JPH01248060A

JPH01248060A - 標本の作成方法および標本用プレート

Info

Publication number: JPH01248060A
Application number: JP7762988A
Authority: JP
Inventors: Masuyo Shinoda; 篠田　益世; Mamoru Takemura; 守竹村; Yasuji Yagi; 八木　靖二; Tsugumasa Nashiro; 名城　嗣勝
Original assignee: Sekisui Chemical Co Ltd
Current assignee: Sekisui Chemical Co Ltd
Priority date: 1988-03-29
Filing date: 1988-03-29
Publication date: 1989-10-03
Anticipated expiration: 2011-03-29
Also published as: JPH0833392B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は９例えば、尿沈渣成分の長期保存等に用いられ
る標本の作成方法、およびその作成方法に用いられる標
本用プレートに関する。

（従来の技術）例えば、尿沈渣成分の検査は、スライドグラス上に液状
の検体試料を滴下し１滴下された検体試料をカバーグラ
スにて直接被覆した後に、光学顕微鏡等にて観察するこ
とにより行われる。スライドグラス上に滴下された検体
試料は、カバーグラスにて直接被覆されるため、検体試
料がスライドグラスとカバーグラスとの間に均一に分散
しないおそれがある。また、液状の検体試料は、カバー
グラスにて直接被覆されているにすぎないため。

該検体試料内に気泡が混入するおそれがある。さらに、
検体試料はスライドグラスとカバーグラスとにより圧縮
されるため、検体試料中の細胞等が破壊れるおそれもあ
る。しかも、液状の検体試料は、水分がスライドグラス
とカバーグラスとの間から蒸発するため、比較的短い時
間しか観察できない。

このように、顕微鏡観察による尿沈渣成分検査のための
試料を準備することは容易ではない。また、顕微鏡観察
後に、検体試料を長期にわたって保存することも困難で
ある。このため、従来は。

尿沈渣成分の検査のための検体試料は、顕微鏡写真を撮
影し、これを標本のかわりとして保存している。

（発明が解決しようとする課題）本発明は、上記従来の問題を解決するものであり、その
目的は、液状の検体試料を長期にわたって安定的に保存
し得る標本を、容易に作成し得る標本作成方法を提供す
ることにある。

また１本発明は、その標本作成方法に好適に用いること
ができ、しかも検体試料を正確に顕微鏡観察し得る標本
用プレートを提供することにある。

（課題を解決するための手段）本発明の標本作成方法は、スライドグラス上の所定領域
を、一対の開口部が形成されるように。

該スライドグラスとは毛細管現象を起こし得る所定の間
隙をあけて、カバーグラスが覆っており。

該開口部を除いて該スライドグラスと該カバーグラスと
の間隙の周囲が液密状に封止された標本プレートの、前
記一方の開口部から、検体を保存処理した液状の検体試
料を、前記間隙内に注入して。

毛細管現象により、該間隙内に展開する工程と。

前記開口部を不溶性のシール材にて気密に封止する工程
と、を包含するし、そのことにより上記目的が達成され
る。

本発明の標本用プレートは、検体を保存処理した液状の
検体試料を長期にわたって保存する標本の作成に使用さ
れる標本用プレートであって、スライドグラスと、該ス
ライドグラス上に所定の領域を囲むように配設された所
定の厚さを有する液密性の枠材と、該枠材に囲まれた領
域を開放する一対の開口部が形成されるように該領域を
覆うべく、該枠材上に液密状に接着されたカバーグラス
と、を有し、前記枠材は、前記スライドグラスとカバー
グラスとの間隙に前記検体試料を注入した際に該検体試
料が毛細管現象を起こし得るようにその厚さが設定され
ていることを特徴とし、そのことにより上記目的が達成
される。

（実施例）以下に本発明を実施例について説明する。

第１図は本発明の標本作成方法に使用される本発明の標
本用プレートの斜視図である。該標本用プレートは、ス
ライドグラス１０と該スライドグラス１０に、その上面
の所定の領域を囲むように配設された所定の厚さを有す
る液密性の枠材２０と、前記スライドグラス１０とは所
定の間隙を有するように、該枠材２０上に配設されたカ
バーグラス３０とを有する。

スライドグラス１０は、従来の顕微鏡観察用プレートと
して用いられるスライドグラスと同様に。

横長の平板状をしており、長手方向の一方の側部上面１
２がエツチング処理されている。該スライドグラス１０
は、ガラス製であっても、プラスチック製であってもよ
い。

該スライドグラス１０上面の所定領域を囲む枠材２０は
、所定の厚さを有している。該枠材２０は、スライドグ
ラス１０の幅方向に延びる一対の縦辺２１ａおよび２１
ａと、スライドグラス１０の長手方向に延びる一対の横
辺２１ｂおよび２１ｂを有する正方形状の外枠２１と、
該外枠２１の対向する一対の縦辺２１ａおよび２１ａの
内側に、各縦辺２１ａとはそれぞれ所定の間隔をあけて
平行に配設された内枠２２および２２とを有する。各内
枠２２の端部は、外枠２１における上記一対の横辺２１
ｂおよび２１ｂに連続している。

外枠２１の各横辺２１ｂおよび２１ｂの中央部には、内
側から凹状に切欠された注入部２１ｃおよび２１ｃが形
成されている。

該枠材２０は１例えば常温硬化型の接着剤により形成さ
れる。その接着剤には、該接着剤が所定の層厚となるよ
うに１球形状粒子がスペーサとして混入されている。ま
た、枠材２０として用いられる接着剤は２着色剤により
例えば白色に着色されて使用される。

カバーグラス３０は１例えば接着剤でなる該枠材２０上
に液密状に接着されている。該カバーグラス３０は、各
−辺が前記枠材２０における外枠２１の各縦辺２１ａお
よび横辺２１ｂより若干短い正方形状をしており、枠材
２０の内枠２２および２２の上面における中央部間に液
密状に接着されている。従って、該カバーグラス３０は
、スライドグラス１０上面とは枠材２０の厚さに相当す
る間隙を有している。また。

該カバーグラス３０は、外枠２１の各横辺２１ｂおよび
２１ｂと各内枠２２および２２とにより囲まれた領域の
上方を、各横枠２１ｂおよび２１ｂ側の一部を除いて覆
っている。その結果、該カバーグラス３０とスライドグ
ラス１０との間隙は、各横辺２１ｂおよび２１ｂとカバ
ーグラス３０とにより形成される開口部１１およびＩＬ
を介してそれぞれ開放されている。

スライドグラス１０とカバーグラス２０との間隙は。

枠材２０の厚さにより規定され、該間隙内に注入される
液状の検体試料が毛細管現象を起こし得るように、　１
０００μｍ以下に設定される。

本発明の標本作成方法は、このような標本用プレートを
使用して実施される。本発明方法では。

まず、検体が保存液にて保存処理される。該保存処理は
、検体内の細胞等が物理的、化学的および生物学的に変
性しないようにするものであり、保存液としては、アル
コール、ホルマリン等が用いられるが、特に、バラホル
ムアルデヒド水溶液。

ゲルタールアルデヒド水溶液等が好適である。

保存処理された検体は、必要に応じて、固定液にて処理
される。該固定液は、標本プレートにて標本化される検
体が、標本プレート上にて動かないように固定するもの
であり１例えばゼラチン・グリセリン溶液等の水溶性樹
脂が用いられる。

保存処理された液状の検体試料は、前記標本用プレート
におけるカバーグラス３０と一方の横辺２１ｂとにより
形成された開口部１１から２例えば、スポイトにてスラ
イドグラス１０とカバーグラス３０との間隙内に注入さ
れる。このとき、枠材２０の一方の横辺２１ｂに形成さ
れた注入部２１ｃ内に検体試料が滴下され、その検体試
料は、スライドグラス１０とカバーグラス３０との間隙
内に毛細管現象にて展開される。

液状の検体試料が、スライドグラス１０とカバーグラス
３０との間隙内に展開されると、カバーグラス３０と外
枠２０における各横辺２１ｂおよび２１ｂとにより形成
されるそれぞれの開口部１１および１１を。

シール材にて封止する。該シール材は、硬化することに
より、各開口部１１を気密に封止する硬化性樹脂または
接着剤が用いられる。該シール材としては、カバーグラ
ス３０とスライドグラス１０との間隙内に展開された液
状の検体試料と接触しても溶出しない不溶性材質であれ
ばよく１例えば、アクリル系樹脂、エポキシ系樹脂、硬
化性シリコン樹脂等が使用される。

シール材にて各開口部１１を封止する際には、外枠２１
の各縦辺２１ａと各内枠２２との間に同様のシール材を
充填して、カバーグラス３０と内枠２２とを該シール材
にて封止すれば、気密性がより向上するので好ましい、
枠材２０として接着剤を用いる場合には、該接着剤内の
水分が経時的に蒸発して、該接着剤とカバーグラス３０
との間に空隙が生じるおそれがあるが、このように、カ
バーグラス３０と接着剤である枠材２０とをシール材に
てシールすることにより２両者は長期にわたって気密に
接着される。

このようにして作成された標本プレートは、液状の検体
試料が、カバーグラス３０とスライドグラス１０との間
隙内に、気密に封止されているため。

長期にわたって、安定的に保存される。

次に９本発明方法の実験例について説明する。

まず、膀胱癌患者の尿１０ｄを１５０Ｏｒ、ｐ、＋ｗ、
にて５秒間回転させて遠心分離し、検体としての尿沈渣
を作成した。そして、該尿沈渣に略等量の保存液を混和
した。該保存液は、以下のようにして作成した。まず、
蒸留水４０ｄにパラホルムアルデヒド（９９，８％）を
１．５ｇ加えて、６０〜７０°Ｃで加温熔解した後、　
ｌＮ−ＮａＯＨを３００μ２加えて混和する。次いで２
５％ゲルタールアルデヒドを８　ｍｌを加え、さらに、
　２００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７，４）を加えて全量
を１００ｄとする。そして、１％ＣａＣ１ｚ（無水）を
３００μｌを撹拌しつつ加えて、保存液を得た。

該保存液を検体に加えた溶液を１時間放置した後、再度
、　１５００ｒ、ｐ、ｍ、にて５秒間回転させて遠心分
離した。そして、その沈澱物に略等量の固定液を加えて
混和した。固定液は、４２成の蒸留水にゼラチン粉末５
ｇを熔解した溶液と、グリセリン５０ｇとフェノール（
固体）０．５　ｇとを混合したものとを、５０°Ｃのパ
ラフィン溶融器内で濾過して作成した。

このようにして得られた検体試料を、第１図に示す標本
用プレートのスライドグラス１０とカバーグラス３０と
の間に一方の開口部１１から注入し、その間隙内に展開
させた。その後、カバーグラス３０の周囲を、前述のよ
うにシール材にて封止した。

該シール材としては、アクリル系樹脂（商品名ビオライ
ト）２５０＋＋１をキシレン約１００　ｍｌにて溶解し
たものを使用した。これにより、膀胱癌患者の尿沈渣試
料の標本を得た。

該標本を、６力月放置したところ、検体試料の液量は変
化しなかった。また、気泡の発生および色調の変化は見
られなかった。さらに、標本作成時において顕微鏡観察
により観察された。赤血球。

白血球、各種円柱、癌細胞等の形状変化は見られず、ま
た、赤血球、癌細胞等の萎縮や膨張による破壊も見られ
なかった。

（発明の効果）本発明の標本作成方法は、このように、液状の検体試料
の標本を容易に作成することができる。

しかも２作成された標本は、検体試料が長期にわたって
安定的に保存される。

本発明の標本用プレートは、このような標本作成方法を
容易に行うことができる。しかも２本発明の標本用プレ
ートは、液状の検体試料内の細胞等が破壊されるおそれ
がなく、検体試料の顕微鏡観察が正確に行える。

４、　゛　　の　　　なＬ第１図は本発明の標本用プレートの斜視図である。

１０・・・スライドグラス、　１１・・・開口部、　２
０・・・枠材。

２１・・・外枠、２２・・・内枠、　３０・・・カバー
グラス。

以上

Claims

【特許請求の範囲】１、スライドグラス上の所定領域を、一対の開口部が形
成されるように、該スライドグラスとは毛細管現象を起
こし得る所定の間隙をあけて、カバーグラスが覆ってお
り、該開口部を除いて該スライドグラスと該カバーグラ
スとの間隙の周囲が液密状に封止された標本プレートの
、前記一方の開口部から、検体を保存処理した液状の検
体試料を、前記間隙内に注入して、毛細管現象により、
該間隙内に展開する工程と、前記開口部を不溶性のシール材にて気密に封止する工程
と、を包含する標本用プレートの作成方法。２、検体を保存処理した液状の検体試料を長期にわたっ
て保存する標本の作成に使用される標本用プレートであ
って、スライドグラスと、該スライドグラス上に所定の領域を囲むように配設され
た所定の厚さを有する液密性の枠材と、該枠材に囲まれ
た領域を開放する一対の開口部が形成されるように該領
域を覆うべく、該枠材上に液密状に接着されたカバーグ
ラスと、を有し、前記枠材は、前記スライドグラスとカ
バーグラスとの間隙に前記検体試料を注入した際に該検
体試料が毛細管現象を起こし得るようにその厚さが設定
されていることを特徴とする標本用プレート。