JPH069541A

JPH069541A - α−グアニジノ酸誘導体およびその製造方法

Info

Publication number: JPH069541A
Application number: JP4185946A
Authority: JP
Inventors: Yumiko Kimura; 由美子木村; Yasuyuki Ueki; 靖之植木
Original assignee: Sumitomo Pharmaceuticals Co Ltd
Current assignee: Sumitomo Pharmaceuticals Co Ltd
Priority date: 1992-06-19
Filing date: 1992-06-19
Publication date: 1994-01-18

Abstract

(57)【要約】【目的】ペプチドのＮ末端をアミジノ化された化合物
を穏和で、選択的に得るための化合物の提供。【構成】一般式（１）【化１】または、一般式（２）【化２】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、α−グアニジノ酸誘導
体またはその製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】α−グアニジノ酸はα−アミノ酸のアミ
ノ基がアミジノ化された化合物である。蛋白質構成アミ
ノ酸に対応するα−グアニジノ酸が知られている（ツア
イツシュリフト・フュア・フィジカリッシェ・ヘミー，
２７９巻，５２頁，１９４３年；ビュレタン・ド・ラ・
ソシエテ・シミク・ド・フランセ，１９５５年，１２２
４頁；シンセシス，１９８６年，７７７頁；アナリティ
カル・バイオケミストリー，１５６巻，３１頁）。２０
種のアミノ酸のうちグリシンに対応するグアニド酢酸や
アスパラギン酸に対応するグアニジノコハク酸は天然物
として知られており、その他のものもすでに合成されて
いる。しかし、グアニジノ酸を構成成分として含むペプ
チド、蛋白質の例は少なく、天然物としては抗生物質フ
ェガノマイシン一点しか知られていない（ペプチド・ケ
ミストリー，１９７７年，１２１頁）。

【０００３】ペプチドを修飾するにはいろいろな方法が
あるが、その一つとしてＮ末端をアミジノ化すること
は、高活性誘導体をデザインする上でも有用な方法であ
ると考える。また、ペプチド化合物を医薬品として応用
する場合に問題となるのはその体内動態であり、血液中
及び体内の各組織中での酵素消化を防ぐ事が必須であ
る。生理活性ペプチドのＮ末端をアミジノ化すること
は、ペプチド化合物の体内動態の改善にも有用であるこ
とが期待される。発明者らの研究によれば、Ｎ末端アミ
ノ酸残基をグアニジノ酸に変換することによりペプチド
性医薬品の血清中安定性が向上する事が明らかとなって
いる。また、中枢作用薬の場合には血液脳関門透過性が
問題となるが、最近の研究によれば、ペプチド分子の場
合、塩基性を上昇させることにより、ペプチドを脳内に
移行させることができると報告されている（ジャーナル
・オブ・ファーマコロジー・アンド・エクスペリメンタ
ル・セラピューティクス，２５１巻，３５１頁，１９８
９年）。このような修飾によりペプチド化合物の脳内移
行性が高められる事も期待さる。

【０００４】Ｎ末端グアニジノ酸含有ペプチドを合成す
る方法としては、ペプチドＮ末端アミノ基をアミジノ化
試薬、すなわち２−アミジノ−３，５−ジメチルピラゾ
ールでアミジノ化する方法が知られている（公開特許公
報，昭５７−５６４４７；同，昭６３−７９８３６；フ
ェデレーション・オブ・ヨーロピアン・バイオケミカル
・ソサイエテイーズ・レターズ，１１０巻，８５頁，１
９８０年）。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】しかし、前記方法では
条件が過激であり、分子内に他にアミノ基が存在する場
合選択的にアミジノ化出来ない。又、グアニジノ酸のグ
アニジノ基をニトロ基で保護した化合物をペプチドに導
入して後に脱保護する方法が知られている（ペプチド・
ケミストリー，１９７７年，１２１頁；公開特許公報，
昭５０−１５４２４８；インターナショナル・ジャーナ
ル・オブ・ペプチド・アンド・プロテイン・リサーチ，
３５巻，１２頁，１９９０年）。この場合ニトロ基は接
触還元及びフッ化水素を用いて除去することができる。
しかし、ペプチド合成においてはそれぞれの場合に応じ
て保護基を使い分けることが重要であり、例えば保護ペ
プチド上の他の保護基を選択的に接触還元で除去するよ
うな場合ニトロ基は適さない。また、ニトログアニジノ
化合物は安全面での問題が懸念される。そのためにもこ
れと異なる新しいグアニジノ基導入のための化合物の開
発が望まれていた。

【０００６】

【課題を解決する手段】本発明者らは上記課題を解決す
るために鋭意検討を重ねた結果、一般式（１）

【化７】（式中、Ｒ₁はベンゼン環上に１ないし５個のメチル基
または１ないし５個のメトキシ基を有する置換ベンゼン
スルホニル基を表す。Ｒ₂はAla 、Val 、Leu 、Ile 、
Nle 、Gln 、Asn 、Phe 、Met 、Met(O)、Met(O₂) 、Se
r 、Tyr 、Thr、Glu 、Asp 、Lys 、Orn 、Cys 、Trp
、His あるいはArg の側鎖、またはこれらの側鎖官能
基を保護基で保護した側鎖を表す。）または、一般式
（２）

【化８】（式中、Ｒ₁はベンゼン環上に１ないし５個のメチル基
または１ないし５個のメトキシ基を有する置換ベンゼン
スルホニル基を表す。Ｒ₃は水素原子、水酸基または保
護基で保護した水酸基を表す。ｎは１または２の整数を
表す。）で表されるα−グアニジノ酸誘導体およびその
製造法を得、本発明を完成するに至った。

【０００７】すなわち、発明者らはペプチドのＮ末端を
アミジノ化する際の有用な前駆体として、一般式（１）
および（２）で表される新規化合物を見い出し、その製
造法を開発した。

【０００８】ベンゼン環上に１ないし５個のメチル基ま
たは１ないし５個のメトキシ基を有する置換ベンゼンス
ルホニル基としては、例えばｐ−トルエンスルホニル
基、メシチレンスルホニル基が挙げられる。

【０００９】一般式（１）または一般式（２）のα位炭
素原子の立体配置についてはＲ又はＳを表す。

【００１０】水酸基の保護基としては例えばベンジル
基、ｐ−メトキシベンジル基などが挙げられる。

【００１１】α−アミノ酸の側鎖の保護基としては例え
ば、水酸基、カルボキシル基、アミノ基、チオール基、
イミノ基、グアニジノ基などの保護基が挙げらる。

【００１２】具体的にα−アミノ酸がSer 、Tyr 、Thr
の場合の、水酸基の保護基としては、例えばベンジル
基、ｐ−メトキシベンジル基などが挙げられる。

【００１３】具体的にα−アミノ酸がGlu 、Asp の場合
の、カルボキシル基の保護基としては、例えばベンジル
エステル、メチルエステル、エチルエステル、ｐ−メト
キシベンジルエステル、フェナシルエステル、ｔ−ブト
キシカルボニルエステル、シクロヘキシルエステルなど
が挙げられる。

【００１４】具体的にα−アミノ酸がLys 、Orn の場合
の、アミノ基の保護基としては、例えばベンジルオキシ
カルボニル基、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル
基、２，４−ジクロロベンジルオキシカルボニル基、ｔ
−ブトキシカルボニル基、トリクロロエトキシカルボニ
ル基、フルオレニルメチルオキシカルボニル基等が挙げ
られる。

【００１５】具体的にα−アミノ酸がCys の場合の、チ
オールの保護基としては、例えばベンジル基、メトキシ
ベンジル基、トリチル基、アセタミドメチル基等が挙げ
られる。

【００１６】具体的にα−アミノ酸がTrp の場合の、イ
ミノ基の保護基としては、例えばホルミル基、トリクロ
ロエトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル
基、２，４−ジクロロベンジルオキシカルボニル基等が
挙げられる。

【００１７】具体的にα−アミノ酸がHis の場合の、イ
ミノ基の保護基としては、例えばトシル基、ベンジル
基、ベンジルオキシメチル基、ｔ−ブトキシカルボニル
基等が挙げられる。

【００１８】具体的にα−アミノ酸がArg の場合の、グ
アニジノ基の保護基としては、例えばトシル基，ニトロ
基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボ
ニル基、メシチレンスルホニル基、アダマンチルオキシ
カルボニル基などが挙げられる。

【００１９】α−アミノ酸の側鎖とは、α炭素に結合す
るβ炭素以下の置換基を表す。具体的にはα−アミノ酸
がAla の場合は側鎖がメチル基、Val の場合はイソプロ
ピル、Leu の場合はイソブチル、Ile の場合は sec−ブ
チル、Nle の場合はｎ−ブチル、Gln の場合は２−カル
バモイルエチル、Asn の場合はカルバモイルメチル、Ph
e の場合はベンジル、Met の場合は２−（メチルチオ）
エチル、Met(O)の場合は２メチルスルフィニルエチル、
Met(O ₂) の場合は２−メチルスルホニルエチル、Ser
の場合はヒドロキシメチル、Tyr の場合はｐ−ヒドロキ
シベンジル、Thr の場合は１−ヒドロキシエチル、Glu
の場合は２−カルボキシエチル、Asp の場合はカルボキ
シメチル、Lys の場合は４−アミノブチル、Orn の場合
は３−アミノプロピル、Cys の場合はメルカプトメチ
ル、Trp の場合は３−インドリルメチル、His の場合は
４−イミダゾリルメチル、Arg の場合は３−グアニジノ
プロピルである。

【００２０】一方、一般式（２）の式中のＲ₃が保護基
で保護した水酸基の場合の保護基としては、例えばベン
ジル基、ｐ−メトキシベンジル基などが挙げられる。

【００２１】好ましいｎとしては１が挙げられる。

【００２２】一般式（１）および（２）で示される化合
物は、カルボジイミド型の縮合剤（例えばジシクロヘキ
シルカルボジイミド、エチル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ
プロピルカルボジイミド等）の存在下に有機溶媒（例え
ばＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）、塩化メチレン等）
中、Ｎ末端遊離のペプチドまたは保護ペプチドと縮合す
ることができ、得られた保護Ｎ末端アミジノ化ペプチド
は、通常のペプチド合成において脱保護の際汎用される
フッ化水素酸やトリフルオロメタンスルホン酸を用い
て、他の側鎖保護基とともにグアニジノ基上の保護基を
除去することができる。フッ化水素酸やトリフルオロメ
タンスルホン酸の量としては原料１mmolに対し、５から
２００mlの範囲が挙げられる。以上に述べた縮合および
脱保護の反応条件は通常のペプチド化学において用いら
れる方法に準ずる。これについては、例えば泉屋信夫他
著、「ペプチド合成の基礎と応用」、丸善（株）、１９
８５年等に記載されている。

【００２３】このように、一般式（１）および（２）で
示される化合物は、Ｎ末端にα−グアニジノ酸を有する
ペプチドを合成する際の重要な化合物である。

【００２４】一般式（１）および（２）で示される本化
合物は、それぞれ一般式（３）および（４）で示される
合成中間体に０から３０℃で濃アンモニア水を作用させ
ることにより得ることができる。濃アンモニア水の濃度
としては１０〜３０％の範囲が挙げられる。濃アンモニ
ア水の量としては合成中間体１mmolにたいし５〜１００
mlの範囲が挙げられる。同合成中間体は、次の２種類の
製造方法により合成される。

【００２５】第一の方法は、まずスルホンアミドと二硫
化炭素を水酸化ナトリウム水溶液存在下に適当な溶媒中
（例えばＤＭＦ等）で反応し、ついでヨウ化メチルを加
えてＳ，Ｓ−ジメチル−Ｎ−ｐ−トルエンスルホニルイ
ミノジチオカルボイミデートを得る（ケミカル・ベリヒ
テ，９９巻，２８８５頁，１９６６年）。二硫化炭素の
量としてはスルホンアミドに対し１〜２当量の範囲が挙
げられる。水酸化ナトリウムの量としてはスルホンアミ
ドに対し２〜４当量の範囲が挙げられる。これを対応す
るα−アミノ酸のｔ−ブチルエステルと適当な有機溶媒
（例えばＤＭＦ、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）等）中
で４０℃ないし１００℃に加熱して反応せしめる。α−
アミノ酸のｔ−ブチルエステルの量としてはＳ，Ｓ−ジ
メチル−Ｎ−ｐ−トルエンスルホニルイミノジチオカル
ボイミデートに対し１〜３当量の範囲が挙げられる。次
いで、通常のペプチド化学において用いられる方法とし
てトリフルオロ酢酸などの酸を作用させてカルボキシル
基を遊離し、一般式（３）および（４）で示される化合
物が得られる。

【００２６】第二の方法は、Ｓ，Ｓ−ジメチル−Ｎ−ｐ
−トルエンスルホニルイミノジチオカルボイミデートと
塩化スルフリルを四塩化炭素などの本反応の試剤に対し
不活性な適当な有機溶媒中で約７０℃に加熱してＮ−
（メチルメルカプトクロロメチレン）−ｐ−トルエンス
ルホンイミドを得る（ジャーナル・オブ・オーガニック
・ケミストリー，４２巻，３０６５頁，１９７７年）。
塩化スルフリルの量としてはＳ，Ｓ−ジメチル−Ｎ−ｐ
−トルエンスルホニルイミノジチオカルボイミデートに
対し１〜１．５当量の範囲が挙げられる。Ｎ−（メチル
メルカプトクロロメチレン）−ｐ−トルエンスルホンイ
ミドと対応するα−アミノ酸とを適当な溶媒（アセト二
トリル−水、アセト二トリル、メタノール、メタノール
−水等）中、０℃ないし５０℃で反応し、一般式（３）
および（４）で示される化合物が得られる。Ｎ−（メチ
ルメルカプトクロロメチレン）−ｐ−トルエンスルホン
イミドの量としてはα−アミノ酸に対し１〜２当量の範
囲が挙げられる。

【００２７】

【実施例】実施例により本発明を具体的に説明するが、
これにより本発明の範囲を限定するものではない。

【００２８】本明細書においては、アミノ酸、溶媒など
について、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢに基づく略号および、当
該分野における慣用略号で表示する場合があり、それら
を例示すると次の通りである。

【００２９】略号名称 Ala アラニン Gly グリシン Asn アスパラギン Val バリン Asp アスパラギン酸 Leu ロイシン Ile イソロイシン Nle ノルロイシン Gln グルタミン Phe フェニルアラニン Met メチオニン Met(O) メチオニンオキシド Met(O2) メチオニンスルホン Ser セリン Thr スレオニン Tyr チロシン Glu グルタミン酸 Lys リシン Orn オルニチン Cys システイン Trp トリプトファン His ヒスチジン Arg アルギニン DMF ジメチルホルムアミド THF テトラヒドロフラン

【００３０】実施例１）Ｓ−メチル−Ｎ−ｐ−トルエ
ンスルホニル−Ｎ’−（（１Ｓ，２Ｓ）−１−カルボキ
シル−２−メチルブチル）イソチオウレアＬ−イソロイシン−ｔ−ブチルエステル・１ＨＣｌ塩
（３．００ｇ，１３．４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラ
ン（ＴＨＦ）（３７ｍｌ）に溶かし、Ｓ，Ｓ−ジメチル
−Ｎ−ｐ−トルエンスルホニルイミノジチオカルボイミ
デート（４．１７ｇ，１５．１ｍｍｏｌ）、トリエチル
アミン（１．３５g,１３．１ｍｍｏｌ）を加えて１６時
間加熱還流下に攪はんした。反応混合物を酢酸エチルで
希釈し、１０％クエン酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウ
ム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄した。有機層を無水硫
酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し、濾液を
減圧濃縮した。得られた油状物をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィー（シリカゲル（８０g ）、ヘキサン：酢
酸エチル（５：１から４：１））で精製した。収量５．
０５ｇ（９１．１％）。次に、得られた化合物（４．９
６ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（ＴＦ
Ａ）（５０ｍｌ）−アニソール（７ｍｌ）−エチルメチ
ルスルフィド（３ｍｌ）に溶かし、４時間攪はんした。
反応混合物を減圧濃縮した後、残さを飽和炭酸水素ナト
リウム水溶液に溶かし、エーテルで洗浄した。水層をク
エン酸で酸性とし、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽
和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した
後、乾燥剤を濾別し濾液を減圧濃縮し、油状物を得た。
収量４．０７ｇ（９４．７％）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃），δ（ｐｐｍ）：８．７５
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ），７．８５（２Ｈ，ｄ，
Ｊ＝７．４Ｈｚ），７．２５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈ
ｚ），４．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．７ａｎｄ９．３
Ｈｚ），２．４０（３Ｈ，Ｓ），２．３３（３Ｈ，
Ｓ），２．００（１Ｈ，ｍ），１．５３（１Ｈ，ｍ），
１．２８（１Ｈ，ｍ），０．９５（６Ｈ，ｍ）．ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（登録商標）
（４．０ｍｍＸ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦ
Ａ／Ｈ₂Ｏ，Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：
１０−７０％／３０ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ
２２０ｎｍ）：２１．３８ｍｉｎ .

【００３１】実施例２）Ｎ−ｐ−トルエンスルホニル
アミジノイソロイシン（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ｐ−トル
エンスルホニルグアニジノ−３−メチルペンタン酸）実施例１で得た化合物（４．０７ｇ，１１．４ｍｍｏ
ｌ）を２９％アンモニア水（３５ｍｌ）に溶かし、８日
間攪はんした。水を加えて濃縮する操作を数回繰り返し
た後、クエン酸を加えて溶液を酸性とした。これを５℃
下に放置し，生じた沈澱を濾取した。収量２．９２ｇ
（７８．２％）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃），δ（ｐｐｍ）：７．６０
（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），７．２５（２Ｈ，ｄ，
Ｊ＝７．４Ｈｚ），７．００（０．５Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．
４Ｈｚ），６．７０（１Ｈ，ｂｓ），４．２０（１Ｈ，
ｍ），２．３２（３Ｈ，Ｓ），１．７３（１Ｈ，ｍ），
１．３０（１Ｈ，ｍ），１．１０（１Ｈ，ｍ），０．８
０（６Ｈ，ｍ）．ＦＤ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］⁺＝３２８ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（４．０ｍｍ
Ｘ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ，
Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：１０−７０％
／３０ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０ｎ
ｍ）：１６.１１ｍｉｎ，

【００３２】実施例３）Ｓ−メチル−Ｎ−ｐ−トルエ
ンスルホニル−Ｎ’−（（Ｓ）−１−カルボキシルイソ
ペンチル）イソチオウレアＬ−ロイシン（９９５ｍｇ，７．５８ｍｍｏｌ）をアセ
トニトリル−水（１：１）（２０ｍｌ）に懸濁し、Ｎ−
（メチルメルカプトクロロメチレン）−ｐ−トルエンス
ルホンイミド（２．００ｇ，７．５８ｍｍｏｌ）、トリ
エチルアミン（１．５３ｇ，１５．２ｍｍｏｌ）を加え
て室温で１時間攪はんした。飽和炭酸水素ナトリウム水
溶液（２０ｍｌ）−水（１００ｍｌ）を加え、エーテル
で洗浄した後、水層をクエン酸で酸性とした。これを酢
酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水
硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別し濾液を減
圧濃縮して、油状物を得た。収量２．８８ｇ（定量
的）。ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（４．０ｍｍ
Ｘ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ，
Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：１０−７０％
／３０ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０ｎｍ
）：２１．３７ｍｉｎ．

【００３３】実施例４）Ｎ−ｐ−トルエンスルホニル
アミジノロイシン（（Ｓ）−２−ｐ−トルエンスルホニ
ルグアニジノ−４−メチルペンタン酸）実施例３で得た化合物（２．８８ｇ，７．５８ｍｍｏ
ｌ）を２９％アンモニア水（６５ｍｌ）に溶かし、３日
間攪はんした。水を加えて濃縮する操作を数回繰り返し
た後、水溶液（１．５ｌ）に５％塩酸を加えて溶液を酸
性とした。これを５℃下に放置し，生じた沈澱を濾取し
た。更に、濾液をＨＰ−２０カラムクロマトグラフィー
（５ｃｍΦ ｘ１５ｃｍ，８０％メタノールで溶出）
で脱塩し、目的物を回収した。収量１．２０ｇ（４
８．５％）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃），δ（ｐｐｍ）：７．７０
（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．３０（２Ｈ，ｄ，
Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．５０−６．８０（２Ｈ，），
４．１５（１Ｈ，ｂｓ），２．３０（３Ｈ，ｓ），
１．６０−１．３０（３Ｈ，ｍ），１．７５（６Ｈ，
ｍ）ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（４．０ｍｍ
Ｘ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ，
Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：２０−８０％
／３０ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０ｎｍ
）：１２．０８ｍｉｎ．

【００３４】実施例５）Ｓ−メチル−Ｎ−ｐ−トルエ
ンスルホニル−Ｎ’−（（Ｓ）−１−カルボキシル−３
−メチルスルホニルプロピル）イソチオウレアＬ−メチオニンスルホン（６４０ｍｇ，７．５８ｍｍｏ
ｌ）をアセトニトリル−水（１：１）（１０ｍｌ）に懸
濁し、Ｎ−（メチルメルカプトクロロメチレン）−ｐ−
トルエンスルホンイミド（９３６ｍｇ，３．５５ｍｍｏ
ｌ）、トリエチルアミン（１．４４ｇ，１４．２ｍｍｏ
ｌ）を加えて室温で１時間攪はんした。トリエチルアミ
ン（１．４４ｇ，１４．２ｍｍｏｌ）を追加し、更に２
時間攪はんした。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０
ｍｌ）で希釈し、エーテルで洗浄した後、水層をクエン
酸で酸性とした。これを酢酸エチルで抽出し、有機層を
飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し
た。乾燥剤を濾別し濾液を減圧濃縮して、油状物を得
た。収量１．４５ｇ（定量的）。ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（４．０ｍｍ
Ｘ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ，
Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：１０−７０％
／３０ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０ｎｍ
）：１３．７９ｍｉｎ．

【００３５】実施例６）Ｎ−ｐ−トルエンスルホニル
アミジノメチオニンジオキシド（（Ｓ）−２−ｐ−トル
エンスルホニルグアニジノ−４−メタンスルホニルブタ
ン酸）実施例５で得た化合物（１．４５ｇ，３．５５ｍｍｏ
ｌ）を２９％アンモニア水（４０ｍｌ）に溶かし、２４
時間攪はんした。反応混合物を３０ｍｌに濃縮し、クエ
ン酸でｐＨ４とした。水で希釈し、ＨＰ−２０カラムク
ロマトグラフィー（５ｃｍΦ ｘ１５ｃｍ，５０％メ
タノールで溶出）で脱塩した。目的物を含む画分を集め
てメタノールを留去した後凍結乾燥した。収量８９９
ｍｇ（６７．１％）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃），δ（ｐｐｍ）：７．６２
（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．２８（２Ｈ，ｄ，
Ｊ＝９．０Ｈｚ），６．９２（１Ｈ，ｂｓ），４．１０
（１Ｈ，ｍ），３．２０−２．８５（５Ｈ，ｍ），２．
３５（３Ｈ，ｓ），２．１０（２Ｈ，ｍ）ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（４．０ｍｍ
Ｘ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ，
Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：１０−７０％
／３０ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０ｎ
ｍ）：１０．３９ｍｉｎ．

【００３６】実施例７）Ｓ−メチル−Ｎ−ｐ−トルエ
ンスルホニル−Ｎ’−（（Ｓ）−１−カルボキシル−２
−（ｐ−Ｏ−ベンジルオキシフェニル）エチル）イソチ
オウレアＬ−Ｏ−ベンジルチロシン（３．０８ｇ，１１．４ｍｍ
ｏｌ）をアセトニトリル−水（１：１）（５６ｍｌ）に
懸濁し、Ｎ−（メチルメルカプトクロロメチレン）−ｐ
−トルエンスルホンイミド（２．００ｇ，７．５８ｍｍ
ｏｌ）、トリエチルアミン（２．５３ｇ，２５．０ｍｍ
ｏｌ）を加えて室温で３時間攪はんした。アセトニトリ
ルを留去後、酢酸エチルで抽出した。有機層を１０％ク
エン酸水溶液、ついで飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マ
グネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別し濾液を減圧濃縮
して、油状物を得た。収量５．６７ｇ（定量的）。ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（４．０ｍｍ
Ｘ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ，
Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：４０−８０％
／２０ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０ｎｍ
）：１１．６３ｍｉｎ．

【００３７】実施例８）Ｎ−ｐ−トルエンスルホニル
アミジノ−Ｏ−ベンジルチロシン（（Ｓ）−２−ｐ−ト
ルエンスルホニルグアニジノ−３−Ｐ−ベンジルオキシ
フェニルプロパン酸）実施例７で得た化合物（５．６７ｇ，１１．３７ｍｍｏ
ｌ）を２９％アンモニア水（１５０ｍｌ）に溶かし、３
日間攪はんした。氷冷下、反応混合物を２０％クエン酸
水溶液（１ｌ）中に注いだ。溶液のｐＨを４から５に保
つようにクエン酸を追加した。生じた沈澱を濾取した。
収量５．３１ｇ（定量的）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃），δ（ｐｐｍ）：７．１２
−７．５２（１５Ｈ，ｍ），４．９７（２Ｈ，ｓ），
４．０８（１Ｈ，ｍ），２．９２（２Ｈ，ｍ），２．１
２（３Ｈ，ｓ）ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（４．０ｍｍ
Ｘ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ，
Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：４０−８０％
／２０ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０ｎ
ｍ）：８．９６５ｍｉｎ．

【００３８】実施例９）Ｓ−メチル−Ｎ−メシチレン
スルホニル−Ｎ’−（（Ｓ）−１−カルボキシル−２−
（ｐ−Ｏ−ベンジルオキシフェニル）エチル）イソチオ
ウレアＬ−Ｏ−ベンジルチロシン（４３５ｍｇ，１．６０ｍｍ
ｏｌ）をアセトニトリル−水（１：１）（８ｍｌ）に懸
濁し、Ｎ−（メチルメルカプトクロロメチレン）メシチ
レンスルホンイミド（５００ｍｇ，１．６０ｍｍｏ
ｌ）、トリエチルアミン（３２５ｍｇ，３．２１ｍｍｏ
ｌ）を加えて室温で３時間攪はんした。飽和炭酸水素ナ
トリウム水溶液（３０ｍｌ）−水（５０ｍｌ）を加え、
エーテルで洗浄した後、水層をクエン酸で酸性とした。
これを酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄
後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別し
濾液を減圧濃縮して、油状物を得た。収量８７７ｍｇ
（定量的）。ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（４．０ｍｍ
Ｘ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ，
Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：３０−８０％
／２５ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０ｎ
ｍ）：２０．４９ｍｉｎ．

【００３９】実施例１０）Ｎ−メシチレンスルホニル
アミジノ−Ｏ−ベンジルチロシン（（Ｓ）−２−メシチ
レンスルホニルグアニジノ−３−ｐ−ベンジルオキシフ
ェニルプロパン酸）実施例９で得た化合物（８７７ｍｇ，１．６０ｍｍｏ
ｌ）を２９％アンモニア水（２０ｍｌ）に溶かし、５．
５日間攪はんした。氷冷下、反応混合物をクエン酸で酸
性とし、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水
で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を
濾別し濾液を減圧濃縮して得られた油状物にエーテルを
加えて懸濁し、生成したゲル状固体を濾取した。収量
７８８ｍｇ（８８．７％）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃），δ（ｐｐｍ）：７．４０
（５Ｈ，ｍ），６．９０（７Ｈ，ｍ），６．６５（１
Ｈ，ｂｓ），５．０５（２Ｈ，ｓ），４．３５（１Ｈ，
ｄｄｄ），２．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４ａｎｄ１
６Ｈｚ），２．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１ａｎｄ１
６Ｈｚ），２．５５（６Ｈ，ｓ），２．２０（３Ｈ，
ｓ）ＨＰＬＣ保持時間（μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ（４．０ｍｍ
Ｘ３００ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ，
Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：３０−８０
％／２５ｍｉｎ，１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０ｎｍ
）：１６．０４ｍｉｎ．

【００４０】参考例１）Ｎ−アミジノ−Ｌ−イソロイ
シル−Ｌ−セリル−Ｌ−グルタミニル−Ｄ−トリプトフ
ィル−Ｌ−アラニン−８−アミノオクチルアミドＢｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ＯＢｚｌ）−Ｌ−Ｇｌｎ−Ｄ−Ｔ
ｒｐ−Ｌ−Ａｌａ−ＮＨ（ＣＨ₂）₈ＮＨＺ（２８０ｍ
ｇ，０．２８９ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３ｍ
ｌ）に懸濁し、メタンスルホン酸（１３８ｍｇ，１．
４４ｍｍｏｌ）を適下し、室温で１時間攪拌した。ＤＭ
Ｆ（５ｍｌ）を加えた後、氷冷下トリエチルアミン（１
４６ｍｇ，１．４４ｍｍｏｌ）で中和した。次いで実施
例２で得た化合物（１４３ｍｇ，０．４３５ｍｍｏ
ｌ）、水溶性カルボジイミド塩酸塩（７４ｍｇ，０．
３８６ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下に２０時間攪拌した。
反応混合物を水（約３％食塩含有）中に注ぎ、生じた沈
澱を濾取した。これをアニソール（３ｍｌ）−エチルメ
チルスルフィド（０．５ｍｌ）に懸濁し、フッ化水素
（２０ｍｌ）を加えて、−１０℃下に１時間、０℃下に
１時間攪拌した。フッ化水素を留去し、残さにエーテル
を加えて３０分攪拌し、生じた粉末を濾取した。これを
水に溶かして凍結乾燥した。得られた粗生成物をＨＰＬ
Ｃで精製した（カラム：ＹＭＣ−ＯＤＳＳＨ−３６３
−５（３ｃｍФ ｘ２５ｃｍ）、溶媒：Ａ液：０．１
％ＴＦＡ／Ｈ₂ＯＢ液：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃Ｃ
Ｎ、Ｂ％：０−７％（１時間）−２３％（４時間）−３
０％（１．５時間）、流速：７ｍｌ／ｍｉｎ、検出：Ｕ
Ｖ２８０ｎｍ）。目的物溶出画分を集めて凍結乾燥し、
無色粉末を得た。収量：１８４ｍｇ。ＦＤ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］⁺＝７７２；ＨＰＬＣ保持時間（ＳｕｍｉｐａｘＡ２１１（４．６
ｍｍｘ２５０ｍｍ），Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ
₂Ｏ，Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ，Ｂ％：１０−
５０％／４０ｍｉｎ，１．０ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２２０
ｎｍ）：２４．１１ｍｉｎ。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（１）【化１】（式中、Ｒ₁はベンゼン環上に１ないし５個のメチル基
または１ないし５個のメトキシ基を有する置換ベンゼン
スルホニル基を表す。Ｒ₂はAla 、Val 、Leu 、Ile 、
Nle 、Gln 、Asn 、Phe 、Met 、Met(O)、Met(O ₂) 、
Ser 、Tyr 、Thr、Glu 、Asp 、Lys 、Orn 、Cys 、Trp
、His あるいはArg の側鎖、またはこれらの側鎖官能
基を保護基で保護した側鎖を表す。）または、一般式
（２）【化２】（式中、Ｒ₁はベンゼン環上に１ないし５個のメチル基
または１ないし５個のメトキシ基を有する置換ベンゼン
スルホニル基を表す。Ｒ₃は水素原子、水酸基または保
護基で保護した水酸基を表す。ｎは１または２の整数を
表す。）で表されるα−グアニジノ酸誘導体。
【請求項２】一般式（１）【化３】（式中、Ｒ₁はベンゼン環上に１ないし５個のメチル基
または１ないし５個のメトキシ基を有する置換ベンゼン
スルホニル基を表す。Ｒ₂はAla 、Val 、Leu 、Ile 、
Nle 、Gln 、Asn 、Phe 、Met 、Met(O)、Met(O ₂) 、
Ser 、Tyr 、Thr、Glu 、Asp 、Lys 、Orn 、Cys 、Trp
、His あるいはArg の側鎖、またはこれらの側鎖官能
基を保護基で保護した側鎖を表す。）で表される請求項
１記載のα−グアニジノ酸誘導体。
【請求項３】一般式（２）【化４】（式中、Ｒ₁はベンゼン環上に１ないし５個のメチル基
または１ないし５個のメトキシ基を有する置換ベンゼン
スルホニル基を表す。Ｒ₃は水素原子、水酸基または保
護基で保護した水酸基を表す。ｎは１または２の整数を
表す。）で表される請求項１記載のα−グアニジノ酸誘
導体。
【請求項４】Ｒ₁がｐ−トルエンスルホニル基を表す
請求項１、２または３記載のα−グアニジノ酸誘導体。
【請求項５】Ｒ₁がメシチレンスルホニル基を表す請
求項１、２または３記載のα−グアニジノ酸誘導体。
【請求項６】Ｒ₁がｐ−トルエンスルホニル基を表
し、ｎが１を表す請求項３記載のα−グアニジノ酸誘導
体。
【請求項７】Ｒ₁がメシチレンスルホニル基を表し、
ｎが１を表す請求項３記載のα−グアニジノ酸誘導体。
【請求項８】Ｒ₁がｐ−トルエンスルホニル基を表
し、Ｒ₂が-CH ₂CH₂SO₂CH₃を表す請求項２記載のα
−グアニジノ酸誘導体。
【請求項９】Ｒ₁がメシチレンスルホニル基を表し、
Ｒ₂が-CH ₂CH₂SO₂CH ₃を表す請求項２記載のα−グ
アニジノ酸誘導体。
【請求項１０】Ｒ₁がｐ−トルエンスルホニル基を表
し、Ｒ₂が２−ブチル基を表す請求項２記載のα−グア
ニジノ酸誘導体。
【請求項１１】Ｒ₁がメシチレンスルホニル基を表
し、Ｒ₂が２−ブチル基を表す請求項２記載のα−グア
ニジノ酸誘導体。
【請求項１２】Ｒ₁がｐ−トルエンスルホニル基を表
し、Ｒ₂が２−メチルプロピル基を表す請求項２記載の
α−グアニジノ酸誘導体。
【請求項１３】Ｒ₁がメシチレンスルホニル基を表
し、Ｒ₂が２−メチルプロピル基を表す請求項２記載の
α−グアニジノ酸誘導体。
【請求項１４】Ｒ₁がｐ−トルエンスルホニル基を表
し、Ｒ₂がｐ−ベンジルオキシベンジル基を表す請求項
２記載のα−グアニジノ酸誘導体。
【請求項１５】Ｒ₁がメシチレンスルホニル基を表
し、Ｒ₂がｐ−ベンジルオキシベンジル基を表す請求項
２記載のα−グアニジノ酸誘導体。
【請求項１６】一般式（３）【化５】（式中、Ｒ₁はベンゼン環上に１ないし５個のメチル基
または１ないし５個のメトキシ基を有する置換ベンゼン
スルホニル基を表す。Ｒ₂はAla 、Val 、Leu 、Ile 、
Nle 、Gln 、Asn 、Phe 、Met 、Met(O)、Met(O₂) 、Se
r 、Tyr 、Thr、Glu 、Asp 、Lys 、Orn 、Cys 、Trp
、His あるいはArg の側鎖、またはこれらの側鎖官能
基を保護基で保護した側鎖を表す。）で表される化合物
を濃アンモニア水で処理することを特徴とする、請求項
２記載のα−グアニジノ酸誘導体を製造する方法。
【請求項１７】一般式（４）【化６】（式中、Ｒ₁はベンゼン環上に１ないし５個のメチル基
または１ないし５個のメトキシ基を有する置換ベンゼン
スルホニル基を表す。Ｒ₃は水素原子、水酸基または保
護基で保護した水酸基を表す。ｎは１または２の整数を
表す。）で表される化合物を濃アンモニア水で処理する
ことを特徴とする、請求項３記載のα−グアニジノ酸誘
導体を製造する方法。