JPH07112938A - アルドースレダクターゼの阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 フクギの抽出成分を有効成分とするアルド−
スレダクタ−ゼ阻害剤を提供する。 【構成】 フクギ（学名：Ｇａｒｃｉｎｉａ Ｓｐｉｃ
ａｔｅ）から溶媒抽出により得られる抽出成分を有効成
分とするアルド−スレダクタ−ゼ阻害剤。フクギを乾燥
後、溶媒抽出する。次いで抽出成分を含む有機溶媒を濃
縮し、抽出成分を単離することにより構成されている。
抽出部分としては特に限定はなく、葉、茎、根等が好ま
しい。還流、抽出に用いる有機溶媒としてはヘキサン、
酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルム、アセト
ン、水及びメタノ−ル、エタノ−ル、ｎ−ブタノ−ル等
のアルコ−ル溶液が適用できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はフクギの抽出成分を有効
成分とするアルド−スレダクタ−ゼ阻害剤に関するもの
である。

【０００２】

【従来の技術】アルド−スレダクタ−ゼ阻害物質は、糖
尿病性白内症、糖尿病性神経症、糖尿病性腎疾患、糖尿
病性網膜症、糖尿病性角膜症などの糖尿病性合併症の予
防及び治療薬として開発が期待される。

【０００３】アルド−スレダクタ−ゼ阻害剤としては、
ヒダントイン誘導体（特開昭５３−５３６５３号公
報）、チアゾリジン誘導体（特開昭５７−２８０７３号
公報）等多くの化合物が知られている。

【０００４】また、既存薬としては「キネダック錠：エ
パルレスタット（小野薬品工業株式会社登録商標、化学
名：５−〔（１Ｚ，２Ｅ）−２−ｍｅｔｈｙｌ−３−ｐ
ｈｅｎｙｌｐｒｏｐｅｎｙｌｉｄｅｎｅ〕−４−ｏｘｏ
−２−ｔｈｉｏｘｏ−３−ｔｈｉａｚｏｌｉｄｉｎｅａ
ｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ）」が、平成４年１月に製造承
認、平成４年４月に薬価収載され発売されている。

【０００５】フクギはオトギリソウ科に属する高木で濃
緑色の葉を密につける。そのため、台風に襲われる沖縄
では古くから道路や家の周囲に植えて風除けにしたり、
肉厚な葉は日除け、火除けも兼ね、古くから利用されて
きた。更に樹皮は黄色染料として織物の染色に利用され
る。又、東南アジアでは、同属の根は煎じて飲むと月経
困難に効果があるとして利用されている。しかし、これ
までフクギの抽出成分がアルド−スレダクタ−ゼ阻害作
用を有することは全く知られていなかった。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明はフクギの抽出
成分を有効成分とするアルド−スレダクタ−ゼ阻害剤を
提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、鋭意研究
の結果、フクギの抽出成分がアルド−スレダクタ−ゼ阻
害作用を有することを見出し、本発明を完成させた。即
ち、フクギ（学名：Ｇａｒｃｉｎｉａ Ｓｐｉｃａｔ
ａ）から溶媒抽出により得られる抽出成分を有効成分と
するアルド−スレダクタ−ゼ阻害剤を提供するものであ
る。これまではフクギの抽出成分がアルド−スレダクタ
−ゼ阻害作用を有することは全く知られていなかった。

【０００８】アルド−スレダクタ−ゼの阻害作用は一般
に以下のように考えられている。グルコ−スは、正常時
には大部分がヘキソキナ−ゼの作用によりグルコ−ス−
６−リン酸になり解糖系で代謝され、重要なエネルギ−
源となっている。しかし糖尿病のような高血糖状態で
は、グルコ−スがソルビト−ルを介してフラクト−スに
代謝されるポリオ−ル代謝系が亢進される。その結果、
ソルビト−ルの異常蓄積が助長される。このソルビト−
ルは極性が高いため、細胞外への移行が少なく、細胞内
に蓄積され、その結果、細胞内の浸透圧が高まり、組織
傷害を起こすと考えられている。そこでポリオ−ル代謝
系でグルコ−スをソルビト−ルに変えている酵素である
アルド−スレダクタ−ゼを阻害することにより糖尿病性
合併症の予防及び治療が可能となる。

【０００９】本発明のフクギから抽出エキスの抽出方法
はフクギを乾燥後、溶媒抽出する。次いで抽出成分を含
む有機溶媒を濃縮し抽出成分を単離することにより構成
されている。フクギの抽出部分としては特に限定はない
が、葉、茎、根等が好ましい。望ましくは、根より抽出
するのが良い。

【００１０】フクギの乾燥条件としては、温度は１０℃
〜７０℃、望ましくは２０℃〜３０℃、乾燥時間は１時
間から３００時間、望ましくは２４時間〜７２時間が良
い。抽出方法としては溶媒を抽出しながら抽出しても良
いし、ソックスレ−抽出法を用いて抽出しても良い。こ
の他にも通常の抽出手段が適用できる。

【００１１】還流時間としては１時間〜１０時間、望ま
しくは１〜３時間である。還流に用いる有機溶媒として
は、ヘキサン、酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホ
ルム、アセトン、水及びメタノ−ル、エタノ−ル、ｎ−
ブタノ−ル等のアルコ−ル溶液が適用できる。望ましく
はアセトン、メタノ−ル、エタノ−ルが良い。

【００１２】単純溶媒抽出であれば抽出回数としては１
〜５回望ましくは２〜３回である。濃縮方法としては、
特に限定はなく、エバポレ−ションによる方法、凍結乾
燥、噴霧乾燥等がこれに含まれる。

【００１３】本発明のアルド−スレダクタ−ゼ阻害剤を
糖尿病の治療・予防に使用する場合、投与量は投与対
象、投与ル−ト、症状により異なるが、通常０．１ｍｇ
〜２００ｍｇ／ｋｇ／日であり、症状に応じて一日１〜
５回に分けて投与するのが良い。投与形態としては特に
限定がなく、錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤、注
射剤、坐剤等の非経口剤が適用できる。

【００１４】錠剤、カプセル剤、顆粒剤は常法によって
調製でき、その場合賦形剤としてはたとえばでんぷん、
乳糖などを用いることができる。軟カプセル剤を調製す
る場合の賦形剤としては動物性、植物性、もしくは鉱物
性の薬学的に許容される無害の油脂を用いることができ
る。主薬は通常これらの油脂に溶解され軟カプセルに充
填される。

【００１５】

【実施例】

（フクギの抽出及び分画方法）採取したフクギの根を２
５℃、７２時間乾燥後、粉末とした。そしてその粉末９
５０ｇを５ｌナス型コルベンで２時間、アセトン３ｌで
還流した。還流後、アセトン５００ｍｌを２回、次い
で、メタノ−ル５００ｍｌを２回により抽出した。次い
で抽出液を減圧濃縮し、メタノ−ルエキス１０ｇ（ＧＵ
−２）を得た。

【００１６】（アルド−スレダクタ−ゼの調製）ヒト胎
盤３０ｇをＥＤＴＡ−リン酸緩衝液（１ｍＭ ＥＤＴ
Ａ、２ｍＭベ−タ−メルカプトエタノ−ル、２μｇ／ｍ
ｌアンチパイン、２μｇ／ｍｌロイペプチン、１０ｍＭ
リン酸緩衝液、ｐＨ７．４）に懸濁後、遠心分離（１０
００ｒｐｍ、１０分、４℃）した。分離後、上清を捨
て、１０ｍＭリン酸緩衝液６０ｍｌに懸濁し、ホモジナ
イザ−で細胞破砕後、超遠心分離（３００００ｒｐｍ、
３０分、４℃）した。次いで、上清を回収し、蒸留水で
２倍に希釈後、４０％硫安塩析、遠心分離（１００００
ｒｐｍ、２０分、４℃）した。さらに、上清を回収し、
７０％硫安塩析、遠心分離（１００００ｒｐｍ、２０
分、４℃）した。最後に、上清を捨て、沈澱を１０ｍＭ
リン酸緩衝液１０ｍｌに懸濁後、１０ｍＭリン酸緩衝液
で２倍希釈し、活性測定した。

【００１７】（アルド−スレダクタ−ゼ阻害活性の測定
法）アルド−スレダクタ−ゼ阻害活性の測定はＨａｙｍ
ａｎ，Ｓ．ら、「Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．」、２４
０、８７７−８８２（１９６５）およびＴｅｒａｓｈｉ
ｍａ，Ｈ．ら、「Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔ
ｈｅｒ．」、２２９（１）、２２６−２３０（１９８
４）等に記載された方法に準じて行った。

【００１８】０．４Ｍリン酸緩衝液１００μｌ、２Ｍ硫
酸アンモニウム水溶液７５μｌ、０．２ｍＭ ＮＡＤＰ
Ｈ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドフォスフェ
−ト還元型）１００μｌ、上記の酵素液（アルド−スレ
ダクタ−ゼ）１２５μｌ及び上記具体例で得られた化合
物の１０^-4Ｍエタノ−ル液５０μｌをそれぞれ加えた。
反応は、１００ｍＭのグリセルアルデヒド５０μｌを加
えることにより開始し、２５℃で５分間、３４０ｎｍの
吸光度の減少を追跡してそのときのｔａｎθ値を求め
た。阻害剤を添加したときのｔａｎθ値をＡとし、阻害
剤を添加しなかったときのｔａｎθをＢとして、（１）
式によって阻害率を求めた。

【００１９】

【数１】 実施例によって得られた分画（ＧＵ−２）について、１
×１０^-5Ｍ濃度の阻害率を調べた。結果を表１に示す。

【００２０】

【表１】 実施例により得られた分画（ＧＵ−２）は前記記載の既
存薬（キネダック）と同程度の阻害率を示した。

【発明の効果】本発明によればフクギの抽出成分を有効
成分とするアルド−スレダクタ−ゼ阻害剤を提供し、前
記記載のアルド−スレダクタ−ゼ阻害剤は糖尿病性合併
症の予防、治療剤として有効に使用することができる。
また本発明のアルド−スレダクタ−ゼ阻害剤は天然物で
あり毒性もなく、古くから漢方薬的な使われ方をしてお
り、安全性が高い。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 フクギ（学名：Ｇａｒｃｉｎｉａ Ｓｐ
   ｉｃａｔａ）から溶媒抽出により得られる抽出成分を有
   効成分とするアルド−スレダクタ−ゼ阻害剤。