JPH072889A

JPH072889A - ２’−エーテル基を有するヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド

Info

Publication number: JPH072889A
Application number: JP6122957A
Authority: JP
Inventors: Pierre Dr Martin; マルタンピエール
Original assignee: Ciba Geigy AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1993-05-12
Filing date: 1994-05-12
Publication date: 1995-01-06
Anticipated expiration: 2022-11-21
Also published as: EP0626387B1; DE59407895D1; IL123330A0; AU6304494A; CN1100728A; US5969116A; AU687796B2; ES2128535T3; IL109605A0; JP4012579B2; CA2123241A1; IL109605A; EP0626387A1; IL123330A; DK0626387T3; CA2123241C; ATE177430T1

Abstract

(57)【要約】【目的】相補的なＲＮＡに対する結合親和性が増加し、
かつヌクレア−ゼ抵抗性が増加するようなヌクレオシド
及びオリゴヌクレオチド、それらの製造法等に関する。【構成】式：【化８２】〔式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、水素等であり、Ｂは、プリン
等の塩基基であり、そしてＲ₃ は、式（Ｉａ）、（Ｉ
ｂ）又は（Ｉｃ）：【化８３】（式中、Ｒ₄ は、水素等であり、Ｒ₅ は、水素等であ
り、ｎは、１乃至１２の数である）〕で示された、２’
−ＯＨ基がポリオ−ル誘導体でエ−テル化されたリボヌ
クレオシド類似体である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、その２’−ＯＨ基がポ
リオール誘導体でエーテル化されたリボヌクレオシド類
似体、その製造法、これらのヌクレオシドを有するオリ
ゴヌクレオチド、及び分子中に同一又は異なるヌクレオ
シド単位を有するオリゴヌクレオチドの製造法における
ヌクレオシドの用途に関する。

【０００２】ヌクレオシド及びオリゴヌクレオチドは、
両者共に抗ウイルス活性成分として、そして核酸と相互
反応する活性（「アンチセンス」オリゴヌクレオチ
ド）、さらにそれと関連した生物学的活性の故に、大き
な関心を惹いている；例えば、Uhlmann, E., Peyman,
A., Chemical Reviews 90:543-584(1990)参照。新しい
性質を有するヌクレオシドを生成し、又はアンチセンス
オリゴヌクレオチドと天然の核酸との相互反応を改善
し、ヌクレアーゼに対する安定性を増加するために、ヌ
クレオシド（又はオリゴヌクレオチドのヌクレオチド単
位）の糖基又はオリゴヌクレオチド中のヌクレオチド間
のリン酸エステル結合は、多種多様な方法で修飾されて
いる；例えば、Marquez, V. E., Lim, M. I., Medicina
l Research Reviews 6:1-40(1986), Helene, C., Toulm
e, J. J., Biochimica et Biophysica Acta 1049:99-12
5(1990), Englisch, U., Gauss, D. H., Angewandte Ch
emie 103:629-646(1991), Matteucci, M. D., Bischofb
erger, N., Annual Reports in Medicinal Chemistry 2
6:87-296(1991)参照。Cook, P. D., Anti-Cancer Drug
Design 6:585-607(1991)及びＷＯ第91/06556号明細書
は、糖の２’−ＯＨ基が修飾されたヌクレオシドを記載
している。記載された修飾は、ヌクレアーゼ抵抗性を増
加している；アルキル基が長くなるにつれて、ヌクレア
ーゼ抵抗性は強くなる。かくして、メチル、エチル又は
プロピルのような短いアルキル基では、結合親和性に僅
かな増加が認められるが、比較的長い鎖では、結合親和
性は劇的に低下する。２’−ＯＨ基の側鎖としてポリオ
ール誘導体を有するヌクレオシドは未知であり、これま
でオリゴヌクレオチドに導入されたことがない。驚くべ
きことであるが、本発明の修飾は、比較的短い鎖のみな
らず比較的長い鎖においても、相補的なＲＮＡに対する
結合親和性を増加する。この結果は、既存のデータを基
にしては考えられないことであった。２’−ＯＨを修飾
したオリゴリボヌクレオチドと同様に、本発明の化合物
は、さらにヌクレアーゼに対する顕著な抵抗性の特色が
ある。加えて、本発明のヌクレオシドを含むオリゴヌク
レオチドは、増加した細胞内取込みがあり、従って生体
内での生物学的利用能及び活性が大きい。

【０００３】本発明は、式（Ｉ）：

【化１９】〔式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各々互いに独立して、水素若
しくは保護基であるか、又は、Ｒ₁ はこれらの意義を有
し、Ｒ₂ はリンを含むヌクレオチド架橋基を形成する基
であり；Ｂは、プリン又はピリミジン基、又はそれらの
類似体の基；そしてＲ₃ は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は
（Ｉｃ）：

【化２０】（式中、Ｒ₄ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₂₁アルキル、Ｃ₂ −Ｃ
₂₁アルケニル、Ｃ₂ −Ｃ₂₁アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）
−アルキル；Ｒ₅ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₀アルキル、−Ｃ
Ｈ₂ −Ｏ−Ｒ₆ 又は式（Ｉｂ）の基；Ｒ₆ は、水素、Ｃ
₁ −Ｃ₂₂アルキル、Ｃ₃ −Ｃ₂₁アルケニル、又は部分的
に若しくは完全にフッ素置換されたＣ₁ −Ｃ₁₀アルキル
若しくは−〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m −Ｒ₇ ；Ｒ₇ は、水
素又はＣ₁ −Ｃ₂₁アルキル；Ｚは、−（ＣＨ₂ ）_p −又
は−（ＣＨ₂ −ＣＨ₂ −Ｏ）_q −ＣＨ₂ ＣＨ₂ −であ
り、−ＣＨ₂ −の場合のＺは、非置換、又はＣ₁ −Ｃ₁₀
アルキル、Ｃ₅ −Ｃ₆ シクロアルキル及び非置換若しく
はＣ₁ −Ｃ₄ アルキル置換フェニルから選ばれる一個以
上の同一若しくは異なる置換基によって置換されていて
もよい；ｎは、１乃至１２の数；ｍは、１乃至４の数；
ｐは、１乃至１０の数であり；そしてｑは、１乃至４の
数である、但し、ｎ＝１及びＲ₅ ＝水素の場合、Ｒ₄ は
水素ではない）の基である〕に示された化合物に関す
る。

【０００４】好適な態様において、Ｒ₄ は、水素、Ｃ₁
−Ｃ₂₁アルキル、Ｃ₂ −Ｃ₂₁アルケニル又はＣ₂ −Ｃ₂₁
アルキニルである。より好適な態様において、Ｒ₄ は、
水素、Ｃ₁ −Ｃ₈ アルキル、Ｃ₂ −Ｃ₈ アルケニル又は
Ｃ₂ −Ｃ₈ アルキニルである。特に好適な態様におい
て、Ｒ₄ は、水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである。Ｒ₄
の例としては、メチル、エチル、ｎ−及びｉｓｏ−プロ
ピル、ｎ−、ｉｓｏ−及びｔｅｒｔ−ブチル、並びにペ
ンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシ
ル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシ
ル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オク
タデシル、ノナデシル、ウンデシルの異性体、ビニル、
アリル、ブタ−３−エン−１−イル、ブタ−２−エン−
１−イル、ペンテニル、オクテニル、ドデセニル、オク
タデセニル、エチニル、プロパ−１−イン−１−イル、
プロパ−１−イン−３−イル、ブタ−１−イン−１−イ
ル又はブタ−１−イン−４−イルが挙げられる。特に好
適なＲ₄ の基は、水素、メチル、エチル、ｎ−若しくは
ｉｓｏ−プロピル、又はｎ−ブチルである。ｎの値は、
好適には１乃至８、より好適には１乃至６、特に好適に
は１乃至３である。

【０００５】好適な態様において、Ｒ₅ は、水素、Ｃ₁
−Ｃ₅ アルキル又は−ＣＨ₂ −Ｏ−Ｒ₆ 、特に水素、メ
チル又は−ＣＨ₂ −ＯＨ、−ＣＨ₂ −Ｏ−Ｃ₁ −Ｃ₂₂ア
ルキル又は−ＣＨ₂ −Ｏ−〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m −Ｃ
₁ −Ｃ₁₀アルキル（式中、ｍは１乃至４の数である）で
ある。

【０００６】好適な態様において、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、水
素である。

【０００７】保護基及びかかる保護基を有する水酸基の
誘導法は、糖及びヌクレオチド化学で一般に公知であ
り、例えばGreene, B. T. による、 Protective Groups
in Organic Synthesis, Wiley Interscience, New Yor
k (1991)、 Sonveaux, E.によるBioorganic Chemistry 1
4:274-325(1986) 、又はBeaucage, S. L., Iyer, R. に
よる、Tetrahedron 48:2223-2311(1992)中に記載されて
いる。かかる保護基の例としては、ベンジル、メチルベ
ンジル、ジメチルベンジル、メトキシベンジル、ジメト
キシベンジル、ブロモベンジル、２，４−ジクロロベン
ジル；ジフェニルメチル、ジ（メチルフェニル）メチ
ル、ジ（ジメチルフェニル）メチル、ジ（メトキシフェ
ニル）メチル、ジ（ジメトキシフェニル）メチル、トリ
フェニルメチル、トリス−４，４’，４”−ｔｅｒｔ−
ブチルフェニルメチル、ジ−ｐ−アニシルフェニルメチ
ル、トリ（メチルフェニル）メチル、トリ（ジメチルフ
ェニル）メチル、メトキシフェニル（ジフェニル）メチ
ル、ジ（メトキシフェニル）フェニルメチル、トリ（メ
トキシフェニル）メチル、トリ（ジメトキシフェニル）
メチル；トリフェニルシリル、アルキル基が１乃至２
０、好適には１乃至１２、特に１乃至８の炭素原子を有
するアルキルジフェニルシリル、ジアルキルフェニルシ
リル及びトリアルキルシリル、例えばトリメチルシリ
ル、トリエチルシリル、トリ−ｎ−プロピルシリル、イ
ソプロピル−ジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチル−ジメ
チルシリル、ｔｅｒｔ−ブチル−ジフェニルシリル、ｎ
−オクチル−ジメチルシリル、（１，１，２，２−テト
ラメチルエチル）−ジメチルシリル；−（Ｃ₁ −Ｃ₈ ア
ルキル）₂ Ｓｉ−Ｏ−Ｓｉ（Ｃ₁ −Ｃ₈ アルキル）₂ −
（式中、アルキルは、例えばメチル、エチル、ｎ−及び
ｉｓｏ−プロピル、又はｎ−、ｉｓｏ−及びｔｅｒｔ−
ブチル）；Ｃ₂ −Ｃ₁₂アシル、特にＣ₂ −Ｃ₈ アシル、
例えばアセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノ
イル、ヘキサノイル、ベンゾイル、メチルベンゾイル、
メトキシベンゾイル、クロロベンゾイル及びブロモベン
ゾイル；Ｒ_S1−ＳＯ₂ −（式中、Ｒ_S1は、Ｃ₁ −Ｃ₁₂ア
ルキル、特にＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、Ｃ₅ −若しくはＣ₆
−シクロアルキル、フェニル、ベンジル、Ｃ₁ −Ｃ₁₂ア
ルキルフェニル、特にＣ₁ −Ｃ₄ アルキルフェニル、又
はＣ₁ −Ｃ₁₂アルキルベンジル、特にＣ₁ −Ｃ₄ アルキ
ルベンジル、又はハロフェニル若しくはハロベンジル、
例えばメチル−、エチル−、プロピル−、ブチル−、フ
ェニル−、ベンジル−、ｐ−ブロモ−、ｐ−メトキシ−
及びｐ−メチルフェニル−スルホニル；非置換、又は
Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルコキシ、トリ（Ｃ₁ −
Ｃ₄ アルキル）シリル若しくはＣ₁ −Ｃ₄ アルキルスル
ホニルで置換されたＣ₁ −Ｃ₁₂アルコキシカルボニル、
好適には ₁ −Ｃ₈ アルコキシカルボニル、例えばメト
キシ−、エトキシ−、ｎ−若しくはｉｓｏ−プロポキシ
−又はｎ−、ｉｓｏ−若しくはｔｅｒｔ−ブトキシカル
ボニル、２−トリメチルシリルエトキシカルボニル、２
−メチルスルホニルエトキシカルボニル、アリルオキシ
カルボニル、又は、非置換、又はアルコキシカルボニル
と同様に置換されたフェノキシカルボニル若しくはベン
ジルオキシカルボニル、例えばメチル−若しくはメトキ
シ−若しくはクロロ−フェノキシカルボニル又はメチル
−若しくはメトキシ−若しくはクロロ−ベンジルオキシ
カルボニル、及び９−フルオレニルメトキシカルボニル
が挙げられる。Ｒ₁ 及び／又はＲ₂ が、アルキルである
場合、これらは、フッ素、塩素、臭素、Ｃ₁ −Ｃ₄ アル
コキシ、フェノキシ、クロロフェノキシ、メトキシフェ
ノキシ、ベンジルオキシ、メトキシベンジルオキシ又は
クロロフェノキシで置換されてもよい。式（Ｉ）におけ
るＲ₁ 及びＲ₂ は、同一又は異なる保護基であり得る。

【０００８】特に好適な態様において、保護基としての
Ｒ₁ 及びＲ₂ は、ベンジル、メチルベンジル、ジメチル
ベンジル、メトキシベンジル、ジメトキシベンジル、ハ
ロゲン化ベンジル、特にブロモベンジル；ジフェニルメ
チル、ジ（メチルフェニル）メチル、ジ（ジメチルフェ
ニル）メチル、ジ（メトキシフェニル）メチル、ジ（メ
トキシフェニル）（フェニル）メチル、トリフェニルメ
チル、トリス−４，４’，４”−ｔｅｒｔ−ブチルフェ
ニルメチル、ジ−ｐ−アニシルフェニルメチル、トリ
（メチルフェニル）メチル、トリ（ジメチルフェニル）
メチル、トリ（メトキシフェニル）メチル、トリ（ジメ
トキシフェニル）メチル；トリメチルシリル、トリエチ
ルシリル、トリ−ｎ−プロピルシリル、イソプロピルジ
メチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅ
ｒｔ−ブチルジフェニルシリル、ｎ−オクチルジメチル
シリル、（１，１，２，２−テトラメチルエチル）ジメ
チルシリル；−（ＣＨ₃ ）₂ Ｓｉ−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ₃ ）
₂ −、−（ｉｓｏ−Ｃ₃ Ｈ₇）₂ Ｓｉ−Ｏ−Ｓｉ（ｉｓ
ｏ−Ｃ₃ Ｈ₇ ）₂ −；アセチル、プロパノイル、ブタノ
イル、ペンタノイル、ヘキサノイル、ベンゾイル、メチ
ルベンゾイル、メトキシベンゾイル、クロロベンゾイル
及びブロモベンゾイル；メチル−、エチル−、プロピル
−、ブチル−、フェニル−、ベンジル−、ｐ−ブロモ
−、ｐ−メトキシ−及びｐ−メチル−フェニルスルホニ
ル；メトキシ−、エトキシ−、ｎ−若しくはｉｓｏ−プ
ロポキシ−又はｎ−、ｉｓｏ−若しくはｔｅｒｔ−ブト
キシ−カルボニル、或いはフェノキシカルボニル、ベン
ジルオキシカルボニル、メチル−又はメトキシ−又はク
ロロ−フェノキシカルボニル、或いはメチル−又はメト
キシ−又はクロロ−ベンジルオキシカルボニル、或いは
９−フルオレニルメトキシカルボニルであり得る。この
場合、Ｒ₁ 及びＲ₂ が同一の保護基であるのが好都合で
ある。

【０００９】リンを含むヌクレオチド架橋基を形成する
基としてのＲ₂ は、式（Ｐ１）又は（Ｐ２）：

【化２１】（式中、Ｙ_a は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、Ｃ₆ −Ｃ
₁₂アリール、Ｃ₇ −Ｃ₂₀アラルキル、Ｃ₇ −Ｃ₂₀アルカ
リール、−ＯＲ_b 、−ＳＲ_b 、−ＮＨ₂ 、第一級アミ
ノ、第二級アミノ、Ｏ^- Ｍ⁺ 又はＳ^- Ｍ⁺ ；Ｘ_a は、酸
素又は硫黄；Ｒ_a は、水素、Ｍ⁺ 、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキ
ル、Ｃ₂ −Ｃ₁₂アルケニル、又はＣ₆ −Ｃ₁₂アリール、
或いはＲ_a Ｏ−の基は、５員環で１乃至３の窒素原子を
有するＮ−ヘテロアリール−Ｎ−イル；Ｒ_b は、水素、
Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル又はＣ₆ −Ｃ₁₂アリールであり；そ
してＭ⁺ は、Ｎａ⁺ 、Ｋ⁺ 、Ｌｉ⁺ 、ＮＨ₄ ⁺ 、又は第
一級、第二級、第三級若しくは第四級アンモニウムであ
り；Ｙ_a 、Ｒ_a 及びＲ_b におけるアルキル、アリール、
アラルキル及びアルカリールは、非置換又はアルコキ
シ、アルキルチオ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ₂ 、フェ
ニル、ニトロフェニル若しくはハロフェニルで置換され
る）に該当する。

【００１０】Ｙ_a は、第一級アミノとして、１乃至１
２、特に１乃至６の炭素原子を含み、第二級アミノとし
て、好適には２乃至１２、特に２乃至６の炭素原子を含
む。

【００１１】第一級アミノ及び第二級アミノは、例えば
式：Ｒ_c Ｒ_d Ｎ（式中、Ｒ_c は水素又は、独立して、Ｒ
_d の意義を有し、Ｒ_d は、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−アルキル（好適
にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、特にＣ₁ −Ｃ₆ −アルキル）、Ｃ₁
−Ｃ₂₀−アミノアルキル（好適にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、特に
Ｃ₁ −Ｃ₆ −アミノアルキル）、又はＣ₁ −Ｃ₂₀−ヒド
ロキシアルキル（好適にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、特にＣ₁ −Ｃ
₆ −ヒドロキシアルキル）；カルボキシアルキル又はカ
ルバルコキシアルキル（このカルバルコキシ基は、２乃
至８の炭素原子を有し、アルキル基は、１乃至６、好適
に１乃至４の炭素原子を有する）；Ｃ₂ −Ｃ₂₀−アルケ
ニル（好適にはＣ₂ −Ｃ₁₂−、特にＣ₂−Ｃ₆ アルケニ
ル）；フェニル、モノ−若しくはジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ アル
キル又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシ）フェニル、ベンジル、
モノ−若しくはジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄アルキル又はＣ₁ −Ｃ₄
アルコキシ）ベンジル；又は１，２−、１，３−若し
くは１，４−イミダゾリル−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル、或い
はＲ_c 及びＲ_d は、一緒になって、テトラ−又はペンタ
−メチレン、３−オキサ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ
₂ −ＮＲ_e −ＣＨ₂ ＣＨ₂ −又は−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −ＮＲ
₁₉−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −（式中、Ｒ_e は水素又はＣ₁ −Ｃ₄
アルキルである）の基をなす。アミノアルキルにおける
アミノ基は、一又は二個のＣ₁ −Ｃ₄ アルキル又はＣ₁
−Ｃ₄ ヒドロキシアルキル基で置換されてもよい。ヒド
ロキシアルキルにおけるヒドロキシ基は、Ｃ₁ −Ｃ₄ ア
ルキルでエーテル化されてもよい。

【００１２】Ｍ⁺ の定義と関連して、Ｙ_a の第一級、第
二級、第三級及び第四級アンモニウムは、式：Ｒ_f Ｒ_g
Ｒ_h Ｒ_i Ｎ〔式中、Ｒ_f は、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−アルキル（好
適にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、特にＣ₁ −Ｃ₆ −アルキル）、Ｃ
₁ −Ｃ₂₀−アミノアルキル（好適にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、特
にＣ₁ −Ｃ₆ −アミノアルキル）、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−ヒドロ
キシアルキル（好適にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、特にＣ₁ −Ｃ₆
−ヒドロキシアルキル）；カルボキシアルキル又はカル
バルコキシアルキル（このカルバルコキシ基は、２乃至
８の炭素原子、アルキル基は、１乃至６、好適には１乃
至４の炭素原子を含む）；Ｃ₂ −Ｃ₂₀−アルケニル（好
適にはＣ₂ −Ｃ₁₂−、特にＣ₂ −Ｃ₆ −アルケニル）；
フェニル、モノ−若しくはジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル又
はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシ）フェニル、ベンジル、モノ−
若しくはジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル又はＣ₁ −Ｃ₄ アル
コキシ）ベンジル；又は１，２−、１，３−若しくは
１，４−イミダゾリル−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルであり、Ｒ
_g 、Ｒ_h 及びＲ_i は、各々互いに独立して、水素又はＲ
_f の意義を有し、或いはＲ_f 及びＲ_g は、一緒になっ
て、テトラ−若しくはペンタ−メチレン、３−オキサ−
１，５−ペンチレン、−ＣＨ₂ −ＮＲ_e −ＣＨ₂ ＣＨ₂
−、又は−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −ＮＲ_e −ＣＨ₂ ＣＨ₂−（式
中、Ｒ_e は、水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである）、そ
してＲ_h 及びＲ_iは、各々互いに独立して、Ｒ_f の意義
を有する〕のイオンであると理解されるものである。ア
ミノアルキルにおけるアミノ基は、一又は二個のＣ₁ −
Ｃ₄ アルキル若しくはＣ₁ −Ｃ₄ ヒドロキシアルキル基
で置換されてもよい。ヒドロキシアルキルにおけるヒド
ロキシ基は、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルでエーテル化されても
よい。

【００１３】カルボキシアルキルの例としては、カルボ
キシメチル、カルボキシエチル、カルボキシプロピル及
びカルボキシブチル；そして、カルバルコキシアルキル
の例としては、メチル又はエチルでエステル化された上
記のカルボキシアルキルが挙げられる。アルケニルの例
としては、アリル、ブタ−１−エン−３−イル又は−４
−イル、ペンタ−３−又は−４−エン−１−イル又は−
２−イル、ヘキサ−３−又は−４−又は−５−エン−１
−イル又は−２−イルが挙げられる。アルキル−及びア
ルコキシ−フェニル及びアルキル−及びアルコキシ−ベ
ンジルの例としては、メチルフェニル、ジメチルフェニ
ル、エチルフェニル、ジエチルフェニル、メチルベンジ
ル、ジメチルベンジル、エチルベンジル、ジエチルベン
ジル、メトキシフェニル、ジメトキシフェニル、エトキ
シフェニル、ジエトキシフェニル、メトキシベンジル、
ジメトキシベンジル、エトキシベンジル及びジエトキシ
ベンジルが挙げられる。アルキル基が好適に２乃至４の
炭素原子を含む、イミダゾリルアルキルの例は、１，２
−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−エチル又
は−ｎ−プロピル又は−ｎ−ブチルである。Ｒ₁₉は、好
適には水素、メチル又はエチルである。

【００１４】第一級アミノ及び第二級アミノの好適な例
は、メチル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル、ジイ
ソプロピル、モノ−又はジ（１−ヒドロキシ−エタ−２
−イル）−、フェニル−及びベンジル−アミノ、アセチ
ルアミノ及びベンゾイルアミノ及びピペリジニル、ピペ
ラジニル及びモルホリニルである。

【００１５】第一級及び第二級アンモニウムの好適な例
は、メチル−、エチル−、ジメチル、ジエチル−、ジイ
ソプロピル−、モノ又はジ（１−ヒドロキシ−エタ−２
−イル）−、フェニル−及びベンジル−アンモニウムで
ある。

【００１６】アルキルとしてのＹ_a 、Ｒ_a 及びＲ_b の例
は、メチル、エチル及びプロピル、ブチル、ペンチル、
ヘキシル、ヘプチル及びオクチルの異性体；アリールと
してのＹ_a 、Ｒ_a 及びＲ_b の例は、フェニル及びナフチ
ル；アルケニルとしてのＲ_aの例は、アリル及び（Ｃ₁
−Ｃ₄ アルキル）ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂ −；アラルキルと
してのＹ_a の例は、フェニル−Ｃ_n Ｈ_2n−であり、特に
ベンジル（式中、ｎは１乃至６の数である）；アルカリ
ールとしてのＹ_a の例は、モノ−、ジ−及びトリ−（Ｃ
₁ −Ｃ₄ アルキル）フェニルである。好適な置換基は、
塩素、臭素、メトキシ、−ＮＯ₂ 、−ＣＮ、２，４−ジ
クロロフェニル及び４−ニトロフェニルである。Ｒ_b の
例は、２，２，２−トリクロロエチル、４−クロロフェ
ニル、２−クロロフェニル及び２，４−ジクロロフェニ
ル；そして、Ｎ−ヘテロアリールとしてのＲ_b Ｏ−の例
は、ピロール−Ｎ−イル、トリアゾール−Ｎ−イル及び
ベンゾトリアゾール−Ｎ−イルである。

【００１７】特に好適な態様において、Ｒ_a はβ−シア
ノエチルであり、Ｙ_a はジ（イソプロピルアミノ）であ
る。

【００１８】Ｂがプリン基又はその類似体の基である場
合、Ｂは、式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、
（IIｄ）、（IIｅ）又は（IIｆ）：

【化２２】〔式中、Ｒ_b1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ₁
−Ｃ₁₂アルキル；Ｒ_b2、Ｒ_b3及びＲ_b5は、各々互いに独
立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯ
Ｈ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ
₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロアルキ
ル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロキシ
−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、
Ｃ₁−Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −Ｃ₁₂
アルキルチオを示し、このヒドロキシ及びアミノ基は、
非置換又は保護基で置換される；或いはフェニル、ベン
ジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ又は炭素数２乃
至３０の第二級アミノ；Ｒ_b4は、水素、ＣＮ又は−Ｃ≡
Ｃ−Ｒ_b7であり；そしてＲ_b6及びＲ_b7は、水素又はＣ₁
−Ｃ₄ アルキルである〕で示される基である。

【００１９】適切な保護基は、上記の基である。好適な
保護基は、Ｃ₁ −Ｃ₈ アシル基、例えばアセチル、プロ
ピオニル、ブチロイル及びベンゾイルである。Ｒ_b6は、
好適には、水素又はメチルである。

【００２０】第一級アミノは、好適には１乃至１２、特
に１乃至６の炭素原子を含み、第二級アミノは、好適に
２乃至１２、特に２乃至６の炭素原子を含む。

【００２１】好適には１乃至６の炭素原子を有するアル
キル、アルコキシ、アルキルチオ、ヒドロキシアルキル
及びアミノアルキルの幾つかの例として、メチル、エチ
ル、及びプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプ
チル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル及びドデ
シルの異性体、及びそれらに対応するアルコキシ、アル
キルチオ、ヒドロキシアルキル及びアミノアルキル基が
挙げられる。アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ヒ
ドロキシアルキル及びアミノアルキルは、特に１乃至４
の炭素原子を含む。好適なアルキル、アルコキシ、アル
キルチオ、ヒドロキシアルキル及びアミノアルキル基
は、メチル、エチル、ｎ−及びｉｓｏ−プロピル、ｎ
−、ｉｓｏ−及びｔｅｒｔ−ブチル、メトキシ、エトキ
シ、メチルチオ及びエチルチオ、アミノメチル、アミノ
エチル、ヒドロキシメチル及びヒドロキシエチルであ
る。

【００２２】第一級アミノ及び第二級アミノは、例え
ば、式：Ｒ_a1Ｒ_a2Ｎ〔式中、Ｒ_a1は、水素又は、独立し
て、Ｒ_a2の意義を有し、Ｒ_a2は、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−アルキル
（好適にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、特にＣ₁ −Ｃ₆ −アルキ
ル）、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−アミノアルキル（好適にはＣ₁ −Ｃ
₁₂−、特にＣ₁ −Ｃ₆ −アミノアルキル）、Ｃ₁ −Ｃ₂₀
−ヒドロキシアルキル（好適にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、特にＣ
₁ −Ｃ₆ −ヒドロキシアルキル）；カルボキシアルキル
又はカルバルコキシアルキル（このカルバルコキシ基
は、２乃至８の炭素原子を有し、アルキル基は、１乃至
６、好適には１乃至４の炭素原子を有する）；Ｃ₂ −Ｃ
₂₀−アルケニル（好適にはＣ₂ −Ｃ₁₂−、特にＣ₂ −Ｃ
₆ −アルケニル）；フェニル、モノ−又はジ−（Ｃ₁ −
Ｃ₄ −アルキル若しくはＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシ）フェニ
ル、ベンジル、モノ−又はジ（Ｃ₁ −Ｃ₄アルキル又は
Ｃ₁ −Ｃ₄ アルコキシ）ベンジル；又は１，２−、１，
３−若しくは１，４−イミダゾリル−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキ
ル、或いはＲ_a1及びＲ_a2は、一緒になって、テトラ−若
しくはペンタ−メチレン、３−オキサ−１，５−ペンチ
レン、−ＣＨ₂ −ＮＲ_a3−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −、又は−ＣＨ
₂ ＣＨ₂ −ＮＲ_a3−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −（式中、Ｒ_a3は、水
素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである）である〕で示される
基である。アミノアルキルにおけるアミノ基は、一又は
二個のＣ₁ −Ｃ₄ アルキル若しくはＣ₁ −Ｃ₄ ヒドロキ
シアルキル基で置換されてもよい。ヒドロキシアルキル
におけるヒドロキシ基は、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルでエーテ
ル化されてもよい。

【００２３】アルキルの例は、上記のアルキルである。
アミノアルキルの例は、アミノメチル、アミノエチル、
１−アミノプロパ−２−イル又は−３−イル、１−アミ
ノ−ブタ−２−イル又は−３−イル又は−４−イル、Ｎ
−メチル−又はＮ，Ｎ−ジメチル−又はＮ−エチル−又
はＮ，Ｎ−ジエチル−又はＮ−２−ヒドロキシエチル−
又はＮ，Ｎ−ジ−２−ヒドロキシエチル−アミノメチル
又は−アミノエチル又は−アミノプロピル又は−アミノ
ブチルである。ヒドロキシアルキルの例は、ヒドロキシ
メチル、１−ヒドロキシ−エタ−２−イル、１−ヒドロ
キシ−プロパ−２−又は−３−イル及び１−ヒドロキシ
ブタ−２−イル、−３−イル又は−４−イルである。カ
ルボキシアルキルの例は、カルボキシメチル、カルボキ
シエチル、カルボキシプロピル及びカルボキシブチルで
あり、カルバルコキシアルキルの例は、メチル又はエチ
ルによってエステル化されたカルボキシアルキル基であ
る。アルケニルの例は、アリル、ブタ−１−エン−３−
イル又は−４−イル、ペンタ−３−又は−４−エン−１
−イル又は−２−イル、ヘキサ−３−又は−４−又は−
５−エン−１−イル又は−２−イルである。アルキル−
及びアルコキシ−フェニル、及びアルキル−及びアルコ
キシ−ベンジルの例は、メチルフェニル、ジメチルフェ
ニル、エチルフェニル、ジエチルフェニル、メチルベン
ジル、ジメチルベンジル、エチルベンジル、ジエチルベ
ンジル、メトキシフェニル、ジメトキシフェニル、エト
キシフェニル、ジエトキシフェニル、メトキシベンジ
ル、ジメトキシベンジル、エトキシベンジル及びジエト
キシベンジルである。アルキル基が、好適には２乃至４
の炭素原子を有する、イミダゾリルアルキルの例は、
１，２−、１，３−又は１，４−イミダゾリル−エチル
又は−ｎ−プロピル又は−ｎ−ブチルである。Ｒ_a3は、
好適には、水素、メチル又はエチルである。

【００２４】第一級アミノ及び第二級アミノの好適な例
は、メチル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、ア
リル−、モノ−又はジ−（１−ヒドロキシ−エタ−２−
イル）−、フェニル−及びベンジル−アミノ、アセチル
アミノ、イソブチリルアミノ及びベンゾイルアミノであ
る。

【００２５】好適な態様において、Ｒ_b1は水素である。
別の好適な態様において、Ｒ_b5は水素である。更なる好
適な態様において、Ｒ_b2及びＲ_b3は、各々互いに独立し
て、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＯ
Ｈ、ＮＨＮＨ₂ 、メチルアミノ、ジメチルアミノ、ベン
ゾイルアミノ、イソブチリルアミノ、メトキシ、エトキ
シ及びメチルチオである。

【００２６】プリン系類似体の幾つかの例としては、プ
リンの他に、キサンチン、ヒポキサンチン、アデニン、
Ｎ−メチルアデニン、Ｎ−ベンゾイルアデニン、２−メ
チルチオアデニン、２−アミノアデニン、６−ヒドロキ
シプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、２−アミノ
−６−メチルチオプリン、グアニン、Ｎ−イソブチリル
グアニンが挙げられる。アデニン、２−アミノアデニン
及びグアニン、並びにこれらの塩基が保護された誘導体
は、特に好ましい。

【００２７】式（Ｉ）におけるＢがピリミジン基である
場合、Ｂは、好適には、式（III ）、（III ａ）、
（III ｂ）又は（III ｃ）：

【化２３】〔式中、Ｒ_b6は、水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルであり、
Ｒ_b8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯ
Ｈ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ
₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロアルキ
ル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロキシ
−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、
Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −Ｃ₁₂
アルキルチオであり（このヒドロキシ及びアミノ基は、
非置換又は保護基で置換される）、或いはフェニル、ベ
ンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ、炭素数２乃
至３０の第二級アミノ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルケニル又はＣ₁
−Ｃ₁₂アルキニルであり、そして式（III ｂ）における
ＮＨ₂ 基は、非置換又はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、ベンゾイ
ル若しくは保護基によって置換される〕で示されるウラ
シル、チミン又はシトシンの基、又は式（III ）、（II
I ａ）、（III ｂ）又は（III ｃ）で示される基のジヒ
ドロ誘導体である。式（III ）におけるＲ_b8は、好適に
は、水素、Ｃ₁−Ｃ₆ アルキル又はＣ₁ −Ｃ₆ ヒドロキ
シアルキル、Ｃ₂ −Ｃ₆ アルケニル又はＣ₂ −Ｃ₆ アル
キニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ₂ 、ベンゾイルアミノ又
はモノ−又はジ−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノである。式
（III ｂ）及び（III ｃ）におけるＲ_b8は、好適には、
水素、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル又はＣ₁ −Ｃ₆ アルコキシ又
はＣ₁ −Ｃ₆ ヒドロキシアルキル、Ｃ₂ −Ｃ₆ アルケニ
ル又はＣ₂ −Ｃ₆ アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ
₂ 、ベンゾイルアミノ、又はモノ−若しくはジ−Ｃ₁−
Ｃ₆ アルキルアミノである。

【００２８】Ｒ_b6は、好適には、水素又はメチルであ
る。式（III ）におけるＲ_b8は、好適には、Ｈ、Ｆ、Ｃ
ｌ、Ｂｒ、ＮＨ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 、Ｎ（ＣＨ₃ ）₂ 、Ｃ₁
−Ｃ₄アルキル、Ｃ₂ −Ｃ₄ アルケニル、又はＣ₂ −Ｃ₄
アルキン−１−イルである。式（III ｂ）及び（III
ｃ）におけるＲ_b8は、好適には、水素、Ｃ₁ −Ｃ₄ アル
キル（特にメチル）、Ｃ₂ −Ｃ₄ アルケニル（特にビニ
ル）、Ｃ₂ −Ｃ₄ アルキン−１−イル（特に１−プロピ
ン−１−イル）、ＮＨ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 、又は（ＣＨ₃ ）
₂ Ｎである。

【００２９】ピリミジン類似体の幾例として、ウラシ
ル、チミン、シトシン、５−フルオロウラシル、５−ク
ロロウラシル、５−ブロモウラシル、ジヒドロウラシ
ル、５−メチルシトシン、５−プロピンチミン及び５−
プロピンシトシンが挙げられる

【００３０】本発明はまた、式（Ｉ）：

【化２４】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各々互いに独立して、水素若
しくは保護基、又はＲ₁はこれらの意義を有し、Ｒ₂ は
リンを含むヌクレオチド架橋基を形成する基；Ｂは、プ
リン若しくはピリミジン基であるか又はそれらの類似体
の基である）で示される化合物の製造法にも関する；そ
して（ａ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）：

【化２５】（式中、Ｒ₄ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₂₁アルキル、Ｃ₂ −Ｃ
₂₁アルケニル、Ｃ₂ −Ｃ₂₁アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）
アルキル；Ｒ₅ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₀アルキル、−ＣＨ
₂ −Ｏ−Ｒ₆ 又は式（Ｉｂ）の基；Ｒ₆ は、水素、Ｃ₁
−Ｃ₂₂アルキル、Ｃ₃ −Ｃ₂₁アルケニル、又は部分的に
若しくは完全にフッ素置換されたＣ₁ −Ｃ₁₀アルキル若
しくは−〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m −Ｒ₇ ；Ｒ₇ は、水素
又はＣ₁ −Ｃ₂₁アルキル；ｎは、１乃至１２の数；ｍ
は、１乃至４の数である；但しｎが１及びＲ₅ が水素の
場合は、Ｒ₄ は水素ではない）で示される基である場
合、その製造法は、式（IVａ）：

【化２６】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は、同一又は異なる保護基であ
り、Ｂは、プリン若しくはピリミジン基又はそれらの類
似体の基であり、塩基Ｂ中の官能基は、保護基で保護さ
れている）で示される化合物を、不活性溶媒中、式
（Ａ）：

【化２７】（式中、Ｒ₄ 、Ｒ₅ 及びｎは、上記と同義であり、Ｘ
は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏであ
る）で示される化合物と反応させることよりなり；（ｂ）Ｒ₃ が、式（Ｉｃ）：

【化２８】で示される基である場合、その製造法は、式（IVａ）で
示される化合物を、不活性溶媒中、式（Ｂ）：

【化２９】（式中、Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル
−Ｏである）で示される化合物と反応させることよりな
り；（ｃ）Ｒ₃ が、式（Ｉｂ）：

【化３０】〔式中、Ｒ₅ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₀アルキル、−ＣＨ₂
−Ｏ−Ｒ₆ 又は式（Ｉｂ）の基；Ｒ₆ は、水素、Ｃ₁ −
Ｃ₂₂アルキル、Ｃ₃ −Ｃ₂₁アルケニル、又は部分的若し
くは完全にフッ素置換されたＣ₁ −Ｃ₁₀アルキル若しく
は−〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m −Ｒ₇ ；Ｒ₇ は、水素又は
Ｃ₁ −Ｃ₂₁アルキル；Ｚは、−（ＣＨ₂ ）_p −又は−
（ＣＨ₂ −ＣＨ₂ −Ｏ）_q −ＣＨ₂ ＣＨ₂ −であり、−
ＣＨ₂ −の場合のＺは、非置換又はＣ₁ −Ｃ₁₀アルキ
ル、Ｃ₅ −Ｃ₆ シクロアルキル、及び非置換又はＣ₁ −
Ｃ₄ アルキル置換フェニルから選ばれる一つ以上の同一
又は異なる置換基で置換されていてもよい；ｍは、１乃
至４の数；ｐは、１乃至１０の数であり；そしてｑは、
１乃至４の数である〕で示される基である場合、その製
造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、Ｈ₂ Ｏ及びＢ
Ｆ₃ の存在で開環し、式：Ｘ’−（ＣＨ₂）_q −Ｘ’又
はＸ’−（ＣＨ₂ −ＣＨ₂ −Ｏ）_r −Ｘ’（式中、Ｘ’
は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏであ
る）で示される化合物を用いて閉環し、新しい環を形成
することよりなり；（ｄ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）で示される基である場合、そ
の製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、Ｒ₆ ＯＨ
及びＢＦ₃ の存在下に反応させ、適当な場合には、遊離
の水酸基をエーテル又はエステルに変換することよりな
り；（ｅ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）で示される基である場合、そ
の製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、ＢＦ₃ 及
び、例えばＮａＢＨ₄の存在下に水素化し、適当な場合
には、遊離の水酸基をエーテル又はエステルに変換する
ことよりなり；（ｆ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）で示される基である場合、そ
の製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、適切なグ
リニャール試薬と反応させ、適当な場合には、遊離の水
酸基をエーテル又はエステルに変換することよりなり；
又は（ｇ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）で示
される基である場合、その製造法は、（ａ）乃至（ｆ）
に記載した方法の一つによって、式（IVｂ）：

【化３１】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は、上記と同義であり、Ａは離脱
基、好適にはアルコキシ、アシルオキシ、メシル−Ｏ、
トシル−Ｏ、特にＯＣＨ₃ 、ＯＣＯＣＨ₃ 及びベンゾイ
ルオキシである）で示される化合物を２’−ＯＨ基にお
いて置換し、次いで、それ自体が公知の方法で、置換に
よって塩基基Ｂを導入し〔Lukevics, E.,Zablocka, A.,
Nucleoside Synthesis, Ellis Horwood, New York (19
91)〕、適当な場合には、保護基Ｒ₁₄及びＲ₁₅を除去
し、リンを含むヌクレオチド架橋基を導入することより
なる。

【００３１】式（Ｉ）（式中、Ｒ₅ は水素でありｎ＝１
である）で示される化合物もまた、式（IVａ）で示され
る化合物を、式：Ｘ−ＣＨ₂ −ＣＯ−ＯＲの化合物と反
応させ、次いでＣＯ基をＣＨ₂ ＯＨ基に還元し、アルキ
ル化することによって得られる。

【００３２】式（IVａ）及び（IVｂ）で示される化合
物、Ａ及びＢは公知である；これらの幾つかの化合物は
市販されているか又は、公知又は類似の方法で作られ
る。

【００３３】不活性溶媒は、例えば炭化水素、ハロゲン
化炭化水素、アルキル化されたカルボン酸アミド及びラ
クタム、エーテル、アセトニトリルのようなニトリル、
ジアルキルスルホン又はジアルキルスルホキシド又は環
状スルホン及びスルホキシドである。

【００３４】反応工程（ａ）乃至（ｇ）における反応温
度は、−５０°から２００℃、好適には０°から９０℃
である。

【００３５】反応は、塩基、例えばアルカリ金属水素化
物、アルコラート、水酸化物、炭酸塩、トリアルキルア
ミン又はジアザビシクロウンデセンの存在下に、好都合
に行なわれる。

【００３６】反応は、例えば触媒を用い、又は水素化ホ
ウ素を用いて行なわれる。

【００３７】式（Ｉ）の化合物は、それ自体が公知の方
法、例えば沈殿又は結晶化及び濾過並びにクロマトグラ
フィー法によって単離、精製される。

【００３８】式（Ｉ）の化合物は、核酸との相互反応の
故に、有益な生物学的活性を示すオリゴヌクレオチドを
構築するのに用いられ、薬学的に活性な成分として又は
診断薬として使用することができる。

【００３９】本発明はまた、式（Ｉ）で示される化合物
の同一又は異なるモノマ−単位を含むが、他の天然の又
は合成ヌクレオシドのモノマ−単位と一緒に、式（Ｉ）
で示される少なくとも１個のモノマ−単位を含む、オリ
ゴヌクレオチドで、２乃至２００のモノマ−単位よりな
る、オリゴヌクレオチドの製造における、式（Ｉ）で示
される化合物の用途にも関する。このオリゴヌクレオチ
ドは、好適には、２乃至１００、特に好適には２乃至５
０、最も好適には４乃至３０のモノマー単位を含む。式
（Ｉ）で示される化合物の同一又は異なるモノマー単位
を含むオリゴヌクレオチドが好ましい。その他、Ｄ−リ
ボース又はＤ−デオキシリボースから誘導される合成又
は天然ヌクレオシドのモノマー単位を付加的に含むオリ
ゴヌクレオチドも好ましい。

【００４０】本発明は、式（Ｖ）：

【化３２】（式中、ｘは０乃至２００の数であり、Ｙはヌクレオチ
ド架橋基、Ｕ、Ｖ及びＷは、各々独立して、天然又は合
成ヌクレオシドの同一又は異なる基を示し、Ｕ、Ｖ及び
／又はＷの少なくとも一個は、式（VI）：

【化３３】で示される基、Ｂ及びＲ₃ は、好適な意義及び例示を含
めて、式（Ｉ）の化合物で定義したものである）で示さ
れるオリゴヌクレオチドにも関する。

【００４１】好適な架橋基Ｙは、天然オリゴヌクレオチ
ドに存在する−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −で示される基である。別
の架橋基の例としては、−Ｐ（Ｏ）Ｓ^- −、−Ｐ（Ｓ）
Ｓ^-−、−Ｐ（Ｏ）Ｒ₁₆−、Ｐ（Ｏ）ＮＲ₁₇Ｒ₁₈及び−
ＣＨ₂ −（式中、Ｒ₁₆は、水素又はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル
であり、Ｒ₁₇及びＲ₁₈は、各々互いに独立して、Ｒ₁₆の
意義を有する）が挙げられる。式（Ｖ）において、ｘ
は、好適には０乃至１００の数、特に１乃至５０の数、
より特に３乃至２９の数である。式（VI）で示される基
は、末端又はヌクレオチド配列中に結合され、式（VI）
のすべて又は幾つか、例えば２乃至５個の基を、互いに
連続させることが可能であり、或いは式（VI）の基は、
天然又は合成ヌクレオチドの基の間に結合され、或いは
これらの配置の混合した形がヌクレオチド配列に存在し
得る。

【００４２】特に好適な態様は、式（Ｖ）〔式中、ｘは
２乃至５０、好適には２乃至３０、Ｙは、−Ｐ（Ｏ）Ｏ
^- −で示される基、Ｕ、Ｖ及びＷは、各々独立して、天
然ヌクレオシドの同一又は異なる基であり、Ｕ、Ｖ又は
Ｗで示される基の少なくとも一個は、式（VI）に該当す
る〕で示されるオリゴヌクレオチドである。適切な天然
ヌクレオシドは、アデノシン、シチジン、グアノシン、
ウリジン、２−アミノアデニン、５−メチルシトシン、
２’−デオキシアデノシン、２’−デオキシシチジン、
２’−デオキシグアノシン及びチミジンである。天然ヌ
クレオシド塩基としては、特にアデニン、シトシン、グ
アニン、チミン及びウラシルが挙げられる。式（VI）で
示される基は、末端又はヌクレオチド配列中に結合さ
れ、式（VI）のすべて又は幾つか、例えば２乃至５個の
同一又は異なる基を、互いに連続させることが可能であ
り、或いは式（VI）の同一又は異なる基が、天然ヌクレ
オシドの基の間に結合され、或いはこれらの配置の混合
した形がヌクレオチド配列に存在し得る。式（Ｖ）で示
されるオリゴヌクレオチドの別の好適な態様において、
Ｕ、Ｖ及びＷで示されるすべての基は、式（VI）の同一
又は異なる基である。ｘは、好適には３乃至２９の数で
あり、式（VI）で示される基の全数は、好適には１乃至
１２である。

【００４３】本発明のオリゴヌクレオチドは、それ自体
が公知の方法で、使用説明書と共に市販されている随意
に自動化されたＤＮＡ合成装置を用いて各種の方法で作
られる。−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −の架橋基の場合、例えばリン
酸トリエステル法、亜リン酸トリエステル法又はＨ−ホ
スホン酸エステル法が用いられ、これらは、当業者によ
く知られているものである。亜リン酸トリエステル法
は、例えば次のように行なわれる：式（Ｉ）（式中、Ｒ
₁ 及びＲ₂ の各々は水素である）で示されるヌクレオシ
ドは、保護基試薬、例えば塩化４，４’−ジメトキシト
リフェニルメチルと反応させ、式（Ｄ）：

【化３４】で示されるヌクレオシドを生成し、式（Ｄ）の化合物
は、「リンカー」、例えば無水コハク酸によって担体、
例えば長鎖のアルキルアミノ基を有する制御ポアグラス
（ＣＰＧ）に結合させる。別の方法では、式（Ｄ）の化
合物のヒドロキシ基は、例えばＲ’ＯＰ〔Ｎ（イソプロ
ピル）₂ 〕₂ を用いてホスホルアミダイトに誘導し、式
（Ｅ）：

【化３５】（式中、Ｒ’は、例えばβ−シアノエチルである）で示
される化合物を形成する。

【００４４】担体に結合する物質であるＤＭＴ基のよう
な保護基を除去する場合、カップリングは、−Ｎ（ｉｓ
ｏ−Ｃ₃ Ｈ₇ ）₂ の除去を伴って、式（Ｄ）で示される
化合物に起こり、遊離の水酸基は何れもブロックされ
（キャッピング）、生成した亜リン酸はリン酸に酸化さ
れる。二量体は保護基を外され、モノマー単位の所望の
数が合成されるまで、式（Ｅ）で示される化合物を用い
て反応サイクルを繰り返し、そして生成物は担体から除
去される。このようにして、式（Ｖ）のＵ、Ｖ及びＷで
示される基すべてが、式（VI）で示される基よりなるオ
リゴヌクレオチドが得られる。同じ方法は、任意の所望
の配列で任意の所望のモノマー単位を有するオリゴヌク
レオチドを製造するためにも用いられ、この単位とその
配列は、どのような合成及び天然ヌクレオシド基礎単位
及び本発明のヌクレオシド基礎単位を個々の反応サイク
ルで用いられるかによって異なる。

【００４５】本発明の式（Ｉ）（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ の
各々は水素である）で示される化合物は、抗ウイルス性
及び抗増殖性を有し、従って医薬品として用いることが
できる。加えて、本発明のオリゴヌクレオチドは、ヌク
レアーゼによる分解に対して高度な安定性を有してい
る。特に驚くべきことは、相補性核酸鎖、特にＲＮＡ型
のそれとの優れた対合性である。その他、本発明のオリ
ゴヌクレオチドには、予想以上の高い細胞性取込みがあ
る。従って、本発明のオリゴヌクレオチドは、アンチセ
ンス工学、すなわちｍＲＮＡの適切な相補性ヌクレオチ
ド配列に結合させることによって望ましくない蛋白生成
物の発現を阻害するのに特に適している（欧州特許第26
6,099 号、ＷＯ第87/07300及び89/08146号各明細書）。
このオリゴヌクレオチドは、例えば核酸（例えば腫瘍形
成因子）段階での生物学的活性蛋白の発現を阻害するこ
とによって感染症及び疾患の治療に用いることができ
る。本発明のオリゴヌクレオチドはまた、診断薬として
も適しており、一本鎖又は二本鎖核酸段階における選択
的な相互作用により、ウイルス感染又は遺伝性疾患の探
知に遺伝子探針として用いることができる。特に、ヌク
レアーゼに対する高い安定性のために、生体外のみなら
ず生体内（例えば、組織検体、血液プラズマ及び血液血
清）においても診断的に用いることができる。このよう
な用途は、例えばＷＯ第91/06556号明細書に記載されて
いる。

【００４６】本発明はまた、ウイルス感染又は遺伝性疾
患の検出における診断薬としての本発明のオリゴヌクレ
オチドの用途にも関する。

【００４７】本発明は、体内においてヌクレオチド配列
を不活性化することによって、ヒトを含む温血動物にお
ける疾患の治療法における、本発明の式（Ｉ）で示され
るヌクレオシド及び式（Ｖ）で示されるオリゴヌクレオ
チドの用途にも関する。約７０kgの体重がある温血動物
への投与の場合の用量は、例えば１日当り、０．０１乃
至１０００mgである。投与は、好適には製剤成分の形態
で、非経口的に、例えば静脈内又は腹腔内に投与され
る。

【００４８】本発明はさらに、式（Ｉ）のヌクレオシド
若しくは式（Ｖ）のオリゴヌクレオチド単独の有効量又
はその他の活性成分、薬剤担体及び、適当な場合には、
賦形剤と一緒に、その有効量を含む薬学組成物に関す
る。

【００４９】本発明の薬理学的に活性なヌクレオシド及
びオリゴヌクレオチドは、非経口的に投与できる製剤又
は注射液の形で用いられる。かかる溶液は、好適には等
張性の水溶液又は懸濁液であり、例えば活性成分単独又
は担体、例えばマンニトールを一緒に含む凍結乾燥成分
の場合、液剤又は懸濁剤のために用時調整することがで
きる。薬学組成物は滅菌され、そして／又は賦形剤、例
えば保存剤、安定剤、湿潤剤及び／又は乳化剤、溶解
剤、浸透圧及び／又は緩衝液を調整するための塩類を加
えてもよい。所望により、別の薬理活性物質、例えば抗
生物質を含む薬学組成物は、それ自体が公知の方法、例
えば通常の溶解又は凍結乾燥法によって製造され、約
０．１％乃至９０％、特に約０．５％乃至約３０％、例
えば１％ないし５％の活性成分を含む。

【００５０】

【実施例】以下の実施例により、本発明を説明する。¹
Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、次の環式炭素構造式における
炭素原子の番号付けに基づいている：原料化合物：

【化３６】ヌクレオシド（例）：

【化３７】

【００５１】明細書本文及び構造式で用いた略語：ＤＭＦジメチルホルムアミドＣｌＢｎＣｌ₂ 塩化２，４−ジクロロベンジルＢｎベンジルＡｃアセチル φ フェニルＢＳＡＮ，Ｎ−ビストリメチルシリルアセ
トアミドＤＢＵジアザビシクロ〔５・４・０〕ウン
デカ−７−エンＢＯＭ−Ｃｌ塩化ベンジルオキシメチルＤＭＴＣｌ塩化４，４’−ジメトキシトリチルＴＨＦテトラヒドロフラン

【００５２】Ａ）ヌクレオシド類似体の製法実施例Ａ１１−メチルリボース２８．０g を、ＤＭＦ１３０mlに懸
濁したＮａＨ１３．５g に６０℃で滴下し、Ｈ₂ の発生
が終了後、１１０．０g のＣｌＢｎＣｌ₂ を滴下した。
次いで、反応混合物を２５℃で１６時間撹拌した。未反
応のＮａＨを分解するため、メタノールを注意して滴下
し、反応混合物を氷水に注加した。塊状の沈殿を濾取
し、アセトニトリルでよく洗い、化合物（Ａ１）：

【化３８】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): H-C(1) のプロトンは5.0ppm
にシングレットを示した。 MS: 638 (M⁺).

【００５３】実施例Ａ２実施例Ａ１で得られた生成物６５．９g を塩化メチレン
６００mlに溶解し、０℃に冷却し、８００mlの塩化メチ
レンに溶解した１２１mlのＳｎＣｌ₄ を滴下した。反応
混合物を３℃で２６時間放置した後、さらに２mlのＳｎ
Ｃｌ₄ を加えた。合計して３５時間後、注意しながら、
反応液をＮａＣＯ₃ 飽和水溶液７００mlに注加した。４
００mlの塩化メチレンで希釈して、Ｓｎを含む沈殿を濾
去した。濾液の有機層をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、蒸発濃縮
して化合物（Ａ２）：

【化３９】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): H-C(1)のプロトンは4.90ppm
にJ=5 Hzのダブレットを示した。

【００５４】実施例Ａ３実施例Ａ２で得られた生成物１２５．９g をピリジン１
リットルに溶解し、２０℃で無水酢酸２５．５g 及び４
−ジメチルアミノピリジン１g を加えた。反応混合物を
１７時間撹拌し、水１リットルに注加して濃塩酸で酸性
にし、酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄ で乾
燥し、蒸発濃縮した。濃縮液をヘキサンで結晶化して化
合物（Ａ３）：

【化４０】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 5.15 [d, J=4.5 Hz, H-C
(1)]; 3.50 (s, OCH₃); 2.17 (s, OCOCH₃); MS: 522 (M +). [ α ]_Na(D)= 87.4 ±1.0゜ (0.998%).

【００５５】実施例Ａ４チミン２４g を１，２−ジクロロエタン１００ml中に懸
濁させ、ＢＳＡ１１６．４g を加えて、透明な溶液が得
られるまで反応混合物を還流加熱した。反応混合物を５
０℃に冷却し、実施例Ａ３で得られた生成物５０g 及び
トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルエステ
ル２７．５g を加えた。反応混合物を７０℃で２０時間
撹拌し、次いでＮａＨＣＯ₃ 水溶液３００mlに注加し、
撹拌した。ジクロロエタンの抽出後、反応混合物をＭｇ
ＳＯ₄ で乾燥し、濃縮した。濃縮物にメタノールを加え
て結晶化させ、化合物（Ａ４）：

【化４１】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 8.25 (s, NH); 6.10 [d, J=
4.5 Hz, H-C(1')]; 2.13 (s, OCOCH₃); 1.66 (s, CH₃). MS: 616 (M⁺).

【００５６】実施例Ａ５実施例Ａ４で得られた生成物８５g をアセトニトリル８
５０mlに懸濁させ、室温でＤＢＵ２４．２g 及び２４．
９g のＢＯＭ−Ｃｌを滴下した。反応混合物を２０時間
撹拌し、水中に注加して酢酸エチルで抽出した。抽出液
をＭｇＳＯ₄ で乾燥して蒸発濃縮し、化合物（Ａ５）：

【化４２】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 6.05 [d, J=4.5 Hz, H-C
(1')]; 5.5 (AB, CH₂); 5.37 (dd, H-C(2')]; 2.13 (s,
OCOCH₃); 1.55 (s, CH₃). MS: 736 (M⁺).

【００５７】実施例Ａ６実施例Ａ５で得られた生成物１０６g をＴＨＦ１リット
ルに懸濁させ、３０％ＮａＯＣＨ₃ ／ＣＨ₃ ＯＨ溶液２
６g を滴下した。２．５時間撹拌した後、反応混合物を
水中に注加し、塩化ナトリウム飽和水溶液を加え、酢酸
エチルで抽出した。ＭｇＳＯ₄ で乾燥後、抽出物を濃縮
して化合物（Ａ６）：

【化４３】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 5.93 [d, J=5 Hz, H-C
(1')]; 5.5 (AB, CH₂); 3.03 (d, J=6.5 Hz, OH); 1.72
(s, CH₃). MS: 694 (M +).

【００５８】実施例Ａ７実施例Ａ６で得られた生成物２０．３g をＴＨＦ２００
mlに溶解し、この溶液にＮａＨ０．７３g を加えた。反
応混合物を３０分間沸騰させ、次いで、２−クロロエチ
ルメチルエーテル２．８９g を加え、反応混合物を、さ
らに２４時間沸騰させた。その後、更にＮａＨ０．５g
及び２−クロロエチルメチルエーテル１．７g を加え、
３２時間、加熱し続けた後、反応混合物を水中に注加し
て酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄ で乾燥
し、蒸発濃縮した。濃縮物をシリカゲルのクロマトグラ
フィーに付し、トルエン／酢酸エチル（４：１）で溶出
して化合物（Ａ７）：

【化４４】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.65 [s, H-C(6)]; 5.93
[s, H-C(1')]; 5.5 (s,CH₂); 3.33 (s, OCH₃); 1.6 (s,
CH₃). MS: 752 (M⁺).

【００５９】実施例Ａ８実施例Ａ７で得られた生成物７９．４g をＴＨＦ８００
mlに溶解し、この溶液にＮａＨ３．３g を加えた。短時
間、反応混合物を沸騰させ、次いで４０℃で、ブロモ酢
酸メチルエステル２１g を滴下した。反応混合物を６０
℃で合計２７時間撹拌し、１６時間後と２０時間後に、
ＮａＨ１g とブロモ酢酸メチルエステル２mlを加えた。
最後に、反応混合物を水中に注加して酢酸エチルで抽出
した。抽出物をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、蒸発濃縮して化合
物（Ａ８）：

【化４５】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.70 [s, H-C(6)]; 5.92
[s, H-C(1')]; 5.48 (AB, CH₂); 3.75 (s, OCH₃); 1.58
(s, CH₃). MS: 766 (M⁺).

【００６０】実施例Ａ９（ａ）実施例Ａ８で得られた生成物３７g をＴＨＦ４０
０mlに溶解し、この溶液に２０℃で、ＬｉＢＨ₄ １．５
g を小量づつ加え、反応混合物を１時間撹拌した。注意
しながら、反応混合物を水５００mlに注加し、２Ｎ塩酸
水溶液３２mlで中和した。酢酸エチルで抽出し、蒸発濃
縮して化合物（Ａ９）：

【化４６】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.65 [s, H-C(6)]; 5.96
[s, H-C(1')]; 5.50 (AB, CH₃); 2.57 (broad s, OH);
1.60 (s, CH₃). MS: 738 (M⁺).

【００６１】（ｂ）化合物（Ａ９）を、ＴＨＦ中７０℃
で、ＮａＨの存在下、ＣＨ₃ Ｉでメチル化した。８時間
後、実施例Ａ７と同様に後処理して、化合物（Ａ７）を
得た。

【００６２】実施例Ａ１０実施例Ａ７で得られた生成物２０．０g をＴＨＦ２００
mlに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（５％）２g を加えて、２５℃、
常圧で４．５時間水素化した（Ｈ₂ の吸収は１０２
％）。濾過後、濾液を蒸発濃縮して、濃縮物をメタノー
ル１７０mlに溶解し、３０％ＮａＯＣＨ₃ ／ＣＨ₃ ＯＨ
溶液を加えてpHを１１に調整した。２４時間後、反応混
合物を水２５０mlに注加し、２Ｎ塩酸水溶液で酸性にし
て酢酸エチルで抽出した。抽出物をＭｇＳＯ₄ で乾燥
し、蒸発濃縮して化合物（Ａ１０）：

【化４７】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 8.75 (s, NH); 7.65 [s, H-
C(6)]; 5.97 [s, H-C(1')]; 3.33 (s, OCH₃); 1.60 (s,
CH₃). MS: 632 (M⁺).

【００６３】実施例Ａ１１実施例Ａ１０で得られた生成物１５g をメタノール２５
０mlに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（５％）の５g を加えて、無水
酢酸ナトリウム９．２５g の存在下、５０℃、常圧で水
素化した。４６時間後、水素化混合物を濾過し、濾液を
蒸発濃縮した。塩類を除去するため、濃縮物を、シリカ
ゲルを持つ小さなフリットによるクロマトグラフィーに
付し（酢酸エチル／メタノール９：１）、化合物（Ａ１
１）：

【化４８】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 11.5 (s, NH); 7.95 [s, H-
C(6)]; 6.00 [d, J=6Hz, H-C(1')]; 5.33 (broad s, O
H); 5.20 (d, OH); 3.32 (s, OCH₃); 1.92 (s, CH₃). MS: 316 (M⁺).

【００６４】実施例Ａ１２実施例Ａ１１で得られた生成物０．４５g を、ピリジン
に溶解し、蒸発濃縮した。この操作を２度繰り返した
後、再度、ピリジン１８mlに溶解し、トリエチルアミン
０．２g 、０．５５g のＤＭＴＣｌ及び４−ジメチルア
ミノピリジン２５mgを順次加えた。反応混合物を室温で
１６時間撹拌してから、酢酸エチル５０mlで希釈し、水
５０mlに注加した。有機層をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、濃縮
し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し
（ヘキサン／酢酸エチル／トリエチルアミン８６：１
０：４）、化合物（Ａ１２）：

【化４９】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.62 [s, H-C(6)]; 6.02
[d, J=4 Hz, H-C(1')];3.38 (s, OCH₃); 1.36 (s, C
H₃).

【００６５】実施例Ａ１３実施例Ａ１２で得られた生成物３３０mgを、ジイソプロ
ピルアンモニウムテトラゾリド１１０mg、２−シアノエ
チル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホ
ラスジアミダイト１７８mg及び塩化メチレン６mlの混合
物に加えた。反応混合物を、室温で１７時間撹拌してか
ら、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液に注加した。有機層をＭｇ
ＳＯ₄ で乾燥し、蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのク
ロマトグラフィーに付した（エタノール／酢酸エチル
４：１にトリエチルアミンを１％添加）。得られた泡状
物質を、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル１mlに溶解
し、０℃でペンタンを滴下して化合物（Ａ１３）：

【化５０】（ジアステレオマー、１：１）を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.70 [s, H-C(6)]及び 7.63
[s, H-C(6)]; 6.08[d, J=4 Hz, H-C(1)]; 6.02 [d, J=
4 Hz, H-C(1')].

【００６６】実施例Ａ１４実施例Ａ２で得られた生成物２４．２g をＴＨＦ２５０
mlに溶解し、この溶液にブロモ酢酸メチルエステル８．
７６g とＮａＨ１．３８g を加え、反応混合物を６０℃
で３．５時間撹拌した。さらに、ＮａＨ０．１４g とブ
ロモ酢酸メチルエステル０．５３mlを加えた後、反応混
合物を６０℃で３時間撹拌した。次いで、この懸濁液を
水３００mlに注加し、２Ｎ塩酸水溶液で中和してから酢
酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、蒸
発濃縮して化合物（Ａ１４）：

【化５１】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 5.05 [d, J=4 Hz, H-C
(1')]; 3.50 (s, OCH₃); 3.75 (s, OCH₃). MS: 552 (M⁺).

【００６７】実施例Ａ１５（ａ）実施例Ａ１４で得られた生成物５．０g をアセト
ニトリル６０mlに溶解し、ビシリル化チミン４．８８g
を加え、６０℃で撹拌した。この混合液に、トリフルオ
ロメタンスルホン酸トリメチルシリルエステル２．６g
を滴下した。３．５時間撹拌した後、反応液を冷却し、
ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液に注加して撹拌し、酢酸エチル
で抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、蒸発濃縮
し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し
（トルエン／酢酸エチル１：１）、化合物（Ａ１５）：

【化５２】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 8.36 (s, NH); 7.70 [s, H-
C(6)]; 5.94 [d, J=1.5 Hz, H-C(1')]; 3.73 (s, OC
H₃); 1.58 (s, CH₃). MS: 646 (M⁺).

【００６８】（ｂ）上記の生成物を塩化ベンジルオキシ
メチルと反応させ、化合物（Ａ８）を得た。

【００６９】実施例Ａ１６上記の方法に準じて、各種の２’−ＯＨ修飾を行なっ
た、これらの結果を第１表に示す。

【００７０】

【表１】

【００７１】

【表２】

【００７２】

【表３】

【００７３】

【表４】

【００７４】

【表５】

【００７５】

【表６】

【００７６】

【表７】

【００７７】実施例Ａ１７実施例Ａ６で得られた生成物５．０g をＴＨＦ５０mlに
溶解し、ＮａＨ０．２１g を加えた後、反応混合物を６
０℃で４５分間撹拌した。次いで、ジエチレングリコー
ルクロロエチルメチルエーテル１．５７g を加えた。最
後に、６０℃で合計５４時間撹拌した。その８時間及び
４２時間後に、さらにＮａＨ０．０５gとジエチレング
リコールクロロエチルメチルエーテル０．４g を加え
た。反応混合物を冷却してから水中に注加して酢酸エチ
ルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄で乾燥し、蒸発濃縮
して得られた化合物（Ａ１７）：

【化５３】を、さらにヘキサン／酢酸エチル（１：１）を用いてシ
リカゲルのクロマトグラフィーに付し、精製した。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.60 (s, CH₃); 3.33 (s, O
CH₃); 5.47 (AB, CH₂); 5.93 [d, H-C(1')]; 7.65 [s,
H-C(6)]. MS: 840 (M^-).

【００７８】実施例Ａ１８実施例Ａ１７で得られた生成物３．２g をテトラヒドロ
フラン３５mlに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（５％）０．６g を加
えて、常圧下、２２℃で水素化した。１時間後（水素吸
収９６％）、水素化混合物の濾液が透明になるまで濾過
し、その後濾液を蒸発濃縮した。濃縮物をメタノール３
０mlに溶解し、メタノール中３０％ＮａＯＣＨ₃ 溶液
３．５mlを加えた。２０℃で２４時間撹拌した後、反応
混合物を水中に注加して酢酸エチルで抽出した。抽出液
をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、蒸発濃縮して化合物（Ａ１
８）：

【化５４】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.60 (s, CH₃); 3.55 (s, O
CH₃); 5.96 [d, J=2 Hz, H-C(1')]; 7.62 [s, H-C(6)];
8.96 (s, NH). MS: 720/722/724 (M⁺).

【００７９】実施例Ａ１９実施例Ａ１８で得られた生成物２．３g をメタノール７
５mlに溶解し、酢酸ナトリウム１．１５g 及びＰｄ／Ｃ
（５％）１．０g を加えて、３５℃で水素化した。４３
時間後、触媒を濾去し、濾液を濃縮した。塩類を除去す
るため、酢酸エチル／メタノール（４：１）を用い、濃
縮物をシリカゲルを通して濾過し、化合物（Ａ１９）：

【化５５】を得た。¹ H-NMR (250 MHz,メタノ−ル(D₄)): 1.72 (s, CH₃); 3.
22 (s, OCH₃); 5.80 [d, J=5 Hz, H-C(1')]; 7.78 [s,
H-C(6)]. MS: 404 (M⁺).

【００８０】実施例Ａ２０実施例Ａ１９で得られた生成物４００mgを無水ピリジン
８mlに溶解し、２０℃で、ＤＭＴＣｌの０．３４g を加
えた。反応混合物を２０時間撹拌してから塩化メチレン
３０mlで希釈し、水中に注加した。有機層を２回水洗
し、乾燥（ＭｇＳＯ₄ ）し蒸発濃縮した。濃縮物をシリ
カゲルのクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル／トリ
エチルアミン（９７：３）で溶出して化合物（Ａ２
０）：

【化５６】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.40 (s, CH₃); 3.35 (s, O
CH₃); 3.70 (s, 2xOCH₃); 6.02 [s, H-C(1')]; 7.66
[s, H-C(6)] （全部のシグナルは幅広い）. MS: 705 (M-H).

【００８１】実施例Ａ２１塩化メチレン２．５mlに溶解した実施例Ａ２０で得られ
た生成物０．３９g の溶液を、無水の塩化メチレン２．
５mlに溶解したジイソプロピルアンモニウムテトラゾリ
ド０．１２g 及びシアノエチルテトライソプロピルホス
ホラスアミダイト０．２０g の溶液に滴下し、２０℃で
２８時間撹拌した。反応溶液を、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶
液に注加し、塩化メチレンで抽出した。抽出液を蒸発濃
縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付
し、酢酸エチル／トリエチルアミン（９７：３）で溶出
して化合物（Ａ２１）：

【化５７】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): H-C(1')のプロトンは、6.02
及び6.07 ppmにダブレットとして現れた。³¹ P-NMR (CDCl₃): 149.95, 149.88 ppm

【００８２】実施例Ａ２２ジクロロエタン２５０mlに懸濁したウラシル２１．４g
に、ＢＳＡ１１６g を加え、反応混合物を８０℃に３０
分間加熱して溶液とした。この溶液を４０℃に冷却し、
ジクロロエタン３５０mlに溶解した実施例Ａ３で得られ
た生成物５０．０g とＳｎＣｌ₄ ２７．４g を加え、こ
の溶液を５時間８０℃に保持した。冷却して、ＮａＨＣ
Ｏ₃ 飽和水溶液に注加した。得られた２相の懸濁液を濾
過し、有機層を分離し、水層を、再びＣＨ₂ Ｃｌ₂ で抽
出した。抽出液を合わせ、ＭｇＳＯ₄ で乾燥し、蒸発濃
縮し、濃縮物をアセトニトリル中で温浸し、化合物（Ａ
２２）：

【化５８】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 2.22 (s, OAc); 5.35 [t, H-C
(2')]; 6.07 [d, J=4Hz, H-C(1')]; 5.53及び7.23 (各
々 d, J=8 Hz, H-C(5)及びH-C(6)]; 8.57 (s,NH). MS: 602

【００８３】実施例Ａ２３６０℃で、ＴＨＦ３００mlに溶解した実施例Ａ４で得ら
れた生成物３５．６gの溶液に、ＴＨＦ６０ml及びＮａ
Ｈ（１００％）１．４７g を加え、得られた混合物に１
時間加熱を続けた。これに、Ｒ−（−）グリシジルトシ
ラート１４．０g を加え、２．５時間後、さらにＮａＨ
０．１g を加えた。反応混合物を４時間加熱し、冷却し
てから氷に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発
濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーに付し（トル
エン／酢酸エチル９：１）、化合物（Ａ２３）：

【化５９】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.59 (s, CH₃); 5.48 (AB、 C
H₂); 5.92 [s, 1.5 Hz,H-C(1')]; 7.62 [s, H-C(6)]. FAB-MS: 751 (M+H)

【００８４】実施例Ａ２４実施例Ａ２３で得られた生成物５．１g と１−ヘキサデ
カノール４．９３g を、ＣＨ₂ Ｃｌ₂ ５０mlに溶解し、
三フッ化ホウ素ジエチルエーテラート（d=1.13g/ml）
０．９６g を加え、反応混合物を室温で１９時間撹拌し
た。次いで、Ｈ₂Ｏに注ぎ、ＣＨ₂ Ｃｌ₂ で抽出した。
抽出液を蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグ
ラフィーに付し（酢酸エチル／ヘキサン１：１）、化合
物（Ａ２４）：

【化６０】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.60 (s, CH₃); 5.47 (AB、 C
H₂); 5.93 [d, J=1.5 Hz, H-C(1')]; 7.63 [s, H-C
(6)]. FAB-MS: 1027 (M+Cl)^-.

【００８５】実施例Ａ２５ＴＨＦ３５mlに溶解した実施例Ａ２４で得られた生成物
３．４５g の溶液に、ＮａＨ（１００％）０．１５g を
加えて、６０℃に４５分間加熱した。次いで、ＭｅＩ
０．６３g を加え、反応混合物を、さらに１．５時間加
熱した。その後、反応混合物を冷却し、水中に注加し、
酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮物に
トルエンを用いて、シリカゲルの短いカラムを通して濾
過し、化合物（Ａ２５）：

【化６１】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.59 (s, CH₃); 5.45 (AB、 C
H₂); 5.93 [d, J=1.5 Hz, H-C(1')]; 7.63 [s, H-C
(6)]. MS (DCl): 1024 (M+NH₄)⁺

【００８６】実施例Ａ２６実施例Ａ２５で得られた生成物３．３g を、ＴＨＦ７０
ml中、Ｐｄ／Ｃを０．７g を加えて水素化した（３３時
間、Ｈ₂ の吸収１０４％）。反応混合物を濾過し、濾液
を蒸発濃縮した。濃縮物をＴＨＦ１０mlとメタノール１
０mlの混液に溶解し、ＮａＯＣＨ₃ ／ＨＯＣＨ₃ 溶液
（３０％）を加えて、室温で２４時間撹拌した。次い
で、約半量にまで濃縮し、水中に注ぎ、酢酸エチルで抽
出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮液をシリカゲルのク
ロマトグラフィーに付し（酢酸エチル／トルエン１：
２）、化合物（Ａ２６）：

【化６２】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.62 (s, CH₃); 3.40 (s, OC
H₃); 5.98 [d, J=2 Hz,H-C(1')]; 7.62 [s, H-C(6)];
8.57 (s, NH). MS (DCl): 886.

【００８７】実施例Ａ２７実施例Ａ２６で得られた生成物１．２１g を、メタノー
ル５０mlとトルエン５mlの混液中、Ｐｄ／Ｃ（１０％）
を０．２g 、ＭｇＯを０．２５８g 加えて水素化した
（２時間、Ｈ₂ の吸収２２０ml）。反応混合物を濾過
し、濾液を蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルを通して濾
過（Ｍｇ塩の除去）して化合物（Ａ２７）：

【化６３】を得た。 NMR (250 MHz, DMSO-d₆): 1.72 (s, CH₃); 5.05 (d, O
H); 5.18 (t, OH); 5.84 [d, J=6 Hz, H-C(1')]; 7.77
[s, H-C(6)]. FAB-MS: 569 (M-H).

【００８８】実施例Ａ２８実施例Ａ２７で得られた生成物０．８３g を、ピリジン
５０mlに溶解し、この溶液を蒸発濃縮した。濃縮物にピ
リジン８ml及び０．６g のＤＭＴＣｌを加え、得られた
混合物を、室温で４４時間撹拌した。反応混合物をＨ₂
Ｏ中に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を濃縮
し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し
（トルエン／酢酸エチル１：１＋１％ＮＥｔ₃ ）、化合
物（Ａ２８）：

【化６４】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.35 (s, CH₃); 3.47 (s, OC
H₃); 3.80 (s, OCH₃); 6.03 [d, J=4 Hz, H-C(1')]; 7.
64 [s, H-C(6)]; 8.20 (s, NH). FAB-MS: 873 (M+H).

【００８９】実施例Ａ２９ＣＨ₂ Ｃｌ₂ １０ml、ジイソプロピルアンモニウムテト
ラゾリド０．２４５g及びシアノエチルテトライソプロ
ピルホスホラスジアミダイト０．３９g を、実施例Ａ２
８で得られた生成物０．９５g に加え、室温で、３日間
撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液に注加
し、ＣＨ₂ Ｃｌ₂ で抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃
縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（トルエ
ン／酢酸エチル２：１＋１％ＮＥｔ₃ ）、化合物（Ａ２
９）：

【化６５】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 5.97及び6.05 [各々 d, J=4
Hz, 各々 H-C(1)];7.62及び7.70 [各々 s, H-C(6)]. P-NMR (250 MHz, CDCl₃): 150.012及び150.102. FAB-MS: 1071 (M-H).

【００９０】実施例Ａ３０ヒポキサンチン１５．６g とＢＳＡ４６．６g を、ジク
ロロエタン３００ml中で還流下に加熱し、３０分後に溶
液を得た。この溶液に、実施例Ａ３で得られた生成物３
０．０g 及びＴＭＳトリフラート１６．５g を加え、さ
らに１６時間加熱を続けた。反応混合物を冷却し、Ｎａ
ＨＣＯ₃ 飽和水溶液に注加し、得られた懸濁液を濾過し
た。濾液をＣＨ₂ Ｃｌ₂ で抽出し、有機層をＭｇＳＯ₄
で乾燥して蒸発濃縮した。濃縮物をクロマトグラフィー
に付し（メタノール／酢酸エチル１：１）、化合物（Ａ
３０）：

【化６６】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 6.22 [d, 3 Hz, H-C(1')];
8.14 及び 8.37 [each s, H-C(2) 及び H-C(8)]. FAB-MS: 625 (M-H).

【００９１】実施例Ａ３１実施例Ａ３０で得られた生成物３．８g を、ＣＨ₂ Ｃｌ
₂ １５０mlに加え、沸騰させながら、ＳＯＣｌ₂ ４．８
ml及びＤＭＦ２．４mlの混液を滴下した。反応混合物
を、更に３時間沸騰させてから、さらにＳＯＣｌ₂ １．
２mlとＤＭＦ０．６mlを加えた。反応混合物を、合計で
５．５時間沸騰させ、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液に注加
し、２０分間撹拌してＣＨ₂ Ｃｌ₂ で抽出した。抽出液
をＭｇＳＯ₄で乾燥して蒸発濃縮し、化合物（Ａ３
１）：

【化６７】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 5.83 [dd, H-C(2')]; 6.33 [d,
J=3 Hz, H-C(1')];8.47及び8.73 [各々 s, H-C(2)及び
H-C(8)]. MS: 664

【００９２】実施例Ａ３２実施例Ａ３１で得られた生成物３０．４g を、メタノー
ル２００mlとＴＨＦ１００mlの混合溶媒に溶解し、３０
％ＮａＯＭｅ／メタノール溶液１６．９g を滴下した。
反応混合物を３時間撹拌し、Ｈ₂ Ｏに注加して酢酸エチ
ルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄ で乾燥して蒸発濃縮
し、化合物（Ａ３２）：

【化６８】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 4.20 (s, OCH₃); 6.10 [d, J=6
Hz, H-C(1')]; 8.17及び 8.48 [each s, H-C(2) 及び
H-C(8)]. MS: 598.

【００９３】実施例Ａ３３ＴＨＦ２５０mlに溶解した実施例Ａ３２で得られた生成
物２５．４g の溶液に、ＮａＨ（１００％）１．１７g
を加え、沸騰させながら、２−ブロモエチルメチルエー
テル６．７６g を滴下した。反応混合物を、さらに６時
間沸騰させ、次いでＮａＨ０．５g と臭化物１．９mlを
加えた。２３時間後、反応混合物を冷却し、Ｈ₂ Ｏ中に
注加して酢酸エチルで抽出し、抽出液を蒸発濃縮した。
濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（ヘキ
サン／アセトン２：１）、化合物（Ａ３３）：

【化６９】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 3.27 (OCH₃); 4.20 (OCH₃);
6.27 [d, J=5Hz, H-C(1')]; 8.24及び8.52 [各々 s, H
-C(2)及び H-C(8)]. MS (DCl): 656.

【００９４】実施例Ａ３４実施例Ａ３３で得られた生成物２．２g を、メタノール
４５ml中、Ｐｄ／Ｃ（１０％）を０．６６g 、及びＭｇ
Ｏを４０２mg加えて水素化した。１３時間後（Ｈ₂ の吸
収は４８５．５ml）、混合物を濾過して得られた透明な
濾液を蒸発濃縮した。マグネシウム塩を除去するため、
濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（酢酸
エチル／メタノール９：１）、化合物（Ａ３４）：

【化７０】を得た。 NMR (250 MHz, DMSO(-d₆)): 4.4 (t, OH); 5.23 (OH);
5.94 [d, J=6.5 Hz,H-C(1')]; 8.40及び 8.55 [each s,
H-C(2) 及び H-C(8)]. FAB-MS: 339 (M-H)^-.

【００９５】実施例Ａ３５メタノール８０mlに溶解した実施例Ａ３４で得られた生
成物２．４６g の溶液をオートクレーブに入れ、ＮＨ₃
２０g を導入し、装置を１２時間１２０℃に維持した
（内圧：１７bar ）。反応混合物を蒸発濃縮し、濃縮物
をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル
／メタノール）、化合物（Ａ３５）：

【化７１】を得た。 NMR (250 MHz, DMSO-D₆): 5.32 (d, OH); 5.60 (t, O
H); 6.15 [d, J=6 Hz,H-C(1')]; 8.33及び 8.57 [each
s, H-C(2) 及び H-C(8)]. MS (DCI): 326 (M+H).

【００９６】実施例Ａ３６メタノール５mlに溶解した実施例Ａ３５で得られた生成
物０．４８g の溶液に、Ｎ−メチル−２，２−ジメトキ
シピロリジン０．２８g を加え、反応混合物を１８時間
撹拌してから蒸発濃縮した。濃縮物にピリジンを加え濃
縮することを２度繰り返した後、残った濃縮物をピリジ
ン１０mlに溶解し、ＤＭＴＣｌを０．５g 加えて、室温
で４０時間撹拌した。反応混合物をＨ₂ Ｏに注加し、Ｃ
Ｈ₂ Ｃｌ₂ で抽出した。抽出液を蒸発濃縮して、濃縮物
をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル
／メタノール９：１）、化合物（Ａ３６）：

【化７２】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 3.09 (s, NMe); 3.72 (s, OC
H₃); 6.08 [d, J=6 Hz,H-C(1')]; 7.98 及び 8.43 [eac
h s, H-C(2) 及び H-C(8)]. FAB MS: 709 (M+H).

【００９７】実施例Ａ３７ＣＨ₂ Ｃｌ₂ ６mlに溶解した実施例Ａ３６で得られたト
リチル誘導体０．６３g の溶液を、ＣＨ₂ Ｃｌ₂ ６mlに
溶解したシアノエチルテトライソプロピルホスホラスジ
アミダイト０．３８g とジイソプロピルアンモニウムテ
トラゾリド０．２４g の溶液に加え、反応混合物を４０
時間撹拌した後、ＮａＨＣＯ₃ 飽和水溶液中に注加し、
ＣＨ₂ Ｃｌ₂ で抽出した。抽出液を蒸発濃縮して、濃縮
物をクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル＋１％ＮＥ
ｔ₃ ）、化合物（Ａ３７）：

【化７３】を得た。³¹ P-NMR (250 MHz, CDCl₃): 149.8及び150.4. FAB-MS: 909 (M+H).

【００９８】実施例Ａ３８ＴＨＦ７０mlに溶解した実施例Ａ２３で得られたエポキ
シド７．１g の溶液に、ＮａＢＨ₄ ０．４３g を加え、
反応混合物を室温で撹拌し、ＢＦ₃ ・ＯＥｔ₂０．５g
を加えた。合計で２６時間撹拌した後、反応混合物を水
中に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮
して化合物（Ａ３８）：

【化７４】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.16 (d, J=7.5 Hz, CH₃); 1.6
1 (s, CH₃); 5.48 (AB, CH₂); 5.92 [d, J=1 Hz, H-C
(1')]; 7.69 [s, H-C(6)]. FAB-MS: 787 (M+Cl)^-.

【００９９】実施例Ａ３９実施例Ａ３８で得られたアルコール６．９g を、ＴＨＦ
７０ml中、ＮａＨ（１００％）１．５６g とＭｅＩ１．
５６g でメチル化した（６０℃、５時間）。常法により
後処理して化合物（Ａ３９）：

【化７５】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.13 (d, J=7.5 Hz, CH₃); 1.6
0 (s, CH₃); 3.33 (s, OCH₃); 5.49 (AB, CH₂); 5.95
[d, J=2 Hz, H-C(1')]; 7.64 [s, H-C(6)]. MS (DCI): 766 (M^-).

【０１００】実施例Ａ４０実施例Ａ４で得られた誘導体１４．４g を、ＴＨＦ１５
０ml中、ＮａＨ（１００％）０．６５g を加えて３０分
間、６０℃で加熱した。反応混合物を２５℃に冷却し、
Ｄ−α，β−イソプロピリデングリセロール−γ−トシ
ラート５．９２g を加えた。１．５時間後、反応混合物
を、６０℃で、さらに３時間撹拌した。反応混合物を冷
却し、水中に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を
蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィー
に付し（トルエン／酢酸エチル４：１）、化合物（Ａ４
０）：

【化７６】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.34 及び 1.41 (each s, each
CH₃); 1.58 (s, CH₃); 5.48 (AB, CH₂); 5.92 [d, J=
1.5 Hz, H-C(1')]; 7.68 [s, H-C(6)]. MS (DCI): 843 (M+Cl)^-.

【０１０１】実施例Ａ４１アセトニトリル５０mlに溶解した実施例Ａ１３で得られ
たホスホラスアミダイト３．１３g の溶液に、ＮＥｔ₃
９．４ml及び１，２，４−トリアゾール６．１７g を加
えた。撹拌下、温度が３０℃を越えないようにしなが
ら、ＰＯＣｌ₃ １．５３g を滴下した。反応混合物を、
室温で、更に４時間撹拌してから、１ＮＮａＨＣＯ₃ 水
溶液（１５０ml）に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽
出液を蒸発濃縮して、濃縮物を少量のＣＨ₂ Ｃｌ₂ に溶
解し、ｎ−ペンタン１００mlと混合し撹拌した。化合物
（Ａ４１）：

【化７７】を沈殿物として得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 6.02及び6.06 [各々 d, J=
1.5 Hz, H-C(1')]; 8.44及び8.47 [各々 s, H-C(6)];
8.07 及び 9.35 (each s, triazole H).³¹ P-NMR (250 MHz, CDCl₃): 149.433及び150.253. MS (DCI): 869 (M^-).

【０１０２】実施例Ａ４２Ｎ² −イソブチリル−Ｏ⁶ −ベンジルグアニン〔Jenny,
T. F., Schneider, K. C., Benner, S. A., Nucleosid
es and Nucleotides 11:1257-1261(1992) の方法に準じ
て合成〕８．８８g とＮ，Ｏ−ビス（トリメチルシリ
ル）アセトアミド３４．８g をトルエン１３０mlに懸濁
し、溶液になるまで１００℃に加熱した。この溶液に、
５０℃で、実施例Ａ３で得られたリボース誘導体１３．
０g 及びトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリ
ルエステル６．３３g を加えた。無色の溶液を１００℃
で４時間撹拌し、冷却して、次いでＮａＨＣＯ₃ 飽和水
溶液２００mlに注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液
をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、蒸発濃縮した。濃縮物をシリカ
ゲル１．２kgのクロマトグラフィーに付し（トルエン／
酢酸エチル４：１）、化合物（Ａ４２）：

【化７８】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.26 (d, J=7.5 Hz, CH₃);
2.23 (s, OAc); 5.61(AB, OCH₂); 5.78 [dd, H-C(2')];
6.19 [d, J=3 Hz, H-C(1')]; 7.83 (s, NH); 8.00 [s,
H-C(8)]. MS (DCI): 801 (M^-).

【０１０３】実施例Ａ４３メタノール８０mlに溶解した実施例Ａ４２で得られた生
成物７．４g の溶液に、３０％ＮａＯＭｅ／メタノール
溶液０．８３g を加え、室温で３０分撹拌した。反応溶
液をＨ₂ Ｏに注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を
ＭｇＳＯ₄ で乾燥し、蒸発濃縮して化合物（Ａ４３）：

【化７９】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 1.29 (d, J=7.5 Hz, CH₃); 5.6
1 (AB, OCH₂); 5.99[d, J=6 Hz, H-C(1')]; 7.97 (s, N
H); 8.04 [s, H-C(8)]. MS (DCI): 760 (M+H)⁺.

【０１０４】実施例Ａ４４ＮａＨ（１００％）６３０mgを、ＴＨＦ１００mlに溶解
した実施例Ａ４３で得られた化合物９．０g の溶液に加
え、反応混合物を１５分間撹拌した。次いで、２−ブロ
モエチルメチルエーテル１．９７g を、反応混合物に添
加した。２５時間後、更に臭化物２．０g を加えた。反
応混合物を合計で４８時間撹拌してから、水中に注加
し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮
物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（トルエン
／酢酸エチル４：１）、化合物（Ａ４４）：

【化８０】を得た。 NMR (250 MHz, CDCl₃): 3.28 (s, OCH₃); 5.56 (AB, OC
H₂); 6.10 [d, J=5 Hz, H-C(1')]; 7.90 [s, H-C(8)]. FAB-MS: 748 (M+H)⁺.

【０１０５】実施例Ａ４５化合物（Ａ３）を原料として、各種の塩基を導入した。
第２表に生成物を示す。

【０１０６】

【表８】

【０１０７】

【表９】

【０１０８】

【表１０】

【０１０９】実施例Ｂオリゴヌクレオチドの製造オリゴヌクレオチドを、本発明のジメトキシトリチル
化、３’−活性化〔３’−（β−シアノエトキシ−ジ
（イソプロピルアミノ）ホスホラスアミダイト）〕ヌク
レオシド、又は同様に活性化された天然のヌクレオシド
を用いて、固体担体（制御ポアグラス、ＣＰＧ）に結合
させ、合成は、製造業者の標準プロトコール〔"Oligonu
cleotide synthesis, a practical approach" M. J. Ga
it; IRL Press 1984 (Oxford-Washington DC) 参照〕に
準拠して、ＤＮＡシンセサイザー（Applied Biosystem
s, Model 380 B, standard phosphorus amidite chemis
try andiodoxidation ）により行なった。最終のヌクレ
オシド基礎単位をカップリングした後、濃アンモニア水
溶液で一夜処理することによって、すべてのその他の保
護基を同時に除去し、５’位が保護されたオリゴヌクレ
オチドを担体から離し、次いで、５０mM酢酸アンモニウ
ム緩衝液（pH７）／アセトニトリルを用いて逆相ＨＰＬ
Ｃによって精製した。８０％酢酸水溶液で２０分間処理
して、５’−ジメトキシトリチル保護基を除去し、エタ
ノールでオリゴヌクレオチドを沈殿させ、遠心分離によ
って単離した。オリゴヌクレオチドの純度は、ゲル電気
泳動（ポリアクリルアミド）で測定し、マトリックスア
シストレーザー脱離飛行時間質量分析法（ＭＡＬＤＩ−
ＴＯＦＭＳ）によって同定した。

【０１１０】実施例Ｃ１親和性；オリゴヌクレオチド（アンチセンス）と相補性
オリゴリボヌクレオチド配列（センス）との相互反応オリゴヌクレオチドと、天然のリボヌクレオチドの相当
する塩基相補性オリゴマーとの相互反応は、ＵＶ融解曲
線を記録して特徴付け、この曲線からＴ_m 値を決定し
た。その標準法は、例えばMarky, L. A., Breslauer,
K. J., Biopolymers 26:1601-1620(1987)に記載されて
いる。

【０１１１】１０mMリン酸緩衝液、１００mMＮａＣｌ溶
液、０．１mMＥＤＴＡ溶液（pH＝７．０）中におけるオ
リゴヌクレオチド及び相当する塩基相補性天然オリゴリ
ボヌクレオチド溶液（ｃ＝４ｘ１０^-6Ｍ／オリゴヌクレ
オチド）を調製し、２６０nmにおける吸光度の変化を、
温度（１５乃至９５℃）の関数として記録した。融解曲
線から、Ｔ_m 値を算出した（第３表）。

【０１１２】

【表１１】

【０１１３】

【表１２】

【０１１４】

【表１３】

【０１１５】

【表１４】

【０１１６】

【表１５】

【０１１７】実施例Ｃ２特異性；オリゴヌクレオチドと、誤ったヌクレオシド
（Ｙ）が組み込まれている塩基相補性オリゴリボヌクレ
オチドとの相互反応１０mMリン酸緩衝液、１００mMＮａＣｌ溶液、０．１mM
ＥＤＴＡ溶液（pH＝７．０）中のオリゴヌクレオチド
は、配列：ｒ（ＧＧＡＣＣＧＧＡＡＹＧＧＴＡＣ
ＧＡＧ）を有する相当する塩基相補性オリゴリボヌク
レオチドを加えて調製し（ｃ＝４ｘ１０^- ６Ｍ／オリゴ
ヌクレオチド）、２６０nmにおける吸光度の変化を、温
度（１５℃乃至９５℃）の関数として記録した。この曲
線からＴ_m値を算出した。結果を第４表に示す。

【０１１８】

【表１６】

【０１１９】実施例Ｃ３ヌクレアーゼ安定性；配列：ｄ（ＴＣＣＡＧＧＴＧ
ＴＣＣＧｔｔｔＣ）を有する各種のオリゴヌクレ
オチドの酵素的加水分解合成オリゴヌクレオチド１４μg 及び相当する天然オリ
ゴマー１４μg を、ウシ胎児の１０％熱不活性化血清２
００μl （ｃ＝７０μg/ml）中、３７℃で培養した。
０．５、１、２、４、６、２４及び４８時間後、反応溶
液１５μl に、９Ｍ尿素及びトリスボレート緩衝液（pH
７）の２５μl を加えて反応を停止し、測定するまで−
２０℃で保存した。停止させた反応溶液を、ポリアクリ
ルアミドゲル電気泳動法によって分離し、開裂した生成
物をリン含量（リン画像法）によって決定した。時間ｔ
＝０において十分に完全なオリゴヌクレオチドの初期濃
度（ｃ_n ⁽⁰⁾ ）に対する、与えられた時間ｔにおける十
分に完全なオリゴヌクレオチド濃度（ｃ_n ^(t) ）及び
３’末端から天然のＣ基礎単位の除去によって形成され
たフラグメント濃度（ｃ_n-1 ^(t)）の和の比Ｒ、すなわち
Ｒ＝（ｃ_n ^(t) ＋ｃ_n _-1 ^(t) ）／ｃ_n ⁽⁰⁾を、時間に対し
てグラフにプロットした。測定された半減期τ_1/ ₂ 、す
なわちＲ＝０．５となる時間を、以下に示す：

【０１２０】

【化８１】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ０７Ｈ 19/20 19/23 21/02 Ｃ１２Ｑ 1/68 Ａ 9453−4ＢＧ０１Ｎ 33/50 Ｔ 7055−2Ｊ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（Ｉ）：【化１】〔式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各々互いに独立して、水素又
は保護基であるか、又は、Ｒ₁ はこれらの意義を有し、
Ｒ₂ はリンを含むヌクレオチド架橋基を形成する基であ
り；Ｂは、プリン又はピリミジン基、又はそれらの類似
体の基であり；そしてＲ₃ は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又
は（Ｉｃ）：【化２】（式中、Ｒ₄ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₂₁アルキル、Ｃ₂ −Ｃ
₂₁アルケニル、Ｃ₂ −Ｃ₂₁アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）
−アルキル；Ｒ₅ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₀アルキル、−Ｃ
Ｈ₂ −Ｏ−Ｒ₆ 又は式（Ｉｂ）の基；Ｒ₆ は、水素、Ｃ
₁ −Ｃ₂₂アルキル、Ｃ₃ −Ｃ₂₁アルケニル、又は部分的
に若しくは完全にフッ素置換されたＣ₁ −Ｃ₁₀アルキル
又は−〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m−Ｒ₇ ；Ｒ₇ は、水素又
はＣ₁ −Ｃ₂₁アルキル；Ｚは、−（ＣＨ₂ ）_p −又は−
（ＣＨ₂ −ＣＨ₂ −Ｏ）_q −ＣＨ₂ ＣＨ₂ −であり、−
ＣＨ₂ −の場合のＺは、非置換又はＣ₁ −Ｃ₁₀アルキ
ル、Ｃ₅ −Ｃ₆ シクロアルキル及び非置換又はＣ₁ −Ｃ
₄ アルキル置換フェニルから選ばれる一つ以上の同一又
は異なる置換基によって置換されてもよい；ｎは、１乃
至１２の数；ｍは、１乃至４の数；ｐは、１乃至１０の
数であり；そしてｑは、１乃至４の数である、但し、ｎ
＝１及びＲ₅ ＝水素の場合、Ｒ₄ は水素ではない）の基
である〕で示される化合物。
【請求項２】Ｒ₁ 及びＲ₂ の各々が、水素である請求
項１記載の化合物。
【請求項３】Ｒ₁ 及びＲ₂ が、同一の保護基である請
求項１記載の化合物。
【請求項４】プリン基又はその類似体の基としてのＢ
が、式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、（II
ｄ）、（IIｅ）又は（IIｆ）：【化３】（式中、Ｒ_b1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ₁
−Ｃ₁₂アルキル；Ｒ_b2、Ｒ_b3及びＲ_b5は、各々互いに独
立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯ
Ｈ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ
₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロアルキ
ル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロキシ
−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、
Ｃ₁−Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −Ｃ₁₂
アルキルチオを示し、このヒドロキシ及びアミノ基は、
非置換又は保護基で置換される；或いはフェニル、ベン
ジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ若しくは炭素数
２乃至３０の第二級アミノ；Ｒ_b4は、水素、ＣＮ又は−
Ｃ≡Ｃ−Ｒ_b7であり；そしてＲ_b6及びＲ_b7は、水素又は
Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルである）で示される基である請求項
１記載の化合物。
【請求項５】ヒドロキシ及びアミノ基の保護基が、Ｃ
₁ −Ｃ₈ アシルである請求項４記載の化合物。
【請求項６】第一級アミノが、１乃至１２の炭素原子
を有し、第二級アミノが、２乃至１２の炭素原子を有す
る請求項４記載の化合物。
【請求項７】第一級アミノ及び第二級アミノが、式：
Ｒ_a1Ｒ_a2Ｎ〔式中、Ｒ_a1は、水素又は、独立して、Ｒ_a2
の定義を有し、Ｒ_a2は、Ｃ₁ −Ｃ₂₀アルキル、Ｃ₁ −Ｃ
₂₀アミノアルキル又はＣ₁ −Ｃ₂₀ヒドロキシアルキル；
カルボキシアルキル又はカルバルコキシアルキル（この
カルバルコキシ基は、２乃至８の炭素原子を有し、アル
キル基は、１乃至６、好適には１乃至４の炭素原子を有
する）；Ｃ₂ −Ｃ₂₀−アルケニル；フェニル、モノ−又
はジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキ
シ）フェニル、ベンジル、モノ−又はジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄
アルキル又はＣ₁ −Ｃ₄ アルコキシ）ベンジル；又は
１，２−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−Ｃ
₁ −Ｃ₆ アルキル、或いはＲ_a1及びＲ_a2は、一緒になっ
て、テトラ−又はペンタ−メチレン、３−オキサ−１，
５−ペンチレン、−ＣＨ₂ −ＮＲ_a3−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −又
は−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −ＮＲ_a3−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −（式中、Ｒ
_a3は、水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルである）であり、ア
ミノアルキルのアミノ基は、非置換又は一又は二個のＣ
₁ −Ｃ₄ アルキル若しくはＣ₁ −Ｃ₄ ヒドロキシアルキ
ル基で置換されており、ヒドロキシアルキルのヒドロキ
シ基は、非置換又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルでエーテル化さ
れている〕で示される基である請求項４記載の化合物。
【請求項８】第一級アミノ及び第二級アミノが、メチ
ル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、アリル−、
モノ−又はジ−（ヒドロキシエタ−２−イル）−、フェ
ニル−及びベンジル−、アセチル−、イソブチリル−及
びベンゾイル−アミノである請求項６記載の化合物。
【請求項９】式（II）、（IIｂ）、（IIｃ）、（II
ｄ）及び（IIｅ）におけるＲ_b1が、水素である請求項４
記載の化合物。
【請求項１０】式（IIｄ）におけるＲ_b5が、水素であ
る請求項４記載の化合物。
【請求項１１】式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（II
ｃ）、（IIｄ）及び（IIｆ）におけるＲ_b2及びＲ_b3が、
各々互いに独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、Ｓ
Ｈ、ＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、ＮＨＮＨ₂ 、メチルアミノ、ジ
メチルアミノ、ベンゾイルアミノ、イソブチルアミノ、
メトキシ、エトキシ及びメチルチオである請求項４記載
の化合物。
【請求項１２】Ｂが、プリン基又はアデニン系からの
プリン類似体の基、Ｎ−メチルアデニン、Ｎ−ベンゾイ
ルアデニン、２−メチルチオアデニン、２−アミノアデ
ニン、６−ヒドロキシプリン、２−アミノ−６−クロロ
プリン、２−アミノ−６−メチルチオプリン、グアニン
及びＮ−イソブチリルグアニンである請求項４記載の化
合物。
【請求項１３】式（Ｉ）におけるＢが、ピリミジン基
として、式（III ）、（III ａ）、（III ｂ）又は（II
I ｃ）：【化４】〔式中、Ｒ_b6は、水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルであり、
Ｒ_b8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯ
Ｈ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ
₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロアルキ
ル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロキシ
−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、
Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −Ｃ₁₂
アルキルチオであり（このヒドロキシ及びアミノ基は、
非置換又は保護基で置換される）、或いはフェニル、ベ
ンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ、炭素数２乃
至３０の第二級アミノ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルケニル又はＣ₁
−Ｃ₁₂アルキニルであり、式（III ｂ）におけるＮＨ₂
は、非置換又はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、ベンゾイル若しく
は保護基によって置換される〕で示されるウラシル、チ
ミン又はシトシンの基、並びに式（III ）、（III
ａ）、（III ｂ）及び（III ｃ）の基のジヒドロ誘導体
である請求項１記載の化合物。
【請求項１４】Ｒ_b8が、水素、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル又
はＣ₁ −Ｃ₆ ヒドロキシアルキル、Ｃ₂ −Ｃ₆ アルケニ
ル又はＣ₂ −Ｃ₆ アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ
₂ 、ベンゾイルアミノ又はモノ−若しくはジ−Ｃ₁ −Ｃ
₆ アルキルアミノである請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】Ｒ_b8が、水素、Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキル又
はＣ₁ −Ｃ₆ アルコキシ又はＣ₁ −Ｃ₆ ヒドロキシアル
キル、Ｃ₂ −Ｃ₆ アルケニル又はＣ₂ −Ｃ₆アルキニ
ル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ₂ 、ベンゾイルアミノ又はモ
ノ−若しくはジ−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノである請求
項１３記載の化合物。
【請求項１６】Ｒ_b8が、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ
₂ 、ＮＨＣＨ₃ 、Ｎ（ＣＨ₃ ）₂ 、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキ
ル、Ｃ₂ −Ｃ₄ アルケニル又はＣ₂ −Ｃ₄ アルキン−１
−イルである請求項１４記載の化合物。
【請求項１７】Ｒ_b8が、水素、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル、
Ｃ₂ −Ｃ₄ アルケニル、Ｃ₂ −Ｃ₄ アルキン−１−イ
ル、ＮＨ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 、又は（ＣＨ₃ ）₂ Ｎである請
求項１５記載の化合物。
【請求項１８】ピリミジン類似体の基としてのＢが、
ウラシル、チミン、シトシン、５−フルオロウラシル、
５−クロロウラシル、５−ブロモウラシル、ジヒドロウ
ラシル、５−メチルシトシン、５−プロピンチミン及び
５−プロピンシトシンから誘導される請求項１記載の化
合物。
【請求項１９】リンを含むヌクレオチド架橋基形成基
としてのＲ₂ が、式（Ｐ１）又は（Ｐ２）：【化５】（式中、Ｙ_a は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、Ｃ₆ −Ｃ
₁₂アリール、Ｃ₇ −Ｃ₂₀アラルキル、Ｃ₇ −Ｃ₂₀アルカ
リ−ル、−ＯＲ_b 、−ＳＲ_b 、−ＮＨ₂ 、第一級アミ
ノ、第二級アミノ、Ｏ^- Ｍ⁺ 又はＳ^- Ｍ⁺ ；Ｘ_a は、酸
素又は硫黄；Ｒ_a は、水素、Ｍ⁺ 、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキ
ル、Ｃ₂ −Ｃ₁₂アルケニル、又はＣ₆ −Ｃ₁₂アリール、
或いはＲ_a Ｏ−基は、５員環で１乃至３の窒素原子を有
するＮ−ヘテロアリール−Ｎ−イル；Ｒ_b は、水素、Ｃ
₁ −Ｃ₁₂アルキル又はＣ₆ −Ｃ₁₂アリールであり；そし
てＭ⁺ は、Ｎａ⁺ 、Ｋ⁺ 、Ｌｉ⁺ 、ＮＨ₄ ⁺ 又は第一
級、第二級、第三級若しくは第四級アンモニウムであ
り；Ｙ_a 、Ｒ_a 及びＲ_b におけるアルキル、アリール、
アラルキル及びアルカリールは、非置換又はアルコキ
シ、アルキルチオ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ₂ 、フェ
ニル、ニトロフェニル若しくはハロフェニルで置換され
る）に該当する請求項１記載の化合物。
【請求項２０】Ｒ_a がβ−シアノエチルであり、Ｙ_a
がジ（イソプロピル）アミノである請求項１９記載の化
合物。
【請求項２１】Ｒ₃ が式（Ｉａ）の基である請求項１
記載の化合物。
【請求項２２】ｎが１乃至８の数である請求項２１記
載の化合物。
【請求項２３】ｎが１乃至６の数である請求項２２記
載の化合物。
【請求項２４】Ｒ₄ が、水素、Ｃ₁ −Ｃ₂₁アルキル、
Ｃ₂ −Ｃ₂₁アルケニル又はＣ₂ −Ｃ₂₁アルキニルである
請求項２１記載の化合物。
【請求項２５】Ｒ₄ が、水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキル
である請求項２４記載の化合物。
【請求項２６】Ｒ₅ が、水素、Ｃ₁ −Ｃ₅ アルキル又
は−ＣＨ₂ −ＯＨ、−ＣＨ₂ −Ｏ−Ｃ₁ −Ｃ₂₂アルキル
又は−ＣＨ₂ −Ｏ〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m −Ｃ₁ −Ｃ₁₀
アルキル（式中、ｍは１乃至４の数である）である請求
項２１記載の化合物。
【請求項２７】Ｒ₅ が、水素、メチル又は−ＣＨ₂ −
ＯＨ、−ＣＨ₂ −Ｏ−Ｃ₁ −Ｃ₂₂アルキル又は−ＣＨ₂
−Ｏ〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m −Ｃ₁ −Ｃ₁₀アルキル（式
中、ｍは１乃至４の数である）である請求項２６記載の
化合物。
【請求項２８】Ｒ₃ が式（Ｉｂ）の基である請求項１
記載の化合物。
【請求項２９】Ｚが、−ＣＨ₂ −又は置換した−ＣＨ
₂ −である請求項２８記載の化合物。
【請求項３０】Ｒ₃ が式（Ｉｃ）の基である請求項１
記載の化合物。
【請求項３１】式（Ｉ）：【化６】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各々互いに独立して、水素又
は保護基、又はＲ₁ はこれらの定義を有し、Ｒ₂ はリン
を含むヌクレオチド架橋基を形成する基であり；Ｂは、
プリン又はピリミジン基、又はその類似体の基である）
で示される化合物の製造法であって；（ａ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）：【化７】（式中、Ｒ₄ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₂₁アルキル、Ｃ₂ −Ｃ
₂₁アルケニル、Ｃ₂ −Ｃ₂₁アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）
アルキル；Ｒ₅ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₀アルキル、−ＣＨ
₂ −Ｏ−Ｒ₆ 又は式（Ｉｂ）の基；Ｒ₆ は、水素、Ｃ₁
−Ｃ₂₂アルキル、Ｃ₃ −Ｃ₂₁アルケニル、又は部分的に
若しくは完全にフッ素置換されたＣ₁ −Ｃ₁₀アルキル若
しくは−〔（ＣＨ₂ ）₂ 〕_m−Ｒ₇ ；Ｒ₇ は、水素又は
Ｃ₁ −Ｃ₂₁アルキル；ｎは、１乃至１２の数であり；そ
してｍは、１乃至４の数である、但しｎ＝１及びＲ₅ ＝
水素の場合、Ｒ₄ は水素でない）で示される基である場
合、その製造法は、式（IVａ）：【化８】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は、同一又は異なる保護基であ
り、Ｂは、プリン若しくはピリミジン基、又はその類似
体の基であり、この塩基基Ｂ中の官能基は保護基で保護
されている）の化合物を、不活性溶媒中、式（Ａ）：【化９】（式中、Ｒ₄ 、Ｒ₅ 及びｎは、上記と同義であり、Ｘ
は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏであ
る）で示される化合物と反応させることよりなり；（ｂ）Ｒ₃ が、式（Ｉｃ）：【化１０】で示される基である場合、その製造法は、式（IVａ）で
示される化合物を、不活性溶媒中、式（Ｂ）：【化１１】（式中、Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル
−Ｏである）で示される化合物と反応させることよりな
り；（ｃ）Ｒ₃ が、式（Ｉｂ）：【化１２】（式中、Ｒ₅ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₀アルキル、−ＣＨ₂
−Ｏ−Ｒ₆ 又は式（Ｉｂ）の基；Ｒ₆ は、水素、Ｃ₁ −
Ｃ₂₂アルキル、Ｃ₃ −Ｃ₂₁アルケニル、又は部分的に又
は完全にフッ素置換されたＣ₁ −Ｃ₁₀アルキル若しくは
−〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m−Ｒ₇ ；Ｒ₇ は、水素又はＣ₁
−Ｃ₂₁アルキル；Ｚは、−（ＣＨ₂ ）_p −又は−（Ｃ
Ｈ₂ −ＣＨ₂ −Ｏ）_q −ＣＨ₂ ＣＨ₂ −であり、−ＣＨ
₂ −の場合のＺは、非置換又はＣ₁ −Ｃ₁₀アルキル、Ｃ
₅ −Ｃ₆ シクロアルキル及び非置換又はＣ₁ −Ｃ₄ アル
キル置換フェニルから選ばれる一つ以上の同一又は異な
る置換基で置換されてもよい；ｍは、１乃至４の数；ｐ
は、１乃至１０の数であり；そしてｑは、１乃至４の数
である）で示される基である場合、その製造法は、
（ｂ）で得られたエポキシドを、Ｈ₂ Ｏ及びＢＦ₃ の存
在下に開環し、それを、式：Ｘ’−（ＣＨ₂ ）_q −Ｘ’
又はＸ’−（ＣＨ₂ −ＣＨ₂ −Ｏ）_r −Ｘ’（式中、
Ｘ’は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏで
ある）の化合物で閉環して新しい環を形成することより
なり：（ｄ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）で示される基である場合、そ
の製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、Ｒ₆ ＯＨ
及びＢＦ₃ の存在下に反応させ、適当な場合には、遊離
の水酸基をエーテル又はエステルに変換することよりな
り；（ｅ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）で示される基である場合、そ
の製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、ＢＦ₃ 及
び、例えばＮａＢＨ₄ の存在下に水素化し、適当な場合
には、遊離の水酸基をエーテル又はエステルに変換する
ことよりなり；（ｆ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）で示される基である場合、そ
の製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、適切なグ
リニャ−ル試薬と反応させ、適当な場合には、遊離の水
酸基をエーテル又はエステルに変換することよりなり；
又は（ｇ）Ｒ₃ が、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）で示
される基である場合、その製造法は、（ａ）乃至（ｆ）
に記載した方法の一つによって、式（IVｂ）：【化１３】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は、上記と同義であり、Ａは離脱
基である）で示される化合物を２’−ＯＨ基において置
換し、塩基Ｂを置換によって導入し；適当な場合には、
保護基Ｒ₁₄及びＲ₁₅を除去して、リンを含むヌクレオチ
ド架橋基を形成する基を導入することよりなる。
【請求項３２】式（Ｉ）で示される化合物の同一又は
異なるモノマー単位を含むが他の天然又は合成ヌクレオ
シドのモノマー単位と一緒に、式（Ｉ）で示される少な
くとも一個のモノマー単位を含むオリゴヌクレオチド
で、２乃至２００のモノマー単位よりなるオリゴヌクレ
オチドの製造における請求項１に記載の化合物の用途。
【請求項３３】２乃至１００のモノマー単位を有する
オリゴヌクレオチドの製造における請求項３２記載の用
途。
【請求項３４】２乃至５０のモノマー単位を有するオ
リゴヌクレオチドの製造における請求項３３記載の用
途。
【請求項３５】４乃至３０のモノマー単位を有するオ
リゴヌクレオチドの製造における請求項３４記載の用
途。
【請求項３６】式（Ｉ）の化合物の同一又は異なるモ
ノマー単位を有するオリゴヌクレオチドの製造における
請求項３２記載の用途。
【請求項３７】式（Ｉ）の化合物の同一モノマー単位
及び天然又は合成ヌクレオシドのモノマー単位を有する
オリゴヌクレオチドの製法における請求項３２記載の用
途。
【請求項３８】式（Ｖ）：【化１４】｛式中、ｘは、０乃至２００の数であり、Ｙはヌクレオ
チド架橋基；Ｕ、Ｖ及びＷは、各々独立して、天然又は
合成ヌクレオシドの同一又は異なる基を示し、Ｕ、Ｖ及
び／又はＷの少なくとも一個は、式（VI）：【化１５】〔式中、Ｂは、プリン又はピリミジン基、又はそれらの
類似体の基であり；そしてＲ₃ は、式（Ｉａ）、（Ｉ
ｂ）又は（Ｉｃ）：【化１６】（式中、Ｒ₄ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₂₁アルキル、Ｃ₂ −Ｃ
₂₁アルケニル、Ｃ₂ −Ｃ₂₁アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）
アルキル；Ｒ₅ は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₀アルキル、−ＣＨ
₂ −Ｏ−Ｒ₆ 又は式（Ｉｂ）の基；Ｒ₆ は、水素、Ｃ₁
−Ｃ₂₂アルキル、Ｃ₃ −Ｃ₂₁アルケニル、又は部分的に
若しくは完全にフッ素置換されたＣ₁ −Ｃ₁₀アルキル若
しくは−〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m −Ｒ₇ ；Ｒ₇ は、水素
又はＣ₁ −Ｃ₂₁アルキル；Ｚは、−（ＣＨ₂ ）_p −又は
−（ＣＨ₂ −ＣＨ₂ −Ｏ）_q −ＣＨ₂ ＣＨ₂ −であり、
−ＣＨ₂ −の場合のＺは、非置換、又はＣ₁ −Ｃ₁₀アル
キル、Ｃ₅ −Ｃ₆ シクロアルキル及び非置換若しくはＣ
₁ −Ｃ₄ アルキル置換フェニルから選ばれる一個以上の
同一又は異なる置換基で置換されてもよい；ｎは、１乃
至１２の数；ｍは、１乃至４の数；ｐは、１乃至１０の
数であり；そしてｑは、１乃至４の数である）に示され
た基である〕に示された基である｝に示されたオリゴヌ
クレオチド。
【請求項３９】架橋基Ｙが、−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −、−Ｐ
（Ｏ）Ｓ^- −、−Ｐ（Ｓ）^s-−、−Ｐ（Ｏ）Ｒ₁₆−、−
Ｐ（Ｏ）ＮＲ₁₇Ｒ₁₈−又は−ＣＨ₂ −（式中、Ｒ₁₆は、
水素又はＣ₁ −Ｃ₆ アルキルであり、Ｒ₁₇及びＲ₁₈は、
各々互いに独立して、Ｒ₁₆の意義を有する）である請求
項３８記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４０】架橋基Ｙが、−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −である
請求項３８記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４１】ｘが、０乃至１００の数である請求項
３８記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４２】ｘが、０乃至５０の数である請求項４
１記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４３】ｘが、３乃至２９の数である請求項４
２記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４４】式（VI）の基が、末端及び／又はヌク
レオチド配列に結合されている請求項３８記載のオリゴ
ヌクレオチド。
【請求項４５】式（VI）の基が、天然又は合成ヌクレ
オシド基の間に結合されている請求項３８記載のオリゴ
ヌクレオチド。
【請求項４６】式（VI）の２乃至５個の同一又は異な
る基が、互いに続いている、請求項４４及び４５に記載
のオリゴヌクレオチド。
【請求項４７】全体が、４乃至３０のヌクレオシド単
位及び式（VI）の１乃至１２の基よりなる請求項３８記
載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４８】プリン基として又はその類似体の基と
してのＢが、式（II）（IIａ）（IIｂ）（IIｃ）（II
ｄ）（IIｅ）又は（IIｆ）：【化１７】〔式中、Ｒ_b1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ₁
−Ｃ₁₂アルキル；Ｒ_b2、Ｒｂ₃ 及びＲ_b5は、各々互いに
独立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨ
ＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ
（Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロア
ルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロ
キシ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキ
ル、Ｃ ₁ −Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −
Ｃ₁₂アルキルチオを示し、このヒドロキシ及びアミノ基
は、非置換又は保護基で置換される；或いはフェニル、
ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ又は炭素数
２乃至３０の第二級アミノ；Ｒ_b4は、水素、ＣＮ又は−
Ｃ≡Ｃ−Ｒ_b7であり；そしてＲ_b6及びＲ_b7は、水素又は
Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルである〕で示される基である請求項
３８記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４９】Ｂが、式（III ）、（III ａ）、（II
I ｂ）又は（III ｃ）：【化１８】〔式中、Ｒ_b6は、水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルであり、
Ｒ_b8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯ
Ｈ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ
₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロアルキ
ル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロキシ
−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、
Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −Ｃ₁₂
アルキルチオであり（このヒドロキシ及びアミノ基は、
非置換又は保護基で置換される）、或いはフェニル、ベ
ンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ、炭素数２乃
至３０の第二級アミノ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルケニル又はＣ₁
−Ｃ₁₂アルキニル、そして式（III ｂ）におけるＮＨ₂
基は、非置換又はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、ベンゾイル若し
くは保護基によって置換される〕で示されるウラシル、
チミン又はシトシンの基、又は式（III ）、（III
ａ）、（III ｂ）又は（III ｃ）の基のジヒドロ誘導体
である請求項３８記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５０】Ｒ₃ が式（Ｉａ）の基である請求項３
８記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５１】ｎが１乃至８の数である請求項５０記
載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５２】ｎが１乃至６の数である請求項５１記
載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５３】Ｒ₄ が、水素、Ｃ₁ −Ｃ₂₁アルキル、
Ｃ₂ −Ｃ₂₁アルケニル又はＣ₂ −Ｃ₂₁アルキニルである
請求項５０記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５４】Ｒ₄ が、水素又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキル
である請求項５３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５５】Ｒ₅ が、水素、Ｃ₁ −Ｃ₅ アルキル又
は−ＣＨ₂ −ＯＨ、−ＣＨ₂ −Ｏ−Ｃ₁ −Ｃ₂₂アルキル
又は−ＣＨ₂ −Ｏ−〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m−Ｃ₁ −Ｃ
₁₀アルキル（式中、ｍは、１乃至４の数である）である
請求項５０記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５６】Ｒ₅ が、水素、メチル又は−ＣＨ₂ −
ＯＨ、−ＣＨ₂ −Ｏ−Ｃ₁ −Ｃ₂₂アルキル又は−ＣＨ₂
−Ｏ−〔（ＣＨ₂ ）₂ −Ｏ〕_m −Ｃ₁ −Ｃ₁₀アルキル
（式中、ｍは、１乃至４の数である）である請求項５５
記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５７】Ｒ₃ が式（Ｉｂ）の基である請求項３
８記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５８】Ｚが、−ＣＨ₂ −又は置換された−Ｃ
Ｈ₂ −である請求項５７記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５９】Ｒ₃ が式（Ｉｃ）の基である請求項３
８記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項６０】ウイルス感染症又は遺伝性疾患の検出
における診断薬としての式（Ｖ）のオリゴヌクレオチド
の用途。
【請求項６１】体内におけるヌクレオチド配列との相
互反応によって、ヒトを含む温血動物の疾患を治療す
る、治療法における用途のための式（Ｖ）のオリゴヌク
レオチド。
【請求項６２】式（Ｉ）のヌクレオシド若しくは式
（Ｖ）のオリゴヌクレオチド単独の有効量又はその他の
活性成分、薬剤担体及び、適当な場合には、賦形剤と一
緒に、その有効量を含む薬学組成物。