasználásával - elvégezzük a komponensek kapcsolását és a végtermék kromatográfiás tisztítását. A végterméket [Rf(l)=0,4] tisztán tartalmazó frakciókat egyesítjük és 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk, majd a maradékot exszikkátorban szárítjuk. Az így nyert 0,59 g (47%) olajat 0,97 mmol cím szerinti terméknek tekintjük. A FAB tömegspektrum (598 [M+H]+, 751 [M+H+NBA]+) a várt szerkezetet erősíti meg.
2. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-NG-benzil-oxi-karbonil-Larginin-aldehid
0,56 g (0,93 mmol) tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-NG-benzil-oxi-kaibonil-L-arg inin-laktámot (2. példa, 1. lépés) az 1. példa 2. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagenseket és oldószereket alkalmazva - redukálunk azzal az eltéréssel, hogy a reakció előrehaladását követő rétegkromatográfiát etil-acetátban végezzük [Rf(l)=0,4 (laktóm), 0,0 (aldehid)]. 0,4 g (67%) cím szerinti terméket kapunk n-hexánnal eldörzsölve. R/6)=0,4. Olvadáspont: 91-93 °C.
A FAB tömegspektrum (600 [M + H]+, 753 [M+H+NBA]+) a várt szerkezetet erősíti meg.
3. lépés: D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-L-arginin-aldehid-hemiszulfát
0,38 g (0,63 mmol) tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-NG-benzil-oxi-karbonil-L-ar ginin-aldehidet (2. példa, 2. lépés) az 1. példa 3. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagensek és oldószerek alkalmazásával - átalakítva 0,22 g (81%) cím szerinti terméket kapunk. HPLC(I): k’=4,29 és 4,68.
A FAB tömegspektrum (382 [M+H]+, 535 [M+H+NBA]+) a várt szerkezetet erősíti meg.
A kiindulási anyagot például az alábbi módon állítjuk elő:
Tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetilL-prolin (THP-D-cPga-Pro) előállítása
A. lépés: O-acetil-DL-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav rezolválása aciláz I enzimmel
0,72 g (5,0 mmol) DL-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsavat [M. Robba és Y. Le Guen: Chim. Therap. 1966, 238; Chem. Abst. 66. 18 633f (1967)] az 1. példa A. és
B. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagensek és oldószerek alkalmazásával - acetilezünk, illetve aciláz I enzimmel hidrolizálunk, és a keletkező L-2-cik11
HU 222 199 Bl lopentil-2-hidroxi-ecetsavat [Rj(14)=0,35] és O-acetilD-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsavat [R/14)=0,52] elválasztjuk, majd utóbbit az 1. példa C. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagensek és oldószerek alkalmazásával - D-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsavvá alakítunk. Az ily módon kapott termékek:
a) 0,2 g (1,39 mmol) L-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav, olvadáspont: 108-109 °C; [a]D=-15,95° (c= 1, metanolban). Optikai tisztaság=99% (királis HPLC).
b) 0,16 g (1,1 mmol) D-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav, olvadáspont: 106 °C;
[a]D= + 15,5° (c=l, metanolban). Optikai tisztaság=98% (királis HPLC).
B. lépés: D-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav (a DLvegyület rezolválása D-tirozin-hidraziddal)
1,44 g (10 mmol) DL-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsavat [M. Robba és Y. Le Guen: Chim. Therap. 1966, 238; Chem. Abst. 66, 18 633f (1967)] és 1,97 g (10 mmol) D-tirozin-hidrazidot szuszpendálunk 50 ml vízmentes etanolban, majd visszafolyós hűtő alatt forraljuk a teljes oldódásig. Miután az oldat szobahőmérsékletre hűlt, hűtőszekrényben tartjuk éjszakán át. A kivált kristályokat kiszűijük, 2 χ 2 ml hideg vízmentes etanollal mossuk és vákuumexszikkátorban szárítjuk. 2,14 g (6,3 mmol) diasztereomer sót kapunk, amit kétszer átkristályosítunk 40 ml vízmentes etanolból. 1,54 g (4,53 mmol) diasztereomer sót kapunk, amit feloldunk 10 ml dietil-éterben és 5 ml 1 M kálium-hidrogén-szulfátban. A dietil-éteres fázist vízzel savmentesre mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, majd 2,0-2,5 kPa nyomáson bepároljuk. A kristályos maradékot petroléterrel eldörzsöljük, szüljük, és levegőn szárítjuk. 0,56 g (3,88 mmol, 76,7%) D-2-ciklopentil-2hidroxi-ecetsavat kapunk. Olvadáspont: 109-110 °C. [a]D= +14,8° (c=l; metanolban) és -30° (c=l; ecetsavban). Optikai tisztaság=98% (királis HPLC). Elemzési eredmény a C7H12O3 (144,17) képletre vonatkoztatva:
számított: C%=58,31; H%=8,39;
talált: C%=58,56; H%=8,50.
C. lépés: D-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav-benzil-észter
0,47 g (3,2 mmol) D-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsavat (2. példa, B. lépés) az 1. példa E. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagensek és oldószerek alkalmazásával - átalakítva 0,74 g (95%) cím szerinti terméket kapunk olaj formájában. Rf(12)=0,20.
D. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav-benzil-észter
0,74 g (3,2 mmol) D-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav-benzil-észtert (2. példa, C. lépés) az 1. példa F. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagensek és oldószerek alkalmazásával - átalakítunk. A kapott párlási maradékot [Rf(12)=0,27-0,36] 2,75 mmol cím szerinti terméknek tekintjük.
E. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-ecetsav
2,75 mmol tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2hidroxi-ecetsav-benzil-észtert (2. példa, D. lépés) az 1. példa G. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagensek és oldószerek alkalmazásával - átalakítunk.
0,6 g (2,6 mmol, 95%) cím szerinti terméket kapunk olaj formájában. Rf(l )=0,25.
F. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-benzil-észter
2,6 mmol tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2hidroxi-ecetsavat (2. példa, E. lépés) és 0,62 g (2,6 mmol) L-prolin-benzil-észter-hidrogén-kloridot az
1. példa H. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagensek és oldószerek alkalmazásával - kondenzálunk. 0,97 g (90%) cím szerinti terméket kapunk olaj formájában. Rj(l)=0,7.
G. lépés: Tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolin
0,97 g (2,3 mmol) tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolin-benzil-észtert (1. példa, F. lépés) az 1. példa I. lépésében leírt módon - arányos mennyiségű reagensek és oldószerek alkalmazásával átalakítva 0,71 g (89%) cím szerinti terméket kapunk olaj formájában [Rj(9)=0,5], melynek nagyobb részét közvetlenül felhasználjuk a példa 1. lépésében, kisebb részét pedig kristályos sóvá alakítjuk az alábbi módon.
0,03 g (0,1 mmol) olajos tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolint feloldunk 5 ml dietiléterben és hozzáadunk 0,018 ml (0,1 mmol) diciklohexil-amint, a kivált kristályokat kiszűijük, dietil-éterrel mossuk, és vákuumexszikkátorban szárítjuk. 0,048 g (95%) tetrahidropiranil-D-2-ciklopentil-2-hidroxiacetil-L-prolin-diciklohexil-ammónium-sót kapunk. Olvadáspont: 145-147 °C. Elemzési eredmény a C29H5oN205 (506,73) képletre vonatkoztatva: számított: C%=68,73; H%=9,95; N%=5,52;
talált: C%=67,25; H%=9,94; N%=6,20.
A FAB tömegspektrum (507 [M+H+DCHA]*) a várt szerkezetet erősíti meg.
Módszerek
Ml. módszer
Plazmaalvadék készítése
a) Lemezkedús plazmát (PRP) készítünk olyan módon, hogy humán vér és 3,8%-os nátrium-citrát-víz(l/2) 9:1 arányú elegyét 240xg-n centrifugáljuk 5 percig.
b) Egy-egy reakcióedénybe 200 μΐ PRP-t teszünk, hozzáadunk 80 μΐ 40 mM-os kalcium-kloridot és állni hagyjuk szobahőmérsékleten 1 órán át. A kialakult plazmaalvadékot 6x2 ml 0,9%-os nátrium-kloriddal mossuk enyhe keveréssel és 5 perc ülepítéssel, hogy az oldatban maradt enzimeket (Xa faktor és trombin) eltávolítsuk. A mosófolyadék trombintartalmát a következő módon határozzuk meg.
c) 400 μΐ mosófolyadékhoz 100 μΐ 1 mM-os Tos-GlyPro-Arg-pNA szubsztrátoldatot adunk, 30 percet inkubáljuk 37 °C-on, majd 100 μΐ 50%-os ecetsavval leállítjuk a reakciót. Az elegyből 150-150 μί-t teszünk egy 96 lyukú lemez (96-well microtitre plate) mélyedéseibe, és 405 nm-en meghatározzuk az extinkciós értékeket (ELISA READER SLT Laborinstrument GmbH, Austria). Eredményes mosás esetén az extinkció értéke kisebb, mint a kontroll 5%-a.
HU 222 199 Bl
M2. módszer
Plazmaalvadékba zárt Xa faktor gátlásának meghatározása
a) A peptidinhibitorból 0,1-1,0-10 és 100 pg/ml-es oldatot készítünk 0,1 M Tris-pufferrel, mely 0,02% humán albumint tartalmaz, pH=8,5.
b) A mosófolyadék leszívása után az alvadókra (Ml. módszer) teszünk 400 pl peptidoldatot (minden koncentrációban 3-3 párhuzamos minta), illetve kontrollként 400 pl puffért és 5 percig inkubáljuk 37 °C-on. Ezt követően hozzáadunk 100 pl 2 mM· os Moc-D-Chg-Gly-Arg-pNA szubsztrátoldatot, további 30 percet inkubáljuk 37 °C-on, majd 100 pl 50%-os ecetsavval leállítjuk a reakciót.
c) Minden reakcióelegyből 150-150 pl-t teszünk egy 96 lyukú lemez (96-well microtitre plate) mélyedéseibe, és 405 nm-en meghatározzuk az extinkciós értékeket (ELISA READER SLT Laborinstrument GmbH, Austria). A kontrolihoz viszonyított, átlagolt extinkcióértékekből grafikusan meghatározzuk az 50%-os gátláshoz szükséges peptidkoncentrációt (IC50).
M3. módszer
Plazmaalvadékba zárt trombin gátlásának meghatározása
a) A peptidinhibitorból oldatokat készítünk az M2. módszer a) pontjában leírtak szerint.
b) A mosófolyadék leszívása után az alvadókra (Ml. módszer) teszünk 400 pl peptidoldatot (minden koncentrációban 3-3 párhuzamos minta), illetve kontrollként 400 pl puffért, és 5 percig inkubáljuk 37 °C-on. Ezt követően hozzáadunk 100 pl 1 mMos Tos-Gly-Pro-Arg-pNA szubsztrátoldatot, további 30 percet inkubáljuk 37 °C-on, majd 100 pl 50%os ecetsavval leállítjuk a reakciót. A továbbiakban az M2. módszer c) pontja szerint járunk el.
M4. módszer Fibringél készítése
a) Egy-egy reakcióedénybe 200 pl 6 mg/ml-es humán fibrinogént (SIGMA), 25 pl 25 NIH E/ml-es humán trombint (SIGMA) és 40 pl 100 mM-os kalcium-kloridot teszünk, és állni hagyjuk 1 órán át 20-22 °C-on. A kialakult fibringélt 3 x 2 ml fiziológiás konyhasóoldattal mossuk enyhe keveréssel és 5 perc ülepítéssel, hogy az oldatban maradt trombint eltávolítsuk. A mosás eredményességét az Ml. módszer c) pontja szerint ellenőrizzük.
M5. módszer
Fibringélhez kötött trombin gátlásának meghatározása
a) A peptidinhibitorokból 0,1-1,0-10 és 100 pg/mles oldatot készítünk Hepes/NaCl pufferrel (0,01 M Hepes és 0,1 M nátrium-klorid, pH=7,4).
b) A továbbiakban az M3. módszer b) pontja szerint járunk el.
M6. módszer
Xa faktor gátlásának mérése oldatban 96 lyukú lemezen (96-well microtitre plate)
a) A Xa faktorból (humán, SIGMA) 1,3 E/ml-es, a peptidinhibitorokból 0,1-1,0-10 és 100 pg/ml-es oldatokat készítünk foszfátpuferrel (0,1 M nátriumfoszfát és 0,05 M nátrium-klorid, pH=7,4). A BzIle-Glu-Gly-Arg-pNA szubsztrátból 0,33 nM-s desztillált vizes oldatot használunk.
b) A kontroliból és minden egyes peptidoldatból 33 reakcióelegyet készítünk. A lemez mélyedésébe teszünk 30 pl peptidet, illetve kontrollként puffért, 30 pl Xa faktort, 90 p I puffért és 150 pl szubsztrátot, majd 10 perc múlva 405 nm-en leolvassuk az extinkcióértékeket. A továbbiakban az M2 módszer
c) pontja szerint járunk el.
Claims (8)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. (I) általános képletű új peptidaldehidszármazékok D-Xaa-Pro-Arg-H (I) aholXaa jelentése 2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil- vagy 2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-csoport,Pro jelentése L-prolin-gyök és Arg jelentése L-arginin-gyök és ezek szerves vagy szervetlen savval képzett savaddíciós sói.
- 2. D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-Larginin-aldehid, és savaddíciós sói.
- 3. D-2-cikloheptil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-Larginin-aldehid hidrogén-szulfát.
- 4. D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-Larginin-aldehid és savaddíciós sói.
- 5. D-2-ciklopentil-2-hidroxi-acetil-L-prolil-Larginin-aldehid hidrogén-szulfát.
- 6. Gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként valamely (I) általános képletű vegyületet, ahol Xaa, Pro és Arg jelentése az 1. igénypontban megadott - vagy ennek valamely gyógyászatilag elfogadható sóját - tartalmazza, a gyógyászatban szokásosan alkalmazott oldó-, hígító-, hordozó- és töltőanyagok kíséretében.
- 7. (I) általános képletű vegyületek - ahol Xaa, Pro és Arg jelentése az 1. igénypontban megadott - gyógyszerként való alkalmazásra.
- 8. (I) általános képletű vegyületek - ahol Xaa, Pro és Arg jelentése az 1. igénypontban megadott - alkalmazása véralvadásgátló gyógyszer előállítására.
Priority Applications (10)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU9601527A HU222199B1 (hu) | 1996-06-05 | 1996-06-05 | Véralvadásgátló hatású peptid-aldehid-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények |
| PT97925209T PT863871E (pt) | 1996-06-05 | 1997-06-05 | Derivados de aldeidos peptidicos anticoagulantes |
| AT97925209T ATE190316T1 (de) | 1996-06-05 | 1997-06-05 | Peptid-aldehydderivate als antikoagulierende mittel |
| AU30435/97A AU717777B2 (en) | 1996-06-05 | 1997-06-05 | Anticoagulant peptide aldehyde derivatives |
| PCT/HU1997/000027 WO1997046523A1 (en) | 1996-06-05 | 1997-06-05 | Anticoagulant peptide aldehyde derivatives |
| EP97925209A EP0863871B1 (en) | 1996-06-05 | 1997-06-05 | Anticoagulant peptide aldehyde derivatives |
| US09/011,001 US6121241A (en) | 1996-06-05 | 1997-06-05 | Anticoagulant peptide aldehyde derivatives |
| ES97925209T ES2146096T3 (es) | 1996-06-05 | 1997-06-05 | Nuevos derivados aldehido-peptidicos. |
| DE69701381T DE69701381T2 (de) | 1996-06-05 | 1997-06-05 | Peptid-aldehydderivate als antikoagulierende mittel |
| GR20000401278T GR3033583T3 (en) | 1996-06-05 | 2000-05-31 | Anticoagulant peptide aldehyde derivatives |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU9601527A HU222199B1 (hu) | 1996-06-05 | 1996-06-05 | Véralvadásgátló hatású peptid-aldehid-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9601527D0 HU9601527D0 (en) | 1996-08-28 |
| HUP9601527A2 HUP9601527A2 (hu) | 1998-10-28 |
| HUP9601527A3 HUP9601527A3 (en) | 1999-03-01 |
| HU222199B1 true HU222199B1 (hu) | 2003-05-28 |
Family
ID=89994026
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9601527A HU222199B1 (hu) | 1996-06-05 | 1996-06-05 | Véralvadásgátló hatású peptid-aldehid-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6121241A (hu) |
| EP (1) | EP0863871B1 (hu) |
| AT (1) | ATE190316T1 (hu) |
| AU (1) | AU717777B2 (hu) |
| DE (1) | DE69701381T2 (hu) |
| ES (1) | ES2146096T3 (hu) |
| GR (1) | GR3033583T3 (hu) |
| HU (1) | HU222199B1 (hu) |
| PT (1) | PT863871E (hu) |
| WO (1) | WO1997046523A1 (hu) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2002331654B2 (en) * | 2001-08-21 | 2007-11-08 | Ivax Institute For Drug Research, Ltd. | Peptide arginals and methods for treating disseminated intravascular coagulation |
| DE10239821A1 (de) | 2002-08-29 | 2004-03-11 | Roche Diagnostics Gmbh | Verbesserung der Spezifität bei der Bestimmung von Antithrombin |
| WO2004050637A2 (en) | 2002-12-03 | 2004-06-17 | Axys Pharmaceuticals, Inc. | 2-(2-hydroxybiphenyl-3-yl)-1h-benzoimidazole-5-carboxamidine derivatives as factor viia inhibitors |
| EP2224949B1 (en) | 2007-11-30 | 2012-10-17 | University of Debrecen | Use of urokinase type plasminogen activator inhibitors for the treatment of corneal disorders |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HU192646B (en) * | 1984-12-21 | 1987-06-29 | Gyogyszerkutato Intezet | Process for preparing new n-alkyl-peptide aldehydes |
| IL99527A (en) * | 1990-09-28 | 1997-08-14 | Lilly Co Eli | Tripeptide antithrombotic agents |
| WO1993015756A1 (en) * | 1992-02-14 | 1993-08-19 | Corvas International, Inc. | Inhibitors of thrombosis |
| EP0675899B1 (en) * | 1992-12-15 | 1999-03-17 | Corvas International, Inc. | NOVEL INHIBITORS OF FACTOR Xa |
-
1996
- 1996-06-05 HU HU9601527A patent/HU222199B1/hu not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-06-05 EP EP97925209A patent/EP0863871B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-06-05 AT AT97925209T patent/ATE190316T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-06-05 US US09/011,001 patent/US6121241A/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-06-05 WO PCT/HU1997/000027 patent/WO1997046523A1/en active IP Right Grant
- 1997-06-05 DE DE69701381T patent/DE69701381T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1997-06-05 PT PT97925209T patent/PT863871E/pt unknown
- 1997-06-05 ES ES97925209T patent/ES2146096T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-06-05 AU AU30435/97A patent/AU717777B2/en not_active Ceased
-
2000
- 2000-05-31 GR GR20000401278T patent/GR3033583T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0863871B1 (en) | 2000-03-08 |
| HU9601527D0 (en) | 1996-08-28 |
| HUP9601527A3 (en) | 1999-03-01 |
| PT863871E (pt) | 2000-08-31 |
| EP0863871A1 (en) | 1998-09-16 |
| HUP9601527A2 (hu) | 1998-10-28 |
| WO1997046523A1 (en) | 1997-12-11 |
| ES2146096T3 (es) | 2000-07-16 |
| ATE190316T1 (de) | 2000-03-15 |
| GR3033583T3 (en) | 2000-09-29 |
| AU3043597A (en) | 1998-01-05 |
| DE69701381D1 (de) | 2000-04-13 |
| DE69701381T2 (de) | 2000-11-16 |
| US6121241A (en) | 2000-09-19 |
| AU717777B2 (en) | 2000-03-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5288707A (en) | Borolysine peptidomimetics | |
| EP0509080B1 (en) | Inhibitors and substrates of thrombin | |
| JP4330450B2 (ja) | カリクレインの選択的ジペプチド阻害薬 | |
| US5607937A (en) | Piperazides of substituted phenylalanine derivatives as thrombin inhibitors | |
| IL99163A (en) | Peptides containing a history of boronic acid at end C with inhibitory activity for serine proteases, their preparation and pharmaceutical preparations containing them | |
| US5760235A (en) | Anticoagulant peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing the same as well as a process for preparation thereof | |
| HU226825B1 (en) | Peptide derivatives, process for prepearing them, pharmaceutical compositions containing them and use of them | |
| WO1999007732A1 (en) | SELECTIVE FACTOR Xa INHIBITORS | |
| EP0688336B1 (en) | Peptide boronic acid derivatives having protease inhibiting activity | |
| US5798352A (en) | Antithrombotic amidinotetrahydropyridylalanine derivatives | |
| IL127325A (en) | History of amino acids, process for their preparation, pharmaceutical preparations containing them and their uses in the preparation of drugs as thrombin inhibitors | |
| US5612369A (en) | Thrombin inhibitors | |
| EP0922054B1 (en) | Anticoagulant peptidyl-arginine aldehyde derivatives | |
| HU222199B1 (hu) | Véralvadásgátló hatású peptid-aldehid-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények | |
| KR100472754B1 (ko) | 항응고성 펩티딜-아르기닌 알데히드 유도체 | |
| WO1998028326A1 (en) | Bicyclic thrombin inhibitors | |
| HU224426B1 (hu) | Trombin- és Xa-faktor-gátló hatású peptidil-arginin-aldehid-származékok, a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és alkalmazásuk | |
| US5648338A (en) | Inhibitors and substrates of thrombin | |
| HU224427B1 (hu) | Véralvadásgátló hatású peptidszármazékok, a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és alkalmazásuk | |
| CZ2004265A3 (cs) | Peptidové arginaly a způsoby léčby diseminované intravaskulární koagulace | |
| AU2002331654A1 (en) | Peptide arginals and methods for treating disseminated intravascular coagulation | |
| NO300504B1 (no) | Forbindelse og terapeutisk preparat omfattende denne |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HFG4 | Patent granted, date of granting |
Effective date: 20030311 |
|
| MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees |