JPH0666795A - 糖化ヘモグロビンの測定方法 - Google Patents
糖化ヘモグロビンの測定方法Info
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- JPH0666795A JPH0666795A JP5165119A JP16511993A JPH0666795A JP H0666795 A JPH0666795 A JP H0666795A JP 5165119 A JP5165119 A JP 5165119A JP 16511993 A JP16511993 A JP 16511993A JP H0666795 A JPH0666795 A JP H0666795A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 簡便、迅速に糖化ヘモグロビンの測定を行な
うことができる糖化ヘモグロビンの測定方法を提供する
こと。 【構成】 未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビンを
含むかもしれない検体とを反応させ、抗糖化ヘモグロビ
ン抗体を反応させ、前記糖化ヘモグロビン吸着ラテック
スの抗糖化ヘモグロビン抗体を介する凝集を測定するこ
とから成る糖化ヘモグロビンの測定方法を提供した。ま
た、未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビンを含むか
もしれない検体と、粒子に結合された抗糖化ヘモグロビ
ン抗体とを反応させ、免疫凝集反応を生起させた後、得
られた凝集より前記糖化ヘモグロビンを測定することか
ら成る糖化ヘモグロビンの測定方法を提供した。
うことができる糖化ヘモグロビンの測定方法を提供する
こと。 【構成】 未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビンを
含むかもしれない検体とを反応させ、抗糖化ヘモグロビ
ン抗体を反応させ、前記糖化ヘモグロビン吸着ラテック
スの抗糖化ヘモグロビン抗体を介する凝集を測定するこ
とから成る糖化ヘモグロビンの測定方法を提供した。ま
た、未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビンを含むか
もしれない検体と、粒子に結合された抗糖化ヘモグロビ
ン抗体とを反応させ、免疫凝集反応を生起させた後、得
られた凝集より前記糖化ヘモグロビンを測定することか
ら成る糖化ヘモグロビンの測定方法を提供した。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、糖化ヘモグロビンの測
定方法に関する。
定方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】糖化ヘモグロビン（Ａ1C）は、糖尿病患
者においてその血中濃度が増加することが知られてお
り、糖化ヘモグロビンの測定は、血糖値の測定と併用し
て糖尿病の診断及び進行度の測定に利用されている。
者においてその血中濃度が増加することが知られてお
り、糖化ヘモグロビンの測定は、血糖値の測定と併用し
て糖尿病の診断及び進行度の測定に利用されている。
【０００３】従来、糖化ヘモグロビンの測定は、検体
（赤血球抽出液）中の糖化ヘモグロビンを固相に直接結
合させ、洗浄し、標識抗糖化ヘモグロビン抗体を反応さ
せ、洗浄し、前記標識を測定することにより行なわれて
いる。しかしながら、この方法では、それぞれの検体中
の糖化ヘモグロビンを固相に直接結合させるいう前処理
（例えば、４℃で一夜インキュベート）が必要であり、
これは時間がかかり、大量の検体を迅速に測定すること
は不可能である。
（赤血球抽出液）中の糖化ヘモグロビンを固相に直接結
合させ、洗浄し、標識抗糖化ヘモグロビン抗体を反応さ
せ、洗浄し、前記標識を測定することにより行なわれて
いる。しかしながら、この方法では、それぞれの検体中
の糖化ヘモグロビンを固相に直接結合させるいう前処理
（例えば、４℃で一夜インキュベート）が必要であり、
これは時間がかかり、大量の検体を迅速に測定すること
は不可能である。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、簡便、迅速に糖化ヘモグロビンの測定を行なうこと
ができる糖化ヘモグロビンの測定方法を提供することで
ある。
は、簡便、迅速に糖化ヘモグロビンの測定を行なうこと
ができる糖化ヘモグロビンの測定方法を提供することで
ある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本願発明者らは、鋭意研
究の結果、糖化ヘモグロビンを含む検体と未感作のラテ
ックスを混合し、続いてあるいは同時に抗糖化ヘモグロ
ビン抗体を反応させることにより、これまでのような時
間がかかる工程を排除することができ、そのため糖化ヘ
モグロビンの測定が迅速に行なえることを見出し本発明
を完成した。
究の結果、糖化ヘモグロビンを含む検体と未感作のラテ
ックスを混合し、続いてあるいは同時に抗糖化ヘモグロ
ビン抗体を反応させることにより、これまでのような時
間がかかる工程を排除することができ、そのため糖化ヘ
モグロビンの測定が迅速に行なえることを見出し本発明
を完成した。
【０００６】すなわち、本発明は、糖化ヘモグロビンを
含む検体と未感作のラテックスを混合し、続いてあるい
は同時に抗糖化ヘモグロビン抗体を反応させ、前記糖化
ヘモグロビンが吸着したラテックスを前記抗糖化ヘモグ
ロビン抗体を介して凝集させることを測定することから
成る糖化ヘモグロビンの測定方法を提供する（以下、こ
の方法を第１の発明ということがある）。
含む検体と未感作のラテックスを混合し、続いてあるい
は同時に抗糖化ヘモグロビン抗体を反応させ、前記糖化
ヘモグロビンが吸着したラテックスを前記抗糖化ヘモグ
ロビン抗体を介して凝集させることを測定することから
成る糖化ヘモグロビンの測定方法を提供する（以下、こ
の方法を第１の発明ということがある）。
【０００７】本発明の方法では、検体の糖化ヘモグロビ
ンＡ1Cが未感作のラテックスに容易に結合するため、抗
糖化ヘモグロビンＡ1C抗体を混ぜるだけで凝集が起き
る。このため、個々の測定においては、検体と抗糖化ヘ
モグロビンＡ1C抗体及び未感作のラテックスを混合する
だけで抗原抗体反応を行なわせることにより検体中の糖
化ヘモグロビンをラテックスに吸着させ、かつ抗糖化ヘ
モグロビンＡ1C抗体により抗原抗体反応を生じ、凝集を
起こさせることができる。この方法は従来のヘモグロビ
ンを直接固相に結合させる工程に比べれば１／１０〜１
／１００の時間で行なえるので、従来方法に比べて大幅
な時間短縮が達成される。
ンＡ1Cが未感作のラテックスに容易に結合するため、抗
糖化ヘモグロビンＡ1C抗体を混ぜるだけで凝集が起き
る。このため、個々の測定においては、検体と抗糖化ヘ
モグロビンＡ1C抗体及び未感作のラテックスを混合する
だけで抗原抗体反応を行なわせることにより検体中の糖
化ヘモグロビンをラテックスに吸着させ、かつ抗糖化ヘ
モグロビンＡ1C抗体により抗原抗体反応を生じ、凝集を
起こさせることができる。この方法は従来のヘモグロビ
ンを直接固相に結合させる工程に比べれば１／１０〜１
／１００の時間で行なえるので、従来方法に比べて大幅
な時間短縮が達成される。
【０００８】さらにまた、本発明者らは、検体と未感作
ラテックスを混合し、これに抗糖化ヘモグロビン抗体を
結合させた粒子を反応させ、生成する凝集により糖化ヘ
モグロビンを測定できることを見いだした。
ラテックスを混合し、これに抗糖化ヘモグロビン抗体を
結合させた粒子を反応させ、生成する凝集により糖化ヘ
モグロビンを測定できることを見いだした。
【０００９】すなわち、本発明は、粒子に結合された抗
糖化ヘモグロビン抗体と、糖化ヘモグロビンを含むかも
しれない検体と未感作ラテックスとを反応させ、免疫凝
集反応を生起させた後、得られた凝集より前記糖化ヘモ
グロビンを測定することから成る糖化ヘモグロビンの測
定方法を提供する（以下、この方法を第２の発明という
ことがある）。
糖化ヘモグロビン抗体と、糖化ヘモグロビンを含むかも
しれない検体と未感作ラテックスとを反応させ、免疫凝
集反応を生起させた後、得られた凝集より前記糖化ヘモ
グロビンを測定することから成る糖化ヘモグロビンの測
定方法を提供する（以下、この方法を第２の発明という
ことがある）。
【００１０】この第２の発明の方法によっても、従来の
方法に比べてはるかに短時間で糖化ヘモグロビンを測定
することができる。
方法に比べてはるかに短時間で糖化ヘモグロビンを測定
することができる。
【００１１】以下、本発明をより詳細に説明する。
【００１２】糖化ヘモグロビン抗体はポリクローナル抗
体でもモノクローナル抗体でもよいが、測定の精度を高
めるためにモノクローナル抗体であることが好ましい。
本発明者らは、下記実施例に詳述する方法により、糖化
ヘモグロビンに対して特異的に反応し、正常なヘモグロ
ビンとは実質的に反応しないモノクローナル抗体を作製
することに成功した（モノクローナル抗体３Ｆ１０、Ｆ
ＥＲＭ ＢＰ−４３１１）。本発明の方法（第１及び第
２の発明の方法、以下、単に「本発明」と言う場合は第
１及び第２の発明を意味する）では、このモノクローナ
ル抗体を好ましく用いることができる。
体でもモノクローナル抗体でもよいが、測定の精度を高
めるためにモノクローナル抗体であることが好ましい。
本発明者らは、下記実施例に詳述する方法により、糖化
ヘモグロビンに対して特異的に反応し、正常なヘモグロ
ビンとは実質的に反応しないモノクローナル抗体を作製
することに成功した（モノクローナル抗体３Ｆ１０、Ｆ
ＥＲＭ ＢＰ−４３１１）。本発明の方法（第１及び第
２の発明の方法、以下、単に「本発明」と言う場合は第
１及び第２の発明を意味する）では、このモノクローナ
ル抗体を好ましく用いることができる。
【００１３】未感作ラテックスの使用については、通常
市販されているラテックスをそのまま使用するか、トリ
ス−コハク酸緩衝液、リン酸緩衝液又は酢酸緩衝液で数
回洗浄したものを好ましく使用することができる。ま
た、第２の発明の方法における粒子への抗糖化ヘモグロ
ビンＡ1C抗体の結合は、一般的には物理吸着法により行
う。すなわち、１〜５０μｇ／ｍｌに希釈した抗体に粒
子濃度が0.1 〜１０％（ｗ／ｖ）程度になるように混合
し、４℃〜室温で攪拌する。これを十分遠心洗浄し、最
後にＢＳＡ１％溶液に保存して使用することができる。
市販されているラテックスをそのまま使用するか、トリ
ス−コハク酸緩衝液、リン酸緩衝液又は酢酸緩衝液で数
回洗浄したものを好ましく使用することができる。ま
た、第２の発明の方法における粒子への抗糖化ヘモグロ
ビンＡ1C抗体の結合は、一般的には物理吸着法により行
う。すなわち、１〜５０μｇ／ｍｌに希釈した抗体に粒
子濃度が0.1 〜１０％（ｗ／ｖ）程度になるように混合
し、４℃〜室温で攪拌する。これを十分遠心洗浄し、最
後にＢＳＡ１％溶液に保存して使用することができる。
【００１４】本発明の方法において用いられる粒子とし
ては、直径0.05〜５μｍ、好ましくは０．１〜２μｍの
ラテックスで未使用のもので通常の緩衝液に分散させて
使用する。ラテックスとしては、例えばスチレン重合
体、スチレン−ブタジエン共重合体、スチレン−アクリ
ル酸エステル共重合体、スチレン−ジビニルベンゼン共
重合体等を挙げることができる。
ては、直径0.05〜５μｍ、好ましくは０．１〜２μｍの
ラテックスで未使用のもので通常の緩衝液に分散させて
使用する。ラテックスとしては、例えばスチレン重合
体、スチレン−ブタジエン共重合体、スチレン−アクリ
ル酸エステル共重合体、スチレン−ジビニルベンゼン共
重合体等を挙げることができる。
【００１５】このラテックスと検体及び抗糖化ヘモグロ
ビンＡ1C抗体の混和は４℃〜４０℃の間で行われ、その
凝集は分光学的には混和後直ちに認められる。
ビンＡ1C抗体の混和は４℃〜４０℃の間で行われ、その
凝集は分光学的には混和後直ちに認められる。
【００１６】０．０５〜５μｍの粒子を用いることによ
り、検体と抗ヒト糖化ヘモグロビンＡ1C抗体と粒子とを
例えば黒色のスライドグラス上で混合し、凝集して沈殿
する粒子の有無を観察することにより検体中の糖化ヘモ
グロビンを検出することができる。また、吸光度測定に
より糖化ヘモグロビンを定量することも可能である。こ
の場合、粒径は小さいものが好ましいが、ブランクを除
去できるなら１μｍ程度の粒径でも吸光度変化を測定で
きる。また、未感作ラテックスと抗ヒト糖化ヘモグロビ
ンＡ1C抗体を結合させたラテックスを用いることによ
り、より高感度かつ迅速に検体中の糖化ヘモグロビンを
検出することができる。
り、検体と抗ヒト糖化ヘモグロビンＡ1C抗体と粒子とを
例えば黒色のスライドグラス上で混合し、凝集して沈殿
する粒子の有無を観察することにより検体中の糖化ヘモ
グロビンを検出することができる。また、吸光度測定に
より糖化ヘモグロビンを定量することも可能である。こ
の場合、粒径は小さいものが好ましいが、ブランクを除
去できるなら１μｍ程度の粒径でも吸光度変化を測定で
きる。また、未感作ラテックスと抗ヒト糖化ヘモグロビ
ンＡ1C抗体を結合させたラテックスを用いることによ
り、より高感度かつ迅速に検体中の糖化ヘモグロビンを
検出することができる。
【００１７】ラテックスの凝集は、目視によりその凝集
を確認することができるほか、0.05〜1.0 μｍのラテッ
クス粒子を用いる場合は、分光測定によりその散乱光を
測定することにより凝集を確認することができる。測定
波長は４００ｎｍ〜８００ｎｍあるいは赤外光を使用す
ることが好ましい。これにより検体中の糖化ヘモグロビ
ンを検出することができる。この場合においても、ヒト
糖化ヘモグロビンに特異的なモノクローナル抗体として
は、下記実施例で詳述する、高感度なモノクローナル抗
体３Ｆ１０を用いることが好ましい。
を確認することができるほか、0.05〜1.0 μｍのラテッ
クス粒子を用いる場合は、分光測定によりその散乱光を
測定することにより凝集を確認することができる。測定
波長は４００ｎｍ〜８００ｎｍあるいは赤外光を使用す
ることが好ましい。これにより検体中の糖化ヘモグロビ
ンを検出することができる。この場合においても、ヒト
糖化ヘモグロビンに特異的なモノクローナル抗体として
は、下記実施例で詳述する、高感度なモノクローナル抗
体３Ｆ１０を用いることが好ましい。
【００１８】
【実施例】実施例１ (1) 糖化ヘモグロビンに対するモノクローナル抗体の作
製 糖化ヘモグロビンをフロイントコンプリートアジュバン
トに十分に分散させこの１００μｌでＢａｌｂ／ｃマウ
スに２週間おきに４回免疫した。この免疫マウスを屠殺
後脾臓を摘出し、これより脾細胞を１０6 個得た。それ
をマウスミエローマ細胞とＰＥＧの存在下で融合させ培
養した。増殖した細胞の上清を採取しＥＬＩＳＡ法によ
り抗ヒト糖化ヘモグロビン抗体の有無を調べた。該抗体
が陽性の細胞を限界希釈法により試験し、抗ヒト糖化ヘ
モグロビン抗体を産生している細胞を確認した。
製 糖化ヘモグロビンをフロイントコンプリートアジュバン
トに十分に分散させこの１００μｌでＢａｌｂ／ｃマウ
スに２週間おきに４回免疫した。この免疫マウスを屠殺
後脾臓を摘出し、これより脾細胞を１０6 個得た。それ
をマウスミエローマ細胞とＰＥＧの存在下で融合させ培
養した。増殖した細胞の上清を採取しＥＬＩＳＡ法によ
り抗ヒト糖化ヘモグロビン抗体の有無を調べた。該抗体
が陽性の細胞を限界希釈法により試験し、抗ヒト糖化ヘ
モグロビン抗体を産生している細胞を確認した。
【００１９】これにより得られた細胞を抗ヒト糖化ヘモ
グロビンマウスモノクローナル抗体産生細胞（ハイブリ
ドーマ細胞）として大量に培養し、マウス腹腔中に注射
した。２週間後より３日おきに腹水を採取し、目的の抗
ヒト糖化ヘモグロビンモノクローナル抗体を得た。この
抗ヒト糖化ヘモグロビンモノクローナル抗体を３Ｆ１０
と命名し、３Ｆ１０を産生するハイブリドーマを平成４
年６月１０日に微工研に寄託した。この寄託は平成５年
５月２５日に国際寄託に切り替えられ、その受託番号は
ＦＥＲＭ ＢＰ−４３１１である。なお、３Ｆ１０はＩ
ｇＧであることを確認した。
グロビンマウスモノクローナル抗体産生細胞（ハイブリ
ドーマ細胞）として大量に培養し、マウス腹腔中に注射
した。２週間後より３日おきに腹水を採取し、目的の抗
ヒト糖化ヘモグロビンモノクローナル抗体を得た。この
抗ヒト糖化ヘモグロビンモノクローナル抗体を３Ｆ１０
と命名し、３Ｆ１０を産生するハイブリドーマを平成４
年６月１０日に微工研に寄託した。この寄託は平成５年
５月２５日に国際寄託に切り替えられ、その受託番号は
ＦＥＲＭ ＢＰ−４３１１である。なお、３Ｆ１０はＩ
ｇＧであることを確認した。
【００２０】直径0.254 μｍの未感作ポリスチレンラテ
ックス（日本合成ゴム社製、０．０２５重量％）２ｍｌ
にそれぞれ別々に５種類の溶血検体５μｌを加え、混和
した。５分後に３Ｆ１０抗糖化ヘモグロビンＡ1Cマウス
ＩｇＧ５０μｇを加え、直ちに日立２２０分光光度計で
３７℃攪拌下で波長７５０ｎｍの吸光度変化を測定し
た。結果を下記表１に示す。
ックス（日本合成ゴム社製、０．０２５重量％）２ｍｌ
にそれぞれ別々に５種類の溶血検体５μｌを加え、混和
した。５分後に３Ｆ１０抗糖化ヘモグロビンＡ1Cマウス
ＩｇＧ５０μｇを加え、直ちに日立２２０分光光度計で
３７℃攪拌下で波長７５０ｎｍの吸光度変化を測定し
た。結果を下記表１に示す。
【００２１】
【表１】
【００２２】実施例２ 抗糖化ヘモグロビンマウスＩｇＧ結合ラテックスの調製 ポリスチレンラテックス（１０％（ｗ／ｖ）、直径0.05
μｍ）１００μｌを、実施例１で作製した抗ヒト糖化ヘ
モグロビンモノクローナル抗体３Ｆ１０を含む２０ｍＭ
酢酸緩衝液９００μｌ（３Ｆ１０濃度：４０μｇ／ｍ
ｌ、ｐＨ６．０）に混合し、エンドオーバーミキサーで
攪拌した。これを遠心分離（5000 g x 15分）し、生理
食塩水で４回洗浄し、１重量％ＢＳＡを含む２０ｍＭ酢
酸緩衝液（ｐＨ５．０）に懸濁させ（0.5 wt%)、保存し
た。
μｍ）１００μｌを、実施例１で作製した抗ヒト糖化ヘ
モグロビンモノクローナル抗体３Ｆ１０を含む２０ｍＭ
酢酸緩衝液９００μｌ（３Ｆ１０濃度：４０μｇ／ｍ
ｌ、ｐＨ６．０）に混合し、エンドオーバーミキサーで
攪拌した。これを遠心分離（5000 g x 15分）し、生理
食塩水で４回洗浄し、１重量％ＢＳＡを含む２０ｍＭ酢
酸緩衝液（ｐＨ５．０）に懸濁させ（0.5 wt%)、保存し
た。
【００２３】検体５μｌと未感作ラテックス１００μｌ
（0.05μｍ、0.25 wt%）を混合し、次に上記のように調
製した抗糖化ヘモグロビンマウスＩｇＧ結合ラテックス
を１ｍｌ混和し、直ちに攪拌下、波長８００ｎｍの吸光
度の増加を調べた。下記表２に検体中の全ヘモグロビン
に対する糖化ヘモグロビンの割合（％）と１分間当たり
の吸光度の変化を示す。
（0.05μｍ、0.25 wt%）を混合し、次に上記のように調
製した抗糖化ヘモグロビンマウスＩｇＧ結合ラテックス
を１ｍｌ混和し、直ちに攪拌下、波長８００ｎｍの吸光
度の増加を調べた。下記表２に検体中の全ヘモグロビン
に対する糖化ヘモグロビンの割合（％）と１分間当たり
の吸光度の変化を示す。
【００２４】
【表２】
【００２５】実施例３ 抗３Ｆ１０抗体のＡ1Cへの特異性 直径０．２５４μｍの未感作ポリスチレンラテックス溶
液（トリス−コハク酸緩衝液（ｐＨ５．５、０．２％ト
ライトンＸ−１００（商品名）を含む。ラテックス濃度
０．０２５％）２ｍｌを３７℃に調節したセルに入れ
た。これにイオン交換クロマトグラフィー精製により得
られたＡ1C抗原（１ｍｇ／ｍｌ）又はヒトヘモグロビン
（Ａ0 抗原）（１ｍｇ／ｍｌ）を別々に加え、３７℃で
５分間攪拌しながら加温した。５分後、Ａ0 抗原を感作
したラテックス液には３Ｆ１０抗体（８ｍｇ／ｍｌ）
を、Ａ1C抗原を感作したラテックス液には３−４抗体
（抗ヒトヘモグロビンモノクローナル抗体、８ｍｇ／ｍ
ｌ）を各２μｌずつ加え、直ちに日立２２０分光光度計
で波長７５０ｎｍの吸光度変化を測定した。さらに１４
分後、Ａ0 抗原を感作したラテックス液に３−４抗体
を、Ａ1C抗原を感作したラテックス液に３Ｆ１０抗体を
それぞれ終濃度が８μｇ／ｍｌになるように添加した。
結果を図１に示す。
液（トリス−コハク酸緩衝液（ｐＨ５．５、０．２％ト
ライトンＸ−１００（商品名）を含む。ラテックス濃度
０．０２５％）２ｍｌを３７℃に調節したセルに入れ
た。これにイオン交換クロマトグラフィー精製により得
られたＡ1C抗原（１ｍｇ／ｍｌ）又はヒトヘモグロビン
（Ａ0 抗原）（１ｍｇ／ｍｌ）を別々に加え、３７℃で
５分間攪拌しながら加温した。５分後、Ａ0 抗原を感作
したラテックス液には３Ｆ１０抗体（８ｍｇ／ｍｌ）
を、Ａ1C抗原を感作したラテックス液には３−４抗体
（抗ヒトヘモグロビンモノクローナル抗体、８ｍｇ／ｍ
ｌ）を各２μｌずつ加え、直ちに日立２２０分光光度計
で波長７５０ｎｍの吸光度変化を測定した。さらに１４
分後、Ａ0 抗原を感作したラテックス液に３−４抗体
を、Ａ1C抗原を感作したラテックス液に３Ｆ１０抗体を
それぞれ終濃度が８μｇ／ｍｌになるように添加した。
結果を図１に示す。
【００２６】図１に示されるように、Ａ0 抗原で感作し
たラテックスに対して３Ｆ１０抗体はほとんど反応しな
かった。これに対して、３−４抗体を加えると凝集反応
が起こり吸光度の上昇を認めた。同様にして、Ａ1Cラテ
ックスでは３Ｆ１０抗体あるいは３−４抗体の添加で同
等の反応性を示した。
たラテックスに対して３Ｆ１０抗体はほとんど反応しな
かった。これに対して、３−４抗体を加えると凝集反応
が起こり吸光度の上昇を認めた。同様にして、Ａ1Cラテ
ックスでは３Ｆ１０抗体あるいは３−４抗体の添加で同
等の反応性を示した。
【００２７】
【発明の効果】本発明の方法により、簡便、迅速に糖化
ヘモグロビンの測定を行なうことができる糖化ヘモグロ
ビンの測定方法が提供された。
ヘモグロビンの測定を行なうことができる糖化ヘモグロ
ビンの測定方法が提供された。
【図１】ヒトヘモグロビン又は糖化ヒトヘモグロビンを
固定化したラテックス粒子液に３Ｆ１０抗体又は３−４
抗体をそれぞれ加え、次いで３−４抗体又は３Ｆ１０抗
体をそれぞれ加えた際の吸光度の経時的変化を示す図で
ある。
固定化したラテックス粒子液に３Ｆ１０抗体又は３−４
抗体をそれぞれ加え、次いで３−４抗体又は３Ｆ１０抗
体をそれぞれ加えた際の吸光度の経時的変化を示す図で
ある。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 田中 愛子 東京都新宿区西新宿２丁目７番１号 富士 レビオ株式会社内 (72)発明者 谷本 徹二 東京都新宿区西新宿２丁目７番１号 富士 レビオ株式会社内
Claims (6)
- 【請求項１】 未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビ
ンを含むかもしれない検体とを反応させ、抗糖化ヘモグ
ロビン抗体を反応させ、前記糖化ヘモグロビンが吸着し
たラテックスの抗糖化ヘモグロビン抗体を介した凝集を
測定することから成る糖化ヘモグロビンの測定方法。 - 【請求項２】 未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビ
ンを含むかもしれない検体と、粒子に結合された抗糖化
ヘモグロビン抗体とを反応させ、免疫凝集反応を生起さ
せた後、得られた凝集より前記糖化ヘモグロビンを測定
することから成る糖化ヘモグロビンの測定方法。 - 【請求項３】 未感作のラテックスの粒径が0.05〜５μ
ｍである請求項１記載の方法。 - 【請求項４】 未感作のラテックスの粒径が0.05〜５μ
ｍである請求項２記載の方法。 - 【請求項５】 粒子が直径0.05〜５μｍのラテックス、
直径0.5 〜１０μｍのゼラチン粒子及び動物赤血球から
成る群より選択される請求項２記載の方法。 - 【請求項６】 前記抗糖化ヘモグロビン抗体はモノクロ
ーナル抗体３Ｆ１０である請求項１ないし５のいずれか
１項に記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5165119A JP2596321B2 (ja) | 1992-06-16 | 1993-06-10 | 糖化ヘモグロビンの測定方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4-181708 | 1992-06-16 | ||
| JP18170892 | 1992-06-16 | ||
| JP5165119A JP2596321B2 (ja) | 1992-06-16 | 1993-06-10 | 糖化ヘモグロビンの測定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0666795A true JPH0666795A (ja) | 1994-03-11 |
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002095407A1 (fr) * | 2001-05-18 | 2002-11-28 | Srl, Inc. | Procede de dosage immunologique |
| EP1607742A1 (en) * | 2003-03-24 | 2005-12-21 | Mitsubishi Kagaku Iatron, Inc. | Latex reagent for adiponectin analysis and method of adiponectin analysis |
| JP4950406B2 (ja) * | 2000-07-27 | 2012-06-13 | 協和メデックス株式会社 | 不溶性担体粒子を用いる免疫測定方法およびその試薬 |
| WO2014132833A1 (ja) * | 2013-03-01 | 2014-09-04 | 富士レビオ株式会社 | 未感作ラテックス試薬の劣化防止方法 |
| WO2020067396A1 (ja) | 2018-09-28 | 2020-04-02 | 積水メディカル株式会社 | 糖化ヘモグロビン（％）の測定方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61280571A (ja) * | 1985-03-29 | 1986-12-11 | ダコ アクティーゼルスカブ | モノクロナ−ル抗体 |
| JPH04145367A (ja) * | 1990-10-06 | 1992-05-19 | Masashi Funayama | ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）の分画定量方法と、それを実施する為に構成されたヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）定量キット |
-
1993
- 1993-06-10 JP JP5165119A patent/JP2596321B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61280571A (ja) * | 1985-03-29 | 1986-12-11 | ダコ アクティーゼルスカブ | モノクロナ−ル抗体 |
| JPH04145367A (ja) * | 1990-10-06 | 1992-05-19 | Masashi Funayama | ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）の分画定量方法と、それを実施する為に構成されたヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）定量キット |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4950406B2 (ja) * | 2000-07-27 | 2012-06-13 | 協和メデックス株式会社 | 不溶性担体粒子を用いる免疫測定方法およびその試薬 |
| WO2002095407A1 (fr) * | 2001-05-18 | 2002-11-28 | Srl, Inc. | Procede de dosage immunologique |
| US6964872B2 (en) | 2001-05-18 | 2005-11-15 | Srl, Inc. | Immunoassay method |
| EP1607742A1 (en) * | 2003-03-24 | 2005-12-21 | Mitsubishi Kagaku Iatron, Inc. | Latex reagent for adiponectin analysis and method of adiponectin analysis |
| EP1607742A4 (en) * | 2003-03-24 | 2006-05-24 | Mitsubishi Kagaku Iatron Inc | LATEX REACTIVE FOR ADIPONECTIN ANALYSIS AND METHOD FOR ANALYZING ADIPONECTIN |
| US7659125B2 (en) | 2003-03-24 | 2010-02-09 | Mitsubishi Kagaku Latron, Inc. | Latex reagent for adiponectin analysis and method of adiponectin analysis |
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| JPWO2014132833A1 (ja) * | 2013-03-01 | 2017-02-02 | 富士レビオ株式会社 | 未感作ラテックス試薬の劣化防止方法 |
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