JPH0833392B2 - 標本の作成方法および標本用プレート - Google Patents

標本の作成方法および標本用プレート

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JPH0833392B2
JPH0833392B2 JP63077629A JP7762988A JPH0833392B2 JP H0833392 B2 JPH0833392 B2 JP H0833392B2 JP 63077629 A JP63077629 A JP 63077629A JP 7762988 A JP7762988 A JP 7762988A JP H0833392 B2 JPH0833392 B2 JP H0833392B2
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Description

【発明の詳細な説明】 (産業上の利用分野) 本発明は,例えば,尿沈渣成分の長期保存等に用いら
れる標本の作成方法,およびその作成方法に用いられる
標本用プレートに関する。
(従来の技術) 例えば,尿沈渣成分の検査は,スライドグラス上に液
状の検体試料を滴下し,滴下された検体試料をカバーグ
ラスにて直接被覆した後に,光学顕微鏡等にて観察する
ことにより行われる。スライドグラス上に滴下された検
体試料は,カバーグラスにて直接被覆されるため,検体
試料がスライドグラスとカバーグラスとの間に均一に分
散しないおそれがある。また,液状の検体試料は,カバ
ーグラスにて直接被覆されているにすぎないため,該検
体試料内に気泡が混入するおそれがある。さらに,検体
試料はスライドグラスとカバーグラスとにより圧縮され
るため,検体試料中の細胞等が破壊れるおそれもある。
しかも,液状の検体試料は,水分がスライドグラスとカ
バーグラスとの間から蒸発するため,比較的短い時間し
か観察できない。
このように,顕微鏡観察による尿沈渣成分検査のため
の試料を準備することは容易ではない。また,顕微鏡観
察後に,検体試料を長期にわたって保存することも困難
である。このため,従来は,尿沈渣成分の検査のための
検体試料は,顕微鏡写真を撮影し,これを標本のかわり
として保存している。
(発明が解決しようとする課題) 本発明は,上記従来の問題を解決するものであり,そ
の目的は,液状の検体試料を長期にわたって安定的に保
存し得る標本を,容易に作成し得る標本作成方法を提供
することにある。
また,本発明は,その標本作成方法に好適に用いるこ
とができ,しかも検体試料を正確に顕微鏡観察し得る標
本用プレートを提供することにある。
(課題を解決するための手段) 本発明の標本作成方法は,スライドグラスと、該スラ
イドグラス上に所定の領域を囲むように配設され、球形
状粒子を含有する常温硬化型の接着剤により形成された
所定の厚さを有する液密性の枠材と、該枠材に囲まれた
領域を開放する一対の開口部が形成されるように該領域
を覆うべく、該枠材上に液密状に接着されたカバーグラ
スと、を有し、前記枠材は、前記スライドグラスとカバ
ーグラスとの間隙に前記検体試料を注入した際に該検体
試料が毛細管現象を起こし得るようにその厚さが設定さ
れている標本プレートの,前記一方の開口部から,検体
を保存処理した液状の検体試料を,前記間隙内に注入し
て,毛細管現象により,該間隙内に展開する工程と,前
記開口部を不溶性のシール材にて気密に封止する工程
と,を包含するし,そのことにより上記目的が達成され
る。
本発明の標本用プレートは,検体を保存処理した液状
の検体試料を長期にわたって保存する標本の作成に使用
される標本用プレートであって,スライドグラスと,該
スライドグラス上に所定の領域を囲むように配設され、
球形状粒子を含有する常温硬化型の接着剤により形成さ
れた所定の厚さを有する液密性の枠材と,該枠材に囲ま
れた領域を開放する一対の開口部が形成されるように該
領域を覆うべく,該枠材上に液密状に接着されたカバー
グラスと,を有し,前記枠材は,前記スライドグラスと
カバーグラスとの間隙に前記検体試料を注入した際に該
検体試料が毛細管現象を起こし得るようにその厚さが設
定されていることを特徴とし,そのことにより上記目的
が達成される。
(実施例) 以下に本発明を実施例について説明する。
第1図は本発明の標本作成方法に使用される本発明の
標本用プレートの斜視図である。該標本用プレートは,
スライドグラス10と該スライドグラス10に,その上面の
所定の領域を囲むように配設された所定の厚さを有する
液密性の枠材20と,前記スライドグラス10とは所定の間
隙を有するように,該枠材20上に配設されたカバーグラ
ス30とを有する。
スライドグラス10は,従来の顕微鏡観察用プレートと
して用いられるスライドグラスと同様に,横長の平板状
をしており,長手方向の一方の側部上面12がエッチング
処理されている。該スライドグラス10は,ガラス製であ
っても,プラスチック製であってもよい。
該スライドグラス10上面の所定領域を囲む枠材20は,
所定の厚さを有している。該枠材20は,スライドグラス
10の幅方向に延びる一対の縦辺21aおよび21aと,スライ
ドグラス10の長手方向に延びる一対の横辺21bおよび21b
を有する正方形状の外枠21と,該外枠21の対向する一対
の縦辺21aおよび21aの内側に,各縦辺21aとはそれぞれ
所定の間隔をあけて平行に配設された内枠22および22と
を有する。各内枠22の端部は,外枠21における上記一対
の横辺21bおよび21bに連続している。外枠21の各横辺21
bおよび21bの中央部には,内側から凹状に切欠された注
入部21cおよび21cが形成されている。
該枠材20は,常温硬化型の接着剤により形成される。
その接着剤には,該接着剤が所定の層厚となるように,
球形状粒子がスペーサとして混入されている。また,枠
材20として用いられる接着剤は,着色剤により例えば白
色に着色されて使用される。
上記球形状粒子の素材としては、カバーガラス30とス
ライドグラス10との間隙内に展開された液状の検体試料
と接触しても溶出しない不溶性材質であればよく、例え
ば、スチレン系樹脂、アクリル系樹脂、エポキシ系樹
脂、硬化性シリコン樹脂、フェノール系樹脂、アセター
ル系樹脂、ジビニルベンゼン重合体、ガラス等が挙げら
れる。カバーグラス30は,接着剤でなる該枠材20上に液
密状に接着されている。該カバーグラス30は,各一辺が
前記枠材20における外枠21の各縦辺21aおよび横辺21bよ
り若干短い正方形状をしており,枠材20の内枠22および
22の上面における中央部間に液密状に接着されている。
従って,該カバーグラス30は,スライドグラス10上面と
は枠材20の厚さに相当する間隙を有している。また,該
カバーグラス30は,外枠21の各横辺21bおよび21bと各内
枠22および22とにより囲まれた領域の上方を,各横枠21
bおよび21b側の一部を除いて覆っている。その結果,該
カバーグラス30とスライドグラス10との間隙は,各横辺
21bおよび21bとカバーグラス30とにより形成される開口
部11および11を介してそれぞれ開放されている。
スライドグラス10とカバーグラス20との間隙は,枠材
20の厚さにより規定され,該間隙内に注入される液状の
検体試料が毛細管現象を起こし得るように,1000μm以
下に設定される。
本発明の標本作成方法は,このような標本用プレート
を使用して実施される。本発明方法では,まず,検体が
保存液にて保存処理される。該保存処理は,検体内の細
胞等が物理的,化学的および生物学的に変性しないよう
にするものであり,保存液としては,アルコール,ホル
マリン等が用いられるが,特に,パラホルムアルデヒド
水溶液,グルタールアルデヒド水溶液等が好適である。
保存処理された検体は,必要に応じて,固定液にて処
理される。該固定液は,標本プレートにて標本化される
検体が,標本プレート上にて動かないように固定するも
のであり,例えばゼラチン・グリセリン溶液等の水溶性
樹脂が用いられる。
保存処理された液状の検体試料は,前記標本用プレー
トにおけるカバーグラス30と一方の横辺21bとにより形
成された開口部11から,例えば,スポイトにてスライド
グラス10とカバーグラス30との間隙内に注入される。こ
のとき,枠材20の一方の横辺21bに形成された注入部21c
内に検体試料が滴下され,その検体試料は,スライドグ
ラス10とカバーグラス30との間隙内に毛細管現象にて展
開される。
液状の検体試料が,スライドグラス10とカバーグラス
30との間隙内に展開されると,カバーグラス30と外枠20
における各横辺21bおよび21bとにより形成されるそれぞ
れの開口部11および11を,シール材にて封止する。該シ
ール材は,硬化することにより,各開口部11を気密に封
止する硬化性樹脂または接着剤が用いられる。該シール
材としては,カバーグラス30とスライドグラス10との間
隙内に展開された液状の検体試料と接触しても溶出しな
い不溶性材質であればよく,例えば,アクリル系樹脂,
エポキシ系樹脂,硬化性シリコン樹脂等が使用される。
シール材にて各開口部11を封止する際には,外枠21の
各縦辺21aと各内枠22との間に同様のシール材を充填し
て,カバーグラス30と内枠22とを該シール材にて封止す
れば,気密性がより向上するので好ましい。枠材20とし
て接着剤を用いる場合には,該接着剤内の水分が経時的
に蒸発して,該接着剤とカバーグラス30との間に空隙が
生じるおそれがあるが,このように,カバーグラス30と
接着剤である枠材20とをシール材にてシールすることに
より,両者は長期にわたって気密に接着される。
このようにして作成された標本プレートは,液状の検
体試料が,カバーグラス30とスライドグラス10との間隙
内に,気密に封止されているため,長期にわたって,安
定的に保存される。
次に,本発明方法の実験例について説明する。
まず,膀胱癌患者の尿10mlを1500r.p.m.にて5秒間回
転させて遠心分離し,検体としての尿沈渣を作成した。
そして,該尿沈渣に略等量の保存液を混和した。該保存
液は,以下のようにして作成した。まず,蒸留水40mlに
パラホルムアルデヒド(99.8%)を1.5g加えて,60〜70
℃で加温溶解した後,1N-NaOHを300μl加えて混和す
る。次いで25%グルタールアルデヒドを8ml加え,さら
に,200mMリン酸緩衝液(pH7.4)を加えて全量を100mlと
する。そして,1%CaCl2(無水)を300μlを撹拌しつつ
加えて,保存液を得た。
該保存液を検体に加えた溶液を1時間放置した後,再
度,1500r.p.m.にて5秒間回転させて遠心分離した。そ
して,その沈澱物に略等量の固定液を加えて混和した。
固定液は,42mlの蒸留水にゼラチン粉末5gを溶解した溶
液と,グリセリン50gとフェノール(固体)0.5gとを混
合したものとを,50℃のパラフィン溶融器内で濾過して
作成した。
このようにして得られた検体試料を,第1図に示す標
本用プレートのスライドグラス10とカバーグラス30との
間に一方の開口部11から注入し,その間隙内に展開させ
た。その後,カバーグラス30の周囲を,前述のようにシ
ール材にて封止した。該シール材としては,アクリル系
樹脂(商品名ビオライト)250mlをキシレン約100mlにて
溶解したものを使用した。これにより,膀胱癌患者の尿
沈渣試料の標本を得た。
該標本を,6ヵ月放置したところ,検体試料の液量は変
化しなかった。また,気泡の発生および色調の変化は見
られなかった。さらに,標本作成時において顕微鏡観察
により観察された,赤血球,白血球,各種円柱,癌細胞
等の形状変化は見られず,また,赤血球,癌細胞等の萎
縮や膨張による破壊も見られなかった。
(発明の効果) 本発明の標本作成方法は,このように,液状の検体試
料の標本を容易に作成することができる。しかも,作成
された標本は,検体試料が長期にわたって安定的に保存
される。
本発明の標本用プレートは,このような標本作成方法
を容易に行うことができる。しかも,本発明の標本用プ
レートは,液状の検体試料内の細胞等が破壊されるおそ
れがなく,検体試料の顕微鏡観察が正確に行える。
【図面の簡単な説明】
第1図は本発明の標本用プレートの斜視図である。 10……スライドグラス,11……開口部,20……枠材,21…
…外枠,22……内枠,30……カバーグラス。

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】スライドグラスと、該スライドグラス上に
    所定の領域を囲むように配設され、球形状粒子を含有す
    る常温硬化型の接着剤により形成された所定の厚さを有
    する液密性の枠材と、該枠材に囲まれた領域を開放する
    一対の開口部が形成されるように該領域を覆うべく、該
    枠材上に液密状に接着されたカバーグラスと、を有し、
    前記枠材は、前記スライドグラスとカバーグラスとの間
    隙に前記検体試料を注入した際に該検体試料が毛細管現
    象を起こし得るようにその厚さが設定されている標本プ
    レートの、前記一方の開口部から、検体を保存処理した
    液状の検体試料を、前記間隙内に注入して、毛細管現象
    により、該間隙内に展開する工程と、 前記開口部を不溶性のシール材にて気密に封止する工程
    と、 を包含する標本用プレートの作成方法。
  2. 【請求項2】検体を保存処理した液状の検体試料を長期
    にわたって保存する標本の作成に使用される標本用プレ
    ートであって、 スライドグラスと、 該スライドグラス上に所定の領域を囲むように配設さ
    れ、球形状粒子を含有する常温硬化型の接着剤により形
    成された所定の厚さを有する液密性の枠材と、 該枠材に囲まれた領域を開放する一対の開口部が形成さ
    れるように該領域を覆うべく、該枠材上に液密状に接着
    されたカバーグラスと、を有し、 前記枠材は、前記スライドグラスとカバーグラスとの間
    隙に前記検体試料を注入した際に該検体試料が毛細管現
    象を起こし得るようにその厚さが設定されていることを
    特徴とする 標本用プレート。
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