JPH0775445A

JPH0775445A - Ｖａ菌根菌製剤の製造法

Info

Publication number: JPH0775445A
Application number: JP5226242A
Authority: JP
Inventors: Hideo Miyamoto; 秀夫宮本; Jin Miyamoto; 人宮本; Masami Sekino; 正巳関野
Original assignee: Idemitsu Kosan Co Ltd
Current assignee: Idemitsu Kosan Co Ltd
Priority date: 1993-09-10
Filing date: 1993-09-10
Publication date: 1995-03-20

Abstract

(57)【要約】【目的】胞子の生残性がよく、活性を安定して保持で
きるとともに、使用性に優れたＶＡ菌根菌製剤を提供す
る。【構成】ＶＡ菌根菌に感染した植物を、焼成アタパル
ジャイト、焼成モンモリロナイト、焼成ケイソウ土、焼
成赤玉土、ゼオライト、軽石等の多孔質担体を含む培地
で栽培し、ＶＡ菌根菌が増殖した培地を、一定の距離を
隔てて平行に配置された複数のロールの間に培地を投入
し、前記ロールを回転することにより粉砕し、６０重量
％以上の粉砕物の粒径が０．１〜０．７ｍｍとなるよう
に粉砕する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ＶＡ菌根菌製剤の製造
法に関し、詳しくは、胞子密度が高く、活性を安定して
保持できるとともに、使用性に優れたＶＡ菌根菌製剤の
製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】ＶＡ菌根菌（Vesicular Arbuscular Myc
orrhizae）は、植物に感染することにより植物と共生
し、感染植物の生長を促進したり、耐病性を向上させる
作用があることが知られている。そこで、ＶＡ菌根菌を
人工的に増殖させ、それを植物の栽培に利用するため
に、ＶＡ菌根菌接種物を製造する方法が種々提案されて
いる。例えば、バーミキュライト、アタパルジャイト
等の担体とカルボキシメチルセルロースなどの接着物を
用いて粒状化させる方法（特開平１−１６５３６９号公
報）や、炭との混合物とする方法（特開平３−１０３１
２４号公報）が知られている。その他、土壌（特開平３
−５８７１５号公報等）や多孔性両イオン交換体（特開
昭６３−８７９７３号公報）を用いて、植物根とＶＡ菌
根菌を共生、増殖させたものを接種物として用いる方法
が提案されている。

【０００３】しかし、これらの従来知られている方法で
は、ＶＡ菌根菌接種物の製造中に高頻度で胞子が死滅し
たり、病原菌が混在したり、高密度のＶＡ菌根菌接種物
が得られないなどの問題があり、実用的なＶＡ菌根菌接
種物は得られていなかった。

【０００４】そこで、このような問題を解決するため
に、焼成モンモロリロナイトを含む培地（特開平５−１
４６２２３号公報）や焼成アタパルジャイト（特開平５
−１４６２２４号公報）でＶＡ菌根菌感染植物を栽培
し、ＶＡ菌根菌を増殖させることによりＶＡ菌根菌接種
物を製造する方法が開発された。この方法により、胞子
密度が高いＶＡ菌根菌接種物が得られるようになった。

【０００５】しかし、これらの方法で用いられている培
地は、粒径が２〜５ｍｍのものが使用されており、接種
物の粒径は２〜５ｍｍと大きく、根や土への接種物の付
着量が少ない。そのために、施用はスプーン等で量り取
りながら行い、多大な労力と時間を要する。また、培土
や圃場に直接施用し、土を撹拌することも可能である
が、均一で十分な効果を得ることが困難であり、根や土
に付着しやすいＶＡ菌根菌接種物が望まれていた。

【０００６】このような根や土に付着しやすい資材とし
ては、付着剤処理や細粒化資材があるが、前者は付着剤
処理後に病原菌等の雑菌汚染の問題があり、さらに、付
着剤処理操作が煩雑で高価であるため実用的ではない。
また、付着剤のＶＡ菌根菌に対する影響も定かではな
い。一方、後者においては、細粒土をＶＡ菌根菌の担体
とし、細粒土を深さの方向の界面に充填して植物を栽培
する方法（特開平３−７６５７２）がある。これは、
０．１〜１ｍｍの細粒土中で増殖したＶＡ菌根菌を回収
・使用するものであるが、２〜４ヶ月の製造過程中に細
粒土が砕け、目詰まりを生ずると同時に、大変操作が煩
雑である。この状態では、酸素の供給が十分に行われず
ＶＡ菌根菌の増殖に好ましくない。さらに、雑菌汚染の
危険性が高いなどの問題がある。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記観点か
らなされたものであり、胞子の生残性がよく、活性を安
定して長期間保持できるとともに、使用性に優れたＶＡ
菌根菌製剤を提供することを課題とする。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意研究を行った結果、ＶＡ菌根菌に
感染した植物を栽培した多孔質担体を含む培地を、６０
重量％以上の粉砕物の粒径が０．１〜０．７ｍｍとなる
ように粉砕すると、胞子密度が高く、活性を安定して保
持できるとともに、使用性に優れたＶＡ菌根菌製剤が得
られることを見出し、さらに、この培地の粉砕を、回転
する複数のロールの間に培地を投入し、ロールを回転す
ることにより行うことが好ましいことを見出し、本発明
に至った。

【０００９】すなわち本発明は、ＶＡ菌根菌に感染した
植物を、多孔質担体を含む培地で栽培し、ＶＡ菌根菌を
増殖させるＶＡ菌根菌製剤の製造方法において、ＶＡ菌
根菌が増殖した培地を、６０重量％以上の粉砕物の粒径
が０．１〜０．７ｍｍとなるように粉砕することを特徴
とするＶＡ菌根菌製剤の製造法である。

【００１０】また、本発明の好ましい態様として、前記
ＶＡ菌根菌が増殖した培地の粉砕を、一定の距離を隔て
て平行に配置された複数のロールの間に培地を投入し、
前記ロールを回転することにより行うことを特徴とする
ＶＡ菌根菌製剤の製造法、さらに、上記製造法において
多孔質担体が、焼成アタパルジャイト、焼成モンモリロ
ナイト、焼成ケイソウ土、焼成赤玉土、ゼオライト、軽
石から選ばれることを特徴とするＶＡ菌根菌製剤の製造
法を提供する。

【００１１】以下、本発明を詳細に説明する。＜１＞本発明に用いるＶＡ菌根菌、植物及び多孔質担体（１）ＶＡ菌根菌本発明に用いるＶＡ菌根菌としては、植物の根に共生し
て菌根を形成し、植物の生長を促進したり、耐病性を向
上させる作用を有するものであれば特に制限はないが、
グロムス（Glomus）属、アカウロスポラ（Acaulospor
a）属、エントロフォスポラ（Entrophospora）属、スク
レロシスティス（Sclerocystis）属、スクテロスポラ
（Scutellospora）属、ギガスポラ（Gigaspora）属等に
属する微生物が挙げられる。

【００１２】さらに具体的には、グロムス・ファシキュ
レータム（Glomus fasciculatum）、グロムス・モセア
エ（Glomus mosseae）、グロムス・エツニカタム（Glom
us etunicatum）、グロムス・イントララディセス（Glo
mus intraradicies）、グロムス・カレドニウム（Glomu
s caledonium）、アカウロスポラ・ラエビス（Acaulosp
ora laevis）、エントロフォスポラ・インフレケンス
（Entrophospora infrequens）、スクレロシスティス・
ダッシ（Sclerocystis dussii）、スクテロスポラ・グ
レガリア（Scutellospora gregaria）、ギガスポラ・マ
ルガリタ（Gigaspora margarita）等が挙げられ、必要
に応じて数種を混合して使用してもよい。

【００１３】これらの微生物は、いずれも本発明に適用
可能であるが、これらの内ではグロムス属に属する微生
物が好適である。上記微生物は、自然界から公知の方法
（例えば、鈴木達彦、ＶＡ菌根に関する諸問題５，農業
及び園芸、第６２巻，第３号，２８〜３３頁，１９８７
年）により分離したもの、あるいは器官培養した根を用
いて増殖させたもの（特公昭６２−４９０３７号公報）
などを使用することができる。

【００１４】本出願人は、このようにして得られたグロ
ムス・モセアエを保管しており、本件発明の確認のため
役立て得ることを宣言する。

【００１５】（２）植物本発明に用いる植物は、ＶＡ菌根菌増殖のための宿主植
物であり、生育が速く、根がよく張り、かつＶＡ菌根菌
が感染しやすい植物であれば特に制限されないが、具体
的にはトウモロコシ、ソルガム（ソルゴー）、メヒシ
バ、スダングラスなどのイネ科植物、ダイズ、アカクロ
ーバー、シロクローバー、マングビーン、アルファルフ
ァなどのマメ科植物、ナス、ピーマン、トマト、シシト
ウなどのナス科植物、ネギ、タマネギなどのユリ科植物
が挙げられる。以下、これらの植物を宿主植物というこ
とがある。

【００１６】（３）多孔質担体本発明に用いる多孔質担体としては、焼成アタパルジャ
イト、焼成モンモリロナイト、焼成ケイソウ土、焼成赤
玉土、ゼオライト、軽石等が挙げられる。これらは、好
ましくは２００℃〜１３００℃、より好ましくは３００
〜１０００℃で焼成したものが用いられる。また、多孔
質担体の粒径は、１〜５ｍｍの範囲が好ましく、１．５
〜３ｍｍがより好ましい。

【００１７】＜２＞本発明のＶＡ菌根菌製剤の製造法上記ＶＡ菌根菌を植物に感染させ、これを多孔質担体を
含む培地で栽培し、ＶＡ菌根菌が増殖した培地を粉砕す
ることにより、胞子密度が高く、活性を安定して保持で
きるとともに、使用性に優れたＶＡ菌根菌製剤が得られ
る。

【００１８】ＶＡ菌根菌の植物への感染は、既知の方法
により行えばよく、例えば、５〜６０℃、好ましくは１
０〜４５℃、ｐＨ３〜９．５、好ましくはｐＨ４〜７．
５の条件で行われる。

【００１９】このようにしてＶＡ菌根菌を感染させた植
物を栽培するのに使用する培地は、多孔質担体を含む培
地であり、前記多孔質担体の１種又は２種以上をそのま
ま、あるいはピートモス、炭、バーミキュライト等の他
の培地成分、さらに緩効性肥料等と混合して用いてもよ
い。尚、他の培地成分の混合割合は、通常７０容積％以
下、好ましくは５０容積％以下である。

【００２０】ＶＡ菌根菌を感染させた宿主植物を、上記
の培地を用いて栽培すると、宿主植物の生育に伴ってＶ
Ａ菌根菌が増殖する。栽培は、通常の条件で行えばよ
く、温度は通常５〜６０℃であり、必要に応じて肥料や
水を施せばよい。通常２〜５カ月程度栽培し、宿主植物
が十分に生育したところで水や肥料の供給を絶ち、暫く
放置するとＶＡ菌根菌は胞子を形成する。

【００２１】本発明は、上記のようにしてＶＡ菌根菌胞
子が形成した培地を一定の粒度に粉砕することに特徴が
ある。粉砕により培地が細粒化されるために、使用性が
よく、しかも胞子の生残性がよく保存安定性の優れたＶ
Ａ菌根菌製剤が得られる。

【００２２】培地を粉砕する前に、培地から宿主植物の
根を取り除き、乾燥させておくことが好ましい。粉砕
は、中砕機等を用いて、粉砕後の培地の粒径が０．１〜
０．７ｍｍのものが総量の６０重量％以上、好ましくは
７０重量％以上となるように行う。

【００２３】上記条件で培地を粉砕するには、各々が一
定の距離を隔てて平行に配置された複数のロールの間に
培地を投入し、このロールを回転させることにより行う
ことが好ましい。このようにして粉砕する装置は、一般
にロールクラッシャと呼ばれており、熱や静電気が発生
せず、粉末を生じることが少なく、均一な粒子を得るこ
とが可能である。ロールとしては、表面が平坦な平ロー
ル、あるいは表面に凹凸が設けられた歯付ロールがある
が、本発明においては、少なくとも一方が歯付ロールで
あることが好ましい。また、歯付ロールの歯としては、
山形（断面が連続した三角形形状）のものが好ましく、
このようなロールを用いた粉砕方式は、架砕方式とも呼
ばれている。

【００２４】架砕方式により原料を粉砕する場合、粉砕
物の粒度は、ロール表面に設けられた山と山との幅（ピ
ッチ）、ロールの段数、ロール間の間隔（クリアラン
ス）により調整することができるので、使用する培地や
ＶＡ菌根菌の種類に応じて、適宜条件を設定すればよ
い。

【００２５】好ましいロール段数は、２段以上特に２〜
３段であり、ピッチとクリアランスは、同一であっても
異なっていてもよく、好ましいピッチとクリアランスは
１段目が１〜２．５ｍｍ、２段目が０．６〜１．２ｍ
ｍ、３段目が０．３〜０．７ｍｍである。

【００２６】本発明に適用できる市販のロールクラッシ
ャとしては、日本グラニュレーター社製のロールグラニ
ュレーター等が挙げられる。そのロールの一部断面図を
図１に示す。

【００２７】尚、上記のようにして得られたＶＡ菌根菌
製剤を、篩い等を用いて分粒し、粒径が０．１〜０．７
ｍｍの粒子を集めると、より一層使用性のよいＶＡ菌根
菌製剤が得られる。

【００２８】

【実施例】以下に、本発明の実施例を説明する。＜１＞ＶＡ菌根菌製剤の製造粒径が１．５〜３ｍｍの焼成アタパルジャイト１ｋｇ
に、１ｇの緩効性肥料（花と野菜の肥料：三井東圧社
製）を混合し、培地とした。この培地をプラスチック５
号鉢に入れ、上面より３ｃｍ下の層にグロムス・モセア
エの胞子を鉢当たり２００個接種した。さらに上面から
１ｃｍの層にスダングラスの種子を鉢当たり５粒接種
し、最低温度を２５℃に保った温室にて３ヶ月間栽培し
た。潅水は、培地の様子を見ながら適宜行った。また、
１区当たりの鉢数は１０とした。

【００２９】３ヶ月後に潅水を停止し、１８℃の恒温室
で２週間放置後、根と培地を分離した。培地はさらに２
日間通風乾燥を行った。乾燥させたＶＡ菌根菌培養物
を、ロールクラッシャ（ロールグラニュレーターＧＲＮ
１５３１型：日本グラニュレーター社製）を用いて粉砕
した。得られた細粒化ＶＡ菌根菌製剤の粒度分布は、こ
れを０．１、０．３、０．５、０．７、１．０ｍｍの篩
いに通し、各々の画分の重量を測定することにより求め
た。

【００３０】また、比較例として、上記と同様にして得
られた乾燥ＶＡ菌根菌接種物を、微粉砕機であるサンプ
ルミル（不二パウダル製、比較例１）およびプレマック
ス（中央化工機商事製、比較例２）を用いて粉砕し、Ｖ
Ａ菌根菌製剤を得た。尚、サンプルミルは、スイングハ
ンマーによる衝撃式微粉砕機であり、プレマックスは、
一方が固定され他方が回転する２枚のディスクの間に投
入された原料を、ディスク相互の圧縮、剪断作用によっ
て粉砕するものである。各粉砕機での粉砕条件を表１
に、各粉砕物の粒度分布を表２に示す。

【００３１】

【表１】注１）ロールのピッチ１段目：１．５ｍｍ２段目：１．０ｍｍ３段目：０．６ｍｍ

【００３２】

【表２】

【００３３】＜２＞実施例及び比較例で得られたＶＡ菌
根菌製剤の評価上記で得られた各ＶＡ菌根菌製剤について、製剤後の胞
子の生残性、及び保存安定性を調べた。

【００３４】製剤直後および室温保存３ヶ月後の各々の
細粒化ＶＡ菌根菌製剤を、完熟腐葉土（臭化メチルで殺
菌したもの）と１：１（容積比）で混合し、４×４×４
ｃｍの小室が４９個連結しているプラスチックポットに
詰め、トマト（品種：桃太郎）を１粒ずつ播種し、２０
〜３０℃に保たれた温室内で４週間栽培した。各ＶＡ菌
根菌製剤につき、５ポット栽培を行った。その後、苗を
回収し、細粒化ＶＡ菌根菌製剤と腐葉土を水で根から丁
寧に洗い落し、根部を切り取って、ＶＡ菌根菌の感染率
を以下のようにして求めた。

【００３５】切り取った根部の水を切り、ビーカーに入
れ、１０％ＫＯＨで１時間弱く沸騰させながら煮た。根
が着色している場合は、１０％ＫＯＨを水ですすいで除
去した後、１０倍に薄めた過酸化水素（約３％）液で５
分間脱色し、さらに水洗した。

【００３６】さらに、下記に示す組成を有するラクトフ
ェノール−トリパンブルー染色液に根を浸し、５〜３０
分間弱く沸騰させて染色した。石炭酸（フェノール）２００ｍｌ蒸留水２００ｍｌ乳酸２００ｍｌグリセリン４００ｍｌトリパンブルー１ｇ合計１０００ｍｌ

【００３７】次に、染色した根を水洗し、１ｃｍ間隔の
グリッド付シャーレの上に載せ、実体顕微鏡で観察し、
グリッド上の１００箇所の升目の内、染色した箇所の割
合（％）を感染率とした。

【００３８】各製剤５ポットずつについて求めた感染率
の平均値を、表３に示した。

【００３９】

【表３】以上の結果から、本発明の方法により製造されるＶＡ菌
根菌製剤は、粉砕後の胞子の生残性がよく、保存安定性
も格段に優れていることが明らかである。また、ＶＡ菌
根菌製剤の粒径は０．１〜０．７ｍｍのものが多く、湿
った根や土への付着量が多く、施用が容易であり、使用
性に優れている。

【００４０】

【発明の効果】本発明により、胞子密度が高く、保存安
定性に優れたＶＡ菌根菌製剤が得られる。また、本発明
により得られるＶＡ菌根菌製剤の粒径は０．１〜０．７
ｍｍのものが多く、湿った根や土への付着性がよく、施
用が容易である。

【図面の簡単な説明】

【図１】ロールクラッシャのロールの一例を示す一部
断面図。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ１２Ｒ 1:645）

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ＶＡ菌根菌に感染した植物を、多孔質担
体を含む培地で栽培し、ＶＡ菌根菌を増殖させるＶＡ菌
根菌製剤の製造方法において、ＶＡ菌根菌が増殖した培地を、６０重量％以上の粉砕物
の粒径が０．１〜０．７ｍｍとなるように粉砕すること
を特徴とするＶＡ菌根菌製剤の製造法。
【請求項２】前記ＶＡ菌根菌が増殖した培地の粉砕
を、平行に配置された複数のロールの間に培地を投入
し、前記ロールを回転することにより行うことを特徴と
する請求項１記載のＶＡ菌根菌製剤の製造法。
【請求項３】前記ロールが、断面が連続した三角形形
状の歯を有する歯付ロールであることを特徴とする請求
項１記載のＶＡ菌根菌製剤の製造法。
【請求項４】前記多孔質担体が、焼成アタパルジャイ
ト、焼成モンモリロナイト、焼成ケイソウ土、焼成赤玉
土、ゼオライト、軽石から選ばれることを特徴とする請
求項１又は２記載のＶＡ菌根菌製剤の製造法。