JPH0820452B2 - 血液中糖類の微生物による消費阻止方法 - Google Patents
血液中糖類の微生物による消費阻止方法Info
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- JPH0820452B2 JPH0820452B2 JP3331654A JP33165491A JPH0820452B2 JP H0820452 B2 JPH0820452 B2 JP H0820452B2 JP 3331654 A JP3331654 A JP 3331654A JP 33165491 A JP33165491 A JP 33165491A JP H0820452 B2 JPH0820452 B2 JP H0820452B2
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- Japan
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- blood
- microorganisms
- naf
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は血液中のブドウ糖，
１,5ーアンヒドログルシトール（ポリオール糖類）等の
糖類を測定するに際し採血後のそれらの成分量の変化，
特に細菌等の微生物による変化を防止して正確な測定値
を得るための方法に関するものである。
１,5ーアンヒドログルシトール（ポリオール糖類）等の
糖類を測定するに際し採血後のそれらの成分量の変化，
特に細菌等の微生物による変化を防止して正確な測定値
を得るための方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】糖尿病等の診断のために血液中のブドー
糖等の糖類の値を測定する場合に試料血液を採血して分
析を行う。その場合に試料をそのまま室温に放置すると
血液中の赤血球等の本来的に血液に含まれている細胞中
の解糖酵素群による解糖反応が進行する。一般に血液の
試料を採血して分析作業をする迄に少なくとも２〜３時
間（病院等の自所分析の場合），場合によっては数十時
間（他所依頼の場合）の時間があり，従って前記解糖反
応を防止する必要があった。
糖等の糖類の値を測定する場合に試料血液を採血して分
析を行う。その場合に試料をそのまま室温に放置すると
血液中の赤血球等の本来的に血液に含まれている細胞中
の解糖酵素群による解糖反応が進行する。一般に血液の
試料を採血して分析作業をする迄に少なくとも２〜３時
間（病院等の自所分析の場合），場合によっては数十時
間（他所依頼の場合）の時間があり，従って前記解糖反
応を防止する必要があった。
【０００３】更に最近では，例えば川合厚生氏他，
「１．５ーアンヒドログルシトール」，臨床検査 vol.
33, No.８，1989年８月にあるように，糖尿病に対する
マーカーとして１，５アンヒドログルシトールを同時に
測定することが行われるようになった。該成分も時間の
経過と共に減少する。
「１．５ーアンヒドログルシトール」，臨床検査 vol.
33, No.８，1989年８月にあるように，糖尿病に対する
マーカーとして１，５アンヒドログルシトールを同時に
測定することが行われるようになった。該成分も時間の
経過と共に減少する。
【０００４】これに対し従来からフッ素化合物やモノヨ
ード酢酸を主体とした解糖阻止剤を添加したりすること
が行われていたがその効果は万全ではなかった。
ード酢酸を主体とした解糖阻止剤を添加したりすること
が行われていたがその効果は万全ではなかった。
【０００５】本発明者らは試料として採取した血液に酸
を加えてｐＨが５．０〜７．０になるように試料の酸性
度を調整することにより前記の酵素系による解糖反応を
速効的に阻止できることを発見し特願昭６０ー１００１
６１号（特公開６１ー２５８１７４号）として出願し
た。また同発明は酸性度を調整し，且つＮａＦ（フッ化
ナトリウム）０．１〜０．５mg/ml を血液試料に添加す
ると阻止効果がより長時間持続することも含まれてい
る。
を加えてｐＨが５．０〜７．０になるように試料の酸性
度を調整することにより前記の酵素系による解糖反応を
速効的に阻止できることを発見し特願昭６０ー１００１
６１号（特公開６１ー２５８１７４号）として出願し
た。また同発明は酸性度を調整し，且つＮａＦ（フッ化
ナトリウム）０．１〜０．５mg/ml を血液試料に添加す
ると阻止効果がより長時間持続することも含まれてい
る。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】前記の採取した血液試
料のｐＨを調整する方法は解糖阻止法として非常に有効
であった。しかし実際には稀にこの方法によっても解糖
が生ずる場合が存在することが分かった。例えば小林芳
夫氏, 「感染性心内膜炎・敗血症」Medical Technology
Vol19, No.10.には敗血症，感染性心内膜炎の患者では
原因不明の低血糖が認められることが指摘されている。
また普通の血糖値の測定においても稀に解糖作用が生じ
て異常に不正確な値を検出する場合があると言う課題が
あった。
料のｐＨを調整する方法は解糖阻止法として非常に有効
であった。しかし実際には稀にこの方法によっても解糖
が生ずる場合が存在することが分かった。例えば小林芳
夫氏, 「感染性心内膜炎・敗血症」Medical Technology
Vol19, No.10.には敗血症，感染性心内膜炎の患者では
原因不明の低血糖が認められることが指摘されている。
また普通の血糖値の測定においても稀に解糖作用が生じ
て異常に不正確な値を検出する場合があると言う課題が
あった。
【０００７】
【課題を解決するための手段】このような実情に鑑み本
発明者らは鋭意研究の結果，前記の血液試料中の糖類の
不安定性は血液中に稀に含まれる赤血球，白血球，血小
板等の血液に本来含まれる細胞以外の他の細菌や微生物
の増殖に伴うブドー糖，及び１，５アンヒドログルシト
ール等の糖類の消費によるものであり，従ってこの不安
定性を解消するには本来含まれる血液細胞中の解糖酵素
群やポリオール代謝酵素系の解糖作用をｐＨ調整その他
の方法で阻止するだけでは不十分であり，他の細胞，微
生物の増殖による糖類の消費を阻止することが必要であ
ることを見い出した。
発明者らは鋭意研究の結果，前記の血液試料中の糖類の
不安定性は血液中に稀に含まれる赤血球，白血球，血小
板等の血液に本来含まれる細胞以外の他の細菌や微生物
の増殖に伴うブドー糖，及び１，５アンヒドログルシト
ール等の糖類の消費によるものであり，従ってこの不安
定性を解消するには本来含まれる血液細胞中の解糖酵素
群やポリオール代謝酵素系の解糖作用をｐＨ調整その他
の方法で阻止するだけでは不十分であり，他の細胞，微
生物の増殖による糖類の消費を阻止することが必要であ
ることを見い出した。
【０００８】すなわち、本発明に係る「血液中糖類の微
生物による消費阻止方法」は、ブドー糖、１，５アンヒ
ドログルシトールなどの血液中糖類を分析測定するに際
し、採取した血液試料に対し各種酸を加えてｐＨを５．
０〜６．８に調整し、さらに弗酸塩をＮａＦに等量換算
して血液１ｍｌ当たり３ｍｇ以上加える方法であり、こ
の方法によって始めて、酵素系による解糖作用と共に、
細菌をはじめとする微生物の増殖による糖類の消費を阻
止して、常に正確な分析値を得ることができる。
生物による消費阻止方法」は、ブドー糖、１，５アンヒ
ドログルシトールなどの血液中糖類を分析測定するに際
し、採取した血液試料に対し各種酸を加えてｐＨを５．
０〜６．８に調整し、さらに弗酸塩をＮａＦに等量換算
して血液１ｍｌ当たり３ｍｇ以上加える方法であり、こ
の方法によって始めて、酵素系による解糖作用と共に、
細菌をはじめとする微生物の増殖による糖類の消費を阻
止して、常に正確な分析値を得ることができる。
【０００９】採取した血液試料は分析作業を行う前に容
器の移し替え，保存等の処理が行われる。空気中には種
々の雑菌，細菌が存在し，又取扱中の人体との接触等に
より容器等が汚染されることがある。これにより汚染さ
れた血液中にはグラム陰性桿菌，グラム陽性球菌等が多
く含まれることが多い。また感染性心内膜炎・敗血症等
の菌血症の患者の場合には血液中にグラム陽性球菌その
他の細菌が含まれていることが認められている。これら
の細菌や微生物が血液中に存在すると試料の保存等の採
血後の処理過程で，温度，環境，運送等の条件にもよる
が，通常状態では細菌，微生物は血液中で容易に増殖し
て，増殖にともなうブトー糖や１．５アンヒドログルシ
トールの消費が生ずるのであり，これが前記課題の生ず
る原因であった。
器の移し替え，保存等の処理が行われる。空気中には種
々の雑菌，細菌が存在し，又取扱中の人体との接触等に
より容器等が汚染されることがある。これにより汚染さ
れた血液中にはグラム陰性桿菌，グラム陽性球菌等が多
く含まれることが多い。また感染性心内膜炎・敗血症等
の菌血症の患者の場合には血液中にグラム陽性球菌その
他の細菌が含まれていることが認められている。これら
の細菌や微生物が血液中に存在すると試料の保存等の採
血後の処理過程で，温度，環境，運送等の条件にもよる
が，通常状態では細菌，微生物は血液中で容易に増殖し
て，増殖にともなうブトー糖や１．５アンヒドログルシ
トールの消費が生ずるのであり，これが前記課題の生ず
る原因であった。
【００１０】弗酸塩，特にＮａＦは従来から単独もしく
はＥＤＴＡやヘパリンと併用して用いられており，その
濃度として血液１ml当たり１〜１０mgの範囲で用いられ
ることが多いし，また弗酸塩としてＮａＦを用いると３
mg／ml以上で溶血が生ずる恐れがあるので普通は１．２
５mg／ml程度を使用している。しかし単に弗酸塩をこの
条件下で添加しても血液中に混入した細菌，微生物の増
殖を阻止することはできない。
はＥＤＴＡやヘパリンと併用して用いられており，その
濃度として血液１ml当たり１〜１０mgの範囲で用いられ
ることが多いし，また弗酸塩としてＮａＦを用いると３
mg／ml以上で溶血が生ずる恐れがあるので普通は１．２
５mg／ml程度を使用している。しかし単に弗酸塩をこの
条件下で添加しても血液中に混入した細菌，微生物の増
殖を阻止することはできない。
【００１１】
【作用】本発明のように，採血後の血液試料を酸により
ｐＨを５．０〜６．８に低下（酸性化）させると，特願
昭６０ー１００１６１号（特公開６１ー２５８１７４
号）にあるように，血液細胞中の解糖系諸酵素による解
糖を即時的に阻止することができる。さらにこの条件下
で弗素化合物（例えばＮａＦ）を血液１ml当たり３mg以
上の濃度になるように添加すると，その条件下で初めて
細菌，微生物の増殖が抑制される。また酸性度を低下し
た状態ではＮａＦが３mg／ml以上の濃度にしても溶血が
生じない。
ｐＨを５．０〜６．８に低下（酸性化）させると，特願
昭６０ー１００１６１号（特公開６１ー２５８１７４
号）にあるように，血液細胞中の解糖系諸酵素による解
糖を即時的に阻止することができる。さらにこの条件下
で弗素化合物（例えばＮａＦ）を血液１ml当たり３mg以
上の濃度になるように添加すると，その条件下で初めて
細菌，微生物の増殖が抑制される。また酸性度を低下し
た状態ではＮａＦが３mg／ml以上の濃度にしても溶血が
生じない。
【００１２】本発明を実施するには，例えば血液採取試
験管にクエン酸, クエン酸ーナトリウム，ＥＤＴＡー２
Ｎａ，ＮａＦからなる顆粒状の薬剤を予め規定量入れて
おき，該試験管に採取した血液を規定量だけ注入するか
あるいは直接採取して，そのまま保存して普通の手段に
よりブドー糖，１．５アンヒドログルシトールを定量す
ればよい。
験管にクエン酸, クエン酸ーナトリウム，ＥＤＴＡー２
Ｎａ，ＮａＦからなる顆粒状の薬剤を予め規定量入れて
おき，該試験管に採取した血液を規定量だけ注入するか
あるいは直接採取して，そのまま保存して普通の手段に
よりブドー糖，１．５アンヒドログルシトールを定量す
ればよい。
【００１３】
【実施例】血液を採取して(a) ｐＨを５．５に調整した
血液試料（従来法），(b) ＮａＦを４mg／mlを添加した
血液試料（従来法），(c) 試料採取管にクエン酸，クエ
ン酸ナトリウム，ＥＤＴＡー２Ｎａ，ＮａＦ を１６：
３４：２３：２７の比率で混和して顆粒化した薬剤を１
２mg／ml（血液当たり）入れて混和した試料（本発明
法），の３つの試料を造った。これらの試料にセラチア
菌（グラム陰性桿菌の一種）を１０5 個／ml（血液当た
り）を投入して，３７°Ｃで放置してブドー糖の濃度を
分析測定して比較したところ図１の通りであった。この
結果から本発明の方法によると血液中の糖類を安定的に
測定することができることが分かる。尚１．５アンヒド
ログルシトールの測定においても同様の結果が得られ
た。
血液試料（従来法），(b) ＮａＦを４mg／mlを添加した
血液試料（従来法），(c) 試料採取管にクエン酸，クエ
ン酸ナトリウム，ＥＤＴＡー２Ｎａ，ＮａＦ を１６：
３４：２３：２７の比率で混和して顆粒化した薬剤を１
２mg／ml（血液当たり）入れて混和した試料（本発明
法），の３つの試料を造った。これらの試料にセラチア
菌（グラム陰性桿菌の一種）を１０5 個／ml（血液当た
り）を投入して，３７°Ｃで放置してブドー糖の濃度を
分析測定して比較したところ図１の通りであった。この
結果から本発明の方法によると血液中の糖類を安定的に
測定することができることが分かる。尚１．５アンヒド
ログルシトールの測定においても同様の結果が得られ
た。
【００１４】
【発明の効果】以上に詳しく説明したように，本発明の
方法は血液中のブドー糖，１．５アンヒドログルシトー
ルを測定する際に，採取血液試料に酸，特にクエン酸を
添加して血液のｐＨを５．０〜６．８に調整すると共に
弗酸塩の添加を併用することによって，血液中の血液細
胞中の解糖酵素群による解糖反応と細菌を始めとする微
生物の容器の汚染や空気中からの混入の場合にそれらの
増殖による糖類，ブドウ糖や１．５アンヒドログルシト
ールの消費（減少）を共に阻止できるものであり，これ
により試料採取後，分析作業まで数十時間が経過，保存
しても正確な分析値を得ることができる。血糖値，１．
５アンヒドログルシトールの検査，特に大量に試料の検
査を行う場合に非常に有効な方法である。
方法は血液中のブドー糖，１．５アンヒドログルシトー
ルを測定する際に，採取血液試料に酸，特にクエン酸を
添加して血液のｐＨを５．０〜６．８に調整すると共に
弗酸塩の添加を併用することによって，血液中の血液細
胞中の解糖酵素群による解糖反応と細菌を始めとする微
生物の容器の汚染や空気中からの混入の場合にそれらの
増殖による糖類，ブドウ糖や１．５アンヒドログルシト
ールの消費（減少）を共に阻止できるものであり，これ
により試料採取後，分析作業まで数十時間が経過，保存
しても正確な分析値を得ることができる。血糖値，１．
５アンヒドログルシトールの検査，特に大量に試料の検
査を行う場合に非常に有効な方法である。
【図１】 各種の解糖阻止法を行った試料血液にセラチ
ア菌を１０5 個／ml（血液当たり）を添加して室温に保
持した時のブドー糖値の時間的変化を示すグラフであ
る。図中，(a) ｐＨ調整法（従来法），(b) ＮａＦを添
加する方法（従来法），(c) 本発明の方法の場合を示
す。
ア菌を１０5 個／ml（血液当たり）を添加して室温に保
持した時のブドー糖値の時間的変化を示すグラフであ
る。図中，(a) ｐＨ調整法（従来法），(b) ＮａＦを添
加する方法（従来法），(c) 本発明の方法の場合を示
す。
Claims (5)
- 【請求項１】 ブドー糖、１，５アンヒドログルシトー
ルなどの血液中糖類を分析測定するに際し、採取した血
液試料に対し各種酸を加えてｐＨを５．０〜６．８に調
整し、さらに弗酸塩をＮａＦに等量換算して血液１ｍｌ
当たり３ｍｇ以上加えることを特徴とする血液中糖類の
微生物による消費阻止方法。 - 【請求項２】 ブドー糖、及び／又は、１，５アンヒド
ログルシトールを分析測定する場合に使用することを特
徴とする請求項１に記載の血液中糖類の微生物による消
費阻止方法。 - 【請求項３】 酸としてクエン酸、弗酸塩としてＮａＦ
（フッ化ナトリウム）を用いることを特徴とする請求項
１又は請求項２に記載の血液中糖類の微生物による消費
阻止方法。 - 【請求項４】 血液採取試験管に、クエン酸、クエン酸
−ナトリウム、ＥＤＴＡ−２Ｎａ、ＮａＦを所定割合で
混和して顆粒化した薬剤を予め規定量入れておくことを
特徴とする請求項３に記載の血液中糖類の微生物による
消費阻止方法。 - 【請求項５】 クエン酸、クエン酸−ナトリウム、ＥＤ
ＴＡ−２Ｎａ、ＮａＦを１６：３４：２３：２７程度の
割合で混和することを特徴とする請求項４に記載の血液
中糖類の微生物による消費阻止方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3331654A JPH0820452B2 (ja) | 1991-12-16 | 1991-12-16 | 血液中糖類の微生物による消費阻止方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3331654A JPH0820452B2 (ja) | 1991-12-16 | 1991-12-16 | 血液中糖類の微生物による消費阻止方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05164758A JPH05164758A (ja) | 1993-06-29 |
| JPH0820452B2 true JPH0820452B2 (ja) | 1996-03-04 |
Family
ID=18246090
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3331654A Expired - Lifetime JPH0820452B2 (ja) | 1991-12-16 | 1991-12-16 | 血液中糖類の微生物による消費阻止方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0820452B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2279653B (en) * | 1993-07-05 | 1998-02-11 | North Gen Hospital Nhs Trust | Stabilisation of cells with an agent comprising a heavy metal compound |
| EP0754301B1 (en) * | 1994-04-05 | 1998-09-09 | Northern General Hospital N.H.S. Trust | Preparation and stabilisation of cell suspensions |
| EP2405275B1 (en) * | 2009-03-05 | 2018-10-10 | BML, Inc. | Method for measuring glycated albumin contained in serum or plasma using mannitol as stabiliser for a control serum or plasma. |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0687062B2 (ja) * | 1985-05-10 | 1994-11-02 | 株式会社京都医科学研究所 | 血液中の解糖阻止方法 |
-
1991
- 1991-12-16 JP JP3331654A patent/JPH0820452B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05164758A (ja) | 1993-06-29 |
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