JPH07278091A - 抗血栓症剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 新規Ｌ−アルギニンアルデヒド誘導体および
その製法ならびにこれらの化合物を含む医薬的製剤を提
供する。 【構成】 式Ｉ： 【化１】 ［ここに、Ｒ¹、ＸおよびＹは明細書中と同義である］
で示される化合物はトロンビン阻害剤、凝固阻害剤およ
び血栓塞栓症剤として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は哺乳類における有用な
抗凝固剤であるトロンビン阻害剤に関する。殊に、高度
な抗凝固作用、抗血栓症作用およびトロンビン選択性を
持つＬ−アルギニンアルデヒド誘導体に関する。血液凝
固の過程にある血栓症はトロンビンの形成に至る複雑な
蛋白質分解的過程がトリガーする。トロンビンは、血漿
に可溶性であるフィブリノーゲンのＡα−鎖およびＢβ
−鎖から活性化ペプチドを蛋白質分解的に除去して不溶
性のフィブリン形成を開始する。

【０００２】

【従来の技術】抗凝固は現在ではヘパリン類とクマリン
類の投与により達成されている。凝固と血栓症の非経口
的薬理学的コントロールはヘパリン類の使用によるトロ
ンビンの阻害に基づいている。ヘパリンは内因性抗トロ
ンビンＩＩＩ（トロンビンの主たる生理学的阻害剤）の
阻害効果を促進することによって間接的にトロンビンに
作用する。抗トロンビンＩＩＩ濃度が血漿中で変化する
ためおよび表面−結合トロンビンがこの間接的機構に対
して抵抗性であると思われるため、ヘパリン類が無効な
処置になることもある。凝固検定は効果と安全性とに関
連すると信じられるので、凝固検定（殊に、活性化部分
トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）検定）ではヘパリ
ン濃度を監視しなければならない。クマリンはプロトロ
ンビンおよび他のこの型の蛋白質の合成における転写後
のガンマカルボキシル化を阻害することによってトロン
ビンの発生を妨害する。その作用機構のために、クマリ
ン類の効果は投与後６〜２４時間と、徐々にしか現れる
ことができない。さらに、これらは選択的抗凝固剤では
ない。クマリン類もまた凝固検定（殊にプロトロンビン
時間（ＰＴ）検定）で監視する必要がある。

【０００３】最近、天然基質と類似の様式で蛋白質分解
酵素によって認識される小さな合成ペプチドについて、
興味が持たれている。Ｂａｊｕｓｚなど、Ｊ．Ｍｅｄ．
Ｃｈｅｍ．、３３巻、１７２９〜１７３５頁（１９９０
年）はＤ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ、Ｂｏｃ−Ｄ−
Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＨおよびＤ−ＭｅＰｈｅ−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｈのようなトリペプチドアルデヒドに強
力で直接的なトロンビン阻害を証明した。多数の研究
者、例えば、Ｓｈｕｍａｎなど、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅ
ｍ．、３６巻、３１４〜３１９頁（１９９３年）ならび
に欧州特許出願公開第４７９４８９号および第５４２５
２５号、が医薬製剤を開発する努力において類似体を合
成した。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】ヘパリン類およびクマ
リン類は効果的な抗凝固剤であり、既知のトリペプチド
アルデヒドからの薬剤は現れておらず、この類の化合物
が継続して有望視されているにも関わらず、選択的にト
ロンビンに作用し、抗トロンビンＩＩＩに非依存的であ
り、投与直後に阻害作用を示し、さらに止血を維持する
ために必要な血餅の分解を阻害しない抗凝固剤への需要
が存在する。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は以下に定義する
本発明の化合物が強力で選択的なトロンビン阻害剤であ
るとの発見を指向するものである。従って、強力なトロ
ンビン阻害剤であり、抗凝固剤として有用な新規Ｌ−ア
ルギニンアルデヒド誘導体を提供することが本発明の第
一義的目的である。他の目的、特徴および利点は以下の
記載と請求項から当業者にとっては明白になるであろ
う。

【０００６】本発明は式：

【化３】 ［ここに、Ｒ¹は水素である。Ｘはプロリニルまたはア
ゼチジニル−２−カルボニルである。Ｙは：

【化４】 で示される基である。Ｚはヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アル
コキシまたは−ＮＨＲ²である。Ｒ²は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−
アルキル、シクロペンチル、シクロヘキシル、基−Ｃ
（Ｃ＝Ｏ）Ｒ⁵または−Ｓ（Ｏ）_n−Ｒ⁵である。Ｒ⁵はＣ
₁〜Ｃ₄−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₂−パーフルオロアルキル、
Ｃ₁〜Ｃ₄−アルコキシ、（Ｃ₁〜Ｃ₄−アルコキシ）−Ｃ
₁〜Ｃ₄−アルキル、シクロペンチル、シクロヘキシル、
アミノ、モノ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルアミノ、ジ（Ｃ₁〜
Ｃ₄）−アルキルアミノ、非置換または置換アリール
（ここにアリールはフェニルまたはナフチル、同一また
は相異なる、硫黄、酸素および窒素から選択されるヘテ
ロ原子１個または２個を持つ５員または６員の非置換ま
たは置換ヘテロ環、または同一または相異なる、硫黄、
酸素および窒素から選択されるヘテロ原子１個または２
個を持つ９員または１０員の非置換または置換縮合双環
ヘテロ環基を表す）である。ｎは１または２である。Ｒ
³はＣ₁〜Ｃ₄−アルキル、非置換または置換フェニルま
たは非置換または置換ベンジルである。Ｚ¹は結合また
は−ＣＨ₂−である。Ｒ⁴はＣ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₁〜
Ｃ₄−アルコキシ、シクロペンチル、シクロヘキシル、
非置換または置換アリール（ここに、アリールはフェニ
ルまたはナフチル、同一または相異なる、硫黄、酸素お
よび窒素から選択されるヘテロ原子１個または２個を持
つ５員または６員の非置換または置換ヘテロ環、または
同一または相異なる、硫黄、酸素および窒素から選択さ
れるヘテロ原子１個または２個を持つ９員または１０員
の非置換または置換双環ヘテロ環基を表す）である。Ｚ
が−ＮＨＲ²である時には、これはＲ³と一緒になってア
ゼチジニル基、５員または６員環の非置換または置換飽
和含窒素ヘテロ環または９員または１０員の非置換また
は置換縮合双環含窒素ヘテロ環基であることができる。
Ｒ³およびＲ⁴はまとめてシクロペンチル、シクロヘキシ
ルまたは９員または１０員の非置換または置換の双環炭
化水素基であることができる。

【０００７】但し、（ａ−ｉ）Ｒ³がメチルまたはエチ
ルであり、Ｚ¹が結合であり、Ｒ⁴がシクロペンチル、シ
クロヘキシル、非置換または置換のアリールであってア
リールがフェニルまたはナフチルであるか、Ｒ⁴がチエ
ニルまたはフリルであり、Ｘがプロリニルまたはアゼチ
ジニル−２−カルボニルである時、または（ａ−ｉｉ）
Ｒ⁴−Ｚ¹−がまとめてメチルまたはエチルを形成し、Ｒ
³が非置換または置換フェニルであり、そしてＸがプロ
リニルまたはアゼチジニル−２−カルボニルである時、
または（ｂ−ｉ）Ｒ³がメチルまたはエチルであり、Ｚ¹
が−（ＣＨ₂）−であり、Ｒ⁴が非置換または置換フェニ
ルであり、Ｘがアゼチジニル−２−カルボニルである
時、または（ｂ−ｉｉ）Ｒ⁴−Ｚ¹−がまとめてメチルま
たはエチルを形成し、Ｒ³が非置換または置換ベンジル
であり、そしてＸがアゼチジニル−２−カルボニルであ
る時、またはさらに、（ｃ）Ｒ³およびＲ⁴がまとめてシ
クロペンチルまたはシクロヘキシルを表し、Ｘがプロリ
ニルである時には、Ｚはヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルコ
キシまたはＮＨＲ²ではないものとする（ここで、Ｒ²は
水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキルまたは基−Ｃ（Ｃ＝Ｏ）Ｒ⁵
であり、Ｒ⁵はＣ₁〜Ｃ₄−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₂−パーフ
ルオロアルキルまたはＣ₁〜Ｃ₄−アルコキシであるもの
とする）。］で示されるトロンビン阻害化合物またはそ
の医薬的に許容しうる塩またはこの化合物または塩の医
薬的に許容しうる溶媒和物を提供する。

【０００８】前記式Ｉで示される化合物の特別な一群は
式Ｉで示される化合物において、Ｒ¹は水素であり、Ｘ
はプロリニルまたはアゼチジニル−２−カルボニルであ
り、Ｙは：

【化５】 で示される基であり、Ｒ³はＣ₁〜Ｃ₄−アルキルであ
り、Ｚ¹は結合または−ＣＨ₂−であり、Ｒ⁴は非置換ま
たはモノ置換フェニルであり、Ｚは−ＮＨＲ²であり、
Ｒ²は−Ｃ（Ｃ＝Ｏ）Ｒ⁵で、Ｒ⁵が窒素原子１個を持つ
９員または１０員の非置換またはモノ置換の縮合双環ヘ
テロ環基であるか、またはＲ²が−ＳＯ₂Ｒ⁵であって、
Ｒ⁵がＣ₁〜Ｃ₄−アルキルであり、Ｒ³およびＺはまとめ
てアゼチジニル基を形成するか、または窒素原子１個ま
たは２個を持つ５員または６員の非置換ヘテロ環であっ
てよい、ものから構成されるものまたはその医薬的に許
容しうる塩または該化合物または塩の医薬的に許容しう
る溶媒和物である。

【０００９】式Ｉで示される化合物に加え、本発明は式
Ｉで示される化合物を医薬的に許容しうる担体、希釈剤
または添加剤とともに含む医薬的な製剤を提供する。本
発明はまた式Ｉで示される化合物の凝固阻害用量をこの
処置を要する哺乳類に投与することを含む、哺乳類にお
ける凝固を阻害する方法も提供する。本発明はさらに式
Ｉで示される化合物をのトロンビン阻害用量をこの処置
を必要とする哺乳類に投与することを含む、トロンビン
を阻害する方法を提供する。 さらに、本発明は式Ｉで示される化合物をこの処置を必
要とする哺乳類に投与することを含む、血栓塞栓症の処
置法を提供する。この発明はトロンビンの新規阻害剤、
この化合物を活性成分として含む医薬組成物、および静
脈血栓症、肺塞栓症、動脈性血栓症、殊に心筋虚血、心
筋梗塞および脳血栓症のような血栓塞栓症、血管形成術
および冠状動脈バイパス手術後に現れるような一般的過
凝固状態および局所的過凝固状態、および炎症過程に関
連する一般的組織損傷の予防および処置のための抗凝固
剤としてのこの化合物の使用に関する。

【００１０】用語「アルキル」それ自体または他の置換
基の一部としてメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプ
ロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチルおよびｓ
ｅｃ−ブチルのような指定する数の炭素原子を持つ直線
状または分枝状鎖のアルキル残基を意味する。用語「ア
ルコキシ」は酸素原子によって親基に結合している指定
する数の炭素原子を持つ直線状または分枝状鎖のアルキ
ル残基を意味する。用語「ハロ」はクロロ、フルオロ、
ブロモまたはヨードを意味する。用語「ジ（Ｃ₁〜Ｃ₄−
アルキル）アミノ」は各アルキル基が独立に指定する数
の炭素原子を持つ基−Ｎ（Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキル）₂を意
味する。用語「パーフルオロアルキル」はトリフルオロ
メチルおよびペンタフルオロエチルのような指定する数
の炭素原子を持ち、すべての可能な原子価がフッ素原子
で置換されている直線状または分枝状鎖アルキル残基を
意味する。用語「５員または６員のヘテロ環」は窒素原
子１個または２個、硫黄原子１個、酸素原子１個、窒素
原子１個および硫黄原子１個、または窒素原子１個およ
び酸素原子１個を含む安定な構造を与える５員または６
員環のどれかを意味する。５員環は二重結合１個または
２個を持ち、６員環は二重結合２個または３個を持つ。
ヘテロ環にはフリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリ
ル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イ
ソチアゾリル、ピラニル、ピリジニル、ピリミジニル、
ピラジニル、オキサジニルおよびチアジニルを含む。

【００１１】用語「９員または１０員のヘテロ環」は前
記５員または６員環のどれかがベンゼン環、シクロヘキ
サン環または他の６員ヘテロ環に縮合し安定な構造を与
える縮合双環ヘテロ環基のどれかを意味する。これらの
ヘテロ環にはインドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフリ
ル、ベンズオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベ
ンゾピラゾリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズ
イミダゾリルおよびベンゾチアゾリルを含む。用語「９
員または１０員の双環炭化水素基」は：

【化６】 ［ここに、Ｑは−ＣＨ₂−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ
Ｈ₂−ＣＨ₂−である。Ｚは式Ｉのために前記定義したも
のと同義である。破線は環内における不飽和の存在また
は不在を意味する］で示される縮合双環基を意味する。
これらの縮合双環基の代表例にはインダニル、ジヒドロ
ナフチルおよびテトラヒドロナフチルを含む。プロリニ
ルおよびアゼチジン−２−カルボニルと記載する基は各
々式：

【化７】 で示され、各々ＰｒｏおよびＡｚｔと略記する。

【００１２】式Ｉの表示において、Ｘのカルボニル官能
基は式Ｉに記載されたアミノ基に結合している。前記ヘ
テロ環の多くがタウトマー型として存在しうることは認
識されるであろう。これらの型はすべてこの発明の範囲
内に含まれる。前記アリール、ヘテロ環および双環性炭
化水素はすべて非置換であるか、またはハロ、ヒドロキ
シル、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルコキシ、ア
ミノ（−ＮＨ₂）、（モノ（Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキル）アミ
ノ、メルカプト、および（Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキル）チオ
（−Ｓ（Ｏ）_pＣ₁〜Ｃ₄−アルキル）、−ＮＨＳ（Ｏ）_p
（Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ₁〜Ｃ₄−ア
ルキル、−Ｓ（Ｏ）_pＮＨ₂、−Ｓ（Ｏ）_pＮＨ（Ｃ₁〜Ｃ
₄−アルキル）および−Ｓ（Ｏ）_pＮ（Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキ
ル）₂であって、ｐが０、１または２であるものから独
立に選択される安定な構造を与える置換基１個または２
個で置換されている。式Ｉおよび続くＸにおける星印は
（Ｌ）であるキラル中心を示す。さらに、Ｙ置換基およ
びＹ置換基上の置換基によってはさらにジアステレオマ
ーも存在しうる。本発明の化合物はジアステレオマー２
種またはそれ以上の混合物ならびに各々の異性体も含
む。

【００１３】本発明の好適な化合物は前記定義の式Ｉで
示される化合物であって、Ｚが−ＮＨＲ²であり、Ｒ²が
−Ｃ（Ｃ＝Ｏ）Ｒ⁵または−Ｓ（Ｏ）_n−Ｒ⁵であり、Ｒ³
がＣ₁〜Ｃ₄−アルキルであり、Ｒ⁴が非置換または置換
アリール、ここにアリールはフェニルまたはナフチルで
あり、Ｒ⁵がＣ₁〜Ｃ₄−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルコキ
シ、窒素原子１個または２個を持つ５員または６員の非
置換または置換ヘテロ環または窒素原子１個または２個
を持つ９員または１０員の非置換または置換の縮合双環
ヘテロ環基であり、ｎが１または２であるか、またはＺ
とＲ³とをまとめてアゼチジニル基、窒素原子１個また
は２個を持つ５員または６員の非置換または置換のヘテ
ロ環または窒素原子１個または２個を持つ９員または１
０員の非置換または置換の縮合双環性ヘテロ環基を与
え、ここにＸ、Ｚ¹およびＲ¹は式Ｉのための前記定義と
同義であるものおよびその医薬的に許容しうる塩および
溶媒和物である。

【００１４】殊に好適な本発明の化合物の第一の群は前
記定義の式Ｉで示される化合物であって、Ｒ¹が水素で
あり、Ｚが−ＮＨＲ²であり、Ｒ²が−Ｃ（Ｃ＝Ｏ）Ｒ⁵
であり、Ｒ³がＣ₁〜Ｃ₄−アルキルであり、Ｚ¹が−ＣＨ
₂−であり、Ｒ⁴が非置換またはモノ置換フェニルであ
り、Ｒ⁵がＣ₁〜Ｃ₄−アルコキシまたは窒素原子１個を
持つ９員または１０員の非置換またはモノ置換の縮合双
環ヘテロ環基であり、Ｘが式Ｉのための前記定義と同義
であるものおよびその医薬的に許容しうる塩および溶媒
和物である。

【００１５】殊に好適な本発明の化合物の第二の群は前
記定義の式Ｉで示される化合物であって、Ｒ¹が水素で
あり、Ｚが−ＮＨＲ²であり、Ｒ²が−ＳＯ₂Ｒ⁵であり、
Ｒ³がＣ₁〜Ｃ₄−アルキルであり、Ｒ⁴が非置換またはモ
ノ置換フェニルであり、Ｒ⁵がＣ₁〜Ｃ₄−アルキルであ
り、ＸおよびＺ¹が式Ｉのための前記定義と同義である
ものおよびその医薬的に許容しうる塩および溶媒和物で
ある。

【００１６】殊に好適な本発明の化合物の第三の群は前
記定義の式Ｉで示される化合物であって、Ｒ¹が水素で
あり、Ｚが−ＮＨＲ²であり、Ｒ⁴が非置換またはモノ置
換フェニルであり、ＺとＲ³とがまとめてアゼチジニル
基または窒素原子１個または２個を持つ５員または６員
の非置換ヘテロ環を与え、Ｘが式Ｉのための前記定義と
同義であるものおよびその医薬的に許容しうる塩および
溶媒和物である。

【００１７】前記の通り、本発明は前記式Ｉで定義され
る化合物の医薬的に許容しうる塩を含む。この発明の特
定的化合物は十分に塩基性の官能基１個またはそれ以上
を持つことができ、それ故に非毒性の無機および有機酸
多数のどれとも反応して医薬的に許容しうる塩を形成す
ることができる。酸付加塩を形成するために通常に採用
される酸は塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、燐
酸などのような無機酸およびｐ−トルエンスルホン酸、
メタンスルホン酸、シュウ酸、ｐ−ブロモフェニルスル
ホン酸、炭酸、コハク酸、安息香酸、酢酸などのような
有機酸である。それで、医薬的に許容しうる塩の例は硫
酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、
燐酸塩、一水素燐酸塩、二水素燐酸塩、メタ燐酸塩、ピ
ロ燐酸塩、塩化物、臭素化物、ヨード化物、酢酸塩、プ
ロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸
塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸
塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハ
ク酸塩、スベリン酸塩、セバカン酸塩、フマル酸塩、マ
レイン酸塩、ブチン−１，４−ジ酸塩、ヘキシン−１，
６−ジ酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安
息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸
塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、
キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロ
ピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、ガ
ンマ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、
メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレ
ン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸
塩、マンデル酸塩などである。好適な医薬的に許容しう
る酸付加塩は塩酸、臭素化水素酸および硫酸のような鉱
酸とともに形成されるものである。

【００１８】前記のように、本発明は式Ｉで示される化
合物およびその医薬的に許容しうる塩の溶媒和物を含
む。本発明の特定の化合物またはその医薬的に許容しう
る塩は水または通常の有機溶媒と溶媒和物を形成しう
る。この溶媒和物も本発明の化合物の範囲内に含む。

【００１９】式Ｉで示される化合物は同時にまたは逐次
に対応する式ＩＩ：

【化８】 ［ここに、グアニジノ基上のＰはアミノ保護基を示し、
ＰＹは式Ｉで示される化合物のための独立に選択された
アミノ保護基Ｐを持ちうる残基Ｙを示し、ここにＹには
塩基性ＮＨ部分を含む］で示される化合物の保護基Ｐを
除去し、その後、式Ｉで示される化合物の塩が必要な時
には医薬的に許容しうる酸と塩を形成することによって
製造される。例えば、式ＩＩで示される化合物であって
アミノ保護基がベンジルオキシカルボニルであるものを
パラジウム炭触媒上、常圧の希エタノール性塩酸中での
加水素分解によって式Ｉで示される対応する化合物の塩
酸塩に変換しうる。式ＩＩで示される化合物は式：ＰＹ
（Ｃ＝Ｏ）−Ｘ−Ａｒｇ（Ｐ）−Ｈとも示されるが、こ
こでＸはＰｒｏ（プロリニル）またはＡｚｔ（アゼチジ
ニル−２−カルボニル）である。

【００２０】式Ｉで示される化合物は公知のペプチド結
合法によって製造される。この方法の一つに従えば、Ｙ
が式Ｉのための前記定義と同義を持ち、Ｐはアミノ保護
基である酸：ＰＹ−ＣＯＯＨをカルボキシ保護プロリン
（またはアゼチジン−２−カルボキシエステル）と結合
してジペプチドを形成する。次にプロリン部分のカルボ
キシ保護エステル基を除去（脱閉鎖または脱エステル
化）し、ジペプチドの遊離酸型をアルギニンのラクタム
型と結合する。上記反応順序を次の反応式１に示す：

【化９】 ［ここにＰはアミノ保護基を示す］ 結合したＡｒｇ（Ｐ）ラクタム生成物（ｃ）を好ましく
は水素化アルミニウムリチウムまたは水素化トリ−ｔ−
ブトキシアルミニウムリチウムである水素化物還元剤と
不活性溶媒または溶媒混合物中で反応させてラクタム環
を還元して（Ｐ）がアミノ保護基である式：ＰＹ（Ｃ＝
Ｏ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｐ）−Ｈで示されるアルギニン
アルデヒド型のトリペプチドを提供する。保護基は金属
触媒上の水素化のような当業者に公知の操作により除去
される。

【００２１】アルギニンのラクタム型はアミノ保護アル
ギニン［Ａｒｇ−ＯＨ］の分子内結合によって得られ
る。例えば、式：

【化１０】 ［ここに、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニルであ
る。Ｃｂｚはベンジルオキシカルボニルである］で示さ
れるＢｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）ＯＨを第一に、たとえば
クロロギ酸エチルからクロロギ酸イソブチルのようなク
ロロホーメートエステルで活性混合無水物のような活性
エステル型に変換する。エステル形成はＮ−メチルモル
ホリンのような三級アミンの存在下に実施する。トリエ
チルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンのような
追加的なまたは別の三級アミン塩基の添加で内部アシル
化が起きて、次式：

【化１１】 に示すジ−アミノ保護アルギニンのラクタム型を得る。
前式に示すＰＹ（Ｃ＝Ｏ）−Ｐｒｏ−ＯＨとの結合で使
用する前に、Ｂｏｃまたは他のアミン保護基をトリフル
オロ酢酸またはＨＣｌで選択的に除去すれば必要な遊離
アミノ基を得る。

【００２２】Ｙが式Ｉのための前記定義と同義であるＰ
ＹＣＯＯＨ化合物とプロリンエステルとの結合は第一に
アミノ酸のアミノ基の保護により実施する。アミノ基の
一時的保護または閉鎖に通常使用される通常のアミノ保
護基が採用される。アミノ保護基は化合物の他の官能基
が反応する間にアミノ官能基を閉鎖または保護するため
に通常採用されるアミノ基の置換基を示す。そのような
アミノ保護基の例はホルミル基、トリチル基、フタルイ
ミド基、トリクロロアセチル基、クロロアセチル、ブロ
モアセチルおよびヨードアセチル基、ベンジルオキシカ
ルボニル、ｔ−ブトキシカルボニル、４−フェニルベン
ジルオキシカルボニル、２−メチルベンジルオキシカル
ボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、４−
フルオロベンジルオキシカルボニル、４−クロロベンジ
ルオキシカルボニル、３−クロロベンジルオキシカルボ
ニル、２−クロロベンジルオキシカルボニル、２，４−
ジクロロベンジルオキシカルボニル、４−ブロモベンジ
ルオキシカルボニル、３−ブロモベンジルオキシカルボ
ニル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、４−シア
ノベンジルオキシカルボニル、２−（４−キセニル）イ
ソプロポキシカルボニル、１，１−ジフェニルエタン−
１−イルオキシカルボニル、１，１−ジフェニルプロパ
ン−１−イルオキシカルボニル、２−フェニルプロパン
−２−イルオキシカルボニル、２−（ｐ−トルイル）プ
ロパン−２−イルオキシカルボニル、シクロペンタニル
オキシカルボニル、１−メチルシクロペンタニルオキシ
カルボニル、シクロヘキサニルオキシカルボニル、１−
メチルシクロヘキサニルオキシカルボニル、２−メチル
シクロヘキサニルオキシカルボニル、２−（４−トルイ
ルスルホニル）エトキシカルボニル、２−（メチルスル
ホニル）エトキシカルボニル、２−トリフェニルホスフ
ィノ）エトキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシ
カルボニル（「ＦＭＯＣ」）、２−（トリメチルシリ
ル）エトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、１
−（トリメチルシリルメチル）−１−プロペニルオキシ
カルボニル、５−ベンズイソオキサリルメトキシカルボ
ニル、４−アセトキシベンジルオキシカルボニル、２，
２，２−トリクロロエトキシカルボニル、２−エチニル
−２−プロポキシカルボニル、シクロプロピルメトキシ
カルボニル、４−（デシルオキシ）ベンジルオキシカル
ボニル、イソボルニルオキシカルボニル、１−ピペリジ
ルオキシカルボニルなどのようなウレタン型閉鎖基、ベ
ンゾイルメチルスルホニル基、２−（２−ニトロ）フェ
ニルスルフェニル基、ジフェニルホスフィンオキシド基
などのアミノ保護基を含む。採用するアミノ保護基の種
類は誘導化されたアミノ基が分子上の他の位置における
後続反応の条件に安定であって、適当な点で分子の残部
を損なうことなしに除去できる限り、限定的でない。好
適なアミノ保護基はベンジルオキシカルボニル、アリル
オキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニルおよびトリ
チル基である。セファロスポリン、ペニシリンおよびペ
プチド技術で使用される同様なアミノ保護基も前記用語
に包含される。前記用語により示される基の他の例は
Ｊ．Ｗ．Ｂａｒｔｏｎ、「有機化学における保護基（Ｐ
ｒｏｔｅｃｔｉｖｅ・Ｇｒｏｕｐｓ・ｉｎ・Ｏｒｇａｎ
ｉｃ・Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）」、Ｊ．Ｇ．Ｗ．ＭｃＯｍ
ｉｅ編、Ｐｌｅｎｕｍ・Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク、
Ｎ．Ｙ．、１９７３年、第２章およびＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅ
ｎｅ、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖ
ｅ・Ｇｒｏｕｐｓ・ｉｎ・Ｏｒｇａｎｉｃ・Ｓｙｎｔｈ
ｅｓｉｓ）」、Ｊｏｈｎ・Ｗｉｌｅｙ・ａｎｄ・Ｓｏｎ
ｓ、ニューヨーク、Ｎ．Ｙ．、１９８１年、第７章に記
載されている。関連する用語「保護されたアミノ」は前
記アミノ保護基で置換されたアミノ基を定義する。

【００２３】結合反応を実施するに当り、アミノ保護基
が無傷である条件下に除去できるプロリンのためのエス
テル保護基を採用する。アシル化用酸ＰＹＣＯＯＨのア
ミノ保護基は後続するアルギニンラクタム化合物との
（ｃ）型にいたる結合反応の間にアミノ基を保護する位
置に残る。この明細書に使用するカルボキシ保護エステ
ル基は化合物の他の官能基で反応が実施されている間に
カルボン酸基を閉鎖または保護するために通常に採用さ
れるカルボン酸基のエステル誘導体の一つを示す。この
ようなカルボン酸保護基の例はＣ₁〜Ｃ₃−アルキル、ベ
ンジル、４−ニトロベンジル、４−メトキシベンジル、
３，４−ジメトキシベンジル、２，４−ジメトキシベン
ジル、２，４，６−トリメトキシベンジル、２，４，６
−トリメチルベンジル、ペンタメチルベンジル、３，４
−メチレンジオキシベンジル、ベンズヒドリル、４，
４’−ジメトキシベンズヒドリル、２，２’，４，４’
−テトラメトキシベンズヒドリル、ｔ−ブチル、ｔ−ア
ミル、トリチル、４−メトキシトリチル、４，４’−ジ
メトキシトリチル、４，４’，４”−トリメトキシトリ
チル、２−フェニルプロパン−２−イル、トリメチルシ
リル、ｔ−ブチルジメチルシリル、フェナシル、２，
２，２−トリクロロエチル、２−（トリメチルシリル）
エチル、２−（ジ（ｎ−ブチル）メチルシリル）エチ
ル、ｐ−トルエンスルホニルエチル、４−ニトロベンジ
ルスルホニルエチル、アリル、シンナミル、１−（トリ
メチルシリルメチル）−１−プロペン−３−イルなどの
基を含む。採用するカルボキシ保護基の種類は誘導化さ
れたカルボキシ基が後続する分子内の他の位置における
反応の条件に安定で、適当な点で分子の残部を損なうこ
となしに除去できる限り、限定的でない。殊に、カルボ
キシ保護分子を強い求核性塩基またはラネイニッケルの
ような高度に活性化された金属触媒を採用する還元条件
に暴露しないことが肝要である（このような過激な離脱
条件は以下に検討するアミノ保護基を除去する時も避け
るべきである）。好適なカルボキシ保護基はＣ₁〜Ｃ₃−
アルキルおよびベンジル基である。これらの基の他の例
はＥ．Ｈａｓｌａｍ、「有機化学における保護基（Ｐｒ
ｏｔｅｃｔｉｖｅ・Ｇｒｏｕｐｓ・ｉｎ・Ｏｒｇａｎｉ
ｃ・Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）」、Ｊ．Ｇ．Ｗ．ＭｃＯｍｉ
ｅ編、Ｐｌｅｎｕｍ・Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク、Ｎ．
Ｙ．、１９７３年、第５章およびＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ
ｅ、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ
・Ｇｒｏｕｐｓ・ｉｎ・Ｏｒｇａｎｉｃ・Ｓｙｎｔｈｅ
ｓｉｓ）」、Ｊｏｈｎ・Ｗｉｌｅｙ・ａｎｄ・Ｓｏｎ
ｓ、ニューヨーク、Ｎ．Ｙ．、１９８１年、第５章に記
載されている。

【００２４】Ｘがアゼチジニル（またはプロリニル）で
ある式Ｉで示される化合物は既知のペプチド結合方法に
より同様にして製造される。その方法の一つに従えば、
アルギニン（ｅ）の環状ラクタム型を製造し、アミノ保
護アゼチジン−２−カルボン酸（ｄ）と次に示すように
して結合してジペプチド（ｆ）を得る：

【化１２】 ［ここに、Ｐはベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）
基、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ｐ−トルエン
スルホニルなどのようなアミノ保護基を示す］ 好ましくは、使用するアミノ保護基は水素化または緩和
な酸（たとえば、トリフルオロ酢酸）または強酸（たと
えば、ＨＣｌ）での処理により除去できるものである。
適当な他のアミノ保護基の例は「有機合成における保護
基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ・Ｇｒｏｕｐｓ・ｉｎ・Ｏｒ
ｇａｎｉｃ・Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、第２版、Ｔ．
Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰｅｔｅｒ・Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔ
ｓ、第７章、第３０９〜４０５頁、（１９９１年）、Ｊ
ｏｈｎ・Ｗｉｌｅｙ・ａｎｄ・Ｓｏｎｓ・Ｉｎｃ．出版
に記載がある。Ｂｏｃまたは他の適当な保護基をアゼチ
ジン環窒素から除去し、次に所期のアミノ酸アシル基で
アシル化して次に示すようにトリペプチドを得る：

【化１３】 本発明の化合物でＸがアゼチジニル−２−カルボニルで
あるものについて例示し、記載したが、当業者はこれら
の操作を使用してＸがプロリニルである本発明の化合物
を得ることができることも認識するであろう。

【００２５】結合したＡｒｇ（Ｐ）ラクタム生成物
（ｇ）を水素化物還元剤、好ましくは水素化リチウムア
ルミニウムまたは水素化トリ−ｔ−ブトキシアルミノリ
チウム、で不活性溶媒または溶媒混合物中でラクタムを
還元してＰがアミノ保護基を示すものである式：ＰＹ
（Ｃ＝Ｏ）−Ａｚｔ−Ａｒｇ（Ｐ）−Ｈで示されるアル
ギニンアルデヒド型トリペプチドを得る。保護基は金属
触媒上の水素化のような当業者に公知の操作によって除
去される。使用した保護基に依存して保護基をＹ基から
およびアルギナール基から同時にまたは逐次に除去しう
る。あるいは、本発明の化合物はＰＹＣＯＯＨ酸とカル
ボキシ保護２−アゼチジン−カルボン酸との結合によっ
ても製造される。カルボキシを脱保護してジペプチドと
し、これを次にアミノ保護ラクタム型アルギニンと前記
のようにして結合する。次にトリペプチドを還元して前
記のようにしてアミノ保護アルギナールトリペプチドを
得る。ＰＹＣＯＯＨ化合物の結合は第一にアミノ酸のア
ミノ基を保護して実施する。アミノ基の一時的な保護ま
たは閉鎖のためには通常に用いられる通常のアミノ保護
基を採用できる。この保護基の例は前に記載した。前記
結合反応は冷時、好ましくは約−２０℃および約１５℃
の間の温度で、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセト
アミド、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、クロロホ
ルムなどのような通常の溶媒またはこのような溶媒の混
合物のような不活性溶媒中で実施する。結合反応ではア
シル化酸の活性エステルが用いられる時には一般に無水
条件が使用される。

【００２６】Ｙ置換基のための中間体（すなわち、式：
Ｙ−ＣＯＯＨで示されるα，α−ジ置換アミノ酸）が商
業的に入手できない式Ｉで示される化合物に対しては、
出発アミノ酸誘導体は下記反応式２に示す方法により容
易に製造できる。適当なα−アミノエステルをベンゾフ
ェノンイミンと縮合して得られるイミンをカリウムｔ−
ブトキシドまたはリチウム・ビス（トリメチルシリル）
アミドのような強塩基で脱プロトン化する。得られるカ
ルバニオンを次にハロゲン化一級アルキル、アリル性ハ
ロゲン化アルキルまたはベンジル性ハロゲン化アルキル
のような適当な求電子剤と処理する。イミンを次に水性
の酸（約１Ｎから約３Ｎ−無機酸、好ましくはＨＣｌ）
で処理して除去し、得られるアミノ酸誘導体を前記のよ
うな式Ｉで示される化合物にまで進行させる。反応式
２：

【化１４】 反応式２において、Ｚ¹、Ｒ⁴およびＲ³は式Ｉのために
定義したものと同義であり、Ｌは有効な脱離基、好まし
くはハロ、であり、「エステル」は適当なカルボキシ保
護基、好ましくはＣ₁〜Ｃ₄−アルキル、である。化合物
（１）はさらに通常の合成操作を用いて反応させて式Ｉ
のために定義したような所期のＺ置換基を与える。この
操作は適当な保護基によるアミノ基の閉鎖、カルボキシ
基の脱閉鎖および次に結合を実施して前記のような本発
明の化合物を得る。Ｎ−置換（Ａｚｔのような）された
α−アミノ酸エステル（すなわち、Ｚが−ＮＨＲ²であ
り、Ｒ³とまとめた式Ｉで示される化合物）は強塩基
（リチウムジイソプロピルアミド、ＬＤＡのような）お
よびＲ⁴とＺ¹とが式Ｉで定義したものであり、Ｌは、好
ましくはハロのような有効な脱離基である求電子剤Ｒ⁴
−Ｚ¹−Ｌを使用すれば塩基性反応条件に安定な窒素保
護基（Ｐ）を採用する限り、直接にα−置換することが
できる。α−アミノ酸エステルをα−置換する両操作法
はエナンチオマーの混合物を与えるが、これは分離する
かまたはラセミ混合物にすることができる。

【００２７】適当なα−置換−α−アミノ酸（式Ｉの置
換基Ｙ）を製造するための別の方法は、ストレッカー合
成による。一般にα−アミノニトリルはアルデヒドまた
はケトンとＮａＣＮとＮＨ₄Ｃｌとで処理することによ
って製造する。この合成法およびその変法に関する詳細
はＭａｒｃｈ、「最新有機化学（Ａｄｖａｎｃｅｄ・Ｏ
ｒｇａｎｉｃ・Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）」、第３版、Ｊｏ
ｈｎ・Ｗｉｌｅｙ・ａｎｄ・Ｓｏｎｓ・Ｉｎｃ．（１９
８５年）、８５５〜８５６頁にある。本発明の化合物は
酸付加塩の型で単離するのが最善である。前記のような
酸で形成した式Ｉで示される化合物の塩はこの抗血栓症
剤の投与のための医薬的に許容しうる塩として、またこ
れらの薬剤の製剤の製造のために有用である。他の酸付
加塩を製造してこのペプチドの単離および精製において
使用しうる。例えば、メタンスルホン酸、ｎ−ブタンス
ルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびナフタレンス
ルホン酸のようなスルホン酸で形成した塩をそのように
使用しうる。

【００２８】式Ｉで示される化合物の精製のため、およ
び同時に所期の安定な塩型を製造するための好適な方法
は、米国特許第５２５０６６０号に記載されている。こ
の方法に従えば、水性成分がｐＨ２．５の硫酸または塩
酸からなり、アセトニトリルが有機成分であるＣ₁₈逆相
クロマトグラフィーによる分取精製により安定な硫酸塩
または塩酸塩が得られる。酸性溶出液のｐＨをヒドロキ
シル型塩基性アニオン交換樹脂、たとえば、Ｂｉｏ−Ｒ
ａｄ・ＡＧ−１Ｘ８、で約ｐＨ４と約６との間に調整す
る。ｐＨの調整後、トリペプチド硫酸塩または塩酸塩の
溶液を凍結乾燥して純粋な塩を乾燥粉末の形で得る。こ
の工程の一例において、粗製ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ
（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−ＡｒｇＨ・ＨＣｌを水に溶か
し、溶液をＶｙｄａｃ・Ｃ₁₈・ＲＰＨＰＬＣカラム（５
ｃｍ×５０ｃｍ）に入れる。２％から２０％Ｂ（溶媒Ａ
＝０．０５％ＨＣｌ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル）の勾配
で２８０分間（１０ｍＬ／分）、続いて４０分間２０％
Ｂの同一組成液を用いる。多数の画分を取り、分析用Ｐ
ＲＨＰＬＣで測定して生成物を含むものを集める。集め
た画分のｐＨをヒドロキシド型ＡＧ−１Ｘ８樹脂（Ｂｉ
ｏ−Ｒａｄ、３３００・Ｒａｇａｔｔａ・Ｂｌｖｄ．，
Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＣＡ・９４８０４）で４．５に調整
する。溶液を濾過し、濾液を凍結乾燥すれば純粋なＤ
−，Ｌ−，Ｌ−トリペプチドを塩酸塩の形で得る。

【００２９】Ｙ置換基のジアステレオマーの光学活性異
性体もまたこの発明の一部である。この光学活性異性体
は対応する光学活性前駆体から前記方法またはラセミ混
合物の分割により製造しうる。この分割はキラル試薬で
の誘導およびクロマトグラフィーまたは反復結晶化を続
けて実施することができる。キラル追加体の標準的方法
による除去は本発明の化合物またはその前駆体の実質的
に光学的に純粋な異性体を与える。分割に関するさらな
る詳細はＪａｃｑｕｅｓなど、エナンチオマー、ラセメ
ートおよび分割（Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍ
ａｔｅｓ，ａｎｄ・Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）、Ｊｏｈ
ｎ・Ｗｉｌｅｙ・ａｎｄ・Ｓｏｎｓ・Ｉｎｃ．（１９８
１年）に見られる。

【００３０】この発明の化合物の合成における最初の出
発物質として採用される化合物は良く知られており、商
業的に入手できないものは当業者により通常に採用され
る標準的操作により容易に合成される。

【実施例】

【００３１】以下の実施例は本発明をさらに記載するた
めに提供するが、その限定として解釈すべきではない。
以下の実施例におけるＲｆ値は、特段の記載がない限
り、キーゼルゲル６０Ｆ−２５４（メルク社、ダルムシ
ュタット）を用いる次の溶媒系によるシリカゲル薄層ク
ロマトグラフィーにより測定した。 （Ａ）クロロホルム−メタノール−酢酸、１３５：１
５：１、ｖ：ｖ：ｖ。 （Ｂ）酢酸エチル−酢酸−無水エタノール、９０：１
０：１０、ｖ：ｖ：ｖ。 （Ｃ）クロロホルム−メタノール−酢酸、９０：３０：
５、ｖ：ｖ：ｖ。 （Ｄ）酢酸エチル。 実施例で用いた分析用ＨＰＬＣは次の通りであった：方法１． ０．４６ｃｍ×１０ｃｍのＶｙｄａｃ・Ｃ₁₈逆
相カラムを用いるＷａｔｅｒｓ・６００Ｅ。クロマトグ
ラムはＡ＝０．１％（ｖ：ｖ）ＴＦＡを含む水およびＢ
＝０．１％（ｖ：ｖ）ＴＦＡを含むアセトニトリルの勾
配を用い、２１４ｎＭでのＬＤＣで監視した。方法２． ０．４６ｃｍ×１０ｃｍの大きさのＶｙｄａｃ
・Ｃ₁₈逆相カラムを用いるファルマシアＦＰＬＣ。監視
は２１４ｎＭでＰｈａｒｍａｃｉａ・ＵＶ−ＭでＡ＝
０．１％（ｖ：ｖ）ＴＦＡを含む水またはＢ＝０．１％
（ｖ：ｖ）ＴＦＡを含むアセトニトリルの勾配を用いて
行った。方法３． ０．４６ｃｍ×１０ｃｍのＶｙｄａｃ・Ｃ₁₈逆
相カラムを用いるＨｉｔａｃｈｉ・Ｌ−６２００。標品
はＡ（０．１％（ｖ：ｖ）ＴＦＡ水）およびＢ（アセト
ニトリル中、０．１％（ｖ：ｖ）ＴＦＡ）からなる勾配
を用いて溶出した。クロマトグラムはＬ−４０００ＵＶ
検出器を用いて２１４ｎｍで監視した。

【００３２】この明細書で用いる略号は次の意味を持
つ。 アミノ酸：Ａｒｇ＝アルギニン、Ｐｒｏ＝プロリン、Ａ
ｚｔ＝アゼチジン−２−カルボン酸。 Ｂｏｃ＝ｔ−ブチルオキシカルボニル（ｔ−ブトキシカ
ルボニル）。 ＢｚｌまたはＢｎ＝ベンジル。 Ｃｂｚ＝ベンジルオキシカルボニル。 ＤＣＣ＝ジシクロヘキシルカーボジイミド。 ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド。 ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド。 ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル。 Ｅｔ₂Ｏ＝ジエチルエーテル。 ＥｔＯＨ＝エタノール。 ＦＡＢ−ＭＳ＝高速原子衝撃質量スペクトル。 ＦＤ−ＭＳ＝電界脱離質量スペクトル。 ＨＯＢＴ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物。 ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー。 ＩＲ＝赤外スペクトル。 ＬＡＨ＝水素化アルミニウムリチウム。 ＮＭＲ＝核磁気共鳴。 ＮＭＩ＝Ｎ−メチルインドール−２−カルボニル。 Ｐｈｇ＝フェニルグリシン。 ＲＰＨＰＬＣ＝逆相高速液体クロマトグラフィー。 ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸。 ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン。 ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー。 ＯＰＦＦ＝ペンタフルオロフェノキシ。 ＰＦＦ＝ペンタフルオロフェニル。

【００３３】特段の記載がない限り、ｐＨ調整および後
処理は水性の酸または塩基溶液で行った。ＲＰＨＰＬＣ
は０．０５％（ｖ：ｖ）ＨＣｌ水（実施例では「Ａ」と
記載した）とアセトニトリル（実施例では「Ｂ」と記載
した）とを用いて実施した。ＡとＢとの混合比はｖ：ｖ
である。¹Ｈ−ＮＭＲを記載したものでは、反応で得た
生成物をプロトンＮＭＲで分析して記載の化合物が得ら
れたことを確認した。

【００３４】実施例１ １−メチルインドール−２−カ
ルボニル−Ｄ−（α−メチル）フェニルグリシニル−Ａ
ｚｔ−Ａｒｇ−Ｈ・塩酸塩の製造 Ａ）Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ＯＨ −５℃に冷却したＢｏｃ−Ａｒｇ（ＨＣｌ）−ＯＨ（８
２．１ｇ、２５０ミリモル）の５Ｎ−ＮａＯＨ（２４０
ｍＬ）溶液に５Ｎ−ＮａＯＨ（２５０ｍＬ）の添加でｐ
Ｈを１３．２〜１３．５に維持しながらクロロギ酸ベン
ジル（１４３ｍＬ、１．０モル）（４ｅｑ）を５５分間
に滴加した。水層を分離し、Ｅｔ₂Ｏ（２×５００ｍ
Ｌ）で抽出した。水層を３Ｎ−Ｈ₂ＳＯ₄（５６０ｍＬ）
でｐＨ３．０まで酸性化し、ＥｔＯＡｃ（５５０ｍＬ）
で抽出した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃを追加
して抽出した。有機層を集め、水で洗い、乾燥（ＭｇＳ
Ｏ₄）し、真空下に蒸発乾固して標記化合物（６６．１
ｇ、収率６５％）を得た： ＴＬＣ・Ｒｆ（Ｃ）０．４３。ＦＤ−ＭＳ４０８
（Ｍ⁺）。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ１．４２（ｓ，９
Ｈ），１．６１〜１．９１（ｍ，４Ｈ），３．２３〜
３．４１（ｍ，２Ｈ），４．１７（ｄ，１Ｈ），５．２
１（ｓ，２Ｈ），５．６２（ｄ，１Ｈ），７．３０〜
７．４２（ｍ，６Ｈ），８．２７（ｍ，１Ｈ）。

【００３５】Ｂ）Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム −１０℃に冷却したＢｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ＯＨ
（Ａ）（６６．０ｇ、０．１６２モル）の無水ＴＨＦ
（２３０ｍＬ）溶液にＮ−メチルモルホリン（１８．７
ｍＬ、１．０５ｅｑ）、続いてクロロギ酸イソブチル
（２２．５ｍＬ、１．０５ｅｑ）を添加した。反応物を
−１０℃で５分間撹拌し、トリエチルアミン（２３．５
ｍＬ、１．０５ｅｑ）を添加した。反応物を−１０℃で
１時間および室温で１時間撹拌後、反応物を氷水１Ｌに
注入した。得られた沈殿を濾取し、冷水で洗浄し、真空
下に乾燥した。生成物をＥｔＯＡｃから結晶化して標記
化合物を白色固体（３８．０５ｇ、収率６０％）として
得た： ＴＬＣ・Ｒｆ（Ａ）０．７７。ＦＤ−ＭＳ３９１（ＭＨ
⁺）。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ１．４８（ｓ，９Ｈ），１．
７８〜１．９８（ｍ，２Ｈ），２．５０（ｍ，１Ｈ），
３．４１（ｍ，１Ｈ），４．４３（ｍ，１Ｈ），４．９
０（ｍ，１Ｈ），５．１６（ｓ，２Ｈ），５．２７
（ｍ，１Ｈ），７．２８〜７．４５（ｍ，６Ｈ），９．
４１（ｍ，１Ｈ），９．６８（ｍ，１Ｈ）。

【００３６】Ｃ）ＨＣｌ・Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム ＨＣｌ（ｇ）飽和ＥｔＯＡｃ（７．２Ｌ）溶液を−１０
℃でＢｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム（Ｂ）（６４
１ｇ、１．６４モル）のＣＨ₂Ｃｌ₂（３Ｌ）溶液に３０
分間にわたり滴加した。反応物を−１０℃で１時間撹拌
し、徐々に（３時間）室温まで温めた。ジエチルエーテ
ル（１２Ｌ）を添加し、沈殿を濾取し、ジエチルエーテ
ルで洗浄し、真空下に乾燥して標記化合物（５８０ｇ）
を得た：ＴＬＣ・Ｒｆ（Ｃ）０．２９。ＦＤ−ＭＳ２９
１（ＭＨ⁺）。

【００３７】Ｄ）Ｎ^α−ジフェニルメチレン−ＤＬ−フ
ェニルグリシン・メチルエステル 室温でベンゾフェノンイミン（５３．８ｇ、２９７ミリ
モル）の塩化メチレン（５００ｍＬ）溶液にＤＬ−フェ
ニルグリシンメチルエステル塩酸塩（５９．９ｇ、２９
７ミリモル）を添加し、反応物を４８時間撹拌した。反
応混合物を水（２００ｍＬ）で３回洗浄し、有機層を分
離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾過し、真空下に濃縮し
て透明な油状物を得た。この油状物をペンタンから結晶
化して標記化合物（９８．５ｇ、収率１００％）を得
た： ＦＡＢ−ＭＳ３３０（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₂Ｈ₁₉ＮＯ₂として計算値：Ｃ，８０．２
２；Ｈ，５．８１；Ｎ，４．２５。実験値：Ｃ，８０．
５０；Ｈ，５．９３；Ｎ，４．１４。

【００３８】Ｅ）Ｎ^α−ジフェニルメチレン−ＤＬ−
（α−メチル）−フェニルグリシン・メチルエステル Ｎ^α−ジフェニルメチレン−ＤＬ−フェニルグリシン・
メチルエステル（Ｄ）（１４．８ｇ、４４．８ミリモ
ル）の無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液を１８−クラウン
−６（１１．８ｇ、４４．８ミリモル）、水素化カリウ
ム（１１．２ｇ、６７．３ミリモル）、ＴＨＦ（１００
ｍＬ）の混合物中に不活性雰囲気下に滴加した。反応物
にヨウ化メチル（６．０ｍＬ、８９．７ミリモル）のＴ
ＨＦ（２０ｍＬ）溶液を滴加した。反応物をさらに１．
５時間室温で撹拌した。反応物にＤ、ＨＯＡｃ（７．０
ｍＬ）、水（２５ｍＬ）およびＴＨＦ（３０ｍＬ）を含
む溶液を滴加した。反応物を酢酸エチルと水で希釈し、
有機層を分離し、水で３回洗い、乾燥（ＭｇＳＯ₄）
し、濾過した。濾液を真空下に濃縮して油状物を得、こ
れをヘキサンから結晶化して標記化合物（１０．２ｇ、
収率６６％）を得た：ＦＡＢ−ＭＳ３４４（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₃Ｈ₂₁ＮＯ₂として計算値：Ｃ，８０．４
４；Ｈ，６．１５；Ｎ，４．０８。実験値：Ｃ，８０．
４０；Ｈ，６．２６；Ｎ，４．０３。

【００３９】Ｆ）ＤＬ−（α−メチル）フェニルグリシ
ン Ｎ^α−ジフェニルメチレン−ＤＬ−（α−メチル）−フ
ェニルグリシン・メチルエステル（Ｅ）（７２．４ｇ、
２１１ミリモル）の５Ｎ−ＨＣｌ（４００ｍＬ）溶液を
還流（２４時間）した。溶液を室温まで冷却し、濾過
し、濾液のｐＨを希ＮＨ₄ＯＨ溶液で５．８に調整し
た。水性溶液を結晶化が開始するまで真空下に濃縮し
た。反応物を５℃に一夜保存し、沈殿を濾取し、真空下
に乾燥して標記化合物（２２ｇ、収率６３％）を得た： ＦＡＢ−ＭＳ１６６（ＭＨ⁺）。

【００４０】Ｇ）Ｄ−（α−メチル）フェニルグリシン ＤＬ−（α−メチル）フェニルグリシン（Ｆ）（８７
ｇ、４３１．４ミリモル）の水溶液を５Ｎ−ＮａＯＨで
ｐＨ６．０に調整した。沈殿を濾取し、乾燥して白色固
体８２ｇを得た。固体（８２ｇ）を９６％ギ酸（７５０
ｍＬ）に懸濁し、反応混合物に無水酢酸（２００ｍＬ、
４３１．４ミリモル）を徐々に添加した。反応物を室温
で３０分間撹拌し、溶液を真空下に濃縮して油状物とし
た。油状物をＥｔＯＡｃ（１５００ｍＬ）に溶解し、水
で３回洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）した後、濾過した。
濾液を真空下に濃縮し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから結晶
化してＮ^α−ホルミル−ＤＬ−（α−メチル）−フェニ
ルグリシン（７７．９ｇ、９３％）の白色固体を得た。
このＮ^α−ホルミル−ＤＬ−（α−メチル）−フェニル
グリシン（７７．３ｇ、４００ミリモル）をＥｔＯＡｃ
（４５０ｍＬ）およびＥｔＯＨ（５０ｍＬ）中に溶解し
た。この溶液にキニン（６８．１８ｇ、２１０ミリモ
ル）とジエチルエーテル（１０００ｍＬ）とを添加し
た。溶液を室温に維持（２４時間）した。得られた結晶
性物質を濾過し、母液を真空下に濃縮して白色固体とし
た。白色固体をＥｔＯＡｃに懸濁し、１．５Ｎ−クエン
酸、水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾過した。濾
液を真空下に濃縮してＮ^α−ホルミル−Ｄ−（α−メチ
ル）−フェニルグリシン（２６．３ｇ、収率６７％）の
白色固体とした。［α］_D＝−６１°（ｃ＝０．５／Ｍ
ｅＯＨ）。このＮ^α−ホルミル−Ｄ−（α−メチル）−
フェニルグリシン（２５ｇ、１２４ミリモル）を２Ｎ−
ＨＣｌ（１３０ｍＬ）に懸濁し、反応物を還流（２時
間）した。反応混合物を室温まで冷却し、水性溶液を結
晶化が開始するまで真空下に濃縮した。沈殿を集め、真
空下に乾燥して純粋な標記化合物（１８．６ｇ、収率７
４％）を得た。

【００４１】Ｈ）１−メチルインドール−２−カルボニ
ル−Ｄ−（α−メチル）フェニルグリシン Ｄ−（α−メチル）フェニルグリシン（Ｇ）（２．０１
ｇ、１０ミリモル）の水溶液に２Ｎ−ＮａＯＨを添加し
てｐＨを６．５に調整し、溶液を凍結乾燥した。固体を
ＤＭＦ（３０ｍＬ）、ビス（トリメチルシリル）アセト
アミド（３．７ｍＬ、１５ミリモル）に懸濁し、１−メ
チルインドール−２−カルボン酸ペンタフルオロフェニ
ルエステル（３．４１ｇ、１０ミリモル）を反応物に添
加した。反応混合物を６０℃で撹拌（２４時間）し、真
空下に濃縮して油状物とした。残渣を水（１００ｍ
Ｌ）、ジエチルエーテル（５０ｍＬ）に溶解し、２Ｎ−
ＮａＯＨでｐＨを９．０に調整した。水層を分離し、Ｅ
ｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）を添加し、溶液を５Ｎ−ＨＣｌ
でｐＨ２．８まで酸性化した。有機層を分離し、乾燥し
（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、真空下に濃縮して標記化合物
の無晶形固体（２．２７ｇ、収率７０％）とした： ＦＡＢ−ＭＳ３２３（ＭＨ⁺）。

【００４２】Ｉ）１−メチルインドール−２−カルボニ
ル−Ｄ−（α−メチル）フェニルグリシニル−Ａｚｔ−
ＯＨ １−メチルインドール−２−カルボニル−Ｄ−（α−メ
チル）フェニルグリシン（Ｈ）（２．２ｇ、６．９ミリ
モル）のＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）溶液に２，４，５−ト
リクロロフェノール（１．６５ｇ、８．３ミリモル）、
ＤＣＣ（１．７２ｇ、８．３ミリモル）を添加し、０℃
に冷却した。反応物を０℃で１時間および室温で１．５
時間撹拌した。得られた沈殿を濾去し、母液を真空下に
濃縮して油状物とした。得られた油状物をピリジン（３
５ｍＬ）に溶解し、反応混合物にＬ−アゼチジン−２−
カルボン酸（０．７ｇ、６．９ミリモル）およびトリエ
チルアミン（０．９７ｍＬ、６．９ミリモル）を添加し
た。反応物を室温で撹拌（２４時間）した後、ピリジン
を真空下に除去して油状物とした。残渣を水（１００ｍ
Ｌ）とジエチルエーテル（５０ｍＬ）とに溶解し、溶液
のｐＨを２Ｎ−ＮａＯＨで９．０に調整した。水層を分
離し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）を添加し、３Ｎ−ＨＣ
ｌで溶液をｐＨ３．０に調整した。有機層を分離し、乾
燥し（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、濾液を真空下に蒸発して
粗製標記化合物の無晶形固体（２．３ｇ）とした。この
粗製固体（２．３ｇ）を段階溶出（ＣＨＣｌ₃１００か
らＣＨＣｌ₃−ＭｅＯＨ７０：３０）を使用するシリカ
ゲル上クロマトグラフィーにより精製して純標記化合物
を無晶形固体（０．８１ｇ、収率２９％）として得た：
ＦＤ−ＭＳ４０６（ＭＨ⁺）。

【００４３】Ｊ）１−メチルインドール−２−カルボニ
ル−Ｄ−（α−メチル）フェニルグリシニル−Ａｚｔ−
Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム フラスコ１に１−メチルインドール−２−カルボニル−
Ｄ−（α−メチル）フェニルグリシニル−Ａｚｔ−ＯＨ
（Ｉ）（０．５１ｇ、１．５ミリモル）をＤＭＦ（１０
ｍＬ）に溶解し、−１５℃に冷却し、Ｎ−メチルモルホ
リン（０．１７ｍＬ、１．５５ミリモル）、続いてクロ
ロギ酸イソブチル（０．１９ｍＬ、１．４１ミリモル）
を加えた。反応混合物を−１５℃で２分間撹拌した。フ
ラスコ２中でＨＣｌ・Ａｒｇ（Ｚ）−ラクタム（Ｃ）
（０．４６ｇ、１．４１ミリモル）をＤＭＦ（１０ｍ
Ｌ）に溶解し、０℃に冷却し、ジイソプロピルエチルア
ミン（０．２７ｍＬ、１．５５ミリモル）を添加した。
反応混合物を０℃で２分間撹拌した。フラスコ２の内容
物をフラスコ１に添加し、反応混合物を４時間（−１５
℃）、続いて室温で２４時間撹拌した。１Ｎ−ＮａＨＣ
Ｏ₃（２ｍＬ）溶液を加え、反応混合物を真空下に濃縮
した。残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（５０ｍ
Ｌ）に溶解した。有機層を分離し、１Ｎ−ＮａＨＣ
Ｏ₃、水と０．１Ｎ−ＨＣｌで順次に洗浄した。有機層
を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾過し、真空下に蒸発して標
記化合物の無晶形固体（０．８８ｇ、収率９２％）とし
た： ＴＬＣ・Ｒｆ（Ａ）０．７４。ＦＡＢ−ＭＳ６７８（Ｍ
Ｈ⁺）。

【００４４】Ｋ）１−メチルインドール−２−カルボニ
ル−Ｄ−（α−メチル）フェニルグリシニル−Ａｚｔ−
Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ １−メチルインドール−２−カルボニル−Ｄ−（α−メ
チル）フェニルグリシニル−Ａｚｔ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）
−ラクタム（Ｊ）（０．８１ｇ、１．１９ミリモル）の
撹拌、冷（−７０℃）無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に窒
素雰囲気下に１Ｍ−水素化アルミニウムリチウムのＴＨ
Ｆ（１．２ｍＬ、１．２ミリモル）溶液を添加した。反
応物を−７０℃で３０分間撹拌した。ＴＨＦ（５ｍＬ）
の０．５Ｎ−Ｈ₂ＳＯ₄（５ｍＬ）溶液を反応物に滴加し
た。反応物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（５０ｍ
Ｌ）で希釈した。有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）
し、濾過し、真空下に濃縮乾固して無晶形固体（０．７
６ｇ）を得た。固体をエタノール（１００ｍＬ）、水
（２５ｍＬ）および１Ｎ−ＨＣｌ（１．６７ｍＬ、１．
６７ミリモル）に溶解し、５％Ｐｄ／Ｃ触媒（０．５
ｇ）の存在下に常温、常圧下に水素化した。反応終了
後、触媒を濾去した。濾液を１００ｍＬまで真空下に濃
縮し、凍結乾燥した。白色固体を水に溶解し、ミリポア
０．５μｍ濾板を通して濾過し、凍結乾燥して純標記化
合物（０．４４５ｇ、収率６４％）を得た：ＦＡＢ−Ｍ
Ｓ５４６（ＭＨ⁺）。 ［α］_D＝−４２．９°（ｃ＝０．５／０．０１Ｎ−Ｈ
Ｃｌ）。

【００４５】実施例２ Ｄ−プロリニル−（α−ベンジ
ル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン−アルデヒド二
塩酸塩二水和物の製造

【化１５】 Ａ）Ｎ−Ｃｂｚ−Ｐｒｏ−ＯＭｅ Ｎ−Ｃｂｚ−プロリン（１４０ｇ、５６２ミリモル）の
メタノール（８５０ｍＬ）溶液にｐ−トルエンスルホン
酸一水和物（５ｇ、２６ミリモル）を加えた。溶液を加
熱還流し、撹拌を１２時間継続した。加熱マントルを除
去し、室温まで冷却後、溶媒をロータリーエバポレータ
で除去した。残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）に溶解
し、飽和ＮａＨＣＯ₃（３００ｍＬ）で２回および食塩
水（２００ｍＬ）で２回洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、
濾過し、濃縮して無色油状物（１２９ｇ、収率８８％）
を得た： ＦＤ−ＭＳ２６３（Ｍ⁺）。 元素分析：Ｃ₁₄Ｈ₁₇ＮＯ₄として計算値：Ｃ，６３．８
７；Ｈ，６．５１；Ｎ，５．３２。実験値：Ｃ，６４．
０３；Ｈ，６．５６；Ｎ，５．２８。

【００４６】Ｂ）Ｎ−Ｃｂｚ−Ｄ，Ｌ−Ｐｒｏ−（α−
ベンジル）−ＯＭｅ −７８℃の０．５Ｍ−カリウムヘキサメチルジシラジド
のトルエン溶液（２００ｍＬ、１００ミリモル）に、Ｎ
₂下にＮ−Ｃｂｚ−Ｐｒｏ−ＯＭｅのテトラヒドロフラ
ン（１５０ｍＬ）溶液を滴下漏斗から１時間にわたって
添加した。次にこの混合物に臭化ベンジル（１１．９ｍ
Ｌ、１００ミリモル）のテトラヒドロフラン溶液（５０
ｍＬ）を別の滴下漏斗から１５分間にわたって添加し
た。２０時間撹拌した後、冷浴を去り、１Ｎ−クエン酸
（１００ｍＬ）を添加した。次に溶液を真空下に約１０
０ｍＬ容まで濃縮し、次に酢酸エチル（３００ｍＬ）と
水（２００ｍＬ）とに分配した。有機層を次に１Ｎ−ク
エン酸（１００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ₃で２回、食塩
水で２回洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、真空下
に濃縮してコハク色の油状物を得た。油状物を次にシリ
カゲル上でクロマトグラフし、ヘキサンから２０％酢酸
エチル／ヘキサンまでの勾配で溶出した。ＴＬＣで判定
して生成物を含む画分を集め、濃縮して無色油状物（２
６．９ｇ、収率７６％）を得た：¹ ＨＮＭＲ。

【００４７】Ｃ）Ｎ−Ｃｂｚ−Ｄ，Ｌ−Ｐｒｏ−（α−
ベンジル）−ＯＨ Ｎ−Ｃｂｚ−Ｄ，Ｌ−Ｐｒｏ−（α−ベンジル）−ＯＭ
ｅ（２６．９ｇ、７６ミリモル）のｐ−ジオキサン（２
００ｍＬ）溶液にＬｉＯＨ・Ｈ₂Ｏ（１２．８ｇ、３０
４ミリモル）の水（１００ｍＬ）溶液を添加した。溶液
を加熱還流し、１２時間撹拌を継続した。加熱マントル
を次に除去し、室温まで冷却した後、ロータリーエバポ
レータで溶媒を除去した。残渣を水（３００ｍＬ）に溶
解し、ジエチルエーテル（２００ｍＬ）で洗浄した。水
層を次に１Ｎ−クエン酸で酸性化し、ジエチルエーテル
（３００ｍＬ）で３回抽出した。エーテル抽出物を集
め、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、濃縮して白色固体
（２３．９ｇ、収率９２％）を得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ３４０（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₀Ｈ₂₁ＮＯ₄として計算値：Ｃ，７０．７
８；Ｈ，６．２４；Ｎ，４．１３。実験値：Ｃ，７１．
００；Ｈ，６．３８；Ｎ，４．１７。

【００４８】Ｄ）Ｎ−Ｃｂｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−（α−ベン
ジル）−Ｐｒｏ−ＯＭｅ Ｎ−Ｃｂｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−（α−ベンジル）−ＯＨ（２
３ｇ、６８ミリモル）、Ｐｒｏ−ＯＭｅ・ＨＣｌ（１４
ｇ、８５ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾー
ル（１１．４ｇ、８５ミリモル）およびＮ，Ｎ−ジイソ
プロピルエチルアミン（３５．４ｍＬ、２０３ミリモ
ル）のジクロロメタン（４００ｍＬ）溶液に１−（３−
ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド
塩酸塩（１６．２ｇ、８５ミリモル）を添加した。１２
時間撹拌後、溶媒を真空下に除去した。残渣を酢酸エチ
ル（５００ｍＬ）に溶解し、１Ｎ−クエン酸（２００ｍ
Ｌ）で２回、飽和ＮａＨＣＯ₃水で２回および食塩水で
２回洗浄した。酢酸エチルをロータリーエバポレーショ
ンで除去して黄色油状物を得た。この油状物をクロマト
グラフし、ヘキサンから３０％酢酸エチル／ヘキサンま
での勾配溶媒で溶出した。高Ｒｆジアステレオマー（Ｔ
ＬＣ・Ｒｆ０．３８、１０：１クロロホルム：メタノー
ル）のみを含む画分を集め、濃縮して白色結晶性固体
（１０．５ｇ、３４％）を得た。続いて、このジアステ
レオマーの構造および立体化学を単結晶Ｘ線回折の分析
によってＮ−Ｃｂｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−（α−ベンジル）−
Ｐｒｏ−ＯＭｅであると証明した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ４５０（Ｍ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₆Ｈ₃₀Ｎ₂Ｏ₅として計算値：Ｃ，６９．３
１；Ｈ，６．７１；Ｎ，６．２２。実験値：Ｃ，６９．
１８；Ｈ，６．７３；Ｎ，６．２５。

【００４９】Ｅ）Ｎ−Ｃｂｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−（α−ベン
ジル）−Ｐｒｏ−ＯＨ Ｎ−Ｃｂｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−（α−ベンジル）−Ｐｒｏ−
ＯＭｅ（８ｇ、１７．８ミリモル）のｐ−ジオキサン
（２００ｍＬ）溶液を激しく撹拌しつつ、これにＬｉＯ
Ｈ・Ｈ₂Ｏ（３ｇ、７１ミリモル）の水（１００ｍＬ）
溶液を添加した。１２時間後、溶液を真空下に５０ｍＬ
容まで濃縮し、水（１００ｍＬ）で薄め、ジエチルエー
テル（１５０ｍＬ）で２回抽出した。５Ｎ−ＨＣｌ水で
水層をｐＨ２に調整し、得られた沈殿を濾取し、水洗
し、乾燥して白色固体（４．２ｇ、収率５４％）を得
た。水層を集め、酢酸エチル（２５０ｍＬ）で２回抽出
し、得られた有機層を食塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、
Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濾過し、濃縮して同一の生成物を
別に３．２ｇ（収率４１％）を得た（合計収率９５
％）：¹ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ４３７（Ｍ
Ｈ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₅Ｈ₂₈Ｎ₂Ｏ₅として計算値：Ｃ，６８．７
９；Ｈ，６．４７；Ｎ，６．４２。実験値：Ｃ，６８．
５１；Ｈ，６．５１；Ｎ，６．４５。

【００５０】Ｆ）Ｄ−Ｐｒｏ−（α−ベンジル）−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ−Ｈ・２ＨＣｌ 実施例１−Ｊと１−Ｋに記載したものと実質的に均等な
方法によって、ＬＡＨを−７８℃で用いる代わりにＬｉ
Ａｌ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）₃Ｈを−２３℃で用いてＤ−Ｐｒ
ｏ−（α−ベンジル）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・２ＨＣｌ
二水和物１．３ｇをＮ−Ｃｂｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−（α−ベ
ンジル）−Ｐｒｏ−ＯＨから製造した。ＲＰＨＰＬＣに
よる精製は不要であった。¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ４４３（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₃Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₃・２．５ＨＣｌ・２Ｈ₂Ｏと
して計算値：Ｃ，４８．４９；Ｈ，７．１６；Ｎ，１
４．７５。実験値：Ｃ，４８．８４；Ｈ，７．０５；
Ｎ，１４．４８。

【００５１】実施例３ プロリニル−（α−ベンジル）
−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド二塩酸塩
の製造

【化１６】 Ａ）Ｎ−Ｃｂｚ−Ｐｒｏ−（α−ベンジル）−Ｐｒｏ−
ＯＭｅ Ｎ−Ｃｂｚ−Ｐｒｏ（α−ベンジル）−Ｐｒｏ−ＯＭｅ
は実施例２−Ｄで製造した。黄色油状物のシリカゲルク
ロマトグラフィー後、低Ｒｆの物質（ＴＬＣ・Ｒｆ０．
３１、クロロホルム：メタノール１０：１）を含む画分
を集め、濃縮して白色泡状物（９．６ｇ、収率３１％）
を得、これをＮ−Ｃｂｚ−Ｐｒｏ−（α−ベンジル）−
Ｐｒｏ−ＯＭｅであると同定した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ４５０（Ｍ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₆Ｈ₃₀Ｎ₂Ｏ₅として計算値：Ｃ，６９．３
１；Ｈ，６．７１；Ｎ，６．２２。実験値：Ｃ，６９．
２５；Ｈ，６．９３；Ｎ，６．１６。

【００５２】Ｂ）Ｐｒｏ（α−ベンジル）−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−Ｈ・２ＨＣｌ 実施例２−Ｅと２−Ｆに記載したものと実質的に均等な
方法によって、２．０ｇのＰｒｏ（α−ベンジル）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・２ＨＣｌ二水和物をＮ−Ｃｂｚ−Ｐ
ｒｏ−（α−ベンジル）−Ｐｒｏ−ＯＭｅから製造し
た。ＲＰＨＰＬＣによる精製は不要であった。¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ４４３（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₃Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₃・３ＨＣｌ・２．５Ｈ₂Ｏと
して計算値：Ｃ，４６．２８；Ｈ，７．０９；Ｎ，１
４．０８。実験値：Ｃ，４６．６７；Ｈ，７．１３；
Ｎ，１３．７５。

【００５３】実施例４ アゼチジニル（α−ベンジル）
−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド二塩酸塩
の製造

【化１７】 Ａ）Ａｚｔ（α−ベンジル）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・２
ＨＣｌ 実施例１−Ａおよび２に記載したものと実質的に均等な
方法により、１．５ｇのＡｚｔ（α−ベンジル）−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ−Ｈ・２ＨＣｌをアゼチジン−２−カルボン
酸から製造した。ＲＰＨＰＬＣによる精製は不要であっ
た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ４２９（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₂Ｈ₃₂Ｎ₆Ｏ₃・２．５ＨＣｌ・２Ｈ₂Ｏと
して計算値：Ｃ，４７．５５；Ｈ，６．９８；Ｎ，１
５．１２。実験値：Ｃ，４７．２１；Ｈ，６．６２；
Ｎ，１４．８３。

【００５４】実施例５ Ｎ−エトキシカルボニル−Ｄ−
フェニルアラニル（α−メチル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ
−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化１８】 Ａ）ＥｔＯＣＯ−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−ＯＨ Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−ＯＨ（７．５ｇ、４２ミ
リモル）のテトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）懸濁液を
撹拌しながら、これにＮ，Ｏ−ビス（トリメチルシリ
ル）アセトアミド（１２．８ｇ、６２．８ミリモル）を
添加した。溶液が透明化した後に溶液を０℃に冷却し、
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．４ｇ、４２
ミリモル）、続いてクロロギ酸エチル（４．５ｇ、４２
ミリモル）を添加した。２時間後、水（１００ｍＬ）を
添加し、次に有機溶媒を真空下に除去した。水層を１Ｎ
−ＮａＯＨで希釈し、ジエチルエーテルで２回洗った。
水層を次に濃ＨＣｌでｐＨ２まで酸性化し、酢酸エチル
で３回抽出した。酢酸エチル抽出物を集め、乾燥（Ｎａ
₂ＳＯ₄）し、濾過し、真空下に濃縮して白色固体１０．
３ｇ（９８％収率）を得た：¹ ＨＮＭＲ。

【００５５】Ｂ）ＥｔＯＣＯ−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍ
ｅ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ ＥｔＯＣＯ−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−ＯＨ（１
０．３ｇ、４１ミリモル）、ＨＯＢＴ（５．５ｇ、４１
ミリモル）、Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ・ＨＣｌ（９．９ｇ、４
１ミリモル）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミ
ン（１５．９ｇ、１２３ミリモル）のジメチルホルムア
ミド（２００ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、これに
１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカル
ボジイミド・ＨＣｌ（８．６ｇ、４５ミリモル）を添加
した。１６時間撹拌後、溶媒を真空下に除去し、残渣を
酢酸エチル（５００ｍＬ）に溶解した。有機層を０．１
Ｎ−ＨＣｌで３回、飽和ＮａＨＣＯ₃水で３回および食
塩水で１回洗浄した。有機層を次に乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）
し、濾過し、真空下に濃縮した。残渣をシリカゲル上ク
ロマトグラフし、１：１−酢酸エチル：ヘキサンで溶出
して生成物を含有する画分（ＴＬＣで判断して）を集
め、真空下に濃縮して白色泡状物１３．５ｇ（収率７５
％）を得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ４３８（Ｍ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₀Ｎ₂Ｏ₅として計算値：Ｃ，６８．４
７；Ｈ，６．９０；Ｎ，６．３９。実験値：Ｃ，６８．
２０；Ｈ，７．０９；Ｎ，６．２８。

【００５６】Ｃ）ＥｔＯＣＯ−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍ
ｅ）−Ｐｒｏ−ＯＨ ＥｔＯＣＯ−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ｏ
Ｂｚｌ（１３．２ｇ、３０ミリモル）のｐ−ジオキサン
（２５０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、これにＬｉＯＨ・
Ｈ₂Ｏ（６．３ｇ、１５１ミリモル）の水（１２５ｍ
Ｌ）溶液を添加した。２．５時間撹拌後、溶媒を真空下
に除去し、残渣を水で希釈し、ジエチルエーテルで３回
洗浄した。水層を次に濃ＨＣｌでｐＨ２とし、酢酸エチ
ルで３回抽出した。酢酸エチル抽出物を集めて乾燥（Ｎ
ａ₂ＳＯ₄）し、濾過し、真空下に濃縮して白色固体１
０．７ｇを得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ３４９（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₁₈Ｈ₂₄Ｎ₂Ｏ₅として計算値：Ｃ，６２．０
５；Ｈ，６．９４；Ｎ，８．０４。実験値：Ｃ，６２．
２９；Ｈ，６．９８；Ｎ，８．１２。

【００５７】Ｄ）Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ＯＨ 三頚フラスコ内でＢｏｃ−Ａｒｇ（ＨＣｌ）−ＯＨ（８
２．１ｇ、２５０ミリモル）を５Ｎ−ＮａＯＨ（２４０
ｍＬ）に溶解した。反応混合物を−５℃に冷却し、５Ｎ
−ＮａＯＨ（２５０ｍＬ）でｐＨを１３．２〜１３．５
に維持しながらクロロギ酸ベンジル（１４３ｍＬ、１．
０モル）を滴加（５５分間）した。反応混合物を−５℃
でさらに１時間撹拌し、水（１００ｍＬ）とジエチルエ
ーテル（５００ｍＬ）とで希釈した。水層を分離し、ジ
エチルエーテル（５００ｍＬ）で２回抽出した。水層を
次に３Ｎ−Ｈ₂ＳＯ₄（５６０ｍＬ）でｐＨ３．０まで酸
性化し、酢酸エチル（５５０ｍＬ）で抽出した。水層を
分離し、酢酸エチルで１回抽出した。酢酸エチル層を集
め、水洗し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、真空下に濃縮して
白色固体６６．１ｇ（収率６５％）を得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ４０８（Ｍ⁺）。

【００５８】Ｅ）Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ＯＨ（６６．０ｇ、０．１
６２モル）をテトラヒドロフラン（２３０ｍＬ）に溶解
し、−１０℃に冷却した。この溶液にＮ−メチルモルホ
リン（１８．７ｍＬ、０．１７モル）、続いてクロロギ
酸イソブチル（２２．５ｍＬ、０．１７モル）を添加し
た。−１０℃で５分間撹拌後、トリエチルアミン（２
３．５ｍＬ、０．１７モル）を添加した。さらに−１０
℃で１時間後、混合物を室温まで温め、撹拌を室温で１
時間継続した。反応混合物を次に氷−水１Ｌに注入し、
得られた沈殿を濾取し、冷水で洗浄し、真空下に乾燥し
た。生成物を酢酸エチルから結晶化して白色固体３８ｇ
（収率６０％）を得た：¹ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ３９１
（ＭＨ⁺）。

【００５９】Ｆ）２ＨＣｌ・Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタ
ム ＨＣｌ（ｇ）を飽和した酢酸エチル（７．２Ｌ）を−１
０℃でジクロロメタン（３Ｌ）に溶解したＢｏｃ−Ａｒ
ｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム（６４１ｇ、１．６４モル）の
溶液に３０分間にわたって滴加した。−１０℃で１時間
後、冷浴を除去し、溶液を３時間に室温まで温めた。ジ
エチルエーテル（１２Ｌ）を添加し、得られた沈殿を濾
過し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空乾燥して５８０
ｇ（収率９７％）を得た： ＦＤ−ＭＳ２９１（ＭＨ⁺）。

【００６０】Ｇ）ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）ラクタム フラスコ１内でＥｔＯＣＯ−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍ
ｅ）−Ｐｒｏ−ＯＨ（６ｇ、１７．２ミリモル）をジメ
チルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶解し、−１５℃に
冷却し、Ｎ−メチルモルホリン（１．７ｇ、１７．２ミ
リモル）、続いてクロロギ酸イソブチル（２．４ｇ、１
７．２ミリモル）を添加した。反応混合物を−１５℃で
１０分間撹拌した。フラスコ２内でＨＣｌ・Ａｒｇ（Ｃ
ｂｚ）ラクタム（６．３ｇ、１７．２ミリモル）をジメ
チルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却
し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．５ｇ、
３４．５ミリモル）を添加した。フラスコ２の内容物を
一度にフラスコ１に加え、反応混合物を室温まで徐々に
（２４時間）温めた。次に飽和ＮａＨＣＯ₃水（１００
ｍＬ）を添加し、溶媒を真空下に除去した。残渣を酢酸
エチルと水とに分配し、分液した。有機層を０．０１Ｎ
−ＨＣｌで２回、飽和ＮａＨＣＯ₃で２回および食塩水
で１回洗った。有機層を乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾液を
真空下に濃縮した。残渣をシリカゲル上でクロマトグラ
フし、酢酸エチルで溶出してジアステレオマー生成物を
分離した。純ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）ラクタム（ＴＬＣＲｆ＝０．５
７、酢酸エチル：アセトニトリル４：１）を含む画分を
集め、真空下に濃縮して白色泡状物１．３ｇを得た。純
ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃ
ｂｚ）ラクタム（ＴＬＣ・Ｒｆ＝０．４４、酢酸エチ
ル：アセトニトリル４：１）を含む画分を集め、真空下
に濃縮して白色泡状物１．７ｇを得た。ジアステレオマ
ー２種の混合物を含む画分を集めて真空下に濃縮して白
色泡状物３．３ｇを得た。混合物を再びクロマトグラフ
して各ジアステレオマーの純画分を集めて最初のクロマ
トグラフィーからのものと合し、真空下に濃縮してＥｔ
ＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃ
ｂｚ）ラクタム計２．１ｇ（２０％）およびＥｔＯＣＯ
−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）ラク
タム計３．７ｇ（３５％）を得た。ジアステレオマー型
トリペプチドの構造は暫定的に対応するアルギニンアル
デヒドの生物学的活性からの類推により決定した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ６２１（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₃₂Ｈ₄₀Ｎ₆Ｏ₇として計算値：Ｃ，６１．９
２；Ｈ，６．５０；Ｎ，１３．５４。実験値：Ｃ，６
１．７４；Ｈ，６．５１；Ｎ，１３．３３。

【００６１】Ｈ）ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
（Ｃｂｚ）ラクタム（２ｇ、３．２ミリモル）のテトラ
ヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液を−２３℃で撹拌しなが
ら、１Ｎ−ＬｉＡｌ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）₃Ｈ（４．８ｍ
Ｌ、４．８ミリモル）のテトラヒドロフラン溶液を徐々
に添加した。２．５時間後、反応混合物を冷１Ｎ−ＨＣ
ｌ（５０ｍＬ）の溶液に撹拌しながら注入した。次にこ
の溶液を水（１００ｍＬ）で希釈し、１：１テトラヒド
ロフラン：ヘキサン（２００ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチ
ルで２回とｎ−ブタノールで１回抽出した。酢酸エチル
およびｎ−ブタノール抽出物を集め、乾燥（Ｎａ₂Ｓ
Ｏ₄）し、真空下に濃縮した。残渣を次にエタノール
（７５ｍＬ）に溶解し、次に水（２５ｍＬ）と１Ｎ−Ｈ
Ｃｌ（１０ｍＬ）とを添加した。この撹拌溶液に次に５
％Ｐｄ炭（１ｇ）を添加した。次にこの溶液にＨ₂を
１．５時間通じ、次にＮ₂を通して反応を止め、硅藻土
床で濾過した。エタノールを真空下に３５℃で除去し、
次に残渣を水（２５ｍＬ）中に再溶解した。Ｂｉｏ・Ｒ
ａｄイオン交換樹脂（塩基型）で水溶液のｐＨを４．７
に調整し、濾過し、凍結乾燥して白色粉末１．１５ｇを
得た。生成物を次にＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ：
Ｂ）、４０分から８０／２０（Ａ：Ｂ）２８０分までの
勾配で上げ、４００分まで持続）により精製して純Ｅｔ
ＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ
・ＨＣｌ・二水和物０．４９ｇ（２９％）を得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ４８９（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₄Ｈ₃₆Ｎ₆Ｏ₅・ＨＣｌとして計算値：Ｃ，
５４．９１；Ｈ，７．１０；Ｎ，１６．０１；Ｃｌ，
６．７５。実験値：Ｃ，５４．８９；Ｈ，７．１２；
Ｎ，１５．８１；Ｃｌ，６．８７。

【００６２】実施例６ Ｎ−エチルスルホニル−Ｄ−フ
ェニアラニル（α−メチル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ−ア
ルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化１９】 Ａ）ＥｔＳＯ₂−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−ＯＨ Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−ＯＨ（９ｇ、５０ミリモ
ル）のテトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）懸濁液を撹拌
しながら、これにＮ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）ア
セトアミド（１５．３ｇ、７５ミリモル）を添加した。
透明化後、溶液を−７８℃に冷却し、Ｎ，Ｎ−ジイソプ
ロピルエチルアミン（６．５ｇ、５０ミリモル）、続い
て塩化エタンスルホニル（７．１ｇ、５５ミリモル）を
添加した。混合物を室温まで徐々に温めた。１６時間
後、水（１００ｍＬ）を添加し、次に有機溶媒を真空下
に除去した。水層を１Ｎ−ＮａＯＨで希釈し、ジエチル
エーテルで２回洗浄した。水層を次に濃ＨＣｌでｐＨ３
まで酸性化し、酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エチル
抽出液を集め、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾過し、真空下
に濃縮して白色泡状物４．９ｇ（３６％）を得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ２７１（Ｍ⁺）。 元素分析：Ｃ₁₂Ｈ₁₇ＮＯ₄Ｓとして計算値：Ｃ，５３．
１２；Ｈ，６．３２；Ｎ，５．１６。実験値：Ｃ，５
３．３６；Ｈ，６．１６；Ｎ，５．０８。

【００６３】Ｂ）ＥｔＳＯ₂−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例５−Ｂ、５−Ｃ、５−Ｇおよび５−Ｈに記載した
ものと実質的に均等な方法により、ＥｔＳＯ₂−Ｄ−Ｐ
ｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌを１．
１ｇ製造した。ジアステレオマーペプチドはラクタム段
階（実施例５−Ｇ参照）でシリカゲルクロマトグラフィ
ー（ＥｔＳＯ₂−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ（Ｃｂｚ）ラクタム、ＴＬＣ・Ｒｆ＝０．７５、
４：１酢酸エチル：アセトニトリル）で分離した。Ｅｔ
ＳＯ₂−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ
・ＨＣｌはＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ／Ｂ）４０分か
ら８０／２０（Ａ／Ｂ）２８０分まで上げ、４００分ま
で維持）で精製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５０９（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₃Ｈ₃₆Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・ＨＣｌとして計算値：
Ｃ，５０．６８；Ｈ，６．８４；Ｎ，１５．４２。実験
値：Ｃ，５０．５９；Ｈ，６．６７；Ｎ，１５．３５。

【００６４】実施例７ Ｎ−エトキシカルボニル−フェ
ニルアラニル（α−メチル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ−ア
ルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化２０】 ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ
・ＨＣｌ 実施例５−Ｈに記載したものと実質的に均等な方法によ
り、０．７８ｇ（４２％）のＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−
Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌをＥｔＯＣＯ−Ｐ
ｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）ラクタム
（ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
（Ｃｂｚ）ラクタムの製造は実施例５−Ｇを参照）から
製造した。ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−
Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ水和物はＲＰＨＰＬＣ（９５／５
（Ａ／Ｂ）４０分から８０／２０（Ａ／Ｂ）２８０分ま
で、４００分まで維持）により精製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ４８９（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₄Ｈ₃₆Ｎ₆Ｏ₅・１．１ＨＣｌ・０．５Ｈ₂
Ｏとして計算値：Ｃ，５３．６１；Ｈ，７．１４；Ｎ，
１５．６３；Ｃｌ，７．２５。実験値：Ｃ，５４．０
１；Ｈ，６．７０；Ｎ，１５．１２；Ｃｌ，７．１８。

【００６５】実施例８ Ｎ−（１−メチルインドリル−
２−カルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル（α−メチ
ル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド・二
塩酸塩の製造

【化２１】 Ａ）ＮＭＩ−ＯＰＦＦ Ｎ−メチルインドール−２−カルボン酸（２５ｇ、１４
３ミリモル）とペンタフルオロフェノール（３５．３
ｇ、１９２ミリモル）のテトラヒドロフラン（２５０ｍ
Ｌ）溶液に１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−
エチルカルボジイミド・ＨＣｌ（３０．５ｇ、１５９ミ
リモル）を添加した。５時間撹拌後、溶液をジクロロメ
タン（２００ｍＬ）およびヘキサン（３００ｍＬ）で希
釈した。有機層を１Ｎ−ＮａＨＳＯ₄（１００ｍＬ）で
１回、１Ｎ−Ｋ₂ＣＯ₃（１００ｍＬ）で３回および食塩
水で２回洗浄した。有機層を乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾
過し、真空下に濃縮して黄褐色固体を得、これをヘキサ
ンから再結晶して灰白色固体３８ｇ（７８％収率）を得
た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ３４１（Ｍ⁺）。 元素分析：Ｃ₁₆Ｈ₈ＮＯ₂Ｆ₅として計算値：Ｃ，５６．
３２；Ｈ，２．３６；Ｎ，４．１０。実験値：Ｃ，５
６．５３；Ｈ，２．３７；Ｎ，４．２０。

【００６６】Ｂ）ＮＭＩ−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）
−ＯＨ Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−ＯＨ（２．５ｇ、１４ミ
リモル）のジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）懸濁液を
撹拌しつつ、これにＮ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）
アセトアミド（４．３ｇ、２１ミリモル）を添加した。
溶液の透明化後に、ＮＭＩ−ＯＰＦＦ（５ｇ、１４．７
ミリモル）を添加し、反応物を６５℃に加熱した。１６
時間後、加熱マントルを去り、水（２０ｍＬ）を添加し
た。次に溶媒を真空下に除去し、残渣を１Ｎ−ＮａＯＨ
に溶解し、ジエチルエーテルで３回洗浄した。水層を次
に５Ｎ−ＨＣｌでｐＨ３まで酸性化し、酢酸エチルで３
回抽出した。酢酸エチル抽出液を集め、乾燥（Ｎａ₂Ｓ
Ｏ₄）し、濾過し、真空下に濃縮して黄色油状物を得、
これをシリカゲル上クロマトグラフし、７０％酢酸エチ
ル：ヘキサン（０．５％酢酸）で溶出した。ＴＬＣで判
断して生成物を含有する画分を集め、真空下に濃縮し
た。残渣をトルエンに溶解し、（酢酸を除くために）３
回真空下に濃縮して白色固体４ｇ（８５％収率）を得
た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ３３６（Ｍ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₀Ｈ₂₀Ｎ₂Ｏ₃として計算値：Ｃ，７１．４
１；Ｈ，５．９９；Ｎ，８．３３。実験値：Ｃ，７１．
６６；Ｈ，６．１５；Ｎ，８．０５。

【００６７】Ｃ）ＮＭＩ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例５−Ｂ、５−Ｃ、５−Ｇおよび５−Ｈに記載した
ものと実質的に均等な方法により、ＮＭＩ−Ｄ−Ｐｈｅ
（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌを１．４ｇ
製造した。ジアステレオマーペプチドをラクタム段階
（実施例５−Ｇ参照）でシリカゲルクロマトグラフィー
（ＮＭＩ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
（Ｃｂｚ）ラクタム、ＴＬＣ・Ｒｆ＝０．３５、酢酸エ
チル）により分離した。ＮＭＩ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍ
ｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌはＲＰＨＰＬＣ（９
５／５（Ａ／Ｂ）から７０／３０（Ａ／Ｂ）１８０分ま
で、４００分まで維持）により精製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５７４（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₃₁Ｈ₃₉Ｎ₇Ｏ₄・ＨＣｌとして計算値：Ｃ，
６１．０２；Ｈ，６．６１；Ｎ，１６．０７；Ｃｌ，
５．８１。実験値：Ｃ，６１．３０；Ｈ，６．４０；
Ｎ，１５．９８；Ｃｌ，６．０９。

【００６８】実施例９ １−（エチルスルホニルアミ
ノ）シクロヘクソイル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニ
ンアルデヒド塩酸塩の製造

【化２２】 １−（エチルスルホニルアミノ）シクロヘキソイルＰｒ
ｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例６に記載したものに実質的に均等な方法により、
０．９５ｇの１−（エチルスルホニルアミノ）シクロヘ
キソイル−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ水和物を１−ア
ミノシクロヘキサン−１−カルボン酸から製造した。１
−（エチルスルホニルアミノ）シクロヘキソイル−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ水和物はＲＰＨＰＬＣ（９８／
２（Ａ／Ｂ）から８０／２０（Ａ／Ｂ）まで、２４０
分）により精製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ４７３（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₀Ｈ₃₆Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・ＨＣｌ・Ｈ₂Ｏとして計
算値：Ｃ，４５．５８；Ｈ，７．４６；Ｎ，１５．９
４；Ｃｌ，６．７３。実験値：Ｃ，４５．４９；Ｈ，
７．３７；Ｎ，１５．６５；Ｃｌ，６．５４。

【００６９】実施例１０ １−（１−メチルインドリル
−２−カルボニルアミノ）シクロヘキソイル−Ｌ−プロ
リニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化２３】 １−（Ｎ−メチルインドリル−２−カルボニルアミノ）
シクロヘキソイル−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例８に記載したものと実質的に均等な方法により、
１．９ｇの１−（Ｎ−メチルインドリル−２−カルボニ
ルアミノ）シクロヘキソイル−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・Ｈ
Ｃｌ・水和物を１−アミノシクロヘキサン−１−カルボ
ン酸から製造した。ＲＰＨＰＬＣによる精製は不要であ
った。¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５３８（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₈Ｈ₃₉Ｎ₇Ｏ₄・２ＨＣｌ・１．５Ｈ₂Ｏと
して計算値：Ｃ，５２．７５；Ｈ，６．９６；Ｎ，１
５．３８。実験値：Ｃ，５３．１１；Ｈ，７．０３；
Ｎ，１５．１７。

【００７０】実施例１１ Ｎ−エチルスルホニルフェニ
ルアラニル（α−メチル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アル
ギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化２４】 Ｎ−ＥｔＳＯ₂−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−Ｈ・ＨＣｌ 実施例６に記載したものと実質的に均等な方法によっ
て、０．７３ｇのＥｔＳＯ₂−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ二水和物をＥｔＳＯ₂−Ｐｈ
ｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）ラクタム
（ＴＬＣ・Ｒｆ＝０．６６、酢酸エチル：アセトニトリ
ル４：１）から製造した。ＥｔＳＯ₂−Ｐｈｅ（α−Ｍ
ｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌはＲＰＨＰＬＣ（９
８／２（Ａ／Ｂ）から８５／１５（Ａ／Ｂ）まで、１８
０分）により精製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５０９（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₃Ｈ₃₆Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・ＨＣｌ・２Ｈ₂Ｏとして
計算値：Ｃ，４７．５４；Ｈ，７．１１；Ｎ，１４．４
６；Ｃｌ，６．１０。実験値：Ｃ，４７．８０；Ｈ，
６．６５；Ｎ，１４．２３；Ｃｌ，６．６７。

【００７１】実施例１２ Ｎ−（１−メチルインドリル
−２−カルボニル）−フェニルアラニル（α−メチル）
−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド塩酸塩の
製造

【化２５】 Ｎ−メチルインドリル−２−カルボニル−Ｐｈｅ（α−
Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例８に記載したものと実質的に均等な方法により、
０．２９ｇのＮ−メチルインドリル−２−カルボニル−
Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ・水
和物をＮ−メチルインドリル−２−カルボニル−Ｐｈｅ
（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）ラクタム（Ｔ
ＬＣ・Ｒｆ＝０．３０、酢酸エチル）から製造した。Ｎ
ＭＩ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣ
ｌ・水和物はＲＰＨＰＬＣ（９５／５（Ａ／Ｂ）から７
０／３０（Ａ／Ｂ）まで、１８０分、４００分まで維
持）により精製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５７４（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₃₁Ｈ₃₉Ｎ₇Ｏ₄・１．１ＨＣｌ・１．５Ｈ₂
Ｏとして計算値：Ｃ，５８．１０；Ｈ，６．７８；Ｎ，
１５．３０；Ｃｌ，６．０９。実験値：Ｃ，５８．２
５；Ｈ，６．５５；Ｎ，１５．００；Ｃｌ，６．２５。

【００７２】実施例１３ Ｎ−エトキシカルボニル−Ｄ
−フェニルアラニル（α−エチル）−Ｌ−プロリニル−
Ｌ−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化２６】 Ａ）Ｎ−（ジフェニルメチレン）Ｐｈｅ−ＯＭｅ Ｐｈｅ−ＯＭｅ・ＨＣｌ（８９．３ｇ、４１４ミリモ
ル）のジクロロメタン（５００ｍＬ）懸濁液を撹拌しつ
つ、これにベンゾフェノンイミン（７５ｇ、４１４ミリ
モル）のジクロロメタン（４００ｍＬ）溶液を添加し
た。１６時間撹拌した後、溶液を濾過し、水で洗い、乾
燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、真空下に濃縮した。残渣をジエチ
ルエーテルから再結晶して白色固体１０７ｇ（７５％収
率）を得た： ¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ３４３（Ｍ⁺）。

【００７３】Ｂ）Ｎ−（ジフェニルメチレン）Ｐｈｅ
（α−Ｅｔ）−ＯＭｅ カリウムｔ−ブトキシド（９ｇ、８０ミリモル）のテト
ラヒドロフラン（５００ｍＬ）溶液を−７８℃で撹拌し
つつ、これにＮ−（ジフェニルメチレン）Ｐｈｅ−ＯＭ
ｅ（２５ｇ、７３ミリモル）のテトラヒドロフラン（２
５０ｍＬ）溶液を添加した。１０分後、ヨウ化エチル
（１２．５ｇ、８０ミリモル）のテトラヒドロフラン
（２００ｍＬ）溶液を添加した。次に冷浴を除去し、溶
液を１６時間撹拌した。溶液を次に濾過し、溶媒を真空
下に除去した。残渣をジエチルエーテルに溶解し、水で
２回、食塩水で１回洗浄し、次に乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）
し、濾過し、真空下に濃縮した。残渣をシリカゲル上で
クロマトグラフし、５％酢酸エチル：ヘキサンから１０
％酢酸エチル：ヘキサンまでの段階勾配で溶出した。Ｔ
ＬＣで判断して生成物を含む画分を集め、真空下に濃縮
して１８．１ｇ（７０％収率）の濃黄色油状物を得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ３７１（Ｍ⁺）。

【００７４】Ｃ）Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−ＯＭｅ Ｎ−（ジフェニルメチレン）−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−Ｏ
Ｍｅ（１７．６ｇ、４７．４ミリモル）のメタノール
（２００ｍＬ）溶液を撹拌しつつ、これに５Ｎ−ＨＣｌ
（１５ｍＬ、７５ミリモル）を添加した。３時間後、溶
媒を真空下に除去し、残渣を水に溶解し、ジエチルエー
テルで３回洗浄した。水層を次に固体のＮａＨＣＯ₃で
ｐＨ１０に調整し、酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エ
チル抽出液を集め、次に乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾過
し、真空下に濃縮して８．７５ｇ（８９％収率）の透明
な無色油状物を得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ２０８（ＭＨ⁺）。

【００７５】Ｄ）Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−ＯＨ Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−ＯＭｅ（２４ｇ、１１６
ミリモル）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）溶液を
撹拌しつつ、５Ｎ−ＮａＯＨ（２４ｍＬ、１２０ミリモ
ル）、続いて水（５０ｍＬ）およびメタノール（５０ｍ
Ｌ）を添加し、溶液を加熱還流した。１６時間後、溶液
を室温に冷却し、溶媒を真空下に除去した。残渣を水に
溶解し、ジエチルエーテルで３回洗浄した。５Ｎ−ＨＣ
ｌでｐＨを６に調整し、溶液を真空下に約５０ｍＬ容ま
で濃縮した。沈殿を濾取し、水で洗浄し、乾燥して１
７．５ｇ（７８％収率）の白色固体を得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ１９４（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₁₁Ｈ₁₅ＮＯ₂として計算値：Ｃ，６８．３
７；Ｈ，７．８２；Ｎ，７．２５。実験値：Ｃ，６８．
５８；Ｈ，７．６５；Ｎ，７．４１。

【００７６】Ｅ）ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例５に記載したものと実質的に均等な方法によっ
て、２．６５ｇのＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌエタノーレートをＤ，Ｌ
−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−ＯＨから製造した。ＥｔＯＣＯ
−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣ
ｌエタノーレートのＲＰＨＰＬＣによる精製は必要がな
かった。ジアステレオマーペプチドはジペプチドエステ
ル段階（実施例５−Ｂ参照）でシリカゲルクロマトグラ
フィー（ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−Ｐｒｏ
−ＯＢｚｌ；ＴＬＣ・Ｒｆ＝０．６６、５０％酢酸エチ
ル：ヘキサン）により分離した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５０３（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₆Ｏ₅・１．１ＨＣｌ・０．５Ｅｔ
ＯＨとして計算値：Ｃ，５５．２０；Ｈ，７．５０；
Ｎ，１４．８５；Ｃｌ，６．８９。実験値：Ｃ，５５．
１９；Ｈ，７．１３；Ｎ，１４．５５；Ｃｌ，６．７
９。

【００７７】実施例１４ Ｎ−エトキシカルボニルフェ
ニルアラニル（α−エチル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ−ア
ルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化２７】 ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ
・ＨＣｌ 実施例１３に記載したものと実質的に均等な方法によ
り、２．１５ｇのＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌエタノーレートをＥｔＯＣＯ
−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ（ＴＬＣ・Ｒ
ｆ＝０．７７、５０％酢酸エチル：ヘキサン）から製造
した。ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−Ｅｔ）−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ−Ｈ・ＨＣｌ・エタノーレートのＲＰＨＰＬＣによる
精製は必要なかった：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５０３（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₆Ｏ₅・２ＨＣｌ・０．５ＥｔＯＨ
として計算値：Ｃ，５２．１７；Ｈ，７．２４；Ｎ，１
４．０４。実験値：Ｃ，５２．３３；Ｈ，６．９６；
Ｎ，１３．９９。

【００７８】実施例１５ Ｎ−エトキシカルボニル−Ｄ
−フェニルアラニル（α−ｎ−プロピル）−Ｌ−プロリ
ニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化２８】 Ａ）Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｐｒ）−ＯＭｅ 実施例１３−Ａおよび１３−Ｂに記載したものと実質的
に均等な方法により、１０．１ｇ（６３％）のＤ，Ｌ−
Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｐｒ）−ＯＭｅをＮ−（ジフェニルメ
チレン）−Ｐｈｅ−ＯＭｅとヨウ化ｎ−プロピルとから
製造した：¹ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ２２２（Ｍ
Ｈ⁺）。

【００７９】Ｂ）ＥｔＯＣＯ−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−ｎ
−Ｐｒ）−ＯＨ Ｄ，Ｌ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｐｒ）−ＯＭｅ（９ｇ、４１
ミリモル）のテトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）溶液を
０℃で撹拌しつつ、これにＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチ
ルアミン（５．３ｇ、４１ミリモル）、続いてクロロギ
酸エチル（４．４ｇ、４１ミリモル）を添加した。３．
５時間後、溶媒を真空下に除去し、残渣を酢酸エチルに
溶解した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ₃で２回、食塩水で
１回洗浄し、次に乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾過し、真空
下に濃縮した。残渣をテトラヒドロフラン（１２０ｍ
Ｌ）に溶解し、この溶液を激しく撹拌しながら、これに
５Ｎ−ＮａＯＨ（１１ｍＬ、５５ミリモル）、続いてメ
タノール（３０ｍＬ）を添加した。溶液を５５℃に加熱
し、４８時間撹拌した。溶液を次に室温まで冷却し、溶
媒を真空下に除去した。残渣を水に溶解し、ジエチルエ
ーテルで２回洗浄した。水層を濃ＨＣｌでｐＨ３に調整
し、酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エチル抽出液を集
め、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、濾過し、真空下に濃縮して
１０．３ｇ（９１％）の黄色固体を得た：¹ ＨＮＭＲ。ＦＤ−ＭＳ・ｍ／ｅ２７９（Ｍ⁺）。

【００８０】Ｃ）ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｐ
ｒ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例５−Ｂ、５−Ｃ、５−Ｇおよび５−Ｈに記載した
ものと実質的に均等な方法により、０．６９ｇのＥｔＯ
ＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｐｒ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−
Ｈ・ＨＣｌを製造した。ジアステレオマーペプチドはジ
ペプチドエステル段階（実施例５−Ｂ参照）でシリカゲ
ルクロマトグラフィー（ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−
ｎ−Ｐｒ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ；ＴＬＣ・Ｒｆ＝０．７
７、５０％酢酸エチル：ヘキサン）により分離した。Ｅ
ｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｐｒ）−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ−Ｈ・ＨＣｌはＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ／Ｂ）６
０分から８０／２０（Ａ／Ｂ）３００分まで）により精
製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５１７（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₆Ｈ₄₀Ｎ₆Ｏ₅・ＨＣｌとして計算値：Ｃ，
５６.４６；Ｈ，７.４７；Ｎ，１５.１９。実験値：
Ｃ，５６.２２；Ｈ，７.４１；Ｎ，１５.１１。

【００８１】実施例１６ Ｎ−エトキシカルボニルフェ
ニルアラニル（α−ｎ−プロピル）−Ｌ−プロリニル−
Ｌ−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化２９】 ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｐｒ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−Ｈ・ＨＣｌ 実施例１５に記載されたものと実質的に均等な方法によ
り、０．３４ｇのＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｐｒ）
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌをＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ
（α−ｎ−Ｐｒ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ（ＴＬＣ・Ｒｆ＝
０．６７、５０％酢酸エチル：ヘキサン）から製造し
た。ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｐｒ）−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−Ｈ・ＨＣｌはＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ／Ｂ）
６０分から８０／２０（Ａ／Ｂ）３００分まで）により
精製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５１７（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₆Ｈ₄₀Ｎ₆Ｏ₅・ＨＣｌとして計算値：Ｃ，
５６.４６；Ｈ，７.４７；Ｎ，１５.１９。実験値：
Ｃ，５６.７５；Ｈ，７.５５；Ｎ，１５.４７。

【００８２】実施例１７ Ｎ−エトキシカルボニル−Ｄ
−フェニルアラニル（α−ｎ−ブチル）−Ｌ−プロリニ
ル−Ｌ−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化３０】 ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｂｕ）−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例１５に記載されたものと実質的に均等な方法によ
り、２．２ｇのＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｂ
ｕ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌをＮ−（ジフェニル
メチレン）−Ｐｈｅ−ＯＭｅおよびヨウ化ｎ−ブチルか
ら出発して製造した。ジアステレオマーペプチドをジペ
プチドエステル段階で（ＥｔＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−
ｎ−Ｂｕ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ。ＴＬＣ・Ｒｆ＝０．８
６、５０％酢酸エチル：ヘキサン）シリカゲルクロマト
グラフィーにより分離（実施例５−Ｂ参照）した。Ｅｔ
ＯＣＯ−Ｄ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｂｕ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−Ｈ・ＨＣｌはＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ／Ｂ）６０
分から８５／１５（Ａ／Ｂ）３００分まで）により精製
した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５３１（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₇Ｈ₄₂Ｎ₆Ｏ₅・ＨＣｌとして計算値：Ｃ，
５７.１８；Ｈ，７.６４；Ｎ，１４.８２。実験値：
Ｃ，５７.３２；Ｈ，７.７４；Ｎ，１４.９５。

【００８３】実施例１８ Ｎ−エトキシカルボニルフェ
ニルアラニル（α−ｎ−ブチル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ
−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化３１】 ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｂｕ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−Ｈ・ＨＣｌ 実施例１７に記載されたものと実質的に均等な方法によ
り、１．４７ｇのＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｂｕ）
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌをＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ
（α−ｎ−Ｂｕ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ（ＴＬＣ・Ｒｆ＝
０．７４、５０％酢酸エチル：ヘキサン）から製造し
た。ＥｔＯＣＯ−Ｐｈｅ（α−ｎ−Ｂｕ）−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−Ｈ・ＨＣｌはＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ／Ｂ）
６０分から８５／１５（Ａ／Ｂ）３００分まで）により
精製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ５３１（ＭＨ⁺）。元
素分析：Ｃ₂₇Ｈ₄₂Ｎ₆Ｏ₅・ＨＣｌとして計算値：Ｃ，５
７．１８；Ｈ，７．６４；Ｎ，１４．８２。実験値：
Ｃ，５６．９２；Ｈ，７．５９；Ｎ，１４．７６。

【００８４】実施例１９ Ｎ−エチルスルホニル−
（Ｄ，Ｌ）−フェニルグリシル（α−メチル）−Ｌ−プ
ロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化３２】 ＥｔＳＯ₂−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｇ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例１５に記載されたものと実質的に均等な方法によ
り、０．２１ｇのＥｔＳＯ₂−Ｄ，Ｌ−Ｐｈｇ（α−Ｍ
ｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ水和物をＤ，Ｌ−Ｐ
ｈｇ−ＯＭｅ・ＨＣｌから出発し、ＥｔＯＣＯＣｌの代
わりにＥｔＳＯ₂Ｃｌを、ヨウ化ｎ−プロピルの代わり
にＣＨ₃Ｉを用いて製造した。ＥｔＳＯ₂−Ｄ，Ｌ−Ｐｈ
ｇ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ・水和物
はＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ／Ｂ）３０分から８０／
２０（Ａ／Ｂ）２４０分まで）によって精製した。この
合成経路の間ではジアステレオマーを分離できなかった
ので、生成物は異性体混合物として製造し、検定した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ４９５（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₂Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・１．２ＨＣｌ・Ｈ₂Ｏと
して計算値：Ｃ，４７．４９；Ｈ，６．７４；Ｎ，１
５．１０。実験値：Ｃ，４７．５０；Ｈ，６．４４；
Ｎ，１４．９１。

【００８５】実施例２０ Ｎ−エトキシカルボニルグリ
シニル（α，α−ジ−ｎ−ブチル）−Ｌ−プロリニル−
Ｌ−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化３３】 ＥｔＯＣＯ−Ｇｌｙ（α，α−ジ−ｎ−Ｂｕ）−Ｐｒｏ
−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ 実施例１５に記載されたものと実質的に均等な方法によ
り、１．４ｇのＥｔＯＣＯ−Ｇｌｙ（α，α−ジ−ｎ−
Ｂｕ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ水和物をＮ−（ジ
フェニルメチレン）Ｇｌｙ−ＯＥｔおよびヨウ化ｎ−ブ
チル２当量から出発して製造した。中間体ＥｔＯＣＯ−
Ｇｌｙ（α，α−ジ−ｎ−Ｂｕ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃ
ｂｚ）ラクタムの還元は還元剤として水素化アルミニウ
ムリチウムを−７８℃で用いること以外は実施例５−Ｇ
に記載されたものと同様な方法によって行った。ＥｔＯ
ＣＯ−Ｇｌｙ（α，α−ジ−ｎ−Ｂｕ）−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ−Ｈ・ＨＣｌ水和物はＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ／
Ｂ）６０分から８０／２０（Ａ／Ｂ）３２０分まで）に
より精製した：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ４９７（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₄Ｈ₄₄Ｎ₆Ｏ₅・１．２ＨＣｌ・Ｈ₂Ｏとし
て計算値：Ｃ，５１．６２；Ｈ，８．５２；Ｎ，１５．
０５；Ｃｌ，７．６２。実験値：Ｃ，５１．８２；Ｈ，
７．９１；Ｎ，１４．６９；Ｃｌ，７．７５。

【００８６】実施例２１ Ｎ−メチルスルホニル−Ｄ−
フェニルアラニル（α−メチル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ
−アルギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化３４】 ＭｅＳＯ₂−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−Ｈ・ＨＣｌ 実施例６に記載されたものと実質的に均等な方法によ
り、０．１６ｇのＭｅＳＯ₂−Ｄ−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ水和物をＥｔＳＯ₂Ｃｌ
の代わりにＭｅＳＯ₂Ｃｌを用いて製造した。ジアステ
レオマーペプチドはトリペプチドアルギニンアルデヒド
段階でＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ／Ｂ）８０分から８
５／１５（Ａ／Ｂ）３２０分まで）により分離した。立
体化学は実施例２１および実施例２２のトロンビン阻害
活性に基づいて暫定的に決めた：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ４９５（ＭＨ⁺）。 元素分析：Ｃ₂₂Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・１．１ＨＣｌ・Ｈ₂Ｏと
して計算値：Ｃ，４７．８１；Ｈ，６．７７；Ｎ，１
５．２０；Ｃｌ，７．０６。実験値：Ｃ，４７．７３；
Ｈ，６．４５；Ｎ，１５．２５；Ｃｌ，７．１２。

【００８７】実施例２２ Ｎ−メチルスルホニルフェニ
ルアラニル（α−メチル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アル
ギニンアルデヒド塩酸塩の製造

【化３５】 ＭｅＳＯ₂−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ
・ＨＣｌ 実施例６に記載されたものと実質的に均等な方法によ
り、０．１６ｇのＭｅＳＯ₂−Ｐｈｅ（α−Ｍｅ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・ＨＣｌ水和物をＥｔＳＯ₂Ｃｌの代
わりにＭｅＳＯ₂Ｃｌを用いて製造した。ジアステレオ
マーペプチドはトリペプチドアルギニンアルデヒド段階
でＲＰＨＰＬＣ（９８／２（Ａ／Ｂ）８０分から８５／
１５（Ａ／Ｂ）３２０分まで）により分離した。立体化
学は実施例２１および実施例２２のトロンビン阻害活性
に基づいて暫定的に決めた：¹ ＨＮＭＲ。ＦＡＢ−ＭＳ・ｍ／ｅ４９５（ＭＨ⁺）。元
素分析：Ｃ₂₂Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・１．１ＨＣｌ・Ｈ₂Ｏとし
て計算値：Ｃ，４７．８１；Ｈ，６．７７；Ｎ，１５．
２０；Ｃｌ，７．０６。実験値：Ｃ，４７．８１；Ｈ，
６．３８；Ｎ，１４．９６；Ｃｌ，７．０６。

【製剤】

【００８８】本発明の化合物は自然の体内血栓分解能力
を有意に妨害することなしに（本化合物は繊維素溶解に
は低い阻害効果を持つ）血液凝固に関する他のプロテイ
ナーゼおよび非酵素蛋白質と比べてトロンビンを選択的
に阻害するするものと信じられる。さらに、この選択性
は血栓溶解および繊維素溶解の実質的な妨害なしに血栓
溶解剤の使用を可能にするものと信じられる。本発明の
側面の一つにおいてはこの処置を必要とする哺乳類に有
効（トロンビン阻害）用量の式Ｉで示される化合物を投
与することを含む哺乳類のトロンビンを阻害する方法を
提供する。他の側面では、本発明はこの処置を必要とす
る哺乳類に有効（血栓塞栓症治療および／または予防
量）用量の式Ｉで示される化合物を投与することを含む
哺乳類の血栓塞栓症を処置する方法を提供する。他の側
面では、本発明は処置を必要とする哺乳類に有効（凝固
阻害）用量の式Ｉで示される化合物を投与することを含
む哺乳類の血液凝固を阻害する方法を提供する。本発明
の方法が意図する血栓阻害、凝固阻害および血栓塞栓症
処置は適切であれば医学的な治療および／または予防的
な処置の双方を含む。

【００８９】別の側面では、本発明はヒトまたは動物に
おいて、トロンビンの阻害を必要とする状況の処置に関
する。本発明の化合物はヒトを含む動物において血液お
よび組織内の血栓症および過凝固の処置または予防にお
いて有用であることが期待される。本化合物が潜在的な
有用性を持つ疾患は血液および組織における血栓症およ
び過凝固の処置または予防にある。本化合物が処置およ
び／または予防において潜在的な有用性を持つ疾患は、
静脈血栓症および肺塞栓症、心筋虚血症のような動脈血
栓症、心筋梗塞症、不安定狭心症、血栓症由来の発作お
よび末梢性動脈血栓症を含む。さらに、本化合物には冠
動脈疾患、脳動脈疾患および末梢性動脈疾患のような動
脈硬化症の予防に有用性が期待される。さらに、本化合
物には心筋梗塞における血栓溶解にも有用性が期待され
ている。さらに、本化合物には血栓溶解、経皮管腔間血
管形成術（ＰＴＣＡ）および冠バイパス手術後の再閉塞
への処置または予防における有用性が期待されている。
さらにマイクロ外科手術後の再血栓症の予防に有用性が
期待される。さらに、本化合物には人工の臓器および心
臓弁に関する抗凝固処置に有用性が期待される。さら
に、本化合物には血液透析および播種性静脈内凝固にお
ける抗凝固処置に有用性が期待される。さらに別の期待
される有用性はカテーテルおよび患者の生体内で使用さ
れる機械装置の洗浄において、および血液、血漿および
他の血液製剤に対する生体外抗凝固剤として有用性が期
待される。さらに、本化合物は転移を含む癌、関節炎お
よび糖尿病を含む炎症性疾患のような血液凝固が基本的
な寄与過程であるか、第二次病理の原因であろう疾患ま
たは障害において有用性が期待される。本抗凝固化合物
は経口的にまたは非経口的、たとえば静脈内点滴（ｉ
ｖ）、筋肉内注射（ｉｍ）または皮下に（ｓｃ）に、投
与される。

【００９０】治療的および／または予防的な効果を得る
ためにこの発明により投与される化合物の具体的用量は
勿論、例えば、投与される化合物、投与速度、投与経路
および処置される症状を含む、症例をめぐる個々の状況
により決定される。前記有用性の各々のための典型的な
日用量は約０．０１ｍｇ／ｋｇと約１０００ｍｇ／ｋｇ
との間である。用量範囲は、たとえば予防的な使用では
変化しうるし、毎日１回で投与しうるし、毎日３または
５回のような多回用量も適当でありうる。特殊な状況で
は、本発明の化合物は約０．０１ｍｇ／ｋｇ／時と約２
０ｍｇ／ｋｇ／時との間の速度、好ましくは約０．１ｍ
ｇ／ｋｇ／時と約５ｍｇ／ｋｇ／時との間の速度のｉｖ
点滴で投与される。また、本発明の方法は血栓溶解剤、
たとえば組織プラスミノーゲンアクティベータ（ｔ−Ｐ
Ａ）、修飾ｔ−ＰＡ、ストレプトキナーゼまたはウロキ
ナーゼとともに実用される。血塊の形成が起き、動脈ま
たは静脈が部分的または完全に閉鎖された時には通常血
栓分解剤を用いる。本発明の化合物はこの溶解剤の前ま
たは同時に、またはその使用後に投与され、好ましく
は、さらに血栓形成の再発を予防するためにアスピリン
と共に投与される。また、本発明の方法は血小板凝集を
阻止する血小板グリコプロテイン受容体（ＩＩｂ／ＩＩ
Ｉａ）拮抗剤とともに実用される。本発明の化合物は
（ＩＩｂ／ＩＩＩａ）拮抗剤の前または同時に、または
その使用後に血塊の発生または再発を予防するために投
与することができる。本発明の方法はアスピリンととも
に実用される。本発明の化合物はアスピリンの投与前ま
たは同時に、またはその使用後に血栓発生または再発を
予防するために投与することができる。前記のように、
好ましくは本発明の化合物は血栓溶解剤およびアスピリ
ンとともに投与される。

【００９１】この発明は前記治療方法における使用のた
めの医薬的製剤も提供する。本発明の医薬的製剤は式Ｉ
で示される化合物のトロンビン阻害有効量を医薬的に許
容しうる担体、添加剤または希釈剤とともに含む。経口
投与のためには抗血栓症化合物はゼラチンカプセル剤ま
たは結合剤、滑沢剤などのような添加剤を含みうる錠剤
に製剤化される。非経口的投与のためには抗血栓症剤
は、たとえば生理学的食塩水（０．９％）、５％デキス
トロース、リンゲル液などのような医薬的に許容しうる
希釈剤中に製剤化される。本発明の化合物は約０．１ｍ
ｇと約１０００ｍｇとの間の用量を含む単位用量製剤と
して製剤化することができる。本化合物は、例えば硫酸
塩、酢酸塩または燐酸塩のような、医薬的に許容しうる
塩の型であるのが好ましい。単位用量製剤の一例は５ｍ
ｇの本発明の化合物を医薬的に許容しうる塩として１０
ｍＬの無菌ガラスアンプル内に含む。単位用量製剤の他
の例は等張食塩水２０ｍＬを医薬的に許容しうる塩とし
ての本発明の化合物１０ｍｇを無菌アンプル内に含む。
本発明の化合物は経口、経直腸、経皮、皮下、静脈内、
筋肉内および鼻内を含む種々の経路で投与することがで
きる。本発明の化合物は好ましくは投与前に製剤化する
ことができる。本発明の別の態様は式Ｉで示される化合
物またはその医薬的に許容しうる塩または溶媒和物の有
効量を医薬的に許容しうる担体、希釈剤または添加剤と
共に含む医薬的製剤である。

【００９２】そのような製剤における活性成分はその製
剤で重量比０．１％から９９．９％を占める。「医薬的
に許容しうる」とは、担体、希釈剤または添加剤がその
製剤の他の成分に適合し、その処方に対して有害ではな
いことを意味する。本発明の医薬的製剤は周知の容易に
入手しうる添加剤を用いて公知の操作により製造され
る。この発明の組成物は患者に対して投与後に活性成分
の迅速的、持続的または遅延的な放出をもたらすように
当業界で周知の操作を採用して製剤化しうる。本発明の
組成物を造るに当り、活性成分は通常、担体と混合する
か、担体で希釈するか、またはカプセル、分包包装、紙
または他の容器の形でありうる担体内に封入されよう。
担体が希釈剤の役目をする時、これは固体、半−固体ま
たは液体物質でありうるが、これは活性成分のための基
剤、添加剤または媒体として作用する。そこで、本組成
物は錠剤、丸剤、粉末剤、ロゼンジ剤、オブラート剤、
分包包装剤、エリキシール剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シ
ラップ剤、エアロゾル剤（固体としてまたは液体媒体
中）、軟および硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、無菌注射
液剤、無菌包装粉末などのような形であることができ
る。

【製剤例】

【００９３】以下の製剤例は説明であって、如何なる意
味でも本発明の範囲を限定することを意図するものでは
ない。「活性成分」は、もちろん、式Ｉで示される化合
物またはその医薬的に許容しうる塩または溶媒和物を意
味する。製剤例１ 下記成分を用いて硬ゼラチンカプセルを製造
する：量（ｍｇ／カプセル） 活性成分 ２５０ 乾燥澱粉 ２００ ステアリン酸マグネシウム １０ 合計 ４６０ｍｇ

【００９４】製剤例２ 下記成分を用いて錠剤を製造す
る：量（ｍｇ／カプセル） 活性成分 ２５０ 微結晶セルロース ４００ 二酸化ケイ素 １０ ステアリン酸 ５ 合計 ６６５ｍｇ 各成分を混合、打錠して６６５ｍｇ重の錠剤を造る。

【００９５】製剤例３ 下記成分を含むエアロゾル液剤
を製造する： 活性化合物をエタノールと混合し、混合物をプロペラン
ト２２の一部に加え、−３０℃に冷却し、充填器に移
す。次に所要量をステンレス鋼容器に充填し、残りのプ
ロペラントで希釈する。次にバルブ部品を容器に取付け
る。

【００９６】製剤例４ 活性成分６０ｍｇを含む錠剤を
以下のようにして製造する： 活性成分 ６０ ｍｇ 澱粉 ４５ ｍｇ 微結晶セルロース ３５ ｍｇ ポリビニルピロリドン ４ ｍｇ （１０％水溶液として） ナトリウムカルボキシメチル澱粉 ４．５ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ０．５ｍｇ タルク １ ｍｇ 合計 １５０ ｍｇ 活性成分、澱粉およびセルロースを米局方４５番篩で篩
過し、よく混合する。ポリビニルピロリドン含有水溶液
を得られた粉末と混合し、次に混合物を米局方１４番篩
で篩過する。得られる顆粒を５０℃で乾燥し、米局方１
８番篩で篩過する。次にあらかじめ米局方６０番篩で篩
過しておいたナトリウムカルボキシメチル澱粉、ステア
リン酸マグネシウムおよびタルクを顆粒に加え、混合
後、打錠機で打錠して各１５０ｍｇ重の錠剤を得る。

【００９７】製剤例５ 活性成分８０ｍｇを含むカプセ
ル剤を以下のようにして製造する： 活性成分 ８０ ｍｇ 澱粉 ５９ ｍｇ 微結晶セルロース ５９ ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ２ ｍｇ 合計 ２００ ｍｇ 活性成分、セルロース、澱粉およびステアリン酸マグネ
シウムを混合し、米局方４５番篩を通し、２００ｍｇ量
を硬ゼラチンカプセルに充填する。

【００９８】製剤例６ 活性成分２２５ｍｇを含む坐剤
を以下のようにして製造する： 活性成分 ２２５ ｍｇ 飽和脂肪酸グリセリド ２０００ ｍｇ 合計 ２２２５ ｍｇ 活性成分を米局方６０番篩で篩過し、予め必要最小限の
熱量を用いて融解しておいた飽和脂肪酸グリセリドに懸
濁する。次に混合物を２ｇ容の坐剤金型に注入し、放冷
する。

【００９９】製剤例７ ５ｍＬ用量当り活性成分５０ｍ
ｇを含む懸濁剤を次のようにして製造する： 活性成分 ５０ｍｇ ナトリウムカルボキシメチルセルロース ５０ｍｇ シロップ １．２５ｍＬ 安息香酸液 ０．１０ｍＬ 矯味剤 適量 着色剤 適量 精製水を加えて合計 ５ ｍＬ 活性成分を米局方４５番篩で篩過し、ナトリウムカルボ
キシメチルセルロースおよびシラップと混合して軟らか
いペーストとする。安息香酸液、矯味剤および着色剤を
水の一部で希釈し、撹拌しながら添加する。次に十分量
の水を加え、所定容量とする。

【０１００】製剤例８ 静脈内製剤を以下のようにして
製造しうる： 活性成分 １００ ｍｇ 等張食塩水 １０００ ｍＬ 前記成分の溶液を一般的に毎分１ｍＬの速度で対象の静
脈内に投与する。

【作用】

【０１０１】本発明によって提供される化合物（式Ｉ）
は哺乳類におけるトロンビンの作用を選択的に阻害す
る。本発明の化合物が有効で、経口的に活性なトロンビ
ン阻害剤であることの性能は、次の検定１種またはそれ
以上で評価される。トロンビンの阻害は発色原基質であ
るＮ−ベンゾイルーＬ−フェニルアラニル−Ｌ−バリル
−Ｌ−アルギニル−ｐ−ニトロアニリド（Ｎ−ベンゾイ
ルーＬ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロ
アニリド）をトロンビンに加水分解させて検定法で測定
されるトロンビンのアミダーゼ活性の試験管内阻害によ
り証明される。この検定は次のように実施する：５０μ
Ｌの緩衝液（０．０３Ｍ−トリス、０．１５Ｍ−ＮａＣ
ｌ、ｐＨ７．４）、２５μＬのヒトのトロンビン液（精
製ヒトトロンビン、Ｅｎｚｙｍｅ・Ｒｅｓｅａｒｃｈ・
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｓｏｕｔｈ・Ｂｅｎｄ、イ
ンディアナ。８ＮＩＨ単位／ｍＬ）および２５μＬの被
検化合物溶液（５０％メタノール中、ｖ／ｖ）を混合す
る。次に１５０μＬの発色原基質の水溶液（０．２５ｍ
ｇ／ｍＬ）を添加し、基質の加水分解速度をｐ−ニトロ
アニリンの放出による４０５ｎｍの反応を監視して測定
する。標準曲線を遊離トロンビン濃度を加水分解速度に
対してプロットすることにより作成する。次に各検定で
テスト化合物について観測された加水分解速度を標準曲
線を用いて「遊離トロンビン」値に変換する。結合トロ
ンビン（テスト化合物に結合したもの）は各検定で観測
された遊離トロンビンの量を各検定で用いたトロンビン
の初期値から差引くことによって算出する。各検定にお
ける遊離の阻害剤の量は結合トロンビンのモル数を添加
した阻害剤（テスト化合物）のモル数から差引くことに
よって算出する。Ｋａｓｓ値はトロンビンとテスト化合
物（Ｉ）との間の反応のための仮の平衡定数である。

【数１】トロンビン ＋ Ｉ ⇔ トロンビン−Ｉ Ｋａｓｓ＝［トロンビン−Ｉ］÷［（トロンビン）×
（Ｉ）］ Ｋａｓｓ値をテスト化合物の全濃度範囲について算出
し、平均値をモル当りリットルの単位で報告する。

【０１０２】ヒトのトロンビンについて前記した操作に
実質的に従い、ヒトの他の血液凝固系セリンプロテアー
ゼを用い、フィブリン溶解系セリンプロテアーゼを用い
て、下記の適当な発色原基質について、本発明の化合物
の凝固因子セリンプロテアーゼおよびフィブリン溶解性
セリンプロテアーゼに関する選択性ならびにそれらがヒ
ト血漿血塊のフィブリノリシス阻害が実質的に存在しな
いことを評価する。ヒトのＸ、Ｘａ、ＩＸａ、ＸＩａお
よびＸＩＩａ因子はＥｎｚｙｍｅ・Ｒｅｓｅａｒｃｈ・
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、サウスベンド、インディア
ナから、ヒトのウロキナーゼはＬｅｏ・Ｐｈａｒｍａｃ
ｅｕｔｉｃａｌｓ、デンマークから購入し、組換え活性
化Ｃ蛋白（ａＰＣ）はイーライ・リリー社で実質的に米
国特許第４９８１９５２号に従って製造する。発色原基
質：Ｎ−ベンゾイル−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ
−ｐ−ニトロアニリド（Ｘａ因子用）、Ｎ−Ｃｂｚ−Ｄ
−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド（Ｘａ
因子の基質としてＩＸａ因子検定用）、ピログルタミル
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド（ＸＩａ因子用
およびａＰＣ用）、Ｈ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−
ｐ−ニトロアニリド（ＸＩＩａ因子用）およびピログル
タミル−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド（ウロキ
ナーゼ用）はＫａｂｉ・Ｖｉｔｒｕｍ、ストックホル
ム、スゥエーデンまたはＭｉｄｗｅｓｔ・Ｂｉｏｔｅｃ
ｈ，Ｆｉｓｈｅｒｓ、インディアナから購入する。牛ト
リプシンはＷｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ・Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｃａｌｓ、フリーホルド、ニュージャージーから、ヒト
の血漿カリクレインはＫａｂｉ・Ｖｉｔｒｕｍ、ストッ
クホルム、スゥエーデンから購入する。血漿カリクレイ
ン用の発色原基質Ｈ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−ｐ
−ニトロアニリドはＫａｂｉ・Ｖｉｔｒｕｍ、ストック
ホルム、スゥエーデンから購入する。ヒトのトロンビン
用およびトリプシン用の基質Ｎ−ベンゾイル−Ｐｈｅ−
Ｖａｌ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリドは本発明の化合物
のために前記した操作に従って既知のペプチド結合法を
用いて商業的に入手可能な反応剤から合成したか、また
はＭｉｄｗｅｓｔ・Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｆｉｓｈｅｒｓ、
インディアナから購入する。

【０１０３】ヒトのプラスミンはＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ
・Ｍａｎｎｈｅｉｍ、インディアナポリス、インディア
ナから購入し、ｎｔ−ＰＡは単鎖活性対照物としてＡｍ
ｅｒｉｃａｎ・Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ、グリニッチ、
コネチカットから購入し、修飾−ｔ−ＰＡ６（ｍｔ−Ｐ
Ａ６）はイ−ライ・リリー社で公知方法（Ｂｕｒｃｋな
ど、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６５巻、５１２０〜
５１７７頁（１９９０年）の操作により製造する。プラ
スミンの発色原基質Ｈ−Ｄ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−
ｐ−ニトロアニリドおよび組織プラスミノーゲン活性化
因子（ｔ−ＰＡ）基質Ｈ−Ｄ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−ｐ−ニトロアニリドはＫａｂｉ・Ｖｉｔｒｕｍ、スト
ックホルム、スゥエーデンから購入する。前記の発色原
基質で、３字の略号、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｐｒ
ｏ、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、ＬｅｕおよびＬｙｓは対
応するアミノ酸基イソロイシン、グルタミン酸、グリシ
ン、プロリン、アルギニン、フェニルアラニン、バリ
ン、ロイシンおよびリジンのそれぞれを示すために用い
る。次の表Ｉは式Ｉで示される指定した化合物で得られ
たＫａｓｓ値を表示する。

【表１】 Ｋａｓｓ（Ｌ／モル × １０⁶） 実施例No. ヒトトロンビン Ｘａ トリプシン プラスミン ｔ−ＰＡ 1 79 0.06 29 0.55 0.02 2 12 0.13 14 0.31 0.0034 3 350 0.27 43 0.77 0.0045 4 75 0.12 17 0.17 0.0028 5 75 0.044 2.4 0.059 0.00079 6 24 0.11 20 0.31 0.051 7 5.0 0.025 1.7 0.020 0.00072 8 25 0.013 1.3 0.0083 0.0022 9 3.2 0.036 0.42 0.010 0.00034 10 5.7 0.024 0.45 0.0071 0.0011 11 0.6 0.027 1.7 0.056 0.007 12 2.8 0.002 0.18 0.001 0.009 13 57 0.036 4.9 0.12 0.002 14 6.5 0.078 4.7 0.058 0.001 15 47 0.030 4.9 0.12 <0.001 16 38 0.077 7.3 0.074 <0.001 17 66 0.095 21 0.066 <0.001 18 47 0.088 15 0.13 0.001 19 430 0.49 42 1.2 0.023 20 24 0.22 38 0.24 0.010 21 31 0.23 28 0.56 0.027 22 2.1 0.033 1.4 0.031 0.0023

【０１０４】トロンビン阻害剤は好ましくはウロキナー
ゼ、組織プラスミノーゲンアクティベータ（ｔ−ＰＡ）
およびストレプトキナーゼにより誘発されるフィブリノ
シスを温存すべきである。これはストレプトキナーゼ、
ｔ−ＰＡまたはウロキナーゼ血栓溶解療法に対する補佐
剤としてのこれらの薬剤の治療的使用に対しておよび内
因性フィブリン溶解性−温存（ｔ−ＰＡおよびウロキナ
ーゼに関して）抗血栓症剤としてのこれらの薬剤の使用
に対して重要であろう。フィブリン溶解性プロテアーゼ
のアミダーゼ活性に関する阻害の欠如に加え、このよう
なフィブリン溶解系の温存は、各フィブリン分解性プラ
スミノーゲン活性化剤によるヒトの血漿血塊およびそれ
らの分解を使用して研究することができる。

【０１０５】材料 犬の血漿は無麻酔雑種犬（両性、Ｈａｚｅｌｔｏｎ−Ｌ
ＲＥ、カラマズー、ミシガン、米国）から静脈穿刺によ
り採取し、３．８％クエン酸塩に入れる。フィブリノー
ゲンは新鮮犬血漿から調製し、ヒトのフィブリノーゲン
はイン−デートＡＣＤヒト血液の画分Ｉ−２から公知操
作および指示書に従って調整する。Ｓｍｉｔｈ、Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ．Ｊ．、１８５巻、１〜１１頁（１９８０年）
およびＳｍｉｔｈなど、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１
１巻、２９５８〜２９６７頁（１９７２年）。ヒトのフ
ィブリノーゲン（９８％純／プラスミン不含）はＡｍｅ
ｒｉｃａｎ・Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ、グリニッチ、コ
ネチカットからのものである。フィブリノーゲンＩ−２
製品の放射能標識は以前に報告されたようにして行う。
Ｓｍｉｔｈなど、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１１巻、
２９５８〜２９６７頁（１９７２年）。ウロキナーゼは
Ｌｅｏ・Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、デンマーク
から２２００プラウ単位／バイアルを購入する。ストレ
プトキナーゼはＨｏｅｃｈｓｔ−Ｒｏｕｓｓｅｌ・Ｐｈ
ａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ソマービル、ニュージャ
ージーから購入する。

【０１０６】方法−ｔ−ＰＡによるヒト血漿血塊の分解に対する効果 ヒトの血漿血塊はマイクロ試験管内で５０μＬトロンビ
ン（７３ＮＩＨ単位／ｍＬ）を０．０２２９ｕＣｉ−１
２５ヨード標識フィブリノーゲンを含むヒトの血漿（１
００μＬ）に加えて形成する。血塊分解は血塊に５０μ
Ｌのウロキナーゼまたはストレプトキナーゼ（５０、１
００または１０００単位／ｍＬ）で重積し、室温で２０
時間インキュベートすることによって研究する。インキ
ュベーション後、試験管をＢｅｃｋｍａｎ・Ｍｉｃｒｏ
ｆｕｇｅ内で遠心分離する。２５μＬの上清液を１．０
ｍＬ容の０．０３Ｍ−トリス／０．１５Ｍ−ＮａＣｌ緩
衝液に添加し、ガンマ計数を行う。計数対照である１０
０％分解はトロンビン（および置換すべき緩衝液）を除
外することによって得る。トロンビン阻害剤である化合
物を１、５および１０μｇ／ｍＬの濃度で重積溶液中に
入れて予想されるフィブリン分解の阻害について評価す
る。概略のＩＣ₅₀値の近似値はフィブリン分解剤の指定
濃度で５０％分解を表すであろう値のデータ値から直線
的外挿により予測する。

【０１０７】抗凝固活性 物質 犬血漿およびラット血漿は無麻酔雑種犬（両性、Ｈａｚ
ｅｌｔｏｎ−ＬＲＥ、カラマゾー、ミシガン、米国）ま
たは麻酔したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｈ
ａｒｌａｎ・Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ社、インデ
ィアナポリス、インディアナ、米国）から静脈穿刺によ
り採取し、３．８％クエン酸塩に入れる。フィブリノー
ゲンはインデートＡＣＤヒト血液の画分Ｉ−２から公知
操作および指示書に従って調製する。Ｓｍｉｔｈ、Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ．Ｊ．、１８５巻、１〜１１頁（１９８０
年）およびＳｍｉｔｈなど、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ、１１巻、２９５８〜２９６７頁（１９７２年）。ヒ
トのフィブリノーゲンは（９８％純／プラスミン不含品
として）はＡｍｅｒｉｃａｎ・Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ
ａ、グリニッチ、コネチカットから購入する。凝固剤で
あるＡＣＴＩＮ、トロンボプラスチンおよびヒトの血漿
はＢａｘｔｅｒ・Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社、Ｄａｄｅ・
Ｄｉｖｉｓｉｏｎ、マイアミ、フロリダからのものであ
る。Ｐａｒｋｅ−Ｄａｖｉｓ（Ａｎｎ・Ａｒｂｏｒ．ミ
シガン）からの牛トロンビンを血漿中の凝固検定法のた
めに用いる。

【０１０８】方法 抗凝固測定 凝固検定操作は前記の通りである。Ｓｍｉｔｈなど、Ｔ
ｈｒｏｍｂｏｓｉｓ・Ｒｅｓｅａｒｃｈ、５０巻、１６
３〜１７４頁（１９８８年）。全ての凝固検定測定には
ＣｏＡＳｃｒｅｅｎｅｒ凝固装置（Ａｍｅｒｉｃａｎ・
ＬＡＢｏｒ社）を用いる。プロトロンビン時間（ＰＴ）
は０．０５ｍＬの食塩水と０．０５ｍＬのトロンボプラ
スチン−Ｃ試薬とを被検血漿０．０５ｍＬに添加して測
定する。活性化した部分トロンボプラスチン時間（ＡＰ
ＴＴ）は０．０５ｍＬの被検血漿を０．０５ｍＬのアク
チン試薬と１２０秒間インキュベートし、続いて０．０
５ｍＬのＣａＣｌ₂（０．０２Ｍ）を添加することのよ
って測定する。トロンビン時間（ＴＴ）は０．０５ｍＬ
の食塩水と０．０５ｍＬのトロンビン（１０ＮＩＨ単位
／ｍＬ）とを０．０５ｍＬの被検血漿に添加することに
よって測定する。式Ｉで示される化合物を広範囲の濃度
にわたってヒトまたは動物の血漿に添加してＡＰＴＴ、
ＰＴおよびＴＴ検定について延長効果を測定する。直線
的外挿を行って各検定で凝固時間を倍加するに必要な濃
度を予測する。

【表２】 動物 雄性のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（３５０〜
４２５ｇ、Ｈａｒｌａｎ・Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅ
ｙ社、インディアナポリス、ＩＮ）をキシラジン（２０
ｍｇ／ｋｇ、皮下）とケタミン（１２０ｍｇ／ｋｇ、皮
下）とで麻酔し、温水ブランケット（３７℃）に固定し
た。頚動脈血管にカニューレを点滴用に挿入した。

【０１０９】動静脈シャントモデル 左頚静脈および右頚動脈に２０ｃｍ長のポリエチレンＰ
Ｒ６０チュービングのカニューレを挿入した。内腔内に
綿糸（５ｃｍ）を持つ大きい管（ＰＥ１９０）の６ｃｍ
中央断面を長断面間に摩擦固定して動静脈シャント回路
を完成した。血液をシャント内に１５分間にわたって循
環した後に、糸を注意深く取出して秤量した。濡れた糸
の重量を糸と血栓の合計重量から差引いた（Ｊ．Ｒ．Ｓ
ｍｉｔｈ、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、７７巻：
２９頁、１９８２年参照）。

【０１１０】動脈損傷のＦｅＣｌ₃モデル 頚動脈を中心線腹側頚管切開により隔離する。各動脈の
下に熱電対を置き、血管温度を帯チャート記録紙上に連
続的に記録する。チューブのカフ（０．０５８ＩＤ×
０．０７７ＯＤ×４ｍｍ、Ｂａｘｔｅｒ医術級シリコ
ン）を長軸方向に切断し、頚動脈の周りの熱電対の直上
に置く。ＦｅＣｌ₃６水和物を水に溶かし、濃度（２０
％）をＦｅＣｌ₃のみの実際の重量で表示する。動脈を
損傷して血栓症を誘発するために、カフに２．８５μＬ
をピペットで入れて、熱電対プローブ上の動脈を潜らせ
る。動脈閉塞は迅速な温度低下で示される。閉塞までの
時間を分単位で示し、ＦｅＣｌ₃の添加と血管温度の迅
速な温度低下との間の経過時間を表す（Ｋ．Ｄ．Ｋｕｒ
ｚ、Ｔｈｒｏｍｂ．Ｒｅｓ．、６０巻：２６９頁、１９
９０年参照）。

【０１１１】突発性血栓分解モデル 試験管内データはペプチドトロンビン阻害剤がトロンビ
ンを阻害するが、高濃度ではプラスミンおよび組織プラ
スミノーゲンアクティベータのような他のセリン・プロ
テアーゼも阻害するかもしれないことを示唆する。これ
らの化合物が生体内でフィブリノリシスも阻害するかど
うかを評価するため、突発性トロンボリシスの速度を肺
循環に標識全血血塊を移植することにより、測定する。
ラット血液（１ｍＬ）をウシトロンビン（４ＩＵ、Ｐａ
ｒｋｅ・Ｄａｖｉｓ）および¹²⁵Ｉ−ヒトフィブリノー
ゲン（５μＣｉ、ＩＣＮ）と迅速に混合し、直ちにシリ
コン処理管に取り、３７℃で１時間インキュベートす
る。熟成した血栓を管から取出し、切断して１ｃｍ断片
とし、ノルマル食塩水で３回洗浄し、各断片をガンマ計
数管でカウントする。カウント数の判った断片をカテー
テル内に吸引し、これを続いて頚静脈に移植する。カテ
ーテルのチップを右心房の近くまで進め、血塊を浮かせ
て肺循環内に入れる。移植１時間後、心臓および肺臓を
取出し、別々にカウントする。血栓溶解を次の百分率で
表示する：

【数２】％トロンボリシス＝［（注入ｃｐｍ−肺臓ｃｐ
ｍ）］÷ （注入ｃｐｍ）×１００ 移植した血塊のフィブリノリシス溶解は時間依存的に発
生する（Ｊ．Ｐ．Ｃｌｏｚｅｌ、Ｃａｒｄｉｏｖａｓ．
Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、１２巻：５２０頁、１９８８年
参照）。

【０１１２】凝固パラメータ 血漿トロンビン時間（ＴＴ）および活性化部分トロンボ
プラスチン時間（ＡＰＴＴ）をフィブロメータで測定す
る。血液を頚静脈カテーテルから採取し、クエン酸ナト
リウム（３．８％、血液９部に対して１部）を含む注射
筒に集める。ＴＴを測定するために、ラットプラズマ
（０．１ｍＬ）を食塩水（０．１ｍＬ）およびウシのト
ロンビン（０．１ｍＬ、３０Ｕ／ｍＬトリス緩衝液、Ｐ
ａｒｋｅ・Ｄａｖｉｓ）と３７℃で混合する。ＡＰＴＴ
については、血漿（０．１ｍＬ）およびＡＰＴＴ溶液
（０．１ｍＬ、Ｏｒｇａｎｏｎ・Ｔｅｋｎｉｋａ）を５
分間（３７℃）でインキュベートし、ＣａＣｌ₂（０．
１ｍＬ、０．０２５Ｍ）を加えて凝固を開始させる。検
定を２回行い、平均する。

【０１１３】生物学的利用能指数 ＴＴの増加が親化合物によるトロンビン阻害のみに由来
するとの仮定に基づき、生物学的活性の一つである血漿
トロンビン時間（ＴＴ）を親化合物の測定の代わりに用
いる。該トロンビン阻害剤のＴＴに対する効果の時間的
経過を麻酔ラットへのｉ．ｖ．迅速投与後および絶食無
麻酔ラットへの経口投与後に測定する。血液量および処
置時間から前処置反応値に戻るまでの時間経過を測定す
るのに要する測定点の制限のため、２集団のラットを用
いる。各標本集団は交代に順番で各時点を表す。時間経
過の平均ＴＴを用いて曲線下面積（ＡＵＣ）を算出す
る。生物学的利用能指数は次式により算出し、相対的活
性百分率として表示する。血漿ＴＴ時間経過の曲線下面
積（ＡＵＣ）を測定し、用量について補正する。この生
物学的利用能を「％相対的活性」と命名し、次のように
して算出する

【数３】％相対的活性＝（ＡＵＣｐｏ÷ＡＵＣｉｖ）×
（用量ｉｖ÷用量ｐｏ）×１００

【０１１４】化合物 化合物溶液は毎日新しくノルマル食塩水中に調製し、単
回注射するか、または実験摂動の１５分前から始め、こ
れを通して継続的に点滴する。実験摂動は動静脈シャン
トモデルでは１５分間、動脈損傷のＦｅＣｌ₃モデルお
よび突発性血栓溶解モデルでは６０分間である。単回注
射用量はｉ．ｖ．では１ｍＬ／ｋｇおよび経口投与では
５ｍＬ／ｋｇであり、点滴容量は３ｍＬ／時間である。

【０１１５】統計学 結果を平均値±ＳＥＭで表す。偏差の統計的有意差を検
出するために一元解析法を用い、次にＤｕｎｎｅｔｔ検
定を応用してどの平均値に差があるか検出する。等平均
値の帰無仮説を否定する有意差水準はＰ＜０．０５であ
る。

【０１１６】動物 雄性犬（ビーグル、１８月齢〜２年、１２〜１３ｋｇ、
Ｍａｒｓｈａｌｌ・Ｆａｒｍｓ、ノースローズ、ニュー
ヨーク１４５１６）を一夜絶食し、ピュリナ保証処方食
餌（Ｐｕｒｉｎａ・Ｍｉｌｌｓ、セントルイス、ミズー
リ）を薬物投与２４０分前に給餌する。水は自由摂取さ
せる。部屋は温度６６〜７４°Ｆ、相対湿度４５〜５０
％に維持、０６００〜１８００時まで照明する。

【０１１７】薬動力学的モデル 被検化合物を投与直前に無菌０．９％食塩水に溶解して
５ｍｇ／ｍＬ剤とする。犬に被検化合物２ｍｇ／ｋｇ用
量を経口投与により単回投与する。投与から０．２５、
０．５、０．７５、１、２、３、４および６時間後に血
液標本（４．５ｍＬ）を脳静脈から採取する。標本はク
エン酸化減圧式注射器内に入れ、氷上に保存し、遠心分
離して血漿を得る。血漿標本をジニトロフェニルヒドラ
ジン誘導体とし、ＨＰＬＣ（Ｚｏｒｂａｘ・ＳＢ−Ｃ８
カラム）により、燐酸でｐＨ７に調整したメタノール／
５００ｍＭ−酢酸ナトリウム（６０：４０、ｖ／ｖ）で
溶出する。被検化合物の血漿内濃度を記録し、薬動力学
的パラメータである離脱速度定数Ｋｅ、全クリアランス
Ｃｌｔ、分配容積Ｖ_D、血漿被検化合物最大濃度到達時
間Ｔｍａｘ、血漿被検化合物最大濃度時間Ｔｍａｘにお
ける濃度Ｃｍａｘ、血漿中半減期ｔ０．５、曲線下面積
ＡＵＣおよび被検化合物吸収率Ｆを算出するために用い
る。

【０１１８】イヌ冠状動脈血栓症モデル イヌの外科手術および装置はＪａｃｋｓｏｎなど、Ｃｉ
ｒｃｕｌａｔｉｏｎ、８２巻、９３０〜９４０頁（１９
９０年）に記載の通り。雑種イヌ（６〜７月齢、両性、
Ｈａｚｅｌｔｏｎ−ＬＲＥ、カラマズー、ＭＩ、米国）
をペントバルビタールナトリウム（３０ｍｇ／ｋｇ、静
脈内、ｉ．ｖ．）で麻酔し、挿管し、室の空気は循環す
る。呼吸容積と呼吸数を調整して血液ＰＯ₂、ＰＣＯ₂お
よびｐＨを正常限界内に維持する。第ＩＩ誘導ＥＣＧを
記録するために皮下針状電極を挿入する。左頚静脈およ
び頚動脈を左中外側頚切開により隔離する。動脈血圧
（ＡＢＰ）を頚動脈に挿入した補正済みＭｉｌｌａｒト
ランスデューサ（ＭＰＣ−５００型、Ｍｉｌｌａｒ・Ｉ
ｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、ヒューストン、Ｔｘ、米国）で
連続的に測定する。頚静脈にカニューレして実験中に血
液標本を採取する。さらに、両後肢の大腿静脈にもカニ
ューレして被検化合物を投与する。第５肋間腔で左開胸
術を行い、心臓を心臓周囲クラドルに懸垂する。左旋回
枝冠動脈（ＬＣＸ）を第一主斜行心室間分枝近くで１〜
２ｃｍ断片を隔離する。２６ゲージ針装着電線陽電極
（テフロン被覆、３０ゲージ銀メッキ銅線）３〜４ｃｍ
長をＬＣＸに挿入し、動脈内膜表面に接触させて（実験
の終りに確認する）設置する。陰極を皮下（ｓ．ｃ．）
部位に設置して刺激回路を完成する。可変プラスチック
閉塞器をＬＣＸ周囲で電極の部分上に設置する。補正済
み電磁流プローブ（Ｃａｒｏｌｉｎａ・Ｍｅｄｉｃａｌ
・Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ、Ｋｉｎｇ、ＮＣ、米国）を
冠血流（ＣＢＦ）の測定のために陽極の近くでＬＣＸの
辺に設置する。閉塞器をＬＣＸの機械的閉塞１０秒後に
観測される充血性血流反応の４０〜５０％阻害を実現す
るように調整する。すべての血流力学およびＥＣＧ測定
を記録しデータ処理系（Ｍ３０００型、Ｍｏｄｕｌａｒ
・Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、マルバーン、ＰＡ、米国）
で解析する。

【０１１９】血栓形成および化合物投与法 １００μＡの直流（ＤＣ）を陽極に流してＬＣＸの最内
部に電気分解的損傷を作製する。電流を６０分間維持し
た後に止めて、管が閉塞しているかどうか観察する。血
栓形成はＬＣＸが完全に閉塞する（ＣＢＦゼロおよびＳ
−Ｔ部分の増加として検出する）まで自然に進行させ
る。閉塞血栓形成１時間後に化合物投与を開始する。本
発明の化合物０．５および１ｍｇ／ｋｇ／時の２時間点
滴を血栓症剤（たとえば、組織プラスミノーゲンアクテ
ィベータ、ストレプトキナーゼ、ＡＰＳＡＣ）の点滴と
同時に開始する。被検化合物の投与３時間後に再潅流を
行う。血栓溶解成功後に３０分間以上持続するＣＢＦゼ
ロを冠状動脈の再閉塞と定義する。

【０１２０】血液学およびテンプレート出血時間の測定 全血細胞数、ヘモグロビンおよびヘマトクリット値はク
エン酸塩化（３．８％）血液（クエン酸塩１部、血液９
部）標本４０μＬを血液分析器（Ｃｅｌｌ−Ｄｙｎ・９
００、Ｓｅｑｕｏｉａ−Ｔｕｒｎｅｒ、モントビュー、
ＣＡ、米国）を用いて測定する。歯肉テンプレート出血
時間をＳｉｍｐｌａｔｅ・ＩＩ・ｂｌｅｄｉｎｇ・ｔｉ
ｍｅ・装置（Ｏｒｇａｎｏｎ・Ｔｅｋｎｉｋａ・ダーラ
ム、ＮＣ、米国）を用いて測定する。この装置を用いて
イヌの左顎の上または下顎どちらかに歯肉に水平な２個
の切開をする。各切開は３ｍｍ幅×２ｍｍ深さである。
切開し、ストップウオッチを用いて出血する長さを測定
した。切開部から血液が泌出したら綿の塊を用いて吸取
る。テンプレート出血時間は切開から出血停止までの時
間である。出血時間は被検化合物投与直前（０分）、点
滴６０分、被検化合物投与終了（１２０分）および実験
終了時に測定する。全データは一元的偏差分析（ＡＮＯ
ＶＡ）により分析し、続いてスチューデント−ノイマン
−クエルスのポスト・ホック・ｔ−検定により有意性を
測定する。反復測定ＡＮＯＶＡを用いて実験内時点間有
意差を測定する。最低ｐ＜０．０５の水準にある値を統
計的な差があるとする。全測定値は平均値±ＳＥＭであ
る。全実験は米国生理学会の指導要領に従って行う。さ
らに詳細な操作の記載は、Ｊａｃｋｓｏｎなど、Ｊ．Ｃ
ａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２１巻、
５８７〜５９９頁（１９９３年）に見出される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ロバート・セオドア・シューマン アメリカ合衆国46143インディアナ州グリ ーンウッド、ウィロー・ストリート2596番 (72)発明者 ジェラルド・フロイド・スミス アメリカ合衆国46217インディアナ州イン ディアナポリス、クウィーンズウッド・コ ート825番 (72)発明者 マイケル・ロバート・ウィリー アメリカ合衆国46268インディアナ州イン ディアナポリス、ラングウッド・ドライブ 7725番

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式： 【化１】 ［ここに、Ｒ¹は水素である。Ｘはプロリニルまたはア
   ゼチジニル−２−カルボニルである。Ｙは： 【化２】 で示される基である。Ｚはヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アル
   コキシまたは−ＮＨＲ²である。Ｒ²は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−
   アルキル、シクロペンチル、シクロヘキシル、基−Ｃ
   （Ｃ＝Ｏ）Ｒ⁵または−Ｓ（Ｏ）_n−Ｒ⁵である。Ｒ⁵はＣ
   ₁〜Ｃ₄−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₂−パーフルオロアルキル、
   Ｃ₁〜Ｃ₄−アルコキシ、（Ｃ₁〜Ｃ₄−アルコキシ）−Ｃ
   ₁〜Ｃ₄−アルキル、シクロペンチル、シクロヘキシル、
   アミノ、モノ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルアミノ、ジ（Ｃ₁〜
   Ｃ₄）−アルキルアミノ、非置換または置換アリール
   （ここにアリールはフェニルまたはナフチル、同一また
   は相異なる、硫黄、酸素および窒素から選択されるヘテ
   ロ原子１個または２個を持つ５員または６員の非置換ま
   たは置換ヘテロ環、または同一または相異なる、硫黄、
   酸素および窒素から選択されるヘテロ原子１個または２
   個を持つ９員または１０員の非置換または置換縮合双環
   ヘテロ環基を表す）である。ｎは１または２である。Ｒ
   ³はＣ₁〜Ｃ₄−アルキル、非置換または置換フェニルま
   たは非置換または置換ベンジルである。Ｚ¹は結合また
   は−ＣＨ₂−である。Ｒ⁴はＣ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₁〜
   Ｃ₄−アルコキシ、シクロペンチル、シクロヘキシル、
   非置換または置換アリール（ここに、アリールはフェニ
   ルまたはナフチル、同一または相異なる、硫黄、酸素お
   よび窒素から選択されるヘテロ原子１個または２個を持
   つ５員または６員の非置換または置換ヘテロ環、または
   同一または相異なる、硫黄、酸素および窒素から選択さ
   れるヘテロ原子１個または２個を持つ９員または１０員
   の非置換または置換の双環ヘテロ環基を表す）である。 Ｚが−ＮＨＲ²である時には、これはＲ³と一緒になって
   アゼチジニル基、５員または６員環の非置換または置換
   飽和含窒素ヘテロ環または９員または１０員の非置換ま
   たは置換の縮合双環含窒素ヘテロ環基であることができ
   る。Ｒ³およびＲ⁴はまとめてシクロペンチル、シクロヘ
   キシルまたは９員または１０員の非置換または置換双環
   炭化水素基であることができる。但し、（ａ−ｉ）Ｒ³
   がメチルまたはエチルであり、Ｚ¹が結合であり、Ｒ⁴が
   シクロペンチル、シクロヘキシル、非置換または置換の
   アリールであってアリールがフェニルまたはナフチルで
   あるか、Ｒ⁴がチエニルまたはフリルであり、Ｘがプロ
   リニルまたはアゼチジニル−２−カルボニルである時、
   または（ａ−ｉｉ）Ｒ⁴−Ｚ¹−がまとめてメチルまたは
   エチルを形成し、Ｒ³が非置換または置換フェニルであ
   り、そしてＸがプロリニルまたはアゼチジニル−２−カ
   ルボニルである時、または（ｂ−ｉ）Ｒ³がメチルまた
   はエチルであり、Ｚ¹が−（ＣＨ₂）−であり、Ｒ⁴が非
   置換または置換フェニルであり、Ｘがアゼチジニル−２
   −カルボニルである時、または（ｂ−ｉｉ）Ｒ⁴−Ｚ¹−
   がまとめてメチルまたはエチルを形成し、Ｒ³が非置換
   または置換ベンジルであり、そしてＸがアゼチジニル−
   ２−カルボニルである時、またはさらに、 （ｃ）Ｒ³およびＲ⁴がまとめてシクロペンチルまたはシ
   クロヘキシルを表し、Ｘがプロリニルである時には、 Ｚはヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルコキシまたはＮＨＲ²
   ではないものとする（ここで、Ｒ²は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−
   アルキルまたは基−Ｃ（Ｃ＝Ｏ）Ｒ⁵であり、Ｒ⁵はＣ₁
   〜Ｃ₄−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₂−パーフルオロアルキルま
   たはＣ₁〜Ｃ₄−アルコキシであるものとする）。］で示
   される化合物またはその医薬的に許容しうる塩またはこ
   の化合物または塩の医薬的に許容しうる溶媒和物。
2. 【請求項２】 ａ．１−メチルインドリル−２−カルボ
   ニル−Ｄ−（α−メチル）フェニルグリシニル−Ｌ−ア
   ゼチジニル−２−カルボニル−Ｌ−アルギニンアルデヒ
   ド、 ｂ．プロリニル（α−ベンジル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ
   −アルギニンアルデヒドおよび ｃ．アゼチジニル（α−メチル）−Ｌ−プロリニル−Ｌ
   −アルギニンアルデヒド から選択される請求項１の化合物またはその塩または溶
   媒和物。
3. 【請求項３】 医薬的に許容しうる担体、希釈剤または
   添加剤とともに式Ｉで示される請求項１〜２のいずれか
   の化合物またはその医薬的に許容しうる塩または溶媒和
   物を含む医薬的製剤。