JPH0783921A - 糖化蛋白の測定方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 不溶性担体としてのラテックスに、測定対象
に対するモノクローナル抗体と、糖に対し親和性を持つ
物質とをそれぞれ担持させ、上記モノクローナル抗体担
持ラテックスと、上記糖親和性物質担持ラテックスとに
それぞれ検体を反応させ、ラテックスの凝集度合を光学
的に測定することを特徴とする糖化蛋白の測定方法であ
る。 【効果】 例えば糖尿病の診断マーカーとして有用な糖
化蛋白の存在比を簡易に測定することのできる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、例えば糖尿病の診断マ
ーカーとして有用な糖化蛋白を測定する、臨床検査分野
等で利用される測定方法に関し、さらに詳しくは、不溶
性担体としてラテックスを使用し、これに、測定対象に
対するモノクローナル抗体と、糖に対し親和性を持つ物
質とをそれぞれ担持させ、モノクローナル抗体担持ラテ
ックスおよび糖親和性物質担持ラテックスと検体との反
応による凝集度合を用いて測定対象物質を測定する糖化
蛋白の測定方法に関する。

【０００２】

【従来技術および解決すべき課題】血液中の蛋白成分で
あるアルブミンや赤血球中のヘモグロビンはグルコース
と非酵素的に反応して糖化され、糖化蛋白となることが
知られている。この糖化を受ける蛋白の量は、その蛋白
が生体中に存在していた期間の体内のグルコース量に比
例しているため、体内の蛋白中の糖化蛋白量を測定する
ことは、糖尿病の診断等の臨床検査分野において有用で
ある。

【０００３】このような糖化蛋白量を測定するマーカー
としては、例えば、ヘモグロビンＡｌｃ（ＨｂＡｌｃ）
あるいはフルクトサミン等が挙げられる。

【０００４】ＨｂＡｌｃは、ヘモグロビンのβサブユニ
ットのＮ末端アミノ酸にグルコースが結合したもので、
臨床検査において用いられるマーカーの一つである。Ｈ
ｂＡｌｃを用いる糖化蛋白量の測定は、充填剤としてイ
オン交換樹脂を使用した専用の高速液体クロマトグラフ
（ＨＰＬＣ）によって行われる（例えば、特開昭６３−
２９８０６３号公報）。この測定法によるＨｂＡｌｃ値
は総ヘモグロビン量に対するＨｂＡｌｃ量の相対パーセ
ントで示されるため、測定値が被検試料中に含まれるヘ
モグロビン量の影響を受けないという特徴があるもの
の、異常ヘモグロビン（例えばＨｂＳ）の影響を受ける
ことがあるという問題がある。

【０００５】また、フルクトサミンをマーカーとして用
いる測定法は、糖化蛋白の還元性を利用した比色法であ
り、生化学検査用の自動測定機を用いて血漿あるいは血
清中に含まれている糖化蛋白量を測定する方法である。
この測定法では、糖化蛋白量の絶対量としてフルクトサ
ミンの測定値が示されるので、測定値が試料中に含まれ
ている蛋白量の影響を受けるという問題がある。

【０００６】また、他の測定法として、ボロン酸アフィ
ニティー法を利用した、ＨＰＬＣを用いた糖化蛋白の測
定法が知られている。ボロン酸アフィニティー法は、ボ
ロン酸が弱アルカリ条件下でシス・ジオール基を持つ物
質と可逆的な結合体を作ることを利用した方法であり、
例えば、クロマトグラフィー用の充填剤としてアミノフ
ェニルボロン酸をセルロースやポリアクリルアミド樹脂
に結合させた例が報告されている。ボロン酸は弱アルカ
リの条件下でボロン酸陰イオンとなり、シス・ジオール
基を持つ物質と安定な結合体を形成する。この結合体は
可逆的でｐＨを酸性側にすることにより解離する。この
性質を利用して充填剤としてボロン酸を利用することに
よって、シス・ジオール基を持つ物質の充填剤への吸着
・脱着をｐＨの変化だけでコントロールすることができ
る。

【０００７】ボロン酸アフィニティー法を利用した、Ｈ
ＰＬＣを用いる糖化アルブミンの測定について、その専
用測定機は未だ当業界に普及していないものの、特開平
２−９６６５７号公報には、この測定法による糖化アル
ブミン値は、血漿あるいは血清試料中に含まれているア
ルブミンのうち、糖化されたアルブミン量の総アルブミ
ン量に対する相対パーセントで示される旨が記載されて
いる。従って、フルクトサミンをマーカーとする測定法
等で問題になっている試料中の蛋白量変動による測定値
への影響がないことから、糖尿病の診断等の臨床検査分
野において非常に有用であると考えられる。

【０００８】即ち、ボロン酸アフィニティー法を利用し
た、上記のＨＰＬＣによる糖化アルブミンの測定法とし
て、同公報には、第１カラムで試料中のアルブミンと他
の蛋白を分離した後、アルブミンのみを第２カラム（ボ
ロン酸アフィニティーカラム）に導き、糖化アルブミン
と非糖化アルブミンに分離する方法が記載されている。

【０００９】また、その他のＨＰＬＣによる糖化アルブ
ミンの測定法として、臨床化学、第２０巻補冊２号（１
９９１年）中の３４ｂ頁および３５ｂ頁では、試料をボ
ロン酸アフィニティーカラムにより糖化成分と非糖化成
分に分離した後、アルブミンのみと特異的に結合する色
素（ブロムクレゾールパープル）を用いて、ポストカラ
ム法によりアルブミンを検出する方法が記載されてい
る。

【００１０】また、他の測定法として、糖化蛋白に対す
る特異的抗体を用いて糖化蛋白を検出する測定法が開発
されており、ＥＬＩＳＡ法による糖化アルブミンの測定
キットがアメリカのＥＸＯＣＥＬＬ，ＩＮＣ．社からＧ
ＬＹＣＡＢＥＮの商品名で販売されている。ここでいう
ＥＬＩＳＡ法とは、固相化抗ヒト糖化アルブミンモノク
ローナル抗体と酵素標識抗ヒトアルブミンポリクローナ
ル抗体とのサンドイッチ法である。このキットでは、試
料中の糖化アルブミン量をＥＬＩＳＡ法で、総アルブミ
ン量をＢＣＧ（ブロムクレゾールグリーン）法で別々に
測定し、測定値を総アルブミン量に対する糖化アルブミ
ン量の比（パーセント）で表するようになっている。

【００１１】しかしながら、前記ＨＰＬＣ法による測定
は１検体当たりの測定時間が長いため、同時に多数検体
の測定ができないという問題がある。また、前記ＥＬＩ
ＳＡ法による測定キットを用いた測定では、総アルブミ
ン量に対する糖化アルブミン量の存在比を測定するため
には、糖化アルブミン量と総アルブミン量を別々に測定
する必要があるので、非常に手間のかかるものである。

【００１２】また、前記ＥＬＩＳＡ法による測定キット
を用いた測定では、固相化抗ヒト糖化アルブミン抗体と
してアルブミンの糖化部位を認識するモノクローナル抗
体を使用しているが、ヒトアルブミンは４カ所の糖化を
受ける部位があるため、１種のモノクローナル抗体だけ
では糖化アルブミン量を正確に測定することはできない
という欠点を有している。このように糖化アルブミンに
対するモノクローナル抗体を利用した糖化アルブミンの
測定は、抗原−抗体反応を利用するので特異性に優れて
いるものの、全ての糖化アルブミンを認識できる抗体を
作製することは困難であるという問題がある。

【００１３】また、他の免疫学的な測定法として、特開
昭６２−１００６６０号公報には、糖化蛋白を特異的に
吸着するフェニルボロン酸等の基質特異性／親和性の吸
着体を結合させた固相とある特定の蛋白にのみ特異的親
和性を有する標識化抗体を用いる方法により、ある特定
蛋白のみを特異的に測定する方法が記載されている。こ
の方法は、ある特定糖化蛋白の存在量を特異的に測定で
きる点で優れた方法であるが、フェニルボロン酸に結合
するのは種々の糖化蛋白であるため、臨床的に意義のあ
る特定蛋白の糖化割合を測定するためには特定蛋白の総
量を別に測定することが必須であるという問題がある。

【００１４】また、他の免疫学的な測定法として、特開
昭６４−１６９６４号公報には、特定蛋白に対する抗体
を担体上に固定化した固相化抗体と被検液とを反応させ
た後、固相上の遊離の糖を除去し、還元剤を用いて糖化
蛋白の糖化部分を還元型に還元し、が該還元反応時また
は還元反応後標識化抗還元型糖化蛋白抗体を反応させ、
固相と液相を分離し、いずれかの相の標識量を測定し、
その測定値から特定糖化蛋白含量を測定する方法が記載
されている。この方法は、被検液として固相上に固定化
した既定量の抗体のすべてに特定蛋白が結合しうる濃度
以上で特定蛋白を含有しうるものを用いることにより、
同一の固相化抗体に結合する特定蛋白量は常に一定とな
るため、特定蛋白の総量を測定する手間を省くことがで
きるという点で優れた方法であるが、還元工程が必要で
あるので操作が複雑化すること、抗還元型糖化蛋白抗体
が必要であるがロット間差のない抗体の作製が容易でな
いこと等の問題がある。

【００１５】その他の免疫測定法としては、特開平４−
１３０２７４に、糖化蛋白分子をレクチン−レクチンの
サンドイッチとすることが記載されている。このレクチ
ン−レクチンの組み合わせは、糖化蛋白に対してはこれ
を捕捉することができるが、特定蛋白を測定するには適
しない。

【００１６】また、特開平５−８７８０９には、抗アル
ブミン抗体とペルオキシダーゼを標識化ボロン酸誘導体
を用いたＥＩＡ法が記載されているが、ＥＩＡ法は操作
が煩雑であり、個人による手技が測定系に与える影響が
大きい。

【００１７】本発明の目的は、糖化蛋白の存在比を簡易
に測定することのできる糖化蛋白の測定方法を提供する
ことにある。

【００１８】

【課題を解決するための手段】本発明による糖化蛋白の
測定方法は、上記目的を達成すべく工夫されたものであ
り、不溶性担体としてのラテックスに、測定対象に対す
るモノクローナル抗体と、糖に対し親和性を持つ物質と
をそれぞれ担持させ、上記モノクローナル抗体担持ラテ
ックスと、上記糖親和性物質担持ラテックスとにそれぞ
れ検体を反応させ、その後ラテックスの凝集度合を光学
的に測定することを特徴とするものである。

【００１９】モノクローナル抗体担持ラテックスと検体
との反応、および、糖親和性物質担持ラテックスと検体
との反応は、前者を先に後者を後に行ってもよいし、ま
たは両者を同時に行ってもよい。

【００２０】ラテックスの凝集の多くは、測定対象と糖
親和性物質との反応により起こるため、測定対象の糖化
の割合として測定することができる。

【００２１】次に、測定系についてさらに詳述する。

【００２２】１）抗体としてはモノクローナル抗体を使
用する。

【００２３】２）糖親和性物質をラテックスに直接結合
させても、または、糖親和性物質をあるキャリア蛋白に
結合させたものをラテックスに結合させても構わない。

【００２４】３）系中のモノクローナル抗体量は、ラテ
ックスに固定させる段階で調節することができるため、
ほぼ一定量とすることができる。

【００２５】４）抗原抗体反応を促進させる物質（ポリ
エチレングリコール等）を併用することもできる。

【００２６】５）測定対象と糖親和性物質との反応以外
の凝集としては、ある蛋白に糖化されている部分が多い
場合、糖親和性物質−蛋白−糖親和性物質というケース
が考えられる。これは、量的に少なければノイズとして
無視することができる。また、反応時間を制御してこの
凝集を余り起こさせないようにすることも可能である。

【００２７】６）糖親和性物質としては、ジヒドロキシ
ボリル化合物、レクチン等が例示される。

【００２８】７）使用できるラテックスのポリマーとし
ては０．０５〜１．０μｍ程度の粒径を有するものが好
適に用いられる。また、ラテックスの樹脂材料としては
ポリスチレン等が好適に用いられる。

【００２９】８）測定対象物質は糖蛋白であれば特に限
定されず、臨床上必要に応じて測定することができる。
現在臨床上で有用とされている測定対象物質は、糖化ア
ルブミン、糖化ヘモグロビン等である。

【００３０】９）光学的測定機器としては、汎用の分光
光度計、分光光度測定を測定原理とした生化学用自動分
析装置（日立製作所社製、日立７１５０、７０７０等、
東芝社製、東芝ＴＢＡ−８０Ｒ等）、近赤外を測定波長
とした装置（三菱化成社製、ＬＰＩＡ等）、積分球濁度
を測定原理とした装置（協和醗酵社製、ＥＬシステム
等）、散乱光強度を測定する装置（ベーリンガー社製、
ＢＮＡシステム等）が使用可能である。

【００３１】

【実施例】以下に本発明の糖化蛋白の測定方法を、測定
対象となる蛋白が糖化アルブミンである場合について、
更に詳しく説明する。ただし、本発明の測定方法の対象
となる糖化蛋白はこれに限定されるものではなく、例え
ば糖化ヘモグロビン等も糖化アルブミンと同様に本発明
の測定方法の対象となる。また測定対象となる糖化蛋白
を有する試料は、前記のような糖化タンパクを含有する
生体由来のものであればよく、たとえば尿、血液、各種
臓器抽出物等が例示される。

【００３２】本実施例においては、以下の試薬および測
定検体を用いた。後述の実施例においても特に指示のな
い限り、同名の試薬については同様の物を使用した。

【００３３】ＰＥＳ（リン酸緩衝液）：リン酸１ナトリ
ウム（２水和物）、リン酸２ナトリウム（２水和物）お
よび塩化ナトリウムを、リン酸および塩化ナトリウムの
終濃度がそれぞれ０．０２Ｍ、０．１５Ｍ、ｐＨが７．
２となるように精製水に加えて調製した。

【００３４】１％カゼインナトリウム−ＰＢＳ：ＰＢＳ
にカゼインナトリウム（和光純薬社製、化学用）を１％
（Ｗ／Ｖ）となるように溶解した。

【００３５】実施例１（糖化アルブミンの測定） １）抗ヒトアルブミン抗体（モノクローナル抗体）のラ
テックスへの結合 抗ヒトアルブミンモノクローナル抗体ＩｇＧ分画（マウ
ス由来、サブクラスＩｇＧｌ、コスモバイオ社製）をそ
の濃度が１ｍｇ／ｍｌとなるようにＰＢＳに分散させ、
この分散液９００μｌと粒径０．２μｌのラテックス
（積水化学社製）１００μｌを混合し、混合液を４℃で
一晩放置した。遠心後、上清を廃棄し、その後１％カゼ
インナトリウム−ＰＢＳを１ｍｌ加え、３７℃で２時間
ブロッキングした。その後、生理食塩水で３回洗浄し、
１％カゼインナトリウム−ＰＢＳを４ｍｌ加え、抗ヒト
アルブミンモノクローナル抗体結合ラテックスを作成し
た。 ２）ジヒドロキシボリル化合物のカゼインへの結合（糖
親和性物質のキャリア蛋白への結合） アミノフェニルボロン酸１９ｍｇ（１４０μｍｏｌ）、
およびマレイミド基導入試薬として、Ｎ−スクシンイミ
ジル−６−マレイミドヘキサノエート４２ｍｇ（１４０
μｍｏｌ）を、ｐＨ７．０に調整したリン酸緩衝液０．
１ｍｏｌ／ｌ２００ｍｌ中で３０℃で１時間インキュベ
ートした。その後、遠心により沈殿物を除去し、ゲル濾
過によりマレイミド基が導入された生成物を得た。

【００３６】この生成物１．０ｍｇ（３μｍｏｌ）にカ
ゼインナトリウム３２ｍｇ（１１００ｎｍｏｌ）を添加
し、ｐＨ６．０に調整したリン酸緩衝液０．１ｍｏｌ／
ｌ２０ｍｌ中で３０℃で１時間インキュベートを行っ
た。その後、ゲル濾過によりマレイミド基が導入された
アミノフェニルボロン酸、カゼインの重合体等の副反応
生成物を除去した。

【００３７】さらに、充填剤としてデキストランゲルを
用いたボロン酸アフィニティークロマトグラフィーによ
り未反応のカゼインを除去することにより、カゼイン結
合ジヒドロキシボリル化合物が１ｍｇ／ｍｌ含まれる
０．１ｍｏｌ／ｌのトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）
を２０ｍｌ得た。

【００３８】３）カゼイン結合ジヒドロキシボリル化合
物のラテックスへの結合（キャリア蛋白を介した糖親和
性物質のラテックスへの結合） カゼイン結合ジヒドロキシボリル化合物をその濃度が
０．４ｍｇ／ｍｌとなるようにＰＢＳに分散させ、この
分散液９００μｌと粒径０．２μｌのラテックス（積水
化学社製）１００μｌを混合し、混合液を４℃で一晩放
置した。遠心後、上清を廃棄し、その後１％カゼインナ
トリウム−ＰＢＳを１ｍｌ加え、３７℃で２時間ブロッ
キングした。その後、生理食塩水で３回洗浄し、１％カ
ゼインナトリウム−ＰＢＳを５０ｍｌ加え、カゼイン結
合ジヒドロキシボリル化合物結合ラテックスを作成し
た。

【００３９】４）測定 測定方法(1) ２種のラテックスを片方ずつ検体と反応さ
せる場合 抗ヒトアルブミンモノクローナル抗体結合ラテックス３
０μｌに、標準試料３０μｌを添加し、３７℃で５分間
インキュベートした。その後、カゼイン結合ジヒドロキ
シボリル化合物結合ラテックスを５００μｌ添加し、攪
拌後、日立Ｕ−３２００型分光光度計を用いて、５７０
ｎｍの波長で光路長１ｃｍのセル内で５分間の吸光度の
変化を測定した。標準試料の代わりに測定試料３０μｌ
を添加し、上記と同様にして吸光度の変化を測定した。
標準試料と測定試料の吸光度から試料中の糖化アルブミ
ン値を求めた。

【００４０】＜測定結果＞

【００４１】

【００４２】 ２）測定試料 Ｎｏ． 吸光度変化 糖化アルブミン値（％） １ ０．０６４ １２．５ ２ ０．０８０ １５．５ ３ ０．１１３ ２０．０ ４ ０．０９４ １７．０ ５ ０．１８４ ３８．５ ６ ０．１８２ ３７．５ ７ ０．１６２ ３３．０ ８ ０．１７４ ３５．５ １〜４：健常者、５〜８：糖尿病患者

【００４３】測定方法(2) ２種のラテックスを同時に検
体と反応させる場合 カゼイン結合ジヒドロキシボリル化合物のラテックスへ
の結合（キャリア蛋白を介した糖親和性物質のラテック
スへの結合） ブロッキング後の１％カゼインナトリウム−ＰＢＳの添
加量を４ｍｌ（工程３）では５０ｍｌ）とした点を除い
て、上記工程３）と同様にして、カゼイン結合ジヒドロ
ボリル化合物結合ラテックスを作成した。

【００４４】標準試料２０μｌとＰＢＳ３５０μｌを添
加し、３７℃で５分間インキュベートした。その後、抗
ヒトアルブミンモノクローナル抗体結合ラテックス２５
μｌとカゼイン結合ジヒドロキシボリル化合物結合ラテ
ックス２５μｌを添加し、攪拌後、日立Ｕ−３２００型
分光光度計を用いて、５７０ｎｍの波長で光路長１ｃｍ
のセル内で５分間の吸光度の変化を測定した。標準試料
の代わりに測定試料２０μｌを添加し、上記と同様にし
て吸光度の変化を測定した。標準試料と測定試料の吸光
度から試料中の糖化アルブミン値を求めた。

【００４５】＜測定結果＞

【００４６】

【００４７】 ２）測定試料 Ｎｏ． 吸光度変化 糖化アルブミン値（％） １ ０．０６８ １９．０ ２ ０．０６２ １７．５ ３ ０．０５６ １６．０ ４ ０．１６４ ３９．０ ５ ０．１６０ ３７．０ ６ ０．１６２ ３７．５ ７ ０．１４４ ３４．０ ８ ０．１５８ ３６．５ １〜３：健常者、４〜８：糖尿病患者

【００４８】実施例２（糖化アルブミンの測定） １）実施例１の工程１）と同様にして、抗ヒトアルブミ
ンモノクローナル抗体結合ラテックスを作成した。

【００４９】２）コンカナバリンＡのラテックスへの結
合 コンカナバリンＡ（和光純薬製、生化学用）を濃度が
１．０ｍｇ／ｍｌとなるようにＰＢＳに分散させ、この
分散液９００μｌと粒径０．２μｌのラテックス（積水
化学社製）１００μｌを混合し、混合液を４℃で一晩放
置した。遠心後、上清を廃棄し、その後１％カゼインナ
トリウム−ＰＢＳを１ｍｌ加え、３７℃で２時間ブロッ
キングした。その後、生理食塩水で３回洗浄し、１％カ
ゼインナトリウム−ＰＢＳを５０ｍｌを加え、コンカナ
バリンＡ結合ラテックスを作成した。

【００５０】４）測定 抗ヒトアルブミンモノクローナル抗体結合ラテックス３
０μｌに、標準試料３０μｌを添加し、３７℃で５分間
インキュベートした。その後、コンカナバリンＡ結合ラ
テックスを５００μｌ添加し、攪拌後、日立Ｕ−３２０
０型分光光度計を用いて、５７０ｎｍの波長で光路長１
ｃｍのセル内で５分間の吸光度の変化を測定した。標準
試料の代わりに測定試料３０μｌを添加し、上記と同様
にして吸光度の変化を測定した。標準試料と測定試料の
吸光度から試料中の糖化アルブミン値を求めた。

【００５１】＜測定結果＞

【００５２】

【００５３】 ２）測定試料 Ｎｏ． 吸光度変化 糖化アルブミン値（％） １ ０．０８８ １４．０ ２ ０．０９９ １５．５ ３ ０．１１８ １９．０ ４ ０．１２４ １９．０ ５ ０．２９２ ３４．５ ６ ０．３５２ ３９．５ ７ ０．３０６ ３６．０ ８ ０．２７２ ３３．０ １〜４：健常者、５〜８：糖尿病患者

【００５４】実施例３（糖化アルブミンの測定） １）実施例１の工程1)と同様にして、抗ヒトアルブミン
モノクローナル抗体結合ラテックスを作成した。

【００５５】２）ピーナツレクチンのラテックスへの結
合 ピーナツレクチン（和光純薬製、生化学用）を濃度が
０．６ｍｇ／ｍｌとなるようにＰＢＳに分散させ、この
分散液９００μｌと粒径０．２μｌのラテックス（積水
化学社製）１００μｌを混合し、混合液を４℃で一晩放
置した。遠心後、上清を廃棄し、その後１％カゼインナ
トリウム−ＰＢＳを１ｍｌ加え、３７℃で２時間ブロッ
キングした。その後、生理食塩水で３回洗浄し、１％カ
ゼインナトリウム−ＰＢＳを５０ｍｌを加え、ピーナツ
レクチン結合ラテックスを作成した。

【００５６】４）測定 抗ヒトアルブミンモノクローナル抗体結合ラテックス３
０μｌに、標準試料３０μｌを添加し、３７℃で５分間
インキュベートした。その後、ピーナツレクチン結合ラ
テックスを５００μｌ添加し、攪拌後、日立Ｕ−３２０
０型分光光度計を用いて、５７０ｎｍの波長で光路長１
ｃｍのセル内で５分間の吸光度の変化を測定した。標準
試料の代わりに測定試料３０μｌを添加し、上記と同様
にして吸光度の変化を測定した。標準試料と測定試料の
吸光度から試料中の糖化アルブミン値を求めた。

【００５７】＜測定結果＞

【００５８】

【００５９】 ２）測定試料 Ｎｏ． 吸光度変化 糖化アルブミン値（％） １ ０．０４４ １４．０ ２ ０．０４４ １４．０ ３ ０．０５８ １８．０ ４ ０．０５４ １７．０ ５ ０．０９８ ３５．０ ６ ０．１００ ３６．５ ７ ０．０９８ ３６．０ ８ ０．０９６ ３３．５ １〜４：健常者、５〜８：糖尿病患者

【００６０】

【発明の効果】本発明は以上の如く構成されているの
で、例えば糖尿病の診断マーカーとして有用な糖化蛋白
の存在比を簡易に測定することのできる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 不溶性担体としてのラテックスに、測定
   対象に対するモノクローナル抗体と、糖に対し親和性を
   持つ物質とをそれぞれ担持させ、上記モノクローナル抗
   体担持ラテックスと、上記糖親和性物質担持ラテックス
   とにそれぞれ検体を反応させ、ラテックスの凝集度合を
   光学的に測定することを特徴とする糖化蛋白の測定方
   法。