JPH0710532A - カチオン置換粘土鉱物、その製造方法、及びそれを用いたクロマトグラフィー用充填剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 水膨張性粘土鉱物の層間のカチオンを低原子
価金属アンミン錯体および／又は低原子価金属アミン錯
体で実質的に置換してなるカチオン置換粘土鉱物及びそ
れを用いたクロマトグラフィー用充填剤 【効果】 本発明の粘土鉱物からなるクロマトグラフィ
ー用充填剤は高度不飽和化合物に対してシャープなピー
クが得られ、また溶媒による変化を受けにくいため長時
間安定に使用することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はカチオン置換粘土鉱物、
それを用いたクロマトグラフィー用充填剤及びその製造
方法、特に置換カチオンの改良に関する。

【０００２】

【従来の技術】各種物質の分析あるいは分離精製にクロ
マトグラフィーが汎用されており、このうち特に液体ク
ロマトグラフィーはその分離機構により、大きくは吸着
クロマトグラフィーと分配クロマトグラフィーに分類さ
れている。分配クロマトグラフィーはさらに、溶離液と
充填剤の極性の関係から、順相分配クロマトグラフィー
と逆相分配クロマトグラフィーとに分けられる。前記吸
着及び順相分配クロマトグラフィーにおける充填剤は、
いずれも巨大孔と微細孔が網目状に分布した全多孔性シ
リカゲル系がほとんどであり、その他アルミナ系、ポー
ラスガラス系の無機担体やポリスチレン−ジビニルベン
ゼン、ポリビニルアルコール、ポリヒドロキシメタクリ
レート等のポーラスポリマー系、また特殊な用途として
水酸化カルシウム粉末、リン酸カルシウムゲル等が用い
られている。

【０００３】一方、逆相分配クロマトグラフィー用充填
剤には、ＯＤＳ−シリカゲルに代表されるように、前記
充填剤（例えばシリカゲル）を担体として、これにオク
タデシル基などのアルキル基を化学結合させたものが多
く用いられている。この他にもシリカゲルや有機ポーラ
スポリマーにスルホン基やカルボキシル基を有する化合
物を結合させたカチオン交換用、あるいは４級アンモニ
ウムやジエチルアミノエチル基を結合させたアニオン交
換用の液体クロマトグラフィー用充填剤も用いられてい
る。

【０００４】しかしながら、これらの充填剤はいずれも
各種の課題を有しており、特に近似する分子量の物質の
飽和−不飽和識別能がきわめて貧弱であり、この点に関
する改善が従来より強く求められていた。このような要
望に応える充填剤として、本発明者らは特開平１−１９
９１５５に開示される充填剤を開発している。これは、
水膨潤性粘土鉱物の層間イオンがナトリウムイオン以外
のカチオン、特に銀イオンで実質的に置換されてなる充
填剤であり、飽和−不飽和識別能を有するため、広範な
不飽和化合物の不飽和度毎の分離が可能であり、各種分
析や分離手段として用いられていた。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】ところが、前記粘土鉱
物からなる充填剤にあっても、不飽和度３以上の高度不
飽和化合物の吸着がきわめて強く、ピークもブロードな
ものとなるため、効率よく短時間に分析、分離を行うこ
とができないものであった。また、不飽和化合物の保持
時間も、使用する溶媒によって経時的に変化するなどの
課題が指摘されていた。本発明は、前記従来技術の課題
に鑑みなされたものであり、その目的は特に不飽和化合
物の分離能力が高く、しかも経時安定性に優れたクロマ
トグラフィー用充填剤、及びその充填剤として用いるカ
チオン置換粘土鉱物を提供することにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】前記目的を達成するため
に、本発明者らが鋭意検討を進めた結果、高度不飽和化
合物のピークがブロードなものとなる点、及び保持時間
の経時的変化が大きい点は、粘土鉱物の層間に存在する
低原子価金属をアンミン錯体ないしアミン錯体とするこ
とにより解決可能なことを見出し本発明を完成するにい
たった。すなわち、粘土鉱物の層間に存在する銀等の置
換低原子価金属イオンは、溶媒と接触することにより、
イオンとして存在する以外にも酸化、還元などによる存
在状態の変化が生じ、これが高度不飽和化合物のピーク
をブロードなものとし、さらに保持時間の経時変化を大
きくする要因となることを見出した。

【０００７】例えば、粘土鉱物の層間に存在させた１価
の銀イオンは、熱と溶媒によって酸化され酸化銀に変化
したり、金属銀に還元されることがＸ線解析の結果確か
められた。また、銀と同様に飽和−不飽和識別能を有す
るとされる１価の銅イオンは乾燥により容易に酸化され
て２価の銅イオンに変化してしまい、飽和−不飽和識別
能を弱めることが確認されている。そこで、本発明者ら
は粘土鉱物の層間に存在する置換低原子価金属イオンの
存在形態に着目したのである。

【０００８】すなわち、本出願の請求項１記載のカチオ
ン置換粘土鉱物は、水膨潤性粘土鉱物の層間のカチオン
を低原子価金属アミン錯体及び／又は低原子価金属アン
ミン錯体で実質的に置換してなることを特徴とする。請
求項２記載のクロマトグラフィー用充填剤は、前記カチ
オン置換粘土鉱物よりなることを特徴とする。請求項３
記載の粘土鉱物は、低原子価金属アンミン錯体は、［Ｍ
（ＮＨ₃）_1■3］Ｘ （Ｍ＝金属，Ｘ＝アニオン）であ
ることを特徴とする。請求項４記載の粘土鉱物は、前記
Ｍが１価の銅、銀または金であることを特徴とする。

【０００９】請求項５記載のカチオン置換粘土鉱物の製
造方法は、水膨潤性粘土鉱物をアンモニアアルカリ性の
アンモニウムイオン溶液に浸せきしたのち乾燥したもの
を、低原子価金属アミン錯体及び／又は低原子価金属ア
ンミン錯体溶液に浸せきし、層間カチオンイオンを低原
子価金属アミン錯体及び／又は低原子価金属アンミン錯
体で実質的に置換することを特徴とする。請求項６記載
のカチオン置換粘土鉱物の製造方法は、低原子価金属ア
ミン錯体及び／又は低原子価金属アンミン錯体溶液に浸
せきされた粘土鉱物をさらに焼成することを特徴とす
る。

【００１０】請求項７記載の魚類油脂の分離方法は、魚
類油脂から、水膨潤性粘土鉱物の層間のカチオンを低原
子価金属アミン錯体及び／又は低原子価金属アンミン錯
体で実質的に置換してなる充填剤により、ドコサヘキサ
エン酸を分離・採取することを特徴とする。請求項８記
載の魚類油脂の分離方法は、魚類油脂を加水分解し、さ
らにエステル化した脂肪酸エステルを分離対象として用
いることを特徴とする。請求項９記載の魚類油脂の分離
方法は、溶媒として超臨界流体を用いることを特徴とす
る。

【００１１】以下、本発明の構成について詳述する。本
発明において用いられる水膨潤性粘土鉱物は、スメクタ
イト属に属する層状ケイ酸鉱物であり、モンモリロナイ
ト、バイデライト、ノントロライト、サポナイト、及び
ヘクトライトなどが好適である。なお、天然または合成
品のいずれも用いることができる。市販品としては、ク
ニピア、スメクトン（クニミネ工業）、ビーガム（バン
ダービルト社）、ラポナイト（ラポルテ社）、フッ素四
ケイ素雲母（トピー工業）などを用いることができる。
本発明の実施にあたっては、これらの水膨潤性粘土性鉱
物のうちから、一種又は二種以上が任意に選択される。
クロマトグラフィー用充填剤としては、比表面積の大き
い粉末である程、吸着容量が大きく、溶質分子を強く保
持することができるため、充填剤として適している。

【００１２】また、クロマトグラフィー用充填剤として
は、形状は破砕状よりも球状のほうが圧力損失及び圧力
変動が小さいので適している。このような観点から、水
性ゲルをスプレードライすることにより、球状の粘土鉱
物を得ることができる合成サポナイトのスメクトンや合
成ヘクトライトのラポナイトが特に好適である。前記水
膨潤性粘土鉱物に対し、その層間に存在するナトリウム
イオンと置換する低原子価の金属のアンミン錯体（アン
モニア錯塩）は、１価の銅、銀、金のアンミン錯体［Ｍ
（ＮＨ₃）_1■3］Ｘ （Ｍ＝金属、Ｘ＝アニオン）を用
いることができる。この他に２価の金属として銅、水
銀、白金、パラジウム等のアンミン錯体を用いることも
可能であるが、１価の銅、銀、金のアンミン錯体を用い
ることが好ましい。

【００１３】これらの金属アミン錯体の粘土鉱物への交
換容量は、粘土鉱物１００ｇあたり約６０〜１５０ミリ
当量であるが、１０ミリ当量程度の少量のイオン交換で
も飽和−不飽和識別能を有する。アンミン錯体の調整方
法としては、これらの１〜２価の金属塩（例えば塩化第
一銅、硝酸銀等）を適量の水、アルコール等の溶媒に溶
解し、適量の２５〜２８％アンモニア水を加え撹拌する
ことにより得られる。また、アミン錯体を調製する場合
には、アンミン錯体の調製方法におけるアンモニア水に
変えて有機アミンを使用することが好適である。

【００１４】用いる有機アミンとしては、エチルアミ
ン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエ
チレンテトラミン、テトラエチレンペンタミン、モノエ
タノールアミンなどを用いることができる。これらの低
原子価金属アンミン錯体ないしアミン錯体は、単独で用
いても、あるいは２種以上組合せて用いてもよい。本ク
ロマトグラフィー用充填剤の金属イオン含有量は、金属
によっても異なるが、０．１〜１５重量％、好ましくは
１〜５重量％である。本発明にかかるカチオン置換粘土
鉱物を製造する際には、原料粘土鉱物をあらかじめアン
モニウムイオン溶液に浸せきすることが好適である。

【００１５】すなわち、例えばモンモリロナイトは三層
体積層を有し、図１に示すように各三層単位１０ａ、１
０ｂの層間１２にナトリウムイオン１４がイオン結合さ
れている。そして、図２に示すように、層間１２のナト
リムイオンをアンモニウムイオン１６に置換し、さらに
図３に示すように低原子価金属の錯体１８へと置換する
のである。このようにアンモニウムイオンで浸せきし
て、粘土鉱物中のナトリウムイオンをアンモニウムイオ
ンにあらかじめイオン交換することで、耐水性が改善さ
れるとともに、金属アンミン錯体の種類によってはアン
モニウムイオンで交換された粘土鉱物の方がアンミン錯
体とのイオン交換が容易となる。

【００１６】なお、アンモニウムイオンで浸せきしてい
ない粘土鉱物にあっても、アンミン錯体あるいはアミン
錯体と容易にカチオン交換できるものもあるので、前記
アンモニウムイオン溶液への浸せきは必ずしも必須のも
のではない。 本発明において、粘土鉱物を浸せきする
際のアンモニウムイオンの濃度は０．１〜１０規定、好
ましくは０．５〜３規定である。この時のアンモニウム
イオン溶液のｐＨはアンモニアを添加し７〜１２、好ま
しくは８．５〜１０．５とする。ここで添加するアンモ
ニアは、アンモニア水が好ましいがアンモニアガスを用
いることも可能である。

【００１７】アンモニウムイオン溶液に粘土鉱物を浸せ
きする時間は１時間以上が望ましい。浸せき後、溶媒を
濾過などの方法で除去し、乾燥する。乾燥温度は６０℃
以上、好ましくは１００〜１５０℃とすることが好適で
ある。このように乾燥を行うことにより、粘土鉱物の細
孔内に満たされたアンモニアを除去し、金属錯イオンと
の交換が容易となる。さらに、これらの金属アンミン錯
体ないし金属アミン錯体によりカチオン交換された粘土
鉱物を焼成することも好適である。

【００１８】焼成温度、焼成時間は金属により異なる
が、金属アンミン錯体もしくは金属アミン錯体が分解し
ない温度が好ましく、８０℃〜５００℃、特に好ましく
は１００℃〜２５０℃である。焼成時間は１時間〜４８
時間、好ましくは４時間〜１８時間である。焼成温度が
高いほど、また焼成時間が長いものほどクロマトグラフ
ィーにおける保持力が強く、保持時間の調整も可能であ
る。このように焼成を行うことにより、粘土鉱物の外面
に表出したシラノール基の活性が増加し、より充填剤と
しての機能を改善することができる。

【００１９】なお、本発明にかかるカチオン置換粘土鉱
物は、必要に応じて通常の乾式分級法により分級し、ク
ロマトグラフィー用充填剤として利用される。また、本
発明にかかる充填剤は、液体クロマトグラフィー用充填
剤はもとより、超臨界クロマトグラフィー用、あるいは
ガスクロマトグラフィー用充填剤としても利用できる。

【００２０】

【実施例】以下、本発明の好適な実施例を説明する。な
お、本発明はこれらの実施例によって限定されるもので
はない。実施例１ ラポナイトＸＬＧ９００ｇをイオン交換水３０Ｌに撹拌
しながら分散させる。得られたゲルを、ディスク式噴霧
乾燥実験器によりディスク回転数２００００ｒｐｍ、入
り口温度約２００℃、排気温度約１１０℃で噴霧乾燥
し、２〜２０μｍの球状粘土鉱物７２０ｇを得た。この
球状粘土鉱物を乾式分級機TARBO CLASSIFINER TC-15N
（日清エンジニアリング社製）を用いて分級し、３〜８
μｍ粉径の粉末を１８０ｇ得た。

【００２１】上記粉末３０ｇを、５００ｍｌガラス製ビ
ーカーに量り、これに６％｛Ｗ／Ｖ｝硝酸アンモニウム
／メタノール溶液２００ｍｌ及び２８％アンモニア水
０．６６ｍｌを加え、約１時間撹拌した後、ガラスフィ
ルター（Ｇ４）で濾過した。これを乾燥器を用いて１１
０℃で６時間乾燥し乾燥粉末を得、この乾燥粉末を５０
０ｍｌビーカーにとった。あらかじめ２．５５ｇの硝酸
銀に２００ｍｌのメタノールと２８％アンモニア水２．
４ｍｌを加え溶解した液全量を前記ビーカーに加え１６
時間撹拌した後、グラスフィルターを用いて濾過した。
この後、２８％アンモニア水／メタノール（１：１０
０）２００ｍｌを用いて３回濾過、洗浄を繰り返し、更
に１６０℃で４時間乾燥し充填剤を得た。

【００２２】つぎに本充填剤を内径４．６ｍｍ，長さ２
５０ｍｍのステンレスカラムに平衡スラリー法により均
一に充填し、充填カラムを得た。本充填カラムを高速ク
ロマトグラフに接続し、移動相溶媒に１％エタノール／
ヘキサンを１ｍｌ／ｍｉｎの流速でながした。温度は３
５℃に設定し、検出器はＵＶ検出器をもちいて波長２２
５ｎｍで検出した。この充填カラムに、試料として、炭
素数２０で不飽和度０〜４の脂肪酸メチルエステル混合
物を注入したところ、図４に示すクロマトグラムが得ら
れた。不飽和度０〜４の順にシャープに分離溶出したク
ロマトグラムが得られた。

【００２３】比較例１ エタノール１Ｌに硝酸銀１．７ｇを溶解し、上記の分級
した球状の粘土鉱物１０ｇを分散し、４時間撹拌する。
その後メタノールで洗浄し、８０℃で乾燥し充填剤を得
た。その後、実施例１と同様に高速液体クロマトグラフ
に接続し、クロマトグラムを測定したところ、吸着が極
めて強く、脂肪酸メチルエステルの溶出はいずれも観測
されなかった。そこで移動相溶媒をより溶出力の強いア
セトンに替え、更に検出器を示差屈折計に替え、得られ
たクロマトグラムを図５に示す。５種の脂肪酸メチルエ
ルテルが分離溶出しているが、不飽和度３〜４の脂肪酸
メチルエステルは大きなテイリングを示し、分離も不良
であった。

【００２４】実施例２ 実施例１で得られた分級した球状の粘土鉱物３０ｇを５
００ｍｌガラス製ビーカーに量り、これに６％｛Ｗ／
Ｖ｝硝酸アンモニウム／メタノール溶液２００ｍｌと２
８％アンモニア水１．０ｍｌを加え、約３時間撹拌した
後、ガラスフィルターで濾過した。これを乾燥器を用い
て１１０℃で６時間乾燥し、乾燥粉末を得、この乾燥粉
末を５００ｍｌビーカーにとった。あらかじめ１．４９
ｇの塩化第一銅に４００ｍｌのメタノールと２８％アン
モニア水５．０ｍｌを加え溶解した液の全量を前記ビー
カーに加え、２４時間撹拌した後、グラスフィルターを
用いて濾過した。この後２８％アンモニア水／メタノー
ル｛１／１００｝２００ｍｌを用いて３回濾過、洗浄を
繰り返し、更に１１０℃で１６時間乾燥し充填剤を得
た。次に本充填剤を内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍの
ステンレスカラムに充填し、充填カラムを得た。

【００２５】本充填カラムを高速液体クロマトグラフに
接続し、移動相溶媒に０．５％アセトニトリル／２％ジ
オキサン／ヘキサンを０．５ｍｌ／ｍｉｎの流速で流し
た。温度は４０℃に設定し、検出器はＵＶ検出器を用い
て波長２２５ｎｍで検出した。試料として、炭素数２０
で不飽和度１〜４の脂肪酸メチルエステル混合物と、魚
油のエチルエステルを注入したところ、それぞれ図６、
図７のクロマトグラムが得られた。図６の脂肪酸メチル
エステル混合物のクロマトグラムは実施例１以上にシャ
ープであり、どの成分もほぼ完全に分離することができ
た。また、図７の魚油のエチルエステルのクロマトグラ
ムには比較例１のカラムでは溶出させることのできなか
った炭素数２０、不飽和度５のエイコサペンタエン酸エ
チルエステルが２２．８分に、また炭素数２２、不飽和
度６のドコサヘキサエン酸エチルエステルが２８．０分
に、極めてシャープに分離、溶出させることができた。

【００２６】実施例３ 実施例１で得られた球状の粘土鉱物に銀アンミン錯体を
交換し、１１０℃で１６時間乾燥し得られた充填剤をさ
らに２５０℃で４時間焼成して得られた粉末を、内径
４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍのステンレスカラムに充填
し、充填カラムを得た。本充填カラムを超臨界流体クロ
マトグラフ（日本分光製）に接続し、圧力２００Ｋｇ，
温度９０℃の超臨界状態で１０％アセトニトリル／二酸
化炭素｛Ｗ／Ｗ｝を１ｍｌ／ｍｉｎの流速で流した。検
出器はＵＶ検出器を用いて波長２２５ｎｍでモニターし
た。試料は炭素数１８、不飽和度０〜３の脂肪酸メチル
エルテルと、炭素数２０、不飽和度４の脂肪酸メチルエ
ルテルの混合物を注入した。得られたクロマトグラムを
図８に示す。本実施例にかかる充填剤を用いた場合、超
臨界流体クロマトグラフィーによっても不飽和度毎のシ
ャープな分離溶出が可能であった。

【００２７】実施例４ 前記実施例１で製造した充填剤１００ｇをパッカーとポ
ンプを用いて、内径２０mm、長さ２５０mmのステンレス
スチール製カラムに平行スラリー法で充填し、充填カラ
ムを作成した。このカラムを超臨界クロマトグラフィー
装置（日本分光社製）に接続し、それぞれ下記表１の分
離条件下で二酸化炭素超臨界流体による分離精製を行っ
た。魚類油脂を常法により加水分解して得た脂肪酸組
成、Ｃ_14:0（３．３％）、Ｃ_16:0（１６．９％）、Ｃ
_18:0（５．２％）、Ｃ_18:1（１６．３％）、Ｃ_20:5（１
２．２％）、Ｃ_22:6（３０．０％）及びその他（１４．
３％）、（Ｃの添数字は、それぞれ前者が対応する脂肪
酸の炭素数を示し、後者は炭素−炭素の二重結合数を示
す。したがって、Ｃ_20:5はＥＰＡを、そしてＣ_22:6はＤ
ＨＡを表す）からなる脂肪酸混合物を常法によりエチル
アルコールでエステル化したサンプルを処理した。

【００２８】つまり、カラムを工程Ｉの条件に平衡化さ
せた後、サンプル２．７２ｇをカラムに負荷し、工程
Ｉ，IIの順に条件を変化させた。各フラクションは１５
分毎に分画し、溶媒を留去後、その収量と純度を求め
た。

【 表１】 ──────────────────────────────── 圧 力 温 度 CO₂流量 アセトン流量 フラクション数 Kg/cm₂ ℃ ml/min ml/min ──────────────────────────────── Ｉ ２００ ５０ ８．５ １．５ 〜(10) ──────────────────────────────── II ２００ ５０ ６ ４ (11)〜(17) ──────────────────────────────── 条件Ｉ，IIの順に、条件を変化させた。各フラクション
は１５分毎にサンプリングした。

【００２９】各フラクションの純度を、ガスクロマトグ
ラムの面積百分率により求めたところ、工程IIのフラク
ション(11)〜 (17)から純度９９．５％のＤＨＡ０．５
９ｇ（回収率７２．３％）が得られた。図９に各フラク
ションのＥＰＡ及びＤＨＡの純度を、また図１０に各フ
ラクションの収量及びＥＰＡ、ＤＨＡの重量を示した。
尚、前記ＥＰＡ、ＤＨＡの重量は、各フラクションのそ
れぞれの純度及び収量より求めた。

【００３０】実施例５ サンプルとして魚類脂肪処理物に代え、γ−リノレン酸
５．９％を含有するγ−リノレン酸含有油脂より調整し
た脂肪酸エチルエステル混合物を用い、二酸化炭素超臨
界流体による分離条件を表２記載の通りとした以外は、
前記実施例４に準じる。尚、粗サンプルの組成は、Ｃ
_14:0（０．８％）、Ｃ_16:0（２７．６％）、Ｃ₁₈:
₀（６．５％）、Ｃ_18:1（４２．６％）、Ｃ_18:2（８．
９％）、Ｃ_18:3（５．９％）及びその他（６．４％）で
ある。カラムを表２の工程Ｉの条件に平衡化させた後、
サンプル２．６４ｇをカラムに負荷し、工程Ｉ〜XIの順
に条件を変化させた。各フラクションは１５分毎に分画
し、溶媒を留去後、その重量測定とＧＣ分析を行った。

【００３１】

【表２】 ──────────────────────────────── 圧 力 温 度 CO₂流量 アセトン流量 フラクション数 Kg/cm₂ ℃ ml/min ml/min ──────────────────────────────── Ｉ ２００ ５０ ９．５ ０．５ 〜(10) ──────────────────────────────── II ２００ ５０ ９．４ ０．６ (11) ──────────────────────────────── III ２００ ５０ ９．３ ０．７ (12) ──────────────────────────────── IV ２００ ５０ ９．２ ０．８ (13) ──────────────────────────────── Ｖ ２００ ５０ ９．１ ０．９ (14) ──────────────────────────────── VI ２００ ５０ ９．０ １．０ (15) ──────────────────────────────── VII ２００ ５０ ８．９ １．１ (16) ──────────────────────────────── VIII ２００ ５０ ８．８ １．２ (17) ──────────────────────────────── IX ２００ ５０ ８．７ １．３ (18) ──────────────────────────────── Ｘ ２００ ５０ ８．５ １．５ (19) ──────────────────────────────── XI ２００ ５０ ６．０ ４．０ (20) ────────────────────────────────

【００３２】各フラクションの純度をガスクロマトグラ
ムの面積百分率より求めたところ、工程VIII、IX、Ｘ、
XIのフラクション(17)，(18)，(19)，(20)に純度７５％
以上のγ−リノレン酸エチルエステルが得られた。次の
表３に主要フラクションのγ−リノレン酸エチルエステ
ルの純度、収量、回収率を示す。

【表３】 ─────────────────────────── 回収フラクション 純度(%) 収量(g) 回収率(%) ─────────────────────────── (17)〜(20) ７６．２ ０．１５３ ７４．８ ─────────────────────────── (18)〜(20) ７７．２ ０．１２５ ６１．７ ─────────────────────────── (19)，(20) ７７．５ ０．０９９ ４９．３ ─────────────────────────── (20) ７７．９ ０．０７６ ３７．８ ─────────────────────────── 図１１に各フラクションのＣ_16:0，Ｃ_18:1，Ｃ_18:2，Ｃ
_18:3の純度を示した。また、図１２に各フラクションの
収量を示した。

【００３３】実施例６ 実施例４で作成したカラムを液体クロマトグラフィー装
置（島津製作所製）に接続し、下記表４の分離条件下で
液体クロマトグラフィーによる分離精製を行った。サン
プルは前記実施例４と同様である。すなわち、カラムを
工程Ｉの条件に平衡化させた後、サンプル２．５８ｇを
カラムに負荷し、工程Ｉ，II，III，IVの順に条件を変
化させた。各フラクションは、１０分毎に分画し、溶媒
を留去後、その収量と純度を求めた。

【表４】 ────────────────────────── 温 度 ヘキサン流量 アセトン流量 フラクション数 ℃ ml/min ml/min ────────────────────────── Ｉ ＲＴ １０ ０ 〜 ────────────────────────── II ＲＴ ９．９ ０．１ 〜(11) ────────────────────────── III ＲＴ ９．５ ０．５ (12)〜(16) ────────────────────────── IV ＲＴ ６ ４ (17)〜(20) ────────────────────────── 各フラクションの純度を、ガスクロマトグラムの面積百
分率より求めたところ、工程IVのフラクション(14)〜(1
9)から純度９９．１％のＤＨＡ０．３５ｇ（回収率４
５．２％）が得られた。図１３に各フラクションのＥＰ
Ａ及びＤＨＡの純度を示す。また、図１４に各フラクシ
ョンの収量及びＥＰＡ、ＤＨＡの重量を示す。

【００３４】実施例７ 実施例４と同一の装置を用い、ＤＨＡ含有トリグリセリ
ドの二酸化炭素超臨界流体による精製を行った。尚、サ
ンプルは実施例４で用いたエチルエステル化前の魚類油
脂である。表５に示すように、カラムを工程Ｉの条件に
平衡化させた後、サンプル２．７０ｇをカラムに負荷
し、工程Ｉ〜IVの順に条件を変化させた。各フラクショ
ンは１５分毎に分画し、溶媒を留去後、重量測定とＧＣ
分析を行った。尚、上記ＧＣ分析は、常法によりサンプ
ルをエチルエステル化した後行った。

【００３５】各フラクションの組成を、ＧＣの面積百分
率より求めたところ、工程III，IVのフラクション〜
(14)に構成脂肪酸としてＤＨＡを約４０％含有するトリ
グリセリドが得られた。表６にフラクション〜(14)を
あわせた時のＤＨＡ純度、収量、回収率を示した。ま
た、図１５に各フラクションのＥＰＡ及びＤＨＡの純度
を、図１６に各フラクションの収量及びＥＰＡ、ＤＨＡ
の収量を示した。

【００３６】

【表５】 ──────────────────────────────── 圧 力 温 度 CO₂流量 アセトン流量 フラクション数 Kg/cm₂ ℃ ml/min ml/min ──────────────────────────────── Ｉ ２００ ５０ ９ １ 〜 ──────────────────────────────── II ２００ ５０ ８．５ １．５ 〜 ──────────────────────────────── III ２００ ５０ ８ ２ 〜(12) ──────────────────────────────── IV ２００ ５０ ６ ４ (13)〜(16) ────────────────────────────────

【００３７】

【表６】 ─────────────────────────── 回収フラクション 純度(%) 収量(g) 回収率(%) ─────────────────────────── 〜(14) ４５．２３ ０．２６ ３９．９５ ───────────────────────────

【発明の効果】以上説明したように本発明にかかるカチ
オン置換粘土鉱物によれば、クロマトグラフィー用充填
剤として用いることにより優れた分離能及び経時安定性
を得ることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】、

【図２】、

【図３】本発明にかかるカチオン置換粘土鉱物の製造工
程の説明図である。

【図４】本発明の実施例１にかかる充填剤を用いたクロ
マトグラムである。

【図５】比較例１にかかる充填剤を用いたクロマトグラ
ムである。

【図６】実施例２にかかる充填剤を用い、炭素数２０で
不飽和度０〜４の脂肪酸メチルエステル混合物を分離し
た場合のクロマトグラムである。

【図７】実施例２にかかる充填剤を用い、魚油のエチル
エステルを分離したクロマトグラムである。

【図８】実施例３にかかる充填剤を用いて得られたクロ
マトグラムである。

【図９】実施例１にかかる充填剤を用いて、魚類油脂脂
肪酸を、二酸化炭素超臨界流体により分離精製を行った
場合のフラクションとＥＰＡ，ＤＨＡの純度との関係を
示す説明図である。

【図１０】実施例１にかかる充填剤を用いて、魚類油脂
脂肪酸を、二酸化炭素超臨界流体により分離精製を行っ
た場合のフラクションとＥＰＡ，ＤＨＡの収量との関係
を示す説明図である。

【図１１】実施例１にかかる充填剤を用いて、γ−リノ
レン酸含有油脂を、二酸化炭素超臨界流体により分離精
製を行った場合のフラクションと各脂肪酸の純度との関
係を示す説明図である。

【図１２】実施例１にかかる充填剤を用いて、γ−リノ
レン酸含有油脂を、二酸化炭素超臨界流体により分離精
製を行った場合のフラクションと収量との関係を示す説
明図である。

【図１３】実施例１にかかる充填剤を用いて、魚類油脂
脂肪酸を、液体クロマトグラフィーにより分離精製を行
った場合のフラクションとＥＰＡ，ＤＨＡの純度との関
係を示す説明図である。

【図１４】実施例１にかかる充填剤を用いて、魚類油脂
脂肪酸を、液体クロマトグラフィーにより分離精製を行
った場合のフラクションとＥＰＡ，ＤＨＡの収量との関
係を示す説明図である。

【図１５】実施例１にかかる充填剤を用いて、ＤＨＡ含
有トリグリセリドを、液体クロマトグラフィーにより分
離精製を行った場合のフラクションとＥＰＡ，ＤＨＡの
純度との関係を示す説明図である。

【図１６】実施例１にかかる充填剤を用いて、ＤＨＡ含
有トリグリセリドを、液体クロマトグラフィーにより分
離精製を行った場合のフラクションとＥＰＡ，ＤＨＡの
収量との関係を示す説明図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 山口 道広 神奈川県横浜市港北区新羽町1050番地 株 式会社資生堂第一リサーチセンター内

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】水膨潤性粘土鉱物の層間のカチオンを低原
   子価金属アミン錯体及び／又は低原子価金属アンミン錯
   体で実質的に置換してなることを特徴とするカチオン置
   換粘土鉱物。
2. 【請求項２】請求項１記載の粘土鉱物よりなることを特
   徴とするクロマトグラフィー用充填剤。
3. 【請求項３】請求項１記載の粘土鉱物において、低原子
   価金属アンミン錯体は、［Ｍ（ＮＨ₃）_1■3］Ｘ （Ｍ
   ＝金属，Ｘ＝アニオン）であることを特徴とするカチオ
   ン置換粘土鉱物。
4. 【請求項４】請求項３記載の粘土鉱物において、Ｍは１
   価の銅、銀または金であることを特徴とするカチオン置
   換粘土鉱物。
5. 【請求項５】水膨潤性粘土鉱物をアンモニアアルカリ性
   のアンモニウムイオン溶液に浸せきしたのち乾燥したも
   のを、低原子価金属アンミン錯体及び／又は低原子価金
   属アミン錯体溶液に浸せきし、層間カチオンイオンを低
   原子価金属アミン錯体及び／又は低原子価金属アンミン
   錯体で実質的に置換することを特徴とするカチオン置換
   粘土鉱物の製造方法。
6. 【請求項６】請求項５記載の方法において、低原子価金
   属アミン錯体及び／又は低原子価金属アンミン錯体溶液
   に浸せきし、イオン交換された粘土鉱物をさらに焼成す
   ることを特徴とするカチオン置換粘土鉱物の製造方法。
7. 【請求項７】魚類油脂を、水膨潤性粘土鉱物の層間のカ
   チオンを低原子価金属アミン錯体及び／又は低原子価金
   属アンミン錯体で実質的に置換してなる充填剤により、
   ドコサヘキサエン酸を分離・採取することを特徴とする
   魚類油脂の分離方法。
8. 【請求項８】請求項７記載の方法において、魚類油脂を
   加水分解し、さらにエステル化した脂肪酸エステルを分
   離対象として用いることを特徴とする魚類油脂の分離方
   法。
9. 【請求項９】請求項７または８記載の方法において、溶
   媒として超臨界流体を用いることを特徴とする魚類油脂
   の分離方法。