JPH08310944A - 肝疾患治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 一般式（１） 【化１】 〔式中、Ｒ¹ はＨ又はホスホノ基、Ｒ² はＨ又は-(CH₂)
_n-OR¹、ｎは２〜５の整数を示す〕で表わされるアミノ
アルコール類又はその塩を有効成分とする肝疾患治療
剤。 【効果】 肝細胞増殖活性や肝障害修復効果を有し、急
性肝炎、慢性肝炎、肝硬変等の治療に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、急性肝炎、慢性肝
炎、肝硬変などの肝疾患治療薬に関する。

【０００２】

【従来の技術】肝は再生力の旺盛な臓器であり、ラット
で７０％以上の実質を削除すると残りの肝葉に増殖が起
こる。この肝再生は何らかの液性因子の関与によって行
われていると考えられていたが、長い間その実体は不明
であった。

【０００３】１９８４年、中村らによって初めて成熟ラ
ット初代培養肝細胞のＤＮＡ合成を指標に、肝再生中の
ラット血液中に肝細胞増殖因子（Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ
Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ、ＨＧＦ）が見出された
（Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｔ．ｅｔ ａｌ．：Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１２
２：１４５０−１４５９，１９８４）。その後、ＨＧＦ
ｃＤＮＡのクローニングがなされ、その全一次構造が
決定された（Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｔ．ｅｔ ａｌ．：Ｎ
ａｔｕｒｅ，３４２：４４０−４４３，１９８９）。そ
の結果、ＨＧＦはこれまでにその構造が明らかにされて
いるいろいろな増殖因子、例えば、上皮細胞増殖因子
（ＥＧＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、神経細胞
増殖因子（ＮＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧ
Ｆ）、血管内皮細胞増殖因子（ＥＣＧＦ）などの何れと
もホモロジーのない新しい増殖因子であることが明らか
となった。

【０００４】一方、高橋らは、ウシ小腸上皮粘膜組織由
来の抽出物を用いて、ラット肝細胞を長期培養し、培地
中で、肝細胞が分裂増殖し、整然とした細胞の集合・配
列を経て、肝組織類似の構造物を形成し、肝機能の一部
を新たに発現する事実を見出した（Ｔａｋａｈａｓｈ
ｉ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．：Ｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｃｅｌｌｕ
ｌａｒ ＆ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏ
ｇｙ，２５：３６５−３７２，１９８９）。この抽出物
に含まれる増殖因子の単離・精製及び構造決定が試みら
れたが現在までのところ成功していない。

【０００５】中村らの発見した前記のＨＧＦは、肝細胞
以外にも、腎尿細管上皮細胞、皮膚ケラチノサイトやメ
ラノサイト、肺胞II型上皮細胞、胃粘膜上皮細胞などの
初代培養に対して強力なマイトゲンとして作用すること
が明らかとなった。また、細胞運動を促すモトーゲンと
しての機能や、癌細胞の増殖を抑制する作用などが存在
することも明らかとなっている。

【０００６】このようなＨＧＦの多彩な生物活性を利用
した医薬品の研究開発が現在盛んに行われており、例え
ば、肝炎、腎障害の治療・予防や、肝手術後の肝再生促
進、創傷治療、抗癌剤などへのＨＧＦの臨床応用が試み
られているが、現在まだ医薬品として実用化されたもの
は一つもない。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は従来公知のＨＧＦ以外の肝実質細胞を増殖させる因子
又は成分を見出し、これを医薬品に応用することにあ
る。

【０００８】

【課題を解決するための手段】そこで本発明者らは前記
のウシ小腸上皮粘膜組織抽出液に着目し、肝細胞増殖促
進活性を指標として種々分画してそれぞれの画分につい
て検討してきたところ、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいては、
高分子画分は単独で肝細胞増殖活性を示すが、低分子画
分は単独ではその活性が弱く、高分子画分の存在下で初
めて活性を示すものであった。ところが、ｉｎ ｖｉｖ
ｏにおける肝細胞増殖活性を検討したところ、低分子画
分は単独投与で優れた活性を示すことが判明した。そし
て更に研究を進めたところ、その低分子画分の活性本体
がエタノールアミンであり、同様な活性が他のアルカノ
ールアミンにもあること、更に、これらのアルカノール
アミン類が種々の肝疾患モデルに対しても優れた治療作
用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。

【０００９】すなわち、本発明は一般式（１）

【００１０】

【化２】

【００１１】〔式中、Ｒ¹ は水素原子又はホスホノ基を
示し、Ｒ² は水素原子又は-(CH₂)_n-OR ¹を示し、ｎは２
〜５の整数を示す〕で表わされるアミノアルコール類又
はその塩を有効成分とする肝疾患治療剤を提供するもの
である。

【００１２】

【発明の実施の形態】本発明に用いられるアミノアルコ
ール類（１）としては、モノエタノールアミン、モノプ
ロパノールアミン、モノブタノールアミン、モノペンタ
ノールアミン、ジエタノールアミン、ジプロパノールア
ミン、ホスホエタノールアミン、ホスホプロパノールア
ミン等が挙げられるが、モノエタノールアミン、ジエタ
ノールアミン、ホスホエタノールアミン及びモノプロパ
ノールアミンが好ましい。また、一般式（１）中、ｎは
２又は３がより好ましい。またアミノアルコール類
（１）の塩としては薬学上許容される塩であれば特に制
限されないが、塩酸塩、硫酸塩などの酸付加塩が好まし
い。

【００１３】これらのアミノアルコール類（１）は、市
販品を直接用いてもよいし、自体公知の手段により化学
合成してもよい。またエタノールアミンは前記の如くウ
シ小腸上皮粘膜組織抽出液から分画した低分子画分をそ
のまま用いてもよい。

【００１４】ここで、ウシ小腸上皮粘膜組織からエタノ
ールアミンを含む低分子画分を採取するには、例えばウ
シ小腸上皮粘膜組織からメタノールで抽出し、所望によ
り低温条件で沈澱する成分を除去すればよい。

【００１５】アミノアルコール類（１）又はその塩は、
肝細胞増殖活性を有し、更に肝炎モデルや肝硬変モデル
において治療作用を有し、かつ安全性も高いので急性肝
炎、慢性肝炎、肝硬変等の治療剤、肝手術後の肝再生促
進剤として有用である。

【００１６】アミノアルコール類（１）又はその塩は、
経口、非経口いずれの方法によっても投与することが可
能であり、本発明の肝疾患治療剤は、各種の剤型、例え
ば散剤、顆粒剤、錠剤、糖衣錠、カプセル剤、アンプル
剤等の経口投与剤；皮下、筋肉又は静脈注射剤；坐剤等
とすることができる。

【００１７】上記製剤化は、アミノアルコール類（１）
単独又はアミノアルコール類（１）と賦形剤、増量剤、
結合剤、湿潤化剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散
剤、緩衝剤、保存剤、矯味剤、香料、被覆剤等の薬学上
許容される担体を適宜組合わせて処方することにより製
造することができる。

【００１８】斯くして得られた本発明肝疾患治療剤の投
与量は、症状、投与ルート等によっても異なるが、一般
的に成人において、アミノアルコール類（１）として１
０〜５，０００mg／日、好ましくは５０〜２，０００mg
／日であり、これを通常１日３〜４回に分けて投与する
のが好適である。

【００１９】

【実施例】以下、本発明を実施例により詳細に説明する
が、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではな
い。

【００２０】実施例１ 高分子因子及び低分子因子粗抽
出液の調製法 水洗したウシ小腸より上皮粘膜組織を、剃刀を用いて筋
肉層より剥離採取し、−８０℃で凍結保存した。

【００２１】凍結保存組織５００ｇあたり２ｌのメタノ
ールを加え室温に放置し解凍した後、ミキサーでホモジ
ェナイズし、４℃で約８時間放置した。ブフナーロート
で濾過し抽出液を得た。更にロート上に残った残渣に１
ｌのメタノールを加え、一晩放置後、同様にして抽出液
を採取し上記抽出液に加えた。抽出液中のメタノールを
蒸発させ抽出液を濃縮した。約５０mlに濃縮した抽出液
に同量のメタノールを加え生じた沈澱を遠心分離（３，
０００rpm、１０分）により取り除いた。上清のメタノ
ールを蒸発させた後精製水を加え全量を５０mlとした。
この抽出液を４℃に保存した。保存中に生じた沈澱物を
除いた後に、低分子因子粗抽出液を得た。当該抽出液は
低分子因子の精製出発材料に利用した。

【００２２】低分子因子を抽出した後の残査１００ｇに
リン酸緩衝生理食塩水（１０mM リン酸ナトリウム pH
７．４、１５０mM ＮａＣｌ）５００mlを加え４℃で一
晩攪拌抽出した。４℃で遠心分離（１０，０００ｒｐｍ
で３０分）した上清を高分子因子抽出液として利用し
た。当該抽出液は小分けにし−２０℃で保存した。

【００２３】実施例２ 肝細胞増殖活性を示す因子の分
離同定 ウシ小腸上皮組織由来の肝細胞活性を示す低分子因子の
分離・同定には、ラット初代培養肝細胞系を用いて、高
分子因子抽出液（１％）及びインスリン（１０μg ／m
l）、又はＥＧＦ（２０ng／ml）及びインスリン（１０
^-7Ｍ）、の存在下で、精製途中のウシ小腸上皮組織粗抽
出液の画分を上記培養系に加え、³Ｈ−ＴｄＲのラット
肝細胞核内ＤＮＡへの取込み量をアッセイ系として用い
た。

【００２４】ウシ小腸上皮粘膜組織粗抽出液１０mlをＳ
ｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ１００カラム（５×２８cm、Ｐｈ
ａｒｍａｃｉａ）で分画し、１５mlごとの画分を上記ア
ッセイ系に加え³Ｈ−ＴｄＲの取込み量を測定した。な
お、上記カラムは精製水で平衡化し、３ml／分の流速で
展開した。検出は紫外吸光度（２８０nm）によった。

【００２５】Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ１００ゲル濾過の
活性画分を集め、ロータリーエバポレーターを用いて６
０℃で１０〜２０倍に濃縮した。この濃縮液２mlをＣａ
ｐｃｅｌ Ｐａｃ Ｃ１８逆相カラム（２×２５cm、５
μm 粒子径、資生堂）に負荷した。溶出はアイソクラテ
ィック法で行い、緩衝液は３％アセトニトリルを含む２
０mMトリス塩酸（pH７．４）溶液を用いた。流速は４ml
／分、検出は紫外吸光度（２２０nm）によった。

【００２６】しかしながら良い分離結果が得られなかっ
たため、各画分に含まれる活性成分のアミノ基に、疎水
性基のフェニルイソチオシアネート（ｐｈｅｎｙｌｉｓ
ｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ、ＰＩＴＣ）を結合させＰＴ
Ｃ誘導体を作製し、逆相ＨＰＬＣカラムに吸着しやすく
した。すなわち、上記活性画分１mlに対し、エタノール
７ml、トリエチルアミン１ml、ＰＩＴＣ １mlを加え、
室温で３０分反応させ、遠心濃縮機で乾燥した。これ
を、０．５mlのメタノールに溶解し１．５mlの精製水を
加え稀釈した。

【００２７】ついで上記希釈液を０．４５μm の濾過膜
で濾過した後、当該濾液を４０℃に設定したカラムオー
ブン中に設置したＣ１８逆相カラム（２×２５cm、Ｈｉ
ｂａｒ Ｃ１８、ＲＴ２５０−２０、Ｃｉｃａ−Ｍｅｒ
ｃｋ、関東化学株式会社）に負荷した。カラムに吸着し
た成分を、Ａ液（３％アセトニトリル、１７mM酢酸ナト
リウム（pH５．４））及びＢ液（９０％アセトニトリ
ル、１７mM酢酸ナトリウム（pH５．４））を混合した溶
出液でアセトニトリルの濃度勾配を作り、溶出した。

【００２８】ＰＴＣ誘導体作製の前に、活性を測定した
際に、活性を認めた画分のみに存在する成分がＰＴＣ誘
導体として検出できたので、ＬＣ−ＭＡＳＳによりこの
成分の分子量を測定した。その結果、ＰＩＴＣが結合す
る以前の分子量は６１であることが判明した。更にＰＴ
Ｃ誘導体となった成分を分取し、これをＮＭＲで構造解
析したところ、NH₂CH₂CH₂OHの化学構造を持つ物質であ
ることが明らかとなった。

【００２９】この物質はモノエタノールアミンであるた
め、市販のモノエタノールアミンを上記ラット初代培養
肝細胞系に加え³Ｈ−ＴｄＲの取込み活性を測定した。
その結果、高分子因子抽出液もしくはＥＧＦの存在下で
ウシ小腸粘膜上皮粗抽出物から得られた低分子活性成分
が示すと同様の相乗的な活性促進効果を示した（図１、
なお図１中には他のアルカノールアミンの効果もあわせ
て示す。この結果、小腸上皮粘膜組織抽出液中の活性は
モノエタノールアミンによるものであることが明らかと
なった。

【００３０】実施例３ 肝再生実験 ラットＳＤ雄 ６−８週令（２００ｇ−２５０ｇ）をす
べての実験に用いた。ラットは通常のえさ、水を与え飼
育した。７０％肝切除は、方形葉・内側左葉（ｍｅｄｉ
ａｎ ｌｏｂｅ）及び外側左葉（ｌｅｆｔ ｌａｔｅｒ
ａｌ ｌｏｂｅ）の切除によった。

【００３１】肝再生実験は、以下に述べる方法で行っ
た。陰性コントロールとして、生理食塩液１ml／ラッ
ト、対照薬としてグリチルリチン（ＳＮＭＣ）２mg／ラ
ット、被験試料として和光特級モノエタノールアミンを
塩酸でpH６．８４に調整し生理食塩液で希釈して１００
mMモノエタノールアミンＨＣｌ（ＥＡ−ＨＣｌ）とした
もの１ml／ラット及びウシ小腸上皮粘膜粗抽出液１ml／
ラットを使用した。

【００３２】投与して２２時間後ＢｒｄＵ（５−ブロモ
デオキシウリジン）１０mg／ml（Ｓｉｇｍａ）、５−フ
ルオロ−２′−デオキシウリジン１mg／ml（Ｓｉｇｍ
ａ）混合液をラットあたり２．５ml腹腔に注射し、２時
間後開腹して肝臓を取り出し、１００％メタノールで一
晩固定した。エタノールで脱水後、キシレンで脱アルコ
ールし、５８℃でパラフィン包埋した。４μmにパラフ
ィン切片を作りプレパラートにつけ以下のように免疫組
織化学を行った。

【００３３】通常の方法で脱パラフィンを行い、内因性
のパーオキシダーゼをブロックするために０．３％Ｈ₂
Ｏ₂（メタノール中）で３０分（室温）処理し、Ｈ₂Ｏで
２回、各３分洗浄した。次に２Ｎ ＨＣｌで３０分（室
温）処理し、０．１Ｎ Ｎａ ₂Ｂ₄Ｏ₇で中和し（３分）
ＰＢＳで３回、各３分洗った。そしてこれ以後の反応
は、セルプロリフェレーションキット（Ｃｅｌｌ ｐｒ
ｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｋｉｔ；Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｒ
ＰＮ２０）（ＧＲＡＴＺＮＥＲ，Ｈ．Ｇ．ｅｔａｌ，Ｅ
ｘｐ．Ｃｅｌｌ．Ｒｅｓ．，９５，ｐｐ．８８−９４，
１９７５．、ＧＲＡＴＺＮＥＲ，Ｈ．Ｇ．，Ｓｃｉｅｎ
ｃｅ，２１８，ｐｐ．４７４−４７５，１９８２．）を
用いて行った。まずＢｒｄＵと室温で１時間反応させ、
ＰＢＳで３回各３分洗浄した。次に、ペルオキシダーゼ
抗マウスＩｇＧ２ａと室温で３０分反応させ、ＰＢＳ
で３回、各３分洗浄した。最後に、ＤＡＢ（３，３′−
ジアミノベンジジン）５００mg／１ｌリン酸バッファー
で５分（室温）反応させた。その後、蒸留水で２回、各
３分洗い脱水封入した。

【００３４】ＢｒｄＵを取り込んだ細胞は茶色〜黒に核
が染まる。結果の集計は、総細胞数が４，０００個以上
になるように写真撮影を行い、ＢｒｄＵを取り込んだ核
数／総細胞数×１００（ラベリングインデックス
（％））を求めた。尾状葉と右葉について同時に免疫組
織化学をおこなった。結果はほぼ同じであった。しかし
右葉ではときどき尾状葉よりも低い値を示すことがあっ
たので今回は尾状葉の結果を示した。結果を表１及び表
２に示す。

【００３５】また、参考として表３に正常ラットにモノ
エタノールアミンを投与した場合のラベリングインデッ
クスを示す。

【００３６】

【表１】

【００３７】

【表２】

【００３８】

【表３】

【００３９】実施例４ ＧＯＴ・ＧＰＴ試験 四塩化炭素肝障害マウスを用い、血清トランスアミナー
ゼ（ＧＯＴ・ＧＰＴ）の低下を指標に、エタノールアミ
ン（肝細胞増殖因子）の肝障害修復効果の検討を行っ
た。

【００４０】（１）使用動物 ｄｄＹ系雄マウスを５週令で購入し、予備飼育を３日間
行い、健康状態を確認後、使用した。 （２）群分け 購入した全マウスの体重を測定して体重により層別化
し、各層から各群の平均体重がほぼ等しくなるように動
物を抽出し、１群を１０匹として群を構成した。群構成
は、投与開始日の投与前に実施した。 （３）四塩化炭素及びエタノールアミンの調製 ・四塩化炭素 四塩化炭素（和光純薬）の５mlをガラスバイアルに採
り、パナセート８００（日本油脂製）を４５ml加え、１
０％（ｖ／ｖ）溶液を調製した。 ・エタノールアミン 腹腔投与：エタノールアミン４２μl を生理食塩水に溶
解し、塩酸でpH７とした後、全量５０mlとした。この溶
液１０mlを生理食塩水２０mlで希釈した。経口投与：エ
タノールアミン２．０mlを生理食塩水に溶解し、塩酸で
pHを７とした後、全量５０mlとした。この溶液２mlを生
理食塩水３８mlで希釈した。 （４）投与方法及び投与量 １群の動物数は１０匹とした。四塩化炭素投与２４時間
前より水のみを与え、絶食させた。１ml／kg用量の１０
％四塩化炭素／パナセート溶液を腹腔内投与した。四塩
化炭素投与２４時間後に被験物質であるエタノールアミ
ン及び対照物である生理食塩水を投与した。腹腔投与の
場合は一回目のエタノールアミン投与から１２時間後に
再度投与し、その６時間後に採血した。経口投与の場合
はエタノールアミン投与は一回のみとし、その２４時間
後に採血した。エタノールアミンの腹腔内投与群では、
エタノールアミン換算で２．８mg／kgの用量と対照群を
設定した。経口投与群ではエタノールアミン換算で１６
mg／kgの用量と対照群を設定した。以下に無処理対照
（Control）、腹腔内投与及び経口投与の群構成を、表
４及び表５にそれぞれ示す。

【００４１】

【表４】

【００４２】

【表５】

【００４３】動物はジエチルエーテル（和光純薬製）で
麻酔をかけた後開腹し、１mlディスポーサブルシリンジ
（テルモ製）により腹大動脈より採血し、１．５mlエッ
ペンドルフチューブに分注、５０００rpm、１０分の遠
心分離操作により血清を得た。得られた血清中の血清ト
ランスアミナーゼ（ＧＯＴ・ＧＰＴ）の活性を測定し
た。測定はCobas Miraシステム（バクスター製）を用い
て行った。

【００４４】（５）結果 得られた結果を図２〜図５に示す。これらの図から明ら
かなように、エタノールアミン腹腔内投与群（２．８mg
／kg）及び経口投与群（１６mg／kg）において、ＧＯＴ
及びＧＰＴが、いずれも有意に低下することが認められ
た。また、肝病理組織像のネクローシス部分の面積が縮
小する傾向が認められた。

【００４５】実施例５ 肝硬変に対する効果 Ｎ−ニトロソジエチルアミンにより肝硬変を誘発したラ
ットを用い、病理組織標本の所見を指標として、エタノ
ールアミン（肝細胞増殖因子）の肝硬変治療効果を検討
した。

【００４６】（１）使用動物 Sprague-Dawley系雄ラット（日本エスエルシー製）を５
週令で５０匹購入し、予備飼育を５日間行い、健康状態
を確認後に使用した。 （２）群分け 購入した全ラットの体重を測定して体重により層別化
し、各層から各群の平均体重がほぼ等しくなるように動
物を３０匹抽出して、１群を１０匹として３群構成し
た。群構成は、投与開始日の投与前に実施した。 （３）Ｎ−ニトロソジエチルアミン及びエタノールアミ
ンの調製 ・Ｎ−ニトロソジエチルアミン Ｎ−ニトロソジエチルアミン溶液の５．３２ml（比重
０．９４のため５ｇに相当）をガラスピペットでメスシ
リンダーに取り、生理食塩水を加えて１００mlに調製
後、２分間の超音波処理（Sine Sonic １５０、形式Ｕ
Ａ１５０、神明台工業製）により均一溶液にし、５０mg
／ml溶液を調製した。 ・エタノールアミン ３．０５mlのエタノールアミンを生理食塩水に溶解し、
塩酸で中和した後に生理食塩水で５０mlとした。このエ
タノールアミン溶液１０mlを生理食塩水３６mlで希釈し
た。 （５）投与方法及び投与量 １群の動物数は１０匹とした。Ｎ−ニトロソジエチルア
ミンの初回投与日をday ０として、day ０、７、１４、
２１及び２８の午前中１回、１００mg／２ml／kgのＮ−
ニトロソジエチルアミンを腹腔内投与した。エタノール
アミン投与は、Ｎ−ニトロソジエチルアミン投与１日後
（day １，８，１５，２２）に、更にＮ−ニトロソジエ
チルアミン投与３日後（day ３，１０，１７，２４，３
１）の午前中１回腹腔内投与した。対照としてエタノー
ルアミンの代わりに生理食塩水を投与した。エタノール
アミンの腹腔内投与群では、エタノールアミン塩基換算
で４０mg／kgの用量と対照群を設定した。以下に無処理
（Control）及び腹腔内投与の群構成を表６に示す。

【００４７】

【表６】

【００４８】ラットはＮ−ニトロソジエチルアミン最終
投与後６日目に一夜絶食させ、７日目に解剖した。ジエ
チルエーテル（和光純薬製）で麻酔をかけた後、胸腹部
を開腹し、肝臓を摘出し、肉眼所見を得た後、重量を測
定、１０％中性緩衝ホルマリン液で固定した。２４時間
以上の固定の後、常法によりパラフィン包埋し、薄切切
片を作製した。薄切切片はヘマトキシリン・エオジン染
色、マッソン染色を施し、肝硬変化の病理組織学的観察
に用いた。肝硬変化の指標として、肉眼観察では結節の
形成を、病理組織学的観察では明細胞性小増殖巣の形成
を用い、その変化を４段階に程度分けし、程度ごとの個
体数を結果として表わした。

【００４９】（６）結果 病理組織学的所見で全群の全例に明細胞性小増殖巣（cl
ear cell foci）が認められた。表７にこれらの変化の
程度を軽度（＋１）、中等度（＋２）、高度（＋３）、
極めて高度（＋４）の４段階に評価し、各群１０例中の
例数を示した。

【００５０】

【表７】

【００５１】明細胞性小増殖巣は、肝細胞の過形成病巣
で周囲実質を圧迫し、周縁は明瞭で、偽小葉又は小結節
とは直接的な相関はなく、ＮＴＰ（The National Toxic
ology Program）の命名法によるfoci of cellular alte
rationに相当するものであった。この小増殖巣は、対照
群では全例が中程度から極めて高度であったが、被験物
質群では軽度が６例に認められ、対照群に比し被験物質
群は軽度であった。Dunnett法による統計検定により、
対照群と被験物質群との間で明細胞性小増殖巣の形成の
程度にＰ＜０．０５の危険率で有意差が認められた。

【００５２】実施例６ 急性毒性試験 モノエタノールアミン・ＨＣｌを０．６ｇ／mlの濃度に
生理食塩水に溶解した。pHは５Ｎ ＮａＯＨで７．０に
調整した。これより低濃度の溶液は生理食塩水で希釈し
調整した。マウス（ＩＣＲ、雌、６週令、２９ｇ）に上
記溶液を２４０μl 腹腔注射し生存率を求めた。５．０
及び２．５ｇ／kgの用量で投与したものは３０分以内に
死亡したが、１．２５ｇ／kg以下の用量のものは６日後
も死亡することはなかった。結果を表８に示す。

【００５３】

【表８】

【００５４】

【発明の効果】本発明の肝細胞増殖活性を示すアミノア
ルコール類（１）又はその塩は、哺乳動物小腸上皮粘膜
抽出液の高分子画分あるいはＥＧＦ存在下で肝細胞の増
殖を相乗的に促進し、低分子であり、生体成分でもある
ので、生体に投与した場合に抗原性、毒性等の問題が出
ない。生体に投与した場合は、アミノアルコール類
（１）又はその塩のみの投与で肝細胞分裂促進を誘導で
き、また肝障害修復効果を示すので、例えば急性肝炎、
慢性肝炎、肝硬変の治療や肝手術後の肝再生促進に有用
である。

【図面の簡単な説明】

【図１】各種アミノアルコール類の肝細胞増殖活性を³
Ｈ−ＴｄＲ取込み量（ｃｐｍ）で示す。

【図２】四塩化炭素肝障害マウスへのエタノールアミン
腹腔投与によるＧＯＴ値の低下を示す。

【図３】四塩化炭素肝障害マウスへのエタノールアミン
腹腔投与によるＧＰＴ値の低下を示す。

【図４】四塩化炭素肝障害マウスへのエタノールアミン
経口投与によるＧＯＴ値の低下を示す。

【図５】四塩化炭素肝障害マウスへのエタノールアミン
経口投与によるＧＰＴ値の低下を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 坪井 洋 神奈川県小田原市成田540番地 明治乳業 株式会社ヘルスサイエンス研究所内 (72)発明者 水本 憲司 神奈川県小田原市成田540番地 明治乳業 株式会社ヘルスサイエンス研究所内 (72)発明者 高橋 直躬 東京都世田谷区桜上水５−２−９

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（１） 【化１】 〔式中、Ｒ¹ は水素原子又はホスホノ基を示し、Ｒ² は
   水素原子又は-(CH₂)_n-OR ¹を示し、ｎは２〜５の整数を
   示す〕で表わされるアミノアルコール類又はその塩を有
   効成分とする肝疾患治療剤。
2. 【請求項２】 一般式（１）中、ｎが２又は３である請
   求項１記載の肝疾患治療剤。
3. 【請求項３】 アミノアルコール類（１）が、モノエタ
   ノールアミン、ジエタノールアミン、ホスホエタノール
   アミン及びモノプロパノールアミンからなる群より選ば
   れた化合物である請求項１記載の肝疾患治療剤。